CÁCH SỬ DỤNG CÁC LOẠI PIPET TRONG PHÒNG THÍ NGHIỆM Giới thiệu Trong công việc phòng thí nghiệm dụng cụ quen thuộc hay sử dụng pipet Do yêu cầu an toàn phòng thí nghiệm, cách sử dụng pipet theo phương pháp cổ điển sử dụng mồm để hút dung dịch qua pipet nghiêm cấm, thay vào loại trợ pipet điện, bóp cau su, hệ thống pipet bán tự động Cho đến nay, có nhiều loại pipet chia thành loại chính: (1) Pipet pasteur thủy tinh không chia vạch; (2) Pipet chia vạch nhựa thủy tinh; (3) Pipet bán tự động kênh nhiều kênh Để làm tốt xét nghiệm phòng thí nghiệm, cần phải hiểu cách dùng bảo quản loại dụng cụ này, đặc biệt pipet bán tự động cần biết cách kiểm tra phát sai số pipet để kịp thời chỉnh lý PIPET PASTEUR Pipet pasteur chất liệu thủy tinh: bình thường, đầu hút pipet thường hàn kín nhiệt, sử dụng phải dùng kẹp bẻ phần đầu hút pipet tiếp nối pipet vào bóp cau su trợ pipet để sử dụng Sau sử dụng loại pipet sấy khử trùng hủy bỏ, rửa làm sạch, thể kéo lại đầu hút pipet làm kín lại nhiệt để tái sử dụng PIPET CHIA VẠCH 2.1 Pipet chia vạch chất liệu thủy tinh (tái sử dụng sau quy trình rửa) 2.1.1 Cách sử dụng pipet với bóp cao su trợ pipet - Khi hút dung dịch pipet, phải ý cắm sâu đầu pipet vào dung dịch Dung dịch cần hút chai tích lớn cần chuyển chai khác bình khác với lượng dung dịch nhỏ Phần lại sau sử dụng pipet để lấy không đổ lại chai gốc - Nên hút tráng pipet hai ba lần dung dịch định hút sử dụng pipet để hút lấy - Khi cho dung dịch chảy từ pipet vào bình, chai ống nghiệm, cầm pipet tư thể thắng đứng, chạm đầu pipet vào thành bình hứng để tư nghiêng - Để cho dung dịch chẩy tự xuống bình, đợi giây, đầu pipet chạm vào thành bình hứng Không sử dụng bóp cau su trợ pipet đẩy hết giọt cuối đọng lại đầu pipet để tránh tạo khí dung 2.1.2 Rửa pipet quy trình cần thực để tái sử dụng - Pipet thủy tinh sau sử dụng cần sấy khử trùng, dùng kẹp nhỏ lấy đầu ngâm vào dung dịch tẩy rửa đồ thủy tinh, sau rửa, sấy khô, đóng gói để tái sử dụng 2.2 Pipet chia vạch chất liệu nhựa vô trùng (sử dụng lần): cách sử dụng pipet chia vạch chất liệu thủy tinh: lấy khỏi bao giấy, sử dụng, sấy khử trùng hủy PIPET BÁN TỰ ĐỘNG 3.1 Cách sử dụng (pipet eppendorf) 3.1.1 Cách cầm pipet a Cái móc: cầm Pipet nghiêng phía cách lỏng lẻo sống bàn tay không sử dụng, làm tay bị sức b Cầm chặt bàn tay Tránh cầm pipet chặt để giảm mỏi tay vai sau sử dụng pipet lâu c Để lộ phần ghi số thể tích: nhìn suốt thời gian để kiểm soát thể tích lấy sử dụng d Nút bật lớn: để khoảng cách thuận lợi khoảng với ngón tay có diện tích bề mặt rộng để làm giảm mỏi ngón tay 3.1.2 Cách lấy mẫu Phương pháp lấy mẫu đa dạng tùy theo loại dung dịch khác nhau, thực tế có hai cách lấy mẫu minh hoạ 3.1.2.1 Cách lấy mẫu theo chiều xuôi (Forward method) Cầm pipet tư Ấn tới nấc dừng Thả pittông Để cho mẫu, ấn Chuyển tất phần thắng đứng thứ Nhúng từ từ tới nấc dừng lại chất thứ lỏng đầu pipet tip đầu pipet tip khoảng – mm ra, ấn tới nấc dừng vào dung dịch thứ hai (để hết dung dịch khỏi pipet tip) 3.1.2.2 Cách lấy mẫu theo chiếu ngược lại (Reverse method) Cầm pipet tư Ấn tới nấc dừng thứ Thả pittông từ từ Để cho mẫu, ấn tới thắng đứng hai Nhúng đầu pipet nấc dừng thứ tip khoảng – mm Loại bỏ phần dung vào dung dịch dịch lại pipet tip 3.1.3 Kiểm tra việc lấy mẫu vào pipet tip 3.1.3.1 Kiểm tra với pipet bán tự kênh Cầm pipet Ấn tới nấc dừng Thả pittông Cầm pipet với Quan sát xem có tư thắng thứ từ từ pipet tip giọt nhỏ hình đứng Nhúng đầu lấy mẫu thành đầu pipet tip khoảng tư thắng pipet tip không – mm vào đứng khoảng Nếu không có, tức dung dịch 15 – 20 giây pipet pipet tip phù hợp tốt 3.1.3.2 Kiểm tra với pipet bán tự động nhiều kênh 3.1.3 Cách cho mẫu 3.1.3.1 Cách cho mẫu vào ống nghiệm Không thao tác nhanh tránh tạo khí dung, tạo bọt 3.1.3.2 Cách cho mẫu vào nhựa Cách cho mẫu vào giếng nhựa 3.2 Cách kiểm tra độ xác - Dùng pipet hút nhả lần, bỏ đầu tip thứ - Lấy đầu tip thứ hai hút nhả lần đến lần thứ lấy để cân - Với loại pipet kiểm tra độ xác qua mức lấy mẫu: mức thấp nhất, mức trung bình mức tối đa - Cân liên tiếp 10 lần, kiểm tra sai khác (yêu cầu CV < 10 %, lý tưởng < 0,5 % Nếu độ sai khác vượt 10 % cần có chỉnh lý lại pipet) - Với pipet nhiều kênh phải thực với kênh Lưu ý: không cầm pipet chặt quá, cầm pipet lâu làm nóng pipet, làm thay đổi kích thước pittông, dẫn đến sai số (có thể găng tay để cách nhiệt) 3.3 Cách bảo dưỡng làm pipet bán tự động (theo hướng dẫn pipet Eppendorf, với loại pipet khác tùy theo hướng dẫn nhà sản xuất) Sự lây nhiễm từ mẫu ống nghiệm sang pipet từ pipet sang mẫu ống nghiệm khác lại lây nhiễm sang pipet chứng minh Để khắc phục tượng này, nhiều hang thiết kế loại pipet tip có fil lọc, loại pipet tip có pittông để hạn chế lây nhiễm chéo Tuy nhiên loại pipet tip giá thành cao Do vậy, thao tác làm pipet sau sủ dụng hạn chế lây nhiễm mẫu trình thực Sự lây nhiễm mẫu trình sử dụng pipet bán tự động khác tùy theo loại chất làm lây nhiễm, cách làm pipet khác 3.3.1 Cách làm thông thường - Mở phần pipet - Tháo pittông, làm hết lớp nhờn pittông cồn 70o - Để pittông khô tự nhiên Bôi lớp mỡ mỏng lắp ráp lại vào pipet - Nếu cần thiết, lau phần phần pipet cồn 70 o dung dịch khử trùng nhẹ, để khô trước lắp ráp lại vào vỏ bao pipet - Khi sử dụng xong pipet cần lau toàn pipet phía bên cồn 70o dung dịch khử trùng nhẹ để lên giá đỡ tránh rơi 3.3.2 Cách làm pipet hút dung dịch lỏng, đệm, acid vô chất kiềm - Mở pipet Tháo phần - Rửa phần bị dính hoá chất với nước cất - Để pipet khô (làm khô không khí nhiệt độ 60oC) - Khi khô hoàn toàn, pittông nên phủ lớp mỡ mỏng Lắp lại vào pipet - Khi dùng cho chất chất base thông thường, nên súc rửa phần pipet với nước cất Có vậy, làm cho pipet tránh tạo khí dung mà tích lũy theo thời gian 3.3.3 Cách làm pipet hút dung dịch có tính chất gây nhiễm tiềm tàng - Tháo phần pipet sấy 121oC 20 phút - Để tất phần pipet khô trước lắp ráp chúng lại với Nếu cần thiết, bôi lớp mỡ mỏng lên pittông - Có thể làm cách tháo phần pipet, ngâm dung dịch khử trùng thông thường phòng thí nghiệm Súc rửa kỹ lại với nước cất Để khô, cho dầu vào pittông lắp ráp lại 3.3.4 Cách làm pipet hút dung môi hữu - Sau hút loại dung môi hữu khác nhau, nên mở pipet để dung môi lưu lại tự bay - Hoặc phần lây nhiễm pipet nhúng vào dung dịch khử trùng Súc rửa với nước cất làm khô - Cho dầu vào pittông để khô 3.3.5 Cách làm pipet hút loại protein - Tháo pipet Đặt phần bị lây nhiễm vào dung dịch đặc biệt ủ tùy theo hướng dẫn nhà sản xuất dung dịch - Súc rửa kỹ với nước cất Làm khô bôi lớp dầu mỏng vào pittông - Tuyệt đối không sử dụng loại cồn (alcohol) để làm pipet 3.3.6 Cách làm pipet hút chất có hoạt tính phóng xạ - Tháo pipet Đặt phần bị lây nhiễm vào dung dịch đặc biệt ủ tùy theo hướng dẫn nhà sản xuất dung dịch - Súc rửa kỹ với nước cất Làm khô bôi lớp dầu mỏng vào pittông 3.3.7 Cách làm pipet hút chất vật liệu di truyền (Nucleic acids) 10 - Khử nhiễm phần pipet cách đun sôi đệm glycine/HCl (pH 2) khoảng 10 – 20 phút - Súc rửa kỹ với nước cất Để khô bôi lớp mỡ mỏng lên pittông - Hoặc ngâm phần pipet dung dịch HCl – 10 % khoảng 20 – 30 phút Súc rửa kỹ với nước cất Để khô bôi lớp mỡ mỏng lên pittông TÀI LIỆU THAM KHẢO Phạm Thị Ngà Virus viêm não Nhật Bản kỹ thuật chẩn đoán Nhà xuất Y học 2004: – 76 Edwin H L., David A L., Evelyne T L Diagnostic procedures for Viral, Rickettsial and Chlamydial Infection American Public Health Association, 7th Edition 1995: 189 – 209 11 12 [...]...- Khử nhiễm phần dưới pipet bằng cách đun sôi trong đệm glycine/HCl (pH 2) khoảng 10 – 20 phút - Súc rửa kỹ với nước cất Để khô và bôi một lớp mỡ mỏng lên pittông - Hoặc ngâm phần dưới pipet trong dung dịch HCl 5 – 10 % khoảng 20 – 30 phút Súc rửa kỹ với nước cất Để khô và bôi một lớp mỡ mỏng lên pittông TÀI LIỆU THAM KHẢO 1 Phạm Thị Ngà Virus viêm não Nhật Bản và các kỹ thuật chẩn đoán Nhà xuất ... 2.2 Pipet chia vạch chất liệu nhựa vô trùng (sử dụng lần): cách sử dụng pipet chia vạch chất liệu thủy tinh: lấy khỏi bao giấy, sử dụng, sấy khử trùng hủy PIPET BÁN TỰ ĐỘNG 3.1 Cách sử dụng (pipet. .. 3.1.1 Cách cầm pipet a Cái móc: cầm Pipet nghiêng phía cách lỏng lẻo sống bàn tay không sử dụng, làm tay bị sức b Cầm chặt bàn tay Tránh cầm pipet chặt để giảm mỏi tay vai sau sử dụng pipet lâu...2.1 Pipet chia vạch chất liệu thủy tinh (tái sử dụng sau quy trình rửa) 2.1.1 Cách sử dụng pipet với bóp cao su trợ pipet - Khi hút dung dịch pipet, phải ý cắm sâu đầu pipet vào dung