MAI THỊ THU HOÀI ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG SINH HỌC CỦA MỘT SỐ DỊCH CHIẾT CÂY NGỦ SẮC (AGERATUM CONYZOĨDES L.) TRÊN ĐỘNG VẬT THỤC NGHIỆM (KHỐA LUẬN TỐT NGHIỆP Dược sĩ KHÓA 2004 - 2009) +t+ Người hướng dẫn : DS Nguyễn Xuân Bác Nơi thực : Bộmôn Hỏa sinh ❖ Thời gian thực : Từ 2/2009 đến 5/2009 LỜI CẢM Em xin cảm ưri thầy Nguyễn Xuân trục liếp em thực hifin thành khóa luận ƠN chan thành giáo DS Bắc - thầy hướng dẫn hoàn Em xin chân thành cảm ơn TS Nguyễn Văn Rư tân tình giúp dỡ cm hồn thành khố luận Em xin chăn Ihàrih câm ƠI1 cúc thầy cỏ giáo, cán bỗ kỹ thuật vion giảng dạy, làm việc mơn Hóa sinh, mồn Dược lực, mởn Vi sinh Sinh học tận Lình giúp đ« cm iron" thời gian làm íhực nghiệm Eĩn cung xin gởi left cam ơn toi Ban giafri Hiệu cung íồrì thầy giắơ, cô giáo trường Đại học Dược Hà Nội dạy dỗ tạo điểu kiện thuận lại cho cm suốt thời gian học lập irường, Cuối cm xin cảm ơn gia đình, bạn bè, người giúp đỡ ủng hộ em để cố kếl quà hôm Em xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 15 tháng năm 2009 Sinh viên Mai Thị Thu Hoà iMỤC LỤC CHÚ GIẢI CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANII MỤC BẢNG số LIỆU DANH MỤC HỈNH MINH HỌA TÀI LIỆU THAM KHẢO PHỤ LỤ CCHÚ GIẢI CÁC CHỬVIẾT TẮT Trang DANH MỤC BẢNG số LIỆU Bảng 1,1 Một số số sữih học rrong sốc bòng Bảng 1.2 Một số số sinh học suy mồn bỏng uãng 2.1 Các mòi trường nuòỉ cấy vi khuẩn kiểm định Bãng 2.2 Các mồi trường nuôi cấy vi nấm kiểm định Bâng 2.3 Cách xác định thành phấn hóa học loại DC câv ngũ sấc Rang 2.4 Thành phần hóa học DC ngũ sắc Bảng 2.5 Mức độ giàm thời giun làm lành da Bảng 2.6 Sự Ihay đổi diện tích bỏng chuột thí nghiệm [heo thời gian Bắng 2.7, Mức độ giảm diện tích hỏng lỗ thử so với lơ chứng Bâng 2.8 Mức dộ giảm diện lích bỏng 10 thử so với lố so sánh Bứng 2.9 Đường kính vịng vơ khuẩn loại DC ngũ sắc trẽn số vsv kiểm định Hình Phẩn rrũịt đất ngữ sấc Hình Sơ quy trình chiết xuất DC nước ngũ sắc Hình Sơ đồ quy trình chiết xuất DC MeOH, EtOH ngũ sác ỉ lình Dó thị biểu dien Ihừi gian lành da hồii tồn lỏ chuột thí nghiệm Hình Đổ thị biểu diễn mức độ giảm diện tích bỏng lơ chuột thí DANH MỤC BẢNG số LIỆU nghiệm theo thời gian IIình Vịng vơ khuẩn ức chếStaphvlơcọccus aureưs ATCC 1128 cùa DC MeOH (1), EXT EtOH (2), DC nước (3), Benzathin Penicillin (4) Hỉnh Vịng vơ khuẩn ức chế Escherichia coli ATCC 25922 DC MeOH (1), DC EiOH (2), DC nước (3), Gentamicin (4) Hình Vịng vồ khuẩn ức chế Candida aỉbican DC MeOH (L), DC BtOH (2), DC nước (3 )ĐẬT VẤN ĐỂ Hỉện nay, sản xuất công nghiệp ngày phát triển tai nạn nghe nghiệp, chập điện, cháy nổ binh ga, xăng dầu ngày nhiều Vì vây, số người bị bịng đặc biệt bỏng nặng lớn có xu hướng ngày tãiig ỏ Việt Nam giới [10], Bỏng thường ảnh huửng xấu đến Ihẩm mỹ bệnh nhân KhOng rihữiig Lhế, bỏng cịn có tliể gây từ vong để lại nhiều di chứng nặng nề khác làm ảnh hưởng đến sức khỏe tâm lý cua bệnh nhân [10] Số lượng thuổc nước để điều trị hỏng cịn ít, nhu câu vẻ thuốc điéu trị bỏng người dân ngày nhiéu, giá thuốc nhập tăng cao, khiến cho viộc điéu trị bồng tốn kcm ihực gánh nặng bênh nhân bỏng, đặc biệt bệnh nhân nghèo mội nước phát triển Viột Nam Vì vậy, viộc nghi ơn cứu tìm nguồn thuốc đáp ứng Iihu cầu người dân cấp thiết Cây ngữ sắc có rấl nhiều địa phưưng Lrong nước la đả đưực sử dụng irong điều trị sơ bệnh [20], [21] Hiện nay, nước ta Irên giới có nhiẻu nghiơn cứu tác dụng sinh học cùa ngũ sắc [14], [15] nhiên chưa có tài liệu cồng bố vé tác dụng chữa bỏng Vì vậy, nham góp phần lam 5 sáng tỏ khả điểu trị bỏng ngũ sắc thời làm läng việc sừ dụng dược liêu điều tri bỏng, chúng tồi tiến hành đề tài: “Đánh giá tác dyng sinh học số dịch chiết ngũ sắc (Ageratum conyzoides L,) động vật thực nghiệm” với hai mục tiêu sau; Xác đình sơ hộ thành phàn hóa học số dịch chiết ngũ sác Đánh giá lác dụng đicu trị bỏng, kháng khuẩn số dịch chiết ngũ sắc PHẦN 1: TỔNG QUAN 1.1 Tons quan ve bỏng 1.1.1 Khái niệm vé bỏng Bỏng lổn thương tác dụng trực tiếp yếu tố vật Lỷ (nhiệt, xạ, điện) hoá học gây trôn thổ Da 6 phận thường bị tổn thương bị bỏng, lớp sâu dưứi da (cân, cơ, xương, khớp, mạch máu, thần kinh) số quan (đường hỡ hấp, ống liêu hoá, phận sinh dục) [10] Khi bệnh nhân có diện từ 10 15% diện tích thể trờ cổ bỏng sâu (từ - 5% diện tích trở lên) xác dịnh bệnh bỏng 1101 1.1.2 Dich tễ bỏng Tai nạn bỏng ỏ rước cóng nghiệp loại chấn thương thường gặp: - Cứ 100 000 dân năm có: + Trên 23 người bị bịng (ở nhóm tuổi 65) + Trên 15 người bị bỏng (ở nhóm tuổi trơn 65) 7 Cứ 100 000 dan cần có 0,2 - 0,5 giường bệnh dành cho chữa bỏng - Mỹ với dàn số 250 Iriệu người nam có khoảng triệu người bị bỏng Trong số 70 000 - 108 000 nạn nhân bỏng phâi vào bệnh viện điều trị năm thi có 500 - 12 000 người bị lử vong Nếu sovới tửvong thiên lãi khắc (như ềẵõ, lụt, độậg đẳt) so tií vorig VI hong gâp 20 lân Nẽìì so với số Lử vang du lili nạn chấn thưưng loại sớ tử vong bỏng đứng hàng thứ [10] Ở Pháp hàng năm có 150 000 người bị hỏng, có 5ÜÜ người bị bỏng nặng [101- Nhật với dân số 125 triệu người, số tử vong bỏng hàng năm 190 nạn nhăn [ 10], 8 Viột Nam hiộn nay, hàng năm Viện loong, Quốc Gia nhận điều trị trèn I 500 người bị bỏng, khoa hỏng Bệnh viện Saint Paul Hà Nội nhận điều trị 900 người bị bỏng, khoa bòng Bệnh viện Chợ Răv thành phố Hồ Chí Minh nhận đicu trị 600 người bị bỏng khoa bỏng trẻ cm Bệnh viện Nhi thành phố Hổ Chí Minh nhận điểu trị 360 trẻ nhỏ bị bỏng [10] Phản loại bỏng Theo GS TS Lé Thế Trung, bỏng chia thành loại: 1.1,3 *♦* Dòng độ Là mức độ bịng nhẹ nơng Da khô, sưng, đỏ, đau rát, Được coi tượng “Viêm cấp vô khuẩn” Sau 24h đau đỡ dẩn sau 48h hết đau Viêm sung nề kéo dài vài ngà}' (2-3 Iigày), thấy lớp sừng bong rụng di [10] Bỏng độ Trên da đỏ, sưng, ƯỚI xuất nốl phổng (ngay sau bị bỏng sau vài phút đến vài có tới 24 48h) Dịch chứa nốt phổng màu vàng Chất dich có đủ thành phần hụyết tirmg (vì rừ máu qua thành mạch rhấm khoảng khe kẽ), Bỏng độ kèm Theo đau rát, đau nhát vùng nổn nốt phổng (các đẩu tận thổn kinh ]ộ ra) Khi nốt phổng vờ, vòm nốt phổng bong lộ phẩn đỏ, ẩm, tăng cảm xuất tiết dịch Cắc not phong nho ❖ 9 khơng 'bị vỗ cỉỊch sễ bị hẫp thụ dl vằ chung se tự sẹp xuống Nếu bị nhiêm khuẩn, dịch nốt phổng ngày sau đục hố mủ, vùng bỏng có triệu chứng viêm mủ, nóng, đỏ, sưng đau tảng kéo dài, Tồn thân có sốt, mệt, khơng thèm ăn, lạì vùng bẹn nách có hạch viêm [10] •Ỵ* Bỏng độ Bịng độ thể hình thức nốt phổng có vịm dầy (gồm lớp biểu bì phần, nơng lớp trung bì bị hoại tử), nốt phổng màu đỏ tím sẫm trâne, có rỉ máu cịn cảm giác Dịch nốt phổna; màu hổng, có máu rĩ Bảng trung bì cịn thể hình Ihứe dam da hoại lử khỏ ướt khác với hoại tử khô hỏng toàn hộ lớp da điểm sau: Khơng CỐ hình tĩnh mạch da bị nghẽn mạch, da hoại tữ bỏng không nhãn nhúm thường mng, th cm ỗic (chc kim, th núng lnh) vùng ihường cịn mội phán cám giác Rút lồng vùng hỏng thấy hám chạt người bệnh thấy đau rioi Bỏng độ Uffi sàftg thể hiậ« ávtêi hifih tìiứei ❖ Da hoại tử ướt (xuất nhiột độ lớp da bỏng đạt tói 50 - 58°C), khám thấy dám da trắng hệch màu dị xám có chỗ trắng chỗ xám đá hoa, có iản vùng da dỏ tím sẫm Đám da hoại lử ướt gổ cao lên so với - 10 10 đầu, đầu lại táp hợp thành ngù Quả bế màu đen, có srtng dọc [7], [21 ] Phán bố + Trên giới: ngũ sắc inôL nhiệt đới râì phổ biến ❖ Tầy Phi, Australia, Bấc Mỹ vài vũng châu Á + Ớ Việt Nam: mọc hoang kháp nơi nước, nhiều vùng nông thôn 17J, L21J Rộ phận dùng thành phím hóa học K* Bợ phận dùng Người ta thường sử đụng phẩn mặt đất để lãm thuốc [7], [21] 1.3.3 ♦í* Thành phấn hóa học Toàn chứa tinh (0,16% so với dược liệu khỏ) Lá hoa chứa 0,02% tinh dẩu với mùi rồng klió chịu, tinh dầu chứa phenol (eugenol) $%r Thanh phan chu yếu cua tinh (lẩu lằ g-car