Bộ Y TÉ TRllỏNG DẠI HỌC DƯỢC HẢ NỘI LỜI CẢM ƠN PIIAN THỊ HẢO Trước hết, với lòrm kíiứi trọng biết ơn sâu sác, em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy cô giáo: TliS.cứư Nguyễn Ngọc Hà NGHIÊN ĐỊNHThị LƯỢNG Cu ThS L6 Đình Quang TRONG CÂY MẬT NHÂN BẲNG ngiròi tin tường giao đề tài trực tiếp hướng dần em hoàn thành khóa PHƯƠNG PHÁP cực PHỒ luận tốt nghiệp(KHỎA LllẬN TÓT NGHIỆP DƯỢC sĩ KHÓA 2005-2010) Trong thời gian thực khỏa luận, em nhận giúp đõ\ chi bảo tận tình thầy giáo PGS TS Phan Túy, ThS Trần Dinh Nghía Em xin Ng uồi hiróng đẫn: cảm ơn thầy! Em xin cảm ơn thầy cô gĩáo anh chị kỹ thuật viên môn Hóa đai cương- vô đà tao moi điềĩi kiên lơi giúp em hoàn thành tốt 1, ThS, Nguyền Thi Ngoe Hà Nội, tháng 5/2010 Sinh viên 2, ThS Lẽ Đình Quang HÀ NỘI-2010 MỤC LỤC Trang DẬT VÀN ĐÈ Chuông TỎNG QUAN Li Tong quan mật nhân L ỉ Thảnh phàn hỏa học / ĩ.3 Tác dụng dược lý LỈ.4 Công dụng / /*5 Một số ché phẩm từ mật íihẵtu, / 1.6 Phân hỗ Viêt Nam * 1.2 Tổ ng quan nguyên tố đồng 1.2 ỉ Tính chái tý hỏa 1.2.2 Vai trì) sinh học cua đồng 1.3 Một số 16 phiroìig pháp (tịnh luựng nguyên tố vi lượng ỉ.4 L Vô hỏa khô * 16 1.4.2 Vỏ hóa ướt * .17 1.4.3 Phương pháp chiết 17 1.4.4 Phương pháp vô mau tò vi sóng 17 Chuông 2: NGUYÊN LIỆU, THIẾT BỊ, NỘI DUNG 19VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 19 2.1 Ng uyên liệu, hóa chất, thict bị* (lụng cụ .19 Ị / Nguyên tiêu, hỏa chất 19 í.2 Thiết bị, dụng cụ 19 2.2 Xtr lý dụng cụ 19 2.3 Nội dung nghiên cứu 20 2.3 /, Xây dưng quy trình dinh tương Cu 20 2.3.2 Đinh tương Cu mât nhân 20 3.4.3 Kết định lượng Cu mật nhân t lĩ eo plĩ ương pháp đường chuẩn Độ ỉập ỉại cùa phép đo mẫu thực .29 3.4.4 Khảo sát độ (độ thu hồi) phương pháp thêm 31 3.5 Bàn luân .33 DANH MỤC CÁC CHU VIẺT TÁT AÁS: Atomỉc Absorption AES: Atomic Emission ppm: part per milỉion SpeetophototnetrySpectophotometry- phần triệu ppb: part per billion- phần tý (lppb = (y'ppm) phổ hấp thụ nguyên tử phổ phát xạ nguyên tử (1 ppm = pg/mL) DANH MỤC CÁC BẢNG 1: 2: 3: 4: 5: Một sổ đặc điểm tính chất lý hóa học Cu Kiểm tra độ lặp lại máy Ket định lượng mẫu rễ (độ ẩm 4%) 7: Kết định lượng mẫu thân (độ ẩm 3,5%) DANH MỤC CÁC HÌNH 2: 3: Eurycoma longilbỉia Jack 4: Một sổ chế phẩm từ cầy mặt nhân 5; 6; 7: chuẩn Khảo sát tỷ tệ aciđ HNO.Ì: IICIO4 dùng vô hóa mẫu 6: i; mầu Máy cực phổ VA 757 Computrace nối với ĐẠT VẤN ĐỀ Chuông TỐNG QUAN Hiện nay, quan mật (Eurycoma longilolia Jack) sử dụng ngày 1.1 Tổng câynhân mật nhãn nhiều thuốc dân gian vả chế phẩm đông dược Chúng ta biết dược liệu có chứa nhiều nguyên tố vi lượng, có nguyên tố đồng (Cu) Dồng có vai trò sinh học quan trọng đốỉ với thể người, nhiên hàm lượng cao gây độc Vì vậy, ta cần phải xây dựng phương pháp tin cậy để xác định hàm lượng đồng mẫu sinh học thực vật Đe định lượng đồng dùng nhiều phương pháp, phương pháp cực phổ phương pháp cỏ nhiều ưu điểm Cùng với phương pháp phản tích khác, phương pháp cực phổ ngày sử dụng nhiều cỏ nhiều ưu điểm độ nhạy, tính tối ưu phép do, thời gian thực phép đo ngắn rẻ tiền Với mong muốn bước đầu làm quen vả sử dụng máy cực VA 757 Coiuputrace đe đánh giá hàm lượng Cu mật nhân, thực đề tài: “Nghiên cứu định lượng Cu câv mật nhân bàng phinrng pháp Hình 1: Eurycoma longiĩolia Jack •y L L ĩ, Mô tả dặc điểm thực vật /10/, í24ị Cây nhờ, cao 2-8m, phân cành Lá kép lông chim lẻ, mọc so le, gồm 2125 chét không cuống, mọc đối, hành mác bầu dục, gốc thuôn, đầu nhọn, mặt xanh sẫm bóng, mật có lông màu trắng xám, cuống kép màu nâu đỏ [24] Cụm hoa mọc ỏ thành chùm kép chùy rộng, cuông có lồng màu nâu; hoa màu đỏ nâu; đài hoa chĩa thành thùy hình tam giác có tuyên lưng; tràng hoa cánh hình thoi, có tuyến; nhị có lông dày vảy gốc; bầu có noãn, dính gốc, đầu nhụy rời [10], [24] Hoa bao hoa phủ đầy lông [10] Quả hạch, hình trứng, nhẫn, có rãnh dọc, chín màu vàng đỏ, chứa I hạt [10]Cây đa dạng có nhiều thứ [24] Mùa hoa: tháng 1-2 Mùa quả: tháng 3-4 [24] Bộ phận dùng: vỏ thân, rễ, phơi sấy khô [10] Ỉ.L2 Thành phần hóa học /10/, /23Ị, /24/ Trong vỏ gỗ bách bệnh người ta đằ chiết chất sau: - Các alkaloid loại canthin- 6- on phân lập từ vò gỗ: 9,10- dimethoxycanthin- 6- oti, 10- hyđroxyl- 9- methoxy-canthin-6-on, 5,9- dìmethoxycanthin- 6- on vả 9- methoxy- 3- metliyl- canthin- 5,6- dion [23] Ngoài cỏ alkaloid carbolin [24] - Từ vỏ cày bách bệnlì miền Đống Nam Bộ Việt Nam đâ xác định thành phần hai chất đấng eurycomalacton vả 2,6- dimethoxybenzoquinon Nsoài có campestrol p~ sitosterol [ 10] ỉ 1.3 Tác dung dưưc lý Ị24Ị Mặt nhản có tác dụng duợc lý đà chứng minh: - Cao chiết từ mật nhân có tác dụng kháng ký sinh trùng sốt rét thử nghiệm in vi tro - Mật nhản có tác dụng tăng dục, có mối tương quan tác dụng kích thích sinh dục nam lượng nội tiết tố sinh dục nam huyết động vật, Thân rễ mặt nhân làm tăng lượng testosteron huyết động vật, rễ làm tăng testosterone nhiều thản 1.1.4 Công dịtng f ỊI, /10/, ị24ị - Theo kinh nghiêm dân gian, vò thân bách bệnh dùng chữa trường hợp ăn uổng không tiêu, nôn mửa, đầy bụng, tiêu chày, gần nhu vị hậu phác, chữa sốt rét, giải độc uống nhiều rượu chừa lưng đau mỏi thấp Vỏ phơi khô, tán bột, ngâm rượu hay làm thảnh viên, sắc uống Ngày dùng 6-12u Quả chữa lỵ [10] Rề chừa ngộ độc tẳy giun Lá nấu nước tắm chừa ghẻ lở [24] Kiêng kỵ: phụ nữ có thai không nên dùng [24] - Theo kỉnh nghiệm dân gian Indonesia, nước sắc vỏ thân mật nhân đươc coỉ vị thuốc cồ truyền tốt đổ chừa sốt rét Có ý kiến cho có hiệu lực tương đương với viên nén cloroquin điều trị sốt rét Nước sắc dùng làm thuốc chữa đau lưng, đau bụng âm ỉ, nhiễm khuẩn đường tiểt niệu roi loạn khớp [1], [24] - Nước sắc mặt nhân với loài lấu {Psychỡtria malayam) dửng uống chừa sốt, vối loài Uncaria điều trị tiểu tiện máu, với nsoi điều trị rối loạn khớp [í] / / Một số chế phẩm tù mật nhihí /ỉ/ Trên giới có nhiều ché phẩm sản xuất từ mật nhân, chủ yếu từ rễ quảng cáo cỏ tác dụng rât tôt, thường tác dụng tăng 34 KỂT LUẬN VÀ Kỉ ẺN NGHỊ Từ trình nghiên cứu làm thực nghĩộm, đà thu số kết sau: Đâ hoàn thành tông quan nguyên tố Cu: tính chất lý hóa, vai trò sinh học số phương pháp định lượng Xây dựng quy trình định lượng Cu mật nhân: - Vô hỏa mẫu băng phương pháp vô hỏa ướt - Định lượng Cu băng phương pháp cực phổ xung vi phân - Tính hàm lượng Cu theo phương pháp đường chuẩn Định lượng Cu mật nhân bao gồm phận rễ, thân, với hàm lượng: rễ : 3,077 ± 0,059 (pg/g) thân : 3,010 ± 0,066(|ig/g) 35 nghiệm phấm, thực phẩm, mỹ phẳm vả nhiều mục đích nghiên cứu khác - Tiếp tục nghiên cửu hoàn thiện phương pháp cực phổ xung vi phân để định lượng Cu dược liệu 36 TÀI LIÊU THAM KHẢO Tiếng Việt Lê Thanh Bình (2007), Nghiên cừu đặc điểm thục vặt thành phần hóa học bá bệnh, Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ đại học, Trường Đại học Dược Hả Nội, Hả Nội, tr.2-8 Nguyễn Thị Bình (2009), Xác định hàm lượng đồng, kẽm mật sô mau nước làng nghề phương pháp AAS, Khỏa luận tốt nghiệp dược sĩ đại học, Trường Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội, tr 7-1 L Phùng Ngọc Bộ, Dr Pacaud (í 999), Vì tam in nguyên tồ vỉ lượng với đời sống người\ Nhà xuất Y học, Hà Nội, tr 94-101 Bộ V tế (2008), Hỏa phân tích, tập Nhà xuất bán y học, Hà Nội, Bộ y tế (2007), Hỏa phân tích, tập 2,Nhà xuất y học, Hà Nội Bộ y tế (2005), Kiếm nghiệm dược phẩm, Nhà xuất y học, Hà Nội, tL\ 68111 37 11 Phạm Luận (2006), Phương pháp phân tích phố nguyên từ, Nhà xuất Đại học Quốc gia Hà Nội, Hà Nội 12 Phan Tiến Lực (2004), Thử nghiệm định lượng selen Nắm men bàng phương pháp cực pho, Khỏa luận tốt nghiệp dược sĩ đại học, Trường Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội, tr 8-14 13 Phạm Thị Hằng Nga (2009), Xác định hờm lượng đồng sắt che phẩm vitamìn c, Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ đại học, Trường Đại học Dược Hà Nội, Hà Nội, tr 12-14 14 Nguyễn Bích Ngân, Nguyễn Thị Việt Hương, Từ Vọng Nghi (2007), Xác định hòm lượng vi tam in BỊ, BJ, R0 phương pháp cực phổ xung vi phân, Tạp chí phân tích hòa, lý sinh học, số 3/2007, tập 12, tr 44-47 15 Hoàng Nhâm (2000), Hóa học vó cơ, tập 3, Nhà xuất giáo dục, Hà Nội, tr 226-230 16 Hoàng Thị Tuyết Nhung (2000), Nghiên cửu xây dựng phương pháp định ticọmg sổ nguyên tô độc (chì, đong) tam thắt phương pháp quang phổ hấp thụ nguyên tu\ Công trinh tốt nghiệp thạc sĩ dược học, Trường Dại học Dược Hà Nội, Hà Nội, tr 5-20 38 20, Lương Thúy Quỳnh (1996), Nghiên cửu hàm lượng Cu Zn huyết người có tuổi Việt Nam, Luận án PTS khoa học y dược, Trường Đại học Dược Mà Nội, tr.23-25 2L Hoàn" Phú Tiến (2009), Định lượng seỉen tỏi phương pháp quang hấp thụ nguyên tứ- AAS, Khóa luận tốt nghiệp dược sĩ đai học, Trường Đại học Dược Hà Nội, Hả Nội, tr 12-13 22 Trường Dai học Ọuôc gia Hà Nội, Khoa liỏa học, Bộ môn Hóa phân tích (2004), Giáo trình vân đê sở kỹ thuật xử tý mâu phán tích Phần ỉ: Những vc/n để sở lý thuyết, tr 24-56 23 Trần Anh Tuấn, Trần Thu Hương, Trần Hồng Quang, Nguyễn Tiến Hùng, Phan Văn Kiệm, Cháu Văn Minh (2007), Nghiên cứu thành phần hóa học câv hách bệnh (Eurycoma ìongifoỉiữ Jơck), Tạp chí Dược học sọ 348 năm 47, tháng 10/2007, tr 12-16 24 Viện Dược liệu (2004), Cây thuốc động vật lầm thuểc Việt Nam- tập /, Nhả xuất khoa học vả kỹ thuật, Hà Nội, tr 116-118 TiÉng Ành 25 G Guibaud, N Tixier, A Bouịu, M Baudu (2004), Ưser of a poỉarographic 39 27 Z.R.Komy (2005), Detenninaỉion of Zinc, Cadimium, Lead and Copper ỉn Kakade, Anỉse, Cumin, Caraway Black Pepper Extracts Using Differentiaỉ Puỉse Anodic Strippỉng Voỉtammetry with Hanging Mercuty American Joumal of Applied Sciences 2, pp 961-968 28 Metrohm (2002), Voltammctry- ií \s never heen so sỉmpỉe Drop Electrode, 40 41 '200m lỉ ỉVk u (VI 42 II (Vỉ 43 PHỤ LỤC • é 44 IHVỈ ị\ỉ) u |V> 45 46 PHỤ LỤC * é 47 48 [...]... - Định lượng Cu băng phương pháp cực phổ xung vi phân - Tính hàm lượng Cu theo phương pháp đường chuẩn 3 Định lượng được Cu trong cây mật nhân bao gồm cả 3 bộ phận là rễ, thân, lá với hàm lượng: rễ : 3,077 ± 0,059 (pg/g) thân : 3,010 ± 0,066(|ig/g) 35 nghiệm được phấm, thực phẩm, mỹ phẳm vả nhiều mục đích nghiên cứu khác nữa - Tiếp tục nghiên cửu hoàn thiện phương pháp cực phổ xung vi phân để định lượng. .. cao nhất trong các phương pháp điện hóa L3,6' Hệ mảy cực phổ VA 757 Computrace f9Ị, [I2Ị, f28/ * Nguyên ỉỷ hoại động Máy cực phổ VÀ 757 Computrace là sản phẩm kết hợp giữa toán, tin học và các kỹ thuật cực phổ Đe tiến hành phân tích bằng phương pháp cực phổ, người ta dùng bộ thiết bị gồm một mảy cực phổ tự ghi và một bình điện phân gồm hệ ba điện cực: cực làm việc là điện CỊTC giọt thủy ngân, cực so... phương pháp đường chuẩn se nhanh hơn và tict kiệm chất chuẩn hơn 3.5.2 về kểt quả định ttrưng 34 KỂT LUẬN VÀ Kỉ ẺN NGHỊ Từ quá trình nghiên cứu và làm thực nghĩộm, chúng tôi đà thu được một số kết quả như sau: 1 Đâ hoàn thành tông quan về nguyên tố Cu: tính chất lý hóa, vai trò sinh học và một số phương pháp định lượng 2 Xây dựng được quy trình định lượng Cu trong mật nhân: - Vô cơ hỏa mẫu băng phương pháp. .. chỉnh xác khoảng 0,25g mẫu đem 3,4,3, Kết (Ịuủ định tượng Cu trong cây mật nhân thơo phương pháp khảo sát ở các tv lệ acid HNO3 : IICIO4 khác nhau ta thu được kết quả nlur sau: TT đường ch uẩn Độ lặp ỉại của phép đo trênNồng mưuđộ thực Lượng cân Hàm lượng Cu Tiến hành vô cơ hỏa ba mẫu rễ, thân, lá của cây mật nhân Mỗi mẫu được làm lặp lại 5 lần, đo trên máy cực phổ VA 757 Computrace, kết quả thu được Ta... phương pháp x= 1000.M ^g/s> 2í dùng acid pẹrcloric ngay từ đầiì có thể gây nổ mạnh do phản ửng xảy ra quá mãnh liệt Do đó chúnt* tôi tiên hành vô cơ hóa bằng acid nitric trước đế oxy hóa những chât dễ oxy hóa, sau dó dùng percloric dè vô cơ hoàn toàn mầu phân tích 2.4.2 Phu'ơng pháp định iượng Định lượng Cư trong cây mật nhân (bao gồm cả rễ, thân và lá) bàng phương pháp cực phổ xung vi phân Theo các nghiên. .. thấy rằng phương pháp đường chưân và phương pháp thêm đường, chuân có độ chính xạc tương tự nhau Nhưng phương pháp đưởng chuẩn có ưu điểm là tiến hành nhanh vả tiết kiệm chất chuẩn Do đó chúng tôi tiến hành định lượng theo phương pháp đường chuẩn Xây dựng đường chuẩn rồi dựa vào đưòri£ chuẩn để tính toán hàm lượng Cu trong mẫu Trong đó: X : số |ig Cu trong 1 g mầu khỏ (pg/g) c : nàng độ Cu tính theo đường... nhất Độ thu hồi của phương pháp là khá cao (93,08%) cho thấy quá trình vô cơ hỏa gây mất mẫu khônư nhiều Két quả trong bảng trên cho thấy khả năng thu hồi của mẫu là tương đối - Phương pháp định lượng: Đe xác định hầm lượng Cu có thể sử dụng phương pháp đưởng chuẩn hoặc phương pháp thêm chuẩn Tuy nhiên, do đề tải của chúng tôi ỉà xác định hàm 1 irọTiẼT của cùne một nauyẽn tố trong nhiều mẫu Do vậy, chúng... hai loạt thực nghiệm như sau: 33 3.5, Bàn luận 3.5 / về phương pháp phân tích: Trong khóa luận này, chủng tôi đã tiên hành khảo sát và xây dựne được quy trình định lượng Cư trong cây mật nhân với các nội dune cụ thể như sau: - Xử lý mẫu: Đe xử lý mẫu thì cỏ nhiều phương pháp như chứng tôi đã nêu ở trên,, Trong đó phượng pháp vô cơ hỏa trong lò vi sóng là tối ưu nhất, Tuy nhiên do điều kiện trang thiết... tích: Id = k.c Trẽn cực phố đồ thu được, vị trí của đỉnh pic sẽ đặc trưng cho từng chát được dùng cho mục đích phân tích định tính, chiều cao pic liên quan tuyến tính vói nồng độ dưực dùng vào mục đích định lượng [ 12] * Máy VA 757 Computrace lả một máy cực phổ đa năng, bao gồm nhiều kỷ thuật đo khác nhau như: cực pho sóng vuông, cực phổ xung vi phân, cực phố Von-ampe hòa tan, phương pháp Von-ampe quét... tích nến được dùng cho mục đích định lượng Ưu điểm nổi bật của phương pháp này là nó có độ nhạy vói cả quá trình thuận nghịch và không thuận nghịch Trong điều kiện tối ưu ta cỏ thể phàn biệt được hai chất có chênh lệch thế đỉnh 0,04 V, trong khi cực phổ cổ điển là 0,2 V Giới hạn phát hiện 10'7-10 8 M b) Cực phổ sóng vuông [4|, [51,116] Điện cực giọt thủy ngân được phán cực từ hai thành phần thế; thế ... phương pháp định lượng Xây dựng quy trình định lượng Cu mật nhân: - Vô hỏa mẫu băng phương pháp vô hỏa ướt - Định lượng Cu băng phương pháp cực phổ xung vi phân - Tính hàm lượng Cu theo phương pháp. .. muốn bước đầu làm quen vả sử dụng máy cực VA 757 Coiuputrace đe đánh giá hàm lượng Cu mật nhân, thực đề tài: Nghiên cứu định lượng Cu câv mật nhân bàng phinrng pháp Hình 1: Eurycoma longiĩolia Jack... 2.4.2 Phu'ơng pháp định iượng Định lượng Cư mật nhân (bao gồm rễ, thân lá) bàng phương pháp cực phổ xung vi phân Theo nghiên cửu trước đỏ, chung tói thấy phương pháp đường chưân phương pháp thêm