i MỤC LỤC Trang MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Mục đích đề tài Nhiệm vụ nghiên cứu Khách thể nghiên cứu Đối tƣợng nghiên cứu Phạm vi nghiên cứu đề tài Nội dung nghiên cứu Phƣơng pháp nghiên cứu Sản phẩm đề tài 10 Ý nghĩa đề tài CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Vai trò thí nghiệm, thực hành dạy học Sinh học 1.2 Các thực hành Di truyền học chƣơng trình Sinh học Trung học Cơ sở Trung học Phổ thông 1.3 Các quy trình làm tiêu Di truyền học nƣớc 1.4 Một số loại thuốc nhuộm nhiễm sắc thể 13 1.5 Đối tƣợng thƣờng đƣợc dùng thực tiêu Di truyền học 15 1.6 Các quy trình thực tiêu Di truyền tạm thời có SGK 15 1.7 Các quy trình thực tiêu Di truyền tạm thời cố định có tài liệu SGK 18 CHƢƠNG 2: VẬT LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP 2.1 Vật liệu nghiên cứu 25 2.2 Hóa chất dụng cụ 25 2.2.1 Hóa chất 2.2.1.1 Thuốc nhuộm NST 25 2.2.1.2 Dung dịch cố định mẫu 25 2.2.1.3 Dung dịch nhƣợc trƣơng 25 2.2.1.4 Dung dịch làm mềm mẫu 25 2.2.1.5 Các loại hóa chất xử lí mẫu 25 ii 2.2.1.6 Môi trƣờng nuôi ruồi giấm 26 2.2.2 Dụng cụ 26 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 26 2.3.1 Nghiên cứu lý thuyết quy trình thực tiêu Di truyền tạm thời cố định 26 2.3.2 Bố trí thí nhiệm 26 2.3.3 Xử lý thống kê 27 2.3.3.1 Cách đếm số lƣợng tế bào thí nghiệm có định lƣợng 27 2.3.3.2 Xử lý số liệu 28 2.3.4 Khảo sát bƣớc (công đoạn) quy trình thực tiêu tạm thời cố định 2.3.4.1 Thao tác chuẩn bị mẫu 28 2.3.4.2 Xử lí đa bội hóa tế bào thực vật 29 2.3.4.3 Xử lý sốc nhƣợc trƣơng 29 2.3.4.4 Cố định mẫu 30 2.3.4.5 Làm mềm mẫu 30 2.3.4.6 Nhuộm mẫu 30 2.3.4.7 Thao tác lên kính 30 2.3.4.8 Cố định tiêu 30 2.3.4.9 Khảo sát độ bền màu tiêu cố định qua thời gian 31 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1 Các khâu thực tiêu Di truyền điều kiện trƣờng Trung học Phổ thông 31 3.1.1 Thao tác chuẩn bị mẫu vật 31 3.1.1.1 Thao tác chuẩn bị mẫu nguyên phân hành tím, hành tây tỏi 31 3.1.1.2 Thao tác chuẩn bị mẫu giảm phân hẹ 32 3.1.1.3 Thao tác chuẩn bị mẫu châu chấu 33 3.1.1.4 Thao tác chuẩn bị mẫu dế mèn 34 3.1.1.5 Thao tác chuẩn bị mẫu ruồi giấm 35 3.1.2 Ảnh hƣởng thời điểm thu mẫu lên số nguyên phân rễ hành tím 37 3.1.3 Đa bội hóa tế bào hành, tỏi 40 3.1.4 Gây sốc nhƣợc trƣơng tế bào động thực vật cho quan sát số lƣợng NST 40 iii 3.1.4.1 Gây nhƣợc trƣơng tế bào rễ hành tím, hành tây tỏi 41 3.1.4.2 Gây nhƣợc trƣơng tế bào sinh dục châu chấu dế mèn đực 43 3.1.5 Cố định mẫu vật 44 3.1.5.1 Cố định mẫu hành tím, tỏi, hành tây hoa hẹ 45 3.1.5.2 Cố định mẫu tinh hoàn châu chấu 45 3.1.6 Làm mềm mẫu 45 3.1.7 Nhuộm mẫu 47 3.1.7.1 Nhuộm NST phẩm nhuộm aceto-orcein 47 3.1.7.2 Nhuộm NST phẩm nhuộm xanh methylene 50 3.1.8 Hóa chất thao tác lên kính 52 3.2 Xây dựng quy trình cải tiến việc thực tiêu Di truyền trƣờng Trung học Phổ thông 53 3.2.1 Sơ dồ hóa quy trình cải tiến 53 3.2.2 Đánh giá quy trình cải tiến 55 3.3 Xây dựng quy trình thực tiêu hiển vi tạm thời để quan sát NST số loài động thực vật 58 3.3.1 Sơ đồ hóa quy trình 58 3.3.2 Những lƣu ý thực quy trình làm tiêu NST động thực vật 62 3.3.2.1 Xử lý để làm NST rõ nét dàn 62 3.3.2.2 Xử lý thuốc nhuộm để làm NST bắt màu tốt 65 3.4 Xây dựng đánh giá hiệu quy trình cố định tiêu 66 3.4.1 Xây dựng quy trình cố định tiêu 66 3.4.1.1 Tách lamelle khỏi lame 66 3.4.1.2 Loại nƣớc cồn 3.4.1.3 Dán tiêu 67 3.4.1.4 Quy trình cố định tiêu cải tiến 68 3.4.2 Khảo sát độ bền màu tiêu cố định theo thời gian 68 3.4.3 Hình ảnh hiển vi tiêu Di truyền học cố định thực đƣợc 69 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 74 TÀI LIỆU THAM KHẢO 75 PHỤ LỤC 77 iv DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT SGK: Sách Giáo Khoa KHV: Kính hiển vi NST: Nhiễm sắc thể v DANH MỤC CÁC BẢNG STT Tên bảng Bảng 1.1: Các yếu tố ảnh hƣởng đến khả bắt màu mô thuốc nhuộm Bảng 1.2: Các yếu tố ảnh hƣởng đến khả bắt màu mô thuốc nhuộm Bảng 3.1: Kích thƣớc hoa hẹ tƣơng ứng với kì giảm phân quan sát đƣợc tiêu tạm thời Bảng 3.2: Kết quan sát giảm phân tinh hoàn dế với kích thƣớc khác Bảng 3.3: Số tế bào thu đƣợc kì thời điểm thu mẫu khác Bảng 3.4: Số tế bào tứ bội hóa thành công Bảng 3.5: Ảnh hƣởng nồng độ KCl thời gian xử lí nhƣợc trƣơng lên phân tán nhiễm sắc thể tế bào hành tím, hành tây tỏi Bảng 3.6: Ảnh hƣởng thao tác xử lý học hóa học lên phân tán nhiễm sắc thể tế bào hành tím Trang 14 34 36 39 41 42 43 Bảng 3.7: Ảnh hƣởng nồng độ KCl thời gian xử lí nhƣợc trƣơng lên phân tán nhiễm sắc thể tế bào sinh dục châu chấu dế 44 mèn đực 10 11 12 13 14 Bảng 3.8: Ảnh hƣởng nồng độ HCl lên việc dàn tế bào mẫu rễ hành tím, tỏi, hành tây Bảng 3.9: So sánh quy trình thực tiêu tạm thời trình nguyên phân hành tím Bảng 3.10: So sánh quy trình thực tiêu tạm thời NST châu chấu Bảng 3.11: So sánh quy trình thực tiêu tạm thời NST lƣỡng bội (2n) tứ bội (4n) hành tím, tỏi, hành tây Bảng 3.12: Thời gian (tính theo giây) nồng độ cồn thao tác loại nƣớc khỏi mẫu 47 57 58 59 68 vi DANH MỤC CÁC HÌNH TT Tên hình Trang Hình 1.1: Công thức cấu tạo orcein 13 Hình 1.2: Công thức cấu tạo xanh methylene 14 Hình 1.3: Sự bắt màu mô với xanh methylene 15 10 Hình 1.4: Sơ đồ quy trình thực tiêu hiển vi tạm thời để quan sát kì nguyên phân Hình 1.5: Sơ đồ quy trình thực tiêu hiển vi tạm thời để quan sát NST Hình 1.6: Sơ đồ quy trình thực tiêu hiển vi tạm thời để quan sát NST số thực vật Hình 1.7: Sơ đồ quy trình thực tiêu hiển vi tạm thời để quan sát hình thái, số lƣợng NST thực vật nguyên phân Hình 1.8: Sơ đồ quy trình thực tiêu hiển vi tạm thời để quan sát NST giảm phân hoa hẹ Hình 1.9: Sơ đồ quy trình thực tiêu hiển vi tạm thời để quan sát NST châu chấu Hình 1.10: Sơ đồ quy trình thực tiêu hiển vi tạm thời để quan sát NST khổng lồ ruồi giấm 16 17 18 20 21 22 23 11 Hình 1.11: Sơ đồ quy trình thực tiêu hiển vi cố định 24 12 Hình 2.1: Phòng đếm Neubauer sơ đồ lƣới 27 13 Hình 3.1: Mẫu rễ hành tây (a); tỏi (b); hành ta (c) sau ngày 32 14 Hình 3.2: Hoa hẹ với kích thƣớc khác (a); cụm hoa (b) 33 15 Hình 3.3: Châu chấu đực (a); (b) mẫu tinh hoàn tách mô mỡ (c) 16 Hình 3.4: Phân biệt dế mèn trƣởng thành đực (a) (b) 17 18 Hình 3.5: Ruồi giấm bắt thiên nhiên a đực; b Hình 3.6: Ấu trùng ruồi giấm độ tuổi a phần đầu; b Thân 19 Hình 3.7: Tuyến nƣớc bọt ấu trùng ruồi giấm dƣới kính hiển vi 34 35 36 36 37 vii 20 Hình 3.8: Nhiễm sắc thể khổng lồ ruồi giấm (X100) 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 Hình 3.9: Sử dụng phòng đếm Neubauer để ƣớc tính (X100) số tế bào rễ hành tím có tiêu Hình 3.10: Biểu đồ thể số tế bào rễ hành tím kì nguyên phân thời điểm thu mẫu khác Hình 3.11: Tế bào hành tây không xử lý nhƣợc trƣơng (a) xử lý nhƣợc trƣơng với KCl 0,2% 30 phút (b) (X400) Hình 3.12 : Bộ NST châu chấu qua xử lý nhƣợc trƣơng để phân tán NST (X400) Hình 3.13 : Bộ NST dế mèn qua xử lý nhƣợc trƣơng để phân tán NST (X400) Hình 3.14: Tiêu nguyên phân rễ tỏi nhuộm với aceto-orcein 2% 20 phút (X400) Hình 3.15: Tiêu nguyên phân rễ hành tím nhuộm với acetoorcein 2% - 20 phút (X400) Hình 3.16: Tiêu nguyên phân rễ hành tây nhuộm với acetoorcein 2% - phút (X400) Hình 3.17: Tiêu giảm phân bao phấn hoa hẹ nhuộm với acetoorcein 2% - phút (X100) Hình 3.18: Bộ nhiễm sắc thể châu chấu nhuộm với aceto-orcein 2% phút (X400) Hình 3.19: Tiêu nguyên phân hành tím nhuộm xanh methylene 2% (X100) Hình 3.20: Tiêu nguyên phân tỏi nhuộm xanh methylene 2% (X100) 37 39 39 42 44 44 47 48 48 49 50 51 51 Hình 3.21: So sánh tiêu NST tỏi nhuộm xanh 33 methylene 2% (a) aceto-orcein 2% (b) (X400) 34 35 Hình 3.22: Tiêu tạm thời NST châu chấu nhuộm xanh methylene 2% (X100) Hình 3.23: Sơ đồ quy trình cải tiến thực tiêu hiển vi tạm thời để quan sát kì nguyên phân hành tím, tỏi hành tây 52 52 53 viii 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 Hình 3.24: Sơ đồ quy trình cải tiến thực tiêu hiển vi tạm thời để quan sát NST châu chấu Hình 3.25: Sơ đồ quy trình cải tiến thực tiêu hiển vi tạm thời để quan sát NST số loài thực vật Hình 3.26: Tiêu nguyên phân rễ hành tím theo quy trình 1a (a) quy trình 1b (b) (X400) Hình 3.27: Tiêu NST châu chấu theo quy trình 2a (a) quy trình 2b (b) (X400) Hình 3.28: Tiêu NST hành tím theo quy trình 3a (a) quy trình 3b (b) (X400) Hình 3.29: Sơ đồ quy trình thực tiêu hiển viđể quan sát NST hành, tỏi Hình 3.30: Sơ đồ quy trình thực tiêu hiển vi để quan sát NST hẹ Hình 3.31: Sơ đồ quy trình thực tiêu hiển vi để quan sát NST châu chấu, dế Hình 3.32: Sơ đồ quy trình thực tiêu hiển vi để quan sát NST khổng lồ ruồi giấm Hình 3.33: Bộ nhiễm sắc thể nhuộm với aceto-orcein 2% - phút châu chấu (a) dế mèn (b)(X400) 54 55 56 57 58 59 60 61 62 63 46 Hình 3.34: NST khổng lồ ruồi giấm cuộn tế bào (X400) 64 47 Hình 3.35: NST khổng lồ ruồi giấm dạng trải (X400) 64 48 Hình 3.36: Tế bào hành tím bị biến dạng thao tác đun mẫu nóng 65 49 Hình 3.37: Tiêu NST hẹ (X400) 65 50 Hình 3.38: Sơ đồ quy trình cố định tiêu hiển vi 68 51 Hình 3.39: Bộ NST tỏi trƣớc cố định (a) sau cố định 12 tháng (b) 68 52 Hình 3.40: Tiêu cố định nguyên phân hành tây (x100) 69 53 Hình 3.41: Tiêu cố định NST tỏi 69 54 Hình 3.42: Tiêu cố định giảm phân hoa hẹ 70 55 Hình 3.43: Tiêu cố định giảm phân châu chấu 70 ix 56 Hình 3.44: Tiêu cố định giảm phân châu chấu 71 57 Hình 3.45: Tiêu cố định NST dế mèn 71 58 Hình 3.46: Tiêu cố định NST khổng lồ ruồi giấm 72 59 Hình 3.47: Tiêu cố định NST hành tím 72 60 Hình 3.48: Tiêu cố định NST hành tím 73 Hình 3.49: Các kì nguyên phân hành tím nhuộm xanh 61 methylene tiêu cố định (X400) 73 MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Quan sát thí nghiệm hai phương pháp nghiên cứu đặc thù Sinh học – môn Khoa học thực nghiệm Vì vậy, dạy học Sinh học, phương pháp trực quan thực hành – thí nghiệm cần phải trọng Các phương pháp trực quan thực hành – thí nghiệm chuẩn bị tốt vận dụng khéo léo huy động tham gia nhiều giác quan, kết hợp hai hệ thống tín hiệu, giúp cho người học dễ hiểu, nhớ lâu, phát triển lực ý, quan sát, rèn luyện kĩ năng, kĩ xảo, phát triển tư tìm tòi, phát tri thức (Đinh Quang Báo Nguyễn Đức Thành, 2003) Trong chương trình Sinh học bậc Trung học, mục tiêu kĩ thực hành rèn luyện phát triển kĩ quan sát, thí nghiệm Qua đó, học sinh học cách thu thập, xử lí mẫu vật, biết cách bố trí thực số thí nghiệm đơn giản nhằm tìm hiểu nguyên nhân số tượng trình Sinh học Muốn thực mục tiêu này, việc tổ chức dạy học thực hành sách giáo khoa việc làm cần thiết (Trịnh Nguyên Giao, Nguyễn Đức Thành, 2009) Từ năm 1990, nội dung chương trình sách giáo khoa Sinh học bậc Trung học trọng cung cấp cho học sinh kiến thức bản, đại Di truyền học – Khoa học giúp lý giải tượng sống Tuy nhiên, kiến thức Di truyền học loại kiến thức khó với nhiều khái niệm trừu tượng đối tượng nghiên cứu mức tế bào phân tử có kích thước hiển vi siêu hiển vi Các thực hành Di truyền học chương trình giúp học sinh củng cố kiến thức, cụ thể hóa khái niệm, gây hứng thú học tập, v.v Các thực hành Di truyền học kể đến gồm: Bài 14, Sách giáo khoa (SGK) Sinh học 9: “Thực hành: Quan sát hình thái nhiễm sắc thể”; Bài 20, SGK Sinh học 10 bản: “Thực hành: Quan sát kỳ nguyên phân tiêu rễ hành”; Bài 31, SGK Sinh học 10 nâng cao: “Thực hành: Quan sát kỳ nguyên phân rễ hành tiêu tạm thời cố định”; Bài 7, SGK Sinh học 12 10, SGK Sinh học 12 nâng cao: “Thực hành quan sát dạng đột biến số lượng nhiễm sắc thể tiêu cố định tiêu tạm thời” 80 ANOVA Source of Variation SS df MS F Between Groups 208.2667 Within Groups 494.6667 10 49.46667 Total 702.9333 14 P-value 52.06667 1.052561 0.428244 F crit 3.47805 2.2 Kì Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance sample 334 111.3333 100.3333 sample 352 117.3333 4.333333 sample 3 309 103 244 sample 339 113 109 sample 338 112.6667 16.33333 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 329.7333 Within Groups Total df MS F 82.43333 948 10 1277.733 14 P-value 0.86955 0.514913 94.8 2.3 Kì sau Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance sample 257 85.66667 17.33333 sample 281 93.66667 5.333333 sample 3 270 90 63 sample 282 94 sample 276 92 39 F crit 3.47805 81 ANOVA Source of Variation SS Between Groups df 139.6 MS F P-value 34.9 1.356218 0.315909 Within Groups 257.3333 10 25.73333 Total 396.9333 14 F crit 3.47805 2.4 Kì cuối Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance sample 257 85.66667 17.33333 sample 281 93.66667 5.333333 sample 3 270 90 63 sample 282 94 sample 276 92 39 ANOVA Source of Variation SS Between Groups df 139.6 MS F 34.9 1.356218 0.315909 Within Groups 257.3333 10 25.73333 Total 396.9333 14 2.5 Bốn kì Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance Kì đầu 15 1289 85.93333 50.20952 Kì 15 1672 111.4667 91.26667 Kì sau 15 1366 91.06667 28.35238 Kì cuối 15 969 P-value 64.6 73.97143 F crit 3.47805 82 ANOVA Source of Variation SS df MS F P-value F crit 1.55EBetween Groups 16674.53 Within Groups Total 5558.178 91.19242 3413.2 56 20087.73 59 21 2.769431 60.95 Phân tích phƣơng sai nhân tố số lƣợng tế bào qua kì nguyên phân rễ hành thời điểm thu mẫu 11 sáng 3.1 Kì đầu Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance sample 151 50.33333 4.333333 sample 173 57.66667 9.333333 sample 3 159 sample 197 65.66667 89.33333 sample 183 53 25 61 163 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 451.7333 Within Groups Total df MS F P-value 112.9333 1.940435 0.180167 582 10 1033.733 14 58.2 3.2 Kì Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance sample 179 59.66667 58.33333 sample 153 sample 3 157 52.33333 36.33333 sample 136 45.33333 6.333333 sample 135 51 45 63 19 F crit 3.47805 83 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 433.3333 Within Groups Total df MS F P-value 108.3333 2.959927 0.074681 366 10 799.3333 14 F crit 3.47805 36.6 3.3 Kì sau Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance sample 185 61.66667 12.33333 sample 172 57.33333 6.333333 sample 3 190 63.33333 24.33333 sample 170 56.66667 42.33333 sample 179 59.66667 58.33333 ANOVA Source of Variation SS Between Groups df 95.6 MS F 23.9 0.831787 0.534762 Within Groups 287.3333 10 28.73333 Total 382.9333 14 3.4 Kì cuối Anova: Single Factor SUMMARY Groups P-value Count Sum Average Variance sample 219 73 39 sample 189 63 103 sample 3 187 62.33333 37.33333 sample 184 61.33333 137.3333 sample 190 63.33333 65.33333 F crit 3.47805 84 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 271.6 764 10 1035.6 14 Within Groups Total df MS F P-value 67.9 0.888743 0.505087 F crit 3.47805 76.4 3.5 Bốn kì Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance 73.8381 Kì đầu 15 863 57.53333 Kì 15 760 50.66667 57.09524 Kì sau 15 896 59.73333 27.35238 Kì cuối 15 1432 95.46667 76.55238 ANOVA Source of Variation SS df MS F P-value F crit 8.15EBetween Groups 18213.92 6071.306 103.4126 Within Groups 3287.733 56 58.70952 Total 21501.65 59 23 2.769431 Phân tích phƣơng sai nhân tố số lƣợng tế bào qua kì nguyên phân rễ hành thời điểm thu mẫu 13 chiều 4.1 Kì đầu Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance sample 119 39.66667 26.33333 sample 129 43 31 sample 3 147 49 sample 160 53.33333 146.3333 sample 152 50.66667 49.33333 85 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 381.7333 Within Groups Total df MS F P-value 95.43333 1.835256 0.198754 520 10 901.7333 14 F crit 3.47805 52 4.2 Kì Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance sample 119 39.66667 25.33333 sample 130 43.33333 10.33333 sample 3 132 sample 121 40.33333 4.333333 sample 136 45.33333 14.33333 44 76 ANOVA Source of Variation SS df MS F Between Groups 71.06667 Within Groups 260.6667 10 26.06667 Total 331.7333 14 P-value 17.76667 0.681586 0.620428 4.3 Kì sau Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance sample 109 36.33333 22.33333 sample 117 sample 3 118 39.33333 26.33333 sample 110 36.66667 2.333333 sample 119 39.66667 0.333333 39 25 F crit 3.47805 86 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 29.73333 7.433333 Within Groups 152.6667 10 15.26667 Total df 182.4 MS F P-value 0.4869 0.745569 F crit 3.47805 14 4.4 Kì cuối Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance sample 349 116.3333 110.3333 sample 327 sample 3 328 109.3333 196.3333 sample 306 sample 326 108.6667 233.3333 109 97 102 49 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 308.9333 Within Groups Total df MS F 77.23333 0.562925 0.695149 1372 10 1680.933 14 137.2 4.5 Bốn kì Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count P-value Sum Average Variance Kì đầu 15 707 47.13333 64.40952 Kì 15 638 42.53333 23.69524 Kì sau 15 573 Kì cuối 15 1636 109.0667 120.0667 38.2 13.02857 F crit 3.47805 87 ANOVA Source of Variation SS df MS F P-value F crit 1.42EBetween Groups 50265.93 Within Groups Total 16755.31 302.9894 3096.8 56 53362.73 59 34 2.769431 55.3 Phân tích phƣơng sai nhân tố số lƣợng tế bào rễ hành nguyên phân qua thời điểm thu mẫu khác Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance 15 4599 15 5296 353.0667 201.6381 11 15 3951 13 15 3554 236.9333 137.2095 306.6 123.5429 263.4 137.5429 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 116648.9 Within Groups 8399.067 Total df 125048 MS F 38882.98 259.2487 P-value F crit 8.46E-33 2.769431 56 149.9833 59 Phân tích phƣơng sai nhân tố số lƣợng tế bào rễ hành kì nguyên phân qua thời điểm thu mẫu khác Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance 15 1217 81.13333 41.55238 15 1672 111.4667 91.26667 11 15 760 50.66667 57.09524 13 15 638 42.53333 23.69524 88 ANOVA Source of Variation SS df MS F P-value F crit 1.44EBetween Groups 44448.32 14816.11 277.4428 Within Groups 2990.533 56 53.40238 Total 47438.85 59 33 2.769431 Phân tích phƣơng sai nhân tố số lƣợng tế bào rễ hành tứ bội hóa thành công nồng độ colchicine khác 7.1 Colchicine 0,01% Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance Sample 58 19.33333 2.333333 Sample 42 Sample 3 47 15.66667 9.333333 Sample 48 16 19 Sample 48 16 13 14 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 45.06667 Within Groups 101.3333 Total df 146.4 MS F 11.26667 1.111842 10 10.13333 14 7.2 Colchicine 0,02% Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance Sample 79 26.33333 36.33333 Sample 84 28 Sample 3 69 23 49 Sample 85 28.33333 9.333333 P-value F crit 0.40341 3.47805 89 Sample 88 29.33333 4.333333 ANOVA Source of Variation SS Between Groups df MS 74 Within Groups 212 10 Total 286 14 F P-value 18.5 0.872642 0.513319 F crit 3.47805 21.2 7.3 Colchicine 0,03% Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance Sample 122 40.66667 4.333333 Sample 109 36.33333 74.33333 Sample 3 116 38.66667 2.333333 Sample 115 38.33333 17.33333 Sample 117 39 21 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 28.93333 Within Groups 238.6667 Total 267.6 df MS F P-value 7.233333 0.303073 0.869402 10 23.86667 14 7.4 Giữa nồng độ Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance 0.01 15 243 16.2 10.45714 3.233751 0.02 15 405 27 20.42857 4.519798 0.03 15 579 38.6 19.11429 4.371989 F crit 3.47805 90 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 3764.8 Within Groups Total df MS 700 F 1882.4 P-value 112.944 F crit 1.26E-17 3.219942 42 16.66667 4464.8 44 Phân tích phƣơng sai nhân tố số lƣợng tế bào rễ hành xử lý nhƣợc trƣơng thành công 8.1 Đối chứng Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance 106 31 Sample 318 Sample 335 111.6667 82.33333 Sample 3 318 Sample 337 112.3333 81.33333 Sample 364 121.3333 114.3333 106 21 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 473.7333 Within Groups Total df MS F 118.4333 1.794444 0.206547 660 10 1133.733 14 66 8.2 Giữa KCl ĐC Anova: Single Factor SUMMARY Groups P-value Count Sum Average Variance ĐC 15 1672 111.4667 80.98095 KCl 15 1759 117.2667 165.6381 F crit 3.47805 91 ANOVA Source of Variation SS df Between Groups 252.3 MS F P-value F crit 252.3 2.046071 0.163665 4.195972 Within Groups 3452.667 28 123.3095 Total 3704.967 29 8.3 Giữa ĐC, KCl colchicine Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance ĐC 15 1672 111.4667 80.98095 8.998942 KCl 15 1759 117.2667 165.6381 12.87005 Colchicine 15 3822 254.8 103.0286 10.1503 MS P-value ANOVA Source of Variation SS df Between Groups 197467.5 Within Groups 4895.067 42 116.5492 Total 202362.6 44 F 98733.76 847.1422 F crit 1.14E-34 3.219942 Phân tích phƣơng sai nhân tố số lƣợng tế bào rễ hành dàn NST thành công 9.1 Bằng KCl Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance 13 Sample 39 Sample 35 11.66667 2.333333 Sample 3 37 12.33333 2.333333 Sample 37 12.33333 6.333333 Sample 39 13 92 ANOVA Source of Variation SS Between Groups 3.733333 Within Groups Total df MS F P-value 0.933333 0.291667 0.876814 32 10 35.73333 14 F crit 3.47805 3.2 9.2 Bằng colchicine Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Colchicine Sum Average Variance 156 52 49 152 50.66667 6.333333 164 54.66667 50.33333 147 49 25 159 53 31 ANOVA Source of Variation SS Between Groups df 56.4 MS F P-value 14.1 0.436082 0.779943 Within Groups 323.3333 10 32.33333 Total 379.7333 14 F crit 3.47805 9.3 Giữa ĐC, KCl colchicine Anova: Single Factor SUMMARY Groups Count Sum Average Variance 0 ĐC 15 KCl 15 187 12.46667 2.552381 1.597617 Colchicine 15 778 51.86667 27.12381 5.208052 ANOVA Source of Variation SS df MS Between Groups 21989.64 Within Groups 415.4667 42 9.892063 Total 22405.11 44 F 10994.82 1111.479 P-value F crit 4.29E-37 3.219942 93 10 Phân tích phƣơng sai so sánh khác biệt kết định lƣợng số tế bào rễ hành tím kì nguyên phân qua thời điểm thu mẫu khác ONEWAY sotebao BY nghiemthuc /POSTHOC=DUNCAN LSD ALPHA(0.05) Oneway [DataSet0] ANOVA sotebao Sum of Squares Between Groups Within Groups Total df Mean Square F 116648.933 38882.978 8399.067 56 149.983 125048.000 59 Sig 259.249 000 Post Hoc Tests Multiple Comparisons Dependent Variable:Sotebao (I) nghiem thuc LSD 11 (J) nghiem thuc Mean Difference (I-J) Std Error Sig Lower Bound Upper Bound -46.46667 * 4.47189 000 -55.4249 -37.5084 11 43.20000 * 4.47189 000 34.2417 52.1583 13 69.66667 * 4.47189 000 60.7084 78.6249 46.46667 * 4.47189 000 37.5084 55.4249 11 89.66667 * 4.47189 000 80.7084 98.6249 13 116.13333 * 4.47189 000 107.1751 125.0916 -43.20000 * 4.47189 000 -52.1583 -34.2417 -89.66667 * 4.47189 000 -98.6249 -80.7084 26.46667 * 4.47189 000 17.5084 35.4249 -69.66667 * 4.47189 000 -78.6249 -60.7084 -116.13333 * 4.47189 000 -125.0916 -107.1751 -26.46667 * 4.47189 000 -35.4249 -17.5084 13 13 95% Confidence Interval 11 * The mean difference is significant at the 0.05 level 94 Homogeneous Subsets Sotebao Subset for alpha = 0.05 nghiemthuc a Duncan 13 11 Sig N 15 2.3693E2 15 2.6340E2 15 3.0660E2 15 3.5307E2 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed a Uses Harmonic Mean Sample Size = 15.000 Notes: (7): số tế bào kỳ thu mẫu khoảng g (9): số tế bào kỳ thu mẫu khoảng g (11): số tế bào kỳ thu mẫu khoảng 11 g (13): số tế bào kỳ thu mẫu khoảng 13 g 1.000 [...]... hiện tiêu bản Di truyền tạm thời và cố định, rút ngắn thời gian thực hiện tiêu bản, tìm kiếm các thuốc nhuộm thay thế hoặc phương cách giảm thiểu lượng thuốc nhuộm tiêu tốn là những việc làm có ý nghĩa, tạo thuận lợi cho công tác triển khai tổ chức dạy học thực hành Di truyền học ở bậc Trung học Với những lý do vừa nêu, hướng nghiên cứu Cải tiến quy trình làm tiêu bản di truyền ở bậc Trung học Phổ. .. dừng lại ở các nội dung thực hành Di truyền học ở bậc Trung học Phổ thông, với một số đối tượng cụ thể như sau: - Cải tiến 03 quy trình thực hiện tiêu bản hiển vi tạm thời về quá trình nguyên phân và bộ NST trong các SGK Sinh học lớp 10 (nâng cao) và SGK Sinh học 12 (cơ bản và nâng cao) - Thực hiện bộ tiêu bản cố định về quá trình nguyên phân ở rễ hành tím - Thực hiện bộ tiêu bản cố định về quá trình. .. chuyên dùng Quá trình cố định tiêu bản hiển được nghiên cứu cải tiến nhằm tạo ra bộ tiêu bản có chất lượng tốt và giá thành phù hợp nhằm phục vụ công tác giảng dạy các bài thực hành Di truyền học 2 Mục đích của đề tài - Cải tiến 03 quy trình làm tiêu bản nguyên phân và tiêu bản NST trong chương trình Sinh học 10 – nâng cao; chương trình Sinh học 12 cơ bản và nâng cao - Thực hiện bộ tiêu bản bộ NST của... kèm Các quy trình sau cải tiến sẽ đi kèm với ký hiệu chữ “b” 2.3.2 Bố trí thí nhiệm Các quy trình thực hiện tiêu bản Di truyền trong SGK Sinh học cần tiến hành khảo sát gồm 03 quy trình (SGK Sinh học 10 nâng cao; SGK Sinh học 12 cơ bản và SGK Sinh học 12 nâng cao) Mỗi quy trình sẽ tiến hành bố trí các thí nghiệm để tìm hiểu, phân tích ưu nhược điểm của mỗi bước (công đoạn) từ đó tiến hành cải tiến lại... được giới thiệu phổ biến trong các bài thực hành di truyền của SGK Sinh học lớp 9, 10, 12 và một số giáo trình Di truyền học phổ biến ở nước ta hiện nay 1.6 Các quy trình thực hiện tiêu bản Di truyền tạm thời có trong SGK Qua hướng dẫn trong các SGK Sinh học lớp 10 và 12, có 3 quy trình được nghiên cứu và sơ đồ hóa như sau: 16 Quy trình 1a: Thực hiện tiêu bản tạm thời để quan sát các kì nguyên phân Trồng... làm tiêu bản tạm thời của tế bào rễ hành (SGK Sinh học lớp 10 cơ bản và nâng cao) Trong chương trình Sinh học lớp 12, kiến thức Di truyền được đề cập ở phần V Di truyền học , tập trung ở năm chương đầu trong SGK Riêng ở chương I “Cơ chế di truyền và biến dị”, học sinh sẽ được thực hiện thí nghiệm “Thực hành: quan sát các dạng đột biến số lượng nhiễm sắc thể trên tiêu bản cố định và trên tiêu bản tạm... cứu khoa học và làm khóa luận tốt nghiệp - Bài đăng trên tạp chí 10 Ý nghĩa, hiệu quả của đề tài - Đề tài thành công sẽ cung cấp cho các giáo viên Sinh học một quy trình làm tiêu bản Di truyền học cụ thể, rõ ràng và hiệu quả (dễ thực hiện, dễ thành công) - Quy trình tìm được có thể đưa vào sản xuất trên quy mô thủ công các loại tiêu bản Di truyền học nhằm cung cấp cho thị trường thiết bị dạy học trong... trong chương trình Sinh học ở trường Trung học, trong đó có đề cập đến các thí nghiệm về Di truyền học Tác giả đã mô tả cách thức thực hiện tiêu bản hiển vi tạm thời để quan sát NST của châu chấu và hành tím hoặc hành tây Thay vì hơ nóng tiêu bản trên ngọn lửa đèn cồn hoặc đặt tiêu bản trong tủ ấm ở 60oC như quy trình của một số tác giả khác, Đào Như Phú đề xuất sử dụng phương pháp hơ nóng tiêu bản tạm... trình giảm phân ở hoa hẹ - Thực hiện tiêu bản cố định về bộ NST của hành tím, tỏi, châu chấu và dế mèn, và bộ NST khổng lồ của ruồi giấm - Đánh giá chất lượng bộ tiêu bản cố định sau 9 tháng - 1 năm 7 Nội dung nghiên cứu - Nghiên cứu và cải tiến quy trình làm tiêu bản nguyên phân và giảm phân - Nghiên cứu và đề xuất quy trình làm tiêu bản bộ nhiễm sắc thể - Nghiên cứu cố định các tiêu bản 4 8 Phƣơng... đồ quy trình thực hiện tiêu bản hiển vi tạm thời để quan sát bộ NST ở một số thực vật (Nguồn: SGK Sinh học 12- nâng cao) 1.7 Các quy trình thực hiện tiêu bản Di truyền tạm thời và cố định có trong các tài liệu ngoài SGK Bộ tiêu bản hiển vi cố định cần phải đạt những yêu cầu cao hơn so với các tiêu bản tạm thời mà giáo viên thực hiện trong các tiết dạy thực hành Tiêu bản tạm thời muốn chuyển thành tiêu ... chức dạy học thực hành Di truyền học bậc Trung học Với lý vừa nêu, hướng nghiên cứu Cải tiến quy trình làm tiêu di truyền bậc Trung học Phổ trông” đề xuất thực Các quy trình thực tiêu Di truyền. .. 52 3.2 Xây dựng quy trình cải tiến việc thực tiêu Di truyền trƣờng Trung học Phổ thông 53 3.2.1 Sơ dồ hóa quy trình cải tiến 53 3.2.2 Đánh giá quy trình cải tiến 55... hành Di truyền học bậc Trung học Phổ thông, với số đối tượng cụ thể sau: - Cải tiến 03 quy trình thực tiêu hiển vi tạm thời trình nguyên phân NST SGK Sinh học lớp 10 (nâng cao) SGK Sinh học 12