KHOÁ LUÂN TỐT NGHIỆP - TRƯÒNG ĐẠI HỌC VINH KHOA SINH HỌC BƯỚC ĐẦU NGHIÊN cúu VỀ NAM Mốc KÝ SINH TRÊN MỘT SỐ LOÀI CÔN TRÙNG Ở RÙNG THÔNG THUỘC XÃ XUÂN LĨNH, HUYỆN NGHI XUÂN, TỈNH HÀ TĨNH KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỊỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH: DI TRUYỀN - VI SINH GIÁO VIÊN HƯỚNG DẪN: TH.S NGUYỄN LÊ ÁI VĨNH SINH VIÊN THỰC HIỆN: TRẦN THỊ KIM HUỆ LỚP: 42E1SINH TRẦN THI KIM HUỆ LỜI CẢM ƠN! Để hoàn thành luận văn này, nỗ lực thân, em nhận nhiều giúp đỡ động viên thầy cô, bạn bè Ban quản lý rừng phòng hộ Hồng Lĩnh, tỉnh Hà Tĩnh Em xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới thầy giáo Nguyễn Lê Vĩnh hướng dẫn chu đáo giúp đỡ em suốt thời gian thực luận văn Cảm ơn cán phòng Thí nghiệm Di truyền - Vi sinh, thầy cô giáo Khoa giúp đỡ để em có đủ điều kiện bước vào đường nghiên cứu khoa học hoàn thành luận văn Cảm ơn quan tâm động viên tất bạn sinh viên suốt thời gian qua Trong suốt thời gian nghiên cứu trường tiến hành thu mẫu em nhận giúp đỡ nhiệt tình anh Trần Quốc Sơn, Phó trạm trưởng quản lý rừng phòng hộ Cộng Khánh thuộc xã Xuân Lĩnh, huyện Nghi Xuân Ban quản lý nhân viên rừng phòng hộ Hồng Lĩnh , tỉnh Hà Tĩnh Em xin trân trọng cảm on! Vinh, ngày 25 tháng năm 2006 Sinh viên Trần Thị Kim Huệ MỤC LỤC 1.1 Kết thử nghiệm ảnh hưởng số chủng nấm mốc đến đời sống Phụ lục II: Bài báo khoa học gửi đăng tạp chí chào mừng Kỷ niệm 45 năm ngày thành lập khoa Sinh học- Đại học Vinh 44- 47 ĐẶT VÂN ĐỂ Nấm mốc (Mould) nhóm sinh vật dị dưỡng phân bố rộng môi trường khác nhau, chúng giữ vai trò khác hệ sinh thái, động vật thực vật Đối với hệ sinh thái rừng, nấm mốc đóng vai trò quan trọng nhằm trì cân sinh thái hệ sinh thái thông qua đấu tranh sinh học, chuỗi lưới thức ăn chu trình chuyển hóa vật chất Do đó, hiểu biết nấm mốc hệ sinh thái rừng cần thiết Cây thông có giá trị kinh tế cao nhiều quốc gia mà loài thực vật ưu thế, tạo nên cánh rừng bạt ngàn xanh với nhiều ý nghĩa sinh thái Ớ Việt Nam, thông trồng khắp tỉnh, phủ xanh đồi núi mang lại việc làm, thu nhập cho nhiều người dân Trong năm gần đây, ngược lại với nhũng nỗ lực Chính phủ người dân việc mở rộng phát triển rừng thông sâu róm thông, hàng năm, phá hoại nhiều hecta địa bàn nhiều tỉnh có tỉnh Hà Tĩnh Ớ Hà Tĩnh, địa phương có rừng thông bị trụi hàng loạt, kể đến Nghi Xuân, Hồng Lĩnh, Can Lộc, Hương Sơn, Hương Khê Một giải pháp nhằm ngăn chặn phát triển mạnh mẽ sâu róm thông sử dụng loại nấm mốc có khả tiêu diệt côn trùng Beauveria bassiana, Metarhizium anisopliae dạng chế phẩm sinh học Tuy nhiên, số ròng thông thuộc rừng phòng hộ Hồng Lĩnh, tỉnh Hà Tĩnh, theo ban quản lý rừng có sử dụng dạng chế phẩm sinh học mua từ nơi khác hiệu đem lại thấp Với mong muốn tìm hiểu giới nấm mốc côn trùng nói chung sâu róm thông nói riêng, đồng thời tìm kiếm chủng nấm mốc có mặt điều kiện tự nhiên có khả tiêu diệt côn trùng gây hại, lựa chọn đề tài luận văn tốt nghiệp cử nhân Sinh học là: "Bước đầu nghiên cứu nấm mốc kỷ sinh số loài côn trùng rừng thông thuộc xã Xuân Lĩnh, huyện Nghi Xuân, tỉnh Hà Tĩnh" Muc tiêu đê tài là: Điều tra thành phần nấm mốc số loại côn trùng thu thập từ rừng thông xã Xuân Lĩnh, huyện Nghi Xuân, tính Hà Tĩnh thuộc Ban quản lý rừng phòng hộ Hồng Lĩnh, tỉnh Hà Tĩnh Qua nghiên cứu xác định chủng nấm mốc ký sinh tìm hiểu ảnh hưởng số chủng đời sống vài loài sâu phá hoại trồng Nhiêm vu đề tài là: Điều tra thành phần nấm mốc sống số loại côn trùng thu thập từ số rừng thông xã Xuân Lĩnh, huyện Nghi Xuân thuộc Ban quản lý rừng phòng hộ Hồng Lĩnh, tỉnh Hà Tĩnh Qua đó, xác định chủng nấm mốc ký sinh loại côn trùng Quan sát đặc điểm khuẩn lạc, sinh trưởng môi trường thạch cấu tạo hiển vi chủng phân lập Nghiên cứu đặc điểm số chủng phân lập: gia tăng sinh khối, thay đổi pH môi trường hoạt độ enzim proteinaza Nghiên cứu ảnh hưởng số chủng nấm mốc phân lập sâu xanh hại rau cải KHQẢ LUẬN TổT NGHIỆP - TRAN THỊ KIM HUỆ CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU Sơ Lược VỀ TÌNH HÌNH NGHIÊN cúư NẤM Mốc KÝ SINH TRÊN CÔN TRÙNG: 1.1 Ớ thê giới: Việc nghiên cứu nấm mốc ký sinh côn trùng ứng dụng chế phẩm sinh học từ nấm mốc ký sinh côn trùng nhằm tiêu diệt côn trùng bắt đầu thực I.I Metchnikoff năm 1879 Ông người đặt móng phương pháp nghiên cứu vi sinh vật đấu tranh với côn trùng có hại toàn giới Nấm ông nghiên cứu có tên là: Entomophthora anisopliae Nấm sáu lần đổi tên sau N.Sorokin (1883) đặt tên nấm Metarhium anisopliae Bước sang kỷ XX, nấm mốc ký sinh côn trùng nghiên cứu rộng rãi hơn, nhiều Số lượng loài nấm diệt sâu mô tả theo tài liệu Carie M.I, Ignoffe(1967) đạt tới 530 loài Nấm mốc ký sinh nhiều loại côn trùng khác nhau, nấm ký sinh muỗi nhiều công trình nhiều tác giả: Walker A.J (1938), Miisprat J (1946), Laird M.(1960) cho biết sử dụng nấm Coelomomyces để đấu tranh sinh học với muỗi, lĩnh vực nghiên cứu nấm diệt muỗi Mỹ thực tốt Năm 1916 Lebedeva L.A mô tả nấm Cordiceps Clavulata Eli et ev kí sinh Eulecamium corni Bouch vùng Curska Watsos W.Y et al (1960) thông báo mối liên quan s.pinícola Smell với Matsecoeu macrocicatrices Rich gây bệnh cho thông Canada N.p Cherapanova (1964) nêu 36 loài nấm từ 14 giống Deuteromycetes: Aspergillus, Pénicillium, Chaetomium, Cephalosporium, Torula, Boteyotrichum, Stysanus dạng ký sinh loài ve tích Từ việc tìm loài nấm ký sinh côn trùng tác giả nghiên cứu tới hoạt tính sinh học nấm diệt sâu KHQẢ LUẬN TOT NGHIỆP - TRAN THỊ KIM HUỆ Công trình Carte A Levrat D (1909) Đã thông báo nấm Beauveria bassỉana tiết enzim diastaza Huber (1958) tìm thấy lipaza, amilaza dịch nuôi cấy nấm Cordyceps militaris, Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana Aspergillus flavus Benz G.(1965) cho biết tất nấm ký sinh côn trùng có khả tiết lượng lớn enzim cần thiết để hòa tan cutincun côn trùng Roberts D.w.(1966) mô tả phương pháp thu nhận thử nghiệm độc tố nấm Metarrhizium anisopliae Năm 1969, R L Hamill et al kết tinh độc tố diệt côn trùng nấm B bassiana Ngoài ra, tác giả giới nghiên cứu ảnh hưởng nấm mốc lên mô, quan lên chức sinh lý côn trùng Các công trình mô tả nhiều phá hủy khác nhau: Làm biến đổi thành phần, hình dạng enzim phản ứng huyết tương (Sussman A.s 1957, Rubuov N.A 1959), làm giảm khả sinh sản (Zigaev G.N 1963, Vinokurov G.M 1949), làm giảm trọng lượng phá hủy hô hấp (Sussman A.S.1952, Samsina kova A 1960), phá hủy chức hệ thống nội tiết côn trùng ( Enven A.B 1966) Kondria V S.1966 kết luận độ mắn đẻ bướm Tortricidae hại táo bị giảm lớn sau xử lý nhộng nấm Beauverỉa bassiana Gamper N M et al ( 1968) thấy trứng loài Bọ rùa Chelonia gây hại nhiễm nấm Beauveria bassiana Aspergillus flavUS pha trứng đạt 21- 33% (đối chứng 8%) đạt tỷ lệ chết cao ấu trùng tuổi: với nấm B.bassiana đạt 100%, với nấm Aspergillus đạt 54% ( đối chứng 20%) [4] 1.2 Ở Việt Nam: Cùng với việc nghiên cứu nấm mốc ký sinh côn trùng ứng dụng chúng làm chế phẩm sinh học diệt côn trùng giới Việt Nam, việc nghiên cứu nấm mốc ký sinh thể côn trùng phát triển mạnh từ thập niên cuối kỷ XX Có nhiều tác giả KHQẢ LUẬN TÔT NGHIỆP - TRAN THỊ KÏM HUỆ nghiên cứu nấm mốc ký sinh côn trùng có nhiều ứng dụng sống Tạ Kim Chỉnh tác giả có nhiều đề tài công bố ứng dụng: Năm 1992, Báo cáo đặc điểm hai chủng vi nấm Bb.75 Ma.82 phân lập từ côn trùng ứng dụng thực tiễn Năm 1994, chọn môi trường xốp có nguồn cacbon tinh bột để nuôi cấy nấm Metarhiziwn anisopliae ( Metsch) Sorokin, diệt côn trùng Bên cạnh đó, với đồng nghiệp, Tạ Kim Chỉnh bước đầu nghiên cứu độc tính số chủng vi nấm chống mối hại kiến trúc chống mối hại vải thiều (1995) [5] Trong công trình nghiên cứu (1998) Tạ Kim Chỉnh đồng nghiệp phân lập tuyển chọn vi nấm thuộc chi Paccilomyces có khả gây bệnh cho mối (Termitidae) hại trồng Từ công trình này, tác giả tìm thấy Metarhizium Beauveria, vi nấm thuộc chi Paecilomyces có khả gây bệnh cho loài mối Từ mẫu đất khác nhau, tác giả phân lập 10 chủng vi nấm thuộc chi Paecilomices 10 chủng có khả gây bệnh cho mối chủng M15 tách từ mẫu đất tổ mối có khả gây bệnh cho mối mạnh nhất.[7] Tại hội nghị công nghệ sinh học toàn quốc, Hà Nội 2003, Tạ Kim Chỉnh đồng nghiệp báo cáo đề tài “ Nghiên cứu khả sinh bào tử số chủng vi nấm diệt côn trùng” Từ chủng vi nấm Metarhizium anisopliae Beauveria bassiana phân lập từ phòng thí nghiệm nuôi cấy môi trường khác khoảng thời gian khác Từ tác giả nghiên cứu khả sinh bào tử chủng vi nấm Từ tác giả thử nghiệm khả diệt mối chủng vi nấm thấy sau ngày chủng nấm Metarhizium anisopliae diệt mối với tỷ lệ 100% [9] Vũ Quang Cồn (1986) xuất “Đặc điểm tạo thành hệ thống “vật chủ - ký sinh” loài sâu hại bưởi” [10] Và vào năm 1998, ông KHQẢ LUẬN TổT NGHIỆP - _TRAN THỊ KIM HUỆ báo cáo tổng kết đề án: “Điều tra thực trạng côn trùng vi sinh vật có ích hệ sinh thái đậu tương định hướng sử dụng chúng” [8] Cùng với Tống Kim Thuần, Vũ Quang Cồn điều tra nấm Nomurea riỉeyi gây bệnh cho côn trùng hại đậu tương vùng Bắc Ninh, Hà Tây, Hà Nội định hướng sử dụng chúng Cùng với việc phát huy chế phẩm sinh học diệt sâu tác giả điều tra phát tác nhân sinh học chỗ nghiên cứu phát triển chúng thành chế phẩm sinh học có hiệu lực diệt sâu cao Từ kết nghiên cứu tác giả phát nấm N rileyi gặp nhiều sâu thuộc cánh phấn sâu xanh, sâu đục quả, sâu khoang Qua thử nghiệm khả diệt sâu nấm N rileyi thấy tất chủng nấm N.rìleyi có khả diệt sâu xanh sâu Trong đó, HN4 có hiệu lực diệt hại loại sâu cao có khả sản xuất thành chế phẩm để phòng trò số sâu hại đậu tuơng [8] Từ năm 2001 đến 2003, Phạm Thị Thùy báo cáo nhiều công trình nghiên cứu hội nghị khoa học như: Báo cáo kết nghiên cứu cải tiến sản xuất chế phẩm Metarhizium để phòng trừ bọ hại dừa tỉnh đồng sông Cửu Long Năm 2003, Phạm Thị Thùy Nguyễn Văn Tuất phân lập tuyển chọn chủng nấm Metavhiúum anisopliae có độc tính cao bọ hại dừa tỉnh phía Nam Từ mẫu nấm Metarhiĩium bọ hại dừa thu vùng trồng dừa khác nhau, tác giả phân lập chủng nấm, xác định chủng nấm Ma ký sinh bọ hại dừa phát triển tốt môi trường Sabouraud khoáng chất giảm (lOg pepton 20g glucoza) chủng nấm Ma ký sinh bọ hại dừa Bến Tre chủng tốt để sản xuất chế phẩm Ma [9] Ngoài ra, có nhiều tác giả khác nghiên cứu nấm mốc ký sinh côn trùng Đối với địa phương, việc nghiên cứu, ứng dụng loài nấm mốc để bảo vệ xanh khỏi phá hoại côn trùng cúng tiến hành nhiều nơi Hà Tây, Bắc Ninh, Kiên Giang, Bến Tre KHQẢ LUẬN TổT NGHIỆP - _TRAN THỊ KIM HUỆ Riêng địa bàn tỉnh Hà Tĩnh việc nghiên cứu sử dụng nấm mốc ký sinh côn trùng nhiều hạn chế phá hoại côn trùng xanh tỉnh Hà Tĩnh bị nặng nề nhu tỉnh khác, đặc biệt nạn sâu róm phá hoại thông huyện Huơng Sơn, Huơng Khê, Can Lộc, Hồng Lĩnh, Nghi Xuân CÁC NHÓM NẤM Mốc KÝ SINH TRÊN CÔN TRÙNG: Nấm mốc ký sinh côn trùng có tất lóp: Phycomycetes, Ascomycetes, Basidiomycetes Deuteromycetes Số luợng nấm diệt sâu đuợc mô tả theo tài liệu Carle M.I, Ignoffe(1967) đạt tới 530 loài * Lóp Phycomycetes bao gồm nhiều nhóm nấm ký sinh côn trùng Trong lóp nguời ta biết bộ: Chytriodiales, Blastocladiales Entomophthorales Bao gồm họ chuyên hóa nhu sâu Coelomomycetaceae Entomophthoraceae * Lớp Ascomycetes, có họ có ý nghĩa lớn lý thuyết mà có ý nghĩa thực tiễn Bao gồm nấm thuộc Laboulbeniales, nấm chuyên hóa cao, ngoại ký sinh côn trùng * Lớp Basidiomycetes có giống: Septobasidium patonillard ưredinella couch nấm diệt côn trùng * Lớp Deutromycetes có nấm thuộc Moniliales tiếng gồm có đại diện thuộc giống Beauveria, Metarhizium, Spicaria, Sorospolla nấm có khả gây nhiễm làm chết côn trùng có độc tố [4] ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA NẤM Mốc KÝ SINH TRÊN CÔN TRÙNG: 3.1 Sự phân bô thiên nhiên nấm ký sinh côn trùng: Khi nấm kí sinh côn trùng rơi vào nơi đó, chúng có khả trở thành thành viên sinh quần nơi tự sinh sôi nảy nở để tăng lên Là vật ký sinh chuyên hóa rộng nấm chiếm phạm vi lớn côn trùng vật chủ cho phép chúng tồn tự nhiên thiếu KHQẢ LUẬN TOT NGHIỆP - TRAN THỊ KIM HUỆ vật chủ Các nấm ký sinh côn trùng diệt côn trùng nhiều cách khác Các nấm ký sinh côn trùng tồn môi trường không thuận lợi dạng túi bào tử (họ Coelomomycetaceae), bào tử nghỉ, hạch nấm thể hay thể rắn sợi nấm dinh dưỡng kết lại kiểu giả hạch nấm Các nấm ký sinh côn trùng nuôi cấy môi trường dinh dưỡng chế tạo dạng chế phẩm sinh học Các nấm ký sinh côn trùng có khả bắn bào tử tới khoảng cách gấp hàng ngàn lần lớn kích thước Các nấm lan truyền nhờ dòng không khí, nước mưa côn trùng.[4] 3.2 Hoạt tính sinh học nấm mốc ký sinh côn trùng: Các nấm ký sinh côn trùng ý nhiều sinh vật sinh sản enzim, độc tố chất hoạt tính sinh học khác.[4] Các loài nấm ký sinh côn trùng có khả tiết loại enzim gây bệnh cho côn trùng emzim lipaza, glucogenaza, tripxin, ureaza, proteinaza, aspatainaza, amilaza, kitinaza Tác dụng chuyên hóa quan hệ với côn trùng không độc hay độc với động vật máu nóng cho phép sử dụng độc tố nấm diệt sâu dùng làm chất diệt sâu Ngoài việc tiết loại enzim trình sống ký sinh côn trùng, loài nấm mốc tiết độc tố tiêu diệt côn trùng Ngay từ năm 1949, Dresnen E thông báo chất diệt côn trùng nấm Beauveria bassiana chất Beauverin Codaira.Y (1961) tách độc tố nấm Metarhizium anisopliae gọi Destruxin A DesstmxinB Trong tương lai, việc sử dụng độc tố nấm làm chất diệt sâu việc thu nhận từ nấm sản phẩm độc tố tinh khiết có ý nghĩa lớn Ngoài ra, trình sống thể côn trùng loài nấm mốc có khả tạo kháng sinh KHQẢ LUẬN TổT NGHIỆP - _TRAN THỊ KIM HUỆ Cunningham K.G.at et (1951) thấy mô côn trùng bị nhiễm nấm Cordyceps militaris bền vững với tác dụng vi sinh vật gây thối rữa thấy nấm tạo thành kháng sinh tên gọi Cordisepine TẨM QUAN TRỌNG CỦA NẤM Mốc KÝ SINH TRÊN CÔN TRÙNG: KHQẢ LUẬN TổT NGHIỆP - _TRAN THỊ KIM HUỆ chủng NHI NT7 (32 đơn vị) thấp chủng NT6 (8 đơn vị) (Bảng 5, Biểu đồ 3) Bảng 5: Kết xác định hoạt độ enzim proteinaza chủng nấm T T Tên chủng Hoạt độ enzỉm proteỉnaza NHI 32 đon vị NT3 64 đơn vị NT6 đơn vị NT7 32 đơn vị 64 70 60 50 '> 40 I 30 20 10 NHI NT3 NT6 NT7 Chủng nấm Biểu đồ 3: Hoạt độ enzim proteinaza chủng nấm Đối với loài nấm mốc ký sinh côn trùng nguồn thức ăn chúng protein vật chủ Vì vậy, enzim proteinaza có ý nghĩa chúng đé phân huỷ protein vật chủ Kết trình bày Biểu đồ cho thấy khả phân huỷ protein chủng NT3 mạnh tiếp đến chủng NHI NT7 Nếu lựa chọn chủng nấm mốc để tiêu diệt côn trùng chủng NT3, NHI NT7 có tác dụng tốt so với chủng NT6 KHQẢ LUẬN TổT NGHIỆP - _TRAN THỊ KIM HUỆ 6.KẾT QUẢ THỬ NGHIỆM ẢNH HƯỞNG CỦA MỘT số CHỦNG NẤM Mốc ĐẾN ĐỜI SỐNG CỦA LOÀI SÂU XANH HẠI RAU CẢI: Sau tiến hành nghiên cứu số đặc điểm sinh học chủng nấm môi trường dịch thể, tiếp tục thử nghiệm ảnh hưởng chủng nấm lên đời sống loài sâu xanh hại rau cải Kết thí nghiệm trình bày Bảng Bảng : Kết thử nghiệm ảnh hưởng số chủng nấm mốc đến đời sống loài sâu xanh hại rau cải Chỉ tiêu Thòi gian theo dõi Lô sâu đồi chứng Số lượng sâu Lô nghiên cứu (lô có nhiễm nấm mốc) Chủng Chủng Chủn Chủng g NHI NT3 NT7 NT6 30 30 30 30 30 Sau -5 ngày 4 Sau 6-10 ngày 0 0 Saul 1-15 ngày 0 0 Sau 1-5 ngày 0 0 Sau 6-10 ngày 0 27 21 26 thử nghiệm Số lượng sâu chết nấm Số lượng sâu chết nhiễm 28 Sau 11-15 ngày Sau 1-5 ngày 0 0 Số lương sâu Sau 6-10 ngày 0 Saul1-15 ngày 26 96,55 0 hóa bướm 80,7 100 nấm Hiệu suất tiêu diệt sâu xanh (%) - - - 100 - - Trong thời gian từ đến ngày đầu có tưọng có số cá thể sâu bị chết ỏ' tất lô nghiên cứu Ớ lô đối chứng có tượng bị chết Do đó, kết luận cá thể bị chết tác động việc chuẩn bị thí nghiệm mà tác động nấm mốc Kết tính tổng số lại lô nghiên cứu KHQẢ LUẬN TổT NGHIỆP - _TRAN THỊ KIM HUỆ - Sau 15 ngày thử nghiệm, kết cho thấy lô đối chứng có 26/26 (100%) cá thể sâu hoá bướm Điều chứng tỏ, cá thể sâu bị chết lô nghiên cứu tác động chủng nấm mốc nhiễm vào - Ớ lô nghiên cứu, chủng nấm bắt đầu gây chết sâu xanh hại cải từ ngày thứ số lượng sâu chết đồng loạt tập trung chủ yếu vào ngày thứ thứ - Nhìn chung, chủng nấm mốc thử nghiệm có hiệu suất tiêu diệt sâu xanh hại cải cao Trong đó, hiệu suất diệt sâu xanh hại cải chủng NT3 NT7 cao nhất, đạt 100%, thứ đến chủng NHI với hiệu suất đạt 96,55% thấp chủng NT6 với hiệu suất 80,76% NHẬN XÉT CHUNG VỂ CÁC CHỦNG NẤM Mốc ĐƯỢC NGHIÊN CỨU: Qua kết nghiên cứu số đặc điểm sinh học chủng nấm mốc: NHI, NT3, NT6, NT7 ảnh hưởng chúng đến đời sống sâu xanh hại rau cải, có số nhận xét sau (Bảng 7): Bảng 7: Tổng hợp số kết nghiên cứu chủng nấm mốc T T Tên Sinh khôi tươi Hoạt độ Hiệu suất tiêu g NHI sau 14 ngày proteinaza diệt sâu xanh 6,0 (g) 32 (đơn vị) 96,55 (%) NT3 4,0 (g) 64 (đơn vị) 100 (%) NT6 2,5 (g) (đon vị) 80,76 (%) NT7 2,0 (g) 32 (đơn vị) 100 (%) - Chủng NT6 có hoạt độ enzim proteinaza thấp (8 đơn vị) chủng có hiệu suất diệt sâu xanh thấp nhất(80,76%) - Chủng NHI, NT3 NT7 có hoạt độ enzim proteinaza cao (từ 32 đến 64 đơn vị) hiệu suất diệt sâu xanh cao (96,55% đến 100%) - Trong trường hợp lựa chọn chủng nấm mốc để làm chế phẩm sinh học diệt sâu xanh hại cải chủng NT3 tối ưu nhờ hiệu suất tiêu diệt sâu cao (100%), hoạt độ enzim proteinaza cao (64 đơn vị) khả nhân sinh khối tương đối cao (4g/100 ml/14 ngày) KHQẢ LUẬN TổT NGHIỆP - _TRAN THỊ KIM HUỆ 3 KẾT LUẬN VÀ ĐỂ NGHỊ KẾT LUẬN: Đã phân lập chủng nấm mốc ( NT1, NT2, NT3, NT5, NT6, NT7, NT8, NT9) ký sinh sâu róm thông phân lập chủng nấm mốc (NHI, NH3, NH5, NHÓ, NH8) từ xác bướm chết nấm Các chủng mô tả đặc điểm hình thái bảo quản Phòng thí nghiệm Vi sinh - Khoa Sinh học - Trường Đại học Vinh Các chủng nấm mốc: NHI, NT3, NT6, NT7 nghiên cứu số đặc điểm: - Trong môi trường lỏng Sabouraud- Dextro nhiệt độ thường, chủng NHI NT3 có khả phát triển mạnh (tạo 6,0g 4,0g sinh khối tươi/lOOml môi trường/14 ngày nuôi cấy) so với chủng NT6 NT7 (tạo 2,5 2,0g sinh khối tươi/lOOml môi trường/14 ngày nuôi cấy) - Chủng NHI NT3 làm giảm pH môi trường nuôi cấy từ pH = 5,3 xuống pH = 3,3 pH = 3,4 sau 14 ngày nuôi, chứng tỏ chúng có khả tiết axit môi trường - Cả chủng thể hoạt tính enzim proteinaza, chủng NT3 có hoạt độ enzim proteinaza cao (64 đơn vị), thứ đến chủng NHI NT7 (32 đơn vị), thấp chủng NT6 (8 đơn vị) - Cả bốn chủng nấm NHI, NT3, NT6, NT7 có khả tiêu diệt sâu xanh hại rau cải Trong đó, hiệu suất tiêu diệt chủng NT3, NT7 mạnh (100%), thứ đến chủng NHI (96,55%) thấp chủng NT6 (80,77%) - Kết nghiên cứu cho thấy mối quan hệ hiệu suất diệt sâu xanh hại cải với hoạt độ enzim proteinaza chủng nấm mốc Cụ thể hiệu suất diệt chủng NT6 thấp (80,77%) có hoạt độ enzim proteinaza thấp (8 đơn vị); chủng NHI, NT3 NT7 có hiệu suất diệt cao (từ 96,55% đến 100%) có hoạt độ enzim proteinaza cao (từ 32 đến 64 đơn vị) KHQẢ LUẬN TổT NGHIỆP - _TRAN THỊ KIM HUỆ ĐỂ NGHỊ: Do hạn chế khách quan trình thực đề tài nên chưa thể thử nghiệm hết chủng nấm mốc đặc biệt thử nghiệm đối tượng sâu róm thông Do đó, chủng phân lập cần tiếp tục phân loại thử nghiệm đối tượng sâu róm thông theo hướng sản xuất chế phẩm diệt sâu róm thông thử nghiệm số đối tượng khác nhằm xác định ảnh hưởng chúng đến môi trường sinh thái KHQẢ LUẬN TổT NGHIỆP - _TRAN THỊ KIM HUỆ TÀI LIỆU THAM KHẢO Lê Văn Khoa cộng (2001)- Phương pháp phân tích đất, nước, phân bón trồng NXB Giáo dục Egrop X.N 1983 Thực tập vi sinh vật học NXB Đại học Trang học chuyên nghiệp Người dịch: Nguyễn Lân Dũng Nguyễn Lân Dũng cộng sự, 1978 Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật học Tập III NXB Khoa học Kỷ thuật, Hà Nội Nguyễn Ngọc Tú, Nguyễn Cửu Thị Hương Giang Bảo vệ trồng chế phẩm từ vi nấm NXBNông nghiệp TP Hồ Chí Minh, 1997 Trang tâm khoa học tự nhiên công nghệ quốc gia viện công nghệ sinh học Kỷ yếu Annual Report', 1996 NXB Khoa học Kỷ thuật, Hà Nội, 1997 Trang tâm khoa học tự nhiên công nghệ quốc gia viện công nghệ sinh học Kỷ yếu Annual Report', 1997 NXB Khoa học Kỷ thuật, Hà Nội, 1998 Trang tâm khoa học tự nhiên công nghệ quốc gia viện công nghệ sinh học Kỷ yếu Annual Report, 1998 NXB Khoa học Kỷ thuật, Hà Nội, 1999 Trang tâm khoa học tự nhiên công nghệ quốc gia viện công nghệ sinh học Kỷ yếu Annual Report, 1999 NXB Khoa học Kỷ thuật, Hà Nội, 2000 Bộ Khoa học Công nghệ Hội đồng khoa học tự nhiên nghành khoa học sống Những vấn đề nghiên cứu Khoa học sống NXB Khoa học Kỷ thuật Hà Nội, 2003 10 Bộ Khoa học Công nghệ Hội đồng khoa học tự nhiên nghành khoa học sống Những vấn đề nghiên cứu Khoa học sống NXB Khoa học Kỷ thuật Hà Nội, 2005 11 G M Wang, J.D.Goeschl and D Tuset, 1993 Abstracts of International yew Resources ference; 12-13,1993 Berkeley, Caliomia USA p 36 12 Gary A Strobel, A Styerl and G.M Vankecijk, 1992 Plant science, vol84, 1992, pps 65-74 KHQẢ LUẬN TOT NGHIỆP - TRAN THỊ KIM HUỆ 13 Chinh T.K., Kham N D., (1994) Preliminary research results on the ability of the termite esocrin gland secriten resisting to pathogenic microogaisrn Proced of the NC of Viet Nam Vol (2): 93-96 14 GS TS Bùi Xuân Đồng Nguyên lý phòng chống nấm mốc Myctoxin NXB Khoa học Kỷ thuật, Hà Nội, 2004 15 Nguyễn Lân Dũng cộng sự, 1976 Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật học Tập II NXB Khoa học Kỷ thuật, Hà Nội 16 Nguyễn Lân Dũng cộng sự, 1972 Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật học Tập I NXB Khoa học Kỷ thuật, Hà Nội 17 Bùi Xuân Đồng, Nguyễn Hữu Văn, 2000 Vi nấm dùng công nghệ sinh học NXB Khoa học Kỷ thuật, Hà Nội 18 Ronald M Atlas Handbook of Media for Envionmental Microbilogy, University of Luoisville CRC press, 1995 PHẦN PHỤ LỤC PHỤ LỤC I: MỘT số HÌNH ẢNH TRONG QUÁ TRÌNH THựC HIỆN ĐỂ TÀI Ánh 1: Chủng NT6 phân lập Anh 2: Chủng NT7 phân lập Anh 3: Chủng NHỈ phân lập Anh 4: Chủng NT3 phân lập Anh 5: Sâu xanh hại rau cải hóa bướm Ánh 6: Các lô thử nghiệm khả nhiễm nấm sâu xanh hại rau cải KHQẢ LUẬN TổT NGHIỆP - _TRAN THỊ KIM HUỆ PHỤ LỤC II: BÀI BÁO KHOA HỌC GỦI ĐẢNG TẠP CHÍ CHÀO MÙNG KỶ NIỆM 45 NĂM NGÀY THÀNH LẬP KHOA SINH HỌC- ĐẠI HỌC VINH PHÂN LẬP VÀ NGHIÊN cứu MỘT số CHỦNG NẤM Mốc CÓ KHẢ NĂNG DIỆT SÂU XANH HẠI RAU CẢI NGUYỄN LÊ ÁI VĨNH TRẦN THỊ KIM HUỆ ĐẶT VÂN ĐỂ Việc nghiên cứu nấm mốc kí sinh côn trùng ứng dụng chế phẩm chúng nhằm tiêu diệt sâu bệnh, bảo vệ trồng tiến hành nhiều nước giới Cho đến nay, giới biết đến 530 loài nấm mốc có khả kí sinh nhiều loài côn trùng khác nhau, Việt Nam, nhiều nhà khoa học đầu tư nghiên cứu theo hướng tìm nhiều chủng nấm mốc thuộc chi Beauveria, Metarhizium, Paecilomyces có khả tiêu diệt sâu xanh, sâu róm thông, sâu lá, mối, bọ dừa số loài côn trùng khác [1,2,5] Đối với khu vực miền Trung, nghiên cứu ứng dụng theo hướng hạn chế Trong thực tế, số địa phương Nghệ An Hà Tĩnh sử dụng chế phẩm nấm mốc để diệt trừ sâu róm hại thông đạt hiệu chưa cao Do đó, việc nghiên cứu tìm kiếm loài thích nghi tốt điều kiện tự nhiên địa phương có hoạt lực diệt côn trùng cao có ý nghĩa Bài báo nhằm trình bày số kết nghiên cứu mà bước đầu đạt NGUYÊN LIỆU VÀ PHUONG PHÁP NGHIÊN cúu Nguyên liệu Sâu róm thông xác bướm thu rừng thông thuộc xã Xuân Lĩnh, huyện Nghi Xuân, tỉnh Hà Tĩnh vào tháng 10 năm 2005 Sâu róm thông cá thể trưởng thành sống, tình trạng bình thường Xác bướm bị nấm phát triển bám thành lớp trắng, khô xung quanh thể Phương pháp nghiên cứu 2.1 Phương pháp phán lập nấm mốc - Đối với xác bướm: Do nấm tạo thành mảng xung quanh xác bướm nên cần dùng que cấy gạt vào dĩa petri chứa môi trường thạch Czapek-Dox có bổ sung kháng sinh Tetraxilin (0,5g/llít môi trường) trang bề mặt đĩa [5] Đối với sâu róm thông: Dùng panh gắp rửa cồn 70° khoảng 30 giây Sau đó, sâu nghiền nát ống nghiệm vô trùng chứa nước cất vô trùng; hút 0,5ml chất dịch vào đĩa petri chứa môi trường trang bề mặt đĩa Nấm mốc nuôi tủ ấm 28°c ngày, mô tả đặc điểm khuẩn lạc, soi kính hiển vi tiếp tục làm chủng nấm phương pháp cấy ria - - - 2.2 Phương pháp nghiên cứu sô đặc điểm sinh học chủng nấm mốc Sự sinh trưởng nấm mốc xác định qua trọng lượng sinh khối tươi tạo thành sau 14 ngày nuôi môi trường lỏng Sabouraud-Dextro (SD) [6] theo phương pháp nuôi cấy bề mặt nhiệt độ phòng thí nghiệm Cân 0,lg sinh khối chủng, cho vào bình tam giác dung tích 500ml có chứa lOOml môi trường Bình đậy nút đặt bóng tối Nấm mốc phát triển mặt thoáng môi trường Sau 14 ngày nuôi, sinh khối thu cách lọc dịch nuôi cấy giấy lọc Whatmann Phần sinh khối phía giấy lọc tiếp độ 30°c tục cĩược đặt tủ ấm nhiệt thời gian ngày cĩể làm bay nước sợi nấm không bị khô Cân trọng lượng sinh khối cân điện tử pH dịch nuôi cấy đo trực tiếp máy đo pH - Hoạt độ enzim a-amylaza proteinaza ngoại hào phân tích từ phần dịch thể lọc Hoạt độ oc-amylaza xác định theo phương pháp Wolhgemuth hoạt độ proteinaza xác định theo phương pháp Gross Fuld [4] - 2.3 Phương pháp thử nghiệm khả tiêu diệt sâu xanh hại rau cải Thu thập cá thể sâu xanh hại rau cải: Sâu xanh bắt rau cải số hộ gia đình thị xã Hà Tĩnh Những cá thể lựa chọn cho thử nghiệm có chiều dài từ 1,5 - cm, không bị thương, tình trang sức khoẻ bình thường - Chuẩn bị dịch huyền phù hào tử nấm mốc: Các chủng nấm mốc nuôi môi trường thạch Czapek-Dox ngày nhiệt độ phòng thí nghiệm Sau đó, thu cân lấy lg nấm mốc gồm sợi nấm bào tử, hoà vào OOml nước cất vô trùng lắc để bào tử phân tán nước Tiến hành: Thí nghiệm gồm có lô đối chứng (sâu xanh không bị nhiễm nấm) lô nghiên cứu (mỗi lô bị nhiễm chủng nấm) Mỗi lô thí nghiệm gồm có 30 sâu xanh nuôi chậu nhựa có đường kính 30cm, miệng chậu bọc vải lưới Thức ăn cho sâu xanh cải tươi rửa sạch, bổ sung ngày lần thu dọn cũ Các chậu đặt nơi có mái che + Nhiễm nấm: Dịch huyền phù bào tử chủng nấm rót vào bình nhựa tưới loại nhỏ phun dạng sương mù trực tiếp lên chậu nuôi sâu vừa đủ để ướt bề mặt chậu ướt sâu + Thu thập số liệu: Quan sát biểu sâu ghi số liệu sau ngày, 10 ngày 15 ngày KẾT QUA NGHIÊN cứu VÀ THẢO LUẬN I Đặc điểm hình thái số chủng nấm mốc phân lập Từ mẫu sâu róm thông xác bướm, phân lập số chủng nấm mốc, có chủng NHI, NT3, NT6 NT7 Các chủng bảo quản Phòng thí nghiệm Vi sinh - Khoa Sinh học - Đại học Vinh Chủng NHI (phân lập từ xác bướm): Khuẩn lạc màu trắng suốt trình phát triển, sau xuất giọt tiết nhỏ màu đỏ Hệ sợi khí sinh chặt Đường kính khuẩn lạc sau ngày: 0,8-1 cm Giá bào tử trần ngắn; bào tử trần hình cầu, trơn, đường kính 1,7 - 2,6 pm, đính đỉnh giá tạo thành cụm Chủng NT3 (phân lập từ sâu róm thông): Khuẩn lạc màu trắng suốt trình phát triển, sau xuất giọt tiết nhỏ suốt Hệ sợi khí sinh chặt dạng mép khuẩn lạc Giá bào tử trần ngắn, đính đơn độc dọc theo sợi nấm Đường kính khuẩn lạc sau ngày: 1,5-2 cm Bào tử trần hình elip, trơn, kích thước (2 - 3)xl ,7 pm Chủng NT6 (phân lập từ sâu róm thông): Khuẩn lạc màu trắng, sau xuất màu lục xám vàng bào tử nhân lan dần mép khuẩn lạc Đường kính khuẩn lạc sau ngày: 2-3 cm Giá bào tử trần mọc sát sợi nấm; bào tử trần hình trụ có đáy hẹp lại, đường kính 1,7 pm Chủng NT7 (phân lập từ sâu róm thông): Khuẩn lạc màu trắng, sau xuất màu xanh lục mép khuẩn lạc, nhân khuẩn lạc tạo thành khối màu trắng Đường kính khuẩn lạc sau ngày: 3-4 cm Giá bào tử trần mọc sát sợi nấm; bào tử trần hình trứng, kích thước (2 - 2,5)xl,7 pm Từ đặc điểm hình thái mô tả cho thấy: chủng NHI NT3 có đặc điểm giống với chi Beauveria (Vuillemin, 1912) chủng NT6, NT7 có đặc điểm giống với chi Metarhizium (Sorokin, 1883) [3,5] II Một sô đặc điểm sinh học chủng nấm mốc Kết nghiên cứu gia tăng sinh khối, thay đổi pH dịch nuôi cấy hoạt độ enzim a-amylaza proteinaza chủng nấm mốc đuợc trình bày Bảng - Hai chủng NH1 NT3 đạt sinh khối cao (tương ứng 6,0g 4,0g sinh khối tươi sau 14 ngày nuôi cấy lOOml môi trường lỏng), hai chủng lại (NT6, NT7) đạt sinh khối thấp (2,5g 2,0g) - Khi sinh khối hai chủng NHI NT3 tăng cao hoạt động trao đổi chất chúng làm giảm mạnh pH môi trường (từ pH 5,3 giảm xuống 3,3 3,4) Điều chứng tỏ hai chủng tiết mạnh axit môi trường Hai chủng lại có sinh khối thấp không thấy làm thay đổi pH môi trường - Cả chủng có hoạt tính enzim a-amylaza proteinaza Hoạt độ enzim a- amylaza chủng NT3 cao (64 đơn vị) hoạt độ enzim proteinaza chủng NT7 cao (32 đơn vị) Bảng Kết nghiên cứu số đặc điểm sinh học chủng nấm mốc Ký hiệ u chủng TT NH I NT 3NT 6NT Sinh khối tươi (trong lOOml MT lỏng) Sau 14 Ban đầu ngày 0,1 (g) 6,0 (g) 0,1 (g) 4,0 (g) Ỉ5 (g) oa 2*0 (g) oa (g) PH môi trường dịch nuôi cấy Ban đầu 5,3 5,3 5,3 5,3 Sau 14 ngày 3,3 3,4 5,3 5,3 Hoạt độ enzim ngoại bào (sau 14 ngày) a-amilaza Ghi chú: - Proteinaza 32 (đv) 64 (đv) (đv) 32 (đv) 30 16 (đv) 16 (đv) (đv) 32 (đv) 30°c, Một đơn vị hoạt độ enzim a-amylaza lượng ezim mà sau phút có ion clo phân giải mg tinh bột đến sản phẩm không tạo màu với dung dịch iốt Một đơn vị hoạt độ enzim proteinaza lượng enzim ml dung dịch nghiên cứu có khả phân giải mg casein 38°c 30 phút III Khả tiêu diệt sâu xanh hại rau cải chủng nấm mốc 2): Qua kết thí nghiệm nhiễm nấm mốc lên sâu xanh hại rau cải cho thấy (Bảng - Trong số 30 sâu lô thí nghiệm có tượng bị chết thời gian từ 1-5 ngày Những thể bị chết bệnh lý di chuyển chuẩn bị thí nghiệm, nấm mốc Do đó, kết thí nghiệm tính tổng số lại: Lổ đối chứng - 26 con, Lổ nhiễm chủng NHI - 29 con, Lô nhiễm chủng NT3 - 27 con, Lô nhiễm chủng NT6 - 26 Lô nhiễm chủng NT7 - 26 - Lô đối chứng có 26/26 cá thể hoá bướm (100%) sau 11-15 ngày Kết chứng tỏ sâu xanh lô nghiên cứu bị chết nán mốc lây nhiễm vào nấm mốc có sẩn tự nhiên - Chủng nấm mốc NT3 NT7 tiêu diệt 27/27 26/26 cá thể (100% sâu xanh bị tiêu diệt); chủng NHI tiêu diệt 28/29 cá thể (96,55%); chủng NT6 tiêu diệt 21/26 cá thể (80,77%) Những sống sót hoá bướm sau 11-15 ngày - Cả chủng nấm mốc có khả tiêu diệt sâu xanh sau 6-10 ngày lây nhiễm, số lượng sâu bị chết chủ yếu vào ngày thứ đêh thứ 10 Bảng Kết theo dõi ảnh hưởng số chủng nấm mốc đến sâu xanh hại rau Chỉ tiêu Số sâu thử nghiêm Số sâu chết nấm Số sâu chết nấm Số sâu hoá bướm Thời gian theo dõi Sau - ngày Sau - ngày Sau 1 - ngày Sau - ngày Sau - ngày Sau 1 - ngày Sau - ngày Sau - ngày Sau 1 - ngày Lô sâu đối chứng 30 0 0 0 26 Chủng NHI 30 Lô sâu có nhiễm nấm mốc Chủn Chủng g NT3 NT6 30 30 Chủn g NT7 30 0 28 0 27 0 21 0 26 - - - - 0 0 0 0 Hiệu suất diệt sâu xanh chủng NT6 thấp có hoạt độ enzim ot-amylaza proteinaza thấp Những tượng gây chết nấm mốc quan sát là: Sau ngày, nấm mốc phát triển thành đốm nhỏ thể sâu Đến ngày thứ có nhiều bị nấm mốc bao phủ toàn thân di chuyển Đến ngày thứ ngừng di chuyển bắt đầu bị chết Chủng NHI NT3 phát triển bao phủ thành lớp trắng hoàn toàn Sâu bị chết (trắngi) nhiêm chung nấm ỳVT thể sâu (Ánh 1) Trên thể sâu nhiễm chủng NT3 xuất Anh Kết thử nghiệm khả diệt sâu xanh hại cải chủng nấm NT3 giọt tiết nhỏ, Chủng NT6 tạo thành màu lục xám vàng; chủng NT7 tạo thành màu xanh lục KẾT LUẬN Các chủng nấm mốc NHI, NT3, NT6 NT7 phân lập từ sâu róm thông xác bướm nhân sinh khối phương pháp nuôi cấy bề mặt môi trường lỏng Sabouraud-Dextro nhiệt độ thường; hai chủng NHI NT3 có khả phát triển mạnh (tạo 6,0g 4,0g sinh khối tươi sau 14 ngày nuôi cấy lOOml môi trường lỏng) thể khả tiết axit môi trường nuôi cấy (pH dịch nuôi cấy giảm từ 5,3 xuống 3,3 3,4) Cả chủng thể hoạt tính enzim a-amylaza proteinaza, chủng NT6 yếu nhất; hoạt độ enzim a-amylaza chủng NT3 cao (64 đơn vị) hoạt độ enzim proteinaza chủng NT7 cao (32 đơn vị) Cả chủng nấm mốc có khả tiêu diệt sâu xanh hại rau cải Trong đó, hiệu suất tiêu diệt chủng N'13 NT7 mạnh (100%), thứ đến chủng NHI (96,55%) thấp chủng NT6 (80,77%) TÀI LIỆU THAM KHẢO Tạ Kim Chỉnh, Hà Thị Quyến, Hoa Thị Minh Tú, 2000 Phân lập tuyển chọn vi nấm thuộc chi Paecilomyces có khả gây bệnh cho mối (Termitidae) hại trồng Kỷ yếu khoa học, Viện công nghệ Sinh học, Trung tâm Khoa học Tự nhiên Công nghệ Quốc gia NXB Khoa học Kỹ thuật, tr.217-225 Tạ Kim Chỉnh, Hồ Thị Loan, Nguyễn Thị Hà Chi, 2005 Một sô' đặc điểm sinh hoá hai chủng nấm Metarhizium anisopliae Ma.82 Beauveria basiana Bb.75KC Những vấn đề nghiên cứu khoa học sống NXB Khoa học Kỹ thuật, Ha Nội tr.433-436 Nguyễn Lân Dũng cộng sự, 1976 Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật học Tập n NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Nguyễn Lân Dũng cộng sự, 1978 Một số phương pháp nghiên cứu vi sinh vật học Tập III NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Bùi Xuân Đổng, Nguyễn Huy Văn, 2000 Vi nấm dùng công nghệ sinh học NXB Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội Ronald M Atlas, Handbook of Media for Environmental Microbilogy, University of Louisville CRC press, 1995 SUMMARY ISOLATING AND RESEARCHING SOME MOULD STRAINS THAT CAN KILL MUSTARD BOLLWORMS NGUYEN LE AI V1NH TRAN TH1 KIM HUE This article aims to introduce some morphological characteristics of the mould strains named NHI, NT3, NT6 and NT7 which were isolated from pine lappets and dead nigger bodies They also were investigated about the growth in the liquid Sabouraud-Dextro medium, pH changes of cultivating medium and a-amylase and proteinase activities The experiments showed that these four strains can kill mustard bollworms The efficiencies of killing mustard bollworms of the strain NT3 and NT7 were highest (100%), the second is the strain NH1 (96,55%) and the lowest is the strain NT6 (80,77%) [...]... tại xã Xuân Lĩnh, huyện Nghi Xuân, thuộc Ban quản lý rừng phòng hộ Hồng Lĩnh, tỉnh Hà Tĩnh 2 THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM NGHI N CÚƯ: 2.1.Thời gian nghi n cứu: * Thu thập số liệu từ tháng 9/2005 đến tháng 3/2006 * Xử lý số liệu và hoàn thành luận văn từ tháng 4-5/2006 2.2.Địa điểm nghi n cứu: Mẫu côn trùng được thu ở rừng thông tại xã Xuân Lĩnh, huyện Nghi Xuân, thuộc Ban quản lý rừng phòng hộ Hồng Lĩnh, tỉnh. .. sinh trưởng và năng suất của cây thông Đặc biệt, ở Việt Nam chúng ta sâu róm gây hại lón và lan rộng trên các lâm trường trồng thông như Quảng Bình, Nghệ An, Hà Tĩnh 4.2 Những bệnh lý ở côn trùng bị nấm mốc ký sinh tiêu diệt: Trước thực trạng côn trùng phá hại cây xanh, nhiều nhà khoa học trên thế giới đã nghi n cứu tìm ra biện pháp diệt côn trùng Qua nhiều nghi n cứu của 1 1 nhiều nhà khoa học trên. .. NT6 với hiệu suất 80,76% 7 NHẬN XÉT CHUNG VỂ CÁC CHỦNG NẤM Mốc ĐƯỢC NGHI N CỨU: Qua kết quả nghi n cứu một số đặc điểm sinh học của các chủng nấm mốc: NHI, NT3, NT6, NT7 và ảnh hưởng của chúng đến đời sống của sâu xanh hại rau cải, chúng tôi có một số nhận xét sau (Bảng 7): Bảng 7: Tổng hợp một số kết quả nghi n cứu của 4 chủng nấm mốc T T Tên Sinh khôi tươi Hoạt độ Hiệu suất tiêu chủn g NHI sau 14... nghi n cứu một số đặc điểm sinh học của các chủng nấm trong môi trường dịch thể, chúng tôi tiếp tục thử nghi m ảnh hưởng của các chủng nấm lên đời sống của loài sâu xanh hại rau cải Kết quả thí nghi m được trình bày ở Bảng 6 Bảng 6 : Kết quả thử nghi m ảnh hưởng của một số chủng nấm mốc đến đời sống của loài sâu xanh hại rau cải Chỉ tiêu Thòi gian theo dõi Lô sâu đồi chứng Số lượng sâu Lô nghi n cứu (lô... Lĩnh, tỉnh Hà Tĩnh 3 PHƯỜNG PHÁP NGHI N CỨU: 3.1.Phương pháp điều tra thực địa và thu mẫu côn trùng: * Thông qua việc trao đổi với Ban quản lý rừng phòng hộ Hồng Lĩnh để tìm hiểu về tình hình chung của rừng phòng hộ Hồng Lĩnh và lựa chọn địa điểm thu mẫu * Địa điểm thu mẫu: địa điểm được lựa chọn là một cánh rừng thuộc xã Xuân Lĩnh, huyện Nghi Xuân, đây là cánh rừng thông đang bị sâu róm thông phá hoại... từ nấm B.bassiana [3] Ngoài ra, người ta đã sản xuất ra các chế phẩm sinh học từ nấm Metarhizium anisopliae, nấm Nbmureariley và ngày càng thấy rõ được hiệu quả cao của chế phẩm sinh học 1 5 KHQẢ LUẬN TổT NGHI P - _TRAN THỊ KIM HUỆ CHƯƠNG II: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHI N cứu 1 ĐỐI TƯỢNG NGHI N cúư: Là những loài nấm mốc (Mould) ký sinh trên một số loài côn trùng thu thập được 0 rừng thông. .. tượng côn trùng bị nấm mốc ký sinh trên nó tiêu diệt Nó ảnh hưởng lên mô, lên các co quan và lên chức năng sinh lý của côn trùng Từ những hiện tượng nấm phá huỷ chức năng sinh lý của côn trùng, các nhà nghi n cứu đã cho biết độc tố của nấm đã làm đình chỉ sự dinh dưỡng của côn trùng, gây hiện tượng tê liệt làm giảm độ mắn đẻ, phá huỷ quá trình hô hấp, đàn áp cơ học sự tuần hoàn máu, phát triển và sinh. .. được: - Mẫu số 1: Xác bướm chết khô được phủ kín bên ngoài bởi một lớp nấm màu trắng vôi bột - Mầu số2 : Xác bướm chết khô, xuất hiện nấm trắng vôi bột ở một số bộ phận cơ thể - Mẫu số 3: Xác bướm chế khô, có nấm màu đen xuất hện ở một số bộ phận cơ thể - Mẫu số4 : Xác bướm chết khô, có xuất hiện nấm màu lục vàng ở một số bộ phận cơ thể KHQẢ LUẬN TÔT NGHI P - TRAN THỊ KÏM HUỆ - Mẫu số 5: Xác bướm... phá hoại thông thuộc nhiều địa bàn của cả tỉnh Hà Tĩnh và tỉnh Nghệ An, Rừng phòng hộ Hồng Lĩnh cũng nằm trong tình trạng đó Rừng phòng hộ Hồng Lĩnh chủ yếu là rừng thông kéo dài qua 3 huyện: Nghi Xuân, Hồng Lĩnh và Can Lộc với diện tích khoảng 4000 hecta Cây thông ở đây chủ yếu được trồng vào năm 1973 và bắt đầu khai thác nhựa thông vào năm 1997-1998 Sản lượng trung bình hàng năm một cây thông cho... sinh trên côn trùng trong tự nhiên: Trong quá trình nghi n cứu nấm mốc ký sinh trên côn trùng thì vai trò trấn áp những dịch sinh sản lớn do côn trùng gây hại của các nấm diệt côn trùng đã được trình bày rất rõ ràng trong nhiều công trình của nhiều tác giả trên thế giới (V.p paspelov 1932-1940, Dusky S.R 1959, Hall I.M 1964, Tanada 1.9591964 ) E.A.Steinhaus(1949) cho biết các nấm diệt sâu ở trong thiên ... nấm mốc kỷ sinh số loài côn trùng rừng thông thuộc xã Xuân Lĩnh, huyện Nghi Xuân, tỉnh Hà Tĩnh" Muc tiêu đê tài là: Điều tra thành phần nấm mốc số loại côn trùng thu thập từ rừng thông xã Xuân Lĩnh,. .. tra thành phần nấm mốc sống số loại côn trùng thu thập từ số rừng thông xã Xuân Lĩnh, huyện Nghi Xuân thuộc Ban quản lý rừng phòng hộ Hồng Lĩnh, tỉnh Hà Tĩnh Qua đó, xác định chủng nấm mốc ký sinh. .. hoàn thành luận văn từ tháng 4-5/2006 2.2.Địa điểm nghi n cứu: Mẫu côn trùng thu rừng thông xã Xuân Lĩnh, huyện Nghi Xuân, thuộc Ban quản lý rừng phòng hộ Hồng Lĩnh, tỉnh Hà Tĩnh PHƯỜNG PHÁP NGHI N