BÀI GIẢNG VI SINH Y HỌC PGS.TS Lê Hồng Hinh ĐAI CƯƠNG VIRUS Mục tiêu học tập: Trình bày thành phần cấu trúc virus chức chúng Trình bày giai đoạn trình nhân lên virus Trình bày hậu tương tác virus xâm nhập vào tế bào Định nghĩa: - Đơn vị sinh học - Biệu thi tính chất sống tế bào - Có đủ điều kiện cần thiết cho nhân lên Những đặc điểm sinh học virus Hình thể kích thước Đa dạng: Cầu,que, sợi, khối, chuỳ Rất bé nhỏ (nm) Cấu trúc 2.1 Cấu trúc bản: gồm thành phần: 2.1.1 Acid nucleic (AN): ADN ARN Chức năng: - Mang mật mã di truyền virus - Quyết định khả gây nhiễm tế bào - Quyết định chu kỳ nhân lên virus - Mang tính bán kháng nguyên đặc hiệu virus 2.1.2 Capsid Bao quanh AN, chất protein Tạo nhiều đơn vị cấu trúc – capsomer Capsomer xếp trật tự, đối xứng Căn vào đối xứng chia thành loại: - Đối xứng hình khối - Đối xứng hình xoắn Ngoài có cấu trúc hỗn hợp có Phage Cấu trúc đối xứng hình khối Cấu trúc đối xứng hình xoắn Cấu trúc đối xứng hình xoắn Chức capsid: - Bảo vệ cho AN không bị enzym nuclease yếu tố khác phá huỷ - Tham gia vào bám virus lên tế bào việt nam - Mang tính kháng nguyên đặc hiệu virus - Ổn định hình thái virus 2.2 Cấu trúc riêng Chỉ có số loài virus - Bao ( envelop ) Bao phủ capsid Bản chất phức hợp lipoprotein glycoprotein - Ngưng kết tố hồng cầu (hemagglutinin) - Enzym chép ngược (Reverse transcriptase) Cấu trúc hình khối Không bao Có bao Cấu trúc hình xoắn Không bao Có bao Virus enzym chuyển hoá hô hấp nên: - Phải ký sinh tuyệt đối vào tế bào cảm thụ để phát triển nhân lên - Kháng sinh tác dụng với virus Sự nhân lên virus tế bào cảm thụ Định nghĩa: Sự nhân lên virus trình nhân lên tế bào cảm thụ, xuất nhiều virus có đầy đủ tính chất virus ban đầu 2 Các giai đoạn nhân lên 2.1 Hấp phụ virus lên bề mặt tế bào Nhờ thụ thể (receptor) đặc hiệu bề mặt tế bào cấu trúc bề mặt virus 2.2 Xâm nhập vào bên tế bào - Theo chế ẩm bào - Bơm acid nucleic vào tế bào Tổng hợp thành phần cấu trúc AN virus điều khiển hoạt động tế bào, bắt TB tổng hợp nên AN capsid (protein) virus Lắp ráp Nhờ enzym cấu trúc virus => virus Giải phóng virus khỏi TB - Phá vỡ TB - Nảy chồi Hậu tương tác virus tế bào Huỷ hoại tế bào Cytopathic effect: CPE Làm sai lạc nhiễm sắc thể tế bào: - Dị tật bẩm sinh, thai chết lưu - Sinh khối u Tạo hạt virus không hoàn chỉnh Hạt virus AN có capsid > hạt DIP: Defective interfering particle Tạo tiểu thể nội bào ( Negri ) Các hạt nhỏ tế bào Chuyển thể tế bào (transformation) Do gen virus tích hợp vào gen TB làm TB xuất tính trạng Biến tế bào thành tế bào tiềm tan Gen virus ôn hoà trở thành virus độc lực gây ly giải tế bào Tạo interferon Interferon protein ức chế nhân lên virus CHẨN ĐOÁN VIRUS Chẩn đoán trực tiếp 1.1 Bệnh phẩm: - Tuỳ bệnh mà lấy BP: phân, dịch họng nũi, máu, nước não tuỷ… - Lấy sớm tốt - Bảo quản lạnh, đưa đến phòng xét nghiệm 1.2 Phân lập virus - Gây nhiễm vào tế bào nuôi: + Tế bào nguyên phát: tế bào thận khỉ, TB thai: người, lợn, chó, gà… + Tế bào thường trực: Vero, Hep 2, C6/36, Hela… - Gây bệnh thực nghiệm động vật: Chuột nhắt sinh, khỉ, bào thai gà, muỗi… 1.3 Xác định virus Bằng kỹ thuật miễn dịch thích hợp, dựa vào kháng thể mẫu Chẩn đoán gián tiếp 2.1 Bệnh phẩm - Lấy máu lần, để đông chắt huyết thanh: Lần lấy BN vào viện, lần sau lần 1: 7ng - Bảo quản -20OC, xét nghiệm điều kiện 2.2 Các phản ứng huyết tìm kháng thể: - Mac-ELISA tìm KT IgM - Gac- ELISA tìm KT IgG - Huỳnh quang gián tiếp - Trung hoà - Kết hợp bổ thể - Ức chế ngưng kết HC … 2.3 Nhận định kết quả: - Mac-ELISA: có KT (+) - Các pứ khác hiệu giá KT máu gấp lần trở lên so với máu kết luận (+) Các phương pháp phát virus khác - Quan sát kính hiễn vi điện tử - Khuếch đại gen: PCR Chúc học giỏi [...]... trúc AN của virus điều khiển mọi hoạt động của tế bào, bắt TB tổng hợp nên AN và capsid (protein) của virus 4 Lắp ráp Nhờ enzym cấu trúc của virus => virus mới 5 Giải phóng virus ra khỏi TB - Phá vỡ TB - N y chồi Hậu quả của sự tương tác virus và tế bào 1 Huỷ hoại tế bào Cytopathic effect: CPE 2 Làm sai lạc nhiễm sắc thể của tế bào: - Dị tật bẩm sinh, thai chết lưu - Sinh khối u 3 Tạo hạt virus không... và nhân lên - Kháng sinh không có tác dụng với virus Sự nhân lên của virus trong tế bào cảm thụ 1 Định nghĩa: Sự nhân lên của virus là quá trình nhân lên trong tế bào cảm thụ, xuất hiện nhiều virus mới có đ y đủ tính chất như virus ban đầu 2 Các giai đoạn nhân lên 2.1 Hấp phụ của virus lên bề mặt tế bào Nhờ các thụ thể (receptor) đặc hiệu trên bề mặt tế bào và cấu trúc bề mặt virus 2.2 Xâm nhập vào... chế sự nhân lên của virus CHẨN ĐOÁN VIRUS 1 Chẩn đoán trực tiếp 1.1 Bệnh phẩm: - Tuỳ bệnh mà l y BP: phân, dịch họng nũi, máu, nước não tuỷ… - L y càng sớm càng tốt - Bảo quản lạnh, đưa ngay đến phòng xét nghiệm 1.2 Phân lập virus - G y nhiễm vào tế bào nuôi: + Tế bào nguyên phát: tế bào thận khỉ, TB thai: người, lợn, chó, gà… + Tế bào thường trực: Vero, Hep 2, C6/36, Hela… - G y bệnh thực nghiệm trên... riêng Chỉ có ở một số loài virus - Bao ngoài ( envelop ) Bao phủ ngoài capsid Bản chất là phức hợp lipoprotein hoặc glycoprotein - Ngưng kết tố hồng cầu (hemagglutinin) - Enzym sao chép ngược (Reverse transcriptase) Cấu trúc hình khối Không bao ngoài Có bao ngoài Cấu trúc hình xoắn Không bao ngoài Có bao ngoài Virus không có enzym chuyển hoá và hô hấp nên: - Phải ký sinh tuyệt đối vào tế bào cảm thụ... Tạo hạt virus không hoàn chỉnh Hạt virus không có AN chỉ có capsid > hạt DIP: Defective interfering particle 4 Tạo ra tiểu thể nội bào ( Negri ) Các hạt nhỏ trong tế bào 5 Chuyển thể tế bào (transformation) Do gen của virus tích hợp vào gen của TB làm TB xuất hiện các tính trạng mới 6 Biến tế bào thành tế bào tiềm tan Gen của virus ôn hoà trở thành virus độc lực g y ly giải tế bào 7 Tạo interferon Interferon... bệnh thực nghiệm trên động vật: Chuột nhắt mới sinh, khỉ, bào thai gà, muỗi… 1.3 Xác định virus Bằng các kỹ thuật miễn dịch thích hợp, dựa vào kháng thể mẫu 2 Chẩn đoán gián tiếp 2.1 Bệnh phẩm - L y máu 2 lần, để đông chắt huyết thanh: Lần 1 l y khi BN mới vào vi n, lần 2 sau lần 1: 7ng - Bảo quản ở -20OC, xét nghiệm cùng điều kiện 2.2 Các phản ứng huyết thanh tìm kháng thể: - Mac-ELISA tìm KT IgM... Nhận định kết quả: - Mac-ELISA: có KT là (+) - Các pứ khác chỉ khi nào hiệu giá KT máu 2 gấp 4 lần trở lên so với máu 1 mới kết luận (+) 3 Các phương pháp phát hiện virus khác - Quan sát dưới kính hiễn vi điện tử - Khuếch đại gen: PCR Chúc học giỏi ... CƯƠNG VIRUS Mục tiêu học tập: Trình b y thành phần cấu trúc virus chức chúng Trình b y giai đoạn trình nhân lên virus Trình b y hậu tương tác virus xâm nhập vào tế bào Định nghĩa: - Đơn vị sinh học. .. ADN ARN Chức năng: - Mang mật mã di truyền virus - Quyết định khả g y nhiễm tế bào - Quyết định chu kỳ nhân lên virus - Mang tính bán kháng nguyên đặc hiệu virus 2.1.2 Capsid Bao quanh AN, chất... bị enzym nuclease y u tố khác phá huỷ - Tham gia vào bám virus lên tế bào vi t nam - Mang tính kháng nguyên đặc hiệu virus - Ổn định hình thái virus 2.2 Cấu trúc riêng Chỉ có số loài virus -