BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HỒ CHÍ MINH KHOA HÓA HỌC  KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CAO ETHYL ACETATE LÁ Ô MÔI CASSIA GRANDIS L HỌ VANG (CAESALPINIACEAE) KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP CỬ NHÂN HÓA HỌC CHUYÊN NGÀNH : HÓA HỮU CƠ Hướng dẫn khoa học: TS LÊ TIẾN DŨNG Sinh viên thực hiện: TRƯƠNG THỊ THU THỦY TP HỒ CHÍ MINH - 2012 LỜI CẢM ƠN - - Với lòng kính trọng biết ơn sâu sắc, em xin chân thành giử lời cảm ơn đến:  TS Lê Tiến Dũng, ThS.Phạm Thị Nhật Trinh - Phòng hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học, thầy (cô) tận tình hướng dẫn, giúp đỡ, cung cấp kiến thức, động viên, tạo điều kiện giúp em hoàn thành đề tài khóa luận tốt nghiệp  TS Mai Đình Trị-Phòng hợp chất thiên nhiên có hoạt tính sinh học-thầy giúp đỡ, cho em ý kiến quí báu để em hoàn thành đề tài  Thầy Cô môn hóa hữu – Khoa hóa – Trường đại học Sư Phạm thành phố Hồ Chí Minh Thầy Cô Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam tạo điều kiện giúp đỡ em hoàn thành khóa luận tốt nghiệp  Chị Lưu Thị Ngọc Anh học viên cao học trường Đại học Cần Thơ truyền đạt ý kinh nghiệm quý báu trình thực đề tài  Các anh chị khóa trước bạn khóa làm phòng 19, phòng 47Công nghệ Việt Nam , bạn lớp hóa 4C, động viên giúp đỡ trình thực đề tài  Các bạn phòng trọ quan tâm, động viên, tạo điều kiện thuận lợi trình thực đề tài  Con xin cảm ơn Bố Mẹ động viên, hỗ trợ mặt suốt trình học tập, thực đề tài khóa luận tốt nghiệp Thành phố Hồ Chí Minh, tháng năm 2012 Sinh viên: Trương Thị Thu Thủy DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT brs Broad singlet Mũi đơn rộng 13 Carbon-13 Nuclear Magnetic Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Resonance carbon 13 C – NMR CTPT Công thức phân tử d Doublet Mũi đôi dd Double of doublet Mũi đôi đôi DMSO Dimethyl sulfoxide DMSO-d6 Dimethyl sulfoxide-d6 DPPH 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl EDTA Ethylenediaminetetraacetic acid ESI-MS Electron Spray Ionization Mass Phổ khối lượng phun mù điện tử Spectrum EtOAc Ethyl acetate EtOH Ethanol g Gram Hz Hertz H n-Hexane HMBC Heteronuclear Multiple Bond Phổ tương tác dị nhân qua Coherence nhiều liên kết HSQC Heteronuclear Single Quantum Phổ tương tác dị nhân qua Correlation liên kết Proton Nuclear Magnetic Phổ cộng hưởng từ hạt nhân Resonance proton J Coupling constant Hằng số ghép m Multiplet Mũi đa MDA Malonyldialdehyde MeOH Methanol H – NMR mg Miligram MHz Mega Hertz MIC Minimum Inhibitory concentration mp Melting Point Điểm chảy ppm Part per million Một phần triệu R p 18 Reversed Phase 18 Pha đảo C18 s Singlet Mũi đơn SKC Sắc ký cột SKLM Sắc ký lớp mỏng STT Số thứ tự t Triplet TMS Tetramethylsilane δ Chemical shift Mũi ba Độ dịch chuyển hoá học DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Kết sắc ký cột sephadex cao CGA5 (0.57g)…………………………………30 Bảng Kết sắc ký cột sephadex cao CGA7 (25 g)……………………………… 32 Bảng Kết sắc ký cột cao CGA7.3(0.75 g)……………………………………….33 Bảng 4: Số liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất CGAVII 39 Bảng 5: Số liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất CGAV 43 Bảng 6: Số liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất CGAVII 47 Bảng 7: Số liệu phổ 1H 13C-NMR hợp chất CGAIX .51 DANH MỤC CÁC SƠ ĐỒ Sơ đồ Quy trình điều chế cao thô từ Ô môi……………………………………28 Sơ đồ Quy trình điều chế phân đoạn từ cao EtOAc …………………………… 29 Sơ đồ Quy trình điều chế CGAV từ phân đoạn CGA5……………………………….32 Sơ đồ Quy trình điều chế CGAVII từ phân đoạn CGA7.2.4…………………………33 Sơ đồ Quy trình điều chế CGAVIII từ phân đoạn CGA7.2.3……………………… 34 Sơ đồ Quy trình điều chế CGAIX từ phân đoạn CGA7.2.2………………………… 35 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình Cây Ô môi 12 Hình Lá Ô môi 12 Hình Hoa Ô môi 13 Hình Trái Ô môi 13 Hình Lá Ô môi khô…………………………………………………………… 27 Hình Tương quan HMBC vòng A CGAVII 38 Hình 7: Tương quan HMBC vòng B CGAVII 41 Hình : Tương quan HMBC vòng A CGAVA………………………….42 Hình 9: Tương quan HMBC vòng A CGAVIII .45 Hình 10: Tương quan HMBC vòng B CGAVIII .46 Hình 11: Tương quan HMBC vòng Acủa CGAIX 49 Hình 12: Tương quan HMBC vòng Bcủa CGAIX 50 MỤC LỤC Chương 12 1.1 ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT 12 1.1.1 Đặc điểm Ô môi 12 1.1.1.1 Mô tả Ô môi 1,5 12 1.1.1.2 Phân bố, thu hái chế biến1,5: 14 1.1.2 Tác dụng dược lý Ô môi 15 1.2 NHỮNG CÔNG TRÌNH NGHIÊN CỨU VỀ CÂY Ô MÔI 15 1.2.1 Thành phần hóa học chung Ô môi1,5 15 1.2.2 Các công trình nghiên cứu giới 16 1.2.2 Các công trình nghiên cứu Việt Nam 23 Chương 25 THỰC NGHIỆM 25 2.1 HÓA CHẤT-THIẾT BỊ-PHƯƠNG PHÁP 25 2.1.1 Hoá chất 25 2.1.2 Thiết bị 25 2.1.3 Phương pháp tiến hành 26 2.1.3.1 Phương pháp cô lập hợp chất 26 2.1.3.2 Phương pháp xác định cấu trúc hoá học hợp chất 26 2.2 NGUYÊN LIỆU 26 2.2.1 Thu hái nguyên liệu 26 2.2.2 Xử lý mẫu nguyên liệu 26 2.3 CÔ LẬP CÁC HỢP CHẤT TỪ CAO THÔ 27 2.3.1 Điều chế cao thô 27 2.3.2 Cô lập chất từ cao CGA5 30 2.3.2 Cô lập chất từ cao CGA7 (21 g) 32 2.3.2.1 Cô lập chất từ phân đoạn 7.3 (0.75 g) 32 2.3.2.1.1 Cô lập chất từ phân đoạn 7.2.4 33 2.3.2.1.2 Cô lập chất từ phân đoạn 7.2.3 33 2.3.2.1.3 Cô lập chất từ phân đoạn 7.2.2 34 Chương 36 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 36 3.1 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC CÁC HỢP CHẤT 36 3.1.1 HỢP CHẤT CGAVII: 36 3.1.2 HỢP CHẤT CGAVA: 39 3.1.3 HỢP CHẤT CGAVIII: 44 3.1.4 HỢP CHẤT CGAIX 50 Chương 52 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 52 4.1 KẾT LUẬN 52 4.2 KIẾN NGHỊ 54 TÀI LIỆU THAM KHẢO Error! Bookmark not defined Tài liệu tiếng Việt 54 Tài liệu tiếng Anh 55 MỞ ĐẦU - - Từ thời xa xưa,con người biết dùng cỏ làm phương tiện phòng chữa bệnh,phát triển y học dân gian y học cổ truyền dân tộc Ngày nay,mặc dù hóa học tổng hợp hữu đạt nhiều thành tựu quan trọng nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học khó tổng hợp,hoặc tổng hợp chi phí đắt Ngoài có tác dụng phụ không mong muốn Cho nên,việc nghiên cứu phát triển nguồn dược phẩm từ nguồn nguyên liệu tự nhiên đóng góp mạnh mẽ vào lĩnh vực điều trị bao gồm chống ung thư, chống nhiễm khuẫn,chống viêm,điều chỉnh miễn dịch bệnh thần kinh…theo thống kê, năm 20002005,hơn 20 thuốc sản phẩm thiên nhiên dẫn xuất từ thiên nhiên16 Vốn nước thiên nhiên ưu đãi,nằm vùng nhiệt đới gió mùa,Việt Nam có thảm thực vật vô phong phú đa dạng với 12.000 loài thực vật bậc cao khác xếp hạng thứ 16 giới phong phú loài thực vật Đây lợi lớn việc nghiên cứu hóa học hợp chất thiên nhiên Cây Ô môi có tên khoa học Cassia grandisL., thuộc họ Vang loại quen thuộc với người dân miền Nam, chúng mọc hoang trồng lấy Quả Ô môi thường dùng ngâm rượu làm thuốc bổ, nấu cao mềm để kích thích tiêu hóa, nhuận tràng, trị bò cạp cắn, Ô môi không loại ngon độc đáo vùng đồng sông Cửu Long mà vị thuốc bổ so sánh ngang với Canh-ki-na Chính thứ cơm màu nâu đen đặc sền sệt chứa Ô môi người dân ta ngâm rượu làm thuốc bổ uống Rượu Ô môi có màu đỏ đẹp màu rượu Canh-ki-na có tác dụng rượu canh-ki-na, nên Ô môi gọi “Canh-ki-na Việt Nam” Tuy nhiên, công trình nghiên cứu thành phần hoá học hoạt tính sinh học loài chưa nghiên cứu nhiều giới Việt Nam Do vậy, đề tài “Nghiên cứu thành phần hoá học Ô môi Cassia grandis L họ Vang (Caesalpiniaceae)” làm sở khoa học ban đầu cho nghiên cứu tiếp theo, nhằm sớm đưa Ô môi thành vị thuốc có giá trị đóng góp thêm hiểu biết thành phần Hóa-thực vật loài Cassia grandis L mọc Đồng sông Cửu Long, qua nâng cao giá trị sử dụng loài thực vật PHỤ LỤC 1.2: PHỔ 13C-NMR CỦA HỢP CHẤT CGAVII PHỤ LỤC 1.3: PHỔ DEPT CỦA HỢP CHẤT CGAVII PHỤ LỤC 1.4: PHỔ HMBCCỦA HỢP CHẤT CGAVII PHỤ LỤC 2.1:PHỤ PHỔLỤC H-NMR CỦAHSQC HỢP CHẤT CGAVA 1.4: PHỔ CỦA HỢP CHẤT CGAVII PHỤ LỤC 2.3: PHỔ DEPT CỦA HỢP CHẤT CGAVA PHỤ LỤC 2.2: PHỔ 13C-NMR CỦA HỢP CHẤT CGAVA PHỤ LỤC 2.4: PHỔ HMBC CỦA HỢP CHẤT CGAVA PHỤ LỤC 2.5: PHỔ HSQC CỦA HỢP CHẤT CGAVA PHỤ LỤC 3.1: PHỔ 1H-NMR CỦA HỢP CHẤT CGAVIII PHỤ LỤC 3.5: PHỔ HSQC CỦA HỢP CHẤT CGAVIII PHỤ LỤC 4.1: PHỔ 1H-NMR CỦA HỢP CHẤT CGAIX PHỤ LỤC 3.5: PHỔ HMBC CỦA HỢP CHẤT CGAVIII PHỤ LỤC 4.2: PHỔ 13C-NMR CỦA HỢP CHẤT CGAIX PHỤ LỤC 3.3: PHỔ DEPT CỦA HỢP CHẤT CGAIX PHỤ LỤC 2.4: PHỔ HMBC CỦA HỢP CHẤT CGAIX [...]... điều chế cao thô được tóm tắt theo Sơ đồ 1 Bột l Ô môi (2.9 kg) - Tận trích bằng EtOH 96° - L c bỏ bã, cô giảm áp dịch chiết Cao EtOH (1500 g) - Hoà với l ợng nhỏ EtOH, tẩm silica gel, cô đến bột tơi - SKC silica gel với các dung môi: H, CHCl3, EtOAc, MeOH - Cô quay dịch chiết Cao H (130 g) Cao CHCl3 (51g) Cao EtOA (330 g) Cao MeOH (588 g) Sơ đồ 1 Quy trình điều chế các cao thô từ l Ô môi Trong luận... được cô loại dung môi dưới áp suất kém thu được cao EtOH dạng sệt có khối l ợng l 500 g Hòa cao sệt với một l ợng tối thiểu ethanol và tẩm với silica gel, đuổi khô dung môi trong tủ sấy ở nhiệt độ khoảng 40°C cho đến khi thu được bột tơi Trích pha rắn cao ethanol l n l ợt với các dung môi n-hexane, chloroform, ethyl acetate và methanol Cô đuổi dung môi các dịch trích dưới áp suất kém thu được các cao. .. học 2.2.2 Xử l mẫu nguyên liệu Mẫu nguyên liệu được rửa sạch, loại bỏ phần sâu bệnh, phơi khô trong bóng râm, sau đó sấy l i ở nhiệt độ thấp (khoảng 50°C), rồi xay thành bột mịn Đây l nguyên liệu dùng trong nghiên cứu Hình 5 L Ô môi khô 2.3 CÔ L P CÁC HỢP CHẤT TỪ CAO THÔ 2.3.1 Điều chế các cao thô Bột l Ô môi (2.9 kg) được tận trích với ethanol 96° bằng phương pháp ngâm dầm, l c bỏ bã, phần dịch... 1 l t nước rồi l c và cô cách thủy đến thành cao thì dùng để l m thuốc chữa đau l ng, đau người, nhuận tràng, tẩy hoặc chữa l , tiêu chảy với liều dùng 5-15 g L tươi giã nát vắt l y nước xát vào nơi hắc l o, có thể sắc uống chữa đau l ng, nhuận tràng Ngày uống 15-20 g l Vỏ thân được dùng đắp l n nơi rắn cắn và bò cạp cắn 1.2 NHỮNG CÔNG TRÌNH NGHIÊN CỨU VỀ CÂY Ô MÔI 1.2.1 Thành phần hóa học chung của. .. cao 7 đến 15 m Vỏ thân nhẵn, cành mọc ngang, cành non có l ng màu rỉ sắt, cành già màu nâu đen (Hình 1) Hình 1 Cây Ô môi L có kích thước l n, kép l ng chim, màu xanh bóng, gân rõ,gồm 5-16 đôi l chét hình hơi quả trám, dài 7-12 cm, rộng 4-8 cm có phủ l ng mịn (Hình 2) Hình 2 L Ô môi Cụm hoa mọc thành chùm thưa, thõng, dài 20-40 cm Cụm hoa nở rộ khi l rụng,màu hồng tươi (Hình 3) Hình 3 Hoa Ô môi. .. Viện Khoa học và Công nghệ Việt Nam, số 18, Hoàng Quốc Việt, Cầu Giấy, Hà Nội 2.2 NGUYÊN LIỆU 2.2.1 Thu hái nguyên liệu Mẫu thực vật được dùng trong nghiên cứu l l Ô môi già được thu hái ở ấp Trường L c-xã An Mỹ-huyện Kế Sách-tỉnh Sóc Trăng Thời gian thu hái: tháng 10/2010 Mẫu l cây Ô môi được ThS Nguyễn Thị Kim Huê, bộ môn Sinh học, khoa Khoa Học Tự Nhiên, đại học Cần Thơ giám định tên khoa học 2.2.2...Mục tiêu của đề tài - Phân l p các chất tinh khiết từ l cây ô môi - Xác định cấu trúc các chất đã phân l p được Chương 1 TỔNG QUAN - - 1.1 ĐẠI CƯƠNG VỀ THỰC VẬT 1.1.1 Đặc điểm cây Ô môi Tên khoa học: Cassia grandis L. 1,5 Tên Việt Nam: cây Cốt khí, cây quả Canh-ki-na Việt Nam, Bò cạp đỏ.1,5 Tên nước ngoài: Anh (coral shower, apple blossom cassia, pink shower, liquorice tree, horse cassia, Cathartocarpus... Cathartocarpus grandis (L. f.) Pers 1805, Cassia brasiliana Lamk 1785, Cathartocarpus brasiliana (Lamk.) Jacq 1809); Pháp (bâton casse, casse du Brésil); L o (brai xiêm, Sino-Tibetan, may khoum); Malaysia (kotek mamak); Tây Ban Nha (sandal, carao, carámano, cañafistula, cañadonga); Thái (kanpaphruek (Bangkok)), Campuchia (Sac phlê, krêête, rich chopeu).1,5,15 Họ: Vang (Caesalpiniaceae). 1,5 1.1.1.1 Mô tả cây Ô môi. .. 3’,4’,5,7-tetrahydroxy-3-O-β-D-glucopyranosylflavonol] (31) Chương 2 THỰC NGHIỆM - - 2.1 HÓA CHẤT-THIẾT BỊ-PHƯƠNG PHÁP 2.1.1 Hoá chất Hạt silica gel cỡ hạt 0.04-0.063 mm dùng cho pha thường của Scharlau, silica gel pha đảo ODS (0.040-0.063 mm), sephadex LH-20, bảng nhôm tráng sẵn với silica gel 60 F 254 (Merck) dùng cho pha thường và Rp18 F 254S (Merck) cho pha đảo Dung môi: n-Hexane, chloroform, ethyl acetate, acetone,... Tuy nhiên những nghiên cứu trên loài Cassia grandis L. hiện rất ít Năm 1981, Y.S.Srivastava và P.C.Gupta đã cô l p được flavonol glycoside mới, kaempferol-3-O-β-D-mannopyranosyl-(1→4)-O-D-glucopyranoside (1) từ hạt của cây Cassia grandis L (N.O.Leguminoseae).13 OH O HO CH2OH O OH O O CH2OH H H H OH OH H O O H H OH H OH OH H H H Kaempferol-3-O-β-D-mannopyranosyl-(1→4)-O-D-glucopyranoside (1) Năm 1984, V.K ... CGA7.2.2………………………… 35 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình Cây Ô môi 12 Hình Lá Ô môi 12 Hình Hoa Ô môi 13 Hình Trái Ô môi 13 Hình Lá Ô môi khô…………………………………………………………… 27 Hình... cứu thành phần hoá học Ô môi Cassia grandis L họ Vang (Caesalpiniaceae)” làm sở khoa học ban đầu cho nghiên cứu tiếp theo, nhằm sớm đưa Ô môi thành vị thuốc có giá trị đóng góp thêm hiểu biết thành. .. đại học Sư Phạm thành phố Hồ Chí Minh Thầy Cô Viện Khoa học Công nghệ Việt Nam tạo điều kiện giúp đỡ em hoàn thành khóa luận tốt nghiệp  Chị Lưu Thị Ngọc Anh học viên cao học trường Đại học