BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HỒ CHÍ MINH Lê Thị Nụ TÌM HIỂU ẢNH HƯỞNG CỦA AUXIN VÀ CYTOKININ ĐẾN SỰ TĂNG TRƯỞNG CỦA VI TẢO NITZSCHIA SP LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC Thành phố Hồ Chí Minh – 2011 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HỒ CHÍ MINH Lê Thị Nụ TÌM HIỂU ẢNH HƯỞNG CỦA AUXIN VÀ CYTOKININ ĐẾN SỰ TĂNG TRƯỞNG CỦA VI TẢO NITZSCHIA SP Chuyên ngành : Sinh học thực nghiệm Mã số : 60.42.30 LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS LÊ THỊ TRUNG hành phố Hồ Chí Minh – 2011 LỜI CẢM ƠN Tôi xin chân thành gửi lời cảm ơn đến  Giáo viên hướng dẫn - TS Lê Thị Trung Cô tận tâm bảo, hướng dẫn, truyền đạt kiến thức, kinh nghiệm quý báu thực hành thí nghiệm sống tạo điều kiện thuận lợi cho suốt trình thực luận văn  Quý Thầy Cô khoa Sinh - trường Đại học Sư phạm Tp Hồ Chí Minh trường Đại học Khoa học Tự nhiên Tp Hồ Chí Minh tận tình giảng dạy, truyền đạt kiến thức tạo niềm tin vững cho để tự tin bước vào trình nghiên cứu hoàn thành luận văn  CN Hồ Thị Mỹ Linh - phòng thí nghiệm Sinh lý thực vật Trường Đại học Sư Phạm Tp Hồ Chí Minh, nhiệt tình giúp đỡ hóa chất trang thiết bị thí nghiệm tạo điều kiện thuận lợi cho làm việc phòng thí nghiệm  Th.S Võ Hồng Trung, Th.S Huỳnh Thị Ngọc Như - trường Đại học Khoa học Tự nhiên nhiệt tình giúp đỡ chia sẻ khó khăn suốt trình thực đề tài  Tập thể lớp cao học khóa 19 học tập nghiên cứu, giúp đỡ lẫn nhau, chia sẻ kinh nghiệm quý báu để hoàn thành tốt công việc  Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn chân thành đến Cha, Mẹ, Anh, Chị, Em gia đình, đặc biệt Chồng Con trai bên tôi, động viên, ủng hộ mặt, chỗ dựa vững chắc, động lực mạnh mẽ giúp vượt qua khó khăn, thử thách để hoàn thành tốt nhiệm vụ MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN MỤC LỤC KÍ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC ẢNH DANH MỤC HÌNH DANH MỤC BẢNG 11 MỞ ĐẦU Chương I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Tảo silic 1.2 Vị trí phân loại 1.3 Cấu tạo tế bào 1.4 Các hình thức sinh sản tảo silic 1.5 Di chuyển 1.6 Dinh dưỡng 10 1.7 Các phương pháp nuôi cấy vi tảo đặc điểm đường cong tăng trưởng 11 1.8 Các yếu tố ảnh hưởng đến sinh trưởng vi tảo 14 1.9 Một số kỹ thuật nuôi cấy vi tảo 18 1.9.1 Đảo trộn 18 1.9.2 Bình nuôi cấy 18 1.9.3 Lựa chọn chuẩn bị môi trường 19 1.9.4 Phương pháp khử trùng 20 1.9.5 Phương pháp phân lập 21 1.10 Vai trò vi tảo 22 1.10.1 Lợi ích 22 1.10.2 Tác hại 24 Chương 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP 25 2.1 Vật liệu nghiên cứu 25 2.2 Phương pháp 25 Chương KẾT QUẢ - THẢO LUẬN 37 3.1 Kết phân lập 37 3.2 Kết tinh 37 3.3 Định danh 38 3.4 Nuôi thích nghi điều kiện phòng thí nghiệm 41 3.5 Môi trường nuôi thích hợp 41 3.6 Mật độ cấy chuyền thích hợp 45 3.7 Thời điểm cấy chuyền thích hợp 50 3.8 Ảnh hưởng auxin nồng độ khác lên sinh trưởng vi tảo Nitzschia palea 54 3.9 Ảnh hưởng cytokinin nồng độ khác lên sinh trưởng vi tảo Nitzschia palea 70 3.10 Ảnh hưởng kết hợp AIA BA 86 Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 99 4.1.Kết luận 99 4.2.Đề nghị: 99 TÀI LIỆU THAM KHẢO 100 KÍ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT AIA Acid indole 3-acetic ATP Adenosine triphosphate BA Benzyladenin CĐHH Cường độ hô hấp CĐQH Cường độ quang hợp EDTA Ethylen diamine tetraacetic acid et al Những người khác (cộng sự) GA Gibberellic acid (Gibberellin) HS Chu #10 Half Streng Chu #10 ml mililit N Ngày ppm parts per million (phần triệu) tb tế bào Tp HCM Thành phố Hồ Chí Minh µL microlit µM micromol/lit DANH MỤC ẢNH Ảnh 3.1: Các tế bào Nitzschia sp lẫn với tế bào khác trước phân lập 40 Ảnh 3.2: Tế bào Nitzschia sp riêng lẻ (x40) 40 Ảnh 3.3: Hình thái tế bào Nitzschia sp môi trường nuôi kính vi quang học 41 Ảnh 3.4: Mặt vỏ tế bào kính hiển vi điện tử quét 41 Ảnh 3.5: Phần đầu vỏ tế bào mặt kính hiển vi điện tử quét 41 Ảnh 3.6: Mặt vỏ tế bào kính hiển vi điện tử quét 42 Ảnh 3.7: Tế bào Nitzschia palea giai đoạn phân chia (x40) 44 Ảnh 3.8: Hình thái tế bào N.palea Môi trường Half Strength Chu #10 44 Ảnh 3.9: Hình thái tế bào N.palea Môi trường Combo 45 Ảnh 3.10: Hình thái tế bào N.palea Môi trường BG 11 46 Ảnh 3.11 Màu dịch nuôi môi trường tương ứng 46 Ảnh 3.12: Hình thái tế bào N.palea Môi trường BG 11 mật độ xuất phát 2,5.103 tb/ml 49 Ảnh 3.13: Hình thái tế bào N.palea Môi trường BG 11 mật độ xuất phát 5.103 tb/ml 49 Ảnh 3.14: Hình thái tế bào N.palea Môi trường BG 11 mật độ xuất phát 7,5.103 tb/ml 50 Ảnh 3.15: Hình thái tế bào N.palea Môi trường BG 11 mật độ xuất phát 10.103 tb/ml 51 Ảnh 3.16: Hình thái tế bào N.palea môi trường BG 11 cấy chuyền vào ngày thứ 54 Ảnh 3.17: Hình thái tế bào N.palea môi trường BG 11 cấy chuyền vào ngày thứ 55 Ảnh 3.18 Hình thái tế bào N.palea môi trường BG 11 cấy chuyền vào ngày thứ 55 Ảnh 3.19 Hình thái tế bào N.palea môi trường chuẩn 58 Ảnh 3.20 Hình thái tế bào N.palea môi trường bổ sung AIA 10-6 g/ml 59 Ảnh 3.21 Hình thái tế bào N.palea môi trường bổ sung AIA 10-8 g/ml 60 Ảnh 3.22 Hình thái tế bào N.palea môi trường bổ sung AIA 10-10 g/ml 60 Ảnh 3.23 Hình thái tế bào N.palea môi trường chuẩn 65 Ảnh 3.24 Hình thái tế bào N.palea môi trường bổ sung AIA 10-12 g/ml 65 Ảnh 3.25 Hình thái tế bào N.palea môi trường bổ sung AIA 10-14 g/ml 66 Ảnh 3.26 Hình thái tế bào N.palea môi trường chuẩn 70 Ảnh 3.27 Hình thái tế bào N.palea môi trường bổ sung AIA 10-16 g/ml 71 Ảnh 3.28 Hình thái tế bào N.palea môi trường bổ sung AIA 10-18 g/ml 71 Ảnh 3.29 Hình thái tế bào N.palea môi trường bổ sung AIA 10-20 g/ml 72 Ảnh 3.30 Hình thái tế bào N.palea môi trường chuẩn 77 Ảnh 3.31 Hình thái tế bào N.palea môi trường bổ sung BA 10-6 g/ml 77 Ảnh 3.32 Hình thái tế bào N.palea môi trường bổ sung BA 10-8 g/ml 78 Ảnh 3.33 Hình thái tế bào N.palea môi trường bổ sung BA 10-10 g/ml 79 Ảnh 3.34 Hình thái tế bào N.palea môi trường chuẩn 83 Ảnh 3.35 Hình thái tế bào N.palea môi trường bổ sung BA 10-12 g/ml 84 Ảnh 3.36 Hình thái tế bào N.palea môi trường bổ sung BA 10-14 g/ml 84 Ảnh 3.37 Hình thái tế bào N.palea môi trường chuẩn 88 Ảnh 3.38 Hình thái tế bào N.palea môi trường bổ sung BA 10-16 g/ml 89 Ảnh 3.39 Hình thái tế bào N.palea môi trường bổ sung BA 10-18 g/ml 89 Ảnh 3.40 Hình thái tế bào N.palea môi trường bổ sung BA 10-20 g/ml 90 Ảnh 3.41 Hình thái tế bào N.palea môi trường chuẩn 95 Ảnh 3.42 Hình thái tế bào N.palea môi trường bổ sung AIA 10-18 kết hợp với BA 1018 95 Ảnh 3.43 Hình thái tế bào N.palea môi trường bổ sung AIA 10-20 kết hợp với BA 1018 96 DANH MỤC HÌNH Hình 1.1 Cấu trúc tế bào tảo silic Hình 1.2: Sơ đồ minh họa cấu trúc tế bào (a) chu kỳ tế bào (b) tế bào tảo silic theo mặt cắt ngang Hình 1.3: Vòng đời tảo silic Hình 1.4: Đường cong tăng trưởng vi tảo điều kiện nuôi cấy hàng loạt (a) thay đổi tương ứng tốc độ tăng trưởng (b) 12 Hình 2.1: Mô hình vợt lưới phiêu sinh 27 Hình 2.2: Các thao tác tạo đầu pipette 28 Hình 2.3: Buồng đếm hồng cầu 33 Hình 2.4: Quy ước đếm tế bào 33 Hình 3.1: Đường cong tăng trưởng Nitzschia palea môi trường Half Strength Chu #10, Combo BG 11 47 Hình 3.2: Đường cong tăng trưởng Nitzschia palea môi trường mật độ xuất phát khác 52 Hình 3.3: Đường cong tăng trưởng N.palea thời điểm cấy chuyền 57 Hình 3.4: Đường cong tăng trưởng N.palea môi trường bổ sung AIA 10-6 g/ml, 10-8 g/ml, 10-10 g/ml 62 Hình 3.5: Cường độ quang hợp vi tảo N palea môi trường bổ sung AIA 10-6 g/ml, 10-8 g/ml, 10-10 g/ml 63 Hình 3.6: Cường độ hô hấp vi tảo N palea môi trường bổ sung AIA nồng độ 10-6 g/ml, 10-8 g/ml, 10-10 g/ml 64 Hình 3.7: Đường cong tăng trưởng N.palea môi trường bổ sung AIA nồng độ 10-12 g/ml, 10-14 g/ml 67 Hình 3.8: Cường độ quang hợp vi tảo N palea môi trường bổ sung AIA 10-12 g/ml, 10-14 g/ml 69 Hình 3.9: Cường độ hô hấp vi tảo N palea môi trường bổ sung BA 10-12 g/ml, 10-14 g/ml 69 Hình 3.10: Đường cong tăng trưởng N.palea môi trường bổ sung AIA nồng độ 10-16 g/ml, 10-18 g/ml, 10-20 g/ml 74 Hình 3.11: Cường độ quang hợp vi tảo N palea môi trường bổ sung AIA nồng độ 10-16 g/ml, 10-18 g/ml, 10-20 g/ml 75 Hình 3.12: Cường độ hô hấp vi tảo N palea môi trường bổ sung AIA nồng độ 10-16 g/ml, 10-18 g/ml, 10-20 g/ml 76 Hình 3.13: Đường cong tăng trưởng N.palea môi trường bổ sung BA nồng độ 10-6 g/ml, 10-8 g/ml, 10-10 g/ml 80 Hình 3.14: Cường độ quang hợp vi tảo N palea môi trường bổ sung BA nồng độ 10-6 g/ml, 10-8 g/ml, 10-10 g/ml 82 Hình 3.15: Cường độ hô hấp vi tảo N palea môi trường bổ sung BA nồng độ 10-6 g/ml, 10-8 g/ml, 10-10 g/ml 82 Hình 3.16: Đường cong tăng trưởng N.palea môi trường bổ sung BA nồng độ 10-12 g/ml, 10-14 g/ml 86 Hình 3.17: Cường độ quang hợp vi tảo N palea môi trường bổ sung BA 10-12 g/ml, 10-14 g/ml 87 Hình 3.18: Cường độ hô hấp vi tảo N palea môi trường bổ sung BA 10-12 g/ml, 10-14 g/ml 88 Hình 3.19: Đường cong tăng trưởng N.palea môi trường bổ sung BA nồng độ 10-16 g/ml, 10-18 g/ml, 10-20 g/ml 92 Hình 3.20: Cường độ quang hợp vi tảo N palea môi trường bổ sung BA nồng độ 10-16 g/ml, 10-18 g/ml, 10-20 g/ml 93 Hình 3.21: Cường độ hô hấp vi tảo N palea môi trường bổ sung BA nồng độ 10-16 g/ml, 10-18 g/ml, 10-20 g/ml 94 Hình 3.22: Đường cong tăng trưởng N.palea môi trường bổ sung AIA 10-18 g/ml kết hợp BA 10-18 g/ml, môi trường bổ sung AIA 10-20 g/ml kết hợp BA 10-18 g/ml 97 Hình 3.23: Cường độ quang hợp N palea môi trường bổ sung AIA 10-18 g/ml kết hợp BA 10-18 g/ml, môi trường bổ sung AIA 10-20 g/ml kết hợp BA 10-18 g/ml 99 Hình 3.24: Cường độ quang hợp vi tảo N palea môi trường bổ sung AIA 1018 kết hợp BA 10-18, môi trường bổ sung AIA 10-20 kết hợp BA 10-18 99 Các số trung bình hàng với mẫu tự khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05 Các số trung bình cột với chữ số khác khác biệt có ý nghĩa mức p = 0,05  Cường độ quang hợp cường độ hô hấp Trong môi trường bổ sung AIA 10-18 g/ml kết hợp BA 10-18 g/ml CĐQH cao giá trị cao đạt vào ngày Tiếp đến môi trường bổ sung AIA 10-20 g/ml kết hợp BA 10-18 g/ml Môi trường chuẩn có CĐQH thấp hẳn so với hai môi trường bổ sung (x 10.000 μmol O2.h-1 10-6 tế bào) Cường độ quang hợp AIA BA kết hợp (hình 3.23) Thời gian (ngày) BG 11 -18 & BA 10 -20 & BA 10 AIA 10 AIA 10 -18 -18 Hình 3.23: Cường độ quang hợp N palea môi trường bổ sung AIA 10-18 g/ml kết hợp BA 10-18 g/ml, môi trường bổ sung AIA 10-20 g/ml kết hợp BA 10-18 g/ml Môi trường bổ sung AIA 10-18 g/ml kết hợp BA 10-18 g/ml CĐHH cao giá trị cao đạt vào ngày Tiếp đến môi trường bổ sung AIA 10-20 g/ml kết hợp BA 10-18 g/ml Môi trường chuẩn BG 11 có CĐHH thấp thấp hẳn so với hai môi trường bổ sung AIA BA kết hợp (hình 3.24) (x 10.000 μmol O2.h-1 10-6 tế bào) Cường độ hô hấp Thời gian (ngày) BG 11 -18 & BA 10 -20 & BA 10 AIA 10 AIA 10 -18 -18 Hình 3.24: Cường độ quang hợp vi tảo N palea môi trường bổ sung AIA 10-18 g/ml kết hợp BA 10-18 g/ml, môi trường bổ sung AIA 10-20 g/ml kết hợp BA 10-18 g/ml Kết hợp yếu tố hình thái tế bào, đường cong tăng trưởng, tốc độ tăng trưởng CĐQH, CĐHH môi trường bổ sung AIA 10-18 g/ml kết hợp với BA 10-18 g/ml môi trường bổ sung AIA 10-20 g/ml kết hợp với BA 10-18 g/ml quần thể vi tảo tăng trưởng mạnh tốt so với chuẩn, môi trường bổ sung AIA 10-18 g/ml kết hợp BA 10-18 g/ml tốt B Thảo luận 3.2.1 Sự sinh trưởng vi tảo Nitzschia palea nuôi cấy điều kiện phòng thí nghiệm Môi trường nước hiển thị giàu có hệ thực vật tảo Sự phân bố tảo loài nước không phụ thuộc vào việc lựa chọn môi trường hóa học mà dựa khả thích nghi môi trường cụ thể sinh vật Do đó, môi trường nuôi khác phát triển sử dụng để phân lập nuôi dưỡng tảo nước Vài môi trường thay đổi công thức để đáp ứng đối tượng cụ thể, số môi trường xây dựng từ phân tích nước môi trường sống tự nhiên, số xây dựng sau nghiên cứu chi tiết yêu cầu dinh dưỡng thể, số thành lập sau xem xét thông số sinh thái (Andersen, 2005) N palea tảo silic nước ngọt, có nhiều môi trường nước nhân tạo ưu tiên lựa chọn môi trường chứa silic môi trường chọn môi trường Half Strength Chu #10 (Nalewajko O’Mahony, 1989), môi trường BG - 11sửa đổi (Allen 1968, Allen and Stanier 1968, Rippka et al., 1979) môi trường Combo (Guillard Lorenzents, 1972) Môi trường Half Strength Chu #10 sử dụng để phát triển Chlamydomonas vernalis Skuja, Nitzschia sp, Oscillatoria utermoehlii (Andersen, 2005) Môi trường Combo bắt nguồn từ môi trường Guillard Lorenzen WC (1972) (ví dụ, loại bỏ glycylglycine Tris đệm, sửa đổi nguyên tố vi lượng) thêm ml vi lượng kim loại Môi trường sử dụng hỗ trợ tăng trưởng mạnh mẽ vi khuẩn, cryptophytes, tảo xanh, tảo silic (Andersen, 2005) Môi trường BG - 11sửa đổi bắt nguồn từ môi trường BG - 11 (Hughes et al., 1958.) dùng nuôi cấy tảo nước ngọt, có tảo silic vi khuẩn lam (Andersen, 2005) Ở môi trường Half Strength Chu #10 mật độ tế bào thấp nhất, tốc độ tăng trưởng chậm, có lẽ tỉ lệ chất dinh dưỡng có môi trường không thích hợp cho tăng trưởng loài vi tảo Ở môi trường Combo mật độ tế bào cao, nhiên đường cong tăng trưởng tốc độ tăng trưởng không ổn định Trong môi trường môi trường BG 11 tế bào có hình thái đẹp, đường cong tăng trưởng dạng chữ S điển hình tốc độ tăng trưởng quần thể vi tảo cao Điều chứng tỏ môi trường BG 11 thích hợp cho sinh trưởng vi tảo N palea điều kiện phòng thí nghiệm Có thể nói môi trường nước nhân tạo sử dụng phổ biến giới Việt Nam chưa áp dụng rộng rãi Tùy đối tượng vi tảo mà môi trường nước nhân tạo thích hợp cho sinh trưởng tảo loài thích hợp với điều kiện pH khác môi trường Vì nước nhân tạo tăng trưởng N palea môi trường BG - 11 phát triển mạnh môi trường Combo Half Strength Chu #10 thông qua hình thái tế bào, mật độ tế bào đường cong tăng trưởng Mật độ ban đầu yếu tố có liên quan mật thiết đến sinh khối thời gian tảo đạt cực đại Tùy loài tảo khác mà mật độ nuôi cấy ban đầu khác (Nguyễn Thanh Mai cộng sự, 2009) Mật độ cấy chuyền thích hợp yếu tố quan trọng trình khảo sát vi tảo Ở Việt Nam có số nghiên cứu mật độ cấy chuyền vi tảo loài Nitzschia sp nuôi cấy mật độ 2.103 tế bào/ml (Nguyễn Thị Lĩnh cộng sự, 1999); loài Chaetoceros lauderi Chaetoceros subtilis nuôi mật độ 5.103 tế bào/ml (Nguyễn Thị Kim Ánh, 2009); loài Thalassiosira sp nuôi mật độ 5.103 tế bào/ml (Nguyễn Tấn Đại, 2007) Nếu cấy chuyền mật độ xuất phát thấp không kích thích tăng trưởng vi tảo, dẫn đến tốc độ tăng trưởng chậm không ổn định, ngược lại cấy chuyền mật độ ban đầu cao, vi tảo cạnh tranh ánh sáng nguồn dinh dưỡng gây ức chế trình tăng trưởng Như việc xác định mật độ cần thiết cho loài cụ thể, mật độ lựa chọn để khảo sát N.palea 2,5.103 tế bào/ml; 5.103 tế bào/ml; 7,5.103 tế bào/ml; 10.103 tế bào/ml Ở hai mật độ thấp 2,5.103 tế bào/ml 5.103 tế bào/ml thời gian để thích nghi tế bào kéo dài ban đầu mật độ thấp nên tốc độ phân chia tế bào thấp, kết mật độ tế bào tốc độ tăng trưởng quẩn thể vi tảo môi trường nuôi thấp nhiều so với hai mật độ lại Ở mật độ 7,5.103 tế bào/ml mật độ tế bào cao đường cong tăng trưởng tốc độ tăng trưởng không ổn định Trong mật độ mật độ thích hợp 10.103 tế bào/ml Ở mật độ đường cong tăng trưởng ổn định, điển hình, tốc độ tăng trưởng tốt, thời gian tăng trưởng không dài, phù hợp để khảo sát điều kiện phòng thí nghiệm nên lựa chọn cho nghiệm thức Thời điểm lấy mẫu để bố trí thí nghiệm yếu tố quan trọng nghiên cứu sinh lí vi tảo, ảnh hưởng đến tốc độ tăng trưởng quần thể, đến chất lượng tế bào khả tăng sinh khối Nếu lấy mẫu cấy chuyền sớm vào ngày vi tảo pha thích nghi, đường cong tăng trưởng tốc độ tăng trưởng không ổn định Nếu lấy mẫu cấy chuyền quần thể bước vào pha cân bằng, lúc môi trường nuôi lượng sản phẩm thải nhiều, tốc độ tăng trưởng tế bào chậm, chất lượng tế bào suy giảm Vì vậy, thời điểm cấy chuyền thích hợp vào pha lũy thừa Các thời điểm lựa chọn để khảo sát ngày 3, Trong đó, cấy chuyền vào ngày thứ có đường cong tăng trưởng ổn định, tốc độ tăng trưởng tốt chọn cho thí nghiệm 3.2.3 Ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật 3.2.3.1 Ảnh hưởng AIA Trên giới có nghiên cứu chất điều hòa tăng trưởng thực vật vi tảo Theo TD Li, Doronina, Ivanova, & Trotsenko, 2007 Auxin phytohormone phổ biến thực vật, có tác dụng chủ yếu kéo dài tế bào thực vật tìm thấy tảo Sự diện cho biết có auxin ảnh hưởng đến phát triển tảo Những nghiên cứu phytohormone chúng thể có tiềm để tăng tốc độ tăng trưởng C.reinhardtii chúng sử dụng để tăng tốc độ tăng trưởng thực vật Auxin có tác dụng giống tảo thực vật bậc cao (Conrad H., et.al., 1959) Có nhiều báo cáo ảnh hưởng AIA lên tăng trưởng tảo nồng độ AIA quan trọng để xác định xem chúng có tác dụng thúc đẩy, ức chế ảnh hưởng lên tăng trưởng loài cụ thể (Yau P C., et al., 1971) Trái với nhiều thông tin trao đổi chất vận chuyển IAA thực vật cao, trao đổi chất AIA tảo biết đến (Sandberg et al., 1990, Ljung et al., 2005) Ở loài Coelastrum microporum Naeg., AIA nồng độ 30 ppm tác dụng đến sinh trưởng, nồng độ 100 ppm có tác dụng ức chế (Yau P C., et al., 1971) Đối với loài Chlorella pyrenoidosa, Scenedesmus obliquus, xử lý AIA 10-3 M lại không xảy tác dụng ức chế (Ahmad M R., et al., 1968) Ở loài Skeletonema costatum, xử lý AIA nồng độ 1010 g/ml 10-11 g/ml cải thiện tăng trưởng (Bentley J A., 1958) AIA nồng độ 10-6, 10-7, 10-8, 10-9 g/ml làm giảm tăng trưởng loài Chaetoceros lauderi Chaetoceros subtilis (Nguyễn Thị Kim Ánh, 2008) Pratt R (1937), Brannon M A cộng (1945) cho AIA có tác dụng kích thích nồng độ cao, Conrad H (1959) lại cho AIA nồng độ cao gây ức chế tảo lục Ulothrix Leonian cộng (1973) chứng minh ức chế AIA nồng độ 1ppm ảnh hưởng độc hại với 10 ppm lên tăng trưởng loài khác môi trường chứa đường Trong môi trường chuẩn bổ sung AIA nồng độ 10-6 g/ml tế bào N.palea có sắc tố nhạt, xuất tế bào có kích thước bất thường dài 3,8 µm so với môi trường chuẩn 6,5 µm Ngay ngày thứ tế bào có tượng thoát sắc tố môi trường nuôi ngày thứ quần thể vi tảo thực suy giảm, yếu tố mật độ tế bào, tốc độ tăng trưởng, CĐQH CĐHH thấp thấp nhiều so với chuẩn Kết tác động AIA nồng độ 10-6 g/ml ảnh hưởng xấu đến hoạt động tế bào, gây ức chế hoạt động sinh trưởng tế bào, làm cho tế bào có kích thước ngắn nhiều so với chuẩn Trong môi trường chuẩn bổ sung AIA nồng độ 10-8 g/ml ngày thứ xuất tế bào có kích thước dài tới 11,3 µm, môi trường bổ sung AIA nồng độ 10-10 g/ml vào ngày thứ sau cấy chuyền xuất tế bào có kích thước dài tới 10,6 µm, tế bào dài ảnh hưởng AIA nồng độ 10-8 g/ml, 10-10 g/ml Tuy nhiên phần lớn tế bào môi trường nuôi có kích thước bình thường, mật độ tế bào thấp, tốc độ tăng trưởng chậm, CĐQH CĐHH thấp tất yếu tố thấp nhiều so với chuẩn Từ kết kết luận AIA nồng độ 10-8 g/ml, 10-10 g/ml bổ sung vào môi trường gây ức chế cho tăng trưởng quần thể vi tảo, mặt khác kích thích tăng trưởng số tế bào dịch nuôi Trong môi trường chuẩn bổ sung AIA nồng độ 10-12 g/ml 10-14 g/ml sang tới ngày tế bào có tượng thoát sắc tố nồng độ cao 10-6 g/ml, 10-8 g/ml, 10-10 g/ml ngày có tượng tượng tế bào thoát sắc tố môi trường Các giá trị khác hai nồng độ 10-12 g/ml 10-14 g/ml mật độ tế bào, CĐQH, CĐHH cao so với nồng độ 10-6 g/ml, 10-8 g/ml, 10-10 g/ml AIA bổ sung vào môi trường Tuy nhiên giá trị thấp so với chuẩn Vì nồng độ thấp tiếp tục đưa vào khảo sát Môi trường chuẩn bổ sung AIA nồng độ 10-16 g/ml tế bào chậm thoát sắc tố nhiên giá trị mật độ tế bào, CĐQH, CĐHH thấp so với chuẩn có đường cong tăng trưởng không ổn định Môi trường chuẩn bổ sung AIA nồng độ 10-18 g/ml tế bào vi tảo có sắc tố đậm, đẹp, tới ngày có tượng dồn sắc tố, kích thước trung bình tế bào môi trường 7,5 µm so với chuẩn 6,5 µm Môi trường chuẩn bổ sung AIA nồng độ 10-20 g/ml tế bào vi tảo có sắc tố đẹp, tượng thoát sắc tố xảy chậm, kích thước trung bình tế bào môi trường 7,9 µm dài chuẩn 1,4 µm Các giá trị mật độ tế bào, CĐQH, CĐHH cao so với chuẩn Như vậy, bổ sung AIA nồng độ 10-18 g/ml 10-20 g/ml vào môi trường chuẩn có tác dụng kích thích trình trao đổi chất tế bào, dẫn đến kích thước tế bào to dài so với chuẩn, tăng khả phân chia tế bào dẫn đến mật độ tế bào cao, hoạt động sinh lí quang hợp, hô hấp tăng cao so với chuẩn Bên cạnh AIA nồng độ có tác dụng trì đường cong tăng trưởng dài Trong hai nồng độ AIA nồng độ 10-18 g/ml bổ sung vào môi trường có mật độ tế bào cao sắc tố đậm đẹp Vì vậy, hai nồng độ lựa chọn để khảo sát kết hợp với BA Qua thí nghiệm nhận thấy, môi trường bổ sung AIA nồng độ cao không thích hợp cho tăng trưởng vi tảo N.palea Khi hạ dần nồng độ xuống yếu tố khảo sát mật độ tế bào, đường cong tăng trưởng, tốc độ tăng trưởng CĐQH, CĐHH tăng lên Hai nồng độ thích hợp cho tăng trưởng N.palea AIA 10-18 AIA 10-20, AIA 10-18 thích hợp Giống vi tảo, thực vật bậc cao, việc xử lý auxin có tác dụng kích thích sinh trưởng nồng độ tương tự với nồng độ tối thích thường gặp thân thể thực vật Ở nồng độ cao, trái lại, ức chế sinh trưởng nhiều trường hợp trở thành độc tố Ở nồng độ đó, auxin có hiệu ứng khác trình sinh lý khác quan hay trình sinh lý quan khác (Bùi Trang Việt, 2000) Đối với rễ, auxin có tác dụng kích thích nồng độ thấp khoảng 1012 – 10-10 M (Võ Thị Bạch Mai, 2004) 3.2.3.1 Ảnh hưởng BA Cytokinin chất điều hòa tăng trưởng thực vật, thúc đẩy phân chia tế bào Cấu trúc giống cytokinin tìm thấy chất chiết xuất từ tảo xanh (Protococcus, Chlorella, Senedesmus) cho đóng vai trò tương tự thực vật bậc cao: thúc đẩy phân chia tế bào (Tarakhovskaya, Maslov, & Shishova, 2007) Việc áp dụng cytokinin vào vi tảo Theo Kadioğlu A., (1992) xử lý BA nồng độ 25 μM loài Chlamydomonas reinhardii làm gia tăng sắc tố quang hợp lại giảm nồng độ cao 50 – 100 μM Nồng độ 50 μM xử lý loài làm gia tăng quang hợp vào ngày Nồng độ 25 μM tăng cường giải phóng oxy so với nồng độ 50 μM vào ngày thứ BA làm gia tăng hàm lượng sắc tố quang hợp giải phóng oxy nồng độ khác Các nồng độ BA đưa khảo sát tương ứng với nồng độ AIA từ 10-6 g/ml 1020 g/ml Kết nhận tương tự với kết khảo sát AIA Khi bổ sung BA nồng độ 10-6 g/ml, 10-8 g/ml, 10-10 g/ml tế bào có sắc tố nhạt, mật độ tế bào thấp tới ngày tốc độ tăng trưởng bắt đầu giảm mạnh, quần thể nhanh chóng bước vào pha suy vong Các tiêu CĐQH, CĐHH thấp nhiều so với chuẩn Có lẽ nồng độ BA chưa có chênh lệch nhiều nên mức độ ảnh hưởng vi tảo không sai khác đáng kể Vì nồng độ gây ức chế hoạt động trao đổi chất hoạt động sinh lí khác tế bào Môi trường bổ sung BA nồng độ 10-12 g/ml 10-14 g/ml tượng thoát sắc tố diễn chậm, nhiên yếu tố khảo sát thấp so với chuẩn, chứng tỏ hạ nồng độ BA xuống tượng ức chế tăng trưởng tế bào giảm theo Ở môi trường bổ sung BA nồng độ 10-14 g/ml vào ngày xuất tế bào có kích thước bất thường to dài 8,1 µm Hiện tượng tác động BA nồng độ 10-14 g/ml kích thích hoạt động trao đổi chất tế bào, làm cho kích thước tế bào tăng mạnh Tuy nhiên phần lớn tế bào môi trường nuôi đạt kích thước trung bình tương đương với chuẩn Môi trường chuẩn bổ sung BA nồng độ 10-16 g/ml tế bào vi tảo chậm thoát sắc tố, kích thước trung bình tế bào môi trường 7,3 µm dài so với chuẩn 0,8 µm Như vậy, nồng độ bổ sung vào môi trường BA có tác dụng kích thích kéo dài tế bào vi tảo, nhiên mật độ trung bình thấp so với chuẩn đường cong tăng trưởng có đỉnh nhọn, không ổn định Các tiêu sinh lí khác CĐQH, CĐHH thấp so với chuẩn so với ngày đầu cao chuẩn vào ngày 5,6,7 cao vào ngày Môi trường chuẩn bổ sung BA nồng độ 10-18 g/ml tế bào vi tảo có sắc tố đậm đẹp chậm thoát sắc tố, kích thước trung bình tế bào môi trường 7,4 µm dài so với chuẩn 0,9 µm Trong môi trường mật độ tế bào cao chuẩn đường cong tăng trưởng có dạng điển hình dài chuẩn, vào ngày 10 mật độ tế bào môi trường chuẩn giảm mạnh môi trường bổ sung BA nồng độ 10-18 g/ml mật độ tế bào cao, tốc độ tăng trưởng nhanh, tiêu khác CĐQH, CĐHH cao so với chuẩn tăng mạnh vào ngày thứ 6, vào ngày giá trị CĐQH, CĐHH môi trường chuẩn giảm mạnh Như vậy, nồng độ BA có tác dụng kích thích làm tăng kích thước tế bào, tăng khả phân chia làm tăng mật độ tế bào trì sắc tố tế bào đậm đẹp, tăng tiêu sinh lí khác CĐQH, CĐHH, bên cạnh giúp trì đường cong tăng trưởng dài Vì nồng độ lựa chọn để bổ sung kết hợp với AIA Môi trường chuẩn bổ sung BA nồng độ 10-20 g/ml tế bào vi tảo chậm thoát sắc tố, kích thước trung bình tế bào môi trường 7,4 µm, dài so với chuẩn 0,9 µm Ở nồng độ bổ sung vào môi trường BA có tác dụng kích thích kéo dài tế bào vi tảo, nhiên mật độ trung bình thấp so với chuẩn đường cong tăng trưởng có đỉnh nhọn vào ngày nhanh chóng suy giảm, không ổn định Các tiêu sinh lí khác CĐQH, CĐHH thấp so với chuẩn vào ngày 3,4 cao chuẩn vào ngày 5,6,7 3.2.3.1 Ảnh hưởng kết hợp AIA BA Ở thực vật bậc cao, cytokinin làm chậm lão hóa, tăng kích thích hoạt động tổng hợp protein làm chậm thoái biến, ngăn cản màu diệp lục tố đặt tối…Cytokinin kích thích phân chia tế bào với điều kiện có auxin (Bùi Trang Việt, 2000) Các nồng độ AIA BA bổ sung riêng rẽ vào môi trường có tác dụng kích thích khả tăng trưởng vi tảo N palea lựa chọn để bổ sung kết hợp vào môi trường Hai nghiệm thức bố trí để so sánh với chuẩn AIA nồng độ 10-18 g/ml kết hợp BA nồng độ 10-18 g/ml AIA nồng độ 10-20 g/ml kết hợp BA nồng độ 10-18 g/ml Trong môi trường bổ sung AIA nồng độ 10-18 g/ml kết hợp BA nồng độ 10-18 g/ml tế bào vi tảo có sắc tố đậm đẹp ngày thứ 6, sang ngày có tượng dồn thoát sắc tố môi trường nuôi, tượng thoát sắc tố diễn chậm, tương đương với khả quang hợp hô hấp tế bào kéo dài Ở ngày thứ xuất tế bào có hình dạng kích thước bất thường, tế bào to dài khoảng 13,1µm, dài gấp đôi chuẩn Kích thước trung bình tế bào môi trường đạt 8,1 µm Kích thước tế bào tăng lên 1,6 µm so với chuẩn cao bổ sung riêng rẽ AIA BA vào môi trường Trong môi trường bổ sung AIA nồng độ 10-18 g/ml kết hợp BA nồng độ 10-18 g/ml CĐQH, CĐHH cao Tiếp đến môi trường bổ sung AIA nồng độ 10-20g/ml kết hợp BA nồng độ 10-18 g/ml Môi trường chuẩn BG 11 có CĐQH, CĐHH thấp hẳn so với hai môi trường bổ sung AIA BA kết hợp Như vậy, bổ sung đồng thời AIA BA nồng độ thích hợp vào môi trường có tác dụng kích thích, làm tăng hoạt động trao đổi chất hoạt động sinh lí khác tế bào lên cách rõ rệt Bên cạnh đó, chúng trì sắc tố đường cong tăng trưởng dài so với môi trường chuẩn Chương KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1.Kết luận Qua kết thu được, xin rút số kết luận sau:  Nitzschia sp nghiên cứu đề tài loài Nitzschia palea Kützing  Loài vi tảo tăng trưởng tốt môi trường BG 11 Với đường cong tăng trưởng dạng chữ S, tốc độ tăng trưởng cao, sắc tố tế bào đậm Mật độ nuôi cấy thích hợp 10.103 tb/ml, thời gian cấy chuyền thích hợp ngày thứ  Môi trường chuẩn bổ sung AIA nồng độ 10-18 g/ml 10-20 g/ml thích hợp cho tăng trưởng hoạt động quang hợp, hô hấp vi tảo Nitzschia palea tốt nồng độ lại  Môi trường chuẩn bổ sung BA 10-18 g/ml cho kết tốt BA nồng độ lại có tác động tích cực lên hoạt động tế bào vi tảo  Khi kết hợp AIA 10-18 g/ml với BA 10-18 g/ml AIA 10-20 g/ml với BA 10-18 g/ml cho kết mật độ tế bào, tốc độ tăng trưởng cường độ quang hợp cường độ hô hấp tốt tất nghiệm thức Trong môi trường chuẩn bổ sung AIA nồng độ 10-18 g/ml kết hợp với BA 10-18 g/ml tốt 4.2.Đề nghị: Nếu có điều kiện, tiếp tục:  Nghiên cứu ảnh hưởng chất điều hòa sinh trưởng thực vật khác lên tăng trưởng loài vi tảo  Nghiên cứu ảnh hưởng chất khoáng đa lượng vi lượng lên tăng trưởng loài vi tảo TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Trương Ngọc An, 1993 Phân loại tảo silic phù du biển Việt Nam Hà Nội: Khoa học Kỹ thuật, tr 3-201 Nguyễn Thị Kim Ánh, 2008 Nghiên cứu ảnh hưởng của số điều kiện môi trường lên sinh trưởng vi tảo Chaetoceros lauderi Rales Chaetoceros subtilis Cleve phân lập từ biển Cần Giờ Thành phố Hồ Chí Minh Luận văn thạc sĩ, chuyên ngành sinh học thực nghiệm, hướng sinh lí thực vật Trường đại học khoa học tự nhiên, Đại học quốc gia Tp Hồ Chí Minh Nguyễn Minh Châu, 2006 Phương pháp thí nghiệm đồng Giáo trình cao học, Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia TP HCM, tr 1-34 [tài liệu lưu hành nội bộ] Nguyễn Lân Dũng, Nguyễn Hoài Hà, 2006 Vi tảo Tài liệu trực tuyến (http://vietsciences.free.fr/khaocuu/nguyenlandung/vitao02.htm) Nguyễn Tấn Đại, 2007 Khảo sát ảnh hưởng số điều kiện nuôi trồng tăng trưởng số loài tảo silic thủy vực ven bờ biển Cần Giờ, Tp Hồ Chí Minh Luận văn thạc sĩ, chuyên ngành sinh học thực nghiệm, hướng sinh lí thực vật Trường đại học khoa học tự nhiên, Đại học quốc gia Tp Hồ Chí Minh Phạm Hoàng Hộ, 1972 Tảo học Sài Gòn: Trung tâm học liệu, Bộ Giáo dục, tr 97-111 Lê Thị Phương Hồng, Bùi Trang Việt, Phạm Thành Hổ, 1997 Sự diện vai trò chất điều hòa tăng trưởng thực vật tảo lam Spirulina platensis Tập san Khoa học Kỹ thuật Nông lâm nghiệp, Trường Đại học Nông lâm Tp Hồ Chí Minh, số tháng 3, tr 69-72 Lê Thị Phương Hồng, Hà Huy Phúc, Bùi Trang Việt, 2002 Vai trò hormon tăng trưởng thực vật tảo Chlorella pyrennoidosa bị sốc nhiệt Tập san Khoa học Kỹ thuật Nông lâm nghiệp, Trường Đại học Nông lâm Tp Hồ Chí Minh, số tháng 1, tr 62 – 66 Dương Công Kiên, 2002 Nuôi cấy mô thực vật Đại học quốc gia Tp Hồ Chí Minh, tr.15-30 10 Đặng Đình Kim, Đặng Hoàng Phước Hiền, 1999 Công nghệ sinh học vi tảo (Giáo trình cao học sinh học) Hà Nội: Nông nghiệp, tr 5-53 11 Nguyễn Thị Lĩnh, Nguyễn Hữu Đại, Phạm Hữu Trí, Nguyễn Xuân Hòa, 1999 Phân lập nghiên cứu ảnh hưởng số yếu tố môi trường phát triển tảo Nitzschia sp (Pennales – Bacillariophyceae) Nhà xuất khoa học kỹ thuật, tuyển tập nghiên cứu biển, số 9, trang 296 – 306 12 Võ Thị Bạch Mai, 2004 Sự phát triển chồi rễ Đại học quốc gia Tp Hồ Chí Minh, tr 11-63 13 Nguyễn Thanh Tùng, 1999 Tài nguyên sinh thái rong Tp Hồ Chí Minh: Tủ sách đại học khoa học tự nhiên, tr 14-17 14 Bùi Trang Việt, 2000 Sinh l ý thực vật đại cương Phần II: Phát triển TP HCM: Đại học Quốc gia TP HCM, tr 26-97 15 Bùi Trang Việt, 2002 Sinh lý thực vật đại cương Phần I: Dinh dưỡng TP HCM: Đại học Quốc gia TP HCM, tr 114-119 Tài liệu tiếng nước 16 Abel, R A., Olson, D M., Dinerstein, E., Hurley, P Eds 2000 Freshwater ecoregions of North America: A conservation assessment World Wildlife Fund, Washington, DC 17 Admiraal, W., Mylius, S D., de Ruijter van Steveninck, E D., Tubbing, D M J 1993 A model of phytoplankton production in the lower River Rhine verified by observed changes in silicate concentration Journal of Plankton Research 15:659– 682 18 Ahmad M.R., Winter A., 1968, Studies on the hormonal relationships of algae in pure culture Planta (Berl.), Vol 78 (3) p 277-286 19 Allen E J., Se D., F R S., 1914 On the culture of the plankton diatom Thalassiosira gravida Cleve, in artificial sea-water Journ Mar Biol Assoc., New series Vol 10 (3), p 417- 429 20 Aloi, J E 1990 A critical review of recent freshwater periphyton field methods Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences 47:656–670 21 Andersen, R A., Ed (2005), Algal Culturing Techniques, Elsevier Academic Press, Burlington 22 Barbera, , C., Bordehore, C., Borg, J A., Glemarec, M., Grall, J., Hall-Spencer, J M., De La Huz, 2003, Conservation and management of northeast Atlantic and Mediterranean maerl beds, Aquatic Conservation: Marine and Freshwater Ecosystems, p 65–76 23 Barsanti L., Gualtieri P., 2006 Algae Anatomy, Biochemistry and Biotechnology Taylor & Francis Group, p 244 -250 24 Bentley J A., 1958 Role of plant hormones in algal metabolism and ecology Nature, vol 181, p 1499 – 1502 25 Bentley J A., 1960 Plant hormones in marine phytoplankton, zooplankton and sea water J Mar Biol Ass., Vol 39, p 433-444 26 Blackburn S., 1989, Marine Research, Commonwealth Scientific and Industrial Research Organization, Hobart, Australia 27 Brannon M A., Sell H M., 1945 The effect of indole-3-acetic acid on the dry weight of Chlorella pyrenoidosa American J Bot., Vol 32 (5), p 257-258 (Abstract) 27 Conrad H., Saltman P., Eppley R., 1959 Effects of auxin and gibberellic acid on growth of Ulothrix Nature, Vol 184, p 556 – 557 29 Evans, J C., Arts, M T., Robarts, R D 1996 Algal productivity, algal biomass, and zooplankton biomass in a phosphorus-rich, saline lake: deviations from regression model predictions Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences 53:1048– 1060 30 Findlay, S., Likens, G E., Hedin, L., Fisher, S G., McDowell, W H 1997 Organic matter dynamics in Bear Brook, Hubbard Brook Experimental Forest, New Hampshire, USA Journal of the North American Benthological Society 16:43–46 31 Guillard G R L., Sieracki M S., 2005 Counting cells in cultures with the light microscope In: Andersen RA (ed.) Algal culturing techniques Amsterdam: Elsevier Academic Press, p 239-252 32 Hamilton, P B., Edlund, S A 1994 Occurrence of Prasiola fluviatilis (Chlorophyta) on Ellesmere Island in the Canadian Arctic Journal of Phycology 30:217–221 33 Hasle, G R 1980 Examination of Thalassiosira type material: T minima and T.delicatula (Bacillariophyceae) Norw J Bot., Vol 27, p 167-173 34 Hasle G R., Syvertsen E E 1997 Marine Diatoms In: Tomas, C.R , Identifying Marine Diatoms and Dinoflagellates Academic Press., p 5–385 35 Iwatani N., Murakami S., Suzuki Y., 2005 A sequencing protocol of some DNA regions in nuclear, chloroplastic and mitochondrial genomes with an individual colony of Thalassiosira nordenskioeldii Cleve (Bacillariophyceae) Polar Biosci., Vol 18, p 35- 45 36 Leonian L H., Lilly V G., 1973 Is heteroauxin a growth-promoting substance? Amer J Bot., Vol 24, p 135 – 139 37 Lowe, R L 1996 Periphyton patterns in lakes, in: Stevenson, R J., Bothwell, M L., Lowe, R L., Eds., Algal ecology: Freshwater benthic ecosystems Academic Press, San Diego, pp 57–76 38 Lowe, R L., Pan, Y 1996 Benthic algal communities as biological monitors, in: Stevenson, R J., Bothwell, M L., Lowe, R L., Eds., Algal ecology: Freshwater benthic ecosystems Academic Press, San Diego, pp 705–739 39 Lowe, D.R and Byerly, G R (1999) Geological evolution of the Barberton greenstone belt, South Africa Geological Society of America Special Paper 329, 319 p 40 Oliver, R L., Ganf, G G 2000 Freshwater blooms, in: Whitton, B A., Potts, M., Eds., The ecology of cyanobacteria: Their diversity in time and space Kluwer, Dordrecht, pp 149–194 41 Palmer, J D., Round, F E 1965 Persistent, vertical-migration rhythms in benthic microflora I The effect of light and temperature on the rhythmic behavior of Euglena obtusa Journal of the Marine Biology Association of the United Kingdom 42 Parker, B C., Wenkert, L J., Parson, M J 1991 Cause of the metalimnetic oxygen maximum in Mountain Lake, Virginia Journal of Freshwater Ecology 6:293–303 43 Parker, N S., Negri, A P., Frampton, D M F., Rodolfi, L., Tredici, M R., and Blackburn, S I., 2002 Growth of the toxic dinoflagellate Alexandrium minutum (Dinophyceae) using high biomass culture systems, Journal of Applied Phycology, 14, 313–324 44 Peterson, C G 1996 Response of benthic algal communities to natural physical disturbance, in: Stevenson, R J., Bothwell, M L., Lowe, R L., Eds., Algal ecology: Freshwater benthic ecosystems Academic Press, San Diego, pp 375–402 45 Pratt R., 1937 Influence of auxins on the growth of Chlorella vulgaris Amer J Bot., Vol 25, p 498 – 501 46 Roberts, D A., Boylen, C W 1989 Effects of liming on the epipelic algal community of Woods Lake, New York Canadian Journal of Fisheries and Aquatic Sciences 46:287 -294 47 Round, F E 1972 Patterns of seasonal succession of freshwater epipelic algae British Phycological Journal 7:213–220 48 Smith, T E., Stevenson, R J., Caraco, N F., Cole, J J 1998 Changes in phytoplankton community structure during the zebra mussel (Dreissena polymorpha) invasion of the Hudson River Journal of Plankton Research 20:1567– 1579 49 Stirk W A., Ördög V., Staden J V., Jäger K., 2002, Cytokinin – and auxin – like activity in cyanophyta and microalgae Journal of applied phycology, Vol 14, p 215-221 50 Taylor & Francis Group, 2006 Algae: Anatomy, Biochemistry, and Biotechnology, pp: 2-18; 181- 249 51 Tuchman, M L., Stevenson, R J 1980 Comparison of clay tile, sterilized rock, and natural substrate diatom communities in a small stream in southeastern Michigan, USA Hydrobiologia 75:73–79 52 Whitton, B A 1975 Algae, in: Whitton, B A., Ed., River ecology Blackwell Science, Oxford, UK, pp 81–105 53 Wood A M., Everroad R C., Wingard L M., 2005 Measuring growth rates in microalgal cultures In: Andersen RA (ed.) Algal culturing techniques Amsterdam: Elsevier Academic Press, p 269 – 285 54 Yau P.C., Chan K.Y., 1971 Some physiological responses of two strains of Coelastrum microporum Naeg after auxin treatment ( tài liệu trực tuyến http://sunzi.lib.hku.hk/hkjo/view/34/3400235.pdf.) [...]... sinh lý vi tảo khá phổ biến nhưng ở Vi t Nam, phương pháp này vẫn chưa được áp dụng rộng rãi Vai trò của các chất điều hòa sinh trưởng thực vật được hiểu biết và sử dụng rộng rãi ở thực vật bậc cao nhưng với vi tảo còn nhiều hạn chế Từ những thực tế trên, chúng tôi chọn đề tài: Tìm hiểu ảnh hưởng của auxin và cytokinin đến sự tăng trưởng của vi tảo Nitzschia sp. ” Mục tiêu của đề tài:  Phân lập và định... tượng Nitzschia sp qua quan sát hình thái, cấu trúc vỏ silic dưới kính hiển vi điện tử quét và bằng phương pháp sinh học phân tử  Tìm môi trường nuôi cấy, mật độ tế bào xuất phát, thời điểm cấy chuyền thích hợp cho sự tăng trưởng của loài vi tảo này  Tìm hiểu ảnh hưởng của các chất điều hòa sinh trưởng thực vật là auxin và cytokinin ở các nồng độ khác nhau đến sự tăng trưởng của Nitzschia sp Đề tài... pyrenoidosa có tác dụng kích thích sự tăng trưởng tế bào trong nuôi cấy in vitro (Lê Thị Phương Hồng và cộng sự, 2002) Ảnh hưởng của AIA và GA 3 đến loài Chaetoceros subtilis và Chaetoceros lauderi (Nguyễn Thị Kim Ánh, 2008) Bước đầu khảo sát ảnh hưởng của các chất điều hòa sinh trưởng thực vật đến sự tăng trưởng của vi tảo Thalassiosira sp (Huỳnh Thị Ngọc Như, 2010) Trên thế giới, vi c sử dụng môi trường nuôi... thức về nuôi cấy tảo trong các thập kỷ của thế kỷ 19 (Andersen, 2005) Ở Vi t Nam, đã có những nghiên cứu về ảnh hưởng của chất điều hòa sinh trưởng thực vật lên tảo như: Nghiên cứu sự hiện diện và vai trò của các chất điều hòa tăng trưởng thực vật ở tảo lam Spirulina plantensis (Lê Thị Phương Hồng, Bùi Trang Vi t, Phạm Thành Hổ, năm 1997) Chất trích chứa hormon tăng trưởng thực vật từ tảo Chlorella pyrenoidosa... chuyền thích hợp 35 Bảng 2.2 : Thí nghiệm ảnh hưởng của AIA lên sự sinh trưởng vi tảo 38 Bảng 2.3: Thí nghiệm ảnh hưởng của BA lên sự sinh trưởng vi tảo 38 Bảng 3.1: Mật độ tế bào Nitzschia palea trong các môi trường Half Strength Chu #10, Combo và BG -11 47 Bảng 3.2: Tốc độ tế bào Nitzschia palea trong các môi trường HS Chu #10, Combo và BG 11 48 Bảng 3.3: Mật độ... độ ánh sáng, nhiệt độ và chất dinh dưỡng có sẵn Giai đoạn tăng trưởng theo cấp số nhân thường diễn ra trong một thời gian ngắn, bởi vì tảo bị ức chế khi nồng độ tế bào gia tăng, thêm vào đó là các chất dinh dưỡng, độ pH, lượng khí CO 2 và các yếu tố vật chất khác bắt đầu hạn chế sự tăng trưởng Vì vậy, quần thể vi tảo đi vào giai đoạn chậm phát triển và giảm tỉ lệ tăng trưởng của tế bào Sau giai đoạn... Francis Group, 2006) 1.8 Các yếu tố ảnh hưởng đến sự sinh trưởng của vi tảo 1.8.1 Ánh sáng Ánh sáng là nguồn năng lượng cung cấp cho quá trình quang hợp của vi tảo Cường độ ánh sáng đóng vai trò quan trọng, nhưng những yêu cầu về thay đổi theo chiều sâu bình nuôi và mật độ nuôi của tảo: ở độ sâu lớn hơn và nồng độ tế bào cao cường độ ánh sáng phải được tăng lên để xâm nhập vào môi trường nuôi cấy Cường độ... 2007) Sự hiện diện này cho biết rằng đã có auxin ảnh hưởng đến sự phát triển tảo Những nghiên cứu về phytohormone chỉ ra rằng chúng thể có tiềm năng để tăng tốc độ tăng trưởng của Chlamydomonas reinhardtii bởi vì chúng được sử dụng để tăng tốc độ tăng trưởng trong các thực vật (Tarakhovskaya, Maslov, & Shishova, 2007) Trái với nhiều thông tin về trao đổi chất và vận chuyển của IAA trong thực vật, sự trao... tảo Trong dịch chiết của cỏ biển có sự hiện diện của auxin ở loài Ulva pertusa, Undaria pinnatifida, Hizikia fusiforme và cytokinin ở loài Laminari và Fucus,… (Bradley P.M., 1991) Như vậy, phytohormones đã được chứng minh có ảnh hưởng đến các loại vi tảo Ngoài ra còn có nhiều bằng chứng cho rằng môi trường nuôi cấy và các chất chiết xuất từ vi tảo có thể có tác dụng kích thích tăng trưởng thực vật (Lie... khác, auxin và các dẫn xuất tổng hợp của nó không để kích thích sự tăng trưởng của tảo đơn bào trong nuôi cấy, chẳng hạn như Euglena gracilis và Chlorella sp (Hanisak năm 1979, Ma et al., 2002) Các isopentenyladenine cytokinin (mạng IP) đã được quan sát trong Arthronema africanum (Stirk et al., năm 1999); zeatin, zeatin riboside, và cytokinin thơm, phức hợp topolin, đã được xác định trong vi tảo màu ...BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC SƯ PHẠM TP HỒ CHÍ MINH Lê Thị Nụ TÌM HIỂU ẢNH HƯỞNG CỦA AUXIN VÀ CYTOKININ ĐẾN SỰ TĂNG TRƯỞNG CỦA VI TẢO NITZSCHIA SP Chuyên ngành : Sinh học... 3.8 Ảnh hưởng auxin nồng độ khác lên sinh trưởng vi tảo Nitzschia palea 54 3.9 Ảnh hưởng cytokinin nồng độ khác lên sinh trưởng vi tảo Nitzschia palea 70 3.10 Ảnh hưởng. .. Tìm hiểu ảnh hưởng auxin cytokinin đến tăng trưởng vi tảo Nitzschia sp. ” Mục tiêu đề tài:  Phân lập định danh đối tượng Nitzschia sp qua quan sát hình thái, cấu trúc vỏ silic kính hiển vi điện