TRNG I HC S PHM H NI KHOA HểA HC -o0o - NG NGC BCH NGHIấN CU PHN LP CC HP CHT TRITECPEN T CY BC BC (MALLOTUS PANICULATUS) KHểA LUN TT NGHIP I HC Chuyờn nghnh: Húa hu c Ngi hng dn khoa hc TS Nguyễn Hoài Nam H NI - 2011 LI CM N Khúa lun tt nghip ny c hon thnh ti phũng Dc liu Bin, Vin Húa sinh bin-Vin Khoa hc v Cụng ngh Vit Nam Trc tiờn, em xin chõn thnh cm n TS Nguyn Hoi Nam v cỏc anh ch Vin Húa sinh bin - Vin khoa hc v Cụng ngh Vit Nam ó nhit tỡnh hng dn em sut quỏ trỡnh thc hin khúa lun tt nghip Vi tt c lũng kớnh trng v lũng bit n chõn thnh em xin cm n thy giỏo TS Nguyn Vn Bng ngi ó tn tỡnh, chu ỏo dy bo em sut nhng nm hc trng v hon thin khúa lun Em xin chõn thnh cm n cỏc thy cụ khoa Húa hoc - Trng HSP H Ni ó to iu kin v giỳp , dy d em quỏ trỡnh hc ti trng Xin cm n tt c cỏc bn bố ó ng viờn giỳp em quỏ trỡnh hc v lm khúa lun Trong quỏ trỡnh lm khúa lun tt nghip ny mc dự ó ht sc c gng nhng chc chn khụng th trỏnh c nhng thiu sút Vỡ vy em kớnh mong nhn c ý kin úng gúp, ch bo ca cỏc quý thy cụ Em xin chõn thnh cm n! H Ni, thỏng 05 nm 2011 Sinh viờn ng Ngc Bỏch LI CAM OAN Khúa lun Nghiờn cu v phõn lp cỏc hp cht tritecpen t cõy Bc bc l cụng trỡnh nghiờn cu ca riờng tụi di s hng dn trc tip ca TS Nguyn Hoi Nam Tụi xin cam oan Cỏc s liu, kt qu khúa lun ny l trung thc, khụng trựng lp vi cỏc khoa lun trc õy Sinh viờn ng Ngc Bỏch MC LC M U CHNG 1: TNG QUAN 1.1 Nhng nghiờn cu tng quan v cõy Bc bc 1.1.1 Thc vt hc 1.1.2 Phõn b sinh thỏi 1.1.3 Cụng dng 1.1.4 Thnh phn húa hc 1.2 Gii thiu s lc v tecpen 1.3 Tng quan v cỏc phng phỏp chit mu thc vt 1.3.1 Chn dung mụi chit 1.3.2 Quỏ trỡnh chit 10 I.4 Tng quan v phng phỏp sc kớ 11 1.4.1 c im chung ca phng phỏp sc kớ 11 1.4.2 C s ca phng phỏp sc kớ 11 1.4.3 Phõn loi cỏc phng phỏp sc kớ 12 1.4.3.1 Sc kớ ct 12 1.4.3.2 Sc kớ lp mng 13 1.5 Mụt s phng phỏp húa lớ ng dng xỏc nh cu trỳc ca cỏc hp cht hu c 14 - Ph hng ngoi (Infraed Spectroscopy-IR) 14 - Ph lng(Mass spectroscopy - MS) 14 - Ph cng hng t ht nhõn (Nuclear Magnetic Resonance Spectroscopy-NMR) 15 CHNG 2: I TNG V PHNG PHP NGHIấN CU 18 2.1 Mu thc vt 18 2.2 Phng phỏp phõn lp cỏc hp cht 18 2.2.1 Sc kớ lp mng (TLC) 18 2.2.2 Sc kớ lp mng iu ch 18 2.2.3 Sc kớ ct (CC) 18 2.3 Phng phỏp xỏc nh cu trỳc húa hc ca cỏc hp cht 19 2.3.1 im núng chy (Mp) 19 2.3.2 Ph lng (ESI-MS) 19 2.3.3 Ph cng hng t ht nhõn 19 2.3.4 quay cc []D 19 CHNG 3: THC NGHIM 20 3.1 X lý mu thc vt 20 3.2 Phõn lp cỏc hp cht 20 3.3 Hng s vt lý v s liu ph ca cỏc hp cht phõn lp 22 3.3.1 Hp cht MP2 22 3.3.2 Hp cht MP3 22 CHNG KT QU V THO LUN 24 4.1 Xỏc nh cu trỳc ca hp cht MP2 24 4.2 Xỏc nh cu trỳc ca hp cht MP3 27 KT LUN 31 TI LIU THAM KHO 32 DANH MC CC CH VIT TT WHO World Health Organization T chc Y tờ th gi International Union for Liờn minh Quc t bo Conservation of Nature and tn thiờn nhiờn v ti Natural Resources nguyờn thiờn nhiờn []D Specific Optical Botation quay cc TLC Thin Layer Chromatography Sc kớ lp mng IUCN SKLM CC Sc kớ lp mng Clolumm chromatography Sc kớ ct M paniculatus Mallotus paniculatus IR In Frared Spectroscopy Ph hng ngoi MS Mass Spectroscopy Ph lng EI MS Electron Impact Mass Ph lng va chm Spectrometry electron Electron Spray Ionization Ph lng phu mự Mass Spectranetry in t Fast Atom Bombing Mass ph bn phỏ nguyờn t Spectroscopy nhanh mc nng lng ESI MS FAB thp FAB MS NMR 13 C-NMR Fast Atom Bomb bradment Ph lng bn phỏ Mass Spectronmetry nguyờn t nhanh Nuclear Magnetic Resonance Ph cng hng t ht Spectroscopy nhõn cacbon-13-Nuclear Magnetic Ph cng hng t ht Resonance Spectroscopy nhõn cacbon 13 H-NMR DEPT proton Magnetic Resonance Ph cng hng t ht Spectroscopy nhõn proton Distortion less Enhacemant By Polarisation Trafer 2D - NMR TWO-Dimensional Nuclear Ph cng hng t ht Magnetic Resonance nhõn hai chiu Spectroscopy HMBC Heteronuclear Multiple Bond Connectivily HMQC Heteronuclear Multiple Quantum Coherence H - 1H COSY H - 1H Chemical Shiff Correlation Spectroscopy NOESY Nucler Over hauser Effect Spectroscopy DANH MC CC HèNH V V BNG BIU Hỡnh I.1.1 Cõy Bc bc - Mallotus paniculatus Hỡnh III.2a S chit phõn on 21 Hỡnh III.2b S phõn lp hp cht ký hiu MP2 v MP3 21 Hỡnh IV.2.a Ph 1H-NMR ca MP2 24 Hỡnh IV.2.b Cu trỳc ca MP2 24 Hỡnh IV.2.c Ph 13C-NMR ca MP2 25 Hỡnh IV.2.d Ph DEPT ca MP2 26 Hỡnh IV.2.e Ph ESI-MS ca MP2 27 Hỡnh IV.3.a Ph 1H-NMR ca MP3 28 Hỡnh IV.3.b Cu trỳc ca MP3 28 Hỡnh IV.3.c Ph 13C-NMR ca MP3 29 Hỡnh IV.3.d Ph DEPT ca MP3 30 Bng IV.2 S liu ph NMR ca MP2 25 Bng IV.3 S liu ph NMR ca MP3 29 Trng i Hc S Phm H Ni Khúa lun tt nghip M U Theo t chc y t th gii WHO, cú 80% dõn s th gii nm khu vc cỏc nc ang phỏt trin v 80% dõn s cỏc nc ang phỏt trin s dng tho dc nh mt la chn hng u iu tr v chm súc sc kho Theo d oỏn, dõn s th gii s t 10 t ngi vo na cui th k 21 Vi s gia tng dõn s khng l, nhu cu s dng hiu qu cỏc phng phỏp chm súc sc khe cng ng ngy cng l mt thỏch thc ln i vi ton nhõn loi Cựng vi s cn kit ca cỏc nhiờn liu t nhiờn nh than ỏ, du m, vic s dng cỏc dc phm tng hp cng s gp rt nhiu khú khn Bờn cnh ú, vic phỏt sinh cỏc loi bnh mi cng nh s khỏng thuc ca cỏc nhõn t viờm nhim cng l mt thỏch thc ln cn gii quyt Hng i phự hp gii quyt cỏc trờn cú l l phỏt trin cỏc dc phm mi cú ngun gc thc - ng vt phc v cho vic chm súc sc khe v kộo di tui th ngi Vit Nam l quc gia nm vựng nhit i, cú iu kin thun li cho cỏc sinh vt phỏt trin v to s phong phỳ ca nhiu loi ng thc vt v nhiu h sinh thỏi khỏc Theo thng kờ tip cn cỏc ngun gen v chia s li ớch (ca t chc bo tn thiờn nhiờn th gii-IUCN), thỡ Vit Nam tn ti gn 12.000 loi thc vt bc cao thuc hn 2.256 chi, 305 h chim 57% tng s h thc vt trờn th gii Cú 69 loi thc vt ht trn; 12.000 loi thc vt ht kớn; 2.200 loi nm; 2176 loi to; 481 loi rờu; 368 loi vi khun lam; 691 loi dng x v hng 100 loi khỏc õy chớnh l kho ti nguyờn thiờn nhiờn vụ giỏ vi ngun dc liu phong phỳ v a dng vo hng bc nht trờn th gii Cựng vi s a dng thiờn nhiờn mang li, Vit Nam cũn l mt nhng quc gia cú nhiu kinh nghim vic s dng cỏc thc vt ng Ngc Bỏch K33A - Khoa Húa hc Trng i Hc S Phm H Ni Khúa lun tt nghip v sinh vt cỏc bi thuc y hc c truyn So vi Tõy dc, cỏc bi thuc y hc c truyn cú rt nhiu u im cha bnh nh ớt c tớnh, ớt cú tỏc dng ph, d tỡm nguyờn liu Chớnh vỡ vy nhiu cụng ty dc phm v ngoi nc ó v ang trung hng nghiờn cu v kinh doanh vo cỏc sn phm thuc cú ngun gc t thiờn nhiờn Vic nghiờn cu trung ó thỳc y cỏc hng nghiờn cu tỡm kim dc liu t thiờn nhiờn, qua nghiờn cu cỏc nh khoa hc ó tỡm nhiu loi thc vt cú ng dng cao y dc nh nhõn sõm - Panax ginseng, hao hoa vng Artemisia annua, an sõm - Salvia miltiorrhiza Nhng kt qu nghiờn cu ny ó giỳp cho vic cung cp cỏc hot cht quý cho nghiờn cu to cỏc sn phm phc v chm súc sc khe cng ng Trong s cỏc loi thc vt ca Vit Nam, cỏc loi thc vt thuc h Thu du hin ang thu hỳt s quan tõm ca nhiu nh khoa hc trờn th gii v Vit Nam Cỏc nghiờn cu v h thu du ó gúp phn tỡm nhiu loi thc vt tim nng nh loi Kh sõm, loi Dip h chõu v loi Mallotus Khúa lun tt nghip ny trung vo Nghiờn cu phõn lp cỏc hp cht tritecpen t cõy Bc Bc-Mallotus paniculatus vi mc tiờu: Phõn lp c mt s hp cht tritecpen t cõy Bc Bc; Xỏc nh c cu trỳc húa hc ca cỏc hp cht ó phõn lp ng Ngc Bỏch K33A - Khoa Húa hc Trng i Hc S Phm H Ni Khúa lun tt nghip CHNG 2: I TNG V PHNG PHP NGHIấN CU 2.1 Mu thc vt Cõy Bc Bc c thu hỏi vo thỏng 02 nm 2011 ti Tam o, Vnh Phỳc Mu cõy c GS.TS Nguyn Ngha Thỡn, i hc Khoa hc T nhiờn - i hc Quc gia H Ni giỏm nh Mu tiờu bn c lu gi ti Phũng tiờu bn Vin Sinh thỏi v Ti nguyờn Sinh vt, Vin Khoa hc v Cụng ngh Vit Nam 2.2 Phng phỏp phõn lp cỏc hp cht 2.2.1 Sc kớ lp mng (TLC) Sc kớ lp mng c thc hin trờn bn mng sn DC-Alufolien 60 F254 (Marck 1,05715), RP18 F254S (Merck) Phỏt hin bng ốn t ngoi hai bc súng 254nm v 368nm hoc dựng thuc th l dung dch H2SO4 10% c phun u trờn bn mng, sy khụ ri h núng trờn bp in t t ti xut hin mu 2.2.2 Sc kớ lp mng iu ch Sc kớ lp mng iu ch c thc hin trờn bn mng sn silicagel 60G F254 (Merck, kớ hiu l 105875), phỏt hin cht bng ốn t ngoi hai bc súng 254nm v 368nm, hoc ct rỡa bn mng phun thuc th l dung dch l H2SO4 10%, h núng phỏt hin vt cht, ghộp li bn mng nh c xỏc nh vựng cht, sau ú co lp silicagel cú cht, gii hp ph bng dung mụi thớch hp 2.2.3 Sc kớ ct (CC) Sc kớ ct c tin hnh vi cht hp ph l silicagel pha thng v pha o Silicagel pha thng cú kớch thc ht l 0,040-0,063 mm (240-430 mesh) Silicagel pha o ODS hoc YMC (30-50m, Fujisilisa Chemical Ltd.) ng Ngc Bỏch 18 K33A - Khoa Húa hc Trng i Hc S Phm H Ni Khúa lun tt nghip 2.3 Phng phỏp xỏc nh cu trỳc húa hc ca cỏc hp cht 2.3.1 im núng chy (Mp) im núng chy c o trờn mỏy Kofler micro-hotstage ca Vin Húa hc 2.3.2 Ph lng (ESI-MS) Ph lng phun mự in t (Electron Spray Ionization Mass Spectra) c o trờn mỏy AGILENT 1100 LC-MSD Trap ca Vin Húa Hc, Vin khoa hc v cụng ngh Vit Nam 2.3.3 Ph cng hng t ht nhõn Ph cng hng t ht nhõn (NMR): 1H-NMR (500 MHz) v 13 C- NMR (125MHz) c o trờn mỏy Bruker AM500 FT-NMR Spectrorneter, Vin Húa Hc, Vin khoa hc v cụng ngh Vit Nam 2.3.4 quay cc []D quay cc c o trờn mỏy JASCO DIP-1000 KUY polarimeter ca vin Húa hc, Vin Khoa hc v Cụng ngh Vit Nam ng Ngc Bỏch 19 K33A - Khoa Húa hc Trng i Hc S Phm H Ni Khúa lun tt nghip CHNG 3: THC NGHIM 3.1 X lý mu thc vt Mu Mallotus paniculatus sau thu v c tin hnh bo qun v lu gi phũng lu gi mu ca Vin Sinh thỏi v Ti nguyờn Sinh vt m bo mu khụng b hng v mt tiờu bn, tin cho vic tra cu v tỡm thụng tin sau ny Mu Mallotus paniculatus c sy khụ hoc phi khụ Cõn lng mu thu c v xay mu (Tu theo loi mu thc vt: lỏ, thõn hoc r s dng cỏc thit b xay v nghin mu khỏc nhau) La chn dung mụi chit mu, nghiờn cu ny dung mụi MeOH c la chn lm dung mụi chit Mu thc vt c tin hnh chit bng dung mụi ó c la chn bc trờn thit b chit siờu õm (Ultrasonic 2010, 950W) nhit 40-50oC, thi gian chit mi ln ti thiu 60 phỳt Dch chit c lc qua giy lc (Whatman, d=240nm, No 1) gp li v tin hnh ct loi dung mụi di ỏp sut gim nhit di 50oC thu c dch cụ MeOH Cỏch ỏnh s ký hiu mu thụ: Ký hiu mu thụ = Ký hiu mu+ ký hiu dung mụi Trong ú: Dung mụi MeOH (Ký hiu 00); Dung mụi n-Hexan (01); Dung mụi Clorofom (Ký hiu 02); Dung mụi Butanol (Ký hiu 03) Cõn dch chit v tớnh lng cn dch chit phn trm hiu sut Bo qun mu cỏc l ng cn dch chit (theo tiờu chun bo qun mu) phc v sng lc hot tớnh v lu tr lu di 3.2 Phõn lp cỏc hp cht Cnh v lỏ ca cõy Bc bc M paniculatus (1,0 kg) c chit ba ln vi MeOH trờn mỏy siờu õm nhit 40-50oC vũng 20 phỳt Dch chit sau ú c cụ c bng mỏy ct quay vi ỏp sut gim thu c 80 g cn chit MeOH Cn MeOH c hũa vo nc v phõn lp ln lt vi ng Ngc Bỏch 20 K33A - Khoa Húa hc Trng i Hc S Phm H Ni Khúa lun tt nghip Hexan, CHCl3 thu c cỏc dch cụ hexan (13 g), CHCl3 (25 g) v dch nc (25 g) Cn chit MeOH (80 g) - B sung nc - B sung n-Hexane n-Hexane: H2O (1/1) Dịch chiết n-Hexane (13g) CHCl3: H2O (1/1) Dịch chiết CHCl3 (25g) Cặn nước (25 g) Hỡnh 3.2a S chit phõn on Cn chit CHCl3 (25g) - Chay gradient - hexane: axeton - T l: 10:1 n 1:1 ML2A (2.0g) ML2C (5.0g) ML2B (8,0g) ML2D (10.0g) - Chay gradient - hexane: axeton - T l: 40:1 MP2 (15 mg) MP3 (10 mg) Hỡnh 3.2b S phõn lp hai hp cht ký hiu MP2 v MP3 ng Ngc Bỏch 21 K33A - Khoa Húa hc Trng i Hc S Phm H Ni Khúa lun tt nghip Phn cn chit CHCl3 c tin hnh phõn tỏch trờn ct sc ký vi h dung mụi gradient hexan-axeton (t 10:1 n 1:1) thu c cỏc phõn on ML2A (2,0 g), ML2B (8,0 g), ML2C (5,0 g) v ML2D (10,0 g), Phõn on ML2B c chy qua ct sc ký silica gel s dng h dung mụi hexan-axeton (40:1) thu nhn c hp cht MP2 (15 mg) v MP3 (10 mg) Chi tit quỏ trỡnh phõn lp cỏc hp cht t dch chit MeOH ca cõy M.paniculatus c s hoỏ nh hỡnh III.2b 3.3 Hng s vt lý v s liu ph ca cỏc hp cht phõn lp c 3.3.1 Hp cht MP2 Cht bt mu trng, ESI-MS m/z: 447 [M+Na]+, cụng thc phõn t: C30H48O, M = 424 H-NMR (500 MHz, CDCl3) (ppm): 1,40 (m, Ha-1), 1,94 (d, J=2,5, Hb-1), 1,62 (m, Ha-2), 1,91 (m, Hb-2), 1,31 (m, H-5), 1,42-1,45 (m, H-6), 1,30 (m, Ha-7), 1,61 (m, Hb-7), 1,56 (m, H-9), 1,42-1,45 (m, H-11), 0,95(m, Ha-12), 1,33(m, Hb-12), 5,57 (dd, J = 8,5; 3,5, H-15), 1,82 (m, Ha-16), 1,98 (m, Hb-16), 0,96 (m, H-18), 1,40 (m, Ha-19), 2,02 (m, Hb-19), 1,30-1,40 (m, H-21), 1,30-1,40 (m, H-22), 1,06 (s, H-23), 0,83 (s, H-24), 0,91 (s, H-25), 1,14 (s, H-26), 0,91 (s, H-27), 0,95 (s, H-28), 1,08 (s, H-29) v 1,08 (s, H-30) 13 C-NMR (125MHz, CDCl3) (ppm): 38,35 (C-1), 34,14 (C-2), 217,53 (C-3), 47,58 (C-4), 55,78 (C-5), 19,16 (C-6), 35,11 (C-7), 38,88 (C-8), 48,70 (C-9), 35,77 (C-10), 17,45 (C-11), 36,67 (C-12), 37,54 (C-13), 157,60 (C-14), 117,19 (C-15), 37,70 (C-16), 37,74 (C-17), 48,88 (C-18), 40,64 (C-19), 28,80 (C-20), 33,57 (C-21), 33,08 (C-22), 26,11 (C-23), 21,48 (C-24), 14,81 (C-25), 29,92 (C-26), 25,57 (C-27), 29,89 (C-28), 33,36 (C-29) v 21,34 (C-30) 3.3.2 Hp cht MP3 Cht bt mu trng, ESI-MS m/z: 285 [M-H2O-H]-, cụng thc phõn t C30H50O, M = 426 ng Ngc Bỏch 22 K33A - Khoa Húa hc Trng i Hc S Phm H Ni Khúa lun tt nghip H-NMR (500 MHz, CDCl3) (ppm): 1,40 (m, Ha-1), 1,92 (m, Hb-1), 1,62 (m, Ha-2), 1,91 (m, Hb-2), 3,41 (d, J = 3,0 Hz, H-3), 1,31 (m, H-5), 1,421,45 (m, H-6), 1,30 (m, Ha-7), 1,61 (m, Hb-7), 1,56 (m, H-9), 1,42-1,45 (m, H11), 0,95(m, Ha-12), 1,33(m, Hb-12), 5,54 (dd, J = 8,5; 3,5, H-15), 1,82 (m, Ha-16), 1,98 (m, Hb-16), 1,00 (m, H-18), 1,40 (m, Ha-19), 2,02 (m, Hb-19), 1,30-1,40 (m, H-21), 1,30-1,40 (m, H-22), 0,95 (s, H-23), 0,83(s, H-24), 0,87 (s, H-25), 1,10 (s, H-26), 0,92 (s, H-27), 0,92 (s, H-28), 0,95 (s, H-29) v 0,95 (s, H-30) 13 C-NMR (125MHz, CDCl3) (ppm): 37,74 (C-1), 25,10 (C-2), 76,24 (C-3), 39,18 (C-4), 49,28 (C-5), 18,77 (C-6), 33,79 (C-7), 38,07 (C-8), 48,79 (C-9), 37,55 (C-10), 17,45 (C-11), 35,15 (C-12), 37,37 (C-13), 158,21 (C-14), 116,76 (C-15), 36,76 (C-16), 37,55 (C-17), 48,97 (C-18), 41,28 (C-19), 28,81 (C-20), 33,13 (C-21), 32,28 (C-22), 33,36 (C-23), 22,19 (C-24), 29,94 (C-25), 26,06 (C-26), 29,85 (C-27), 21,26 (C-28), 28,29 (C-29) v 15,24 (C-30) ng Ngc Bỏch 23 K33A - Khoa Húa hc Trng i Hc S Phm H Ni Khúa lun tt nghip CHNG 4: KT QU V THO LUN 4.1 Xỏc nh cu trỳc ca hp cht MP2 Hp cht MP2 thu c di dng cht kt tinh cú mu trng Ph 1HNMR cú dng ph ca mt hp cht tritecpen ú cú s xut hin tớn hiu singlet ca nhúm metyl bc ba ti 0,83 (3H), 0,91 (6H), 0,95 (3H), 1,06 (3H), 1,08 (6H) v 1,14 (3H) Ngoi ra, trờn ph cũn thy xut hin tớn hiu mt proton olefin ti 5,57 (dd, J = 8,5, 3,5 Hz) Hỡnh 4.2.a Ph 1H-NMR ca MP2 30 29 20 27 19 21 18 22 12 11 25 26 17 13 14 10 O 23 15 28 16 24 Hỡnh 4.2.b Cu trỳc ca MP2 ng Ngc Bỏch 24 K33A - Khoa Húa hc Trng i Hc S Phm H Ni Khúa lun tt nghip Ph 13C-NMR xut hin tớn hiu ca 30 cacbon, ú da vo kt qu ca cỏc ph DEPT cho thy hp cht ny cú cacbon bc bn ti 217,53, 157,60, 47,58, 38,88, 37,74, 37,54, 35,77, 28,80; cacbon bc ba ti 117,19, 55,78, 48,80, 48,70; 10 nhúm CH2 ti 40,64, 38,35, 37,70, 36,67, 35,11, 34,14, 33,57, 33,08, 19,96, 17,45; v nhúm metyl ti 33,36, 29,92, 29,86, 26,11, 25,57, 21,48, 21,34 v 14,81 Trong ú tớn hiu ca nhúm cacbonyl c xỏc nh ti 217,53, mt ni ụi b th v trớ ti 157,60 (C) v 117,19 (CH) Hỡnh 4.2.c Ph 13C-NMR ca MP2 Bng 4.2 S liu ph NMR ca MP2 C C # C a, b H a, c (J = Hz) C C # C a, b 16 36,7 37,70 17 37,7 37,74 18 48,8 48,80 1,40 (m), 38,4 38,35 1,94 (d, J=2,5) 34,1 34,14 217,3 217,53 ng Ngc Bỏch 1,62/1,91 (m) 25 H a, c (J = Hz) 1,82, 1,98 (m) 0,96 (m) K33A - Khoa Húa hc Trng i Hc S Phm H Ni 47,6 47,58 55,8 55,78 20,0 Khúa lun tt nghip 1,40, 2,02 19 40,7 40,64 1,31 (m) 20 28,8 28,80 19,96 1,42-1,45 (m) 21 33,6 33,57 1,30-1,40 (m) 35,2 35,11 1,30/1,61 (m) 22 33,1 33,08 1,30-1,40 (m) 38,9 38,88 23 26,2 26,11 1,06(s) 48,7 48,70 24 21,5 21,48 0,83 (s) 10 37,6 35,77 25 14,8 14,81 0,91 (s) 11 17,5 17,45 1,42-1,45 (m) 26 29,9 29,92 1,14(s) 12 35,8 36,67 0,95/1,33 (m) 27 25,6 25,57 0,91 (s) 13 37,7 37,54 28 29,9 29,86 0,95 (s) 14 157,6 157,60 29 33,4 33,36 1,08 (s) 15 117,2 117,19 5,57 (dd, 8,5, 3,5) 30 21,4 21,34 1,08 (s) a 1,56 (m) (m) o CDCl3, b125 MHz, c500 MHz, #C ca taraxerone [8] Hỡnh 4.2.d Ph DEPT ca MP2 ng Ngc Bỏch 26 K33A - Khoa Húa hc Trng i Hc S Phm H Ni Khúa lun tt nghip Trờn ph lng ESI-MS xut hin pớc ti m/z 447 [M+Na]+ gi ý cho cụng thc phõn t ca MP2 l C30H48O Hỡnh 4.2.e Ph ESI-MS ca MP2 Phõn tớch cỏc d kin ph thu c v so sỏnh vi ti liu ó cụng b, hp cht MP2 c xỏc nh l taraxerone 4.2 Xỏc nh cu trỳc ca hp cht MP3 Hp cht MP3 thu c di dng tinh th mu trng Trờn ph 1HNMR ca MP3 xut hin tớn hiu ca nhúm metyl bc bn ti 0,83, 0,87, 0,92(6H), 0,95(12H), 1,10 di dng cỏc singlet, mt tớn hiu proton ni ụi ti 5,53 (dd, J =8,5, 3,5Hz) v mt doublet ti 3,41 (J = 3,0Hz) Nhỡn chung, ph 1H-NMR ca MP3 khỏ ging vi hp cht MP2, trờn ph ca MP3 cú xut hin thờm tớn hiu proton ti 3,41 õy l tớn hiu ca nhúm oximetin iu ny cho phộp d oỏn MP3 l mt dn xut b kh nhúm cacbonyl (C=O) ca MP2 ng Ngc Bỏch 27 K33A - Khoa Húa hc Trng i Hc S Phm H Ni Khúa lun tt nghip Hỡnh 4.3.a Ph 1H-NMR ca MP3 30 29 20 27 19 21 18 22 12 11 25 26 17 13 14 10 HO 23 15 28 16 24 Hỡnh 4.3.b Cu trỳc ca MP3 ng Ngc Bỏch 28 K33A - Khoa Húa hc Trng i Hc S Phm H Ni Khúa lun tt nghip Hỡnh 4.3.c Ph 13C-NMR ca MP3 Bng 4.3 S liu ph NMR ca MP3 C C # C a, b H a, c (J = Hz) C C # C a, b H a, c (J = Hz) 1,82/1,98 (m) 37,8 37,74 1,40/1,92 (m) 16 36,8 36,76 25,2 25,10 1,62/1,91 (m) 17 38,1 37,55 76,3 76,34 3,41(d, J=3,0) 18 49,1 48,97 1,00 (m) 39,1 39,18 19 41,4 41,28 1,40/2,02 (m) 49,4 49,28 1,31 (m) 20 29,0 28,81 18,8 18,77 1,42-1,45 (m) 21 33,2 33,13 1,30-1,40 (m) 33,9 33,79 1,30/1,61 (m) 22 32,4 32,28 1,30-1,40 (m) 38,9 38,07 23 33,1 33,36 0,95(s) 48,9 48,79 24 22,0 22,19 0,83 (s) 10 37,9 37,55 25 30,0 29,94 0,87 (s) 11 17,5 17,45 1,42-1,45 (m) 26 26,5 26,06 1,10(s) 12 35,2 35,15 0,95/1,33 (m) 27 30,0 29,85 0,92 (s) 13 37,9 37,37 28 21,2 21,26 0,92 (s) ng Ngc Bỏch 1,56 (m) 29 K33A - Khoa Húa hc Trng i Hc S Phm H Ni 14 158,1 158,21 15 116,6 116,76 a 5,54 (dd, 8,5, 3,5) Khúa lun tt nghip 29 28,1 28,29 0,95 (s) 30 15,1 15,24 0,95 (s) o CDCl3, b125 MHz, c500 MHz, #C ca epitaraxero [9] Ph 13C-NMR ca MP3 xut hin tớn hiu ca 30 cacbon khỏ ging vi hp cht MP3 Tuy nhiờn, trờn ph 13C-NMR ca MP3 khụng thy xut hin tớn hiu ca nhúm cacbonyl ( 217,53) m thay vo ú l tớn hiu ca nhúm oximetin ti 76,24 iu ny mt ln na khng nh d oỏn trờn l phự hp Hỡnh 4.3.d Ph DEPT ca MP3 Phõn tớch cỏc d kin ph thu c v so sỏnh vi ti liu ó cụng b, hp cht MP3 c xỏc nh l epitaraxerol, mt dn xut ca taraxerone ng Ngc Bỏch 30 K33A - Khoa Húa hc Trng i Hc S Phm H Ni Khúa lun tt nghip KT LUN Bng cỏc phng phỏp sc ký kt hp, hp cht tritecpen ó c phõn lp t dch chit metanol ca lỏ cõy Mallotus paniculatus Cỏc hp cht ú l: taraxerone (1) v epitaraxerol (2) Cu trỳc ca cỏc hp cht ny c xỏc nh nh vo cỏc phng phỏp ph hin i nh ph cng hng t ht nhõn mt chiu (1H-NMR, 13CNMR, DEPT 135 v DEPT 90) v Ph lng phun mự in t (ESI) õy l ln u tiờn cỏc hp cht ny c phõn lp t cõy Mallotus paniculatus ng Ngc Bỏch 31 K33A - Khoa Húa hc Trng i Hc S Phm H Ni Khúa lun tt nghip TI LIU THAM KHO Huy Bớch, ng Quang Trung, Bựi Xuõn Chng, Nguyn Thng Dong, Trung m, Phm Vn Hin, V Ngc L, Phm Duy Mai, Phm Kim Món, on Th Nhu, Nguyn Tp v Trn Ton Cõy thuc v ng vt lm thuc Vit Nam, Nh xut bn Khoa hc v K thut H Ni, II, trang 130-133 (2004) Vừ Vn Chi T in cõy thuc Vit Nam, Nh xut bn Y hc (1997) PGS TS Nguyn Hu nh - PGS TS ỡnh Róng Húa hc hu c, 1, Nh xut bn Giỏo dc, (2009) Phm Hong H Cõy c Vit Nam, Nh xut bn tr, (1999) Trn Quc Sn - Trn Th Tu Danh phỏp hp cht hu c, Nh xut bn Giỏo dc (2008) o ỡnh Thc Mt s phng phỏp ph ng dng húa hc, Nh xut bn i hc Quc gia H Ni (2007) PGS TS Thỏi Doón Tnh C s húa hc hu c, 1, Nh xut bn Khoa hc v K thut Nobuko Sakurai, Yoshikatsu Yaguchi, Takao Inoue, Triterpenoids from Myrica rubra, Phytochemistry, 1987, 26, 1, 217-219 Atta-Ur-Rahman, Nighat Sultana, Farzana Akhter, Farzana Nighat, M Iqbal Choudhary, Phytochemiscal studies on Adhatoda vasica nees, Natural Product Letters, 1997, 10, 249-256 ng Ngc Bỏch 32 K33A - Khoa Húa hc [...]... cỏc dn xut cha oxi ca tritecpen vi cu trỳc l vũng sỏu cnh vớ d nh: Fielin v Fielanol Frienlin (C30H50O) Frielanol (C30H50O) Hp cht squalen vi cu hỡnh trans l cht tin thõn sinh hc ca tt c cỏc tritecpen Squalen ng Ngc Bỏch 6 K33A - Khoa Húa hc Trng i Hc S Phm H Ni 2 Khúa lun tt nghip S úng vũng ca Squalen theo cỏc kiu khỏc nhau to lờn s a dng ca cỏc hp cht tritecpen Nhỡn chung cỏc tritecpen thng phõn b... thỏng 10-11 hng nm c bit l v cõy cú nhiu si rt dai dựng bn thng 1.1.4 Thnh phn húa hc: Cho n ny cha cú nhiu nghiờn cu v thnh phn húa hc ca loi Mallotus paniculatus, cỏc nghiờn cu bc u phỏt hin c bảy hợp chất cardenolides là: 11-oxouzarigenin (1), mallogenin (2), malloside (3), panoside (4), glucopanoside (5), uzarigenin (6) và coroglaucigenin (7) O O O O HO R1 O H R1 OH OH HO H 7 R2O R2 HO H H 1 R =... ca cỏc hp cht tritecpen Nhỡn chung cỏc tritecpen thng phõn b rng rói trong gii thc vt, cỏc nghiờn cu v hot tớnh sinh hc cng ch ra rng cỏc tritecpen cú kh nng khỏng khun, khỏng nm, khỏng viờm v khỏng mt s dng ung th Ngoi ra, mt s nghiờn cu khỏc cũn ch ra rng cỏc tritecpen cú tỏc dng lờn h thn kinh trung ng, iu hũa ni tit, h cholesterol trong mỏu v chng x va ng mch 1.3 Tng quan v cỏc phng phỏp chit mu... loi nh sau: Loi tecpen Khung cacbon S lng cacbon Thớ d Monotecpen (iso-C5)2 10 C10H16, C10H18O,C10H 16O Secquitecpen (iso-C5)3 15 C15H24, C15H24O, C15H22O itecpen (iso-C5)4 20 C20H32, C20H32O, C20H30O Tritecpen (iso-C5)6 30 C30H50, C30H50O Tetratecpen (iso-C5)8 40 C40H56 Cỏc n v isopren ni vi nhau theo kiu u uụi hoc u u, uụiuụi hỡnh thnh nhiu dng cht, trong ú cú cu trỳc bao gm hng chc nghỡn mt xớch... Bỏch 23 K33A - Khoa Húa hc Trng i Hc S Phm H Ni 2 Khúa lun tt nghip CHNG 4: KT QU V THO LUN 4.1 Xỏc nh cu trỳc ca hp cht MP2 Hp cht MP2 thu c di dng cht kt tinh cú mu trng Ph 1HNMR cú dng ph ca mt hp cht tritecpen trong ú cú s xut hin tớn hiu singlet ca 8 nhúm metyl bc ba ti 0,83 (3H), 0,91 (6H), 0,95 (3H), 1,06 (3H), 1,08 (6H) v 1,14 (3H) Ngoi ra, trờn ph cũn thy xut hin tớn hiu mt proton olefin ti ... kiu khỏc to lờn s a dng ca cỏc hp cht tritecpen Nhỡn chung cỏc tritecpen thng phõn b rng rói gii thc vt, cỏc nghiờn cu v hot tớnh sinh hc cng ch rng cỏc tritecpen cú kh nng khỏng khun, khỏng... nhiu nghiờn cu v thnh phn húa hc ca loi Mallotus paniculatus, cỏc nghiờn cu bc u phỏt hin c bảy hợp chất cardenolides là: 11-oxouzarigenin (1), mallogenin (2), malloside (3), panoside (4), glucopanoside... cha oxi ca tritecpen vi cu trỳc l vũng sỏu cnh vớ d nh: Fielin v Fielanol Frienlin (C30H50O) Frielanol (C30H50O) Hp cht squalen vi cu hỡnh trans l cht tin thõn sinh hc ca tt c cỏc tritecpen Squalen