TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH VI SINH VẬT HỌC NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT SINH KHỐI NẤM MEN TỪ BÃ BIA VÀ BÃ ĐẬU NÀNH CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN: TS BÙI THỊ MINH DIỆU NGUYỄN THANH NHẬT PHƢƠNG MSSV: 3113748 LỚP: VI SINH VẬT K37 CẦN THƠ, 12/2014 TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH VI SINH VẬT HỌC NGHIÊN CỨU SẢN XUẤT SINH KHỐI NẤM MEN TỪ BÃ BIA VÀ BÃ ĐẬU NÀNH CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN: TS BÙI THỊ MINH DIỆU NGUYỄN THANH NHẬT PHƢƠNG MSSV: 3113748 LỚP: VI SINH VẬT K37 CẦN THƠ, 12/2014 Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 Trường Đại học Cần Thơ PHẦN KÝ DUYỆT CÁN BỘ HƢỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN (ký tên) (ký tên) Nguyễn Thanh Nhật Phƣơng Bùi Thị Minh Diệu DUYỆT CỦA BỘ MÔN …………………………………………………………………………………… … ……………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… …………………………………………………………………………………… Cần Thơ, ngày 01 tháng 12 năm 2014 TRƢỞNG BỘ MÔN (ký tên) Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 Trường Đại học Cần Thơ LỜI CẢM ƠN  Chân thành cảm tạ! Cô Bùi Thị Minh Diệu tận tình hướng dẫn, cung cấp tài liệu, góp ý truyền đạt kiến thức kinh nghiệm quý báu giúp em hoàn thành luận văn tốt nghiệp Quý Thầy Cô Viện Nghiên cứu Phát triển Công nghê Sinh học truyền đạt kiến thức suốt thời gian em học tập trường Các anh chị, bạn phòng thí nghiệm Sinh học Phân tử Thực vật, đặc biệt anh Nguyễn Trung Duẩn giúp đỡ tạo điều kiện thuận lợi cho trình thực đề tài Tập thể lớp Vi sinh vật khóa 37 nhiệt tình giúp đỡ, chia sẻ thông tin tài lệu trình học tập Kính chúc Quý Thầy Cô, anh chị bạn dồi sức khỏe thành công sống Ngày 01 tháng 12 năm 2014 Sinh viên thực Nguyễn Thanh Nhật Phương Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 Trường Đại học Cần Thơ TÓM LƢỢC Hiện Việt Nam bã bia bã đậu nành thường sử dụng làm thức ăn thô cho gia súc phân bón hiệu suất sinh học thấp Bã bia bã đậu nành chứa nhiều thành phần dinh dưỡng (tinh bột, đường, acid amin…) thích hợp cho phát triển vi sinh vật, đặc biệt nấm men Do đó, đề tài “Nghiên cứu sản xuất sinh khối nấm men từ bã bia bã đậu nành” thực nhằm bước đầu nghiên cứu sản xuất sinh khối nấm men từ bã bia bã đậu nành, đồng thời nhân sinh khối tạo sản phẩm có chất lượng dinh dưỡng tốt hơn, mang lại hiệu kinh tế cao nhờ sử dụng phụ phế phẩm công nghiệp bã bia bã đậu nành thô Các thí nghiệm tiến hành để khảo sát ảnh hưởng yếu tố môi trường nuôi cấy (độ pha loãng bã bia bã đậu nành, độ pH, nồng độ rỉ đường bổ sung, mật số nấm men ban đầu thời gian nuôi cấy nấm men) lên trình tăng sinh khối nấm men bã bia bã đậu nành Mật số nấm men xác định phương pháp đếm trực tiếp kinh hiển vi buồng đếm hồng cầu Kết thí nghiệm cho thấy, hàm lượng bã bia bã đậu nành môi trường thích hợp cho phát triển nấm men 25% Sinh khối nấm men tăng rõ rệt khác biệt có ý nghĩa thống kê pH môi trường có bổ sung 4% rỉ đường Mật số nấm men ban đầu thích hợp 104 tế bào/ml đạt 108 tế bào/ml sau 48 nuôi cấy Nghiên cứu cho thấy tiềm sản xuất sinh khối nấm men Saccharomyces từ bã bia bã đậu nành, mở hướng sản xuất thức ăn chăn nuôi giàu dinh dưỡng từ nguồn phụ phế phẩm Từ khóa: bã bia, bã đậu nành, nấm men, Saccharomyces, sinh khối Chuyên ngành Vi sinh vật học i Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 Trường Đại học Cần Thơ MỤC LỤC Trang PHẦN KÝ DUYỆT LỜI CÁM ƠN TÓM LƢỢC ii MỤC LỤC ii DANH SÁCH BẢNG iv DANH SÁCH HÌNH v TỪ VIẾT TẮT vi CHƢƠNG GIỚI THIỆU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục tiêu đề tài CHƢƠNG LƢỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1 Tổng quan nấm men Saccharomyces 2.1.1 Phân loại 2.1.2 Đặc điểm hình thái 2.1.3 Thành phần cấu tạo 2.1.4 Sinh trưởng sinh sản 2.1.5 Giá trị dinh dưỡng nấm men 2.1.6 Quá trình trao đổi chất nấm men 10 2.1.7 Các yếu tố ảnh hưởng đến trình lên men 10 2.2 Bã bia 11 2.2.1 Tổng quan bã bia 11 2.2.2 Thành phần hóa học 12 2.3 Bã đậu nành 14 2.4 Rỉ đƣờng 16 2.5 Tình hình nghiên cứu nƣớc sinh khối nấm men 20 2.5.1 Tình hình nghiên cứu nước 20 2.5.2 Tình hình nghiên cứu nước 21 CHƢƠNG PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 3.1 Phƣơng tiện nghiên cứu 22 3.1.1 Địa điểm – Thời gian nghiên cứu 22 Chuyên ngành Vi sinh vật học ii Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 Trường Đại học Cần Thơ 3.1.2 Dụng cụ, thiết bị 22 3.1.3 Hóa chất 22 3.1.4 Vật liệu nghiên cứu 22 3.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 23 3.2.1 Chuẩn bị vật liệu thí nghiệm 23 3.2.2 Phân lập nấm men 25 3.2.3 Phương pháp xác định mật số nấm men 25 3.2.4 Qui trình thực 25 3.2.5 Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng độ pha loãng bã bia bã đậu nành đến khả tạo sinh khối nấm men 26 3.2.6 Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng pH môi trường đến khả tạo sinh khối nấm men 26 3.2.7 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng nồng độ rỉ đường bổ sung đến khả tạo sinh khối nấm men 26 3.2.8 Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng thời gian nuôi cấy mật số tế bào ban đầu đến khả tạo sinh khối nấm men 28 3.3 Phƣơng pháp xử lý số liệu 27 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 29 4.1 Phân lập nấm men 29 4.2 Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng độ pha loãng bã bia bã đậu nành đến khả tạo sinh khối nấm men 29 4.3 Thí nghiệm 2: Ảnh hưởng pH môi trường đến khả tạo sinh khối nấm men 31 4.4 Thí nghiệm 3: Ảnh hưởng nồng độ rỉ đường bổ sung đến khả tạo sinh khối nấm men 33 4.5 Thí nghiệm 4: Ảnh hưởng thời gian nuôi cấy mật số tế bào ban đầu đến khả tạo sinh khối nấm men 35 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 38 TÀI LIỆU THAM KHẢO 39 PHỤ LỤC Phụ lục 1: Các hình ảnh Phụ lục 2: Kết Phụ lục 3: Kết thống kê Chuyên ngành Vi sinh vật học iii Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 Trường Đại học Cần Thơ DANH SÁCH BẢNG Bảng Thành phần vách tế bào nấm men Saccharomyces cerevisiae Bảng 2: Hàm lượng amino acid, vitamin tế bào nấm men Saccharomyces cerevisiae Bảng Thành phần bã malt 12 Bảng Thành phần trung bình tro 13 Bảng Thành phần hóa học nấm men 13 Bảng Giá trị thức ăn mầm malt (trong 100 kg mầm malt) 14 Bảng Thành phần dinh dưỡng bã đậu nành 15 Bảng Thành phần acid amin bã đậu nành 15 Bảng Thành phần chất hóa học bã đậu nành 16 Bảng 10 Thành phần dinh dưỡng rỉ đường mía 16 Bảng 11: Thành phần chất hữu rỉ đường mía 18 Bảng 12 Kết đếm mật số thí nghiệm PL2 Bảng 13 Kết đếm mật số thí nghiệm PL2 Bảng 14 Kết đếm mật số thí nghiệm PL2 Bảng 15 Kết đếm mật số thí nghiệm PL2 Bảng 16 Mật số tế bào Saccharomyces ml dung dịch độ pha loãng bã bia bã đậu nành khác phương pháp đếm hồng cầu (qui giá trị logarit) PL3 Bảng 17 Mật số tế bào Saccharomyces ml dung dịch pH khác phương pháp đếm hồng cầu (qui giá trị logarit) PL3 Bảng 18 Mật số tế bào Saccharomyces ml dung dịch nồng độ rỉ đường bổ sung khác phương pháp đếm hồng cầu (qui giá trị logarit) PL3 Bảng 19 Mật số tế bào Saccharomyces ml dung dịch nghiệm thức thời gian nuôi cấy mật số nấm men ban đầu khác phương pháp đếm hồng cầu (qui giá trị logarit) PL3 Chuyên ngành Vi sinh vật học iv Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 Trường Đại học Cần Thơ DANH SÁCH HÌNH Hình Hình thái nấm men Saccharomyces cerevisiae Hình Cấu tạo nấm men Saccharomyces cerevisiae Hình Đường cong sinh trưởng quần thể nấm men môi trường nuôi cấy Hình Quy trình thực chung cho thí nghiệm 25 Hình Ảnh hưởng độ pha loãng bã bia bã đậu nành đến khả tạo sinh khối nấm men 29 Hình Mật số tế bào Saccharomyces 72 nuôi cấy độ pha loãng bã bia bã đậu nành 30 Hình Ảnh hưởng pH đến khả tạo sinh khối nấm men 31 Hình Mật số tế bào Saccharomyces 72 nuôi cấy mức pH khác 32 Hình Ảnh hưởng nồng độ rỉ đường bổ sung đến khả tạo sinh khối nấm men 33 Hình 10 Mật số tế bào Saccharomyces 72 nuôi cấy nồng độ rỉ đường bổ sung 34 Hình 11 Ảnh hưởng mật số tế bào men giống đến khả tạo sinh khối nấm men theo thời gian 35 Hình 12 Mật số tế bào Saccharomyces thời điểm 36 48 nuôi cấy mật số tế bào khác (qui giá trị logarit) 36 Hình 13 Mật số tế bào Saccharomyces 1ml dung dịch sau 48 mật số tế bào khác (qui giá trị logarit) 35 Hình 14 Hình ảnh thiết bị sử dụng phòng thí nghiệm PL1 Hình 15 Hình sinh khối nấm men PL1 Hình 16 Khuẩn lạc nấm men Sacchromyces PL1 Hình 17 Tế bào nấm men Saccharomyces kính hiển vi độ phóng đại E40 PL1 Hình 18 Tế nấm men Sacchromyces kính hiển vi độ phóng đại E100 PL1 Hình 19 Tế nấm men Sacchromyces môi trường bã bia bã đậu nành thời điểm nuôi cấy kính hiển vi độ phóng đại E40 PL1 Chuyên ngành Vi sinh vật học v Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 Trường Đại học Cần Thơ TỪ VIẾT TẮT DNA Deoxyribo Nucleic Acid YEPD Yeast Extract Peptone Dextrose Chuyên ngành Vi sinh vật học vi Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 1 2 3 4 1 2 3 4 1 2 3 4 48 48 48 48 48 48 48 48 48 48 48 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 60 72 72 72 72 72 72 72 72 72 72 72 72 Chuyên ngành Vi sinh vật học 12 13 20 21 17 15 16 13 11 13 13 11 17 19 16 11 14 10 11 12 13 17 22 11 13 15 10 Trường Đại học Cần Thơ 11 9 18 15 23 14 11 13 13 18 14 18 21 15 12 21 15 13 14 13 15 14 13 23 15 17 11 13 15 13 10 15 23 21 14 16 14 12 14 12 18 18 21 12 13 22 15 10 16 17 18 15 14 17 16 4 18 14 15 13 17 12 20 17 12 8 17 16 16 13 21 14 12 13 12 11 17 15 16 10 15 16 156250000 168750000 281250000 262500000 218750000 475000000 437500000 443750000 356250000 381250000 343750000 175000000 150000000 175000000 356250000 293750000 212500000 437500000 462500000 425000000 300000000 431250000 381250000 237500000 175000000 287500000 312500000 300000000 356250000 493750000 368750000 381250000 262500000 375000000 356250000 8,19 8,23 8,45 8,42 8,34 8,68 8,64 8,65 8,55 8,58 8,54 8,24 8,18 8,24 8,55 8,47 8,33 8,64 8,67 8,63 8,48 8,63 8,58 8,38 8,24 8,46 8,49 8,48 8,55 8,69 8,57 8,58 8,42 8,57 8,55 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 Trường Đại học Cần Thơ Phụ lục 3: Kết thống kê Phụ lục 3.1 Kết phân tích thống kê thí nghiệm a Kết phân tích thống kê 12 One-way ANOVA: log 12 versus nt 12 Source nt 12 Error Total DF 10 14 SS 0,13534 0,03934 0,17468 S = 0,06272 Level N 3 3 MS 0,03383 0,00393 R-Sq = 77,48% Mean 6,4405 6,2445 6,2652 6,2952 6,4755 StDev 0,0843 0,0692 0,0632 0,0414 0,0454 F 8,60 P 0,003 R-Sq(adj) = 68,47% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ ( -* -) ( -* ) ( * -) ( * -) ( * -) + -+ -+ -+ 6,20 6,30 6,40 6,50 Pooled StDev = 0,0627 Grouping Information Using Tukey Method nt 12 N 3 3 Mean 6,47554 6,44048 6,29516 6,26515 6,24451 Grouping A A B B C C C b Kết phân tích thống kê 24 One-way ANOVA: log 24 versus nt 24 Source nt 24 Error Total DF 10 14 S = 0,1078 Level N 3 3 SS 0,4547 0,1163 0,5710 MS 0,1137 0,0116 R-Sq = 79,64% Mean 6,9694 6,8309 6,7863 7,1065 7,2560 StDev 0,0583 0,1653 0,1100 0,0765 0,0973 F 9,78 P 0,002 R-Sq(adj) = 71,49% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+( -* ) ( * -) ( * ) ( * ) ( * ) + -+ -+ -+6,80 7,00 7,20 7,40 Pooled StDev = 0,1078 Grouping Information Using Tukey Method Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 nt 24 N 3 3 Mean 7,2560 7,1065 6,9694 6,8309 6,7863 Trường Đại học Cần Thơ Grouping A A B A B C B C C c Kết phân tích thống kê 36 One-way ANOVA: log 36 versus nt 36 Source nt 36 Error Total DF 10 14 SS 1,7020 0,1809 1,8829 S = 0,1345 Level MS 0,4255 0,0181 R-Sq = 90,39% F 23,53 N 3 3 Mean 7,6075 7,1646 7,3194 8,0694 7,8810 StDev 0,1238 0,1961 0,0684 0,0844 0,1576 P 0,000 R-Sq(adj) = 86,55% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ ( * ) ( * ) ( * ) ( * -) ( * ) + -+ -+ -+ 7,00 7,35 7,70 8,05 Pooled StDev = 0,1345 Grouping Information Using Tukey Method nt 36 N 3 3 Mean 8,0694 7,8810 7,6075 7,3194 7,1646 Grouping A A B B C C D D d Kết phân tích thống kê 48 One-way ANOVA: log 48 versus nt 48 Source nt 48 Error Total DF 10 14 SS 0,32226 0,03079 0,35305 S = 0,05549 Level N 3 3 MS 0,08057 0,00308 R-Sq = 91,28% Mean 8,1221 8,0346 8,1936 8,4178 8,3749 StDev 0,1105 0,0143 0,0174 0,0415 0,0308 F 26,17 P 0,000 R-Sq(adj) = 87,79% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ ( -* ) ( * -) ( * ) ( * ) ( -* ) -+ -+ -+ -+ 8,10 8,25 8,40 8,55 Pooled StDev = 0,0555 Grouping Information Using Tukey Method Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 nt 48 N 3 3 Mean 8,41781 8,37494 8,19359 8,12209 8,03460 Trường Đại học Cần Thơ Grouping A A B B C C e Kết phân tích thống kê 60 One-way ANOVA: log 60 versus nt 60 Source nt 60 Error Total DF 10 14 SS 0,41330 0,09682 0,51013 S = 0,09840 Level N 3 3 MS 0,10333 0,00968 R-Sq = 81,02% Mean 8,0107 8,1893 8,2676 8,4535 8,4444 StDev 0,0942 0,1477 0,1150 0,0509 0,0437 F 10,67 P 0,001 R-Sq(adj) = 73,43% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ ( * -) ( -* ) ( -* ) ( * -) ( -* ) + -+ -+ -+ 8,00 8,20 8,40 8,60 Pooled StDev = 0,0984 Grouping Information Using Tukey Method nt 60 N 3 3 Mean 8,45345 8,44437 8,26761 8,18932 8,01069 Grouping A A A B A B B f Kết phân tích thống kê 72 One-way ANOVA: log 72 versus nt 72 Source nt 72 Error Total DF 10 14 SS 0,30499 0,05584 0,36083 S = 0,07472 Level N 3 3 MS 0,07625 0,00558 R-Sq = 84,53% Mean 8,0274 8,2266 8,3090 8,4063 8,4151 StDev 0,0960 0,0880 0,0852 0,0546 0,0264 F 13,66 P 0,000 R-Sq(adj) = 78,34% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -( -* ) ( -* ) ( -* -) ( -* ) ( -* -) -+ -+ -+ -+ -7,95 8,10 8,25 8,40 Pooled StDev = 0,0747 Grouping Information Using Tukey Method Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 nt 72 N 3 3 Mean 8,41514 8,40633 8,30904 8,22665 8,02742 Trường Đại học Cần Thơ Grouping A A A B A B B Phụ lục 3.2 Kết phân tích thống kê thí nghiệm a Kết phân tích thống kê 12 One-way ANOVA: log 12 versus nt 12 Source nt 12 Error Total DF 10 14 SS 0,09346 0,02572 0,11918 S = 0,05072 Level N 3 3 MS 0,02336 0,00257 R-Sq = 78,42% Mean 6,5169 6,6983 6,7529 6,6668 6,6324 StDev 0,0250 0,0736 0,0249 0,0180 0,0767 F 9,08 P 0,002 R-Sq(adj) = 69,78% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -( * -) ( * -) ( -* ) ( * -) ( -* ) -+ -+ -+ -+ -6,50 6,60 6,70 6,80 Pooled StDev = 0,0507 Grouping Information Using Tukey Method nt 12 N 3 3 Mean 6,75286 6,69830 6,66682 6,63237 6,51693 Grouping A A A A B B b Kết phân tích thống kê 24 One-way ANOVA: log 24 versus nt 24 Source nt 24 Error Total DF 10 14 S = 0,1114 Level N 3 3 SS 0,6375 0,1241 0,7616 MS 0,1594 0,0124 R-Sq = 83,70% Mean 6,9520 7,4217 7,4979 7,2862 7,0725 StDev 0,0173 0,0324 0,0867 0,1735 0,1520 Chuyên ngành Vi sinh vật học F 12,84 P 0,001 R-Sq(adj) = 77,19% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+( -* -) ( -* -) ( -* -) ( * -) ( -* -) + -+ -+ -+7,00 7,25 7,50 7,75 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 Trường Đại học Cần Thơ Pooled StDev = 0,1114 Grouping Information Using Tukey Method nt 24 N 3 3 Mean 7,4979 7,4217 7,2862 7,0725 6,9520 Grouping A A A B B C C c Kết phân tích thống kê 36 One-way ANOVA: log 36 versus nt 36 Source nt 36 Error Total DF 10 14 SS 0,74485 0,07366 0,81852 S = 0,08583 Level N 3 3 MS 0,18621 0,00737 R-Sq = 91,00% Mean 7,5212 8,0757 8,1259 7,9245 7,7428 StDev 0,0457 0,0906 0,0881 0,0954 0,0984 F 25,28 P 0,000 R-Sq(adj) = 87,40% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ ( * -) ( -* -) ( -* -) ( -* -) ( * -) + -+ -+ -+ 7,50 7,75 8,00 8,25 Pooled StDev = 0,0858 Grouping Information Using Tukey Method nt 36 N 3 3 Mean 8,12592 8,07575 7,92448 7,74279 7,52124 Grouping A A A B B C C d Kết phân tích thống kê 48 One-way ANOVA: log 48 versus nt 48 Source nt 48 Error Total DF 10 14 SS 0,79769 0,09907 0,89676 S = 0,09954 Level N 3 3 MS 0,19942 0,00991 R-Sq = 88,95% Mean 7,8223 8,2590 8,4456 8,1865 7,9019 StDev 0,1384 0,1323 0,0201 0,0449 0,1023 Chuyên ngành Vi sinh vật học F 20,13 P 0,000 R-Sq(adj) = 84,53% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ ( * ) ( * ) ( * ) ( * -) ( * ) + -+ -+ -+ 7,75 8,00 8,25 8,50 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 Trường Đại học Cần Thơ Pooled StDev = 0,0995 Grouping Information Using Tukey Method nt 48 N 3 3 Mean 8,4456 8,2590 8,1865 7,9019 7,8223 Grouping A A A B B e Kết phân tích thống kê 60 One-way ANOVA: log 60 versus nt 60 Source nt 60 Error Total DF 10 14 SS 0,3211 0,1192 0,4402 S = 0,1092 Level MS 0,0803 0,0119 N 3 3 R-Sq = 72,93% F 6,73 Mean 8,0895 8,3469 8,4068 8,2001 8,0230 StDev 0,0978 0,1086 0,1054 0,1512 0,0656 P 0,007 R-Sq(adj) = 62,10% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ ( * ) ( * ) ( * ) ( * ) ( * ) + -+ -+ -+ 8,00 8,20 8,40 8,60 Pooled StDev = 0,1092 Grouping Information Using Tukey Method nt 60 N 3 3 Mean 8,4068 8,3469 8,2001 8,0895 8,0230 Grouping A A B A B C B C C f Kết phân tích thống kê 72 One-way ANOVA: log 72 versus nt 72 Source nt 72 Error Total DF 10 14 SS 0,32327 0,06353 0,38681 S = 0,07971 Level N 3 3 MS 0,08082 0,00635 R-Sq = 83,58% Mean 8,0880 8,3140 8,4205 8,1870 8,0167 StDev 0,0451 0,0225 0,0525 0,0361 0,1586 Chuyên ngành Vi sinh vật học F 12,72 P 0,001 R-Sq(adj) = 77,01% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -( * -) ( * -) ( -* ) ( * -) ( -* -) -+ -+ -+ -+ -Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 Trường Đại học Cần Thơ 8,00 8,16 8,32 8,48 Pooled StDev = 0,0797 Grouping Information Using Tukey Method nt 72 N 3 3 Mean 8,42047 8,31400 8,18698 8,08803 8,01674 Grouping A A B B C C C Phụ lục 3.3 Kết phân tích thống kê thí nghiệm a Kết phân tích thống kê 12 One-way ANOVA: log 12 versus nt 12 Source nt 12 Error Total DF 10 14 SS 0,21141 0,02206 0,23347 S = 0,04697 Level N 3 3 MS 0,05285 0,00221 R-Sq = 90,55% Mean 6,4974 6,5912 6,7809 6,8077 6,6059 StDev 0,0644 0,0477 0,0476 0,0375 0,0305 F 23,96 P 0,000 R-Sq(adj) = 86,77% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+ ( * ) ( * ) ( * ) ( * ) ( * -) + -+ -+ -+ 6,48 6,60 6,72 6,84 Pooled StDev = 0,0470 Grouping Information Using Tukey Method nt 12 N 3 3 Mean 6,80766 6,78089 6,60585 6,59121 6,49738 Grouping A A B B B b Kết phân tích thống kê 24 One-way ANOVA: log 24 versus nt 24 Source nt 24 Error Total DF 10 14 S = 0,1129 Level N 3 SS 0,6468 0,1275 0,7743 MS 0,1617 0,0128 R-Sq = 83,53% Mean 7,1103 7,3798 StDev 0,0325 0,0956 Chuyên ngành Vi sinh vật học F 12,68 P 0,001 R-Sq(adj) = 76,94% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -( * -) ( -* -) Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 3 7,6933 7,4450 7,6401 0,0144 0,1335 0,1886 Trường Đại học Cần Thơ ( -* -) ( -* -) ( -* ) -+ -+ -+ -+ -7,00 7,25 7,50 7,75 Pooled StDev = 0,1129 Grouping Information Using Tukey Method nt 24 N 3 3 Mean 7,6933 7,6401 7,4450 7,3798 7,1103 Grouping A A B A B B C C c Kết phân tích thống kê 36 One-way ANOVA: log 36 versus nt 36 Source nt 36 Error Total DF 10 14 SS 0,7534 0,2041 0,9575 S = 0,1429 Level MS 0,1884 0,0204 N 3 3 R-Sq = 78,68% F 9,23 Mean 7,8186 8,0871 8,3521 8,4368 8,0300 StDev 0,2141 0,1546 0,0121 0,1263 0,1274 P 0,002 R-Sq(adj) = 70,16% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -( -* ) ( * -) ( * ) ( * -) ( * -) -+ -+ -+ -+ -7,75 8,00 8,25 8,50 Pooled StDev = 0,1429 Grouping Information Using Tukey Method nt 36 N 3 3 Mean 8,4368 8,3521 8,0871 8,0300 7,8186 Grouping A A B A B C B C C d Kết phân tích thống kê 48 One-way ANOVA: log 48 versus nt 48 Source nt 48 Error Total DF 10 14 SS 0,31067 0,07661 0,38728 S = 0,08753 Level N MS 0,07767 0,00766 R-Sq = 80,22% Mean 8,1991 StDev 0,0914 Chuyên ngành Vi sinh vật học F 10,14 P 0,002 R-Sq(adj) = 72,31% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+ -( * ) Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 3 3 8,2942 8,5446 8,5761 8,3914 0,1217 0,0769 0,0222 0,0935 Trường Đại học Cần Thơ ( * ) ( * ) ( * ) ( * -) -+ -+ -+ -+ -8,16 8,32 8,48 8,64 Pooled StDev = 0,0875 Grouping Information Using Tukey Method nt 48 N 3 3 Mean 8,57606 8,54459 8,39145 8,29415 8,19905 Grouping A A A B B B e Kết phân tích thống kê 60 One-way ANOVA: log 60 versus nt 60 Source nt 60 Error Total DF 10 14 SS 0,26995 0,05993 0,32988 S = 0,07741 Level N 3 3 MS 0,06749 0,00599 R-Sq = 81,83% Mean 8,2508 8,3207 8,5560 8,6016 8,4600 StDev 0,0557 0,1414 0,0319 0,0597 0,0479 F 11,26 P 0,001 R-Sq(adj) = 74,57% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev -+ -+ -+ -+-( * ) ( * -) ( -* ) ( -* ) ( * ) -+ -+ -+ -+-8,25 8,40 8,55 8,70 Pooled StDev = 0,0774 Grouping Information Using Tukey Method nt 60 N 3 3 Mean 8,60163 8,55603 8,46003 8,32070 8,25083 Grouping A A A B B C C f Kết phân tích thống kê 72 One-way ANOVA: log 72 versus nt 72 Source nt 72 Error Total DF 10 14 S = 0,09579 Level N SS 0,55544 0,09176 0,64720 MS 0,13886 0,00918 R-Sq = 85,82% Mean StDev Chuyên ngành Vi sinh vật học F 15,13 P 0,000 R-Sq(adj) = 80,15% Individual 95% CIs For Mean Based on Pooled StDev + -+ -+ -+Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 3 3 8,1615 8,2708 8,5704 8,6395 8,5895 0,1612 0,0941 0,0404 0,0436 0,0866 Trường Đại học Cần Thơ ( -* -) ( * -) ( * -) ( -* -) ( -* ) + -+ -+ -+8,20 8,40 8,60 8,80 Pooled StDev = 0,0958 Grouping Information Using Tukey Method nt 72 N 3 3 Mean 8,63952 8,58947 8,57037 8,27084 8,16146 Grouping A A A B B Phụ lục 3.4 Kết phân tích thống kê thí nghiệm General Linear Model: Log versus Nt, thoi gian Factor Nt thoi gian Type fixed fixed Levels Values 1, 2, 3, 12h, 24h, 36h, 48h, 60h, 72h Analysis of Variance for Log, using Adjusted SS for Tests Source Nt thoi gian Nt*thoi gian Error Total S = 0,0860784 DF 15 48 71 Seq SS 5,2817 58,9020 2,1862 0,3557 66,7256 Adj SS 5,2817 58,9020 2,1862 0,3557 R-Sq = 99,47% Adj MS 1,7606 11,7804 0,1457 0,0074 F 237,61 1589,91 19,67 P 0,000 0,000 0,000 R-Sq(adj) = 99,21% Unusual Observations for Log Obs 19 21 Log 5,75012 5,39794 7,37566 6,97197 Fit 5,54764 5,54764 7,18048 7,18048 SE Fit 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 Residual 0,20249 -0,14970 0,19518 -0,20851 St Resid 2,88 -2,13 2,78 -2,97 R R R R R denotes an observation with a large standardized residual Least Squares Means for Log Nt thoi gian 12h 24h 36h 48h 60h 72h Nt*thoi gian Mean 7,355 7,626 7,982 8,011 SE Mean 0,02029 0,02029 0,02029 0,02029 6,180 6,849 8,024 8,441 8,470 8,499 0,02485 0,02485 0,02485 0,02485 0,02485 0,02485 Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 1 1 1 2 2 2 3 3 3 4 4 4 12h 24h 36h 48h 60h 72h 12h 24h 36h 48h 60h 72h 12h 24h 36h 48h 60h 72h 12h 24h 36h 48h 60h 72h 5,548 6,549 7,304 8,149 8,221 8,359 6,135 6,368 7,895 8,403 8,449 8,508 6,361 7,180 8,439 8,655 8,645 8,614 6,676 7,297 8,457 8,556 8,564 8,515 Trường Đại học Cần Thơ 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 0,04970 Grouping Information Using Tukey Method and 95,0% Confidence Nt N 18 18 18 18 Mean 8,011 7,982 7,626 7,355 Grouping A A B C Means that not share a letter are significantly different Grouping Information Using Tukey Method and 95,0% Confidence thoi gian 72h 60h 48h 36h 24h 12h N 12 12 12 12 12 12 Mean 8,499 8,470 8,441 8,024 6,849 6,180 Grouping A A A B C D Means that not share a letter are significantly different Grouping Information Using Tukey Method and 95,0% Confidence Nt 3 4 4 1 thoi gian 48h 60h 72h 60h 48h 72h 72h 36h 60h 36h 48h 72h 60h 48h 36h 36h N 3 3 3 3 3 3 3 3 Mean 8,655 8,645 8,614 8,564 8,556 8,515 8,508 8,457 8,449 8,439 8,403 8,359 8,221 8,149 7,895 7,304 Grouping A A A B A B A B A B A B A B C A B C A B C A B C D B C D C D D E E Chuyên ngành Vi sinh vật học F Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 4 24h 24h 12h 24h 24h 12h 12h 12h 3 3 3 3 7,297 7,180 6,676 6,549 6,368 6,361 6,135 5,548 Trường Đại học Cần Thơ F F G G H H I H I I J Bảng 16 Mật số tế bào Saccharomyces ml dung dịch độ pha loãng bã bia bã đậu nành khác phƣơng pháp đếm hồng cầu (qui giá trị logarit) Thời gian (giờ) Độ pha loãng 12 24 36 48 60 72 10% 6,44AB 6,97ABC 7,61BC 8,12BC 8,01B 8,03B 15% 6,24C 6,83BC 7,16D 8,03C 8,19AB 8,23AB 20% 6,27C 6,79C 7,32CD 8,19B 8,27AB 8,31AB 25% 6,30BC 7,12AB 8,07A 8,42A 8,45A 8,41A 30% 6,48A 7,26A 7,88AB 8,37A 8,44A 8,42A *Ghi chú: Giá trị bảng giá trị trung bình lần lặp lại Các giá trị mang mẫu tự giống khác biệt ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% Bảng 17 Mật số tế bào Saccharomyces ml dung dịch pH khác phƣơng pháp đếm hồng cầu (qui giá trị logarit) pH Thời gian (giờ) 12 24 36 48 60 72 6,52B 6,95C 7,52C 7,82B 8,09BC 8,09C 6,70A 7,42A 8,08A 8,26A 8,35AB 8,31AB 6,75A 7,50A 8,13A 8,45A 8,41A 8,42A 6,67A 7,29AB 7,92AB 8,19A 8,20ABC 8,19BC 6,63AB 7,07BC 7,74BC 7,90B 8,02C 8,02C *Ghi chú: Giá trị bảng giá trị trung bình lần lặp lại Các giá trị mang mẫu tự giống khác biệt ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 Trường Đại học Cần Thơ Bảng 18 Mật số tế bào Saccharomyces ml dung dịch nồng độ rỉ đƣờng bổ sung khác phƣơng pháp đếm hồng cầu (qui giá trị logarit) Nồng độ rỉ đƣờng Thời gian (giờ) 12 24 36 48 60 72 0% 6,50B 7,11C 7,82C 8,20B 8,25C 8,16B 2% 6,59B 7,38BC 8,09ABC 8,29B 8,32BC 8,27B 4% 6,78A 7,69A 8,35AB 8,54A 8,56A 8,57A 6% 6,81A 7,45AB 8,44A 8,58A 8,60A 8,64A 8% 6,61B 7,64AB 8,03BC 8,39AB 8,46AB 8,59A bổ sung *Ghi chú: Giá trị bảng giá trị trung bình lần lặp lại Các giá trị mang mẫu tự giống khác biệt ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% Bảng 19 Mật số tế bào Saccharomyces ml dung dịch nghiệm thức thời gian nuôi cấy mật số nấm men ban đầu khác phƣơng pháp đếm hồng cầu (qui giá trị logarit) Mật số tế bào ban đầu (tế bào/ml) Thời gian (giờ) Mật số tế bào (qui giá trị logarit) 100 12 5,55J 100 24 6,55GH 100 36 7,30F 100 48 8,15DE 100 60 8,22CD 100 72 8,36BCD 102 12 6,14I 102 24 6,37HI 102 36 7,90E 102 48 8,40ABCD 102 60 8,45ABC 102 72 8,51AB 104 12 6,36HI Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 37 – 2014 Trường Đại học Cần Thơ 104 24 7,18F 104 36 8,44ABC 104 48 8,66A 104 60 8,65A 104 72 8,61AB 106 12 6,68G 106 24 7,30F 106 36 8,46ABC 106 48 8,56AB 106 60 8,56AB 106 72 8,52AB *Ghi chú: Giá trị bảng giá trị trung bình lần lặp lại Các giá trị mang mẫu tự giống khác biệt ý nghĩa thống kê với độ tin cậy 95% Chuyên ngành Vi sinh vật học Viện NC&PT Công nghệ Sinh học [...]... nng kt lng ca nm men cú vai trũ rt quan trng Men chỡm kt lng dng bụng di ỏy cỏc thựng lờn men cũn men ni thỡ ni lờn b mt dch lờn men Tc lờn men tựy thuc vo nhiu yu t: kh nng lờn men ca nm men, hot tớnh sinh lý v s lng t bo ca chỳng torng mụi trng ph thuc vo nhit , pH, thnh phn húa hc ca dch lờn men Ngoi ra cũn ph thuc vo hm lng cỏc cht protein trong t bo nm men - Sinh sn Men cú th sinh sn vụ tớnh... NC&PT Cụng ngh Sinh hc Lun vn tt nghip i hc Khúa 37 2014 Trng i hc Cn Th ti Nghiờn cu sn xut sinh khi nm men t bó bia v bó u nnh c a ra nhm bc u nghiờn cu ng dng sn xut sinh khi nm men t bó bia v bó u nnh 1.2 Mc tiờu ti Xỏc nh cỏc mc thớch hp v t l bó bia, bó u nnh, pH, nng r ng b sung mt s t bo nm men ban u trong mụi trng nuụi cy nm men phỏt trin cho sinh khi cao Chuyờn ngnh Vi sinh vt hc 2 Vin... trong khi ú nm men ni ch s dng c 1/3 ng sacarose Ngoi ra chỳng cũn khỏc nhau v kh nng hụ hp, kh nng trao i cht khi lờn men v kh nng hỡnh thnh bo t Quỏ trỡnh trao i cht ca nm men chỡm ch yu xy ra trong quỏ trỡnh lờn men, cũn ca nm men ni xy ra mnh trong quỏ trỡnh hụ hp, vỡ vy sinh khi nm men ni thu c nhiu hn nm men chỡm Nm men chỡm cú nng enzyme thp hn nm men ni Kh nng to bo t ca nm men chỡm lõu hn... men (yeast cell wall), hay dch chit nm men cha nucleotide t nhiờn Chuyờn ngnh Vi sinh vt hc 6 Vin NC&PT Cụng ngh Sinh hc Lun vn tt nghip i hc Khúa 37 2014 Trng i hc Cn Th 2.1.4 Sinh trng v sinh sn - Sinh trng Cng nh cỏc vi sinh vt khỏc, quỏ trỡnh sinh trng ca nm men gm pha: pha tim phỏt, pha ly tha, pha cõn bng v pha suy vong Hỡnh 3 ng cong sinh trng ca qun th nm men trong mụi trng nuụi cy (Ngun: http://www.doko.vn... 5-6 àm Nm men Saccharomyces cú hỡnh cu hay hỡnh trng, cú kớch thc nh, t 5-14 àm, l loi nm men thuc nhúm c th n bo, gm cú nm men chỡm v nm men ni Nm men ni: t bo nm men m v con sau khi ny chi thng dớnh li vi nhau to thnh chui t bo nm men Hỡnh dng ch yu l hỡnh cu hoc ovan vi kớch thc 7-10 àm S khỏc nhau gia nm men ni v nm men chỡm l kh nng lờn men cỏc loi ng trisacarit, vớ d raffinose Trong nm men chỡm... trỡnh sinh sn vụ tớnh, chi mi phỏt trin t men m khi cỏc iu kin thớch hp v sau ú, khi chi t ti kớch thc ca men trng thnh thỡ nú tỏch ra khi men m Khi cỏc iu kin dinh dng kộm, men cú kh nng sinh sn hu tớnh s to ra cỏc nang bo t + Sinh sn vụ tớnh: Sinh sn vụ tớnh nm men thng gp nht l ny chi, khi mt chi hon chnh s phỏt trin ngay, ú chi s ni lin vi t bo m v khi chũi ri ra t bo m gi l im sinh sn + Sinh. .. to nm men Saccharomyces cerevisiae (Ngun: http://icfood.vn - ngy 27/6/2014) Nm men c s dng to ra men chit xut c s dng nh l mt cht iu v trong ch bin thc phm hay lm thnh phn cung cp ngun nit v cỏc cht kớch thớch sinh trng vo mụi trng nuụi cy vi sinh Men chit xut gm cỏc sn phm cú giỏ tr dinh dng v kinh t cao nh dch chit nm men (yeast extract), dch t phõn nm men (yeast autolysate), dch vỏch t bo nm men. .. tin nh ph phm ca ngnh mớa ng, sn xut bia, ch bin tinh bt v hoa qu Nm men thụ c s dng trc ht l ngun protein trong dinh dng ng vt, ch yu l trong chn nuụi Ngy nay cụng ngh sn xut v th trng tiờu th bia ngy cng phỏt trin, sn lng bia c to ra vi mt s lng ln, kộo theo lng bó bia thi ra cng tng Mt s cỏc ph phm c sn xut gn vi sn xut bia, bao gm cỏc loi bó bia t hoc khụ v men bia khụ Trong quỏ trỡnh sn xut v ch... thc n kộm ngon ming - Giỏ r Chuyờn ngnh Vi sinh vt hc 19 Vin NC&PT Cụng ngh Sinh hc Lun vn tt nghip i hc Khúa 37 2014 Trng i hc Cn Th 2.5 Tỡnh hỡnh nghiờn cu trong v ngoi nc v sn xut sinh khi nm men 2.5.1 Tỡnh hỡnh nghiờn cu ngoi nc Con ngi ó hiu bit v nm men v nhng tớnh cht ca nú khong 150 nm tr li õy n u th k XIX, nm men bia, nm men thi ra t nh mỏy sn xut bia ó c con ngi ỏp dng vo sn xut bỏnh mỡ Cui... trỡnh lờn men ca ging Saccharomyces cerevisiae a ra kt qu rng pH t 4 5,5 l tt nht cho hot ng ca nm men ẫrika Duróo Vieira, Maria da Graỗa Stupiello Andrietta, v Silvio Roberto Andrietta (2013) s dng ging Saccharomyces cerevisiae lm sinh khi cho kt qu sau 16 gi sinh khi nm men ó tng gp 100 ln Ngy nay, vi s hiu bit v vi sinh vt hc, con ngi ó phn no gii thớch c quỏ trỡnh lờn men v tng sinh Nm men Saccharomyces