MỤC LỤC DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH .4 DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT CHƯƠNG 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề .1 1.2 Mục tiêu nghiên cứu đề tài CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN 2.1 Cấu tạo chức sinh lý tuyến vú 2.1.1 Cấu trúc bầu vú bò sữa 2.1.2 Quá trình tạo sữa bầu vú 2.2 Sữa thành phần sữa 2.3 Bệnh viêm vú bò sữa (Bovine Mastitis) 2.3.1 Một vài khái niệm 2.3.2 Phân loại bệnh viêm vú bò sữa 2.3.3 Một số biểu lâm sàng biến đổi bệnh lý bệnh viêm vú bò sữa 2.4 Những ngun nhân gây bệnh viêm vú bị sữa 11 2.4.1 Bò 11 2.4.2 Vi sinh vật gây nhiễm 11 2.4.3 Môi trường 12 2.5 Một số phương pháp thiết bị đặc hiệu chẩn đoán bệnh viêm vú 13 2.5.1 Phương pháp thử cồn 13 2.5.2 Phương pháp thử nghiệm Blue Methylen (Blue Methylen Test) 14 2.5.3 Phát sữa viêm thuốc thử CMT (California Mastitis Test) .14 2.5.4 Xác định số lượng bạch cầu, tế bào nhu mô sữa 15 CHƯƠNG 3: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 3.1 Thời gian địa điểm 16 3.1.1 Thời gian 16 3.1.2 Địa điểm 16 3.2 Nội dung phương pháp nghiên cứu .16 3.2.1 Nội dung .16 3.2.2 Các cơng thức tính 18 3.2.3 Quản lí xử lí số liệu 18 DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT CHƯƠNG 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Trong năm gần đời sống kinh tế phát triển mạnh kéo theo nhu cầu thực phẩm số lượng chất lượng ngày cao Một thực phẩm có giá trị dinh dưỡng,dễ hấp thu người tiêu dùng quan tâm sữa mà chủ yếu sữa bị Sữa bị sản phẩm có giá trị đời sống hàng ngày thiếu quốc gia phát triển Nước ta kinh tế ngày phát triển nhu cầu sữa ngày tăng khơng địi hỏi số lượng mà chất lượng Sản phẩm sữa làm phong phú thêm mặt hàng thực phẩm, thoả mãn nhu cầu người tiêu dùng, góp phần đem lại lợi nhuận kinh tế cho người chăn nuôi Hiện chăn ni bị sữa Việt Nam phát triển nhanh với nhiều tiềm lớn Người chăn nuôi đáp ứng tốt phần quản lý chuồng trại nên hạn chế tối đa số bệnh Tuy nhiên , số bệnh gây ảnh hưởng trực tiếp lên đàn bị từ ảnh hưởng tới thu nhập người chăn nuôi Trong loại bệnh thường xảy bò sữa, bệnh viêm vú bệnh phổ biến, dễlây lan gây thiệt hại kinh tế lớn làm giảm sản lượng sữa chất lượng sữa Tại Việt Nam, thời gian gần đây, bệnh viêm vú đàn bò sữa bắt đầu quan tâm Nhiều khảo sát cho thấy tỷ lệ bệnh viêm vú đàn bò sữa vào khoảng 30 -50% đàn bò sữa bị mắc bệnh Nhằm mục đích nắm rõ tỷ lệ mắc bệnh viêm vú đưa biện pháp phòng trị bệnh hiệu quả, tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu thực trạng bệnh viêm vú bò sữa địa bàn huyện Củ Chi thành phố Hồ Chí Minh thử nghiệm biện pháp phịng trị” 1.2 Mục tiêu nghiên cứu đề tài - Xác định tỷ lệ mắc bệnh viêm vú đàn bị sữa ni nơng hộ huỵện Củ Chi TP Hồ Chí Minh - Đưa biện pháp phòng bệnh hiệu nhằm hạn chế tỷ lệ mắc bệnh viêm vú đàn bò sữa - Thử nghiệm điều trị viêm vú tiềm ẩn CHƯƠNG 2: TỔNG QUAN 2.1 Cấu tạo chức sinh lý tuyến vú 2.1.1 Cấu trúc bầu vú bò sữa a Tuyến sữa: Gồm có thân tuyến khối lượng tuyến tiết sữa núm vú để tiết sữa Vậy tuyến sữa tuyến ngoại tiết có hay nhiều hệ hốc để tích lũy trước đẩy ngồi bể chứa sữa Đầu núm vú hình thành kênh núm vú mà lòng phủ lớp tế bào tiết chất keratin (một chất ngăn khơng cho vi trùng qua, trí giết chết vi trùng) Phần ngồi kênh núm vú đóng trơn nhỏ đàn hồi gọi sphincter Hình Cấu trúc tuyến vú nang tuyến Các vú cách ly với mơ liên kết mơ cơ: dây treo Dây treo sau có tầm quan trọng để nâng đỡ vú, giữ cho vú khỏe mạnh, cho tuyến bền lâu tạo tư cho bò Tuyến vú chứa chùm túi nhỏ (gọi acini) túi nhỏ tuyến sản sinh sữa tí hon, lát tế bào biểu mô, chịu trách nhiệm sản sinh sữa Nó bao quanh tế bào gọi biểu mô cơ, tế bào chịu trách nhiệm co bóp túi nhỏ cho bú vắt sữa để đẩy sữa điều khiển hormone Người ta thấy có hàng tỷ túi nhỏ vú bò Mỗi túi nhỏ tiếp tế vài tỷ huyết quản thoát sữa kênh sữa, kênh liên búp nhỏ để đến bể chứa vú b Cấu tạo bầu vú Tuyến vú có nguồn gốc từ da, hình chùm nho phúc tạp Tuyến vú có phần: Bao tuyến hệ thống ống dẫn Bao tuyến tế bào biểu mô phân tiết tạo thành, nơi sản sinh sữa Các bao tuyến giống túi nhỏ ống dẫn nhỏ, sau tập trung thành ống dẫn trung bình đến ống dẫn lớn cuối bể sữa đáy tuyến vú Bể sữa xoang rỗng tích tương đối lớn để chứa sữa từ ống dẫn sữa đổ Bể sữa thơng ngồi qua ống dẫn đầu núm vú, bị đầu núm vú có dẫn thông với bể sữa Những tế bào biểu mô co bóp sữa xoang bao tuyến thải Ống dẫn sữa bể sữa có sợi trơn bao bọc, xếp thành vòng tròn tạo cho núm vú có vịng rõ rệt, giữ vai trị thắt chặt bầu vú khơng có q trình thải sữa Các mơ liên kết, mơ mỡ bao quanh tồn tuyễn vú, đồng thời mơ sâu vào bên tạo thành màng mỏng, màng chia tuyến vú thành nhiều thùy nhỏ Trong bao tuyến có hệ thống mạch quản dày đặc, hệ thống mạch quản làm nhiệm vụ mang chất dinh dưỡng, oxy nguyên liệu cần thiết cung cấp cho bao tuyến hình thành sữa 2.1.2 Quá trình tạo sữa bầu vú Sữa tạo từ nang tuyến Từ nang tuyến sữa chảy vào ống dẫn sữa nhỏ, từ ống sữa nhỏ tập hợp vào ống dẫn sữa, ống sữa lớn chảy vào bể sữa Bểsữa nơi dự trữ sữa Bầu vú có bể sữa tách biệt, khơng thơng Cơ vịng đầu núm vú giữ cho sữa khơng hai lần vắt sữa Sữa tổng hợp từ nguyên liệu máu Để sản xuất lít sữa, bình qn có khoảng 540 lít máu chuyển qua bầu vú để cung cấp nguyên liệu cho trình tạo sữa Tuyến vú bò sữa chiếm -3% thể trọng bò tạo lượng sữa với lượng vật chất khơ năm lớn trọng lượng bị 2.1.3 Chức sinh lý tuyến vú Khi non tuyến vú đực giống Gia súc thành tính, ống dẫn sữa sinh trưởng phát triển thành nhỏ phúc tạp, đến có thai, tuyến vú phát triển nhanh chóng, số lượng ống dẫn sữa tăng lên, tận ống dẫn sữa hình thành phát triển bao tuyến Cuối thời kỳ có thai, mô tiết sữa bao tuyến bắt đầu phân tiết, tuyến vú hình thành trình sản sinh thải sữa Sau đẻ, tuyến vú hoạt động mạnh làm xuất trạng thái tiết sữa đầu Hình 2 Phản xạ tiết sữa: Sữa tiết theo chế phản xạ Phản xạ tiết sữa liên quan đến thần kinh thể dịch (các kích thích tố, hormone) Khi bị nhận tác nhân kích thích dẫn truyền vào võ đại não thông qua hệ thần kinh Từ phát xung lệnh đến quan hệ thống thể dịch để thực việc tiết sữa: kích thích hệ thống trơn ống dẫn, bể sữa tiết xuất oxytocin (gây co bóp biểu mơ tuyến bào) Trong suốt thời gian thải sữa 40% sữa nằm bể sữa hệ thống ống lớn, lại 40% sản xuất dự trữ hệ thống ống dẫn nhỏ kênh nhỏ Sức ép co thắt đẩy sữa tác động oxytocin, vắt không kịp lượng oxytocin giảm hết hệ thống ống chứa sữa nhỏvà kênh nhỏ đóng lại.và sữa tồn lại hệ thống ống dẫn nhỏ Muốn cho thải sữa hồn tồn việc vắt sữa phải bắt đầu tức xảy tượng thải sữa Bởi vì, oxytocin chấm dứt tiết ra, thời gian vắt sữa chậm tượng thải sữa phút, có nghĩa 25% sữa tồn lại bầu vú sản lượng sữa giảm (theo thống kê nước lượng giảm kg/bò/ngày bò cái) Các tác nhân kích thích (tín hiệu kích thích) bao gồm: • Thịgiác:nhìn thấy bê, người vắt sữa, máy vắt sữa, chỗ vắt sữa • Thính giác:nghe tiếng bê kêu, tiếng máy vắt sữa hoạt động, tiếng xô vắt sữa, tiếng người vắt sữa… • Khứu giác:mùi người vắt sữa, mùi thuốc sát trùng bầu vú • Xúc giác: xoa bóp, massage bầu vú Hình Phản xạ tiết sữa 2.2 Sữa thành phần sữa Sữa tiết sau đẻ gọi sữa đầu (colostrum, sữa non, sữa máu) sữa tiết vềsau gọi sữa thường Thành phần quan trọng sữa đầu globulin miễn dịch (immunoglobulin) Đây chất quan trọng việc bảo vệ bê sơ sinh chống lại tác nhân gây bệnh Thêm vào đó, sữa đầu cịn chứa chất“transferrin” “lactoferrin” Các chất hấp thu qua hệ thống ruột non bê phần lại ruột non để trung hoà vi khuẩn gây bệnh giúp ngăn ngừa tiêu chảy Các globulin miễn dịch có khả kháng enzym tiêu hoá ruột non phần nhờ khả bảo vệ chất ức chế trypsin nên có khả tồn thời gian đầu Sau hệ thống ruột non hình thành chế để ngăn ngừa việc hấp thu chất globulin miễn dịch Chính lý , người chăn nuôi cần phải cho bê uống sữa đầu sớm tốt, theo thời gian hấp thu globulin miễn dịch giảm dần Bảng Ảnh hưởng thời gian cho uống sữa đầu đến khả hấp thu globulin miễn dịch bê Thời gian cho uống Hàm lượng Globulin Tỉ lệ hấp thu(%) sữa đầu sau sinh miễn dịch huyết (giờ) tương 24 h sau 12 24 36 48 cho uống (mg/ml) 52,7 37,5 9,2 5,4 4,8 66 47 12 Thành phần sữa thay đổi tùy theo giống bị, chế độ dinh dưỡng, điều kiện nuôi dưỡng, môi trường, chuồng trại, tình trạng bệnh tật, sức khỏe bị như: - Sự khác tỷ lệ tăng trưởng thời nhỏ - Khả suất cho sữa, giai đoạn chu kỳ cho sữa - Do hệ thống tiêu hóa (sự hấp thu thức ăn) - Do chế độ vắt sữa: bú sữa, vắt tay, máy vắt - Môi trường xung quanh (lạnh tỷ lệ béo cao) - Lứa đẻ, kết cấu bầu vú… Thức ăn ảnh hưởng đến thành phần sản lượng sữa Bò ăn nhiều thức ăn thơ xanh, bánh dầu tỷ lệ béo sữa gia tăng Bò ăn thức ăn tinh (cám hỗn hợp nhiều) sản lượng gia tăng tỷ lệ béo giảm Sữa thường chứa nhiều chất béo, đạm chất khoáng (chủ yếu canxi) Bảng 2 Thành phần sữa đầu sữa thường Thành phần Vật chất khô Nước Chất béo Chất bột đường Chất đạm Trong Casein Albumin α-lactoglobulin β-lactoglobulin γ- globulin Cancium Sữa đầu (%) 19 -22 78 – 81 3, – 4,0 5,2 - 6,1 13,2 – 14,3 4,8 – 5,2 1,1 – 1,5 0,60 – 0,80 0,22 – 0,27 5,5 – 6,9 8-9 Sữa thường (%) 12 -13 87 – 88 3, - 3,9 4,2 -4,8 3,2 – 3,8 2,4 - 2,6 0,44 – 0,47 0,30 – 0,33 0,11 – 0,13 0,07 – 0,09 10 - 11 2.3 Bệnh viêm vú bò sữa (Bovine Mastitis) 2.3.1 Một vài khái niệm + Viêm vú (Mastitis) Bệnh viêm vú bò sữa phản ứng viêm tuyến vú Viêm đáp ứng mô tiết sữa núm vú tổn thương có mặt vi khuẩn gây bệnh + Tuyến vú bình thường (normal udders) tuyến vú dấu hiệu trình bệnh lý, sữa từ tuyến vú tiết khơng có vi sinh vật gây bệnh số tế bào đếm bình thường (< 500.000/ml) + Nhiễm trùng chậm (latent infection): Nhiễm trùng chậm thể sữa có mặt vi sinh vật gây bệnh số tế bào đếm bình thường + Viêm vú cận lâm sàng (subclinical mastitis): viêm vú cận lâm sàng đặc trưng biến đổi rõ rệt tuyến sữa sữa Những biến đổi mức độ nặng nhẹ khác trình diễn biến bệnh + Viêm vú cấp tính (acute mastitis): Các trường hợp cấp tính đặc trưng xuất đột ngột biểu sưng, tấy , đỏ, bầu sữa rắn, vật đau, sữa khơng bình thường sản lượng giảm Những biểu toàn thân sốt ăn + Viêm vú cấp tính (past acute mastitis): thể bệnh thấy có biểu trên, có biểu biểu suy nhược, tăng nhịp tim tần số hô hấp, vận động kém, chân lạnh, phản xạ mắt giảm, nước tiêu chảy + Viêm vú mạn tính (chronical mastitis): Thể mãn tính bắt đầu thể lâm sàng thể cận lâm sàng Thường có hình thành sẹo làm biến đổi hình dạng tuyến sữa bị nhiễm.cùng với giảm sản lượng sữa 2.3.2 Phân loại bệnh viêm vú bò sữa a Phân loại theo biểu triệu chứng  Thể lâm sàng (có biểu bên ngịai): Bệnh viêm vú thể lâm sàng bệnh có biểu triệu chứng cụ thể (sưng, nóng, đỏ, đau) Mức độ nghiêm trọng bệnh hậu bệnh biểu rõ rệt nên người ta dễ dàng xử lý điều trị đánh giá mức độ nguy hiểm thiệt hại bệnh gây không lớn so với bệnh tiềm ẩn  Thể tiềm ẩn : Bệnh viêm vú thể tiềm ẩn phổ biến gây thiệt hại kinh tế lớn làm giảm sản lượng sữa chất lượng sữa Bệnh nguy hiểm chỗ trì mầm bệnh, lây lan cho bị khác mà ngừơi chăn ni khơng biết Bị có triệu chứng bên ngồi, thường ăn, sữa bị bị tủa khơng có biểu triệu chứng bầu vú b Phân loại theo tính chất gây bệnh  Viêm vú lây nhiễm Bệnh gây vi sinh vật gây bệnh Streptococcus agalactiae, Streptococcus dysgalactiae Staphylococcus aureus nguồn lây nhiễm chủ yếu từ vú bò bị bệnh viêm vú  Viêm vú tác nhân môi trường Bệnh gây vi sinh vật hội nằm mơi trường chung quanh bị (từ chuồng trại, thiết bị, chất độn chuồng, phân, nguồn nước…) Các nhóm vi sinh vật chủ yếu nhóm Coliform (Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca, Enterobacter aerogenes), nhóm Streptococcus (S uberis, S bovis, Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis) 2.3.3 Một số biểu lâm sàng biến đổi bệnh lý bệnh viêm vú bò sữa Bệnh viêm vú thường biểu nhiều hình thức trạng thái bệnh lý khác nhau, phụ thuộc vào mức độ đề kháng thể, mức độ nhiễm khuẩn thời gian sảy bệnh mà đặc điểm bệnh thể lâm sàng khác Nhiều tác giả phân chia trình bệnh lý tuyến vú làm thể khác a Viêm vú thể dịch (mastits serosa) Bệnh thường gặp 1-2 tuần đầu sau đẻ Phần vú bị viêm lớn dần lên thể tích bị xung huyết, có cảm giác nóng Lúc đầu vật khơng đau, mắt thường khơng nhìn thấy biến đổi sữa Về sau trình viêm lan đến phận tiết sữa làm cho lỗng hơn, sữa chứa nhiều tế bào bạch cầu biểu mô Dịch rỏ viêm nước vàng thải nhiều da b Viêm vú thể cata (Mastitiis Catarrhalis) Thể viêm bao gồm: Viêm cata bể sữa, ống dẫn sữa viêm cata nang sữa  Viêm cata bể sữa ống dẫn sữa Chủ yếu liên cầu trùng, tụ cầu trùng E.coli gây niêm mạc đầu vú khơng khép kín hoạc sữa tích nhiều tuyến vú liên tục rỉ Thể bệnh thường xuất 1-2 vú, vú có biểu trạng thái xung huyết (do phù niêm mặc bể sữa, ống dẫn sữa) Sau lớp màng tế bào biểu mơ bể sữa ống dẫn sữa bị thối hóa, casein sữa bị đơng vón thành hạt nhỏ màu xanh hay vàng nhạt bịt kín ống dẫn sữa Thành ống dẫn sữa giảm, lòng ống chứa đầy dịch viêm Khi xoa bóp vú có cảm giác nóng, sờ thấy cục sữa đơng, phản ứng đau thể nói chung yếu ớt có khơng biểu Khi vắt sữa tia sữa lỗng, chữa nhiều hạt đơng vón, lợn cợn, tia sữa sau gần bình thường, lượng sữa giảm  Viêm cata nang sữa: Do trình viêm cata nang sữa bể sữa không trị kịp thời lâu ngày vi khuẩn phát triển làm tổn thương nang sữa Khi sờ nắn có cảm giác nóng, cứng bình thường, sữa có nhiều cục sữa đơng kết tia sữa cuối c Viếm vú thể Fibrin (Mastitis fibrinosa) Viêm vú thể thường kế phát viêm vú dịch, viêm cata tiến triển từ viêm nội mạc tử cung Viêm vú thể fibirin thể viêm mà tế bào tổ chức liên kết nang sữa ống dẫn sữa chứa nhiều fibirin Dịch rỉ viêm chứa nhiều fibirin tế bào chết fibrin bịt kín niêm mặc ống dẫn sữa đơng vón Con vật mệt mỏi, sốt cao, bỏ ăn chí ngừng tiết sữa Bầu vú sưng to, sờ thấy nóng, cứng, xoa bóp vật đau đớn, khó chịu nghe tiếng lạo sạo sợi fibrin  Một số thể viêm vú bị sữa khác: Ngồi thể có số thể khác tần số xuất nên gặp như: Viêm vú thể có mủ ( Mastitis purulenta), viêm vú thể áp xe ( Mastitis abcessus uberi), viêm vú thể có máu ( Masstitis haemonrhagica), viêm vú thể biến chứng, teo bầu vú viêm vú hoá cứng, viêm vú hoại thư Hình Nang tuyến bị vi khuẩn công huỷ hoại 10 2.4 Những nguyên nhân gây bệnh viêm vú bị sữa Gồm ba ngun nhân sau: 2.4.1 Bị Ngun nhân xuất phát thân bị sữa tuỳ thuộc vào cá thể bị Như bị có bầu vú q to dài dễ gây xây xát, lổ thông đầu vú to dễ rò rỉ, bò cao sản điều kiện để bộc phát bệnh 2.4.2 Vi sinh vật gây nhiễm Vi sinh vật có ảnh hưởng lớn sức khỏe người động vật qua khả lây nhiễm chúng có nhiều loại (type) phát triển gây bệnh Chúng diện khơng khí, thức ăn, chuồng trại, người vắt sữa, đất, phân, nước tiểu Chúng xâm nhập vào thể động vật qua thở, uống, ăn, vết thương, lổ núm vú…Các vi sinh vật phát triển nhanh chóng chúng hấp thụ dinh dưỡng cách hại máu, hại tế bào…Nhưng bên cạnh đó, nguy hiểm chúng tiết độc tố(toxin) Các độc tố làm ảnh hưởng đến thể, giảm chức hoạt động quan cơthể Khi vi trùng xâm nhập vào tuyến sữa, chúng công tế bào tiết sữa để lấy dưỡng chất từ làm ảnh hưởng đến khả tiết sữa tuyến sữa Có nhiều loại vi trùng gây bệnh viêm vú: Liên cầu khuẩn (Streptococcus): Trong loại vi khuẩn gây bệnh viêm vú, liên cầu khuẩn (streptococcus) chiếm 86%, chủyếu S.agalactiae, S dysgalactiae 11 S uberis S.agalactiae vi khuẩn Gram + phát triển mô tuyến vú dễ bị khống chế tiêu diệt S dysgalactiae S uberis phát triển bên ngồi mơ tuyến vú khó loại trừ Ba loại chủ yếu phát triển sữa công lớp tế bào bề mặt ống dẫn sữa Tụcầu khuẩn(Staphyloccus) chiếm 5,4% trường hợp, S.aureus (vi khuẩn Gram +) vi khuẩn gây bệnh mạnh thường dạng cấp tính Vi khuẩn xâm nhập công vào tế bào nang có tính kháng penicilline (có chủng vi khuẩn có khả hình thành penicillinaza phân huỷpenicilline), khó xử lý Bên cạnh đó, cịn sản sinh độc tố(coagulaza, hemolysine) gây co thắt mạch máu hoại tử mô tếbào Trực khuẩn bao gồm trực trùng sinh mủ2,7%, E.coli1,2%, loài vi trùng khác 3,75% Các vi khuẩn sống chủ yếu môi trường (phân, chất độn, nguồn nước bị nhiễm…) Gây viêm vú truyền nhiễm cho bị sữa có 80% gây viêm vú Streptococcus agalactiaevà Streptococcus dysagalactiae Bệnh lan truyền chủ yếu người vắt sữa, dụng cụ vắt sữa ruồi Bệnh biểu viêm vú, sưng tụ máu, sữa màu xanh lợn cợn máu, vú teo dần 2.4.3 Môi trường Tác nhân từ môi trường bao gồm nhiều yếu tố như:  Thời tiết khí hậu: Hình Quan hệ ngun nhân gây bệnh viêm vú tiểu Các tác nhân bầu khí hậu chuồng ni bị sữa nhiệt độ, ẩm độ có ảnh hưởng trực tiếp gián tiếp lên tỷ lệ mắc 12 bệnh viêm vú bò sữa Mặt khác nhiệt độ cao, ẩm độcao điều kiện thuận lợi cho vi sinh vật gây bệnh, côn trùng mang tác nhân gây bệnh phát triển từ gián tiếp gây bệnh  Chuồng trại: - Bị ni giữtrong chuồng dễmắc bệnh viêm vú - Tuy nhiên, chăn thả ngồi đồng cỏ, khơng kiểm sốt hồn tồn, cần phải ý đến tổn thương bầu vú từ dễmắc bệnh  Nguồn thức ăn, nước uống: - Người ta nhận thấy có mối liên hệ phần ăn bệnh viêm vú, ý đến mức cân dưỡng chất phần việc thay đổi phần ăn nhanh  Chăm sóc, vắt sữa: Phương pháp vắt sữa, kỹthuật vắt sữa không đúng, thời gian sốlần vắt, áp lực vắt không đảm bảo định dễgây ảnh hưởng đến bầu vú Người vắt sữa có trách nhiệm,lau gia súc, dọn nơi vắt sữa, rửa dụng cụvắt sữa tay rửa trước bắt đầu vắt sữa Người vắt sữa phải khỏe mạnh không mang vi trùng hay bệnh tật có khả truyền vi trùng lây lan sang gia súc Hình Các tác nhân gây lây truyền bệnh viêm vú 2.5 Một số phương pháp thiết bị đặc hiệu chẩn đoán bệnh viêm vú 2.5.1 Phương pháp thử cồn 13 - Phương pháp dựa vào nguyên tắc chất đạm môi trường acid bị tủa cồn Cồn sử dụng cồn 70-75 độ Tỷlệcồn sữa: 1:1 - Tiến hành: cho 2ml sữa vào 2ml cồn 70 độchứa ống nghiệm,quan sát thành ống nghiệm - Kết quả: Dung dịch đồng âm tính (khơng viêm vú); có mảng bámblợn cợn thành ống nghiệm bị viêm vú 2.5.2 Phương pháp thử nghiệm Blue Methylen (Blue Methylen Test) Phần lớn vi sinh vật gây ô nhiễm sữa phát triển làm thay đổi hiệu oxy hoá khử Nếu cho chất màu vào sữa chất màu thay đổi, tuỳ theo thời gian đổimàu ước tính độ nhiễm vi sinh sữa Dung dịch Blue Methylen pha nhưsau: Blue Methylen 5ml, nước cất vừa đủ 100cc tạo dung dịch Blue Methylen, ống nghiệm sấy tiệt trùng có nút đậy, Pipete 10ml 1ml.Tiến hành thử: thử nghiệm điều kiện vô trùng, cho vào ống nghiệm 10ml sữa, Blue Methylene 1ml Nút ống lại cẩn thận, lắc nhẹ cho dung dịch trộn sau để vào tủ ấm 37oC Sau mổi lắc nhẹ lần xác định độ màu thời gian Như sau: lúc vừa cho vào tủ ấm, sau 10 phút, sau giờ, sau - Nếu màu trước 15 phút: sữa nhiễm vi sinh nhiều - Nếu màu sau 15 phút đến giờ: sữa bị nhiễm nặng - Nếu màu sau đến giờ: sữa bị nhiễm nhẹ - Nếu màu sau giờ: sữa coi đạt tiêu chuẩn 2.5.3 Phát sữa viêm thuốc thử CMT (California Mastitis Test)  Nguyên tắc phướng pháp nhằm phát bệnh viêm vú qua sốlượng tếbào bạch cầu ml sữa Tỷlệxét nghiệm: 1-1 (giữa dung dịch CMT sữa)  Thao tác: sau vắt sữa rửa núm vú, lấy sữa vú cho vào đĩa Pétri hay cốc đựng, lấy 2ml lượng vừa đủ để xét nghiệm Bơm 2ml thuốc thử CMT vào đĩa Pétri có chứa 2ml sữa Xoay trịn đĩa, đặt đĩa Pétri nơi tối đểquan sát, đọc kết dựa đóng vón thay đổi màu sắc hổn hợp Thành phần hoá chất thuốc thửgồm: chất màu đỏ xẩm 14 bromocrésol 1/10.000 dung dịch teepol10% Sự đơng vón phụ thuộc vào mật độ tế bào bạch cầu sữa với mức độ đo lường tình trạng viêm nhiễm  Kết quả: Bò mạnh khoẻ: 300.000 tếbào/ ml Bảng Kết CMT 2.5.4 Xác định số lượng bạch cầu, tế bào nhu mô sữa - Phương pháp tiến hành trực tiếp sữa hay cạn sữa ly tâm phương pháp nhằm mục đích: - Xác định độ nhiễm khuẩn sữa - Xác định số lượng vi khuẩn 1ml sữa - Tìm loại vi khuẩn sữa 15 CHƯƠNG 3: NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 3.1 Thời gian địa điểm 3.1.1 Thời gian Từ / / 2014 đến / / 2014 3.1.2 Địa điểm Đàn bò bò sữa ni hộ gia đình huyện Củ Chi, thành phố Hồ Chí Minh 3.2 Nội dung phương pháp nghiên cứu 3.2.1 Nội dung a Khảo sát bệnh viêm vú bị sữa  Mục tiêu Khảo sát tình trạng bệnh viêm vú bò sữa địa bàn xã Phú Hịa Đơng, huyện Củ Chi, TP.HCM  Đối tượng khảo sát Chọn 200 bò cho sữa hộ dân chăn ni bị sữa địa bàn huyện Củ Chi Các hộ có quy mơ khác chọn hoàn toàn ngẫu nhiên  Thu nhập, xử lí bảo quản mẫu - Đến hộ chăn ni bị sữa lấy mẫu sữa thùy vú để thử mức độ viêm vú tiềm ẩn chỗ với thuốc thử CMT - Lấy 2ml sữa thùy vú cho vào khay thử theo ô quy định sau cho vào 2ml thuốc thử CMT  Các tiêu khảo sát - Độ đồng hỗn hợp sữa thuốc thử CMT - Màu sắc hỗn hợp - Số lượng tế bào ước đoán ml sữa b Khảo sát yếu tố gây bệnh viêm vú tiềm ẩn cá thể bò  Mục tiêu Xác định yếu tố ảnh hưởng tới bệnh viêm vú tiềm ẩn cá thể bò 16  Các tiêu khảo sát - Lứa đẻ - Tháng cho sữa chu kì sữa - Quy mô chăn nuôi - Mức độ vệ sinh trại c Phân lập xác định vi khuẩn gây bệnh mẫu sữa bò bị viêm vú thử kháng sinh đồ  Mục tiêu Xác định vi khuẩn diện sữa bò bị viêm vú Sau đó, mức độ mẫn cảm hay đề kháng vi khuẩn số kháng sinh nhằm đưa hướng điều trị phù hợp  Thu thập, xử lí, bảo quản mẫu - Mẫu sữa chọn lấy trực tiếp từ thùy vú bò bị viêm xác định pp thử CMT - Vệ sinh sát trùng bầu vú cồn 70 độ - Lấy mẫu sữa cho vào ống nghiệm vô trùng - Đậy kĩ, đánh số kí hiệu cho vào bình đá bảo quản độ C  Thử kháng sinh đồ - Các gốc vi khuẩn phân lập từ mẫu sữa viêm xác định khả đề kháng với kháng sinh thông dụng thị trường theo pp Kirby Bauer - Vi khuẩn dược làm hoạt hóa sang mơi trường thạch ống nghiêng NA ủ 37 độ C 24h sau làm huyễn dịch vi khuẩn thấm huyễn dịch vi khuẩn trải bề mặt đĩa thạch Mueller-Hilton Đặt đĩa giấy tẩm kháng sinh lên bề mặt đĩa thạch trải trùng đem ủ 37 độ C 18-24h - Các đĩa kháng sinh sử dụng: ampicillin, amoxcillin, cephalexin, pennicillin, gentamycin, kanamycin, neomycin, streptomycin, norfloxacine, spiramycin, ciprofloxacin, ofloxacin, erythromycin, doxicycline, tetracycline, Bactrim, colistin, tobramycin 17 d Thử nghiệm điều trị viêm vú bị sữa  Mục tiêu Tìm pp điều trị hiệu để giúp người chăn ni ứng dụng điều trị viêm vú bị  Biện pháp thực Dựa vào kết phân lập vi khuẩn thử kháng sinh đồ cá chế phẩm kháng sinh có thị trường dùng để điều trị viêm vú Chọn bị có vú bị viêm mức độ CMT 3(++) 4(+++) để điều trị  Bố trí thí nghiệm Bảng Bố trí thí nghiệm Đường cấp thuốc Tiêm Bơm trực tiếp vào Sản phẩm điều trị Oxytetracyclin Số thùy vú điều trị 50 Số ngày điều trị Mastijet Fort 89 50 thùy vú Tiêm + Bơm trực Oxytetracyclin + tiếp vào thùy vú Mastijet Fort Tổng 189  Đánh giá kết điều trị Sau ngày điều trị lấy mẫu sữa thùy vú điều trị để thử CMT Nếu kết CMT 0(-) 1(±) đánh giá điều trị có kết 3.2.2 Các cơng thức tính - Tỉ lệ bị viêm vú tiềm ẩn (%) = ( số bò thử CMT dương tính / tổng số bị thử CMT) * 100 - Tỉ lệ vú viêm tiềm ẩn (%) = ( số vú thử CMT dương tính / tổng số vú thử CMT)* 100 - Tỉ lệ điều trị khỏi (%) = ( số thùy vú khỏi / số thùy vú điều trị ) * 100 3.2.3 Quản lí xử lí số liệu - Quản lí số liệu phần mềm excel 18 - Xử lí số liệu phần mềm minitab 16.1 • • So sánh tỉ lệ trắc nghiệm χ So sánh số trung bình trắc nghiệm Turkey - Ảnh hưởng nghiệm thức xem có ý nghĩa P < 0,05 19 20 ... cứu thực trạng bệnh viêm vú bò sữa địa bàn huyện Củ Chi thành phố Hồ Chí Minh thử nghiệm biện pháp phòng trị? ?? 1.2 Mục tiêu nghiên cứu đề tài - Xác định tỷ lệ mắc bệnh viêm vú đàn bị sữa ni nông... bệnh viêm vú đàn bò sữa vào khoảng 30 -50% đàn bò sữa bị mắc bệnh Nhằm mục đích nắm rõ tỷ lệ mắc bệnh viêm vú đưa biện pháp phòng trị bệnh hiệu quả, tiến hành nghiên cứu đề tài: ? ?Nghiên cứu thực. .. sát bệnh viêm vú bò sữa  Mục tiêu Khảo sát tình trạng bệnh viêm vú bò sữa địa bàn xã Phú Hòa Đông, huyện Củ Chi, TP.HCM  Đối tượng khảo sát Chọn 200 bò cho sữa hộ dân chăn ni bị sữa địa bàn huyện