TRƢỜNG ĐẠI HỌC SƢ PHẠM HÀ NỘI KHOA SINH – KTNN - PHẠM THỊ PHƢƠNG NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG HẠ ĐƢỜNG HUYẾT VÀ KHẢ NĂNG CHỐNG RỐI LOẠN TRAO ĐỔI LIPID CỦA DỊCH CHIẾT TỪ HẠT LOÀI ĐẬU ĐEN (Vigna cylindrica(L.) TRÊN MÔ HÌNH CHUỘT ĐÁI THÁO ĐƢỜNG THỰC NGHIỆM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Chuyên ngành: Hóa sinh học Ngƣời hƣớng dẫn khoa học TS TRẦN THỊ PHƢƠNG LIÊN HÀ NỘI – 2015 LỜI CẢM ƠN Lời đầu tiên, xin gửi lời cảm ơn chân thành sâu sắc tới TS Trần Thị Phƣơng Liên khoa Sinh – KTNN trƣờng Đại học sƣ phạm Hà Nội giao đề tài, tận tình hƣớng dẫn, truyền đạt kiến thức với phƣơng pháp nghiên cứu khoa học để hoàn thành khóa luận Tôi xin chân thành cảm ơn thầy cô khoa Sinh - KTNN - trƣờng ĐHSP Hà Nội 2, Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung Ƣơng, phòng Hóa sinh - bệnh viện Hữu nghị Việt Xô, trung tâm Hỗ trợ nghiên cứu khoa học Chuyển giao công nghệ với phòng Thí nghiệm Hóa sinh - trƣờng Đại học sƣ phạm Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi giúp suốt thời gian nghiên cứu Cuối cùng, xin cảm ơn đến ngƣời thân gia đình, bạn bè giúp đỡ, động viên, khích lệ suốt trình học tập hoàn thành khóa luận tốt nghiệp Xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 13 tháng 05 năm 2015 Sinh viên thực Phạm Thị Phƣơng LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan: Đây công trình nghiên cứu riêng Tất số liệu kết nghiên cứu khóa luận trung thực chƣa có công bố sử dụng để bảo vệ học vị từ trƣớc đến Tôi xin hoàn toàn chịu trách nhiệm với nội dung đƣợc đề cập khóa luận Hà Nội, ngày 13 tháng 05 năm 2015 Sinh viên thực Phạm Thị Phƣơng MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1 Lí chọn đề tài Mục đích nghiên cứu 3.Nội dung nghiên cứu NỘI DUNG Chƣơng TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Hạt loài Đậu đen (Vigna cylindrical(L.) 1.1.1 Nguồn gốc, đặc điểm hình thái, phân bố 1.1.2 Thành phần hóa học 1.1.3 Công dụng tác dụng dƣợc lý 1.2 Bệnh béo phì 1.2.1 Định nghĩa 1.2.2 Phƣơng pháp đánh giá 1.2.3 Phân loại 1.2.4 Nguyên nhân gây béo phì 1.2.5 Biến chứng béo phì 1.3 Bệnh đái tháo đƣờng 1.3.1 Khái niệm 1.3.2 Phân loại 1.3.3 Biến chứng tác hại bệnh đái tháo đƣờng 1.3.4 Tiêu chí chẩn đoán đái tháo đƣờng 1.3.5 Tỷ lệ mắc bệnh ĐTĐ giới Việt Nam 1.3.6 Mối quan hệ béo phì đái tháo đƣờng 10 1.4 Rối loạn trao đổi lipid 11 1.4.1 Khái niệm 11 1.4.2 Phân loại 11 1.4.3 Nguyên nhân triệu chứng rối loạn lipid 11 Chƣơng ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 12 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 12 2.1.1 Mẫu thực vật 12 2.1.2 Mẫu động vật 12 2.2 Hóa chất dụng cụ thí nghiệm 13 2.2.1 Hóa chất 13 2.2.2 Các dụng cụ thí nghiệm 13 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 13 2.3.1 Tách chiết phân đoạn dịch chiết từ hạt loài đậu đen 13 2.3.2 Phƣơng pháp nuôi chuột béo phì 13 2.3.3 Phƣơng pháp gây ĐTĐ thực nghiệm mô theo type 14 2.3.4 Phƣơng pháp nghiên cứu tác dụng hạ glucose huyết dịch chiết từ hạt loài Đậu đen (Vigna cylindrica(L.) mô hình chuột đái tháo đƣờng type 14 2.3.4.1 Phƣơng pháp gây ĐTĐ thực nghiệm mô type 14 2.3.4.2 Thử khả hạ glucose huyết phân đoạn dịch chiết từ hạt loài Đậu đen (Vigna cylindrica(L.)trên mô hình chuột ĐTĐ type 15 2.3.5 Phƣơng pháp định lƣợng số số lipid huyết 15 2.3.5.1 Phƣơng pháp định lƣợng glucose huyết 16 2.3.5.2 Định lƣợng triglycerid huyết theo phƣơng pháp enzyme 16 2.3.5.3 Định lƣợng cholesterol toàn phần huyết theo phƣơng pháp enzyme 17 2.3.5.4 Định lƣợng HDL-c 18 2.3.6 Phƣơng pháp xử lí số liệu 18 Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 20 3.1 Kết tạo mô hình chuột béo phì thực nghiệm 20 3.2 Kết tạo mô hình chuột ĐTĐ type 24 3.3 Tác dụng số phân đoạn dịch chiết từ hạt loài Đậu đen mô hình chuột BP thực nghiệm 25 3.4 Tác dụng phân đoạn dịch chiết từ hạt loài Đậu đen (Vigna cylindrical(L.) đến nồng độ glucose huyết lúc đói chuột ĐTĐ 27 3.5 Tác dụng đến chuyển hóa lipid hạt loài Đậu đen (Vigna cylindrical(L.) mô hình chuột ĐTĐ type 29 KẾT LUẬN 31 TÀI LIỆU THAM KHẢO 33 DANH MỤC CÁC KÍ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT BP :Béo phì CHCL3 :Choloroform ĐC :Đối chứng ĐTĐ :Đái tháo đƣờng ĐTĐKĐT :Đái tháo đƣờng không điều trị EtOAc :Ethylacetat EtOH :Ethanol HDL-c :Lipoprotein tỷ trọng cao (High-density lipoprotein cholesterol) LDL-c :Lipoprotein tỷ trọng thấp (Low-density lipoprotein cholesterol) NO :Nitric oxide PĐ :Phân đoạn STZ :Streptozotocin TC TĐ TG :Cholesterol :Tiểu đƣờng :Triglycerid VLDL :Lipoprotein tỷ trọng cực thấp (very low – density lipoprotein) WHO :Tổ chức y tế Thế giới DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 1.1 Phân loại BMI ngƣời trƣởng thành Châu Âu Châu Á Bảng 1.2 Tiêu chí chẩn đoán ĐTĐ theo Tổ chức Y tế Thế giới Bảng 2.1 Mô hình nghiên cứu khả hạ glucose huyết phân đoạn dịch chiết từ hạt loài Đậu đen (Vigna cylindrica(L.) 15 Bảng 3.1 Trọng lƣợng trung bình tính theo (g) hai nhóm chuột nuôi hai chế độ dinh dƣỡng khác 20 Bảng 3.2 So sánh số số hóa sinh máu chuột hai chế độ ăn khác 22 Bảng 3.3 Nồng độ glucose huyết lúc đói lô chuột trƣớc sau tiêm STZ 24 Bảng 3.4 So sánh trọng lƣợng lô chuột BP trƣớc sau điều trị 26 Bảng 3.5 Kết nồng độ glucose huyết lúc đói phân đoạn dịch chiết từ hạt loài Đậu đen đến chuột ĐTĐ sau 21 ngày điều trị 28 Bảng 3.6 So sánh số số lipid máu chuột ĐTĐ trƣớc sau điều trị cao phân đoạn CHCL3 cao phân đoạn EtOH 29 DANH MỤC HÌNH VẼ, BIỂU ĐỒ Hình 2.1 Hình thái hạt Đậu đen (Vigna cylindrical(L.) 12 Hình 2.2 Mẫu chuột nuôi với hai chế độ ăn khác (thí nghiệm) 12 Hình 3.1 Biểu đồ tăng trọng lƣợng chuột tuần 21 Hình 3.2 Biểu đồ số số hóa sinh máu chuột nuôi hai chế độ ăn khác 23 Hình 3.3 Biểu đồ nồng độ glucose huyết lúc đói lô chuột thí nghiệm trƣớc sau tiêm (72h) 25 Hình 3.4 Biểu đồ so sánh khối lƣợng lô chuột BP trƣớc sau điều trị 26 Hình 3.5 Nồng độ glucose huyết lúc đói lô chuột trƣớc sau 21 ngày điều trị 28 Hình 3.6 So sánh số số lipid máu chuột ĐTĐ trƣớc sau điều trị cao phân đoạn CHCL3 cao phân đoạn EtOH 30 MỞ ĐẦU Lí chọn đề tài Bệnh ĐTĐ thời đại bệnh phổ biến nhất, đặc biệt nƣớc phát triển có Việt Nam Ở số nƣớc, số ngƣời mắc bệnh chiếm tỉ lệ tới 10% dân số số ngƣời mắc bệnh ngày tăng cao ĐTĐ bệnh nội tiết rối loạn chuyển hóa, có mức tăng nhanh chóng thời gian gần số lƣợng nhƣ chi phí điều trị, trở thành gánh nặng kinh tế xã hội nhiều quốc gia giới Sự gia tăng nhanh chóng tỷ lệ ngƣời mắc bệnh làm cho ĐTĐ trở thành vấn đề lớn cho sức khỏe bệnh có tỷ lệ mắc, chết trầm trọng trình trị liệu lâu dài, đặc biệt ĐTĐ type2 bệnh phổ biến bệnh ĐTĐ ĐTĐ loại (type 2) chứng bệnh mãn tính phát triển tuyến tụy không sản xuất đủ insulin mô thể sử dụng insuliun cách bình thƣờng [3] Bệnh ĐTĐ hậu tình trạng béo phì thừa cân mức ĐTĐ gây nhiều biến chứng nhƣ: mù mắt, nhồi máu tim, tai biến mạch máu não, suy thận, cƣa chân… Y học đại ngày có nhiều loại thuốc chống ĐTĐ rối loạn trao đổi lipid hiệu nhƣ: Insulin, Metformin, Fluoxiten Tuy nhiên chúng thƣờng có tác dụng phụ không mong muốn chi phí điều trị đắt đỏ [10] Vấn đề đặt cần nghiên cứu phát triển loại thuốc nguồn gốc thảo dƣợc với nguyên liệu sẵn có, rẻ tiền có tác dụng phụ Với nhiều ngƣời đậu đen không thực phẩm mà có nhiều công dụng phòng, Chƣơng KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 3.1 Kết tạo mô hình chuột béo phì thực nghiệm Chuột nhắt trắng chủng Swiss (17 – 20g) đƣợc chia làm lô thí nghiệm - Lô 1: Cho ăn chế độ bình thƣờng (thức ăn Viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ƣơng) - Lô - 6: Cho ăn thức ăn giàu lipid cholesterol (thức ăn béo) Sau tuần nuôi theo chế độ trọng lƣợng chuột tăng lên đáng kể Kết đƣợc thể qua bảng 3.1 hình 3.1 dƣới đây: Bảng 3.1 Trọng lượng trung bình tính theo (g) hai nhóm chuột nuôi hai chế độ dinh dưỡng khác Lô chuột Thời gian chăm sóc Ăn thƣờng Ăn béo Ban đầu 17,93±1,12 18,09±1,35 Tuần 19,97±0,41 23,57±1,72 Tuần 22,78±0,49 28,75±1,38 Tuần 25,52±0,58 35,49±1, 74 Tuần 28,95±1,25 41,89±1,68 Tuần 31,54±1,03 47,84±1,45 Tuần 34,72±0,98 52,92±1,81 (Số liệu thể bảng giá trị trung bình lô chuột) 20 Khối lượng (g) Ăn thường 60 Ăn béo 52.92 50 47.84 41.89 40 35.49 30 20 34.72 31.54 28.95 28.75 18.09 17.93 23.57 19.97 25.52 22.78 10 Ban đầu Tuần Tuần Tuần Tuần Tuần Tuần Hình 3.1 Biểu đồ tăng trọng lƣợng chuột tuần Qua hình 3.1 cho thấy chuột đƣợc nuôi thức ăn giàu Qua thử nghiệm tạo thành công mô hình chuột béo phì thực nghiệm Sau tuần với chế độ thức ăn giàu lipid cholesterol có khác biệt rõ rệt khối lƣợng chuột nuôi thức ăn giàu lipid so với chuột nuôi thức ăn thƣờng Tại thời điểm ban đầu sựu khác trọng lƣợng không đáng kể Trong tuần (tuần 1), nuôi với chế độ thức ăn giàu lipid cholesterol trọng lƣợng chuột tăng 30,29% so với ban đầu Tại thời điểm tuần 2, trọng lƣợng chuột tăng 26,21% so với lô đối chứng Ở tuần thứ 3, trọng lƣợng chuột nuôi béo đạt 35,49g tăng 39,07% so với lô nuôi thƣờng (25,52g) Kết thúc tuần sau trình nuôi với chế độ thức ăn giàu chất béo, trọng lƣợng chuột nuôi béo đạt 52,92g, trọng lƣợng chuột nuôi thƣờng đạt 34,72g Qua kết luận chuột đƣợc nuôi thức ăn giàu lipid bị béo phì Những nghiên cứu chuyển hóa chất tế bào mô cho thấy tiêu thụ chất béo vƣợt qua nhu cầu lƣợng thể chất béo đƣợc tích tụ mô mỡ gây béo phì Nhƣ vậy, chế độ ăn giàu chất béo bão hòa 21 yếu tố nguy gây nên bệnh béo phì nhƣ bệnh mãn tính liên quan Và để có thêm sở cho kết luận này, tiến hành xác định số số lipid máu chuột lô chuột thí nghiệm Kết đƣợc thể bảng 3.2 hình 3.2 Bảng 3.2 So sánh số số hóa sinh máu chuột hai chế độ ăn khác Lô chuột Các số lipid (mmol/l) Glucose TC TG HDL-c LDL-c Ăn thƣờng 6,15±0,37 4,16±0,44 1,18±0,2 1,64±0,2 2,83±0,32 Ăn béo 8.93*±0.35 6.03*±0.31 2.54*±0.21 0.97*±0.2 So sánh lô 1.45 1.45 2.15 1.69 3.91*±0.37 1.38 béo/thƣờng (Số liệu số hóa sinh có khác biệt chuột ăn thường chuột ăn béo thực nghiệm (*): p < 0.05 so sánh với nhóm ăn thường : tăng, : giảm) 22 Ăn thường Hàm lượng (mmol/l) 8.93 6.15 6.03 4.16 3.91 2.83 2.54 1.64 0.97 1.18 Glucose Ăn béo Cholesterol Triglycerid HDL-c LDL-c Hình 3.2 Biểu đồ số số hóa sinh máu chuột nuôi hai chế độ ăn khác Kết hình 3.2 cho thấy lô chuột ăn thức ăn có hàm lƣợng lipid cao có rối loạn số số lipid máu so với lô chuột ăn thức ăn thƣờng Cụ thể nhƣ sau: - Nồng độ glucose chuột BP 8,93mmol/l tăng 45,2% so với lô đối chứng (6,15mmol/l) - Nồng độ cholesterol chuột BP 6,03mmol/l tăng 44,95% so với lô nuôi thƣờng (4,16mmol/l) - Nồng độ triglyceride chuột BP 2,54mmol/l tăng so với lô thƣờng (1,18mmol/l) - Hàm lƣợng LDL-c máu chuột BP 3,91mmol/l tăng 38,16% so với lô nuôi thƣờng (2,83mmol/l) Ngƣợc lại, HDL-c lại có giảm mạnh, giảm tới 40,85% so với lô nuôi thƣờng Khi chuột đƣợc nuôi thức ăn giàu lipid cholesterol không tăng trọng lƣợng mà tăng số lipid nhƣ cholesterol, triglyceride, LDL-c tăng rõ rệt Qua bảng số liệu ta thấy béo phì kéo theo rối loạn trao đổi glucid làm nồng độ glucose máu tăng cao 23 Vậy kết hợp với độ tăng trọng lƣợng ta kết luận việc gây mô hình béo phì thực nghiệm thành công 3.2 Kết tạo mô hình chuột ĐTĐ type Chúng em nuôi chuột béo phì vòng tuần, trƣớc thí nghiệm cho chuột nhịn đói 12h, chuột đƣợc tiêm dƣới màng bụng streptozotocin (STZ) pha đệm Citrat 0.01M, pH 4.5, với liều đơn 110mg/kg thể trọng Các chuột sau đƣợc tiến hành kiểm tra nồng độ glucose huyết vào thời điểm trƣớc tiêm sau tiêm 72 Bảng 3.3 Nồng độ glucose huyết lúc đói lô chuột trước sau tiêm STZ Nồng độ glucose huyết (mmol/l) Các lô chuột Trƣớc tiêm Sau tiêm 72h Chuột thƣờng tiêm đệm 7.32±0.52 7.41±0.36(*) Chuột thƣờng tiêm STZ (110mg/kg) 7.45±0.69 7.62±0.47(**) Chuột BP tiêm đệm 8.43±0.46 8.79±0.45(*) Chuột BP tiêm STZ (110mg/kg) 8.76±0.59 22.35±0.39(**) (Ghi chú: (*) khác biệt ý nghĩa thống kê với p > 0.05 số glucose huyết sau tiêm 72h so với thời điểm trước tiêm (**) Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p < 0.05 số glucose huyết sau tiêm 72h so với thời điểm trước tiêm.) 24 (mmol/l) Trước tiêm STZ Sau tiêm STZ (72h) 25 mmol/l 22.35 20 15 10 7.32 7.41 7.45 7.62 8.43 8.79 8.76 Chuột thường Chuột thường tiêm STZ Chuột BP Chuột BP tiêm STZ Hình 3.3 Biểu đồ nồng độ glucose huyết lúc đói lô chuột thí nghiệm trƣớc sau tiêm (72h) Ở chuột thƣờng tiêm STZ nồng độ glucose huyết thay đổi Điều chuột ăn thức ăn tự điều chỉnh nồng độ glucose huyết nhờ lƣợng insulin tiết điều hòa lƣợng glucose huyết Trong chuột BP tiêm STZ sau 72h có thay đổi nồng độ glucose huyết lớn (tăng từ 8.76 lên tới 22.35 mmol/l) Nồng độ glucose huyết tăng cao do: chuột BP bị rối loạn mỡ bảo vệ cho thể Vậy việc kết hợp nuôi béo tiêm STZ liều 110mg/kg thành công mô hình chuột ĐTĐ thực nghiệm mô theo ĐTĐ type 3.3 Tác dụng số phân đoạn dịch chiết từ hạt loài Đậu đen mô hình chuột BP thực nghiệm 25 Bảng 3.4 So sánh trọng lượng lô chuột BP trước sau điều trị Trọng lƣợng (g) Lô Ban đầu ngày 14 ngày 21ngày KĐT 53.47±1.15 54.46±0.21 55.71±0.29 57.12±0.38 EtOH 52.91±1.37 48.35*±1.42 43.54*±1.36 41.05*±1.63 n-hexan 53.28±1.04 49.92*±1.18 46.59*±1.15 43.77*±1.07 CHCL3 53.69±1.77 48.41*±1.68 43.38*±1.45 38.01*±1.81 (Số liệu thể bảng giá trị trung bình chuột/lô; (*): p[...]... tài: Nghiên cứu tác dụng hạ đường huyết và khả năng chống rối loạn trao đổi lipid của dịch chiết từ hạt loài Đậu đen (Vigna cylindrical(L.) trên mô hình chuột đái tháo đường thực nghiệm 2 Mục đích nghiên cứu Đánh giá ảnh hƣởng của dịch chiết từ hạt loài đậu đen đến hàm lƣợng glucose huyết và một số chỉ số lipid máu ở chuột ĐTĐ type 2 nhằm tạo cơ sở cho việc tìm kiếm và sản xuất thực phẩm chức năng từ. .. khả năng hỗ trợ điều trị bệnh BP và ĐTĐ 3.Nội dung nghiên cứu 3.1 Tạo mô hình chuột béo phì và đái tháo đƣờng 3.2 Xác định liều độc cấp LD50 của dịch chiết từ hạt loài Đậu đen (Vigna cylindrical(L.) 3.3 Đánh giá ảnh hƣởng của các phân đoạn dịch chiết đến trọng lƣợng, nồng độ glucose, lipid 2 NỘI DUNG Chƣơng 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Hạt loài Đậu đen (Vigna cylindrical(L.) 1.1.1 Nguồn gốc, đặc điểm hình. .. nƣớc 2000mg/kg/ngày Chuột bị bệnh uống điều trị các phân đoạn dịch chiết từ hạt đậu đen và metformin, đƣợc tiến hành đo nồng độ glucose huyết của chuột ở các thí điểm khác nhau ( 7 ngày, 14 ngày, 21 ngày) trong vòng 21 ngày (3 tuần) 2.3.4.2 Thử khả năng hạ glucose huyết của các phân đoạn dịch chiết từ hạt loài Đậu đen (Vigna cylindrica( L. )trên mô hình chuột ĐTĐ type 2 Các lô chuột đái tháo đƣờng type 2... con chuột này bị bệnh với nồng độ đƣờng huyết ≥ 18mmol/lit 2.3.4 Phương pháp nghiên cứu tác dụng hạ glucose huyết của dịch chiết từ hạt loài Đậu đen (Vigna cylindrica( L.) trên mô hình chuột đái tháo đường type 2 2.3.4.1 Phương pháp gây ĐTĐ thực nghiệm mô phỏng type 2 Chuột nuôi béo phì đƣợc gây đái tháo đƣờng type 2 bằng tiêm STZ (110mg/kg pha trong đệm citrate 0.01M, pH = 4,3) dƣới màng bụng, gây rối. .. 2 ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tƣợng nghiên cứu 2.1.1 Mẫu thực vật - Đậu đen (Vigna cylindrical(L.) Hình 2.1 Hình thái hạt Đậu đen (Vigna cylindrical(L.) Bộ phận sử dụng hạt Đậu đen ( Vigna cylindrical(L.) 2.1.2 Mẫu động vật Chuột nhắt trắng Mus musculus chủng Swiss 6 tuần tuổi (17 - 20g) và thức ăn chuẩn cho chuột do viện Vệ sinh Dịch tễ Trung ƣơng cung cấp Hình 2.2 Mẫu chuột nuôi với... Nồng độ glucose huyết tăng cao là do: chuột BP bị rối loạn mỡ bảo vệ cho cơ thể Vậy việc kết hợp nuôi béo và tiêm STZ liều 110mg/kg là thành công trong mô hình chuột ĐTĐ thực nghiệm mô phỏng theo ĐTĐ type 2 3.3 Tác dụng của một số phân đoạn dịch chiết từ hạt loài Đậu đen trên mô hình chuột BP thực nghiệm 25 Bảng 3.4 So sánh trọng lượng của các lô chuột BP trước và sau khi điều trị Trọng lƣợng (g) Lô... đƣợc xác định ≥ 18mmol/l [7], [8] Tiến hành phân các lô chuột đã bị bệnh để nghiên cứu khả năng hạ đƣờng huyết khi sử dụng các phân đoạn dịch chiết từ hạt đậu đen 14 Bảng 2.1 Mô hình nghiên cứu khả năng hạ glucose huyết của các phân đoạn dịch chiết từ hạt loài Đậu đen (Vigna cylindrica( L.) Lô Chế độ ăn trƣớc khi điều trị Phƣơng pháp điều trị Liều uống 1 Thức ăn chuẩn Uống nƣớc cất, không điều trị 2 Thức... rối loạn trao đổi glucose máu của chuột béo phì thực nghiệm nhằm tạo mô hình chuột đái tháo đƣờng type 2 phát triển từ béo phì Trƣớc khi thí nghiệm cho chuột nhịn đói 12 giờ Sau đó chúng đƣợc tiếp nhận nƣớc và thức ăn bình thƣờng Sau từ 3-4 ngày những con chuột bị bệnh với nồng độ glucose huyết đƣợc xác định ≥ 18mmol/l [7], [8] Tiến hành phân các lô chuột đã bị bệnh để nghiên cứu khả năng hạ đƣờng huyết. .. que thử của công ty Johnson – Johnson – tập đoàn Lifescan của Mỹ - Máy li tâm eppendorf, li tâm lạnh 2.3 Phƣơng pháp nghiên cứu 2.3.1 Tách chiết các phân đoạn dịch chiết từ hạt loài đậu đen Từ 3000g hạt Đậu đen (Vigna cylindrical(L.) sấy khô đƣợc ngâm với ethnol 96% ở nhiệt độ phòng 220C trong vòng 14 ngày (quá trình đƣợc lặp lại 3 lần) Gộp dịch chiết lại, lọc qua giấy lọc 3 lần và cất loại dung môi dƣới... phân bố Đậu đen (Vigna cylindrical(L.) có nguồn gốc ở Châu Phi, từ đó lan sang Trung Á, Ấn Độ và nhiều khu vực khác của Châu Á Đậu đen là cây thân thảo, sống hàng năm Thân cao 50-100 cm, phân nhiều cành, toàn thân không lông Lá kép gồm 3 lá chét mọc so le, lá chét giữa to và dài hơn lá chét hai bên Hoa màu tím nhạt, quả giáp dài, đƣờng kính tròn, trong chứa 7-10 hạt màu đen Hạt có vỏ màu đen, nhân hạt ... loạn trao đổi lipid dịch chiết từ hạt loài Đậu đen (Vigna cylindrical(L.) mô hình chuột đái tháo đường thực nghiệm Mục đích nghiên cứu Đánh giá ảnh hƣởng dịch chiết từ hạt loài đậu đen đến hàm... Phƣơng pháp gây ĐTĐ thực nghiệm mô theo type 14 2.3.4 Phƣơng pháp nghiên cứu tác dụng hạ glucose huyết dịch chiết từ hạt loài Đậu đen (Vigna cylindrica( L.) mô hình chuột đái tháo đƣờng type ... ngày chuột bị bệnh với nồng độ đƣờng huyết ≥ 18mmol/lit 2.3.4 Phương pháp nghiên cứu tác dụng hạ glucose huyết dịch chiết từ hạt loài Đậu đen (Vigna cylindrica( L.) mô hình chuột đái tháo đường