Bộ giáo dục đào tạo Trờng đại học Nông nghiệp I hà nội - - Nguyễn thị hồng minh Nghiên cứu số chủng vi khuẩn nội sinh đối kháng kiểm soát sinh học tổng hợp bệnh héo xanh vi khuẩn lạc vừng luận văn thạc sĩ nông nghiệp Chuyên ngành : Bảo vệ thực vật M số : 60.62.10 Ngời hớng dẫn khoa học: Ts Nguyễn ngọc cờng H NI - 2007 Lời cam đoan Tôi xin cam đoan công trình nghiên cứu riêng tôi, số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực cha đợc sử dụng để bảo vệ học vị Tôi xin cam đoan giúp đỡ cho việc thực luận văn đ đợc cảm ơn thông tin trích dẫn luận văn đ đợc rõ nguồn gốc Ngời cam đoan Nguyễn Thị Hồng Minh Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - i Lời cảm ơn Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc đến TS.Nguyễn Ngọc Cờng ngời đ tận tình hớng dẫn, giúp đỡ suốt trình thực luận án Tôi xin trân trọng cảm ơn: Khoa Sau Đại học, trờng Đại học Nông nghiệp I - Hà Nội đ tổ chức khoá đào tạo này, giúp có điều kiện học tập nghiên cứu để nâng cao trình độ Tập thể thầy cô giáo môn Bệnh Nông dợc, trờng Đại học Nông nghiệp I - Hà Nội, đ tạo điều kiện giúp đỡ hoàn thành luận án Ban l nh đạo Viện Di truyền Nông nghiệp, tập thể cán phòng Di truyền Công nghệ Vi sinh - Viện Di truyền Nông nghiệp đ tận tình giúp đỡ suốt thời gian thực luận án Cuối xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới ngời thân gia đình bạn bè đ tạo điều kiện, động viên giúp đỡ suốt thời gian qua Hà nội, ngày 19 tháng năm 2007 Nguyễn Thị Hồng Minh Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - ii Mục lục Trang Trang phụ bìa i Lời cam đoan .ii Lời cảm ơn iii Mục lục iv Danh mục bảng vii Danh mục hình đồ thị ix Danh mục ký hiệu, chữ viết tắt x Mở đầu .0 1.1 Tính cấp thiết đề tài 1.2 Cơ sở khoa học đề tài .3 1.3 ý nghĩa khoa học, thực tiễn đề tài 1.4 Mục tiêu đề tài Tổng quan tàI liệu 2.1 Tình hình gieo trồng vừng lạc Việt Nam giới 2.1.1 Tình hình gieo trồng vừng Việt Nam giới 2.1.2.Tình hình gieo trồng lạc Việt Nam giới 2.2 Bệnh héo xanh vi khuẩn Ralstonia solanacearum 2.2.1 Khái quát bệnh héo xanh trồng 2.2.2 Biểu triệu trứng nhiễm bệnh .7 2.2.3 Vi khuẩn gây bệnh héo xanh Ralstonia solanacearum .8 2.2.3.1 Hình thái vi khuẩn 2.2.3.2 Đặc tính sinh lý, sinh hoá vi khuẩn gây bệnh héo xanh 2.2.3.3 Phân loại vi khuẩn R solanacearum 10 2.2.3.4 Tính độc vi khuẩn R solanacearum 12 2.2.3.5 Các đờng xâm nhập vi khuẩn R solanacearum vào chủ .13 2.2.3.6 ảnh hởng điều kiện ngoại cảnh đến phát sinh phát triển bệnh héo xanh vi khuẩn chủ 13 2.3 Vi sinhvật đối kháng 14 2.3.1 Quan hệ đối kháng giới vi sinh vật 14 2.3.2 Vi sinh vật nội sinh đối kháng 16 2.4 Biện pháp phòng trừ sinh học phơng pháp sử dụng vi sinh vật đối kháng với vi khuẩn R Solanacearum 17 2.4.1 Cơ chế đối kháng vi sinh vật đối kháng với vi khuẩn héo xanh R solanacearum .19 2.4.2 Các loại vi sinh vật đối kháng với vi khuẩn R solanacearum .20 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - iii 2.4.3 ứng dụng vi khuẩn nội sinh phát triển nông nghiệp bền vững 24 2.5 Phân loại vi khuẩn 26 2.5.1 Phân loại theo phơng pháp truyền thống 26 2.5.2 Phân loại theo phơng pháp đại cách sử dụng kit Api Vitek .26 Vật liệu, nội dung phơng pháp nghiên cứu 28 3.1 Vật liệu nghiên cứu 28 3.1.1 Nguồn vi sinh vật 28 3.1.2 Các thiết bị hoá chất số giống nghiên cứu .28 3.1.3 Các môi trờng dung dịch đệm chủ yếu 28 3.2 Nội dung nghiên cứu 29 3.3 Phơng pháp nghiên cứu 29 3.3.1 Phơng pháp nghiên cứu vi khuẩn gây bệnh héo xanh R.solanacearum 29 3.3.1.1 Phơng pháp điều tra thu mẫu 29 3.3.1.2 Phơng pháp thu thập, phân lập vi khuẩn gây bệnh từ mẫu bệnh .30 3.3.1.3 Phơng pháp đánh giá tính độc R solanacearum 30 3.3.1.4 Phơng pháp xác định thứ sinh học (biovar) 32 3.3.2 Phơng pháp nghiên cứu vi khuẩn đối kháng với vi khuẩn R.solanacearum 33 3.3.2.1 Phân lập vi khuẩn đối kháng 33 3.3.2.2 Phơng pháp phân loại vi khuẩn đối kháng 34 3.3.2.3 Phơng pháp đánh giá tác động vi khuẩn đối kháng lên nảy mầm hạt vừng lạc .36 3.3.2.4 Đánh giá hoạt lực kháng bệnh héo xanh vi khuẩn đối kháng lên vừng lạc nhà kính 36 3.3.2.5 Đánh giá khả kích thích sinh trởng chủng vi khuẩn đối kháng lên vừng lạc nhà kính 37 3.3.2.6 Đánh giá hoạt lực vi khuẩn đối kháng lên vừng, lạc đồng ruộng 37 3.4 Phơng pháp xử lý số liệu 38 Kết thảo luận 40 4.1 Bệnh héo xanh lạc vừng vi khuẩn R solanacearum 40 4.1.1 Điều tra thu mẫu .40 4.1.2 Thu mẫu, phân lập tuyển chọn vi khuẩn gây bệnh héo xanh .42 4.1.3.Nhận dạng vi khuẩn gây bệnh héo xanh R solanacearum 45 4.1.3.1 Thử nghiệm tính độc chủng vi khuẩn R solanacearum giống lạc Thiên Ngọc giống vừng V6 45 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - iv 4.1.3.2 Phân nhóm vi khuẩn gây bệnh héo xanh R solanacearum thành thứ sinh học (biovar) 46 4.2 Vi khuẩn đối kháng với vi khuẩn gây bệnh héo xanh R solanacearum 48 4.2.1 Thu mẫu, phân lập tuyển chọn vi khuẩn đối kháng 48 4.2.2 Đánh giá hoạt lực đối kháng chủng vi khuẩn 49 4.2.3 Một số đặc điểm chủng vi khuẩn đối kháng sử dụng xác định vị trí phân loại chúng 52 4.3 Vi khuẩn nội sinh (Endophytic bacteria) 53 4.3.1 Khẳng định có mặt tồn vi khuẩn nội sinh vừng 53 4.3.2 Xác định vị trí tạo dòng chủng vi khuẩn nội sinh bên mô rễ vừng 53 4.4 ảnh hởng chủng vi khuẩn nội sinh đối kháng lên nảy mầm hạt lạc hạt vừng 55 4.5 Đánh giá hiệu chủng vi khuẩn nội sinh đối kháng lạc 57 4.5.1 Đánh giá hiệu lực đối kháng chủng vi khuẩn nội sinh đối kháng với vi khuẩn R solanacearum điều kiện nhà kính 57 4.5.2 Đánh giá tác động chủng vi khuẩn nội sinh đối kháng lên sinh trởng phát triển lạc điều kiện nhà kính 60 4.5.3 Hiệu phòng trừ bệnh héo xanh đồng ruộng phạm vi hẹp.62 4.5.4 Đánh giá tác động chủng vi khuẩn nội sinh đối kháng lên sinh trởng phát triển lạc đồng ruộng phạm vi hẹp 63 4.6 Đánh giá hiệu chủng vi khuẩn nội sinh đối kháng lên vừng 65 4.6.1 Hiệu phòng trừ bệnh héo xanh vừng điều kiện nhà kính .65 4.6.2 Tác dụng kích thích sinh trởng chủng vi khuẩn nội sinh đối kháng vừng điều kiện nhà kính 67 4.6.3 Hiệu kháng bệnh vừng đồng ruộng 68 4.6.4 ảnh hởng chủng vi khuẩn nội sinh đối kháng đến sinh trởng phát triển suất vừng đồng ruộng 71 Kết Luận kiến nghị 73 5.1 Kết luận: 73 5.2 Kiến nghị: 73 Tài liệu tham khảo 74 A Tài liệu tiếng Việt 74 B Tài liệu tiếng Anh .75 Ph lc 84 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - v Danh mục bảng Bảng 2.1 Những đặc tính sinh lí sinh hoá vi khuẩn R.solanacearum Bảng 2.2 Vi khuẩn đối kháng với R solanacearum 21 Bảng 3.1 Phân định mức độ độc R solanacearum 31 Bảng 3.2 Cách thức phân vi khuẩn gây bệnh héo xanh thành Thứ sinh học 33 Bảng 4.1 Đặc điểm hình thái khuẩn lạc điển hình số chủng gây bệnh thể triệu chứng bệnh héo xanh 43 Bảng 4.2 Khả chuyển hoá nguồn cacbon chủng vi khuẩn R solanacearum phân lập thể tính độc 47 Bảng 4.3 Nguồn gốc đặc điểm hình thái chủng vi khuẩn phân lập đợc 48 Bảng 4.4 Hoạt lực đối kháng chủng vi khuẩn với đại diện chủng R Solanacearum ( điều kiện invitro) 50 Bảng 4.5 Một số đặc điểm phục vụ mục đích phân loại chủng vi khuẩn đối kháng 52 Bảng 4.6 Mật độ khả tồn chủng vi khuẩn nội sinh mô rễ vừng lạc 54 Bảng 4.7 ảnh hởng chủng vi khuẩn nội sinh đối kháng lên khả nảy mầm hạt vừng hạt lạc 56 Bảng 4.8 Hiệu phòng trừ bệnh héo xanh vi khuẩn chủng vi khuẩn nội sinh đối kháng lạc điều kiện nhà kính .58 Bảng 4.9 So sánh thống kê sinh học tác dụng phòng trừ bệnh héo rũ vi khuẩn chủng nội sinh đối kháng giống lạc Thiên ngọc giống lạc Thiên hoa 59 Bảng 4.10 Tác động tăng cờng sinh trởng lạc chủng vi khuẩn nội sinh 61 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - vi Bảng 4.11 Kết đối kháng vi khuẩn gây bệnh lạc gieo trồng đồng ruộng phạm vi hẹp .62 Bảng 4.12 Tác dụng tăng cờng sinh trởng chủng vi khuẩn nội sinh đối kháng lên lạc đồng ruộng phạm vi hẹp .63 Bảng 4.13 Hiệu lực phòng trừ bệnh héo xanh vi khuẩn chủng vi khuẩn nội sinh đối kháng vừng điều kiện nhà kính 65 Bảng 4.14 So sánh thống kê sinh học hiệu phòng trừ bệnh héo rũ vi khuẩn chủng nội sinh đối kháng giống vừng sản xuất .66 Bảng 4.15 Kết tác động chủng vi khuẩn nội sinh lên sinh trởng phát triển vừng nhà kính 67 Bảng 4.16 Hiệu phòng trừ bệnh héo rũ vừng vi khuẩn đồng ruộng chủng vi khuẩn nội sinh đối kháng 69 Bảng 4.17 Hiệu suất biện pháp kiểm soát bệnh héo rũ vi khuẩn vừng V6 đồng ruộng chủng đối kháng nội sinh mang lại .71 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - vii Danh mục hình đồ thị Hình 3.1 Chỉ tiêu đánh giá mức độ nhiễm bệnh31 ảnh 4.1 Ruộng vừng bị nhiễm bệnh héo rũ 40 ảnh 4.2 Cây vừng bị chết héo xanh vi khuẩn đồng ruộng 41 ảnh 4.3 Lát cắt dọc đoạn thân sát cổ rễ vừng biểu triệu chứng nhiễm bệnh héo xanh vi khuẩn .41 ảnh 4.4 Hình thái khuẩn lạc số chủng vi khuẩn gây bệnh héo xanh 44 ảnh 4.5 Sự chuyển hoá nguồn cacbon chủng thể độc tính .47 ảnh 4.6 Hình thái khuẩn lạc điển hình số chủng đối kháng 49 ảnh 4.7 Vòng ức chế vi khuẩn gây bệnh VT3 vi khuẩn đối kháng NA4 51 Đồ thị Hoạt lực đối kháng vi khuẩn gây bệnh chủng vi khuẩn đối kháng đĩa petri 51 ảnh 4.8 Sự tồn vi khuẩn CI4-2 NA4 gian bào mô rễ vừng 55 ảnh 4.9 Hiệu phòng trừ bệnh héo xanh vi khuẩn chủng vi khuẩn đối kháng lạc điều kiện nhà kính .59 ảnh 4.10 Kết kích thích sinh trởng chủng vi khuẩn nội sinh lạc đồng ruộng phạm vi hẹp 64 ảnh 4.11 Hiệu phòng trừ bệnh héo xanh chủng vi khuẩn đối kháng vừng điều kiện nhà kính 67 ảnh 4.12 Hình ảnh vừng đồng ruộng 70 Đồ thị Tỷ lệ (%) vừng sống sót thí nghiệm đồng ruộng .70 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - viii Danh MụC CáC THUậT NGữ VIếT TắT CHữ VIếT TắT Chữ viết đầy dủ AVRDC Asian Vegetable Research Development Center C Cacbon CFU (Colony Forming Unit) đơn vị hình thành khuẩn lạc cs Cộng CT Công thức ĐC Đối chứng EDTA Ethylen Diamine Tetraacetic Acid EPS Exopolysaccharide FAO Tổ chức Nông Lơng Thế giới IAA Axit indol -3- axetic KB Môi trờng KingB LSP Lipopolysacarit NSLT Năng suất lý thuyết NSTT Năng suất thự tế STT Số thứ tự tb Tế bào TBE Trisbase Boric acid EDTA TE Trisbase EDTA TTC Triphenyl Tetrazolium Chloride VKNSĐK Vi khuẩn nội sinh đối kháng Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - ix 2.2 Trên giống vừng địa phơng 2.2.1 Cao thân SU MMARY Groups dc ci41 ci42 na4 ci15 Count 14 11 10 AN OV A Sourc e of Variation Be tw een G roups Wi thin G r oups SS 489 1199 1534 337 Tot al 2023 457 Sum 30 7.4 45 2.5 42 8.8 400 65 24 5.5 Av erage 34.15556 32.32143 38.98182 40.065 35.07143 Variance 44 24528 55 94643 18 22964 15 61781 21 70238 df MS 122.28 33.35515 F 666 Av erage 14.33333 14.68571 17.8 17.83 16.71429 Variance 3.25 229011 2.36 293444 904762 MS 30.0096 5.23145 F 736382 46 P - value 0.011295 F c rit 574035 P - value 0.000785 F c rit 574035 50 2.2.2 Dài rễ SU MMARY Groups dc ci41 ci42 na4 ci15 Count 14 11 10 AN OV A Sourc e of Variation Be tw een G roups Wi thin G r oups SS 120 0384 240 6467 Tot al 360 6851 Sum 129 20 5.6 19 5.8 17 8.3 117 df 46 50 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - 91 2.2.3 Trọng lợng tơi SU MMARY Groups dc ci41 ci42 na4 ci15 Count 14 11 10 AN OV A Sourc e of Variation Be tw een G roups Wi thin G r oups SS 60 77699 230 9135 Tot al 291 6905 Sum 51 42 81 37 88 24 81 31 52 67 df 46 Av erage 5.713333 5.812143 8.021818 8.131 7.524286 Variance 669125 17328 247896 469921 766595 MS 15.19425 5.019858 F 026828 Av erage 2.728889 2.852143 4.536364 4.802 3.585714 Variance 709361 999157 058005 614751 037429 MS 9.613456 1.021768 F 408652 P - value 0.026852 F c rit 574035 P- val ue 21E- 05 F crit 2.57403 50 2.2.4 Trọng lợng khô SU MMARY Groups dc ci41 ci42 na4 ci15 Count 14 11 10 AN OV A Sourc e of Variation Be tw een G roups Wi thin G r oups SS 38 45382 47 00131 Tot al 85 45513 Sum 24 56 39 93 9.9 48 02 5.1 df 46 50 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - 92 Bảng số liệu kích thích sinh trởng lạc đồng ruộng 3.1 Cao thân SU MMARY Groups dcdc+ ci41 ci42 na4 ci15 Count 23 11 13 16 20 11 Sum 716 309 343 542 703 369 AN OV A Sourc e of Variation Be tw een G roups Wi thin G r oups SS 869.1865 2399.622 Tot al 3268.809 93 Count 23 9.7 13 16 20 11 Sum 319 06.7 126 211 332 144 df 88 A verage 31 13043 28 09091 26 38462 33 875 5.15 33 54545 Variance 16 75494 19 69091 21 25641 39 31667 35 29211 31 87273 MS 173 8373 27 26843 F 375039 A verage 13.86957 13.0845 9.692308 13.1875 16.6 13.09091 Variance 15.93676 12.3652 6.730769 11.09583 30.67368 12.49091 MS 65535 65535 F 6553 P- value 4.26E -05 F crit 2.31805 3.2.Dài rễ SU MMARY Grou ps dcdc+ ci41 ci42 na4 ci15 AN OV A Source of Variat ion Be tw een G roups Wi thin G r oups Tot al SS 65535 65535 1691.157 df 77 P - value 2.67E - 05 F crit 333309 82 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - 93 3.3 Trọng lợng tơi SU MMARY Groups Count 23 11 13 16 20 11 Sum 1264.54 368.14 499.77 1050.09 1914.31 679.46 A verage 54.98 3.46727 8.44385 5.63063 95.7155 1.76909 Variance 589 1882 322 7758 665 7459 707 1312 313 4.243 999 8803 AN OV A Sourc e of Variation Be tw een G roups Wi thin G r oups SS 40220.1 04335.2 df MS 044.019 185.628 F 784608 Tot al 44555.3 dcdc+ ci 41 ci 42 na4 ci 15 88 P- v alue 15E- 05 F c rit 2.318053 93 3.4 Trọng lợng khô SU MMARY Groups dcdc+ ci41 ci42 na4 ci15 AN OV A Sourc e of Variation C ount 23 11 13 16 20 11 SS Sum 069.96 260.37 379.08 933.12 1730.8 561.99 A verage 46 52 23 67 29 16 58 32 86 54 51 09 Variance 521.7459 256.7758 322.7459 578.1882 3015243 512.8803 df MS F Be tw een G roups Wi thin G r oups 39202.1 104301.2 88 Tot al 143503.3 93 8021.0 19 1163.6 28 6.52106 P- valu e 2.15E 05 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - F crit 2.318053 94 3.5 Số củ SU MMARY Groups dcdc+ ci41 ci42 na4 ci15 AN OV A Sourc e of Variation Be tw een G roups Wi thin G r oups Tot al Count 23 11 13 16 20 11 S um 226 77 131 200 373 117 SS 134 0.507 366 3.323 df 88 A verage 9.8 26087 10 07692 12 18 65 10 63636 Va rianc e 19.87747 16.4 28.57692 39.86667 92.02895 37.25455 MS 268 1014 41 62867 F 6.440306 A verage 2.7 13043 1.7 83636 2.3 28462 90375 1155 2.1 01818 Va rianc e 0.404158 0.073105 0.157781 0.240385 0.196658 0.176696 MS 3.6 20788 0.2 34377 F 15.44859 P - value 3.82E - 05 F crit 2.31805 P - value 6.93E - 11 F crit 2.31805 93 50 03.83 3.6 Cân nặng trung bình/ củ SU MMARY Groups dcdc+ ci41 ci42 na4 ci15 Count 23 11 13 16 20 11 AN OV A Sourc e of Variation Be tw een G roups Wi thin G r oups SS 18 10394 20 62514 Tot al 38 72909 S um 62.4 19.62 30.27 46.46 62.31 23.12 df 88 93 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - 95 Kết đối kháng vi khuẩn gây bệnh lạc đồng ruộng phạm vi hẹp 4.1 So sánh ĐC (-) ĐC (+) SU MMARY Groups Count S um A verage Variance D C- 0 dc+ 26 2.09 65.5225 387.3757 AN OV A Sourc e of Variation SS df MS Be tw een G roups 8586.396 586.396 Wi thin G r oups 1162.127 93.6878 Tot al 9748.523 F 44.3311 P -v alue F cri t 0.000555 5.98737 4.2 So sánh CI - ĐC (+) SU MMARY Groups Count S um A verage Variance dc+ 26 2.09 65.5225 387.3757 ci41 16 5.63 41.4075 120.0185 AN OV A Sourc e of Variation SS df Be tw een G roups Wi thin G r oups 1163.066 1522.183 Tot al 2685.249 MS F P -v alue F cri t 163.066 53.6971 4.584469 0.076031 5.98737 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - 96 4.3 So sánh CI 4- với ĐC (+) SU MMARY Groups Count S um A verage Variance dc+ 26 2.09 65.5225 387.3757 ci42 9.93 24.9825 66.77729 AN OV A Sourc e of Variation SS df Be tw een G roups Wi thin G r oups 3286.983 1362.459 Tot al 4649.442 MS F P -v alue F cri t 286.983 27.0765 14.47522 0.008919 5.98737 Ave rage Variance 4.4 So sánh NA với ĐC (+) SU MMARY Groups Count Sum dc+ 262.09 65.5225 387 3757 na4 110.56 27.64 92 29233 AN OV A Sourc e of Variation SS df Be tw een G roups Wi thin G r oups 287 0.168 143 9.004 Tot al 430 9.172 MS F P- value F crit 2870.168 239.834 11 96731 0.013 477 5.98737 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - 97 4.5 So sánh CI 1- với ĐC (+) SU MMARY Groups Count Sum Av erage Varianc e dc+ 262.09 5.5225 387 3757 ci15 124.19 1.0475 78 18536 AN OV A S ourc e of Variation SS df MS F P- v alue F crit 10 21156 0.018 705 987378 Be tw een G roups 2377 051 23 77.051 Wi thin G r oups 1396 683 23 2.7805 Tot al 3773 734 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - 98 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - 99 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - 100 Phụ lục Bảng số liệu nhiệt độ ẩm độ Hà nội từ tháng 7/2006 đến 7/2007 Kinh ủ : 05 o 8' Tr m: Lỏng Nhiệt độ Trung bình ngày Tnh( tp) : H Ni V ủ: 21 o 01' n v: o C N m: 2006 Nm: 007 Ng y VII VIII IX X XI XII I II III IV V VI VII 27.8 27 29.4 28.5 26 18.3 18 18.5 23.7 27.8 26.0 31.2 29.9 28.1 29 30.6 26.4 24 18.0 20 17.9 24.0 26.9 26.7 31.7 28.5 28.9 28 31.4 26.5 24 16.3 22 16.6 24.1 19.4 26.3 30.8 30.2 29.9 21 30.8 27.2 23 17.7 16 17.3 25.0 17.0 22.6 29.9 29.6 29.6 28 27.4 28.2 24 19.0 15 19.8 24.6 16.7 21.9 29.8 30.2 30.7 26 28.9 27.8 24 20.5 16 20.7 17.1 18.7 25.3 31.6 30.1 31.7 26 30.7 27.8 24 23.5 15 20.8 13.8 20.3 26.6 30.9 29.5 32.6 26 30.5 28.5 23 24.8 16 20.9 13.7 20.8 26.3 33.5 29.9 31.4 28 26.5 24.7 25 21.5 15 20.7 14.4 20.6 26.0 33.8 30.0 10 31.8 29 24.7 26.4 27 16.2 16 21.2 16.5 20.6 26.6 29.3 28.6 11 29.6 29 25.8 26.3 27 15.2 17 21.1 17.0 21.9 27.8 26.9 28.1 12 29.4 28 26.6 26.6 26 15.2 18 21.6 18.0 22.6 26.1 28.0 29.0 13 29.7 29 27.7 28.1 25 18.1 18 23.2 19.9 22.5 25.6 27.0 31.2 14 32.1 29 28.9 28.4 25 18.4 18 23.1 23.2 24.1 25.8 26.0 29.6 15 32.6 28 28.4 28.5 26 18.8 18 22.9 24.1 25.5 27.0 28.5 30.1 16 32.7 27 28.9 28.4 26 19.2 21 24.1 24.5 25.3 28.3 29.0 30.0 17 28.6 26 28.8 28.6 27 17.4 17 24.5 21.1 26.4 25.4 29.2 29.5 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - 101 18 29.1 25 28.8 28.5 27 16.3 14 24.9 15.6 24.6 26.7 29.7 28.4 19 29.1 26 28.1 28.7 26 16.7 13 23.6 15.7 23.2 25.5 30.4 29.6 20 29.6 26 26.7 28.2 24 16.1 13 24.3 17.3 24.7 27.6 31.0 31.8 21 30.8 27 27.5 27.9 24 17.0 14 22.9 18.8 25.9 30.1 31.2 31.4 22 30.9 29 28.1 27.4 23 16.4 15 23.9 19.9 27.8 31.3 31.3 27.0 23 31.6 28 27.8 28.0 21 16.6 15 22.4 22.4 27.7 32.8 31.4 28.7 24 32.0 27 28.4 27.2 22 16.6 16 23.9 23.4 28.1 33.9 31.2 27.9 25 28.9 27 26.2 27.3 25 17.9 17 24.5 24.4 22.5 30.0 31.2 29.1 26 30.6 29 26.0 26.8 26 19.4 17 22.8 24.5 24.0 29.7 31.0 28.4 27 32.5 28 26.9 26.4 26 20.8 16 23.0 25.9 25.3 28.1 29.7 26.6 28 29.1 29 28.6 26.3 20 21.2 16 22.6 25.6 25.9 26.3 32.0 27.3 29 25.8 28 28.5 26.6 22 19.8 16 25.8 22.1 28.3 31.9 27.4 30 26.7 27 29.4 26.7 19 17.3 16 25.4 24.5 27.7 28.0 28.3 31 26.2 28 18.1 17 26.1 26.8 929 Tng T.bỡnh 30.0 29.3 29.0 849 862.7 46.6 742.3 568.3 524.8 613 55.5 70 3.4 847 907 904 27 28.2 27.4 24 18.3 16 21.9 21.1 23.4 27.3 30.2 29.2 Ma x 37.7 35 36.0 33.4 32 29.5 26 29.9 29.9 34.2 38.9 38.5 36.7 Ng y 14 10 19 18 18 31 10 24 20 Min 24.9 24 22.8 22.8 17 11.9 10 12.7 11.8 14.3 19.9 23.2 22.4 Ng y 28 18 11 10 30 20 29 0.3 5 14 16 c tr n g n m Nhi t ủ c ao nh t: Nhi t ủ th p nh t: Tru ng bỡnh nm : 38.9 o C Ngy 24 Th ỏng XI 10.9 o C Ngy 29 Th ỏng VII 25.1 o C Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - 102 Ki nh ủ : 105o48' T r m: L ỏ ng T n h( t p ) : H N i M KHễ NG KH T N G I T R UNG B è N H N GY V ủ: 21o01' n v : % N m: 0 N m: 0 Ng y 10 11 12 13 14 15 VII V III IX X XI XII I II III IV V VI VII 88 89 79 72 60 79 86 61 85 81 66 70 79 85 80 79 80 61 71 86 52 90 77 64 73 87 83 79 79 80 63 83 85 62 92 63 77 76 81 78 79 77 78 67 87 71 75 88 69 94 75 81 79 78 88 79 65 84 63 81 86 75 87 76 75 79 91 84 83 71 86 58 81 83 73 72 76 77 69 92 81 82 57 90 42 83 78 75 65 76 78 63 93 84 76 69 90 43 80 81 74 63 63 79 66 82 84 81 80 85 48 81 86 78 67 64 80 67 81 63 75 83 75 58 86 95 81 78 76 82 79 78 53 81 74 85 69 80 94 78 80 88 88 82 78 57 81 72 92 80 83 95 79 78 85 83 78 74 59 77 75 82 75 84 93 88 61 87 77 71 75 61 76 77 66 77 82 91 84 80 89 79 66 76 67 73 79 74 78 86 91 83 83 83 73 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - 16 66 89 65 75 81 62 81 86 90 87 80 82 78 90 93 70 72 80 58 75 83 95 85 78 84 73 78 95 64 74 80 57 65 81 94 63 79 82 78 79 91 68 76 84 63 68 83 80 60 90 77 75 77 91 74 75 86 66 90 79 72 83 85 73 72 77 84 74 75 86 67 77 89 77 87 72 71 76 61 78 65 75 75 68 68 88 94 83 62 68 87 74 73 65 72 85 67 75 90 91 81 52 71 83 72 85 63 79 83 72 57 89 91 82 50 72 86 86 74 82 79 86 70 71 83 92 86 63 77 84 74 80 88 81 80 78 69 86 90 84 77 72 85 70 85 82 70 81 85 66 87 86 84 78 80 91 82 86 72 72 77 71 54 90 76 84 89 69 88 95 83 71 71 78 66 61 86 88 83 73 86 88 88 70 71 85 77 71 89 70 88 88 84 91 86 79 70 86 T ng 2388 2583 2164 2362 2280 2335 2137 2271 2717 2365 2322 2296 2508 T b ỡ n h 77 83 72 76 76 75 69 81 88 79 75 77 81 50 54 37 49 36 31 24 35 51 46 39 44 56 13 12 17 28 20 18 23 20 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 Min Ng y 71 81 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - 83 Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun Thc s khoa hc Nụng nghip - [...]... tài: Nghiên cứu một số chủng vi khuẩn nội sinh đối kháng kiểm soát sinh học tổng hợp bệnh héo xanh vi khuẩn cây lạc và cây vừng Trng i hc Nụng nghip H Ni - Lun vn Thc s khoa hc Nụng nghip - 2 1.2 Cơ sở khoa học của đề tài Bệnh héo xanh cây trồng ngày càng gây thiệt hại trầm trọng trong thực tế sản xuất ở Vi t Nam và trên toàn thế giới Hơn nữa vi khuẩn gây độc ở các vùng địa lý khác nhau và. .. 1.4 Mục tiêu của đề tài - Phân lập và tuyển chọn một bộ su tập những chủng vi khuẩn R solanacearum gây bệnh héo xanh vừng, lạc và vi khuẩn đối kháng với chúng - Xác định và sử dụng một số chủng vi khuẩn đối kháng với vi khuẩn gây bệnh chết héo, đồng thời kích thích cây sinh trởng phát triển và có triển vọng áp dụng thực tiễn, nhằm góp phần vào vi c phòng trừ bệnh héo xanh có hiệu quả Trng i hc Nụng nghip... là một trong những loài vi khuẩn chính gây ra các vụ dịch chết héo xanh đang phổ biến ở nhiều địa phơng - Chứng minh sự đa dạng sinh học của R solanacearum và vi khuẩn đối kháng với chúng ở Vi t Nam - Xác định đợc những chủng vi khuẩn nội sinh cây trồng có tác dụng kích thích sinh trởng cây vừng và cây lạc đồng thời có hoạt tính đối kháng cao với vi khuẩn R Solanacearum trong điều kiện nhà kính và. .. gen Tn5 có khả năng tạo khuẩn lạc ở rễ cà chua và ngăn cản sự tạo khuẩn lạc của các chủng dạng dại một cách hiệu quả (Trigalet và Trigalet-Demery, 1994) [72] 2.4.1 Cơ chế đối kháng giữa vi sinh vật đối kháng với vi khuẩn héo xanh R solanacearum Phòng trừ sinh học đợc dựa trên đối kháng vi sinh vật có thể là trực tiếp nh cạnh tranh và kháng sinh hay gián tiếp nh kháng cảm ứng của cây chủ Các giới hạn tác... cần thiết của vi khuẩn nội sinh để xử lý vào hạt hay rễ trớc và khi trồng Vi khuẩn nội sinh tạo một ổ sinh thái tơng tự nh ổ sinh thái của các vi khuẩn gây bệnh thực vật, đặc biệt là các mầm bệnh xâm nhiễm mạch gây héo Điều này tạo cho vi khuẩn nội sinh trở nên u thế khi sử dụng nh các tác nhân phòng trừ sinh học Có rất nhiều các công trình nghiên cứu sử dụng các tác nhân phòng trừ sinh học hệ rễ cho... vi khuẩn gây thối củ khoai tây Sau này, vào năm 1885, E F Smith đ phát hiện thêm và nghiên cứu sâu, rộng trên nhiều loại vi khuẩn và trên hầu hết các loại cây trồng Năm 1892, Halsted khởi đầu cho các nghiên cứu bệnh héo xanh cà chua Càng về sau này càng có nhiều công trình nghiên cứu đặc điểm sinh lý, sinh hoá, di truyền của các loại vi khuẩn gây bệnh héo xanh Năm 1896, E F Smith đ mô tả bệnh héo xanh. .. cây chủ Bằng chứng gián tiếp gợi ý rằng vi khuẩn nội sinh đ thích ứng với cây chủ qua thời gian và mối quan hệ nh vậy có thể trở nên đặc hiệu cây trồng Chính vì vậy, một vài chu trình trong cùng một cây chủ có thể biến đổi vi khuẩn nội sinh để sống trong cây chủ mới đó Tơng tự một số cây chủ phản ứng với xử lý vi khuẩn nội sinh kích thích sinh trởng hơn các cây chủ khác Ví dụ nh khoai tây giống Red... bảo vệ thực vật hoá học Do đó, vấn đề phân lập và bảo quản một bộ su tập những chủng vi khuẩn R solanacearum có độc tính cao để sử dụng trong vi c chọn, tạo giống vừng và lạc kháng bệnh héo xanh, đồng thời tuyển chọn các chủng vi sinh vật đối kháng với chúng và kích thích sự sinh trởng, phát triển cây chủ nh các tác nhân phòng trừ sinh học là rất cần thiết Xuất phát từ những lý do và đòi hỏi nêu trên,... chất kháng khuẩn đặc hiệu hơn, hoặc do sự có mặt của thực khuẩn thể Các kỹ thuật thích hợp phải đợc hình thành để phân biệt các cơ chế khác nhau này Phản ứng do các chất đặc hiệu gây ra đợc gọi là chất kháng sinh có ảnh hởng đến vi sinh vật Vi sinh vật đối kháng tạo ra những chất này có khả năng ức chế sinh trởng chỉ một số loài nhất định Một số vi sinh vật đối kháng chỉ ức chế vi khuẩn gram dơng và một. .. xử lý với vi khuẩn nội sinh có thể tăng cờng khả năng tạo củ (+63%) Chọn giống cây trồng để cải thiện tơng tác cây chủ và vi khuẩn nội sinh Để tăng năng suất cây trồng cần xem xét đến vi c cải tạo độ bền vững của tơng tác vi khuẩn nội sinh và cây chủ Có thể cải tạo khả năng làm chủ (phản ứng) của cây chủ hoặc chọn các tính trạng có lợi của vi khuẩn trong các quần thể vi khuẩn c trú trong cây chủ Bằng ... phòng trừ sinh học cần thiết Xuất phát từ lý đòi hỏi nêu trên, đ tiến hành thực đề tài: Nghiên cứu số chủng vi khuẩn nội sinh đối kháng kiểm soát sinh học tổng hợp bệnh héo xanh vi khuẩn lạc vừng. .. Hình thái khuẩn lạc điển hình số chủng đối kháng 49 ảnh 4.7 Vòng ức chế vi khuẩn gây bệnh VT3 vi khuẩn đối kháng NA4 51 Đồ thị Hoạt lực đối kháng vi khuẩn gây bệnh chủng vi khuẩn đối kháng đĩa... phòng trừ bệnh héo rũ vừng vi khuẩn đồng ruộng chủng vi khuẩn nội sinh đối kháng 69 Bảng 4.17 Hiệu suất biện pháp kiểm soát bệnh héo rũ vi khuẩn vừng V6 đồng ruộng chủng đối kháng nội sinh mang