BỘ Y TÊ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI TẠ THỊ HẰNG NGHIÊN CỨU SINH KHẢ DỤNG VÀ TƯƠNG ĐƯƠNG SINH HỌC VIÊN NANG THEOPHYUN TẮC DỤNG KÉO DÀI ■ (KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP Dược sĩ ĐẠI HỌC KHOÁ 1997 - 2002) HÀ NỘI, THÁNG 05/2002 Vci Người hướng dẫn: PGS TS Trần Tử An ThS Nguyễn Trần Linh Nơi thực hiện: Bộ môn Hoá phân tích Bộ môn Bào chế Trường Đại học Dược Hà Nội Thòi gian thực hiện: Từ 0212002-0512002 lè s tàm &iì lòníị hiêt Ờ4t làu iắe., em xitt tràn tvẹn tị oảni tín: - cTcV C ĩl í ĩn cTiứ’ c A n - tTcV ^Uõ (Ằ)uân Minh - £7/f (§ QOịnụễn C7râf/ Ấlìnii tận tình htừhtíỊ ííẫu em tvontị trình Làm Ultúú Luận ỐnI xin chà II thành eảm tìtt eáe, thíìụ (Jồ tịìáú Oỉê môn (Bà& oliè, Ữ3() ntôtt 76f)á Ịiltâít tíeh, ưlt.cS Qliịnụễn &hị CKiềxi cÂnh tạ ú (tìhí lùệti (ịiúp UM hoàn thành Ultúíì Luận HÙlị y ù i J\T ôì, n 0,05 tức ảnh hưởng khác nguồn biến thiên đến lnCmax ý nghĩa thống kê Khoảng tin cậy 90% tỷ lệ CmaxR/CmaxX: 0,231 < CmaxR/CmaxX< 1,016 Kết cho thấy tỷ lệ Cmax R/Cmax T có phần chung với khoảng (0,8; 1,25) phần vượt khoảng (0,8; 1,25) 35 c Kết phân tích phương sai khoảng tin cậy tỷ lệ MRT cho mẫu T R Chuyển số liệu MRT sang lnMRT, thực phân tích phương sai tính toán kết ta bảng sau: Bảng 10 Bảng phân tích phương sai với biến phụ thuộc lnMRT Nguồn biến Tổng bình Bậc tự Trung bình thiên phương bình phương Nhóm 0,139 NTN 0,320 Đợt F p 0,139 1,733 0,258 0,080 1,734 0,300 0,017 0,017 0,372 0,575 Mẫu 0,040 0,040 0,879 0,402 Sai số 0,183 0,045 Tổng cộng 0,699 11 Bảng cho thấy p > 0,05 tức ảnh hưởng khác nguồn biến thiên đến lnMRT ý nghĩa thống kê Khoảng tin cậy 90% tỷ lệ MRTr/MRTt : 0,863 < MRTr/MRTt < 1,460 Kết cho thấy tỷ lệ MRTr/MRTx có phần chung với khoảng (0,8; 1,25) phần vượt khoảng (0,8; 1,25) * Nhận xét: Theo tiêu chuẩn đánh giá tương đương sinh học quan quản lý thuốc thực phẩm Mỹ (FDA), khoảng tin cậy 90% CI tỷ số AUC, Cmax, MRT nằm khoảng (0,80; 1,25) chế phẩm tương đương sinh học Mặc dù kết nghiên cứu không hoàn toàn thoả mãn điều kiện chưa thể kết luận chế phẩm mẫu T mẫu R có tương đương 36 hay không Trong quy định đánh giá tương đương sinh học, số người tham gia thử nghiệm phải 12 người Với phạm vi nghiên cứu khoá luận tốt nghiệp, thực nghiên cứu người tình nguyện Vì vậy, để đánh giá xem viên nang theophylin tác dụng kéo dài (mẫu T) có tương đương sinh học với viên Euphylline L.A (mẫu R) hay không, cần phải tiếp tục nghiên cứu thử nghiệm người tình nguyện Khi đó, với đầy đủ số liệu kết luận chế phẩm theophylin tác dụng kéo dài có thật tương đương sinh học với chế phẩm Euphylline L.A hay không 2.2.5 Tính toán tốc độ hấp thu theo phương pháp giải tích chập tối ưu hoá thông qua tái tích chập (WLS Reconvoỉution) Sử dụng phần mềm KinBes để tính toán tỷ lệ theophylin hấp thu theo thời gian mẫu T R theo phương pháp WLS Reconvolution có sử dụng dung dịch o làm đối chiếu Kết trình bày bảng 11: 37 Bảng 11 Tỷ lệ hấp thu theophylin theo thời gian mẫu T R (So với tổng lượng theophylin hấp thu uống dung dịch chứa 200 mg theophylin) Thời Mẫu R Mẫu T điểm (h) Trung bình SD Trung bình SD 0,25 0,0155 0,0242 0,0411 0,0530 0,50 0,0459 0,0527 0,2172 0,2278 0,75 0,0609 0,0519 0,3604 0,3232 1,00 0,1412 0,1433 0,4362 0,2911 1,50 0,2219 0,2095 0,7631 0,3921 2,00 0,3951 0,3715 1,0392 0,6016 3,00 0,5378 0,4081 1,3311 0,6727 4,00 0,8563 0,6970 1,4767 0,7334 6,00 1,2983 1,1495 1,5116 0,7200 8,00 1,4136 1,2440 1,6595 0,7731 12,00 1,4917 1,2414 1,7132 0,7439 16,00 1,5220 1,2310 1,7995 0,8013 24,00 1,6355 1,3652 1,9033 0,9153 28,00 1,6736 1,3994 1,9099 0,9102 32,00 1,6889 1,4250 1,9304 0,9077 38 3.5000 t(h) Hình Tỷ lệ theophylin hấp thu theo thời gian từ mẫu R mẫu T * Nhận xét: Từ kết cho thấy: mẫu T có tốc độ mức độ hấp thu cao mẫu R Các thông số dược động học mẫu T R phân tích cho kết phù hợp với kết tính toán Như vậy, sơ kết luận viên theophylin tác dụng kéo dài bào chế có tốc độ hấp thu nhanh mức độ hấp thu lớn viên Euphylline L.A 2.2.6 Nghiên cứu tương quan in vitro - ỉn vivo viên nang theophylin tác dụng kéo dài Tương quan in vitro - in vivo xác định dựa mối tương quan mức độ giải phóng theophylin thu từ trắc nghiệm hoà tan in vitro mức độ hấp thu in vivo tính theo phương pháp WLS reconvolution Mức độ giải phóng thể qua phần trăm theophylin giải phóng theo thời gian, 39 CÒI1 mức độ hấp thu thể qua tỷ lệ theophylin hấp thu theo thời gian Ở ta xét khoảng thời gian từ đến giờ, khoảng thời gian hoà tan chủ yếu hấp thu chủ yếu từ bắt đầu thực thí nghiệm Kết nghiên cứu trình bầy bảng 12 hình 6,1 Bảng 12 Tỷ lệ hấp thu in vivo phần trăm giải phóng in vitro theophylin từ mẫu R & T Tỷ lệ hấp thu Thòi điểm (h) Tỷ lệ hấp thu R T Phần trăm giải phóng SD R % giải phóng T R T SD R T 0,00 0,0000 0,0000 0,0000 0,0000 0,00 0,00 0,00 0,00 0,25 0,0135 0,0411 0,0242 0,0530 1,44 1,91 0,69 1,91 0,50 0,0459 0,2172 0,0527 0,2278 4,42 5,97 0,72 1,81 1,00 0,1412 0,4362 0,1433 0,2911 11,69 15,99 2,12 3,24 2,00 0,3951 1,0392 0,3715 0,6016 25,41 29,87 2,19 4,08 3,00 0,5378 1,3311 0,4081 0,6727 38,50 41,22 2,18 4,89 4,00 0,8563 1,4767 0,6970 0,7334 50,41 50,10 3,18 5,59 6,00 1,2983 1,5116 1,1495 0,7200 66,59 64,97 2,28 5,81 8,00 1,4136 1,6595 1,2440 0,7731 77,51 75,59 2,09 5,07 40 Hình Tương quan lượng theophylin giải phóng in vitro lượng theophylin hấp thu in vivo từ mẫu R % giải phóng Hình Tương quan lượng theophylin giải phóng in vitro lượng theophylin hấp thu in vivo từ mẫu T Như vậy, mẫu T mẫu R có tương quan tốc độ giải phóng in vitro tốc độ hấp thu in vivo Khi có tương quan in vitro - in vivo 41 thay đổi công thức bào chế làm thay đổi thông số in vitro dẫn đến làm thay đổi thông số in vivo tương ứng thay đổi ước lượng mà không cần phải tiến hành thử nghiệm in vivo Tương quan in vitro - in vivo cho phép dự báo hấp thu in vivo có thông số in vitro, đồng thời có khả cho phép thay test in vivo test in vitro đơn giản hơn, tốn đánh giá sinh khả dụng chế phẩm 42 PHẦN - KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUÂT Qua thời gian thực nghiệm, đạt số kết sau: Xây dựng phương pháp định lượng theophylin nước bọt phương pháp sắc ký lỏng hiệu cao làm sở để tiến hành thử nghiệm in vivo Tiến hành đánh giá sinh khả dụng tương đương sinh học mẫu: viên nang theophylin tác dụng kéo dài bào chế (T), viên nang Euphylline L.A (R) dung dịch theophylin (O), tính thông số dược động học: Cmax, Tmax, AUC, Xz, T1/2 AUMC, MRT mẫu Từ xác định tốc độ mức độ hấp thu in vivo mẫu T mẫu R Kết sơ cho thấy mẫu T có mức độ tốc độ hấp thu nhanh hơn, mạnh mẫu R Với số mẫu thử nghiệm nhỏ, chưa kết luận chắn tương đương mặt sinh khả dụng viên nang theophylin tác dụng kéo dài bào chế viên nang Euphylline L.A Từ thông số độ hoà tan in vitro độ hấp thu in vivo theophylin từ mẫu R T, xác định có tương quan in vivo - in vitro mẫu > Ý kiến đề xuất: Đề tài thực thời gian ngắn, số người thử nghiệm nên kết bước đầu Để đánh giá cách đầy đủ xác sinh khả dụng viên nang theophylin tác dụng kéo dài bào chế, cần phải tiếp tục thử nghiệm số người tình nguyện lớn 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt Dược điển Việt Nam III; 2002; Nhà xuất Y học; tr 278 Nguyễn Anh Đào; 2001; Nghiên cứu thử nghiệm viên nén theophylin tác dụng kéo dài lâm sàng; Khoá luận tốt nghiệp Dược sỹ khoá 51; Trường Đại học Dược Hà Nội Phạm Gia Huệ, Trần Tử An; 1998; Hoá phân tích //; Trường Đại học Dược Hà Nội; tr 55 -85 Hoàng Tích Huyền, Đào Văn Phan, Nguyễn Trọng Thông; 1998; Dược lý học; Nhà xuất Y học; tr 374 - 375, 418 - 423 Võ Xuân Minh; 1999; Đại cương sinh dược học', Tài liệu sau đại học Chuyên đề kỹ thuật bào chế sinh dược học; Trường Đại học Dược Hà Nội; tr 7-17 Võ Xuân Minh, 1996; Thuốc tác dụng kéo dài dùng qua đường uôhg; Tài liệu sau đại học - Chuyên đề kỹ thuật bào chế sinh dược học; Trường Đại học Dược Hà Nội Bùi Hải Thanh; 2001; Nghiên cứu bào chế viên nén theophylin tác dụng kéo dài từpellet theophylin\ Khoá luận tốt nghiệp dược sỹ khoá 51; Trường Đại học Dược Hà Nội Trần Văn Thiên; 2000; Nghiên cứu bào chế viên nén theophylin tác dụng kéo dài\ Luận án tiến sỹ dược học; Trường Đại học Dược Hà Nội Tài liệu tiếng Anh Saníord Bolton; 1997; Pharmaceutical statistics', Marcel Dekker, Inc.; p 397 - 428 10 Mehdi Boroujerdi; 1995; Pharmacokinetics: principles and applications', McGraw Hill; p 153 - 180; 331 - 342 44 11 M Danh, D D Breimer; 1978; Therapeutic drug monitoring in saliva\ Clinical Pharmacokinetics 3; ADIS Press; p 39-57 12 Pahma Devarajan, Poonam Sule, D Parmar; 1999; Comparative pharmacodynamic - pharmacokỉnetỉcs correlation of oral sustained release theophylline ỷormulation in adult asthmatỉcs\ Drug Devel and Indus Pharm 25; Marcel Dekker, Inc 13 Food and drug administration; CDER; 2000; Bioavailability and bioequivalence studies for orally adminỉstered drug Products - General consideration 14 Food and drug administration; CDER; 1997; Extended release oral dosage forms: development, evaluation and application of in vỉtro - in vivo correlations 15 K Georga, V Samanidon, I Papadoyannis; 2001; Improved micro methodỷor the HPLC analysis of caffeine and its demethylated metabolites in human biological fluids\ Joumal of Liquid Chromatography & Related Technologies 23 16 L Hendeles, R Peter Iaữate, Miles Weinberger; 1994; A clinical and pharmacokinetic basic for the selection and use of sỉow - reỉease theophylline Products', Clinical Pharmacokinetics 9; ADIS Press; p 95 135 17 J H G Jonkman et al; 1981; Correlatỉon of serum and saliva theophylline concentrations after administratìon of a sustained release preparation\ Eur J Clin Pharmacol 20; p 73 - 78 18 Renu Koysooko, Elliot F Ellis, Gerhard Levy; 1973; Relationship between theophylline concentrations in plasma and saỉiva of man', Clinical Pharmacology and Therapeutics 15 (5); p 454-460 19 Martindale 29 - The extra pharmacopoeia; 1989 45 20 Rạịinder Singh, p Matharu, J K Lalla; 1994; A diffusion controlled drug deỉivery system for theophylline\ Drug Devel and Indus Pharm 20 (7); Marcel Dekker, Inc.; p 1225 - 1238 21 D L Munday, A R Fassihi, c Devilliers; 1991; Bioavailability study ofa theophylline oral controlled release capsule containing film coated minitablets in beagle dogs\ Int J Pharmaceutics 69; p 123 - 127 22 Zs Musko, K Pintye-Hodi, R Gaspar, J Pintye; 2001; Study of in vitro and in vitro dissolution of theophỵlline from fỉlm coated peỉlets", Eur J Pharm Biopharm 51; p 143 - 146 23 National asthma education and prevention program; 1997; Guidelines for the diagnosỉs and management ofasthma\ NIH publication 24 USP 24; 2000; p 1920 - 1924,1628 - 1636, 2051 - 2061 25 Jaleh Varshosaz, Taghi Ghafghazi, Ahmad Raisi, Mahmood Falamarziann; 2000; Biopharmaceutical characterỉĩatỉon of oral theophylỉine and aminophylline tablets - Quantỉtative correlation between dissolution and bioavailability studỉes', Eur J Pharm Biopharm 50; p 301 - 306 26 Peter Veng-Pedersen, 2001; Noncompartmentally-based pharmacokinetỉc modeling; Advanced Drug Delivery Reviews 48; p 265 - 300 46 [...]... là viên nang Euphylline L.A có cùng hàm lượng, 2 chế phẩm này có đồ thị giải phóng theophylin tương tự nhau, sơ bộ kết luận là có tương đương về sinh khả dụng in vitro Nghiên cứu sinh khả dụng và tương đương sinh học cho viên nang theophylin tác dụng kéo dài đang được thực hiện Khoá luận này đóng góp một 11 phần nhỏ trong bước đầu nghiên cứu sinh khả dụng của viên theophylin tác dụng kéo dài, có sử dụng. .. Theostat * Viên nang theophylỉn tác dụng kéo dài: dạng viên nang được bào chế từ pellet theophylin tác dụng kéo dài, do bộ môn Bào chế trường Đại học Dược Hà Nội nghiên cứu xây dựng công thức và đã được khảo sát các chỉ tiêu in vitro Kết quả khảo sát cho thấy: viên nang theophylin tác dụng kéo dài giải phóng dược chất trong khoảng 12 giờ, tốc độ giải phóng theophylin tương đối hằng định theo thời gian Khảo... liều Do vậy, dùng theophylin tác dụng kéo dài rất có lợi > Một vài chế phẩm theophylin tác dụng kéo dài: 10 Hiện nay trên thị trường dược phẩm Mỹ có hơn 150 biệt dược chứa theophylin trong đó có trên 50 chế phẩm theophylin tác dụng kéo dài Ở nước ta, trên thị trường đã có một số biệt dược theophylin tác dụng kéo dài của các hãng nước ngoài Một vài chế phẩm theophylin tác dụng kéo dài trong nước còn... thông số dược động học đang so sánh của chế phẩm thử là tương đương với chế phẩm đối chiếu hay là có tương đương sinh học giữa hai chế phẩm: viên nang theophylin tác dụng kéo dài và viên nang Euphylline L.A h Phương pháp nghiên cứu tương quan in vivo - in vitro Để đánh giá xem có sự tương quan in vivo - in vitro của chế phẩm thử hay không, phương pháp hồi quy tuyến tính được sử dụng để thiết lập mối... dụng viên Euphylline L.A làm chế phẩm đối chiếu 1.3 Đánh giá sinh khả dụng thuốc và thuốc tác dụng kéo dài 1.3.1 Đánh giá khả năng giải phóng dược chất in vitro [8] [22] [24] [25] Tác dụng sinh học của thuốc phụ thuộc nhiều vào khả năng hoà tan của dược chất từ dạng bào chế Việc đánh giá tốc độ và mức độ hoà tan in vitro rất có ý nghĩa trong dự báo hấp thu và trong nghiên cứu tương đương sinh học 1.3.2... mẫu sinh học 19 c Người tình nguyện 6 người tình nguyện, 3 nam, 3 nữ, khoẻ mạnh, không hút thuốc lá, không có tiền sử dị ứng thuốc tuổi từ 18 - 24, cân nặng 45 - 56 kg 2.1.2 Phương pháp thực nghiệm a Phương pháp bố trí thí nghiệm theo một thiết kế chéo đôi để đánh giá sinh khả dụng và tương đương sình học Để làm cơ sở cho việc đánh giá sinh khả dụng và tương đương sinh học của viên theophylin tác dụng. .. viên nang tác dụng kéo dài, sử dụng ngày hai lần của hãng Byk France SA sản xuất với các tá dược chính là: polyvidon, ethyl cellulose, Eudragit L và s, acid stearic, triacetin * Theo-KD: dạng viên nén theophylin tác dụng kéo dài, là sản phẩm của một số nhà nghiên cứu trong nước, đang được thử nghiệm lâm sàng ở một số bệnh viện, và đã được đánh giá sinh khả dụng và có tương đương sinh học với chế phẩm... mẫu R 2.2.4 Đánh giá mức độ tương đương sinh học giữa viên nang theophylỉn tác dụng kéo dài và viên nang Euphylline L.A Để xác định mức độ tương đương sinh học của mẫu thử T so với mẫu chuẩn R chúng tôi tiến hành so sánh các thông số dược động học (đã chuyển dạng logarit) sau: - Diện tích dưới đường cong AUC - Nồng độ cực đại Cmax - Thời gian lưu trú trung bình của phân tử theophylin MRT Trong đó khoảng... ứng sinh học của chế phẩm, trong nghiên cứu sinh khả dụng thường sử dụng các thông số dược động học như: AUC, Cmax, Tmax, M RT, thu được từ các nghiên cứu in vivo 17 * Tương quan in vivo - in vỉtro: được coi là quan hệ tỷ lệ giữa một đáp ứng sinh học hoặc một thông số rút ra từ một đáp ứng sinh học của thuốc (chỉ tiêu in vivo) với một thông số đặc trưng của dạng bào chế (chỉ tiêu in vitro) Trong nghiên. .. đoạn nghiên cứu in vivo và thử nghiệm lâm sàng Sau đây là một vài thông tin về các chế phẩm này: * Theostat: dạng viên nén theophylin tác dụng kéo dài sử dụng ngày 2 lần của hãng Inava (Pháp) Chế phẩm này là một sản phẩm có uy tín trên thị trường từ lâu * Euphyllỉne L.A: đây cũng là một chế phẩm theophylin tác dụng kéo dài của hãng nước ngoài có uy tín trên thị trường Euphylline L.A là dạng viên nang tác ... sinh khả dụng tương đương sinh học viên nang theophylỉn tác dụng kéo dài vói số mục tiêu sau: ỉ Đánh giá tương đương sinh học viên nang theophylin tác dụng kéo dài bào chế với viên nang Euphylline... thị giải phóng theophylin tương tự nhau, sơ kết luận có tương đương sinh khả dụng in vitro Nghiên cứu sinh khả dụng tương đương sinh học cho viên nang theophylin tác dụng kéo dài thực Khoá luận... giá sinh khả dụng tương đương sình học Để làm sở cho việc đánh giá sinh khả dụng tương đương sinh học viên theophylin tác dụng kéo dài 200 mg bào chế chọn viên nang Euphylline L.A 200 mg làm viên