TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y  Luận văn tốt nghiệp NGÀNH THÚ Y ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ CÁC LOẠI THUỐC BƠM VÚ ĐỂ ĐIỀU TRỊ BỆNH VIÊM VÚ TRÊN BÒ SỮA Giáo viên hướng dẫn Sinh viên thực hiện PGS-TS. TRẦN NGỌC BÍCH NGUYỄN THANH NGUYÊN Th.S NGUYỄN THỊ ÁNH TUYẾT MSSV: LT11661 LỚP: THÚ Y LT K37 Cần Thơ - 2013 TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y  NGUYỄN THANH NGUYÊN ĐÁNH GIÁ HIỆU QUẢ CÁC LOẠI THUỐC BƠM VÚ ĐỂ ĐIỀU TRỊ BỆNH VIÊM VÚ TRÊN BÒ SỮA Luận văn tốt nghiệp NGÀNH THÚ Y Cần Thơ - 2013 TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP VÀ SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y Đề tài: “ Đánh giá hiệu quả các loại thuốc bơm vú để điều trị bệnh viêm vú trên bò sữa” ở hợp tác xã Nông Nghiệp EVERGROWTH Sóc Trăng, trại bò sữa Hiệp Hòa Đức Hòa Long An, hợp tác xã bò sữa Long Hòa Cần Thơ Do sinh viên Nguyễn Thanh Nguyên thực hiện thời gian từ tháng 6 đến tháng 12 năm 2013. Cần Thơ, ngày …..tháng …. năm … Duyệt Bộ Môn Cần Thơ, ngày …. tháng …. năm …. Duyệt giáo viên hƣớng dẫn Trần Ngọc Bích Cần Thơ, ngày …. tháng …. năm … Duyệt Khoa Nông Nghiệp & SHƢD i LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của bản thân. Các số liệu, kết quả trình bày trong luận văn là trung thực và chƣa từng đƣợc ai công bố trong bất kỳ công trình luận văn nào trƣớc đây. Tác giả luận văn Nguyễn Thanh Nguyên ii LỜI CẢM ƠN Xin chân thành cảm ơn: Thầy Trần Ngọc Bích đã hết lòng lo lắng, quan tâm, hƣớng dẫn và giúp đỡ tôi hoàn thành luận văn tốt nghiệp. Cô Nguyễn Thị Ánh Tuyết – Trƣởng phòng Chăm Sóc Khách Hàng Công ty CP SXKD Vật Tƣ và Thuốc Thú Y Vemedim đã tận tình giúp đỡ, tạo điều kiện cho tôi đƣợc học tập và hoàn thành luận văn. Đồng gửi lời cảm ơn đến anh Huỳnh Minh Trí, anh Bùi Hoàng Huy, anh Võ Duy Thanh cùng tất cả các anh chị phòng vi sinh – Trung Tâm Nghiên Cứu & Phát Triển Công ty Vemedim đã giúp đỡ và hƣớng dẫn tôi trong suốt thời gian thực hiện đề tài. Xin chân thành cảm ơn quí thầy cô Bộ môn Thú Y – Khoa Nông Nghiệp & SHƢD trƣờng Đại Học Cần Thơ đã tận tình giảng dạy, truyền đạt cho tôi những kiến thức quý báu của đời mình. Cảm ơn các bạn lớp Thú Y LT K37 đã đồng hành, chia sẻ và động viên tôi trong suốt thời gian qua. Cần Thơ, tháng 12 năm 2013 Nguyễn Thanh Nguyên iii TÓM LƢỢC Đề tài “Đánh giá hiệu quả các loại thuốc bơm vú để điều trị bệnh viêm vú trên bò sữa” ở hợp tác xã Nông Nghiệp EVERGROWTH Sóc Trăng, trại bò sữa Hiệp Hòa Đức Hòa Long An, hợp tác xã bò sữa Long Hòa Cần Thơ. Thời gian từ tháng 6 năm 2013 đến tháng 12 năm 2013. Đối tượng khảo sát là bò đang cho sữa, mẫu bệnh phẩm là sữa, xác định viêm vú lâm sàng bằng phương pháp cảm quan và sờ nắn, xác định viêm vú cận lâm sàng (tiềm ẩn) bằng CMT. Nuôi cấy phân lập vi khuẩn Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Streptococcus spp, Pseudomonas aeruginosa và làm kháng sinh đồ. Kết quả Khảo sát hiệu quả của thuốc bơm vú điều trị bệnh viêm vú trên bò sữa là thuốc Ceptifi for LC, CEQUIN for LC và SPECTRAMAST tỷ lệ khỏi bệnh viêm vú là 100%, còn MAMIFORT tỷ lệ khỏi bệnh là 63,64%, BiO- TETRAMAS tỷ lệ khỏi thấp nhất là 33,33%. Tỷ lệ bò bị viêm vú lâm sàng ở trại tập trung là 10,49%, ở hộ gia đình là 15,49%. Tỷ lệ viêm vú cận sàng khảo sát bằng phương pháp CMT ở trại tập trung là 35,94%, CMT ở hộ gia đình là 20,21%. Kết quả phân lập vi khuẩn trong 9 mẫu sữa thì vi khuẩn Staphylococcus tỷ lê cao nhất 100%, tiếp đến là E.coli là 66,67% thấp nhất là Pseudomonas aeruginosa là 11,11%. Chưa phát hiện vi khuẩn Streptococcus spp. Các loại vi khuẩn phân lập nhạy cảm với các kháng sinh: Ceptiofur, Cefquinome, Doxycycline, Florfenicol, Marbofloxacin, Norfloxacin và Enrofloxacin. iv MỤC LỤC Trang duyệt ............................................................................................................... i Lời cam đoan ............................................................................................................ ii Lời cảm ơn .............................................................................................................. iii Tóm lƣợc ................................................................................................................. iv Mục lục .................................................................................................................... v Danh sách viết tắt .................................................................................................... ix Danh mục bảng ......................................................................................................... x Danh mục hình ........................................................................................................ xi Danh mục sơ đồ ...................................................................................................... xii CHƢƠNG 1: ĐẶT VẤN ĐỀ .................................................................................... 1 CHƢƠNG 2: CƠ SỞ LÝ LUẬN .............................................................................. 2 2.1 Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nƣớc ......................................................... 2 2.1.1 Tình hình nghiên cứu trong nước ..................................................................... 2 2.1.2 Tình hình nghiên cứu ngoài nước ..................................................................... 5 2.2 Đặc điểm cấu tạo và chức năng sinh lý của tuyến vú ........................................... 6 2.2.1 Cấu tạo của nhũ tuyến...................................................................................... 6 2.2.2 Sự phát triển của nhủ tuyến .............................................................................. 7 2.2.3 Chức năng của nhũ tuyến ................................................................................. 8 2.2.3.1 Sự tạo sữa .................................................................................................... 8 2.2.3.2 Sự thải sữa ...................................................................................................10 2.3 Chức năng và thành phần của sữa ......................................................................11 2.3.1 Chức năng của sữa .........................................................................................11 2.3.2 Thành phần của sữa ........................................................................................11 2.4 Các tính chất của sữa .........................................................................................11 2.4.1 Màu sắc ..........................................................................................................11 2.4.2 Tính ngưng tụ..................................................................................................11 v 2.4.3 Độ pH của sữa ...............................................................................................11 2.5 Định nghĩa viêm vú và phân loại bệnh viên vú ở bò sữa.....................................11 2.5.1 Định nghĩa viêm vú .........................................................................................11 2.5.2 Phân loại bệnh viêm vú ở bò sữa.....................................................................12 2.5.2.1 Phân loại theo sự biểu hiện của triệu chứng ................................................12 2.5.2.2 Phân loại theo tính chất gây bệnh ................................................................12 2.6 Những yếu tố liên quan đến sự xuất hiện bệnh ...................................................12 2.7 Các nguyên nhân gây viêm vú............................................................................14 2.7.1 Vật chủ............................................................................................................14 2.7.2 Vi sinh vật gây nhiễm ......................................................................................14 2.7.2.1 Staphylococcus aureus .................................................................................14 2.7.2.2 Streptococcus agalactiae ..............................................................................15 2.7.2.3 Escherichia coli ...........................................................................................15 2.7.2.4 Pseudomonas aeruginosa .............................................................................16 2.7.2.5 Môi trường ...................................................................................................19 2.8 Các biến chứng của bệnh viêm vú .....................................................................19 2.8.1 Teo bầu vú ......................................................................................................19 2.8.2 Xơ cứng bầu vú ...............................................................................................19 2.8.3 Bầu vú hoại tử.................................................................................................20 2.9 Thiệt hại do bệnh viêm vú gây ra .......................................................................20 2.10 Phòng và trị viêm vú ........................................................................................21 2.10.1 Phòng bệnh viêm vú ......................................................................................21 2.10.2 Kiểm tra bầu vú.............................................................................................21 2.10.3 Tổ chức việc vắt sữa ......................................................................................21 2.10.4 Số lần vắt sữa................................................................................................21 2.10.5 Tăng cường quản lý ......................................................................................21 2.10.6 Cách ly và điều trị gia súc mắc bệnh viêm vú ................................................22 vi 2.10.7 Điều trị bệnh viêm vú ....................................................................................22 2.10.8 Các phương pháp chuẩn đoán viêm vú trên bò sữa .......................................22 CHƢƠNG 3: NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ............................24 3.1 Nội dung nghiên cứu ..........................................................................................24 3.2 Địa điểm và thời gian thực hiện .........................................................................24 3.2.1 Địa điểm .........................................................................................................24 3.2.2 Thời gian thực hiện .........................................................................................24 3.3 Phƣơng pháp thí nghiệm ....................................................................................25 3.3.1 Đối tượng khảo sát..........................................................................................25 3.3.2 Mẫu bệnh phẩm ..............................................................................................25 3.3.3 Thuốc điều trị..................................................................................................25 3.3.4 Dụng cụ và hóa chất .......................................................................................26 3.4 Phƣơng pháp nghiên cứu ....................................................................................26 3.4.1 Điều tra cắt ngang ..........................................................................................26 3.4.2 Phương pháp lấy mẫu .....................................................................................26 3.4.3 Phương pháp chẩn đoán .................................................................................26 3.4.4 Nuôi cấy, phân lập vi khuẩn ............................................................................29 3.4.4.1 Vi khuẩn Staphylococcus aureus ..................................................................29 3.4.4.2 Vi khuẩn Streptococcus spp ..........................................................................31 3.4.4.3 Vi khuẩn Escherichia coli............................................................................33 3.4.4.4 Vi khuẩn Pseudomonas aeruginosa ..............................................................35 3.4.5 Kháng sinh đồ .................................................................................................37 3.4.6 Bố trí thí nghiệm điều trị viêm vú thể lâm sàng ...............................................38 3.4.7 Chỉ tiêu theo dõi..............................................................................................39 3.4.8 Phương pháp xử lý số liệu ...............................................................................39 CHƢƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ............................................................40 4.1 Tổng quát về tình hình chăn nuôi bò sữa ...........................................................40 vii 4.1.1 Phương thức chăn nuôi ..................................................................................40 4.1.2 Phương thức vắt sữa ......................................................................................40 4.1.3 Tình hình vệ sinh ............................................................................................41 4.2 Tỷ lệ và mức độ bệnh viêm vú khảo sát trên đàn bò sữa ....................................41 4.3 Kết quả phân lập vi khuẩn ..................................................................................43 4.4 Kết quả kháng sinh đồ ........................................................................................44 4.5 Kết quả thử nghiệm thuốc ..................................................................................47 CHƢƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ ................................................................50 5.1 Kết luận .............................................................................................................50 5.2 Đề nghị ..............................................................................................................50 TÀI LIỆU THAM KHẢO........................................................................................51 PHỤ LỤC ...............................................................................................................54 viii DANH MỤC VIẾT TẮT Ký hiệu Diễn giải BA Blood Agar EMB Eosin Methylene Blue Agar KIA Kligler Iron Agar MC MacConkey Agar MHA Mueller Hinton Agar MR Methyl Red VP Voges ProsKauer NA Nutrient Agar NB Nutrient Borth MSA Mannitol Salt Agar TSA Tryptycase Soy Agar CFU Colony Forming Unit CMT California Mastitic Test ix DANH MỤC BẢNG Bảng Tựa bảng Trang 1 Ƣớc tính thiệt hại do bệnh viêm vú bò tại Mỹ 20 2 Thời gian mất màu của xanh Methylene và ƣớc lƣơng số vi khuẩn/ml sữa 23 3 Số lƣơng mẫu bệnh phẩm 25 4 Phƣơng pháp phát hiện bệnh lý khi kiểm tra sờ nắn bầu vú 27 5 Kiểm tra viêm vú bằng CMT 28 6 Giải thích kết quả CMT khi kiểm tra 28 7 Đặc tính sinh hóa đặc trƣng của vi khuẩn Staphylococcus aureus 29 8 Đặc tính sinh hóa của vi khuẩn E.coli 33 9 Đặc tính sinh hóa đặc trƣng của vi khuẩn Pseudomonas aeruginosa 35 10 Tỷ lệ bò bị viêm vú lâm sàng 41 11 Tỷ lệ viêm vú cận lâm sàng khảo sát bằng phƣơng pháp CMT (>2+) 42 12 Kết quả phân lập vi khuẩn Staphylococcus aureus, Streptococcus spp, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa trên các mẫu sữa 43 13 Kết quả kháng sinh đồ đối với vi khuẩn Staphylococcus aureus 44 14 Kết quả kháng sinh đồ đối với vi khuẩn Pseudomonas aeruginosa 45 15 Kết quả kháng sinh đồ đối với vi khuẩn Escherichia coli 46 16 Kết quả thử nghiệm thuốc đối với bệnh viêm vú lâm sàng 47 x DANH MỤC HÌNH Hình Tựa hình Trang 1 2 3 Cấu tạo tuyến vú Cấu trúc tuyến vú và nang tuyến Khuẩn lạc Staphylococcus aureus trên môi trƣờng MSA 7 10 14 4 Vi khuẩn Streptococcus agalactiae 15 5 Nuôi cấy khuẩn lạc E.coli 15 6 Vi khuẩn Pseudomonas aeruginosa xem kính hiển vi điện tử 16 7 Mối quan hệ giữa các nguyên nhân gây bệnh viêm vú bò vi sinh vật môi trƣờng 19 8 Trại chăn nuôi bò sữa tập trung 24 9 Trại chăn nuôi bò sữa ở nông hộ 24 10 11 12 13 14 Lấy mẫu sữa bò thử CMT Kiểm tra sữa bò bị viêm vú bằng phƣơng pháp CMT Staphylococcus aureus sinh men catalase Staphylococcus aureus làm đông huyết tƣơng thỏ Streptococcus làm đục môi trƣờng NaCl 6,5% 29 29 29 29 31 15 Phản ứng sinh hóa vi khuẩn E. coli 33 16 Bình chứa sữa và bồn trữ lạnh 35 17 Kháng sinh đồ vi khuẩn Staphylococcus aureus 38 18 Kháng sinh đồ vi khuẩn E. coli 38 19 Máy vắt sữa 41 20 Sát trùng vú Vime- Iodine 41 21 Vú bò bình thƣờng 48 22 Vú bò bị viêm teo 1 thùy vú 48 23 Bơm thuốc CEQUIN for LC 48 24 Bơm thuốc Ceptifi for LC 48 25 Thuốc bơm vú SPECTRAMAST 49 26 27 Thuốc bơm vú BiO- TETRAMAS Thuốc bơm vú MAMIFORT 49 49 xi DANH MỤC SƠ ĐỒ Sơ đồ Tựa sơ đồ Trang 1 Quy trình nuôi cấy phân lập vi khuẩn Staphylococcus aureus 30 2 Quy trình nuôi cấy phân lập vi khuẩn Streptococcus spp 32 3 Quy trình nuôi cấy phân lập vi khuẩn E.coli 34 4 Quy trình nuôi cấy phân lập vi khuẩn Pseudomonas aeruginosa 36 xii CHƢƠNG 1 ĐẶT VẤN ĐỀ Mục tiêu chính của người chăn nuôi bò sữa là làm sao sản xuất ra nhiều sữa với chất lượng cao đáp ứng được tiêu chuẩn thu mua của các nhà máy chế biến sữa, từ đó tăng thu nhập cho bản thân mình. Muốn đạt được mục tiêu này, người chăn nuôi phải chăm sóc nuôi dưỡng tốt đàn bò sữa với khẩu phần ăn đáp ứng đầy đủ nhu cầu dinh dưỡng, quản lý chuồng trại, môi trường sạch sẽ, vệ sinh và áp dụng các biện pháp kỹ thuật nhằm tăng cường sức khỏe và bảo vệ đàn bò sữa chống lại các tác nhân gây bệnh. Trong quá trình phát triển chăn nuôi bò sữa, ngoài các yếu tố về giống, thức ăn, chăm sóc, nuôi dưỡng, chuồng trại, thời tiết khí hậu...Có ảnh hưởng đến năng suất và chất lượng sữa thì tình hình bệnh lý tại bầu vú đã gây thiệt hại không nhỏ về kinh tế cho người chăn nuôi mà còn ảnh hưởng đến sức khoẻ cho người tiêu dùng vì sữa từ những thú nhiễm bệnh có thể là phương tiện lây truyền các vi khuẩn có hại cho con người. Bệnh viêm vú trên bò sữa là bệnh phổ biến trên phạm vi thế giới và gây tổn thất lớn, nó tồn tại ở bất cứ nơi nào có chăn nuôi bò sữa. Bệnh thường gây ra bởi các vi khuẩn như Staphylococcus spp, Staphylococcus aureus, Streptococcus spp, E.coli, Pseudomonas…Tuy nhiên, dù cho nguyên nhân nào đi nữa thì bệnh cũng gây thệt hại đáng kể cho người chăn nuôi, làm giảm sản lượng sữa và chất lượng sữa. Do đó, việc tiến hành chẩn đoán sớm để phát hiện kịp thời tình trạng viêm vú tiềm ẩn là hết sức cần thiết và quan trọng. Nó góp phần giúp cho người chăn nuôi ngăn chặn và trị bệnh kịp thời để không dẫn đến tình trạng viêm vú lâm sàng gây tổn thất lớn về kinh tế và sức khoẻ của đàn bò cho sữa. Trước tình hình thực tế trên, được sự phận công của Bộ Môn Thú Y, Khoa Nông Nghiệp & Sinh Học Ứng Dụng, Trường Đại Học Cần Thơ, cùng với sự hỗ trợ của Công Ty Cổ Phần Sản Xuất Kinh Doanh Vật Tư Và Thuốc Thú Y Vemedim. Chúng tôi tiến hành thực hiện nghiên cứu đề tài: “Đánh giá hiệu quả các loại thuốc bơm vú để điều trị bệnh viêm vú trên bò sữa” ở hợp tác xã Nông Nghiệp EVERGROWTH Sóc Trăng, trại bò sữa Hiệp Hoà Đức Hoà Long An, hợp tác xã bò sữa Long Hoà Cần Thơ. Mục tiêu đề tài: + Khảo sát tỷ lệ viêm vú bò sữa thể lâm sàng và cận lâm sàng (tiềm ẩn) + Khảo sát sự nhiễm vi sinh vật có trong sữa và thực hiện kháng sinh đồ nhằm đưa ra khuyến cáo cho quá trình phòng trị đạt hiệu quả hơn. + So sánh hiệu quả của các loại thuốc bơm vú để điều trị bệnh viêm vú trên bò sữa. 1 CHƢƠNG 2 CƠ SỞ LÝ LUẬN 2.1 Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nƣớc 2.1.1 Tình hình nghiên cứu trong nước Các loại bệnh gây hại trên bò thì bệnh viêm vú rất quan trọng gây thiệt hại đến năng suất và chất lương sữa nên có rất nhiều tác giả trong nước nghiên cứu đến để trị bệnh làm giảm tỷ lệ bệnh và hạn chế những thiệt hại do gây ra sau đây là một số tác giả nghiên cứu: Theo Nguyễn Ngọc Nhiên (1986), kiểm tra viêm vú tiềm ẩn trên đàn bò sữa bằng phương pháp CMT, kết quả bò viêm vú tiềm ẩn chiếm 24,20%, trong đó vi khuẩn Staphylococcus aureus và Streptococcus spp chiếm chủ yếu trong các mẫu sữa viêm. Theo Trần Công Thành (1997), khảo sát viêm vú trên đàn bò sữa tại Đức Trọng – tỉnh Lâm Đồng bằng phương pháp CMT, kết quả bò viêm vú tiềm ẩn chiếm tỷ lệ 27,54%. Trong đó vi khuẩn được phân lập chủ yếu là Staphylococcus spp chiếm 33,06%, Streptococcus spp chiếm 25% và E.coli chiếm 18,06%. Theo Nguyễn Văn Thành (1998), phân lập và thử kháng sinh đồ trên 82 mẫu sữa bò viêm vú, trong đó có 35 mẫu viêm vú lâm sàng và 47 mẫu viêm vú tiềm ẩn ở Quận 12, Hóc Môn. Kết quả phân lập: Staphylococcus aureus chiếm 68,29%, Streptococcus spp chiếm 39,02%, Pseudomonas chiếm 4,87%, E.coli chiếm 3,65% và 1,21% mẫu có sự hiện diện của Citrobacter. Những loại kháng sinh có hiệu quả trong điều trị là Cephalexin, Gentamycin, Norfloxacin. Theo Nguyễn Ngọc Điền (1999), khảo sát 87 hộ chăn nuôi bò sữa tại Quận 12, kết quả cho thấy trong 140 bò đang vắt sữa, có 102 bò viêm vú tiềm ẩn chiếm 42,50%, số thùy vú viêm chiếm 25%. Vi khuẩn phân lập từ mẫu sữa gồm Staphylococcus spp, Staphylococcus aureus, Streptococcus spp. Các vi khuẩn này nhạy cảm với kháng sinh Cephalexin, Gentamycin, Norfloxacin. Theo Cù Hữu Phú (1999), đã kiểm tra 1679 mẫu sữa bò nuôi tại Ba Vì (Hà Tây) và ngoại thành Hà Nội bằng phản ứng CMT đã thấy 771 mẫu dương tính, chiếm tỷ lệ 45,92%. Theo Trịnh Quang Phong và ctv (1999), bệnh viêm vú lâm sàng ở bò sữa biến động khá cao từ 10 – 22%. Nguyễn Ngọc Nhiên và ctv (1996 – 1999), cho rằng bệnh viêm vú lâm sàng biến động từ 24,8 – 31,43%. Nguyễn Văn Phát và ctv (2004), khi sử dụng CMT để đánh giá tình trạng viêm vú tiềm ẩn ở bò sữa nuôi tại Thành Phố Hồ Chí Minh cho kết quả 75,2% - 84,3% bò bị viêm vú tiềm ẩn. 2 Theo Nguyễn Ngọc Thanh Hà (2004), kiểm tra 683 mẫu sữa trên đàn bò sữa tại Thành Phố Cần Thơ, trong đó có 142 mẫu dương tính với Staphylococcus aureus chiếm 22,26%, 55 mẫu dương tính với E.coli chiếm 8,62%, 37 mẫu dương tính với Streptococcus agalactiae chiếm 5,8%. Theo Nguyễn Thị Hồng Châu (2004), khảo sát bệnh viêm vú trên đàn bò sữa tại thị xã Tân An, huyện Châu Thành và Thủ Thừa, tỉnh Long An. Qua kết quả thử CMT cho thấy tỷ lệ viêm vú tiềm ẩn khá cao: 49,46% số thùy vú khảo sát bị viêm ở mức độ từ 2(+) đến 4(+). Những loại vi khuẩn phân lập từ các mẫu sữa viêm vú lâm sàng là Staphylococcus aureus chiếm 28,00%, Staphylococcus spp chiếm 31,50%, Streptococcus agalactiae chiếm 9,00%, E.coli chiếm 9,00%, Streptococcus khác chiếm 12,25%, Pseudomonas chiếm 8,25%, Microccoccus spp chiếm 1,00%, Corynebacterium spp chiếm 1%. Theo Lưu Quỳnh Hương và Trần Thị Hạnh (2004), tiến hành điều tra các chỉ tiêu vệ sinh vắt sữa ở 6 hộ chăn nuôi bò sữa thuộc khu vực ngoại thành Hà Nội cho thấy: 100% các mẫu tăm bông bầu vú, dụng cụ chứa sữa, tay người vắt sữa có coliform. 100% các mẫu không khí chuồng nuôi bị ô nhiễm vi sinh vật, chuồng cao nhất gấp 7 lần chỉ tiêu cho phép. Phân lập vi khuẩn trong mẫu sữa cho thấy tỷ lệ nhiễm Staphylococcus aureus từ 25 -75%, Staphylococcus môi trường 75-100%, trong khi đó Streptococcus agalactiae lại không nhiều (0 - 25%). Theo Trần Thị Hạnh và Lưu Quỳnh Hương (2004), qua điều tra tình hình các chỉ tiêu vắt sữa bằng tay tại một số hộ chăn nuôi gia đình cho thấy mức độ ô nhiễm vi sinh vật vượt nhiều lần chỉ tiêu cho phép. Sau khi đề ra một số biện pháp vệ sinh vắt sữa bằng tay áp dụng tại các hộ chăn nuôi trên. Thu được kết quả: Các mẫu tăm bông lấy từ đầu vú, tay người vắt sữa, dụng cụ chứa sữa cho thấy Staphylococcus aureus và Streptococcus agalactiae không còn xuất hiện, số mẫu có Coliform giảm xuống còn 50% (trước là 100%). Các mẫu không khí trong chuồng cho thấy vi sinh vật giảm đi đáng kể, tuy nhiên cần áp dụng quy trình vệ sinh vắt sữa nghiêm ngặt và thường xuyên để đạt kết quả tốt hơn. Tổng số vi sinh vật trong 1ml sữa giãm đi rõ rệt, tỷ lệ các mẫu sữa không đạt tiêu chuẩn cho phép còn 20,8%, giảm 3 lần so với trước thực nghiệm (62,5%). Chung Anh Dũng và ctv (2005), số liệu điều tra trên 4280 bò sữa nuôi ở 8 tỉnh thành có chăn nuôi bò sữa trong 2 năm 2004 – 2005 cho thấy tỷ lệ bò bị viêm vú lâm sàng là 12,3%, trung bình cứ 7 ca viêm vú tiềm ẩn, phát hiện qua máy đo viêm vú điện tử, có một ca phát triển thành viêm vú lâm sàng. Tỷ lệ bệnh viêm vú lâm sàng ở bò sữa trung bình là 12,3%, dao động từ 4,9% - 19,0% tùy khu vực. Đây là những trường hợp bò bệnh viêm vú có một trong số các biểu hiện ra ngoài như: sữa tủa, tắt sữa, vú sưng nóng đỏ đau, vắt không đủ 4 thùy, sữa lợn cợn, sữa có mủ. Đối với bệnh viêm vú bò sữa, kết quả điều tra trong nước đã báo động tình trạng này. Tỷ lệ bò bị viêm vú khá cao, biến động từ 10 - 22% (Trịnh Quang Phong và ctv, 1999) và từ 24,8 3 31,43%(Nguyễn Ngọc Nhiên và ctv, 1996 - 1999), cao hơn nhiều so với các nước khác (12%). Tỷ lệ bò viêm vú vào mùa mưa là 11,6% và mùa khô là 12,9%, sự sai khác không ý nghĩa (P>0,05) cho thấy không có ảnh hưởng rõ của mùa vụ lên tình trạng bệnh viêm vú bò sữa. Theo Sa Đình Chiến (2005), tỷ lệ viêm vú lâm sàng của bò sữa mới nhập vào địa bàn Mai Sơn, Sơn La là 27,56%, viêm vú cận lâm sàng là 48,16%; Staphylococcus, Streptococcus, E.coli là ba loại chính gây bệnh viêm vú bò sữa tại Mai Sơn, Sơn La trong đó đặc biệt là Staphylococcus: Amoxicillin, Lincomycin, Ciprofloxacin, Norfloxacin, Cephazolin, Neomycin, Tetracycline là những loại kháng sinh có hiệu quả điều trị cao đối với bệnh viêm vú tại nơi khảo sát. Theo Nguyễn Quang Tuyên và ctv (2007), điều tra 96 bò sữa nuôi tại Thái Nguyên cho thấy tỷ lệ viêm vú khá cao (31.25%), cao nhất trong vòng một tháng sau khi đẻ (40,0%) và giảm dần theo các tháng cho sữa. Bò bị viêm vú với tỷ lệ cao nhất là ở lứa thứ nhất (42,10%) và giảm dần theo các lứa tiếp theo, (29,03%) ở lứa thứ hai và 18,51% ở lứa thứ ba. Tỷ lệ bò bị bệnh viêm vú cao nhất vào mùa hè (42,85%), tiếp đến là mùa thu (31,83%), mùa xuân là (27,27%) và thấp nhất là mùa đông (20,83%). Thử nghiệm phác đồ dùng chế phẩm Mastiject Fort cho tỷ lệ khỏi bệnh cao (85%) với liệu trình điều trị ngắn (2-3 ngày) so với các phác đồ khác. Theo Trương Quang, Đỗ Trung Đông, Trương Thái Hà (2008), kiểm tra sữa bằng phương pháp CMT trên 435 con bò tại huyện Gia Lâm và Quận Long Biên, Hà Nội. Đã phát hiện 39,77% số bò sữa được kiểm tra có phản ứng dương tính, trong đó 37,20% bị viêm một lá vú, 27,74% bị viêm hai lá vú, 21,97% bị viêm 3 lá vú và 17,92% bị viêm 4 lá vú. Tỷ lệ một số loại vi khuẩn phân lập được từ các mẫu sữa của bò bị viêm vú là: Streptococcus 85%; Staphylococcus 78,75%; E.coli 30%. Có 90 – 100% số chủng vi khuẩn Streptococcus, Staphylococcus, E.coli phân lập được mẫn cảm với Marbofloxacin, Ciprofloxacin và Cephalothin. Theo Phạm Bảo Ngọc và ctv (2008), nghiên cứu sự ảnh hưởng của viêm vú bò sữa tới năng suất và chất lượng sữa tại công ty giống gia súc Hà Nội và các hộ gia đình chăn nuôi bò sữa tại huyện Gia Lâm – Hà Nội. Kết quả cho thấy sản lượng sữa giảm từ 5,223 xuống còn 3,210 kg/ chu kỳ. Các mẫu sữa lấy từ vú bò bị viêm đều không đạt tiêu chuẩn vệ sinh, vi khuẩn hiếu khí cao hơn nhiều so với mức độ cho phép. Bò bị viêm vú ảnh hưởng rất lớn đến chất lượng sữa, các thành phần không mong muốn trong sữa không tăng lên (Na) và các thành phần mong muốn trong sữa lại giảm đi (Ca, P, K, Mg, chất béo thô). Chất lượng sữa giảm dần nếu mức độ viêm càng tăng. Theo Nguyễn Minh Trí (2008), thực hiện tại trại chăn nuôi bò sữa Trung Tâm Giống Nông Nghiệp Thành Phố Cần Thơ, tỷ lệ bò viêm vú (52,78%), trong đó tỷ lệ bò viêm vú tiềm ẩn (41,67%). Kết quả phân lập nhóm vi sinh vật có trong mẫu sữa viêm là Staphylococcus aureus chiếm 47,06%, E.coli chiếm 21,57%, Streptococcus spp chiếm 4 17,65%. Kết quả phân lập nhóm vi sinh vật có trong môi trường là Staphylococcus aureus chiếm 82,50%, E.coli chiếm 70%, Streptococcus spp chiếm 42,50%. Theo Trần Thị Hạnh, Nguyễn Thị Loan, Ngô Chung Thủy (2009), điều tra 145 bò sữa đang khai thác tại trang trại quy mô trên 300 con, vắt sữa bằng tay, trong thời gian 6 tháng cho thấy: Bò mắc bệnh viêm vú lâm sàng chiếm 22,07%. Tỷ lệ viêm vú lâm sàng cao nhất ở bò đẻ lứa đầu tiên và giảm ở bò đẻ các lứa tiếp theo. Tỷ lệ viêm vú lâm sàng cũng cao nhất ở các giai đoạn vắt sữa dưới 1 tháng và thấp nhất giai đoạn trên 6 tháng. Tỷ lệ bệnh viêm vú lâm sàng cao nhất vào mùa hè (26,32%) và thấp nhất vào mùa đông (12,66%). Kiểm tra viêm vú tiềm ẩn bằng phương pháp CMT cho thấy: Trong 115 mẫu sữa được kiểm tra có 48 mẫu dương tính, chiếm tỷ lệ (41,47%). 2.1.2 Tình hình nghiên cứu ngoài nước Có rất nhiều tác giả ngoài nước nghiên cứu về bệnh viêm vú trên bò trên bò sữa sau đây là một số tác giả điển hình: Theo Pfizer (2002), khoảng 50% đàn bò ở Bắc Mỹ bị viêm vú tiềm ẩn ở các mức độ khác nhau. Theo Ahlner (2003), khảo sát 181 bò đang cho sữa tại Uruguay, kết quả tỷ lệ viêm vú tiềm ẩn chiếm 42,20%. Các loài vi khuẩn phân lập được là Staphylococcus aureus chiếm 34,30%, Streptococcus agalactiae chiếm 0,60%, Streptococcus uberis chiếm 3,90%, Streptococcus dysgalactiae chiếm 4,40%. Vi khuẩn từ môi trường bên ngoài như chuồng trại, chất độn chuồng, phân, nguồn nước, thiết bị chăn nuôi, dụng cụ vắt sữa… có cơ hội tiếp xúc với đầu vú xâm nhập vào bầu vú gây viêm vú (Alvaro Garcia, 2004). Thức ăn nhiều vi trùng, nấm mốc gây bệnh ở hệ thống tiêu hóa như tiêu chảy, từ đó, vi khuẩn và độc tố theo máu đến bầu vú gây viêm vú, vi khuẩn và nấm mốc cũng tiết ra các độc tố ảnh hưởng đến hệ thống miễn dịch (Jaen Duval,1995). Abdella và cộng sự (1996), Higgins và cộng sự (1997), cho rằng Staphylococcus aureus có khả năng sản sinh một lượng lớn enzyme hyaluronidaza gây phân hủy acid hyaluronic, nó gây ra sự phá hủy tổ chức tuyến vú làm cho lượng tế bào thân trong sữa tăng lên. Byaguraba et al. (2004), khảo sát 60 hộ dân nuôi bò sữa ở Uganda, tổng số bò khảo sát là 172 con bò đang cho sữa tương ứng với 688 thùy vú được lấy mẫu để kiểm tra tỉ lệ bò thử CMT dương tính (61,3%), thùy vú viêm tiềm ẩn (60,07%). Qua phân lập mẫu sữa cho thấy Pseudomonas aeruginosa (1,2%), Staphylococcus aureus (11,19%), Staphylococci không đông huyết tương (30,5%), Streptococci (2%), E.coli (14,4%). 5 2.2 Đặc điểm cấu tạo và chức năng sinh lý của tuyến vú Nhũ tuyến của gia súc cái là một tuyến ngoại tiết sản xuất sữa để nuôi con. Nhũ tuyến là biến thái của tuyến mồ hôi đặc trưng cho loài có vú. Nhũ tuyến giữ vai trò quan trọng trong sự sinh sản. Nhũ tuyến trong thời kỳ tiết sữa là một cơ quan có hoạt động biến dưỡng một cách tích cực do nó đã được cung cấp rất nhiều máu. 2.2.1 Cấu tạo của nhũ tuyến Nhũ tuyến được cấu tạo bởi 3 phần chính: Nang tuyến: Là nơi tạo ra sữa. Nó được cấu tạo bởi những tế bào tiết ra sữa có hình dạng như những nang nối liền với hệ thống dẫn sữa. Hệ thống ống dẫn : Bao gồm một loạt các xoang và các ống phức tạp khởi điểm từ nang tuyến đến ống dẫn nhỏ, ống dẫn vừa, ống dẫn lớn, bễ sữa của bầu vú, núm vú và cuối cùng là ống đầu vú. Các phần phụ : Bao gồm: Tế bào biểu mô cơ : chúng nằm xen ở trong các nang tuyến ống dẫn sữa nhỏ ; cơ trơn bao bọc xung quanh ống dẫn sữa và bễ sữa. Ngoài ra nó còn bao bọc xung quanh ống đầu vú. Tế bào biểu mô cơ và cơ trơn có vai trò co thắt trong quá trình thải sữa. Màng nông màng sâu, mô liên kết và mô mỡ bao bọc toàn bộ tuyến vú, các mô này xuyên vào nhũ tuyến tạo nên thùy vú và nó có vai trò bảo vệ và giữ cho bầu vú có hình dạng đặc biệt. Hệ thống mạch máu : Bầu vú được hệ thống lưới mạch máu dày đặc bao bọc, hệ thống tĩnh mạch phát triển gấp nhiều lần so với hệ thống động mạch. Vai trò của nó là đem các chất dinh dưỡng để tạo ra sữa và mang các chất cặn bã để thải ra ngoài, tĩnh mạch vú nổi rõ bên ngoài, đây cũng là một trong những chỉ tiêu quan trọng để lựa chọn bò sữa. Hệ thống thần kinh : Bầu vú là nơi có hệ thống thần kinh bao bọc dày đặc, do vậy bầu vú rất nhạy cảm với các tác động bên ngoài, phần trong của bầu vú có các thụ quan trong, bên ngoài có các thụ quan ngoài. Vai trò của hệ thống thần kinh của bầu vú là truyền những xung động thần kinh trong quá trình tập luyện đầu vú cũng như là quá trình vắt sữa lên hệ thần kinh trung ương từ đó tạo ra những cảm giác đối với gia súc. Các xung động này giữ vai trò quan trọng trong quá trình tạo sữa cũng như khai thác sữa. 6 Hình 1. Cấu trúc bầu vú Dây Màng mỏng giữa chằng các bầu vú treo trung tâm Vách ngoài Hình 1. Cấu trúc bầu vú (http://agriculture.kzntl.gov.za/publications/production_guidelines/dairying_in_natal/dairy6_1.htm) 2.2.2 Sự phát triển của nhũ tuyến. Sự phát triển nhũ tuyến và các tổ chức tế bào tiết xảy ra trong các giai đoạn đặc biệt trong cuộc đời của gia súc. Kiến thức về sự phát triển của chúng trong từng giai đoạn rất quan trọng, để từ đó chúng ta cần tạo điều kiện cho sự sản xuất sữa tối đa của tế bào tiết và tối thiểu hóa sự suy giảm của nó. Sự phát triển của nhũ tuyến xảy ra trong 5 giai đoạn : - Giai đoạn bào thai - Giai đoạn từ sau khi sanh cho đến tuổi dậy thì - Giai đoạn dậy thì - Giai đoạn mang thai - Giai đoạn cho sữa và khô sữa Giai đoạn bào thai : Ngay trong thời kỳ phôi thai, nhũ tuyến được nhận dạng dưới dạng những khối tế bào nằm dưới lớp biểu bì là mào nhũ tuyến. Sự phát triển này tương tự ở các loài gia súc, lấy bò làm một ví dụ, ở giai đoạn bào thai tháng tuổi thứ sáu thì nhũ tuyến đã phát triển một cách tương đối hoàn chỉnh về mặt cấu trúc. Giai đoạn từ sau khi sanh cho đến tuổi dậy thì : Sự phát triển của bầu vú ở một mức độ tương đương như sự phát triển của cơ thể và dần dần tạo nên hình dạng của bầu vú 7 trưởng thành. Hầu hết sự phát triển trong giai đọan này là sự phát triển của mô liên kết, mô mỡ và sự gia tăng một ít tế bào tiết. Giai đoạn tuổi dậy thì : sự phát triển của bầu vú diễn ra rõ rệt trong giai đoạn này, nhũ tuyến được kích thích để phát triển trong sự thích ứng với chức năng chuẩn bị có mang của gia súc. Các kích thích tố quan trọng liên quan đến sự dậy thì bao gồm FSH, LH, estrogen, progesteron, … cứ mỗi chu kỳ động dục thì nhũ tuyến phát triển khá hơn chủ yếu là sự phát triển các ống dẫn. Sự phát triển này do ảnh hưởng trực tiếp của 2 kích thích tố chính của noãn sào (estrogen và progesteron). Giai đoạn mang thai : Sự phát triển nhũ tuyến trong giai đoạn này rất mạnh mẽ, kích thước của bầu vú tăng trưởng được thấy một cách rõ rệt. Các nang sữa không được tạo ra trước đây, nhưng đến giai đoạn này chúng phát triển mạnh. Sự gia tăng mạnh nhất của các tế bào tiết là ở giai đoạn tháng thứ 5 của sự có mang và sự hoạt động của tế bào tiết bắt đầu vào khoảng tháng thứ 8, thứ 9 của thời giai mang thai. Giai đoạn cho sữa và khô sữa : Sự phát triển của tế bào tiết tiếp tục gia tăng trong giai đoạn đầu của thời gian cho sữa, tuy nhiên ở một mức độ thấp hơn so với giai đoạn có mang. Sau sự cho sữa ở đỉnh cao thì các tế bào tiết bắt đầu giảm, chính vì vậy nó gây sự giảm sữa dần dần đến giai đoạn khô sữa. Bò sữa được lên giống và phối lại từ 60 – 90 ngày sau khi đẻ và chúng sẽ có mang trong hầu hết thời gian cho sữa. Sự có mang sớm sẽ có một ít ảnh hưởng đến năng suất sữa do tế bào tiết sữa mau chóng giảm do yêu cầu phân phối dinh dưỡng cho bào thai. Sau 5 tháng của thời gian có mang, năng suất sữa và tế bào nang sữa sẽ giảm hơn so với những bò đang cho sữa mà không mang thai. Thông thường ở những con bò cái cho sữa thì thời gian khô sữa là 60 ngày trước khi chúng đẻ lần kế. 2.2.3 Chức năng của nhũ tuyến : 2.2.3.1 Sự tạo sữa Vào cuối thời kỳ mang thai của gia súc, các tế bào của nang tuyến trãi qua những biến đổi rất đặc biệt, trở nên to lớn và có khả năng tổng hợp và phân tiết sữa (tế bào tiết). Sự bài tiết sữa gồm 2 quá trình : Tiết sữa và thải sữa. Đây là một hoạt động sinh lý phức tạp, đáp ứng bằng hình thức phản xạ dưới sự điều khiển của hệ thần kinh. Từ những kích thích ở bộ phận nhận cảm ngoài da của nhũ tuyến : Xoa bóp, động tác nút bú của gia súc con … Luồng xung động thần kinh sẽ truyền về tủy sống ( hạ khưu não) hạ tầng thị giác, từ đó kích thích não thùy trước tiết ra kích thích tố LTH đưa vào máu kích thích tế bào nang tuyến tiết sữa. Trong một chu kỳ sữa, tính chất của sữa có nhiều biến đổi. Vào lúc đầu kỳ, nhũ tuyến tiết ra sữa đầu (colostrum) hơi khác với sữa thường, dần dần trong các ngày sau, các tế bào nang tuyến chuyển hóa thành sữa thường. Sản lượng sữa sản suất ra cũng tăng dần 8 vào những ngày đầu và đạt điểm cao vào tháng 1, 2 sau khi sanh. Sau đó sản lượng sữa hơi giảm, đồng thời hàm lượng chất béo và protein hơi tăng một ít. Sản lượng sữa biến đổi tùy loài, cá thể và phụ thuộc các yếu sau đây : Di truyền và dinh dưỡng : Các tính năng do di truyền về sản lượng sữa chỉ có thể khai thác được hoàn toàn khi gia súc mẹ được nuôi dưỡng với khẩu phần đầy đủ; Trường hợp thiếu dinh dưỡng thì sản lượng sữa của gia súc cái cao sản sẽ bị giảm. Tuy nhiên, trong nhiều trường hợp, đối với những gia súc cao sản, mặc dù cho ăn với khẩu phần không đầy đủ nhưng sự phân tiết sữa vẫn được duy trì ở mức độ cao, nhưng hậu quả là cơ thể sẽ bị xáo trộn nghiêm trọng: Gầy ốm, xốp xương … Đối với gia súc cái có sản lượng sữa thấp mặc dù nuôi với thức ăn có chất lượng tốt, chế độ dinh dưỡng cao nhưng sản lượng sữa vẫn thấp và thức ăn dư thừa được chuyển hóa thành thịt và mỡ dự trữ. Trong cùng một cơ thể, lượng sữa cũng có những biến động rất lớn cũng như trong cùng một loài. Đối với những bò sữa bình thường, sản lượng sữa vào khoảng 3.000 lít trong 1 kỳ tiết sữa là 300 ngày, trong khi đối với bò cao sản có thể sản xuất lượng sữa gấp đôi với cùng thời gian. Tuổi tác: Tuổi cũng ảnh hưởng đến sản lượng sữa. Gia súc cái nuôi trong điều kiện dinh dưỡng và chăm sóc tốt thì cũng chỉ đạt được sản lượng sữa cao nhất vào những kỳ cho sữa đầu tiên. Sự phân tiết sữa sẽ giảm rõ rệt khi gia súc già (ở những kỳ cho sữa cuối). Hoạt động và làm việc: Nuôi thả bò tự do trên đồng cỏ để vận động từ đó kích thích hệ thần kinh nội tiết kích thích quá trình phân tiết sữa tăng sản lượng sữa. Trái lại nếu làm việc khẩn trương, vận động nhiều quá sẽ làm giảm lượng sữa vì máu bấy giờ sẽ phân bố đến các cơ, bắp thịt thay vì đến nhũ tuyến. Bệnh tật: Tình trạng sức khỏe gia súc cái là yếu tố quan trọng trong sự phân tiết sữa. Trong trường hợp gia súc bệnh sẽ làm giảm sản lượng một cách rõ rệt. Sự tuần hoàn máu: Yếu tố này góp phần tạo ra sản lượng sữa vì khi nhũ tuyến hoạt động phân tiết mãnh liệt đòi hỏi phải được cung cấp một khối lượng máu khá lớn nên sau khi sinh, khối lượng máu đến tuyến vú gia tăng rất nhanh thay vì đưa đến tử cung như trong giai đoạn mang thai. 9 Hoạt động của hệ thần kinh, nội tiết: Sự phân tiết sữa hay hoạt của nhũ tuyến nói chung được kích thích bởi các kích thích tố của não thùy trước. Các kích thích tố này cũng được điều khiển bởi hệ thần kinh. Mặt khác, hệ thống thần kinh cũng tham gia vào quá trình phân tiết cũng như thải sữa, do đó hệ thần kinh ảnh hưởng rất lớn đến sản lượng sữa của gia súc. Mạch máu Tế bào cơ Mô tuyến Tế Bể bào biểu mô sữa Nang tuyến Ống tiết sữa Hình 2. Cấu trúc tuyến vú và nang tuyến (nguồn: www.ag.ndsu.edu/pubs/ansci/dairy/as1129w.htm) 2.2.3.2 Sự thải sữa Sự phân tiết sữa trong các tế bào nang tuyến là một tiến trình liên tục và sữa được tích lũy trong các hệ thống nang tuyến và trong các bể sữa. Nhờ các sợi đàn hồi ở xung quanh núm vú ức chế không cho sữa chảy khỏi bầu vú. Sự tiết sữa hay thải sữa là một tiến trình phức tạp gồm có sự phối hợp của của hệ thần kinh và nội tiết. Các yếu tố khơi mào sự tiết sữa tác dụng trực tiếp lên tuyến vú, Những kích thích ở bộ phận nhận cảm ngoài da của vú, từ đó những kích thích này truyền về tủy sống, gây ra phản xạ làm giảm những túi tuyến và ống dẫn sữa. Đồng thời những kích thích về thị, khứu, thính giác (thí dụ: thấy bóng dáng quen thuộc, tiếng nói quen của người vắt sữa, tiếng động của dụng cụ đựng sữa, động tác nút vú, tiếng kêu của gia súc con …) tạo luồng thần kinh lên não  hạ tầng thị giác  não thùy sau kích thích sự tiết oxytocin 10 đưa vào máu. Oxytocin tác dụng kích thích gây co bóp những hệ thống ống dẫn sữa, xoang sữa, bể sữa  thải sữa ra ngoài. Hai quá trình tiết sữa và thải sữa có quan hệ mật thiết với nhau. Sữa tiết ra nhiều sẽ kích thích quá trình thải sữa và ngược lại sữa không thải ra được sẽ làm ngưng tiết sữa. 2.3 Chức năng và thành phần của sữa 2.3.1 Chức năng của sữa Sữa được tiết ra sau khi thú cái sinh đẻ. Sữa là nguồn thức ăn trong suốt thời gian đầu lúc thú còn non và ngay sau khi sinh (Cholesterol). Sữa chứa đựng tất cả các chất dinh dưỡng cần thiết cho duy trì và tăng trưởng. Sữa được coi là thức ăn tổng hợp đủ dinh dưỡng dùng cho người lớn tuổi và trẻ sơ sinh ở nước kém phát triển là nguồn thức ăn chính và chế biến từ sản phẩm sữa cho các nước đang phát triển. 2.3.2 Thành phần của sữa Thành phần của sữa chủ yếu là nước (87,1%) còn lại gọi là vật chất khô gồm đường, mỡ, đạm, khoáng chất. Thành phần sữa có thể thay đổi tùy theo giống bò cái, chế độ dinh dưỡng, điều kiện nuôi dưỡng, môi trường, chuồng trại, tình trạng bệnh tật, sức khỏe bò cái bao gồm: sự khác nhau do tỷ lệ tăng trưởng thời còn nhỏ, khả năng và năng suất cho sữa, giai đoạn chu kỳ cho sữa; Do hệ thống tiêu hóa (sự hấp thu thức ăn); Do chế độ vắt sữa: bú sữa, vắt tay, vắt máy, thời gian, môi trường xung quanh; lứa đẻ, bầu vú… Sản lượng sữa được chứng minh là liên quan đến thể trạng và trọng lượng cơ thể, các tài liệu cho thấy cả hai về số lượng sữa (lít/ngày) và năng lượng (J/ngày) có liên quan đến sự phát triển của trọng lượng cơ thể. Theo FAO (1982) tỉ lệ sản xuất sữa trên thế giới thì bò chiếm 91%, trâu 5,9%, cừu 1,7%, dê 1,6%. 2.4 Các tính chất của sữa 2.4.1 Màu sắc: sữa bình thường có màu trắng đục, sữa bệnh sẽ biến màu, tùy tình trạng bệnh sữa sẽ có màu hồng, đỏ, xanh, vàng lợn cợn. 2.4.2 Tính ngưng tụ: Vắt sữa vào ống nghiệm 15-20ml, Để ở tủ ấm 370C trong 24-36 giờ sữa tốt sẽ ngưng tụ chậm hoặc không ngưng tụ, nếu có vi sinh vật sữa sẽ đông nhanh trước 6 giờ, cục sữa không đều đặn. 2.4.3 Độ pH của sữa: Sữa bình thường pH = 6,5-6,7, nếu sữa bệnh sẽ tùy thuộc bệnh mà pH sẽ tăng hay giảm (Nguyễn Thị Kim Đông, Nguyễn Văn Thu, 2010). 2.5 Định nghĩa viêm vú và phân loại bệnh viêm vú ở bò sữa 2.5.1 Định nghĩa viêm vú: Bệnh viêm vú là phản ứng viêm của tuyến vú. Bệnh viêm vú làm sữa biến đổi về lý tính và hóa tính, làm giảm sản lượng và phẩm chất sữa. Thùy vú tổn thương, nếu viêm 11 nặng thì bầu vú teo và mất khả năng tiết sữa, thú sẽ bị đào thải. (Nguyễn Văn Thành, 2005). Viêm vú là loại bệnh do nhiều nguyên nhân gây nên, có thể là nguyên nhân vật lý hoặc hóa học nhưng đa số là do nhiễm trùng (Schalm và ctv, 1971). Viêm vú là phản ứng phòng vệ của cơ thể chống lại các tác nhân gây tổn thương mô của bầu vú, những tổn thương này có thể gây ra do tác động cơ học hay do các loại vi khuẩn (Emanuelson và Philipsson, 1984 ; Kaneene và Hurd, 1990 ; Miller và Dorn, 1990 ; Hallén-Sandgren và ctv,1997 ; Heringstad và ctv, 1997). Viêm vú là sự viêm một hay nhiều thùy vú với sự hiện diện của một hay nhiều loài vi khuẩn trong mô vú, dẫn đến sự gia tăng số lượng tế bào sinh dưỡng trong sữa đặc biệt là tế bào bạch cầu, đồng thời làm thay đổi tính chất vật lý và hóa học của sữa. Nó dẫn đến hậu quả là làm giảm sản lượng của sữa, có khi còn gây chết thú (Tainturier, 1997). 2.5.2 Phân loại bệnh viêm vú ở bò sữa 2.5.2.1 Phân loại theo sự biểu hiện của triệu chứng Thể lâm sàng (có biểu hiện ra bên ngoài): Bò bị bệnh biểu hiện rõ triệu chứng ra bên ngoài (bầu vú sưng, đỏ, nóng, đau), độ đồng đều của sữa thay đổi như sữa đóng cục, kết sợi, màu sắc của sữa thay đổi: sữa có máu, có mủ hoặc có màu cà phê. Bò có cảm giác đau nên không cho vắt sữa. Trường hợp nặng có thể có triệu chứng toàn thân như sốt cao, bỏ ăn. Thể tiềm ẩn: Theo Quinn (1994) viêm vú tiềm ẩn không có dấu hiệu của sự viêm nhưng khi xét nghiệm sữa phát hiện sự nhiễm trùng của bầu vú, sự tăng số lượng bạch cầu và thay đổi tính chất của sữa. 2.5.2.2 Phân loại theo tính chất gây bệnh Viêm vú do lây nhiễm: Vi khuẩn truyền nhiễm gây viêm vú từ bò này sang bò khác trong lúc vắt sữa, thông qua tay người vắt sữa, khăn lau vú, máy vắt sữa bị nhiễm khuẩn (Alvaro Garcia, 2004). Viêm vú do tác nhân môi trường: Vi khuẩn từ môi trường bên ngoài như chuồng trại, chất độn chuồng, phân, nguồn nước, thiết bị chăn nuôi, dụng cụ vắt sữa… có cơ hội tiếp xúc với đầu vú xâm nhập vào bầu vú gây viêm vú (Alvaro Garcia, 2004). 2.6 Những yếu tố liên quan đến sự xuất hiện bệnh Có một số yếu tố tạo điều kiện cho bệnh viêm vú phát triển, đó là: - Yếu tố di truyền: Có những giống bò mẫn cảm hơn đối với bệnh viêm vú (ví dụ: giống bò Pio đỏ mẫn cảm hơn giống bò Pio đen) 12 -Cấu tạo bầu vú và núm vú: Những dây chằng nâng đỡ bầu vú không vững chắc; các núm vú phình căng, gây khó khăn cho việc vắt sữa; lổ mở của núm vú bị đẩy vào trong … là yếu tố làm cho bầu vú dễ bị viêm. (Nguyễn Văn Thành, 2005) - Tuổi của gia súc: với tuổi càng cao, sức đề kháng tự nhiên của gia súc càng giảm và bò sữa càng có nguy cơ bị viêm vú. - Thời kỳ tiết sữa: trong thời gian hai tuần đầu tiên trước khi đẻ, bầu vú rất mẫn cảm với viêm nhiễm. Trong thời kỳ cạn sữa, bầu vú cũng mẫn cảm với vi khuẩn hơn, so với trong thời kỳ tiết sữa. Bởi vì trong thời kỳ cạn sữa, có sự giảm tiết của protein. - Các vết thương: bản thân các vết thương tạo thành cửa xâm nhập của vi khuẩn vào tuyến vú, đồng thời chúng làm giảm sức đề kháng tự nhiên của gia súc đối với tất cả các trường hợp viêm nhiễm. Nguyên nhân dẫn đến tổn thương thường là do các thao tác thô bạo lên núm vú (ví dụ: vắt sữa không đúng kỹ thuật), kẹt núm vú khi bò đứng dậy, vắt sữa khi bầu vú trống rỗng, không lau khô bầu vú cẩn thận sau khi rửa và dẫn đến nứt nẻ da bầu vú hoặc do bị côn trùng đốt … - Sức đề kháng của bản thân bầu vú: Bao gồm toàn bộ các thành phần, yếu tố ngăn cản việc xâm nhập và phát triển của các mầm bệnh trong tuyến vú. Đó là sự đổi mới liên tục của các tế bào biểu mô trong ống núm vú ; Sự có mặt của các acid amin trong niêm mạc ống núm vú (Các acid amin này có đặc tính làm kìm hãm vi khuẩn phát triển). - Bản thân việc vắt sữa: đào thải ra một số lượng lớn vi khuẩn trong những vú bị viêm có nguy cơ gây nên viêm vú nhiều hơn. Về mặt miễn dịch tế bào, khi có hiện tượng nhiễm khuẩn, số lượng các bạch cầu trung tính nhân lên một cách nhanh chóng. Do bị thu hút bởi các chất từ tế bào tuyến vú tổn thương giải phóng ra, chúng di chuyển trong sữa và bắt đầu thực bào các vi khuẩn. Các bạch cầu trung tính cũng sinh ra các chất như: Interleukine và Interferon, có tác dụng làm tăng tính thấm của các thành mạch và bằng cách này, làm tăng cường tiết sữa, kết quả làm loãng các độc tố do vi khuẩn sản sinh ra. - Người ta cũng thấy trong sữa có các chất như: Lactoferrine, Lactenine và Lactoperoxidase. Mỗi chất này có cơ chế tác động riêng, nhưng đều tiêu diệt hoặc ngăn cản sự phát triển của vi khuẩn. Ví dụ, Lactoferrine chẳng hạn, nó được gắn với các phân tử sắt và ngăn cản sự phát triển của E.coli, là loại vi khuẩn cần đến sắt để nhân lên. 13 2.7 Các nguyên nhân gây viêm vú 2.7.1 Vật chủ Do bầu vú quá to và dài dễ gây xây xát, lỗ thông đầu vú to dễ rò rỉ (bò cao sản)…, là những điều kiện để bộc phát bệnh. 2.7.2 Vi sinh vật gây nhiễm Vi sinh vật là một vật thể rất nhỏ chỉ nhìn qua kính hiển vi, chúng sống trong các tổ chức, tế bào, cơ thể của động vật, một số ở dạng thực vật như nấm, mốc… ; dạng động vật như vi trùng, siêu vi trùng… ở giữa hai dạng trên như nguyên sinh vật. Có nhiều loại vi trùng gây bệnh viêm vú thường gặp như: Liên cầu trùng chiếm 86%, tụ cầu chiếm 5,4%, trực trùng sinh mủ 2,7%, E.coli 1,2%, các loài vi trùng khác 3,75%. Phổ biến nhất là liên cầu trùng gây viêm vú (Nguyễn Hữu Ninh – Bạch Đăng Phong, 1979). Gây viêm vú truyền nhiễm cho bò sữa có 80% là do Streptococcus agalactiae và Streptococcus dysgalactiae. Bệnh lan truyền chủ yếu do người vắt sữa, dụng cụ vắt sữa và ruồi, bệnh biểu hiện viêm vú, sưng tụ máu, sữa màu xanh lợn cợn máu, vú teo dần. Hai nguyên nhân này quan hệ chặt chẽ với nhau, cùng một loài gây bệnh nhưng sức đề kháng của cơ thể và tuyến vú con vật khác nhau nên có thể gây ra các thể viêm vú khác nhau. Ngược lại, những vi trùng khác nhau khi tác động lên bầu vú cũng có thể gây ra những triệu chứng giống nhau. Ngoài những vi khuẩn đặc trưng trên, bệnh viêm vú cũng có thể xảy ra do trực khuẩn lao, virus gây bệnh lở mồm long móng… 2.7.2.1 Staphycoccus aureus ( tụ cầu khuẩn ) Hình 3. Khuẩn lạc Staphylococcus aureus trên môi trường MSA Staphylococcus aureus là loại tụ cầu khuẩn gây bệnh mạnh nhất đối với tuyến vú. Việc viêm nhiễm thường có nguồn gốc từ môi trường bên ngoài và người vắt sữa là tác nhân truyền bệnh chủ yếu. Đây là vi khuẩn gram dương, có đường kính 0,7-1 μm, gồm nhiều cầu khuẩn gắn liền nhau tạo thành hình giống như chùm nho, không có lông, không nha bào, không có vỏ nhày, là vi khuẩn sinh mủ điển hình (Nguyễn Vĩnh Phước, 1977). 14 2.7.2.2 Streptococcus agalactiae (a) (b) Hình 4. Vi khuẩn Streptococcus agalactiae (a): www. sciencephoto.com (b): www. microbiologiaudca.webnode.es Streptococcus agalactiae là vi khuẩn gram dương, tác nhân gây bệnh duy nhất cần đến mô tuyến vú để phát triển và nhân lên. Chúng là những cầu khuẩn xếp thành chuỗi dài hay ngắn như chuỗi hạt, không di động. Về cơ bản, việc lây truyền bệnh là do người vắt sữa. Bệnh xảy ra khi hệ thống kháng viêm của tuyến vú không hữu hiệu và thường xảy ra trên toàn đàn. 2.7.2.3 Escherichia coli E.coli là trực khuẩn gram âm, hình gậy ngắn, hai đầu tròn, không bào tử (Nguyễn Vĩnh Phước, 1977). Sau khi tấn công và gây viêm tuyến vú, E.coli sản sinh một số lượng lớn nội độc tố gây thay đổi khả năng thẩm thấu của mạch máu, hậu quả gây sưng tấy, phù thủng, viêm vú cấp tính và tăng một số lượng bạch cầu trung tính đáng kể trong sữa. (a) Hình 5: Nuôi cấy khuẩn lạc E.coli (a) Khuẩn lạc E. coli trên môi trường EMB (b) Khuẩn lạc E.coli trên môi trường MC 15 (b) 2.7.2.4 Pseudomonas aeruginosa (P.aeruginosa) Trực khuẩn mủ xanh P.aeruginosa còn có tên là Pseudomonas pyocyaneus, Bacterium pyocyaneum, Pseudomonas aeruginosa là vi sinh vật có độc lực thấp, thường tìm thấy trong quá trình nung mủ ở bò, heo và trong các vết thương nhiễm trùng của người. Trong tự nhiên vi khuẩn có trong đất, nước, không khí, sống hoại sinh ở da và niêm mạc, phân người và gia cầm (Nguyễn Vĩnh Phước, 1977).. Đặc điểm hình thái P.aeruginosa có dạng hình que mỏng, Gram âm, kích thước 1,5 x 3 μm, hai đầu tròn, đứng riêng từng đơn vị hoặc từng đôi, từng chuỗi ngắn và đôi khi còn tồn tại dạng hình sợi, hình dấu phẩy, hình cầu. P.aeruginosa chuyển động bằng tiêm mao, không sinh bào tử và không có vỏ nhầy (Nguyễn Vĩnh Phước, 1977). Hình 6: Vi khuẩn Pseudomonas aeruginosa xem kính hiển vi điện tử http://www.pseudomonas.com/images/paeruginosa.jpg Đặc điểm nuôi cấy P.aeruginosa là vi khuẩn hiếu khí và yếm khí không bắt buộc, mọc ở nhiệt độ từ 30 – 37oC, giới hạn nhiệt độ phát triển 5 – 42oC, pH thích hợp là 6,6 – 7,0. Môi trường nước thịt: đục đều, hình thành màng và cặn, canh trùng nhuộm màu xanh, màu vàng trở nên sậm khi lắc canh trùng. Canh trùng già trở nên nhớt và thành sợi. Loài này có khả năng tăng trưởng trên môi trường nghèo dinh dưỡng với khoáng và nguồn carbon như: acetate, pyruvate, succinate, glucose (Trần Linh Thước, 2005). Trên môi trường dinh dưỡng khuẩn lạc tròn, bóng, môi trường trở nên xanh. Phát triển trên môi trường SS (Shigella Salmonella), trên thạch máu gây dung huyết. Canh khuẩn đục đều có màu vàng sau đổi sang xanh, canh trùng già trở nên nhớt và có sợi (Tô Minh Châu và Trần Thị Bích Liên, 2001). Trong môi trường dinh dưỡng dạng lỏng như NB, TSB, P.aeruginosa hình thành màng và cặn, canh trùng già làm môi trường trở nên nhớt (Nguyễn Vĩnh Phước, 1977). 16 Trên thạch: khuẩn lạc không tròn, bóng, dẹt, to, rìa không phẳng có dạng nhầy (Trần Linh Thước, 2005). Trên môi trường thạch dinh dưỡng như TSA (Trypticase Soy Agar), NA (Nutrient Agar) khuẩn lạc hơi tròn, rìa không phẳng, trong óng ánh, môi trường xung quanh khuẩn lạc màu xanh, mùi trái cây (Carter G.R, 1978). Môi trường thạch máu: có dung huyết. Huyết thanh đông: tan chảy một phần sau 14 ngày. Sữa: đông, sau đó pepton hoá. Đặc tính sinh hoá Môi trường đường: chỉ có glucose bị phân giải, không sinh hơi. Không hoàn nguyên methyl red, không sản sinh indol, H2S. Phản ứng VP âm tính, phản ứng oxidase dương tính, làm tan chảy gelatin, khử nitrate thành các hợp chất khác như nitrite, ammonia (Nguyễn Vĩnh Phước, 1977). Phản ứng Indole âm tính, citrate dương tính, VP âm tính, Methyl – Red âm tính, oxidase dương tính (Tô Minh Châu và Trần Thị Bích Liên, 2001). P.aeruginosa là vi khuẩn duy nhất tiết ra pyocyanin. Vì vậy bất cứ trực khuẩn Gram âm nào tiết ra pyocyanin chính là P.aeruginosa (Botzenhart K và Ruden H., 1987). Các tính chất hoá sinh thường được sử dụng trong lâm sàng gồm: urease (-), indol (-), H2S (-), citrate simmons, arginin dihydrolase và gelatinose (+); khử NO3- đến N2. Trên môi trường OF (Oxidation – Fermentation), nhiều loại cacbohydrate bị thoái hoá theo lối oxy hoá có sinh axit: glucose, manitol, glycerol, ethanol, arabinose, fructose và galactose (Lê Huy Chính, 2007). Sức đề kháng P.aeruginosa sống rất lâu trong môi trường nuôi cấy và trong thiên nhiên, bị diệt sau khi đun 55oC trong 2 giờ (Nguyễn Vĩnh Phước, 1977); chết nhanh chóng ở 100oC. Trong môi trường ẩm, thoáng, không có ánh sáng mặt trời chiếu trực tiếp, chúng sống được hàng tuần; trong môi trường có dinh dưỡng tối thiểu, ở 5oC chúng có thể sống hơn 6 tháng (Lê Huy Chính, 2007). Độc tố P.aeruginosa sản sinh nội độc tố và sinh ngoại độc tố exotoxin A, độc tố này giống với độc tố gây bệnh bạch hầu, gây hoại tử cục bộ trên các cơ quan tạo điều kiện cho vi khuẩn xâm nhập vào tế bào và gây bệnh (Nguyễn Vĩnh Phước, 1977). P.aeruginosa tiết ra hai loại protein ngoại bào có vai trò trong độc tính của vi khuẩn trong quá trình xâm nhiễm là elastase và alkaline protease. Elastase có liên quan nhiều đến độc lực của vi khuẩn, có tác dụng phân cắt lớp collagen, chia cắt các thành phần của IgG, IgA và các bổ thể, phá huỷ các màng fibrin của biểu mô làm khả năng đề kháng tự nhiên của vật chủ giảm, tạo điều kiện cho vi 17 khuẩn xâm nhập. Lecithinase có tác dụng phá vỡ cấu trúc có lecithin (Lê Huy Chính, 2007). Tính kháng thuốc P.aeruginosa kháng với nhiều loại kháng sinh. Tính kháng thuốc thường được quy định bởi các plasmid và các yếu tố di truyền có thể được lan truyền trong quần thể thông qua hiện tượng tải nạp và chuyển nạp tạo ra những dạng đột biến kháng thuốc mới. Sự kháng thuốc của P.aeruginosa đối với Cephalosporin thế hệ thứ ba và các Aminoglycoside, Fluroquinolone đang gây khó khăn cho việc điều trị nhiễm trùng do P.aeruginosa (Nguyễn Thị Hải Yến, 2008). P.aeruginosa là vi khuẩn kháng thuốc phổ biến, do đó là một loài gây bệnh nguy hiểm, chỉ còn một số ít kháng sinh có tác dụng với nó như: Fluoroquinolone, Gentamycin, và Imipenem (Trần Linh Thước, 2005). P.aeruginosa có được tính kháng thuốc cao là do cấu tạo của màng tế bào làm giảm khả năng thấm của kháng sinh vào bên trong tế bào của vi khuẩn, một yếu tố khác là do P.aeruginosa có mang plasmid – R có khả năng truyền gen kháng thuốc qua trung gian plasmid. Theo Bonfiglio et al., (1998), P.aeruginosa kháng một số kháng sinh: meropenem 9,1%, ceftazidime 13,4%, carbenicillin 27,3%, ticarcillin/clavulanic acid 22,8%, amikacin 10,6% và ciprofloxacin 31,9%. Theo Hoàng Kim Tuyến et al., (2005), P.aeruginosa kháng mạnh cefoperazone và nhóm aminoglycoside (65 – 70%). Kháng sinh thông dụng như ceftazidime cũng chỉ còn nhạy cảm khoảng 50%. Tính gây bệnh P.aeruginosa là điển hình của loại vi khuẩn gây nhiễm trùng cơ hội (opportunistic pathogen). Vi khuẩn sống khắp nơi trong đất và nước, khi sức đề kháng của cơ thể giảm sút, nó dễ dàng tấn công vào cơ thể gia súc. Vi khuẩn có thể gây nhiễm trùng máu, nhiễm khuẩn đường tiết niệu, viêm phổi, viêm nội tâm mạc, viêm da và viêm xương sụn. Ngoài ra, P.aeruginosa là nguyên nhân gây bệnh mủ xanh trong thiên nhiên, vi khuẩn này được tìm thấy trong bệnh viêm phổi có hoại tử, bệnh viêm ruột có hoại tử của heo, abscess lá lách, gan của heo và bò, cũng có thể tìm thấy vi khuẩn trong bộ máy sinh dục và tinh trùng của bò đực giống mất khả năng sinh sản (Nguyễn Vĩnh Phước, 1977). 18 2.7.2.5 Môi trường Do chuồng trại vệ sinh kém, không thoáng và thiếu ánh sáng, mật độ nuôi, chăm sóc quản lý không đúng kỹ thuật, dinh dưỡng không phù hợp. Phương pháp vắt sữa, kỹ thuật vắt sữa không đúng, thời gian và số lần vắt, áp lực vắt không đảm bảo dễ gây ảnh hưởng đến bầu vú. B ò Vi sinh vật Môi trƣờng Hình 7: Mối quan hệ giữa các nguyên nhân gây bệnh viêm vú bò vi sinh vật môi trƣờng (nguồn: WWW.ag.ndsu.edu/pubs/ansci/dairy/as1129w.htm) 2.8 Các biến chứng của bệnh viêm vú 2.8.1 Teo bầu vú Trong bệnh viêm vú, phần lớn tế bào vú bị tổn thương, cơ năng tiết sữa không phục hồi. Thể tích thùy vú nhỏ hơn bình thường, khả năng tiết sữa của tuyến vú giảm hoặc mất hẳn. Ngoài ra, sau khi bị teo các thùy vú lành phải tiết sữa bù nên thể tích lớn hơn. 2.8.2 Xơ cứng bầu vú Các chức năng sinh lý giảm mạnh, tổ chức tuyến vú bị teo đi. Sờ vào thấy rắn hoặc ấn mạnh tuyến vú thấy những cục rắn hoặc rắn toàn bộ. Sau khi vắt sữa thể tích thùy vú không giảm. Lượng sữa giảm, nếu xơ cứng một phần tuyến vú thì sữa loãng màu xám và có cục vón lợn cợn. 19 2.8.3 Bầu vú hoại tử Bầu vú thối loét và phân giải do vi khuẩn gây hoại tử xâm nhập vào tuyến vú qua đường tiết sữa, vết thương hoặc mạch máu. Lúc đầu bề mặt bầu vú có những đám bầm tím, cứng, đau, về sau loét và hoại tử có mủ. Toàn bộ bầu vú sưng to, ấn vào thấy nước hồng chảy ra. Hạch lâm ba vú sưng to, đau, có triệu chứng bại huyết. 2.9 Thiệt hại do bệnh viêm vú gây ra Khi bò cái cho sữa bị viêm vú lâm sàng thì tỷ lệ sữa giảm 10-30%, nếu viêm vú ở thể tiềm ẩn thì tỷ lệ sữa giảm 19%, thông thường tỷ lệ bò cái cho sữa bị mắc bệnh viêm vú tiềm ẩn chiếm khoảng 50% (Nguyễn Văn Thành, 2005). Bệnh viêm vú gây tổn thất rất lớn cho ngành chăn nuôi bò sữa. Các thiệt hại liên quan đến nhiều khía cạnh khác nhau: Làm giảm khoảng 10% sản lượng sữa do tuyến sữa bị tổn thương. Sau khi dùng kháng sinh điều trị cục bộ, trực tiếp vào bầu vú phải chờ đợi một thời gian trước khi vắt sữa đem bán. Sữa của bò bệnh không được bán cho đại lý. Sữa chỉ được bán cho đại lý thu mua sữa sau 2-3 ngày kể từ ngày dứt điều trị (khi hàm lượng kháng sinh tồn dư trong sữa không còn). Giảm 10-30% sản lượng sữa; giảm chất lượng sữa; tốn chi phí cho việc điều trị và công lao động; tốn chi phí cho việc loại thải bò hoặc bò bị chết (Hurley, 1997). Tại Mỹ thiệt hại do bệnh viêm vú ước tính khoảng 184,40 USD/bò/năm. Bảng 1: Ƣớc tính thiệt hại do bệnh viêm vú bò tại Mỹ Nguồn thiệt hại Chi phí/bò (USD) Tỷ lệ (%) Sản lượng sữa giảm 121,00 66,00 Loại bỏ sữa 10,45 5,70 Loại thải bò 41,73 2,.60 Tốn công lao động 1,14 0,10 Điều trị bệnh 7,36 4,10 Dịch vụ thú y 2,72 1,50 184,40 100 Tổng (nguồn : www.ag.ndsu.edu/pubs/ansci/dairy/as1129w.htm) 20 2.10 Phòng và điều trị viêm vú 2.10.1 Phòng bệnh viêm vú Phải đảm bảo vệ sinh sạch sẽ từ chuồng trại đến cơ thể con vật, nhất là bầu vú, cụ thể phải thực hiện các biện pháp sau đây: 2.10.2 Kiểm tra bầu vú: Kiểm tra hàng ngày, phát hiện sự khác thường của bầu vú, của sữa để chẩn đoán và điều trị chính xác, kịp thời. Chỉ những bò có bầu vú bình thường sau khi đẻ, mới được đưa vào vắt sữa. 2.10.3 Tổ chức việc vắt sữa: - Phương pháp vắt: Đúng kỹ thuật, tránh làm tổn thương da, niêm mạc bầu vú, trước khi vắt sữa phải xoa bóp bầu vú. - Vệ sinh khi vắt sữa: Rửa sạch bầu vú bằng nước ấm. Sau dùng khăn sạch lau khô (mỗi con phải có khăn riêng). Công nhân vắt sữa phải mặc quần áo sạch sẽ, móng tay cắt ngắn, rửa sạch tay sau khi vắt sữa mỗi con. Cách ly bò bị bệnh, sữa bò bệnh để riêng để xử lý. - Trình tự vắt sữa: Bò khỏe vắt trước, bò bệnh vắt sau. Trên cùng một con viêm vú thì thùy vú lành vắt trước, thùy vú bệnh vắt sau. 2.10.4 Số lần vắt sữa: Bò cao sản, nên tăng số lần vắt trong ngày. 2.10.5 Tăng cường quản lý: Tránh để xây xát bầu vú (không chăn thả bò những nơi có lùm cây cao, có gai…) Nếu nhập bò mới cần cách ly theo dõi, nhất là khi bầu vú hoặc sữa không bình thường. Làm cạn sữa: Bò trước khi đẻ phải được cạn sữa triệt để và chú ý thường xuyên vệ sinh và kiểm tra bầu vú, đầu vú bò trong giai đoạn này. Bò cái tơ cũng phải định kỳ kiểm tra vệ sinh bầu vú để phát hiện sớm những dấu hiệu bất thường. Sau khi đẻ: Làm tốt công tác hộ lý, nếu bị viêm nhiễm đường sinh dục phải điều trị kịp thời và dứt điểm. Vệ sinh chuồng trại: Chuồng trại phải sạch sẽ, khô thoáng và tiêu độc định kỳ. Khi vắt sữa không được vắt tia sữa đầu xuống nền chuồng, tránh để vi trùng gây bệnh viêm vú có điều kiện phát triển. Bố trí hố phân cách xa chuồng nuôi và nơi vắt sữa. Nếu có điều kiện thì nên xây nơi vắt sữa riêng, không nên vắt ngay tại chuồng. 21 2.10.6 Cách ly và điều trị gia súc mắc bệnh viêm vú: Cách ly ngay gia súc bệnh để tránh lây lan. Điều trị phải đúng liều lượng, đúng phương pháp. Chú ý chế độ ăn uống phù hợp với bò viêm vú. Tiêu độc triệt để chuồng trại và phân rác nơi bò bệnh. Nếu bò bệnh kéo dài không chữa khỏi nên loại thải để tránh thiệt hại kinh tế. 2.10.7 Điều trị bệnh viêm vú Bò bị viêm vú phải được phát hiện sớm để điều trị kịp thời bệnh sẽ nhanh khỏi nếu điều trị trể có thể gây thiệt hạy nặng và mất khả năng sản xuất sữa gây thiệt hạy kinh tế cao. 2.10.8 Các phương pháp chẩn đoán viêm vú trên bò sữa Xác định viêm vú lâm sàng *Kiểm tra bằng cảm quan Sữa bình thường: Sữa có màu trắng đục, hơi vàng, không quá đặc cũng không quá loãng. Sữa không bình thường(sữa viêm): Sữa có màu hồng hay đỏ có lẫn máu, đóng cục, lợn cợn, có màu xanh của mủ. Xác định viêm vú tiềm ẩn (cận lâm sàng) *Alcohol test Vật liệu nghiêm cứu: cồn 750, ống nghiệm vô trùng. Phương pháp tiến hành: cho 3 ml cồn vào trong ống nghiệm sao đó cho tiếp 3 ml sữa vào trong ống nghiệm (tỉ lệ cồn và sữa là 1:1), lắc điều quan sát và đọc kết quả sau vài phút. -Nếu dung dịch cồn và sữa đồng nhất, không đóng vón lợn cợn thì phản ứng âm tính. -Nếu có mãng bám lơn cợn trên thành thành ống nghiệm thì phản ứng dương tính. *Máy phát hiện viêm vú điện tử hay máy đo điện trở sữa Nhấn công tắc khi không có sữa trong cốc đo, màn hình sẽ hiển thị số 1 0 , chứng tỏ rằng pin đã được kết nối tốt với dụng cụ và không có thử nghiệm. Cầm cốc đo đặt ngay dưới núm vú của thùy vú muốn kiểm tra, vắt sữa trực tiếp vào cốc đo đến ngang vạch quy định trong cốc. 22 Sau đó ấn công tắc và giữ trong 1-2 giây cho đến khi màn hình hiển thị 3 con số. Nếu sử dụng loại máy không có điều chỉnh nhiệt độ, kết quả phải được ghi nhận ngay sau khi vắt sữa đầy cốc đo. Sau khi có kết quả nên nhả công tắc ra, đổ bỏ mẫu sữa và rửa sạch, tiếp tục thử mẫu sữa khác. *Methylene Blue: Vật liệu nghiên cứu: Dung dịch Methylene 5%; ống nghiệm vô trùng. Phương pháp tiến hành: cho 10 ml sữa vào trong ống nghiệm tiếp đến cho 1 ml xanh Methylene 5% vào lắc điều và đọc kết quả sau mỗi khoảng 30 phút. Bảng 2: Thời gian mất màu của xanh Methylene và ƣớc lƣợng số vi khuẩn/ml sữa. Thời giam mất màu Số lượng vi Phẩm chất sữa Xếp loại Khuẩn/ml sữa 20- 30 phút >20x 106 Rất xấu IV 1giờ 4- 20x 106 Xấu III 3giờ 500.000-4x106 Trung bình II >3 giờ 0,05), khác nhau thì khác nhau có ý nghĩa thống kê (p> 0,05) Tỷ lệ viêm vú lâm sàng tổng số bò khảo sát là 285 con số bò bị viêm vú là 37 con chiếm tỷ lệ 12,98%. Trong đó tỷ lệ viêm vú lâm sàng của bò sữa nuôi ở trại tập chung là 10,49% và tỷ lệ viêm vú lâm sàng của bò sữa được nuôi ở nông hộ gia đình là 15,49%. Chung Anh Dũng và ctv (2005), số liệu điều tra trên 4280 bò sữa nuôi ở 8 41 tỉnh thành có chăn nuôi bò sữa trong 2 năm 2004 – 2005 cho thấy tỷ lệ bò bị viêm vú lâm sàng là 12,3%.Theo Trịnh Quang Phong và ctv (1999), bệnh viêm vú lâm sàng ở bò sữa biến động khá cao từ 10 – 22%. Nguyễn Ngọc Nhiên và ctv (1996 – 1999), cho rằng bệnh viêm vú lâm sàng biến động từ 24,8 – 31,43%. So sánh với kết quả nghiên cứu của Chung Anh Dũng và ctv (2005) là 12,3 % thì kết quả bệnh viêm vú của chúng tôi là 12,98% cao hơn sao với kết quả nghiên cứu của Chung Anh Dũng So sánh với kết quả nghiên cứu của Nguyễn Ngọc Nhiên và ctv (1996 – 1999), cho rằng bệnh viêm vú lâm sàng biến động từ 24,8 – 31,43%, thì kết quả bệnh viêm vú của chúng tôi là 12,98% thấp hơn nhiều so với kết quả của Nguyễn Ngọc Nhiên và ctv. So sánh với tỷ lệ viêm vú ở trại tập trung là (10,49%) và hộ gia đình là (15,49%), thì bệnh viêm vú lâm sàng ở hộ gia đình chiếm tỷ lệ bệnh cao hơn so với trại tập trung. Vì trại tập trung nuôi nhiều con và chủ trại rất chú trọng quan tâm chăm sóc và sát trùng chuồng trại thường xuyên xem trọng việc phòng và trị bệnh bò nên tỷ lệ bệnh viêm vú lâm sàng rất thấp so với nông hộ gia đình. So sánh trại tập trung và hộ gia đình khác nhau không có ý nghĩa thống kê (Pvalue=0,209) Bảng 11: Tỷ lệ viêm vú cận lâm sàng khảo sát bằng phƣơng pháp CMT ( ≥ 2+ ) Số bò thử CMT (con) Số vú khảo sát Địa điểm Số bò TL (%) thử CMT Dương tính Số vú Dương khảo sát tính Trại tập trung 128 74 57,81 512 184 35,94 Hộ gia đình 120 39 32,50 480 97 20,21 Tổng cộng 248 113 45,56 992 281 28,33 TL (%) Chúng tôi khảo sát tổng cộng 992 bầu vú của 248 con bò nghi bị viêm vú, kiểm tra CMT từng bầu vú riêng biệt, qua khảo sát nhận thấy có 113 con cho kết quả CMT dương tính, tỷ lệ (45,56%), có 281 bầu vú bị viêm, tỷ lệ 28,33%. Kết quả của chúng tôi thấp hơn kết quả khảo sát của Nguyễn Ngọc Thanh Hà (2004) là 42,16%, thấp hơn Nguyễn Minh Trí (2008) là 52,78%. Theo Nguyễn Minh Trí (2008), thực hiện tại trại chăn nuôi bò sữa Trung Tâm Giống Nông Nghiệp Thành Phố Cần Thơ trong đó tỷ lệ bò viêm vú tiềm ẩn (41,67%). Nhìn chung tỷ lệ viêm vú của chúng tôi 42 nghiên cứu thì bệnh rất thấp so với các nghiên cứu trước đó có thể là do các nguyên nhân sau: các công trình nghiên cứu của các tác giả trước là thời gian cũng đã lâu lúc đó có thể là kiến thức chăm nuôi bò sữa, thuốc điều trị và ý thức chăm sóc nuôi dưỡng của mọi người chưa cao nên số lượng bệnh cao hơn. So sánh giữa trại tập trung và hộ gia đình thì tỉ lệ viêm vú tiềm ẩn cận lâm sàng của trại tập trung là (35,94%) thì cao hơn so với hộ hộ gia đình là (20,21%) là do trại tập trung nuôi với số lượng lớn vắt sữa bằng máy nhanh tranh thủ vắt hết cho kịp với thời gian nên có một số con vắt không cạn hết sữa nên còn tồn đọng sữa vì vậy gây nên hiện tượng viêm vú cận lâm sàng nhiều.Trại tập trung và hộ gia đình đều vắt sữa bằng máy, hộ gia đình thì khi vắt máy xong rồi vắt cạn sữa bằng tay, trại tập trung có khi vắt cạn sữa bằng tay có khi không vắt cạn sữa. Tất cả các nguyên nhân trên góp phần tạo điều kiện thuận lợi cho các loại mầm bệnh xâm nhập, khi bò giảm đề kháng chúng sẽ tác động và gây bệnh. Kết quả: So sánh số bò thử CMT/con ở trại tập trung và hộ gia đình khác nhau có ý nghĩa thống kê (P < 0,05), (Pvalue= 0,000) Kết quả: So sánh Số vú khảo sát bằng CMT ở trại tập trung và hộ gia đình khác nhau có ý nghĩa thống kê (P < 0,05), (Pvalue= 0,000) 4.3 Kết quả phân lập vi khuẩn Bảng 12: Kết quả phân lập vi khuẩn Staphylococcus aureus, Streptococcus spp, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa trên các mẫu sữa Kết quả phân lập vi khuẩn Địa điểm Số lƣợng mẫu Loại mẫu Staphylococcus Streptococcus aureus spp TL TL SL SL (%) Pseudomonas aeruginosa E. coli TL SL (%) TL SL (%) (%) Hộ gia đình 2 Sữa 2 100 * * * * * * Trại tập trung 7 Sữa 7 100 * * 6 85,71 1 14,29 9 100 * * 6 66,67 1 11,11 Tổng 9 *: Chưa phát hiện. Kết quả ở bảng 17 cho thấy có 3 loại vi khuẩn hiện diện trong các mẫu sữa khảo sát, trong đó vi khuẩn Staphylococcus chiếm tỷ lệ cao nhất (100%), tiếp đến là E.coli (66,67%), thấp nhất là Pseudomonas aeruginosa (11,11%), chưa phát hiện vi khuẩn 43 Streptococcus spp. Các vi khuẩn phổ biến trong sữa là E. coli, Staphylococcus, Pseudomonas aeruginosa. Tỷ lệ nhiễm Staphylococcus aureus mà chúng tôi phân lập được tương đối cao hơn nhiều so với kết quả của Nguyễn Minh Trí (2008) là 47,06%, cao hơn của Huỳnh Thị Mỹ Hạnh (2010) là 71,42%. Nhưng tỉ lệ nhiễm E. coli thì cao hơn của Nguyễn Minh Trí (2008) lần lượt là 21,57% và Huỳnh Thị Mỹ Hạnh (2010) lần lượt là 59,18%, tỉ lệ nhiễm Spseudomonas aeruginosa là 11,11% cao hơn so với Nguyễn Thị Hồng Châu (2004) là 2,25%. Còn vi khuẩn Streptococcus spp chúng tôi phân lập không có vi khuẩn này Điều này có thể là do điều kiện vệ sinh chuồng trại chưa được đảm bảo, nền chuồng thường xuyên bị ẩm thấp là điều kiện để vi khuẩn phát triển. Mặt khác, công tác định kì kiểm tra phát hiện bò bị viêm vú chưa được quan tâm đúng mức, chỉ khi bò bị viêm vú nặng và biểu hiện rõ mới được điều trị. Bên cạnh đó việc điều trị cũng chưa đạt hiệu quả cao, việc điều trị chỉ nhằm mục đích làm bò hết biểu hiện viêm vú để tiếp tục khai thác sữa. 4.4 Kết quả kháng sinh đồ Bảng 13: Kết quả kháng sinh đồ đối với vi khuẩn Staphylococcus aureus (n=11) Tỷ lệ Loại kháng sinh Tỷ lệ (%) Trung bình Nhạy Tỷ lệ Kháng (%) (%) Ceftiofur 7 63,64 1 9,09 3 27,27 Cefquinome 11 100 0 00,00 0 00,00 Gentamycin 6 54,55 1 9,09 4 36,36 Marbofloxacin 7 63,64 1 9,09 3 27,27 Doxycycline 8 72,73 3 27,27 0 00,00 Florfenicol 11 100 0 00,00 0 00,00 Fosfomycin 9 81,82 2 18,18 0 00,00 Enrofloxacin 7 63,64 1 9,09 3 27,27 Norfloxacin 7 63,64 1 9,09 3 27,27 Danofloxacin 7 63,64 1 9,09 3 27,27 Phân lập nuôi cấy 9 mẫu, n là khuẩn lạc điển hình. Từ kết quả bảng 18 chúng tôi nhận thấy vi khuẩn Staphylococcus aureus nhạy với các kháng sinh Florfenicol (100%), Cefquinome (100), Doxycycline (72,73%) với Ceftiofur, Marbofloxacin, Fosfomycin Enrofloxacin, Norfloxacin, Danofloxacin (63,64%), nhạy thấp với Gentamycin (54,55%). 44 (81,82%), Kết quả của chúng tôi tương đối thấp hơn với kết quả của Nguyễn Thị Thu Thảo (2008) về tỉ lệ nhạy với doxycycline của vi khuẩn Staphylococcus aureus (88%) nhưng cao hơn kết quả của Huỳnh Thị Mỹ Hạnh (2010) là (58%), thấp hơn của Nguyễn Minh Tiến (2012) là (81,82%). Nhưng kết quả của Florfenicol của cúng tôi (100%) là cao hơn tất cả Nguyễn Minh Tiến (12012) là (63,64%), kháng sinh Fosfomycin, Norfloxacin kết quả nhại cao hơn Huỳnh Thị Mỹ Hạnh (2010) lần lược là (75%), (58,33%), về Enrofloxacin kết quả nhạy đều thấp hơn kết quả của Huỳnh Thị Mỹ Hạnh (2010) lần lượt là (66,67% ). Bảng 14: Kết quả kháng sinh đồ đối với vi khuẩn Pseudomonas aeruginosa (n=3) Tỷ lệ Loại kháng sinh Tỷ lệ (%) Trung bình Nhạy Tỷ lệ Kháng (%) (%) Ceftiofur 0 00,00 1 33,33 2 66,67 Cefquinome 3 100 0 0 0 0 Gentamycin 1 33,33 2 66,67 0 00,00 Marbofloxacin 3 100 0 00,00 0 0,00 Doxycycline 3 100 0 00,00 0 00,00 Florfenicol 0 00,00 2 66,67 1 33,33 Fosfomycin 0 00,00 0 00,00 3 100 Enrofloxacin 3 100 0 00,00 0 00,00 Norfloxacin 3 100 0 00,00 0 00,00 Danofloxacin 3 100 0 00,00 0 00,00 n = khuẩn lạc điển hình Qua bảng 19 chúng tôi nhận thấy vi khuẩn Pseudomonas aeruginosa nhạy với Cefquinome, Marbofloxacin, Doxycycline, Enrofloxacin, Norfloxacin, Danofloxacin với tỷ lệ là 100%. Kháng với Fosfomycin tỷ lệ là 100%, kế đế là Ceftiofur là 66,67%, các loại kháng sinh kháng với vi khuẩn là Ceftiofur, Florfenicol, Fosfomycin và Gentamycin. Kết quả Doxycyclin và Norfloxacin tỷ lệ nhạy 100% cao hơn nhiều so với kết quả của Nguyễn Thị Hồng Châu (2004) là 50%. Kháng sinh Gentamycin là nhạy chỉ có 33% thấp hơn so với Nguyễn Thị Hồng Châu (2004) là 100%.Qua kết quả kháng sinh đồ thì chúng tôi có thể khuyến cáo mọi người sử kháng sinh: Cefquinome, Marbofloxacin, Doxycyclin, Enrofloxacin, Norfloxacin, Danofloxacin trong quá trình đều trị để diệt vi khuẩn Pseudomonas aeruginosa. 45 Bảng 15: Kết quả kháng sinh đồ đối với vi khuẩn Escherichia coli (n=8) Tỷ lệ Loại kháng sinh Tỷ lệ (%) Trung bình Nhạy Tỷ lệ Kháng (%) (%) Ceftiofur 8 100 0 00,00 0 00,00 Cefquinome 8 100 0 00,00 0 00,00 Gentamycin 4 50 4 50 0 00,00 Marbofloxacin 8 100 0 00,00 0 00,00 Doxycycline 8 100 0 00,00 0 00,00 Florfenicol 8 100 0 00,00 0 00,00 Fosfomycin 8 100 0 00,00 0 00,00 Enrofloxacin 8 100 0 00,00 0 00,00 Norfloxacin 8 100 0 00,00 0 00,00 Danofloxacin 8 100 0 00,00 0 00,00 n= khuẩn lạc điển hình Kết quả bảng 20 cho thấy vi khuẩn E. coli nhạy hầu hết với tất cả kháng sinh làm kháng sinh đồ Ceftiofur, Cefquinome, Marbofloxacin, Doxycycline, Florfenicol, Fosfomycin, Norfloxacin, Enrofloxacin, Danofloxacin là (100%), chỉ có Gentamycin nhạy thấp nhất (50%). Kết quả này cao hơn với kết quả của Nguyễn Thị Thu Thảo (2008) vi khuẩn E. coli nhạy với Norfloxacin (84%) và cao hơn kết quả của Huỳnh Thị Mỹ Hạnh (2010) về tỷ lệ nhạy của vi khuẩn E. coli với Doxycycline, Enrofloxacin, Norfloxacin lần lượt là (44,44%; 66,67% và 77,78%). Vi khuẩn E.coli đã kháng với kháng sinh Gentamycin nên kết quả nhạy chỉ có 50% do đó không nên sử dụng Gentamycin trong quá trình điều trị bệnh về E.coli. Có thể sử dụng các loại kháng sinh nhạy 100% trên để điều trị bệnh E.coli sẽ đạ được kết quả cao. 46 4.5 Kết quả thử nghiệm thuốc Bảng 16: Kết quả thử nghiệm thuốc đối với bệnh viêm vú lâm sàng Số lƣợng (con) Hết bệnh Tỷ lệ (con) (%) Ceptifi for LC 11 11 100a CEQUIN for LC 10 10 100a MAMIFORT 11 7 63,64ab BIO - TETRAMAS 3 1 33,33b SPECTRAMAST 4 4 100ab Tổng cộng 39 33 84,62 Thuốc thử nghiệm a, b: Các giá trị cùng một cột mang các ký tự giống nhau thì khác nhau không có ý nghĩa thống kê (P> 0,05), khác nhau thì khác nhau có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) Qua kết quả bảng 21, tỷ lệ điều trị khỏi bệnh của 3 sản phẩm Ceptifi for LC, CEQUIN for LC, SPECTRAMAST là rất tốt, tỷ lệ khỏi bệnh viêm vú đến 100%. Còn 2 sản phẩm MAMIFORT tỷ lệ khỏi bệnh là 63,64%. BiO-Tetramas tỷ lệ khỏi bệnh rất thấp 33,33%, do quá trình bố trí thí nghiệm thuốc này ít nên kết quả cũng không cao. Tổng kết quả điều trị của 5 loại thuốc trên thì tỷ lệ khỏi 84,62%. Thuốc Ceptifi for LC thành phần Ceftiofur là loại kháng sinh thế hệ mới được dùng trong thú y thuộc nhóm Cephalosporin thế hệ thứ III và thuốc CEQUIN for LC có thành phần là Cefquinome là kháng sinh thế hệ mới thế hệ thứ IV của nhóm Cephalosporin là loại kháng sinh mới nên điều trị rất hiệu quả trong bệnh viêm vú ở bò sữa. Thuốc Ceptifi for LC, CEQUIN for LC và SPECTRAMAST sử dụng điều trị có hiệu quả cao nên có thể khuyến cáo mọi người sử dụng thuốc rộng rãi. Trong quá trình điều trị cũng phụ thuộc nhiều yếu tố: vừa kết hợp vừa điều trị vừa tăng sức đề kháng, gia súc được chăm sóc nuôi dưỡng chu đáo trong quá trình điều trị nên hiệu quả điều trị tương đối cao. 47 Hình 21: Vú bò bình thƣờng Hình 22: Vú bò bị viêm teo 1 thùy vú Hình 23 : Bơm thuốc CEQUIN for LC Hình 24: Bơm thuốc Ceptifi for LC 48 Hình 25: Thuốc bơm vú SPECTRAMAST Hình 26: Thuốc bơm vú BIO-TETRAMAS www.tristatevetsupply.com/store/livestockhealth/antibiotics/Spectramast-LC WWW. Biopharmachemie.com/vi/product /biotetre-massup%C2AEsup-66/ Hình 27: Thuốc bơm vú MAMIFORT www.agrosfera55.ru/catalog/kategoriya-9/mamifort.html 49 CHƢƠNG 5 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Tỷ lệ viêm vú lâm sàng 12,98%, tỷ lệ viêm vú cận lâm sàng 45,56% Tỷ lệ nhiễm vi khuẩn Staphylococcus aureus trong sữa là 100%, E. coli là 66,67%, Pseudomonas aeruginosa 11,11%, không tìm được Streptococcus spp. Các loại kháng sinh nhạy với vi khuẩn Staphylococcus aureus là Cefquinome 100%, Florfenicol 100%, Fosfomycin 81,82% kháng với kháng sinh Gentamycin 36,63%. Kháng sinh nhạy với vi khuẩn Pseudomonas aeruginosa là Cefquinome, Marbofloxacin, Doxycycline, Enrofloxacin, Norfloxacin, Danofloxacin 100%, kháng với Ceftiofur, Gentamycin, Florfenicol, Fosfomycin. Kháng sinh nhạy với vi khuẩn E.coli là Ceftiofur, Cefquinome, Marbofloxacin, Doxycycline, Florfenicol, Fosfomycin, Enrofloxacin, Norfloxacin, Danofloxacin 100%, kháng với Gentamycin 50%. Nhìn chung qua thời gian thử nghiệm điều trị chúng tôi nhận thấy tỷ lệ điều trị khỏi bệnh của sản phẩm Ceptifi for LC, CEQUIN Fof LC, SPECTRAMAST là khá cao, tỉ lệ khỏi đối với bệnh viêm vú là 100%. 5.2 Đề nghị Thường xuyên kiểm tra sữa bằng phương pháp CMT hoặc thử cồn, để phát hiện sớm và điều trị kịp thời những cá thể viêm vú. Nếu phát hiện có bò bệnh thì nên sớm cách ly bò bệnh ra để điều trị càng sớm càng tốt Thực hiện nghiêm ngặt công tác vệ sinh vắt sữa, vệ sinh chuồng trại, xử lí phân và chất thải. 50 TÀI LIỆU THAM KHẢO 1. Bùi Thị Tho (2003), Thuốc kháng sinh và nguyên tắc sử dụng trong chăn nuôi, NXB Hà Nội, pp 144-145. 2. Đào Trọng Đạt, Phan Thanh Phượng, Lê Ngọc Mỹ, Huỳnh Văn Kháng (2001), Bệnh ở heo nái và heo con, NXB Nông Nghiệp, pp 52-82. 3. Đỗ Thị Hồng Nga (2003), Nuôi cấy phân lập vi khuẩn Staphylococcus aureus gây bệnh viêm vú tiềm ẩn ở bò đang cho sữa huyện Ô Môn tỉnh Cần Thơ, Luận văn kỹ sư chăn nuôi Thú y, Trường Đại học Cần Thơ.Tô Minh Châu, Trần Thị Bích Liên (2001), Vi khuẩn và nấm gây bệnh trong thú y, Trường Đại học Nông Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh. 4. Đỗ Ngọc Thúy, Darren Trott, Alan Fort, Kirsty Townsend, Cừu Hữu Phú, Nguyễn Ngọc Nhiên, Âu Xuân Tuấn, Nguyễn Xuân Huyên, Văn Thị Hường và Vũ Ngọc Quý (2002), Tính kháng kháng sinh của các chủng Escherichia coli phân lập từ lợn con tiêu chảy ở một số tỉnh miền Bắc Việt Nam, Khoa học Kỹ Thuật Thú y 10 (2): 21-27. 5. Đỗ kim Tuyên (2009), Tình hình phát triển chăn nuôi bò sữa Việt Nam 2001-2009 và dự báo 2010-2020, Cục Chăn Nuôi. Lê Huy Chính (2007), Vi sinh vật Thú y, NXB Y Học, pp 715. 6. Hoàng Kim Tuyến, Vũ Kim Cương, Đặng Mỹ Hương (2005), Tình hình kháng thuốc của vi khuẩn gây bệnh phân lập tại bệnh viện thống nhất 2002-2005, Hội nghị khoa học 2005 7. Huỳnh Kim Diệu (2010), Thú y cơ sở dược lý trong điều trị, NXB Nông Nghiệp. 8. Huỳnh Thị Mỹ Hạnh (2010), Tình hình viêm vú trên đàn bò sữa tại Thành Phố Cần Thơ và thử nghiệm hiệu quả điều trị của thuốc forloxin, amogen, penstrep, Luận văn tốt nghiệp đại học Thư viện khoa Nông Nghiệp và Sinh Học Ứng Dụng, trường Đại Học Cần Thơ. 9. Huỳnh Văn Kháng (2001), Bệnh ngoại khoa gia súc, NXB Nông Nghiệp. 10. Lăng Ngọc Huỳnh (2007), Giáo trình cơ thể gia súc A, Trường Đại học Cần Thơ. 11. Lý Thị Liên Khai (1999), Kiểm soát vệ sinh thú y các sản phẩm động vật-an toàn thực phẩm, pp 169-173. 12. Nguyễn Thanh Bảo (2006), Vi sinh vật Thú y, NXB Nông Nghiệp, pp 101-104. 13. Nguyễn Hoàng Can (2004), Nuôi cấy, phân lập vi khuẩn Escherichia coli gây viêm vú tiềm ẩn trên đàn bò sữa tỉnh Cần Thơ, Luận văn kỹ sư chăn nuôi Thú Y, Trường Đại học cần Thơ. 14. Nguyễn Ngọc Điền (1999), Điều tra tình trạng viêm vú tiềm ẩn trên đàn bò sữa nuôi tại quận 12 Thành Phố Hồ Chí Minh, Đề xuất phương án chẩn đoán và phòng trị, Luận văn thạc sĩ khoa học Nông Nghiệp, Trường Đại Học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh. 15. Nguyễn Ngọc Thanh Hà (2004), Điều Tra Tình Hình Chăn Nuôi, Nuôi Cấy, Phân Lập Và Thử Kháng Sinh Đồ Một Số Loài Vi Khuẩn Gây Viêm Vú Tiềm Ẩn Trên Bò Sữa Thành Phố Cần Thơ, Luận Án Thạc Sĩ Khoa Học Nông Nghiệp, Trường Đại Học Cần Thơ. 51 16. Nguyễn Đức Hiền (1999), Sổ tay hướng dẫn kỹ thuật thú y và chăn nuôi trâu, bò dê, cừu, Chi cục thú y Cần Thơ, pp. 40. 17. Nguyễn Thị Hồng (2007), Phòng và điều trị bệnh viêm vú trên đàn bò sữa, http://www.nongthon.net/apm/modules.php 18. Nguyễn Thị Kim Loan (2000), Khảo sát khả năng sản xuất sữa và tình hình bệnh viêm vú trên đàn bò sữa lai 1/2, 3/4, 7/8 Holstein Friesian ở khu vực An Phước thuộc Huyện Long Thành Tỉnh Đồng Nai, Luận văn Bác sĩ Thú Y, Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh. 29. Nguyễn Đức Lục (2003), Khảo sát tình hình bệnh viêm vú trên đàn bò sữa của một số hộ chăn nuôi thuộc xí nghiệp bò sữa An Phước, Luận văn Thạc Sĩ Khoa Học Nông Nghiệp, Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh. 20. Nguyễn Ngọc Nhiên, Cù Hữu Phú, Phạm Bảo Ngọc (1999), Kết Quả Phân Lập Vi Khuẩn Từ Bò Sữa Bị Viêm Vú, Thử Kháng Sinh Đồ Và Điều Trị Thử Nghiệm, Tạp Chí Khoa Học Kỹ Thuật Thú Y, tập VI (số 1), trang 43- 47. 21. Nguyễn Hữu Ninh, Bạch Đăng Phong (1994), Bệnh Sinh Sản Gia Súc, Nhà Xuất Bản Nông Nghiệp Hà Nội. 22. Nguyễn Văn Phát (1999), Điều Tra Bệnh Viêm Vú Trên Đàn Bò Sữa Khu Vực TP. HCM, Luận Án Thạc Sĩ Khoa Học Nông Nghiệp, Trường Đại Học Nông Lâm TP. Hồ Chí Minh. 23. Nguyễn Vĩnh Phước (1977), Vi Sinh Vật Thú Y, Tập II, Nhà Xuất Bản Đại Học Và Trung Học Chuyên Nghiệp. 24. Nguyễn Như Thanh, Nguyễn Bá Hiền, Trần Thị Lan Hương (1997), Vi sinh vật Thú y, Nhà xuất bản Nông Nghiệp. 25. Nguyễn Văn Thành (1998), Phòng trị bệnh viêm vú trên đàn bò sữa, Trung tâm ứng dụng khoa học kỹ thuật, Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh. 26. Nguyễn Văn Thành (2005), Bài Giảng Sản Khoa, Đại Học Nông Lâm Thành Phố Hồ Chí Minh. 27. Nguyễn Thị Thu Thảo (2008), Nuôi cấy, phân lập và kiểm tra tính nhạy cảm đối với kháng sinh của vi khuẩn Escherichia coli, Staphylococcus aureus trong sữa và môi trường vắt sữa ở một số hộ chăn nuôi bò sữa thuộc Thành Phố Cần Thơ, Luận văn tốt nghiệp đại học Thư viện khoa Nông Nghiệp và Sinh Học Ứng Dụng, trường Đại Học Cần Thơ. 28. Nguyễn Minh Trí (2008), Kiểm soát bệnh viêm vú trên đàn bò sữa nuôi tập trung tại Trung Tâm Giống Nông Nghiệp Thành Phố Cần Thơ, Luận án thạc sĩ khoa học Nông Nghiệp, Trường Đại Học Cần Thơ. 29. Nguyễn Thị Hải Yến (2008), Nhiễm trùng bệnh viện, Lý thuyết vi sinh học, Đại học y Dược Cần thơ, pp 64-75. 30. Phạm Sỹ Lăng và Trương Văn Dung (2002), Một số bệnh mới do vi khuẩn và Mycoplasma ở Gia súc và Gia cầm nhập nội và biện pháp phòng trị, NXB Nông Nghiệp, pp 12-25. 52 31. Phạm Sỹ Lăng (2006), Sổ Tay Phòng Trị Bệnh Cho Bò Sữa, Nhà Xuất Bản Nông Nghiệp, Hà Nội. 32. Phạm Hồng Phương (2005), Xác định mức độ nhiễm và hiệu quả của một số biện pháp phòng trị bệnh viêm vú trên bò sữa tại Nông Trường Sông Hậu Thành Phố Cần Thơ, Luận văn tốt nghiệp Kỹ Sư Chăn nuôi Thú Y, Trường Đại học Cần Thơ. 33. Phạm Hùng Vân (2002), Cẩm nang các kỹ thuật xét nghiệm vi sinh lâm sàng dùng cho các phòng thí nghiệm bệnh viện, Trường Đại học Y Dược TP Hồ Chí Minh, Bộ Y tế. 34. Phùng Quốc Quảng (2001), Nuôi bò sữa năng xuất cao-hiệu quả lớn, NXB Nông NghiệpHà Nội. 35. Trần Tiến Dũng, Dương Đình Long, Nguyễn Văn Thanh (2002), Sinh sản gia súc. NXB Nông Nghiệp, pp 56-70, 132-268, 285-291. 36. Trần Thị Phận (2004), Bài giảng vi sinh vật Thú y, Trường Đại học Cần Thơ, pp 5-7, 1821. 37. Trần Linh Thước (2005), Phương pháp phân tích vi sinh vật trong nước - thực phẩm và mĩ phẩm, NXB Giáo Dục. 38. Võ Thị Châu Hà (2002), Khảo sát vi khuẩn trên mẫu sữa bò viêm vú tiềm ẩn, Luận văn Thạc Sĩ Thú y, Trường Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh. 39. Vương Ngọc Long (2007), Tài liệu tập huấn kiểm soát bệnh viêm vú trong chăn nuôi bò sữa, Công ty cổ phần sữa Vinamilk phòng phát triển vùng nguyên liệu, pp 9, 14-20, 26-27, http://dairyvietnam.org.vn/vi/images/File/Pub/KIEMSOATBENHVIEMVUhc.pdf. Website http://www.bigmedicine.ca/Streptococcus.JPG http://www.biology.clc.uc.edu/.../Gram_Stain/Gram_Stain.htm http://www.dairyvietnam.com/data/category/gbn1310815758.jpg http://en.wikipedia.org/wiki/Cefquinome http://www.life.umd.edu/cbmg/faculty/asmith/Staphylococcus.jpg http://www.maxine-log.blogspot.com/2007_08_01_archive.html http://www.nongthon.net/apm, 2007 http://www.pseudomonas.com/images/paeruginosa.jpg http://www.sonongnghiep.hochiminhcity.gov.vn http://thuy.ykhoa.net; Faibrother et al.,1992 http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/2/2d/Pseudomonas_aeruginosa _Gram.jpg http://www.vcn.vnn.vn/Pictures/Upload_VCN/quytrinh/QT_2008/tc__so6.jpg http://www.vemedim.vn/chitietsanpham.php 53 PHỤ LỤC PHIẾU ĐIỀU TRA GIA SÚC THỬ NGHIỆM Tên chủ gia súc: ................................................................................................................ Địa chỉ : Ấp (Khu Vực):………………………….......Xã (Phường): .................................. Huyện (Quận):……………………………………Điện thoại: ........................................... Loài gia súc…………….....Trọng lượng (kg):…………………Số lượng (con): ................ Giới tính: Đực (con)……………………Cái (con)………………… Hình thức chăn nuôi:……………………….…...Phương thức nuôi: .................................. Chuồng trại:  Kiên cố,  Bán kiên cố; Điều kiện vệ sinh: .............................................. Thức ăn: ............................................................................................................................ Nguồn nước sử dụng: ........................................................................................................ Vaccine đã tiêm phòng: ..................................................................................................... Tình trạng sức khỏe: Thân nhiệt:…………………….. Hô hấp: ............................................................................................................................. Tiêu hóa: ........................................................................................................................... Sinh dục: ........................................................................................................................... Triệu chứng khác:.............................................................................................................. Bệnh xảy ra gần đây: ......................................................................................................... Thuốc điều trị:…………………………………………………..Liều lượng (ml/kgP) ........ ………………………………………………………………….Liều lượng (ml/kgP) ......... ………………………………………………………………….Liều lượng (ml/kgP) ......... ………………………………………………………………….Liều lượng (ml/kgP) ......... Ngày bắt đầu điều trị:…………………………………..Ngày kết thúc:.............................. Thuốc điều trị trước đó:………………………………………..Liều lượng (ml/kgP) .......... ………………………………………………………………….Liều lượng (ml/kgP) ......... ………………………………………………………………….Liều lượng (ml/kgP) ......... ………………………………………………………………….Liều lượng (ml/kgP) ......... Ngày bắt đầu điều trị:…………………………………..Ngày đổi thuốc: ........................... Kết quả sau điều trị: Khỏi bệnh (con) ................................................................................ Không khỏi (con) ............................................................................... Mẫu bệnh phẩm đã lấy:………………………………..Ngày lấy mẫu: ............................... Vi khuẩn phân lập được 54 Thuốc điều trị  Ceptifi for LC Thành phần: mỗi ống bơm 10ml chứa Ceftiofur (hydrochloride)............... 125mg Microcrystalline Wax .................... 700mg Labrafil.......................................... 500mg Công dụng: - Đặc trị viêm vú ở bò đang cho sữa do các vi khuẩn Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactia và E.coli gây ra. Cách dùng: - Bơm vào núm vú bò. Trước khi bơm phải vắt cạn sữa trong bầu vú, làm sạch và sát trùng núm vú Liều dùng: - 1 ống 10ml/ thùy vú/ ngày trong 1 – 5 ngày. Bệnh nặng có thể điều trị kéo dài 8 ngày. Thời gian ngưng sử dụng: - Thịt: 2 ngày, sữa: 72 giờ  CEQUIN for LC Thành phần: mỗi ống bơm chứa Cefquinome (sulfate) ...................... 75mg Công dụng: - Đặc trị viêm vú ở bò đang cho sữa do các vi khuẩn nhạy cảm với cefquinome gây ra như: Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Escherichia coli và các vi khuẩn Enterobacteria khác. Cách dùng: - Mỗi ống thuốc bơm cho một thùy vú, bơm 3 lần liên tiếp mỗi lần cách nhau 12 giờ Thời gian ngưng thuốc: - Thịt: 2 ngày, sữa 96 giờ (8 lần vắt)  MAMIFORT ĐẶC TRỊ VIÊM VÚ - TÁC ĐỘNG 3 TRONG 1 HIỆU QUẢ CAO – LỢI NHUẬN CAO – KHAI THÁC SỮA TỐI ĐA 55 Thành phần: Mỗi týp 10ml gồm có: Cloxacillin (sodium)…………………..200 mg Ampicillin (sodium)…………………….75 mg Đặc tính: - Ampicillin có hoạt phổ rộng trên cả vi khuẩn Gram dương và Gram âm gây viêm vú như E.coli, Haemophilus, Salmonella, Shigella, Proteus, Neisseria, Bordetella pertussis. - Cloxacillin có ái lực mạnh với các vi khuẩn Gram dương như Staphylococcus aureus (đã kháng với penicillin), với Enterococcus), Corynebacterium Streptococcus spp. pyogenes, Clostridium (cả perfringens, Cl.Pseudotuberculosis, Listeria monocytogenes, Bacillus anthracis. Tác động 3 trong 1: - Sự phối hợp giữa Ampicillin và Cloxacillin có tác động hiệp lực chống lại các vi khuẩn gây viêm vú. - Khuếch tán khắp các nơi trong mô tuyến vú. - Tá dược đặc biệt trong công thức của MAMMIFORT giúp luôn duy trì cao sự khuếch tán các kháng sinh vào các mô bị viêm nhiễm. Chỉ định: Đặc trị viêm vú cho trâu, bò, dê, cừu trong thời gian đang khai thác sữa. Liều dùng – cách dùng: Vắt hết sữa ra ngoài và lau sạch bầu vú bị viêm với dung dịch khử trùng, sau đó bơm trực tiếp vào ống dẫn sữa với liều như sau: Trâu bò: 1 ống Mamifort cho mỗi bầu vú bị viêm. Dùng liên tục 3 lần (tối đa 5 lần) cách nhau 12 giờ. Dê, cừu: 1/2 ống Mamifort cho mỗi bầu vú bị viêm. Dùng liên tục 3 lần cách nhau 12 giờ. Sau khi bơm Mamifort vào, nên xoa nhẹ bầu vú để thuốc được hấp thu tốt hơn. Thời gian bài thải: Thịt: 7 ngày. Sữa: 3 ngày. Bảo quản: 56 Nơi mát, tránh ánh nắng trực tiếp. Qui cách: Syringe 10ml. Xô 48 syringe. SĐK: SYVAS–1 Đọc kỹ hướng dẫn trước khi sử dụng.  BiO-TETRAMAS: THUỐC MỠ – ĐẶC TRỊ VIÊM VÚ Thành phần: Oxytetracycline……………….. 5 g Prednisolone………………..100 mg Soybean Oil vừa đủ…………100 ml Công dụng: Đặc trị viêm vú ở thể cấp tính và thể tiềm ẩn trên bò sữa, trâu bò giống hoặc phòng ngừa viêm vú khi cạn sữa. Liều lượng và cách dùng: Tra đầu kim vào núm vú, bơm 10 ml thuốc vào mỗi bầu vú, bít núm vú rồi dùng tay thoa đều bầu vú từ dưới lên. Mỗi ngày bơm thuốc 2 lần ngay sau khi vắt sữa. Điều trị viêm vú : Dùng liên tục 3-4 ngày. Phòng ngừa viêm vú : Dùng trong 1-2 ngày lúc cạn sữa. Lưu ý:"Không dùng quá liều quy định". (Màu đỏ) Không sử dụng sữa trong vòng 3 ngày sau khi dùng thuốc. Bảo quản:Nơi khô thoáng, nhiệt độ không quá 30oC.  SPECTRAMAST: kem Ceptiofur hydrochloride vô trùng, bơm vú cho bò đang tiết sữa Thành phần: mỗi xy lanh nhựa 10 ml chứa: Cepftiofur ( ở dạng muối hydrochloride )………….125 mg Microcrystalline wax………………………………..700 mg Labrafil M 19944 CS……………………………….500 mg Cottonseed Oil………………………………………vừa đủ Chỉ định, liều lượng và cách dung Chỉ định: kem vô trùng SPECTRAMAST R LC (Ceptiofur hydrochloride) được chỉ định điều trị viêm vú lâm sàng trên bò cái ở giai đoạn tiết sữa có kết hợp với 57 Staphylococcus aureus, Streptococcus dyegalactiae, và Escherichia Coli. Bò cái có triệu chứng lâm sàng toàn thân gây ra bởi viêm vú, cần phải điều trị bằng phương pháp thích hợp khác của bác sĩ thú y. Liều lượng: bơm một ống bơm cho mỗi ¼ bầu vú bị viêm nhiễm. Lặp lại điều trị sau 24 giờ. Trong trường hợp điều trị kéo dài, cứ bơm thuốc mỗi ngày lặp lại 8 ngày liên tục. Hướng dẫn sử dụng: rửa thật sạch núm vú với nước ấm có dung dịch thuốc sát trùng dùng cho bò sữa. Lau khô núm vú,vắt cạn sữa của phần núm vú đó. Dùng khăn cồn được cung cấp, lau sạch phần đầu vú viêm, dùng khăn riêng cho mỗi đầu vú. Chọn cách đưa đầu ống bơm vào toàn thân hoặc một phần vào ống vú; bơm toàn bộ thuốc vào, xoa bóp phần vú đó để thuốc phân bố đều trong bầu sữa. Tái nhiễm: Sau khi điều trị thành công, tái nhiễm vẫn có thể xảy ra mặc dù việc quản lý đàn, vệ sinh và các biện pháp cơ khí an toàn được thực hiện. Cần theo dõi kỹ các bò cái viêm vú nhằm phát hiện tái nhiễm và có thể lây sang các con khác. Chống chỉ định: không sử dụng Spectramast LC cho những thú trước đó đã bị quá mẫn với thuốc. Thận trọng khi sử dụng thuốc: -Không dùng quá liều quy định -Không để thuốc tiếp xúc với da, mắt, miệng và quần áo. -Những người dị ứng với Penicillin 58 Bảng 1: Bảng đƣờng kính vòng vô khuẩn chuẩn của một số kháng sinh đối với vi khuẩn Staphylococcus aureus và Streptococcus spp (NCCLS, 2004; CLSI, 2012) Kháng sinh Kí hiệu Hàm lƣợng kháng sinh/đĩa (μg) Đƣờng kính vòng vô khuẩn (mm) Kháng (≤) Trung bình Nhạy (≥) Ceftiofur Xnl 30 17 18-20 21 Cefquinome C10 10 15 16-21 22 Gentamycin Ge 10 12 13-14 15 Marbofloxacin Mar 5 14 15-19 20 Doxycycline Do 30 12 13-15 16 Florfenicol Ffc 30 14 15-18 19 Fosfomycin Fos 50 12 13-15 16 Enrofloxacin Enr 5 16 17-22 23 Norfloxacin Nr 10 12 13-16 17 Danofloxacin Dn 30 12 13-15 16 Bảng 2: Đƣờng kính vòng vô khuẩn chuẩn của một số loại kháng sinh đối với vi khuẩn E. coli (NCCLS, 2004; CLSI, 2012) Kháng sinh Kí hiệu Hàm lƣợng kháng sinh/đĩa (μg) Đƣờng kính vòng vô khuẩn (mm) Kháng (≤) Trung bình Nhạy (≥) Ceftiofur Xnl 30 17 18-20 21 Cefquinome C10 10 15 16-21 22 Gentamycin Ge 10 12 13-14 15 Marbofloxacin Mar 5 14 15-19 20 Doxycycline Do 30 10 11-13 14 Florfenicol Ffc 30 14 15-18 19 Fosfomycin Fos 50 12 13-15 16 Enrofloxacin Enr 5 16 17-22 23 Norfloxacin Nr 10 12 13-16 17 Danofloxacin Dn 30 10 11-13 14 59 Bảng 3. Tỷ lệ bò bị viêm vú lâm sàng Địa điểm Tổng số bò sữa (con) Số bò bị viêm (con) Tỉ lệ (%) 143 15 10,49a 142 22 15,49a 285 37 12,98 Trại tập trung Hộ gia đình Tổng a, b: Các giá trị cùng một cột mang các ký tự giống nhau thì khác nhau không có ý nghĩa thống kê (P> 0,05), khác nhau thì khác nhau có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) Chi-Square Test: Trại tập trung, Hộ gia đình Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts 1 Trại tập chung 15 18.56 0.685 Hộ gia đình Total 22 37 18.44 0.689 2 128 124.44 0.102 120 123.56 0.103 248 Total 143 142 285 Chi-Sq = 1.579, DF = 1, P-Value = 0.209 Kết quả: So sánh tỷ lệ bò bị viêm vú lâm sàng của trại tập trung và hộ gia đình khác nhau không có ý nghĩa thống kê (P > 0,05) 60 Bảng 4. Tỉ lệ viêm vú khảo sát bằng phƣơng pháp CMT ( ≥ 2+ ) Số bò thử CMT (con) Số vú khảo sát Địa điểm Số bò TL (%) thử CMT Dương tính Số vú Dương khảo sát tính Trại tập trung 128 74 57,81 512 184 35,94 Hộ gia đình 120 39 32,50 480 97 20,21 Tổng cộng 248 113 45,56 992 281 28,33 TL (%) Chi-Square Test: Dương tính, Âm tính Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Dương tính 74 58.32 4.214 Âm tính 54 69.68 3.527 Total 128 2 39 54.68 4.495 81 65.32 3.763 120 Total 113 135 248 1 Chi-Sq = 15.999, DF = 1, P-Value = 0.000 Kết quả: So sánh số bò thử CMT/con ở trại tập trung và hộ gia đình khác nhau có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) Chi-Square Test: Số vú dương tính, Số vú âm tính Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts Số vú dương tính 184 145.03 10.470 Số vú âm tính 328 366.97 4.138 2 97 135.97 11.168 383 344.03 4.414 480 Total 281 711 992 1 Total 512 Chi-Sq = 30.190, DF = 1, P-Value = 0.000 Kết quả: So sánh Số vú khảo sát bằng CMT ở trại tập trung và hộ gia đình khác nhau có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) 61 Bảng 5. Tỷ lệ hết bệnh giữa các loại thuốc thử nghiệm đối với bệnh viêm vú lâm sàng Số lƣợng (con) Hết bệnh Tỷ lệ (con) (%) Ceptifi for LC 11 11 100a CEQUIN for LC 10 10 100a MAMIFORT 11 7 63,64ab BIO - TETRAMAS 3 1 33,33b SPECTRAMAST 4 4 100ab Tổng cộng 39 33 84,62 Thuốc thử nghiệm a, b: Các giá trị cùng một cột mang các ký tự giống nhau thì khác nhau không có ý nghĩa thống kê (P> 0,05), khác nhau thì khác nhau có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) m= 2 n= 5 Trị số Chi Bình Phương 7.7276343 Độ Tự do 4 P (Ho) = 0.1020805 NS Kết quả: khác nhau không có ý nghĩa thống kê (P > 0,05) Tỷ lệ hết bệnh của CEQUIN for LC và MAMIFORT m= 2 Trị số Chi Bình Phương Độ Tự do 1 P (Ho) = 0.072168901 n= 3.23299 2 NS Kết quả: khác nhau không có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Tỷ lệ hết bệnh của CEQUIN for LC và BIO- TETRAMAS m= 2 Trị số Chi Bình Phương Độ Tự do 1 P (Ho) = 0.011531987 n= 6.38144 2 * Kết quả: khác nhau rất có ý nghĩa thống kê (p < 0,05) 62 Tỷ lệ hết bệnh của MAMIFORT và BIO- TETRAMAS m= 2 Trị số Chi Bình Phương Độ Tự do 1 P (Ho) = 0.506805729 n= 0.44066 2 NS Kết quả: khác nhau không có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Tỷ lệ hết bệnh của MAMIFORT và SPECTRAMAST m= 2 Trị số Chi Bình Phương Độ Tự do 1 P (Ho) = 0.249622852 n= 1.32541 2 NS Kết quả: khác nhau không có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) Tỷ lệ hết bệnh của BIO- TETRAMAS và SPECTRAMAST m= 2 Trị số Chi Bình Phương Độ Tự do 1 P (Ho) = 0.1612462 n= 1.9625 2 NS Kết quả: khác nhau không có ý nghĩa thống kê (p > 0,05) 63 [...]... phòng trị đạt hiệu quả hơn + So sánh hiệu quả của các loại thuốc bơm vú để điều trị bệnh viêm vú trên bò sữa 1 CHƢƠNG 2 CƠ SỞ LÝ LUẬN 2.1 Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nƣớc 2.1.1 Tình hình nghiên cứu trong nước Các loại bệnh gây hại trên bò thì bệnh viêm vú rất quan trọng gây thiệt hại đến năng suất và chất lương sữa nên có rất nhiều tác giả trong nước nghiên cứu đến để trị bệnh làm giảm tỷ lệ bệnh. .. Và Thuốc Thú Y Vemedim Chúng tôi tiến hành thực hiện nghiên cứu đề tài: Đánh giá hiệu quả các loại thuốc bơm vú để điều trị bệnh viêm vú trên bò sữa ở hợp tác xã Nông Nghiệp EVERGROWTH Sóc Trăng, trại bò sữa Hiệp Hoà Đức Hoà Long An, hợp tác xã bò sữa Long Hoà Cần Thơ Mục tiêu đề tài: + Khảo sát tỷ lệ viêm vú bò sữa thể lâm sàng và cận lâm sàng (tiềm ẩn) + Khảo sát sự nhiễm vi sinh vật có trong sữa. .. Văn Thu, 2010) 2.5 Định nghĩa viêm vú và phân loại bệnh viêm vú ở bò sữa 2.5.1 Định nghĩa viêm vú: Bệnh viêm vú là phản ứng viêm của tuyến vú Bệnh viêm vú làm sữa biến đổi về lý tính và hóa tính, làm giảm sản lượng và phẩm chất sữa Thùy vú tổn thương, nếu viêm 11 nặng thì bầu vú teo và mất khả năng tiết sữa, thú sẽ bị đào thải (Nguyễn Văn Thành, 2005) Viêm vú là loại bệnh do nhiều nguyên nhân gây nên,... chữa khỏi nên loại thải để tránh thiệt hại kinh tế 2.10.7 Điều trị bệnh viêm vú Bò bị viêm vú phải được phát hiện sớm để điều trị kịp thời bệnh sẽ nhanh khỏi nếu điều trị trể có thể gây thiệt hạy nặng và mất khả năng sản xuất sữa gây thiệt hạy kinh tế cao 2.10.8 Các phương pháp chẩn đoán viêm vú trên bò sữa Xác định viêm vú lâm sàng *Kiểm tra bằng cảm quan Sữa bình thường: Sữa có màu trắng đục, hơi... phân cách xa chuồng nuôi và nơi vắt sữa Nếu có điều kiện thì nên xây nơi vắt sữa riêng, không nên vắt ngay tại chuồng 21 2.10.6 Cách ly và điều trị gia súc mắc bệnh viêm vú: Cách ly ngay gia súc bệnh để tránh lây lan Điều trị phải đúng liều lượng, đúng phương pháp Chú ý chế độ ăn uống phù hợp với bò viêm vú Tiêu độc triệt để chuồng trại và phân rác nơi bò bệnh Nếu bò bệnh kéo dài không chữa khỏi nên loại. .. nuôi bò sữa trong 2 năm 2004 – 2005 cho thấy tỷ lệ bò bị viêm vú lâm sàng là 12,3%, trung bình cứ 7 ca viêm vú tiềm ẩn, phát hiện qua máy đo viêm vú điện tử, có một ca phát triển thành viêm vú lâm sàng Tỷ lệ bệnh viêm vú lâm sàng ở bò sữa trung bình là 12,3%, dao động từ 4,9% - 19,0% tùy khu vực Đây là những trường hợp bò bệnh viêm vú có một trong số các biểu hiện ra ngoài như: sữa tủa, tắt sữa, vú sưng... mạc bầu vú, trước khi vắt sữa phải xoa bóp bầu vú - Vệ sinh khi vắt sữa: Rửa sạch bầu vú bằng nước ấm Sau dùng khăn sạch lau khô (mỗi con phải có khăn riêng) Công nhân vắt sữa phải mặc quần áo sạch sẽ, móng tay cắt ngắn, rửa sạch tay sau khi vắt sữa mỗi con Cách ly bò bị bệnh, sữa bò bệnh để riêng để xử lý - Trình tự vắt sữa: Bò khỏe vắt trước, bò bệnh vắt sau Trên cùng một con viêm vú thì thùy vú lành... bệnh viêm vú gây ra Khi bò cái cho sữa bị viêm vú lâm sàng thì tỷ lệ sữa giảm 10-30%, nếu viêm vú ở thể tiềm ẩn thì tỷ lệ sữa giảm 19%, thông thường tỷ lệ bò cái cho sữa bị mắc bệnh viêm vú tiềm ẩn chiếm khoảng 50% (Nguyễn Văn Thành, 2005) Bệnh viêm vú gây tổn thất rất lớn cho ngành chăn nuôi bò sữa Các thiệt hại liên quan đến nhiều khía cạnh khác nhau: Làm giảm khoảng 10% sản lượng sữa do tuyến sữa bị... Theo Nguyễn Ngọc Nhiên (1986), kiểm tra viêm vú tiềm ẩn trên đàn bò sữa bằng phương pháp CMT, kết quả bò viêm vú tiềm ẩn chiếm 24,20%, trong đó vi khuẩn Staphylococcus aureus và Streptococcus spp chiếm chủ yếu trong các mẫu sữa viêm Theo Trần Công Thành (1997), khảo sát viêm vú trên đàn bò sữa tại Đức Trọng – tỉnh Lâm Đồng bằng phương pháp CMT, kết quả bò viêm vú tiềm ẩn chiếm tỷ lệ 27,54% Trong đó... khuẩn Staphylococcus aureus 38 18 Kháng sinh đồ vi khuẩn E coli 38 19 Máy vắt sữa 41 20 Sát trùng vú Vime- Iodine 41 21 Vú bò bình thƣờng 48 22 Vú bò bị viêm teo 1 thùy vú 48 23 Bơm thuốc CEQUIN for LC 48 24 Bơm thuốc Ceptifi for LC 48 25 Thuốc bơm vú SPECTRAMAST 49 26 27 Thuốc bơm vú BiO- TETRAMAS Thuốc bơm vú MAMIFORT 49 49 xi DANH MỤC SƠ ĐỒ Sơ đồ Tựa sơ đồ Trang 1 Quy trình nuôi cấy phân lập vi khuẩn ... sữa Cách ly bò bị bệnh, sữa bò bệnh để riêng để xử lý - Trình tự vắt sữa: Bò khỏe vắt trước, bò bệnh vắt sau Trên viêm vú thùy vú lành vắt trước, thùy vú bệnh vắt sau 2.10.4 Số lần vắt sữa: Bò. .. phòng trị đạt hiệu + So sánh hiệu loại thuốc bơm vú để điều trị bệnh viêm vú bò sữa CHƢƠNG CƠ SỞ LÝ LUẬN 2.1 Tình hình nghiên cứu nƣớc 2.1.1 Tình hình nghiên cứu nước Các loại bệnh gây hại bò bệnh. .. nơi bò bệnh Nếu bò bệnh kéo dài không chữa khỏi nên loại thải để tránh thiệt hại kinh tế 2.10.7 Điều trị bệnh viêm vú Bò bị viêm vú phải phát sớm để điều trị kịp thời bệnh nhanh khỏi điều trị