BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐAI HỌC D ư ợ c HÀ NÔI PHẠM THỊ MINH PHƯỢNG NGHIÊN CỨU XÂY DựNG CÔNG THỨC © VIÊN KETOPROFEN HOÀ TAN NHANH BẰNG KỸ THUẬT ĐÔNG KHÔ (KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP Dược s ĩ KHOÁ 2002-2007) J Phương pháp đun chảy Hỗn hợp vật lý của thuốc và chất mang được trộn đều rồi đun chảy, sau đó được làm lạnh hoặc đông rắn nhanh trong nước đá lạnh trong khi hỗn hợp bột được khuấy liên tục. Khối rắn sau đó được để ổn định một thời gian trong bình hút ẩm hoặc ở điều kiện phòng rồi đem nghiền, rây để chọn bột có kích thước nhất định [32]. ❖ Phương pháp dùng dung môi Phương pháp dung môi được áp dụng với những dược chất, chất mang không bền với nhiệt. Dược chất và chất mang được hoà tan trong một lượng tối thiểu dung môi thích hợp. Sau đó tiến hành loại dung môi sẽ thu được dược chất kết tinh cùng với chất mang. Khối rắn được sấy hoặc để trong bình hút ẩm một thời gian, sau đó nghiền, rây, chọn bột có kích thước nhất định. Nếu dược chất và chất mang không đồng tan trong một dung môi thì có thể hoà tan từng chất trong các dung môi thích hợp, sau đó phối hợp, khuấy trộn và loại dung môi. Có thể loại dung môi bằng các cách sau: 6 - Cho dung môi bay hơi ở nhiệt độ phòng, kết hợp với thổi khí làm cho dung môi bay hơi nhanh hơn hoặc bốc hơi trên nồi cách thuỷ, sau đó làm khô trong bình hút ẩm. - Bốc hơi dung môi dưới áp suất giảm bằng máy cất quay hoặc tủ sấy chân không ở nhiệt độ thấp khoảng 50°c. - Sấy phun bằng máy phun sấy ở nhiệt độ thích hợp. - Loại dung môi bằng phương pháp đông khô. ❖ Phương pháp nghiền trộn cơ học Phương pháp này được áp dụng khi không thể chọn được dung môi và biện pháp loại dung môi thích hợp hoặc dược chất kém bền với nhiệt. Tiến hành nghiền trộn hỗn hợp dược chất và chất mang với một lượng chất lỏng thích hợp, có thể là nước, trong một thời gian dài bằng cối chày hoặc máy nghiền để thu được một khối bột nhão. Khối bột nhãođược làm khô,nghiền, rây để thu được bột có kích thước nhất định. 1.3.1.2. Cơ chế làm tăng đổ tan của dươc chất từ hê phân tán rần - Thay đổi trạng thái kết tinh của dược chất hoặc chuyển từ dạng kết tinh sang trạng thái vô định hình [32]. - Giảm kích thước tiểu phân dược chất. - Tăng mức độ thấm môi trường hoà tan của dược chất do có mặt của chất mang thân nước, đặc biệt là khi hệ chất mang có chất diện hoạt. - Tạo phức dễ tan. 1.3.1.3. Mốt số nghiên cứu về hê phân tán rắn Marzia Cirri và cs (2005) nghiên cứu bào chế viên hoà tannhanh chứa flurbiprofen bằng phương pháp chế tạo hệ phân tán rắn (HPTR) với các cyclodextrin. Các tác giả đã đánh giá khả năng cải thiện độ tan dược chất và khả năng bào chế viên hoà tan nhanh từ HPTR chế tạo bằng các phương pháp khác nhau. HPTR được chế tạo theo các cách: trộn đều đơn giản, nhào ẩm với hỗn hợp dung môi, bốc hơi dung môi, đun chảy, đông khô. Kết quả thu được 7 cho thấy tất cả các HPTR đều cải thiện độ tan của dược chất, tuy nhiên khả năng này phụ thuộc vào chất mang và phương pháp chế tạo. HPTR sử dụng MeP-CD có độ tan tốt nhất, sau đó đến HEp-CD, thấp nhất là Ị3-CD. về phương pháp (pp): khả năng cải thiện độ tan tăng theo thứ tự sau: pp tạo hỗn hợp vật lý, pp đun chảy, pp nhào ẩm với dung môi, pp bốc hơi dung môi và pp đông khô. HPTR chế tạo bằng pp đông khô với chất mang MeP-CD cải thiện độ tan dược chất gấp 120 lần, được chọn làm nguyên liệu bào chế viên hoà tan nhanh. Viên hoà tan nhanh flurbiprofen có lượng dược chất hoà tan trên 85% trong vòng 30 phút [14]. 1.3.2. Phương pháp đun chảy và kết tinh bằng siêu âm Để cải thiện khả năng hoà tan, đặc tính hoá lý của ibuproíen với mục đích bào chế viên nén hoà tan nhanh, các tác giả đã sử dụng phương pháp đun chảy và kết tinh bằng siêu âm. Trong đó, ibuprofen được đun chảy hoàn toàn, sau đó rót vào cốc nước tinh khiết ở nhiệt độ 25°c, khuấy siêu âm trong vòng từ 30 giây đến 2 phút. Kết quả thu được, nguyên liệu sau khi bị tác động đã tăng độ tan đáng kể, viên nén có nguyên liệu bị tác động hoà tan 90- 100% dược chất trong vòng 30 phút [24]. 1.4. Kỹ thuật đông khô 1.4.1. Định nghĩa Đông khô là quá trình loại bỏ nước trong chế phẩm sau khi đã được đông lạnh bằng cách đặt chế phẩm vào buồng chân không. Điều kiện này cho phép nước chuyển trạng thái từ thể rắn sang thể hơi mà không phải qua thể lỏng trung gian [29], [31]. Ưu điểm của chế phẩm đông khô [6]: - Cải thiện độ hoà tan của dược chất do quá trình đông khô làm thay đổi trạng thái kết tinh của dược chất. Dược chất được chuyển một phần sang dạng vô định hình và độ tan tăng lên [8], [16], [26]. 8 - Quá trình thăng hoa của nước tạo ra những lỗ xốp trong cấu trúc của sản phẩm đông khô, làm tăng khả năng hút nước của sản phẩm khi hoà tan. Do đó làm tăng tốc độ hoà tan trở lại của sản phẩm đông khô. - Quá trình loại bỏ nước được tiến hành trong điều kiện nhiệt độ thấp vì vậy tránh được sự phân huỷ dược chất (điều này rất quan trọng với những dược chất không bền với nhiệt, những dược chất có nhiệt độ nóng chảy thấp). - Thuốc được đóng vào lọ ở trạng thái dung dịch nên dễ dàng đạt yêu cầu đồng đều hàm lượng và khối lượng. Với những ưu điểm trên, kỹ thuật đông khô đã được áp dụng trên quy mô sản xuất với dạng thuốc tiêm. Tuy nhiên, ngoài những ưu điểm trên, kỹ thuật đông khô có những nhược điểm: - Đòi hỏi thiết bị đặc biệt. - Quá trình đông khô tốn thời gian và có nhiều thao tác thủ công. - Sản phẩm đông khô có giá thành cao. 1.4.2. Quá trình đông khô Quá trình đông khô gồm 3 giai đoạn: đông lạnh, sấy sơ cấp, sấy thứ cấp [29], [31]. - Giai đoạn đông lạnh: Trong giai đoạn này, sản phẩm được đóng băng hoàn toàn ở nhiệt độ thấp hơn nhiệt độ eutecti (đối với dạng kết tinh) hay nhiệt độ chuyển đổi thuỷ tinh (đối với dạng vô định hình) của hệ. Đầu tiên, các tinh thể nước đá được hình thành và tách ra khỏi dung dịch. Phần dung dịch chưa được đông lạnh có nồng độ dược chất, tá dược tăng dần, băng điểm của nó giảm xuống và tiến đến nhiệt độ eutecti (hay nhiệt độ chuyển đổi thuỷ tinh). Cuối cùng, các thành phần khác trong hệ kết tinh hoặc chuyển sang dạng vô định hình. Kết thúc quá trình, hệ tồn tại ở nhiều dạng khác nhau: tinh thể, vô định hình hoặc cả tinh thể và vô định hình. 9 - Giai đoạn sấy sơ cấp: Sản phẩm sau khi được đông lạnh thích hợp được chuyển sang buồng đông khô dưới điều kiện áp suất nhỏ hơn áp suất hơi nước đá (thường từ 0,05- 0,2 mmHg hay 0,0665- 0,2260 mbar), nhiệt độ condensor khoảng -50°c, nhiệt độ của giá từ -30 đến 10°c. Trong điều kiện này, nước sẽ thăng hoa trực tiếp từ trạng thái rắn sang trạng thái hơi không qua giai đoạn lỏng trung gian. Quá trình nhận biết được bởi bề dày lớp băng giảm trong khi bề dày của sản phẩm đông khô tăng lên. Ở giai đoạn này, nhiệt độ của sản phẩm phải thấp hơn nhiệt độ phá vỡ cấu trúc khoảng 2-5°C. - Giai đoạn sấy thứ cấp: Nhiệt tiếp tục được cấp cho sản phẩm để loại bỏ hoàn toàn nước (không được đông lạnh và nước hấp phụ trên bề mặt tinh thể. Giai đoạn này thường kéo dài, đến khi chế phẩm đạt độ ẩm tương đối khoảng 1% thì kết thúc. 1.4.3. ứng dụng của đông khô vào công nghệ bào chế viên rã nhanh, hoà tan nhanh. Với xu hướng phát triển dạng bào chế viên nén giải phóng nhanh, kỹ thuật đông khô đã được ứng dụng để cải thiện khả năng hoà tan của dược chất, tăng độ xốp cho sản phẩm như: chế tạo hệ phân tán rắn, chuyển dạng kết tinh các loại đường làm tá dược dập thẳng, và chế tạo viên đông khô hoà tan nhanh. 1.4.2.1. Phương pháp chuyển dang kết tinh Thực chất của phương pháp này là áp dụng kỹ thuật đông khô để chuyển dạng kết tinh một số đường thành vô định hình. Các loại đường này sau đó được trộn với dược chất và tá dược độn, tá dược trơn và tiến hành dập viên. Các loại đường hay dùng là sucrose, lactose và maltose. Tá dược độn thường dùng là ethrytol, manitol và xylitol. Viên nén sau khi bào chế có tốc độ thấm nước cao vì sự có mặt của các tá dược độn thân nước. Các loại đường vô định hình tạo ra cấu trúc viên có độ xốp cao dẫn đến tăng nhanh tốc độ và mức độ hút nước vào viên, vì vậy viên rã nhanh trong miệng (khoảng 10-30 giây) [33]. 10 1.4.2.2. Chế tao hê phân tán rán làm tăng đố tan của dươc chất Nhiều tác giả nghiên cứu chế tạo HPTR bằng phương pháp đông khô để cải thiện độ tan của dược chất ít tan [22]. Dung dịch chất mang hoà tan trong nước được kết hợp với dược chất hoà tan trong một dung môi hữu cơ đồng tan với nước. Dung môi hữu cơ đó phải có đặc tính lý- hoá- sinh học phù hợp với quá trình đông khô. Đó là nhiệt độ đông đặc và áp suất bay hơi cao, và dư phẩm trong chế phẩm đông khô không gây độc khi sử dụng. Dung môi hay được sử dụng trong phương pháp đông khô là tert- butanol. Tác giả V. Drooge (2004) đã chế tạo HPTR bằng phương pháp đông khô, sử dụng chất mang là các đường: saccarose, trehalose, inulin với các dược chất ít tan là diazepam, cyclosporin A, niíedipin. Kết quả thu được cho thấy, dược chất trong hệ phân tán rắn thu được tồn tại hầu hết ở dạng vô định hình và do đó độ tan tăng lên rõ rệt [16]. 1.4.2.3. Cổng nghê bào chế viên đỏng khỏ Dược chất ít tan và sơ nước được pha chế dưới dạng hỗn dịch, sau đó phân liều vào vỉ (thường là vỉ PVC), tiến hành đông khô. Viên được bào chế bằng phương pháp này thường có ưu điểm rã nhanh, đảm bảo độ bền cơ học, ổn định đồng thời tốc độ giải phóng nhanh hơn dạng viên nén, viên nang thông thường. s. Corveleyn (1997) đã nghiên cứu bào chế viên hydroclorothiazid rã nhanh bằng phương pháp này, sử dụng maltodextrin, gelatin, gôm xanthan với vai trò đảm bảo độ bền cơ học của viên. Viên đông khô được đánh giá về các nội dung: thời gian rã, độ bền cơ học, độ xốp và độ ẩm tương đối. Sử dụng nồng độ mantodextrin tăng làm tăng độ bền cơ học của viên, ở mức 20%, kết hợp với gôm xanthan 0,4% phù hợp yêu cầu [15]. Năm 2006,1. s. Ahmed và cộng sự đã ứng dụng kỹ thuật đông khô trên vỉ để bào chế viên ketoproíen hoà tan nhanh hàm lượng 25mg. Kết quả cho thấy, 5 phút đầu, trên 95% ketoprofen được hoà tan từ dạng thuốc mới, so với viên 11 đối chiếu hoà tan dưới 45% trong 60 phút. Phổ phân tích nhiễu xạ tia X cho thấy, so với ketoprofen nguyên liệu, ketoprofen/dạng thuốc mới có sự chuyển từ trạng thái kết tinh sang vô định hình. Phân tích trên kính hiển vi điện tử, cũng thấy sự giảm kích thước tiểu phân dược chất trong chế phẩm viên đông khô. Do đó kỹ thuật đông khô có thể sử dụng để chế tạo viên hoà tan nhanh ketoprofen [8]. 1.5. Đại cương về ketoprofen 1.5.1. Công thức hoá học H và đồng phân quang học. - Công thức phân tử: C16H140 3 - Trọng lượng phân tử: 254,3 - Tên khoa học: acid (RS) -2- (3- benzoyl phenyl) propionic [12]. 1.5.2. Tính chất vật lý - Bột kết tinh trắng hoặc gần như trắng, không mùi [12], [23]. - Độ tan: thưc tế không tan trong nước, dễ tan trong alcol, cloroíbrm, ether, aceton methylen clorid, tan trong benzen, ethyl acetat [23]. - Nhiệt độ nóng chảy nằm trong khoảng 94-97°C [12]. - Hằng số phân ly (pKa) trong hỗn hợp dung môi gồm H20:DMS0 (tỷ lệ khối lượng 20:80) là 7,84; trong nước là 4,45 [23]. 1.5.3. Độ ổn định và tạp chất phân huỷ Ketoproíen nhạy cảm với ánh sáng mặt trời và tia u v . Trong 1 giờ, dưới tác dụng của tia u v (X = 254 nm) hoặc ánh sáng mặt trời, ketoproíen bị phân huỷ thành 3- benzoylphenyl ethan. Sau đó tiếp tục phân huỷ thành 3benzoylphenyl ethanol và 3- benzoylphenyl ethanon. Sau 24 tháng bảo quản 12 trong điều kiện kín, tránh ánh sáng, ketoprofen hầu như không bị phân huỷ [23]. Sản phẩm phân huỷ của ketoprofen bao gồm nhiều dẫn chất khác nhau như: 3- acetyl benzophenol, acid 2- (3- benzoylphenyl) acetic, acid 2- [3- (4methyl benzoyl) phenyl) propionic, acid 2- (3- carboxyl phenyl) propionic, 2(3- benzoylphenyl) propionitril, 2- (3- benzoylphenyl) propionamid [12]. 1.5.4. Tác dụng- chỉ định - Tác dụng: ketoprofen là dẫn chất của acid propionic, là thuốc chống viêm không steroid (NSAID). Giống như các thuốc cùng nhóm, ketoprofen có tác dụng chống viêm, giảm đau và hạ sốt. - Chỉ định: các trường hợp đau cột sống, thoái hoá khớp, đau đầu, đau bụng kinh kỳ [3], [6]. 1.5.5. Một số dạng bào chếketoprofen - Nang cứng 40mg và 50 mg (Proíenid, Aventis). - Viên nén tác dụng kéo dài 150 mg (Bi- Proíenid, Aventis). - Thuốc đạn 100 mg; Gel dùng ngoài 2,5%. - Lọ thuốc bột tiêm 50 mg, 100 mg kèm theo 1 ống dung môi. 1.5.6. Nghiên cứu vê viên hoà tan nhanh chứa ketoprofen Yusuke Shibata và cs (2006) nghiến cứu xác định độ chảy và mô tả đặc điểm của viên nén bào chế từ HPTR chứa ketoprofen và ibuproíen. HPTR chế tạo bằng phương pháp đun chảy với chất mang crospovidon. Qua phân tích nhiễu xạ tia X, phổ của hệ phân tán rắn không còn pick của dược chất, điều này khẳng định trong hệ phân tán rắn, dược chất tồn tại chủ yếu ở dạng vô định hình. HPTR có khả năng trơn chảy tốt, thuận lợi cho quá trình bào chế viên nén bằng phương pháp dập thẳng. Như vậy chế tạo HPTR bằng phương pháp đun chảy cho phép cải thiện độ tan của ketoproíen và ibuproíen, tăng khả năng trơn chảy, giảm chênh lệch khối lượng viên, tăng độ cứng. Từ đó dễ dàng sử dụng để bào chế viên nén rã nhanh bằng phương pháp dập thẳng [32]. 13 PHẦN 2: THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 2.1. NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP THỰC NGHIỆM 2.1.1. Nguyên vật liệu - Nguồn gốc và tiêu chuẩn chất lượng của nguyên vật liệu sử dụng trong thực nghiệm được ghi trong bảng 2.1. Bảng 2.1: Nguyên vật liệu sử dụng trong quá trình thực nghiệm STT Nguyên liệu, hoá chất Nguồn gốc Tiêu chuẩn 1 Ketoproỷen Italy BP 2005 2 Ketoprofen An Độ BP 2005 3 Ethanol Việt Nam DĐVNIII 4 Glycin Trung Quốc TKHH 5 Sorbitol Trung Quốc BP2005 6 p cyclodextrin Merk- Đức TKHH 7 Hydroxypropyl p cyclodextrin Trung Quốc TKHH 8 Aerosil 200 Trung Quốc USP29 9 Talc Trung Quốc DĐVNIII Việt Nam DĐVNIỈI Trung Quốc BP2005 10 Gelatin 11 Polyvinylpirolidon (PVP) . - Viên đông khô được tiến hành trên vỉ PVC, của XN DPTW1, theo tiêu chuẩn TCCS có kích thước: + Đường kính trong 8 mm + Bề dày 2 mm + Thể tích 0,8 ml 14 - Viên nang đối chiếu Proíenid 50 mg(Cty TNHH Aventis SRL, Việt Nam)TCCS. + Số lô sản xuất: 020606 + Hạn sử dụng : 06-09 2.1.2. Thiết bị sử dụng trong thực nghiệm - Máy đông khô LSL SECFROID. - Máy khuấy từ IKA, WERKA. - Máy quét phổ Vankel-Varian. - Máy đo quang phổ UV-Vis U-1800 HITACHI. - Máy thử độ rã ERWERKA. - Máy thử hoà tan VK7010, VanKel. - Máy phân tích nhiễu xạ tia X D8 Advance, Brucker (Đức). - Máy phân tích nhiệt vi sai DSC SETARAM (Pháp). - Cân phân tích Sartorius BP 2151. - Cân kỹ thuật. - Nồi đun cách thuỷ. - Tu sấy. - Chày, cối, rây. - Bình hút ẩm. Và một số thiết bị khác. 2.1.3. Phương pháp thực nghiệm 2.1.3.1. Phương pháp bào chế viên đông khô > Công thức cơ bản của viên đồng khô ketoprofen: - Ketoprofen 25 mg - Tá dược vừa đủ 15 > Sơ đồ bào chế viên đông khô ketoproíen Ketoproíen, tá dược I Hỗn dịch (bán thành phẩm) ị Đông lạnh (Nhiệt độ -40°c, tốc độ l°c/phút, 1 giờ) l ( tc o n d e n s o r = - 4 5 Đông khô sơ cấp áp suất 0,1 mbar, 24 giờ) ° C , 1 (t, : o n d e n s o r = - 4 5 ° C , Đông khô thứ cấp áp suất 0,1 mbar, tkhay~ 40-50°C, 48 giờ) Ị Viên đông khô (bảo quản trong bình hút ẩm) Hình 2.1: Sơ đồ các giai đoạn bào chế viên đông khô ketoprofen 25 mg > Mô tả: - Pha chế hỗn dịch ketoproíen với các tá dược trong công thức. Lấy 1 lượng chính xác hỗn dịch trên bơm vào vỉ, đặt trong khay. - Đưa khay vào tủ lạnh, đông lạnh ở nhiệt độ - 40°c, tốc độ làm lạnh khoảng l°c/phút, thời gian khoảng lh. - Sau khi chế phẩm đông rắn hoàn toàn, đưa chế phẩm vào buồng đông khô, hút chân không đến áp suất khoảng 0,1 mbar, nhiệt độ condensor khoảng -45°c, thời gian 24h. Nhiệt độ của giá khoảng -30-10°C. 16 - Tiếp tục tăng nhiệt độ của giá lên tới nhiệt độ 40 - 50°c, duy trì áp suất, nhiệt độ buồng ngưng, thời gian sấy 48h. - Lấy vỉ thuốc ra khỏi khay, cho vào túi PE, đặt trong bình hút ẩm có chứa chất hút ẩm là vôi sống để bảo quản. 2.1.3.2. Thử độ rã của viên đông khô Theo phương pháp “Thử độ rã của viên nén và viên nang thông thường” của DĐVN III [2]. - Môi trường: 900 ml nước cất - Nhiệt độ: 37°c± 0,5. - Thiết bị thử độ rã quy định trong DĐVN III. - Thời gian rã tính từ lúc cho viên thử vào đến khi 6 viên thử rã hoàn toàn. 2.1.3.3. Định lượng ketoprofen trong viên đông khô Hàm lượng ketoprofen trong viên đông khô được xác định bằng phương pháp đo quang phổ hấp thụ tử ngoại ở bước sóng cực đại 260 nm trong dung môi nước và so sánh độ hấp thụ với dung dịch chuẩn ketoproíen tương ứng (xem mục 2.2.1.1). > Pha dung dịch chuẩn ketoprofen - Cân chính xác khoảng 100 mg ketoproíen chuẩn vào bình định mức 100 ml, hoà tan bằng khoảng 80 ml ethanol 96° và thêm nước cất vừa đủ thể tích, lắc đều được dung dịch A. - Hút chính xác 1 ml dung dịch A cho vào bình định mức 100 ml, thêm nước vừa đủ đến vạch, lắc đều thu được dung dịch chuẩn ketoprofen (1). > Dung dịch thử ketoproíen - Ngâm viên đông khô ketoproíen trong khoảng 10 ml nước cất, cho viên rã hoàn toàn. Chuyển hỗn dịch vào bình định mức 50 ml, thêm ethanol 96° đến vạch, lắc đều. 17 - Lọc nhanh dung dịch qua giấy lọc vào cốc, bỏ 10 ml dịchlọc đầu, được dung dịch B. Hút chính xác 1 ml dung dịch B vào bình định mức 50 ml, thêm nước vừa đủ tới vạch, lắc đều thu được dung dịch thử ketoproíen (1 ’). Dung dịch chuẩn (1) và dung dịch thử (1’) được đo độ hấp thụ tử ngoại ở bước sóng cực đại 260 nm. Mẫu trắng là nước cất. > Tính kết quả Hàm lượng ketoprofen trong chế phẩm được tính theo công thức: Hàm lượng ketoproíen = ^--Cch- 2500 (mg). Ach Trong đó: Ach : Độ hấp thụ của dung dịch chuẩn (1). Ath : Độ hấp thụ của dung dịch thử (1’). Cch : Nồng độ ketoprofen chuẩn (1) (ng/ml). 2.1.3.4. Thử độ hoà tan của viên đông khô, nguyên liệu và viên so sánh > Điều kiện thử hoà tan: - Môi trường : Nước cất; 900 ml. - Tốc độ khuấy : 50 vòng/phút. -Nhiệt độ thử : 37° c ± 0,5. - Thiết bị thử: với viên đông khô và nguyên liệu dùng thiết bị số 2 (cánh khuấy), với viên nang đối chiếu dùng thiết bị số 1 (giỏ quay). > Tiến hành: - Đặt nhiệt độ của nước trong bể ở 37°c± 0,5 và duy trì nhiệt độ đó trong suốt quá trình thử. - Cho 900 ml môi trường thử vào 4 cốc thử. - Để môi trường ổn định nhiệt độ. - Cho từng viên ketoprofen vào mỗi cốcthử. - Cho máy chạy, tính thời gian. - Hút 5 ml môi trường hoà tan ở cácphút thứ 5,10,15,20,30,45... lọc qua giấy lọc. Sau mỗi lần hút mẫu, bổ sung 5 ml môi trường. 18 - Pha loãng dịch lọc với nước cất nếu cần, lắc đều rồi xác định mật độ quang ở bước sóng 260 nm. > Tính kết quả: Phần trăm ketoproíen hoà tan từ viên tại lần thứ i (số thứ tự của các lần hút mẫu) được tính theo công thức: ot\ * f - ( Ai 900 %ketoprofen = ( - 7 - • Cci,n ■K , r—— + A •' C- 1ch „• K , Ao, 1000 Ack r -1 •—-—5). —— 100 %. „ 1000 Dv Trong đó A; : Độ hấp thụ của dung dịch hoà tan lần thứ i, sau khi pha loãng Kị lần. Ach : Độ hấp thụ của dung dịch ketoproíen chuẩn (khoảng 10|Lig/ml). Qh : Nồng độ dung dịch ketoproíen chuẩn ( I^g/ml). Kị : Hệ số pha loãng của dung dịch hoà tan tại phút thứ i. Dv : Hàm lượng của viên ketoproíen thử (mg). 2.1.3.5. Phân tích nhiễu xạ tia X Nguyên tắc chung của phương pháp phân tích cấu trúc tinh thể và thành phần pha bằng nhiễu xạ tia X (XRD) dựa trên hiện tượng nhiễu xạ tia X của mạng tinh thể khi thoả mãn điều kiện Bragg: 2dsin0 = nÀ, Trong đó d là khoảng cách giữa các mặt nguyên tử phản xạ, 0 là góc phản xạ, %là bước sóng của tia X và n là số bậc phản xạ. Bước sóng tia X tới từ bức xạ Ka của Cu là : Ằ-Cu = 1,54056 Ả. 2.1.3.6. Phân tích nhiệt vi sai Tiến hành trên dải nhiệt độ 20- 150°c, tốc độ 10°c/phút, tiến hành trên máy phân tích nhiệt vi sai DSC 131, SETARAM. 2.1.3.6. Theo dõi độ ổn định của chế phẩm Chế phẩm được bảo quản trong điều kiện phòng thí nghiệm, trong bình hút ẩm chứa vôi sống (độ ẩm thấp), nhiệt độ trong khoảng 15-35°c. Sau các khoảng thời gian định kỳ là 1 tháng được lấy ngẫu nhiên để đánh giá các chỉ tiêu: cảm quan, hàm lượng dược chất, độ hoà tan. 19 2.2. KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM VÀ NHẬN XÉT 2.2.1. Khảo sát một sô tính chất của ketoprofen 2.2.1.1. Sự phụ thuộc độ hấp thụ u v với nồng độ dung dịch ketopro/en ♦♦♦ Quét phổ dung dịch: - Quét phổ nguyên liệu: Hoà tan 25 mg ketoprofen trong hỗn hợp dung môi gồm nước tinh khiết & EtOH (tỉ lệ 20:80). Pha loãng dung dịch với nước tinh khiết đến nồng độ khoảng 10 |4,g/ml. Tiến hành quét phổ dung dịch thu được ở dải bước sóng 400-200 nm, kết quả trong hình 2.2. - Quét phổ dung dịch chế phẩm cùng điều kiện: Hoà tan viên đông khô trong hỗn hợp dung môi gồm nước tinh khiết & EtOH (tỉ lệ 20:80). Lọc nhanh dung dịch qua giấy lọc, pha loãng dịch lọc với nước tinh khiết đến nồng độ khoảng 10 Jig/ml. Tiến hành quét phổ dung dịch thu được ở dải bước sóng 400-200 nm, kết quả trong hình 2.3. G i.ip li I - S.ini|)le12 X: 289.464. V: 1.157285 Hình 2.2 : Phổ hấp thụ tử ngoại của ketoproýen trong nước 20 VVavelength (nm) I ________________________________________________________________________________________________ ■ ________________________________________________________________________________________________ I 6 k ì |>Iì I - Scimple 13 X: 295.3789. Y: 1.122517 Hình 2.3: Phổ hấp thụ tử ngoại của ketoprofen hoà tan từ viên đông khô Kết quả trong hình 2.2 và 2.3 cho thấy: Trong môi trường nước, ketoproíen nguyên liệu có cực đại hấp thụ ở bước sóng 260 nm. Bước sóng cực đại này đã được công bố trong Dược điển Anh 2005 [12]. Độ hấp thụ của dung dịch thu được từ chế phẩm không có sự khác nhau với nguyên liệu, có cực đại hấp thụ ở bước sóng 260 nm. Điều này hợp lý vì các tá dược của viên đông khô không có khả năng hấp thụ tử ngoại. Do đó chọn bước sóng 260 nm khảo sát sự phu thuộc mật độ quang & nồng độ ketoprofen, định lượng dược chất trong chế phẩm và trong môi trường thử hoà tan. ❖ Xây dựng đường chuẩn biểu thị tương quan giữa nồng độ và mật độ quang của ketoproíen: - Pha dung dịch gốc ketoproíen trong ethanol 96% (TT) nồng độ 1 mg/ml. - Từ dung dịch gốc, dùng nước tinh khiết pha loãng thành các dung dịch ketoproíen ở các nồng độ 2,4,6,8,10,12 |Lig/ml. - Tiến hành đo quang ở bước sóng 260 nm, mẫu trắng là nước tinh khiết. Thí nghiệm được tiến hành 5 lần, lấy kết quả trung bình. 21 - Từ kết quả thu được, xây dựng đường chuẩn biểu thị mối tương quan giữa mât độ quang và nồng độ ketoproíen trong các dung dịch tương ứng. Bảng 2.1: Sự phụ thuộc giữa độ hấp thụ và nồng độ keto ở &=260 nm c 2,01 4,02 6,03 8,04 10,05 12,06 0.1266 0.2566 0.3858 0.5198 0.6602 0.7932 (|xg/ml) Độ hấp thụ 1 ? 0 .8 c © \o s 0.6 % 0.4 1 :; ^ \ 0,9995, đảm bảo độ chính xác của phương pháp đo quang. Dùng phương trình hồi quy y= 0,0664x 0,0095 để xác định nồng độ ketoproíen. 22 2.2.I.2. Khảo sát độ hoà tan của ketoprofen nguyên liệu Tiến hành thử độ hoà tan của ketoproíen nguyên liệu theo mục 2.1.3.4 với khối lượng chính xác khoảng 25 mg. Tiến hành 3 lần, lấy kết quả trung bình, kết quả được trình bày trong bảng 2.2. Bảng 2.2: Độ hoà tan ketoproýen Thời gian 5 10 15 20 30 45 21,6 28,5 36,8 42,3 52,7 62,3 (phút) % keto hoà tan 100 G /eođ 4—» c & Ọ I ọ \ ^ I ^ I I I 0 ^ 0 T 10 I--------------------------------- 1--------------------------------- r ------------------------------- ! 20 30 40 50 í I Thời gian (phút) Hình 2.5: Đồ thị biểu diễn tốc độ hoà tan của ketoproýen Nhận xét: Dựa vào đồ thị ta thấy, tốc độ hoà tan của ketoproíen rất chậm, sau 5 phút hoà tan được 21,6% tương ứng với 10,2 mg; sau 45 phút được 62% tương ứng với 15,8 mg. Điều này phù hợp với tính chất của ketoprofen là rất ít tan, sơ nước [12] (Theo Hứa Thanh Thuỷ độ tan trong nước là 0,13 mg/ml [6]). 23 2.2.1.3. Khảo sát độ hoà tan của viên ketoprofen đối chiếu (viên nang ProfenỉdR50 mg) Hiện nay trên thị trường, dạng thuốc viên ketoproíen chỉ có viên nang cứng 50 mg, không có dạng viên nén và chế phẩm nào thuộc loại viên rã nhanh hoặc hoà tan nhanh. Vì vậy, để so sánh về độ hoà tan dược chất, chúng tôi chọn viên nang cứng 50 mg làm viên đối chiếu (chế phẩm ProfenidR50 mg). Thử hoà tan viên nang ketoprofen 50 mg, mục 2.1.3.4, tiến hành 3 lần, lấy kết quả trung bình. Kết quả trình bày trong bảng 2.3. Bảng 2.3: Độ hoà tan của viên đối chiếu Profenỉd 50mg Thời gian 5 10 15 20 30 45 4,3 5,1 6,0 8,1 11,1 13,5 (phút) % hoà tan 100 3 80 /C3 1 60 o Oh 40 p ! ; 0 4----------,---------- ,----------,---------- T ----------, 0 10 20 30 40 I 50 Thời gian (phút) Hình 2.6: Đồ thị biểu diễn tốc độ hoà tan dược chất của viên đôi chiếu (Pro/enid 50mg) 24 Nhận xét: Kết quả trong bảng 2.3 và hình 2.6 cho thấy, sau 5 phút, tỷ lệ ketoprofen hoà tan là 4,3% tương ứng với 2,2 mg; sau 45 phút được 13,5% tương ứng với 6,8 mg. Như vậy, có thể thấy viên đối chiếu có độ hoà tan dược chất rất thấp. 4vtVỊ vit 2.2.2. Xây dựng công thức viên đông khô ketoproĩen 25 mg -------------------------------------------------2.2.2.1. Khảo sát tá dươc dính trong viên đông khô Chúng tôi khảo sát 2 loại gelatin và polyvinylpirolidon (PVP) với vai trò tá dược dính cho viên đông khô. Viên đông khô được bào chế bằng hỗn dịch 25 mg ketoproíen và aerosil 200 phân tán trong dung dịch gelatin (PVP) tương ứng, theo mục 2.1.3.1. Tá dược nào tạo viên có khả năng tróc vỉ, viên đảm bảo độ bền cơ học khi tách ra khỏi vỉ sẽ được lựa chọn làm tá dược dính cho viên đông khồ. Bảng 2.4: Ảnh hưởng của tá dược dính tới tính chất vđk ketoprofen Công thức Ketoprofen Gelatin PVP Aerosil KN tróc vỉ Cảm quan 1 25 20 0 8 + Viên chắc 2 25 20 0 7 + Viên chắc 3 25 20 0 6 + Viên chắc 4 25 15 0 7 + Viên chắc 5 6 7 8 25 25 25 25 15 0 0 5 10 6 6 7 7 + + ± 9 10 11 25 25 25 Thành phần (mg/viên) Đánh giá Viên chác 10 Viên co 10 Viên bở 5 Viên xốp,bở 0 20 Viên bông 8 0 15 8 Viên xốp 0 15 8 Viên xốp (Ghi c lú: +: tróc vỉ, không tróc vỉ,±: hơi dính vỉ.) — - - - 25 Nhận xét: Khi thay đổi tá dược dính, gelatin có tác dụng hình thành viên chắc, có độ bền cơ học cao còn PVP tạo viên xốp, dễ vỡ, khó tróc vỉ. Măt khác, viên có chứa PVP có khả năng hút ẩm trở lại nhanh, làm cho viên chảy nhão, không thể sử dụng làm tá dược cho viên đông khô. Có thể giải thích, khi mất nước kết tinh gelatin có khả năng liên kết mạnh hơn PVP và các tá dược dính khác, điều này cho phép tạo cho viên có độ chắc, và độ bền thích hợp cho viên đông khô. Ngoài ra, gelatin khi được làm khô trở lại thì khó hút nước hơn các tá dược dính khác, có thể bảo quản trong thời gian dài hơn [1]. Kết quả trong bảng 2.4 cho thấy, khi sử dụng gelatin với tỷ lệ lớn làm tăng độ bền cho viên. Tuy nhiên, với mục đích bào chế viên hoà tan nhanh, viên càng chắc sẽ kéo dài thời gian rã của viên. Từ đó làm giảm tốc độ, mức độ tiếp xúc của dược chất với môi trường, làm giảm tốc độ hoà tan. Trên cơ sở những mẫu viên đạt về cảm quan và khả năng tróc vỉ, tiến hành thử độ rã theo mục 2.1.3.2, tiến hành 2 lần, lấy kết quả trung bình. Kết quả ghi trong bảng 2.5. Bảng 2.5: Thòi gian rã của viên có sử dụng gelatin với tỷ lệ khác nhau Công thức 1 2 3 4 5 Thời gian rã 245 203 145 52 36 (giây) \ 250] I 200 : 1501 100 50 ■ 0 CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 Hình 2.7: Đồ thị so sánh thời gian rã của viên có tỷ lệ gelatin khác nhau 26 Nhận xét: Qua bảng 2.4, 2.5 và hình 2.7 ta thấy, với thành phần gelatin thay đổi, thời gian rã của viên đông khô thay đổi: tăng tỷ lệ gelatin làm tăng thời gian rã của viên, viên chứa 20 mg gelatin có thời gian rã lớn hơn 120 giây, viên chứa 15 mg gelatin thời gian rã giảm xuống dưới 60 giây. Kết quả này phù hợp với nghiên cứu của I. s. Ahmed, viên đông khô sử dụng gelatin với tỷ lệ là 20 mg/viên [8]. Khi sử dụng aerosil với lượng trên 5mg, thời gian rã tăng khi tăng tỷ lệ aerosil. Vì vậy, lựa chọn tỷ lệ aerosil thấp nhất trong thành phần viên đông khô. Kết quả khảo sát cho thấy, CT5 chứa 15 mg gelatin & 6 mg aerosil phù hợp yêu cầu, thời gian rã 36 giây, được lựa chọn cho các thí nghiệm tiếp theo. 22.2.2. Ảnh hưởng của tá dươc trơn Đối với viên đông khô, hình thức cũng như khả năng tróc vỉ của viên là yếu tố cần được đặc biệt quan tâm. Nếu như không đảm bảo về mặt cảm quan, dạng thuốc không thể đưa vào sử dụng. Vì lý do đó, tá dược trơn (chống dính vỉ) được khảo sát trên 2 tiêu chí: chống dính vỉ và không làm tăng thời gian rã của viên. Tiến hành bào chế viên đông khô theo thành phần trong bảng 2.6, mục 2.1.3.1. Khảo sát tính tróc vỉ, cảm quan, thử độ rã của viên theo muc 2.1.3.2. Kết quả ghi trong bảng 2.6. Bảng 2.6: Ảnh hưởng của tá dược trơn tới tính chất của viên đông khô Công thức 12 13 14 15 16 17 18 Ketoproíen 25 25 25 Thành phần Gelatin Aerosil 2 15 4 15 15 6 25 25 15 15 25 25 15 15 0 0 2 4 27 Talc 0 0 0 5 10 Đánh giá Tróc VI Trã (s) ± 28 ± 35 + 44 ± 56 rp X ± ± ± 9 71 64 5 5 78 (Ghi chú: +: tróc vỉ, ±: hơi dính vỉ.) Nhận xét: Kết quả trong bảng 2.5 và 2.6 cho thấy viên sử dụng aerosil làm tá dược chống dính với tỷ lệ từ 6-8 mg có khả năng chống dính vỉ tốt hơn bột talc. Phối hợp aerosil và talc không cải thiện được khả năng chống dính của viên. Kết quả này phù hợp với tỷ lệ của 2 tá dược trơn trong viên nén (aerosil 0,5-1%, talc 3%), có thể do aerosil có tỉ trọng nhỏ hơn talc. Tuy nhiên, khi tăng tỉ lệ aerosil lên tới 8 mg sẽ làm tăng thời gian rã, không phù hợp với mục đích chế tạo viên hoà tan nhanh. Chúng tôi chọn tỷ lệ aerosil là 6 mg cho các thí nghiệm sau. 2 2 .2 3 . Ảnh hưởng của tá dược làm tăn ợ đảJmà-tan ketopro/en Tiến hành bào chế viên đông khô với các thành phần ketoproíen, gelatin, aerosil cố định, thay đổi thành phần tá dược làm tăng độ hoà tan là glycin, Ị3-cyclodextrin (P-CD) và hydroxypropyl (3-cyclodextrin (HP P-CD) với hàm lượng tăng dần từ 10-40 mg. Đánh giá độ hoà tan dược chất từ viên đông khô, so sánh với viên đối chiếu và nguyên liệu. > Vớip-CD Tiến hành bào chế theo mục 2.2.1.1, thành phần viên đông khô được ghi trong bảng 2.7. Bảng 2.7: Thành phần viên đông khô chứa Ị3-CI) (đơn vị:mg/viên) CT Ketoprofen Gelatin Aerosil P-CD Sorbitol KL viên 19 25 15 6 10 10 66 20 25 15 6 20 20 86 21 25 15 6 25 25 96 22 25 15 6 40 86 23 25 15 6 50 96 Quan sát về cảm quan, định lượng theo mục 2.1.3.3 và thử hoà tan theo mục 2.1.3.4, mỗi mẫu thử 3 lần, lấy kết quả trung bình. Kết quả ghi trong bảng 2.8. 28 _ 9 ^ _ _ _ _ _ _ Bảng 2.8: Anh hưởng của ỊỈ- CD đến độ hoà tan ketoproýen vđk Công Cảm Định thức quan lượng 5 10 15 20 30 45 19 Đạt 99,6% 81,6 92,0 95,6 96,4 96,5 96,5 20 Đạt 97,5% 63,7 71,5 76,5 79,1 82,0 85,8 21 Đạt 98,2% 63,6 69,4 74,9 76,9 81,5 82,2 22 Không 99,1% 61,4 70,4 79,1 83,9 88,0 92,2 23 Không 98,7% 62,1 69,5 74,6 79,1 81,9 84,8 Tỷ lệ % ketoproíen hoà tan/vđk.(thời gian:phút) Từ kết quả thử độ hoà tan, vẽ đồ thị biểu diễn tốc độ hoà tan dược chất từ viên đông khô, hình 2.8. 100 I ; C T19 80 1 ■o— C T 2 0 -à— C T 21 G 60 ầ I C T22 40 1 CT23: ĩì Ị I I ^ 2 0 -Ị VĐC -+-NL I I 0 '' 0 10 20 30 40 50 Thời gian (phút) Hình 2.8: Đồ thị biểu diễn tốc độ hoà tan ketoprofen/viên đông khô sử dụng P-CĐ Nhận xét: từ bảng 2.8 và hình 2.8 cho thấy, khi thay đổi tỷ lệ P-CD trong viên hoà tan nhanh ketoproíen, cảm quan cũng như khả năng cải thiện độ tan có 29 thay đổi. Khi tăng hàm lượng Ị3-CD (CT 22, 23), không những không cải thiện được khả năng hoà tan dược chất mà còn làm cho viên trở nên bông xốp, không đạt về khả năng tróc vỉ. Kết quả này phù hợp với lý thuyết, khả năng cải thiện độ hoà tan của P-CD thấp hơn các dẫn chất vô định hình khác như HEp-CD, MeP-CD. Theo nghiên cứu của M. Cirri khả năng cải thiện độ tan của flurbiprofen từ HPTR chứa Ị3-CD theo phương pháp đông khô là 16 lần, thấp hơn rất nhiều so với MeP-CD, tỷ lệ này là 120 lần [14]. Sự có mặt của sorbitol (CT19,20,21) làm cho viên tróc vỉ tốt hơn, đồng thời không ảnh hưởng đến độ hoà tan ketoproíen trong viên. Nhận thấy, CT 19 chứa 10 mg P-CD và 10 mg sorbitol cho phép cải thiên độ hoà tan dược chất tốt nhất trong các công thức có sử dụng P-CD. > Với glycin Chúng tôi khảo sát ảnh hưởng của glycin đến độ hoà tan của ketoprofen/viên đông khô. Tiến hành bào chế viên đông khô ketoproíen hoà tan nhanh có thành phần ghi trong bảng 2.9, mục 2.1.3.1. Bảng 2.9: Thành phần viên đông khô sử dụng glycin với tỷ lệ khác nhau CT Ketoprofen Gelatin Aerosil Glycin Sorbitol KL viên 24 25 15 6 25 25 96 25 25 15 6 20 20 86 26 25 15 6 15 15 76 27 25 15 6 10 10 66 28 25 15 6 5 15 66 29 25 15 6 15 5 66 (Đơn vị: mg/viên). Từ các mẫu viên đông khô này, định lượng theo mục 2.1.3.3, thử độ hoà tan theo mục 2.1.3.4, mỗi phép thử tiến hành 3 lần, lấy kết quả trung bình. Kết quả ghi trong bảng 2.10. 30 9 Bảng 2.10: Anh hưởng của glycỉn đến độ hoà tan ketoprofen/vđk Thời gian (phút) Công Cảm Định thức quan lượng 5 10 15 20 30 45 24 Tốt 99,7% 40,1 46,7 53,4 62,7 66,5 69,4 25 Tốt 98,6% 58,2 61,4 66,2 69,3 74,6 76,8 26 Tốt 99,3% 66,1 72,0 78,7 85,2 90,8 93,5 27 Tốt 99,8% 87,2 92,1 93,8 95,6 95,6 96,5 28 Vàng 99,5% 65,0 70,0 76,0 82,5 91,1 93,5 29 Tốt 100,1% 65,0 78,1 85,5 87,9 92,3 94,1 CT24 -°—CT25 CT26 -X- CT27 -*-CT28 lị -*—CT29 I H— VĐC I — NL c c So sánh ảnh hưởng của P-CD, glycin và HPỊ3-CD tới độ hoà ta của ketoprofen/vđk hoà tan nhanh. Bào chế viên đông khô có thành phần ghi trong bảng 2.11, theo muc 2.1.3.1. Bảng 2.11: Công thức của viên đông khô sử dụng P-CD, glycin và HP fi-CD CT Ketoprofen Gelatin Aerosil 19 25 15 6 27 25 15 6 30 25 15 6 31 25 15 6 P-CD HPP-CD Glycin Sorbitol 10 10 10 10 10 10 20 (Đơn vị: mg/viên) Tiến hành định lượng và thử độ hoà tan viên đông khô theo mục 2.1.3.3 và 2.1.3.4 tương ứng, mỗi phép thử tiến hành 3 lần, lấy kết quả trung bình. Kết quả ghi trong bảng 2.12. 32 Bảng 2.12: Độ hoà tan keto/viên đông khô chứa Ị3-CD, glycin và HP /3-CD Tỷ lệ % ketoprofen hoà tan/vđk (thời gian:phút) Công Cảm Định thức quan lượng 5 10 15 20 30 45 19 Tốt 100,3% 81,6 92,0 95,6 96,4 96,5 96,5 27 Tốt 99,6% 87,2 92,6 94,3 95,8 96,3 96,5 30 Tốt 99,3% 82,0 89,3 90,0 91,2 90,0 91,4 31 Tốt 97,9% 55,6 73,8 79,2 82,7 86,4 88,4 100 § /03 o tí rD 80 CT19 CT27 -ù- CT30 CT31 VĐC NL 60 p 5h 40 Q Đánh giá cảm quan, độ rã của viên đông khô hoà tan nhan ketoprofen 25 mg sau quá trình bảo quản Cảm quan của viên đánh giá qua màu sắc, khả năng tróc vỉ của viên, mỗi lần thử với 5 viên bất kỳ. Thử độ rã theo mục 2.1.3.2, tiến hành 2 lần, lấy kết quả trung bình. Kết quả ghi trong bảng 2.13. Bảng 2.13: Đánh giá cảm quan và thời gian rã của viên đông khô CT 27 Thời điểm Cảm quan Thòi gian rã (giây) Ban đầu Viên trắng, tróc vỉ tốt 26 1 tháng Viên trắng, tróc vỉ tốt 25 34 2 tháng Viên trắng, tróc vỉ tốt 26 3 tháng Viên trắng, tróc vỉ tốt 27 Hình 2.11: Biểu đồ biểu diễn thời gian rã của viên đông khô theo CT27 Nhận xét: Kết quả trong bảng 2.13 cho thấy, viên đông khô ketoproíen hoà tan nhanh trước và sau 3 tháng bảo quản trong điều kiện phòng thí nghiệm vẫn giữ được cảm quan, viên trắng và tróc vỉ tốt. Nhìn vào hình 2.11, có thể thấy thời gian rã của viên không có sư tăng giảm đáng kể, dao động trong khoảng 30 giây, khi rã tiểu phân mịn. Như vậy, sau 3 tháng bảo quản trong điều kiện phòng thí nghiệm, viên đông khô vẫn đảm bảo về mặt lý học: cảm quan và thời gian rã không có thay đổi đáng kể. > Kết quả thử độ hoà tan của viên đông khô ketoprofen trước và sau bảo quản Tại các thời điểm trước và sau bảo quản, lấy mẫu để định lượng và thử độ hoà tan viên đông khô ketoproíen hoà tan nhanh. Định lượng viên theo mục 2.1.3.3, thử độ hoà tan viên đông khô theo mục 2.1.3.4, mỗi phép thử tiến hành 3 lần, lấy kết quả trung bình. Kết quả ghi trong bảng 2.14. Từ kết quả thử hoà tan, vẽ đồ thị biểu diễn tốc độ hoà tan keto/vđk, hình 2 . 12. 35 Bảng 2.14: Kết quả thử độ hoà tan của viên đông khô trước và sau bảo quản trong điều kiện phòng thí nghỉệnt Thời Hàm điểm lượng 5 10 15 20 30 45 Ban đầu 99,8% 88,7 93,9 95,4 96,9 97,3 97,8 1 tháng 99,7% 88,9 93,7 96,2 97,1 97,5 97,7 2 tháng 99,9% 88,6 92,7 95,0 95,4 95,8 96,9 3 tháng 99,8% 88,2 92,8 94,9 95,1 95,6 96,0 Tỷ lệ % ketoproíen hoà tan/vđk (thời gian:phút) Thời gian (phút) Bảng 2.12: Đồ thị biểu diễn tốc độ hoà tan keto/vđk hoà tan nhanh Kết quả trong bảng 2.14 và hình 2.11 cho thấy: Sau thời gian bảo quản, hàm lượng ketoprofen/viên đông khô hoà tan nhanh khồng có sự thay đổi đáng kể, sau 3 tháng đạt 99,8%. v ề tốc độ hoà tan của dược chất trong viên đông khô, trước và sau thời gian bảo quản, lượng ketoproíen hoà tan đạt trên 88% trong 5 phút đầu. 36 > Như vậy, sơ bộ có thể kết luận, viên đông khô ketoproíen hoà ta nhanh bào chế theo CT27 vẫn đảm bảo chất lượng nếu bảo quản trong điều kiện tránh ẩm, nhiệt độ 15-35°c. 2.2.3. Quy trình bào chê viên đông khô ketoprofen 25 mg Ngâm, hoà tan td dính/nước Nghiền ketoprofen Nghiền td trơn Hoà tan các td còn lại /nước Rây 0,405 mm Rây 0,18 mm Môi trường phân tán Cân Cân Môi trường phân tán (I) Trộn bột kép (II) Hỗn dịch (bán thành phẩm), khuấy từ Phân phối vào vỉ Đông lạnh Đông khô sơ cấp Sấy thứ cấp SP đóng vào túi PE, bảo quản trong bình hút ẩm ___________________________________________ _________________________________________ (Ghi chú: td: tá dược; sp: sản phẩm; dd: dung dịch) Hình 2.13: Sơ đồ bào chế viên đông khô ketoproýen 25 mg Mỏ tả: - Ngâm trương nở tá dược dính trong khoảng 1/2 lượng nước có trong chế phẩm cho đến khi trương nở hoàn toàn. Đun nóng ở nhiệt độ 60-70°C (trong nồi đung cách thuỷ) đến khi dung dịch hoàn toàn đồng nhất. - Hoà tan các tá dược khác tan được trong nước vào phần nước còn lại, kết hợp với dung dịch tá dược dính tạo thành môi trường phân tán (I). - Nghiền lượng dược chất trong cối, rây qua rây 0,405 mm. Cân vừa đủ lượng dược chất dưới rây. - Nghiền tá dược trơn và rây qua rây 0,18 mm. Cân tá dược trơn vừa đủ. - Trộn bột kép của tá dược trơn và dược chất (II) - Tạo hỗn dịch từ I và II, điều chỉnh thể tích. 37 - Khuấy hỗn dịch bằng khuấy từ, đồng thời phân phối chính xác hỗn dịch vào vỉ, đặt trong khay. - Đông lạnh ở nhiệt độ - 40° c, tốc độ làm lạnh khoảng l°c/phút. - Đưa chế phẩm vào buồng đông khô, duy trì nhiệt độ condensor -45°c, áp suất buồng ngưng 0,1 mbar. Nhiệt độ đông khô sơ cấp khoảng dưới 10°c, nhiệt độ sấy thứ cấp 40-50°C. - Quá trình kết thúc, lấy vỉ ra khỏi khay, đóng túi PE, bảo quản trong bình hút ẩm. 2.2.4. Đánh giá tính chất viên đông khô ketoproĩen 25 mg y Cảm quan: - Viên đông khô phải tróc vỉ, dễ cầm, nắm. Viên màu trắng, bề mặt không co. > Độ rã - Theo mục 2.1.3.2, thời gian rã không được quá 60s. > Phân tích nhiễu xạ tia X B&tsíp Meu K«topiofírr> nhien lieu taw . s ta rt' !0 CíOCi * - Enci 4 3 .3í»Cs * - S iep 0.030 * - Su>p tim«r 0 5 8 - Anocte' Cu - WL1- t 5406 - Creation 5/7/2007 7.12 5 t PM .VTipịte Mau VDK.-ket-No34 raw - start. 10 000 * . En«* 49.890 * - ste p 0 030 “ - st« p tun e 0 7 s - Anođe Cu - w u 1 5406 - Creation 5/7/2007 6 32.25 PM Mau Vmn đoi rh u n g raw • Srarr 10.000 * 49 990 * - s » p 0 03 0 * - s te p » • 0 5 s - Anođo: Cu - WL1 1.5408- Crsation 5/7/2007 6 56 1 1 PM (Ghi chú: :VĐK CT27; : VĐC; □: NL) Hình 2.14: Phổ nhiễu xạ tia X của chế phẩm viên đông khô, viên đối chứng và nguyên liệu 38 Nhận xét: Qua phổ nhiễu xạ tia X của nguyên liệu ketoprofen, có thể thấy dược chất tồn tại chủ yếu ở dạng kết tinh. Phổ của viên đối chiếu có sự gia tăng pick của dược chất, chứng tỏ sự tăng tương ứng trạng thái kết tinh, điều này phù hợp với kết quả thử độ hoà tan của viên đối chiếu, độ hoà tan rất thấp. Phổ của viên đông khô hoà tan nhanh, pick của dược chất giảm đi đáng kể, chứng tỏ ketoprofen chuyển một phần từ trạng thái kết tinh sang vô định hình. Kết quả này phù hợp với nghiên cứu của I. s. Ahmed (2006), trong viên đông khô hoà tan nhanh, dược chất tồn tại chủ yếu ở dạng vô định hình [11]. > Phân tích nhiệt vi sai Nhiệt độ (°C) Hình 2.15: Phổ phân tích nhiệt vi sai (DSC) Nhận xét: Đường cong của keto nguyên liệu có pick thu nhiệt rất rõ ở khoảng 90°c, gần nhiệt độ nóng chảy của keto (94-97°C). Trên đường cong của viên đối chứng, pick mở rộng và dịch chuyển sang bên phải, điều này chứng tỏ trong viên đối chứng trạng thái kết tinh vẫn còn. Với viên đông khô bào chế 39 theo công thức 27, đường cong chỉ còn một pick thu nhiệt rất nhỏ tại khoảng nhiệt độ nóng chảy của keto, thể hiện trạng thái vô định hình của hệ. Điều này phù hợp với kết quả phân tích nhiễu xạ tia X ở trên. Kết quả này phù hợp với nghiên cứu của I. s. Ahmed, trong viên đông khô dược chất chuyển một phần sang trạng thái vô định hình [11]. > Định lượng: - Phương pháp thử: đo quang ở bước sóng 260 nm. - Hàm lượng viên đạt từ 97,5- 102,5%. > Độ hoà tan: - Phương pháp thử : theo mục 2.1.3.4. - Yêu cầu: hoà tan ít nhất 85% dược chất tính theo hàm lượng viên. 40 PHẦN 3: KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUÂT 3.1. Kết luận Sau thời gian nghiên cứu, có thê rút ra một sô kết luận như sau: - Kết quả nghiên cứu cho thấy, có thể sử dụng phương pháp đo quang ở bước sóng 260 nm để định lượng ketoproíen trong viên đông khô, thử hoà tan thành phẩm và bán thành phẩm.. - Từ kết quả nghiên cứu thu được, chúng tôi đề xuất công thức viên đông khô ketoproíen hoà tan nhanh 25 mg như sau: Ketoproíen..................... 25 mg Gelatin...........................15 mg Glycin............................ 10 mg Sorbitol.......................... 10 mg Aerosil...........................6 mg Nước tinh khiết vừa đủ. -Về quy trình bào chế: + Hỗn dịch trước khi đông khô phải đảm bảo: kích thước tiểu phân nhỏ hơn 0,4 mm; khi phân phối hỗn dịch vào vỉ, cần khuấy trộn liên tuc để đảm bảo đồng nhất. + Thông số của quá trình đông khô: Quá trình Thông số Thời gian Đông lạnh tđl=- 40°C; tốc độ l°c/phút 1 giờ Đông khô sơ cấp tcond=-45°C ; áp suất 0,1 mbar 24 giờ Sấy thứ cấp tcond=-45°C ; áp suất 0,1 mbar ; tkhay = 50±5°c 48 giờ - Sau 3 tháng, viên đông khô ổn định trong điều kiện phòng thí nghiệm. Trên cơ sở đó có thể tiếp tục theo dõi để xác định tuổi thọ của chế phẩm. 3.2. Đề xuất - Tiếp tục theo dõi độ ổn định của chế phẩm. - Từng bước hoàn thiện chế phẩm (bao bì, quy trình bào chế, TCCS) để hướng tới ứng dụng trong thực tế sản xuất. 41 TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng Việt 1. Bộ môn bào chế (2002), Kỹ thuật bào chế và sinh dược học các dạng thuốc, NXB Y học, tập 1,2. 2. Bộ Y tế (2002), Dược điển Việt Nam III, NXB Y học, Hà nội. 3. Bộ Y tế (2003), Dược thư quốc gia Việt Nam, NXB Y học, Hà nội. 4. Tào Duy Cần (1999), Tra cứu và sử dụng thuốc và biệt dược nước ngoài, NXB KHKT, Hà nội, quyển 1, tr. 1101. 5. Lê Đình Quang (2007), “Nghiên cứu bào chế viên nén giải phóng nhanh chứa paracetamol và ibuproíen”, Luận văn thạc sĩ dược học khoá 20052007, Trường đại học Dược Hà nội. 6. Hứa Thanh Thuỷ (2006), “Nghiên cứu bào chế thuốc tiêm dung dịch và thuốc tiêm đông khô ketoproíen”, Khoá luận tốt nghiệp dược sĩ đại học khoá 2001-2006, Trường đại học Dược Hà nội. Tài liệu tiếng Anh 7. G. Abdelbary et al. (2005), “Determination of the in vitro disintegration profile of rapidly disintegrating tablets and correlation with oral disintegration”, Int. J. Pharm., 292, p. 29-41. 8. I. s. Ahmed et al. (2006), “Formulation of a fast-dissolving ketoproíen tablet using freeze-drying in blisters technique”, Drug Dev. Ind. Pharm.,32, p. 437-442. 9. Loyd V. Allen (2003), “Rapid-dissolve technology”, Int. J. Pharm., 7, 6, p „ 449-450. 10. M. Adel Aly et al. (2005), “Superdisintegrants for solid dispersion to produce rapidly disintegrating tenoxicam sublimation”, Pharm. Technol., 1, p. 68-78. tablets via camphor 11. L. L. Augsburger (2002), “Super disintegrants: Characterization and íunction”, Encỵ. Pharm. Technol., p. 2626-2638. 12. British Pharmacopoeia CD-ROM (2005). 13. G. H. Bolhuis et al. (1997), "Improvement of dissolution of poorly soluble drugs by solid deposition on a super disintegrant. II. The choice of super disintegrants and effect of granulation", Eur. J. Pharm. Sci., 5, p. 63-69. 14. Mazia Cirri et al. (2005), “Development of fast-dissolving tablets of flurbiprofen-cyclodextrin complexes”, Drug Dev. Ind. Pharm., 31, p. 697-707. 15. Sam Corveleyn et al. (1997), “Formulation and production of rapidly disintegrating tablets by lyophilisation using hydrochlorothiazide as model drug”, Int. J. Pharm., 152, p. 215-225. 16. Van Drooge et al. (2004), “Incorporation of lypophylic drugs in sugar glasses by lyophylization using a mixture of water and tertiary butyl alcohol as solvent”, J. Pharm. Sci., 93 , 3 , p. 713-725. 17. Jinichi Fukami et al. (2005), “Evaluation of rapidly disintegrating tablets containing glycin and carboxymethylcellulose”, Int. J. Pharm., 310, p. 101-109. 18. Noriyuki Hirasawa et al. (2004), “Application of nilvadipine solid dispersion to tablet formulation and manufacturing using crospovidone and methylcellulose as dispersion carriers”, Chem. Pharm. Bull.,52, 2, p. 244-247. 19. A. H. Kibble (2005), “Handbook of pharmaceutical excipients”, Pharmaceutical Press. 20. Keichi Koizumi et al. (2006), “New method of preparing high-porosity rapidly saliva soluble compressed tablets using mannitol with camphor, a subliming material”, Int. J. Pharm. BulL, 44, 11, p. 2121-2127. 21. Yoshio Kuno et al. (2005), “Evaluation of rapidly disintegrating tablets manuíactured by phase transition of sugar-alcohols”, /. Control Rel., 105, p. 16- 22. 22. XuHong Li, Steve Nail (2005), "Kinetics of glycin crystallization during freezing of sucrose/ glycin excipient systems", J. Pharm. Sci., 94, 3, 625631. 23. Walter Lund (1994), “The pharmaceutỉcal codex’\ The Pharmaceutical Press, p. 933-936. 24. Maheshwari Manish et al (2005), “Melt sonocrystallization of ibuproíen: Effect on crystal properties”, Eur. J. Pharm. Sci., 25, p. 41-48. 25. Takao Mizumoto et al. (2005), “Formulation design of a novel fastdisintegrating tablet”, Int. J. Pharm., 306, p. 83-90. 26. A. K. Overhoff et al. (2007), “Novel untra-rapid freezing particle engineering process for enhancement of dissolving rates of poorly watersoluble drugs”, Eur. J. Pharm. Biopharm., 65, p.57-67. 27. Tetsuya Ozeki et al. (2003), “Design or rapidly disintegrating oral tablets using acid-treated cell wall: A technical note”, AAPS Pharm. Scỉ. Technol., 4, 4, Article 70. 28. William. R. Pfister and Tapash K. Ghosh (2006), “Orally disintegating tablets: products, technologies, and development issues”, Pharm. Technol. Asia, Apr/2006, p. 28- 33. 29. M. J. Pikal (2002), “Freeze-drying”, Ency. Pharm. Technoỉ.,ỹ. 12991326. 30. Li Que et al. (2006), “Evaluation of dissintegrating time of rapidly disintegating tablets by a paddle method”, Pharm. Dev. Technol., 11, p. 295- 301. 31. L. Rey (2004), “The sega of freeze-drying”, Pharm. Technol., p. 5-8. 32. Yusuke Shibata et al. (2006), “Fluidity and tableting characteristics of a powder solid dispersion of the low melting drugs ketoproíen and ibuproíen with crospovidon”, DrugDev. Ind. Pharm., 32, p. 449- 456. 33. Masaaki Sugimoto et al. (2001), “The preperation of rapidly disintegrating tablets in the mouth”, Pharm. Dev. TechnoL, 6, 4, p. 487493. 4 [...]... kỹ thuật đông khô đã được áp dụng trên quy mô sản xuất với dạng thuốc tiêm Tuy nhiên, ngoài những ưu điểm trên, kỹ thuật đông khô có những nhược điểm: - Đòi hỏi thiết bị đặc biệt - Quá trình đông khô tốn thời gian và có nhiều thao tác thủ công - Sản phẩm đông khô có giá thành cao 1.4.2 Quá trình đông khô Quá trình đông khô gồm 3 giai đoạn: đông lạnh, sấy sơ cấp, sấy thứ cấp [29], [31] - Giai đoạn đông. .. tương ứng với 6,8 mg Như vậy, có thể thấy viên đối chiếu có độ hoà tan dược chất rất thấp 4vtVỊ vit 2.2.2 Xây dựng công thức viên đông khô ketoproĩen 25 mg -2.2.2.1 Khảo sát tá dươc dính trong viên đông khô Chúng tôi khảo sát 2 loại gelatin và polyvinylpirolidon (PVP) với vai trò tá dược dính cho viên đông khô Viên đông khô được bào chế bằng hỗn dịch 25 mg ketoproíen và aerosil... bào chế viên đỏng khỏ Dược chất ít tan và sơ nước được pha chế dưới dạng hỗn dịch, sau đó phân liều vào vỉ (thường là vỉ PVC), tiến hành đông khô Viên được bào chế bằng phương pháp này thường có ưu điểm rã nhanh, đảm bảo độ bền cơ học, ổn định đồng thời tốc độ giải phóng nhanh hơn dạng viên nén, viên nang thông thường s Corveleyn (1997) đã nghiên cứu bào chế viên hydroclorothiazid rã nhanh bằng phương... được cấp cho sản phẩm để loại bỏ hoàn toàn nước (không được đông lạnh và nước hấp phụ trên bề mặt tinh thể Giai đoạn này thường kéo dài, đến khi chế phẩm đạt độ ẩm tương đối khoảng 1% thì kết thúc 1.4.3 ứng dụng của đông khô vào công nghệ bào chế viên rã nhanh, hoà tan nhanh Với xu hướng phát triển dạng bào chế viên nén giải phóng nhanh, kỹ thuật đông khô đã được ứng dụng để cải thiện khả năng hoà tan... Thử độ rã của viên đông khô Theo phương pháp “Thử độ rã của viên nén và viên nang thông thường” của DĐVN III [2] - Môi trường: 900 ml nước cất - Nhiệt độ: 37°c± 0,5 - Thiết bị thử độ rã quy định trong DĐVN III - Thời gian rã tính từ lúc cho viên thử vào đến khi 6 viên thử rã hoàn toàn 2.1.3.3 Định lượng ketoprofen trong viên đông khô Hàm lượng ketoprofen trong viên đông khô được xác định bằng phương... phần (mg /viên) Đánh giá Viên chác 10 Viên co 10 Viên bở 5 Viên xốp,bở 0 20 Viên bông 8 0 15 8 Viên xốp 0 15 8 Viên xốp (Ghi c lú: +: tróc vỉ, không tróc vỉ,±: hơi dính vỉ.) — - - - 25 Nhận xét: Khi thay đổi tá dược dính, gelatin có tác dụng hình thành viên chắc, có độ bền cơ học cao còn PVP tạo viên xốp, dễ vỡ, khó tróc vỉ Măt khác, viên có chứa PVP có khả năng hút ẩm trở lại nhanh, làm cho viên chảy... tích Sartorius BP 2151 - Cân kỹ thuật - Nồi đun cách thuỷ - Tu sấy - Chày, cối, rây - Bình hút ẩm Và một số thiết bị khác 2.1.3 Phương pháp thực nghiệm 2.1.3.1 Phương pháp bào chế viên đông khô > Công thức cơ bản của viên đồng khô ketoprofen: - Ketoprofen 25 mg - Tá dược vừa đủ 15 > Sơ đồ bào chế viên đông khô ketoproíen Ketoproíen, tá dược I Hỗn dịch (bán thành phẩm) ị Đông lạnh (Nhiệt độ -40°c, tốc... Khảo sát độ hoà tan của viên ketoprofen đối chiếu (viên nang ProfenỉdR50 mg) Hiện nay trên thị trường, dạng thuốc viên ketoproíen chỉ có viên nang cứng 50 mg, không có dạng viên nén và chế phẩm nào thuộc loại viên rã nhanh hoặc hoà tan nhanh Vì vậy, để so sánh về độ hoà tan dược chất, chúng tôi chọn viên nang cứng 50 mg làm viên đối chiếu (chế phẩm ProfenidR50 mg) Thử hoà tan viên nang ketoprofen 50... dược chất tốt nhất trong các công thức có sử dụng P-CD > Với glycin Chúng tôi khảo sát ảnh hưởng của glycin đến độ hoà tan của ketoprofen /viên đông khô Tiến hành bào chế viên đông khô ketoproíen hoà tan nhanh có thành phần ghi trong bảng 2.9, mục 2.1.3.1 Bảng 2.9: Thành phần viên đông khô sử dụng glycin với tỷ lệ khác nhau CT Ketoprofen Gelatin Aerosil Glycin Sorbitol KL viên 24 25 15 6 25 25 96 25... 22.2.2 Ảnh hưởng của tá dươc trơn Đối với viên đông khô, hình thức cũng như khả năng tróc vỉ của viên là yếu tố cần được đặc biệt quan tâm Nếu như không đảm bảo về mặt cảm quan, dạng thuốc không thể đưa vào sử dụng Vì lý do đó, tá dược trơn (chống dính vỉ) được khảo sát trên 2 tiêu chí: chống dính vỉ và không làm tăng thời gian rã của viên Tiến hành bào chế viên đông khô theo thành phần trong bảng 2.6, mục ... xu nghiên cứu bào chế nay, thực đề tài Nghiên cứu xây dựng công thức viên ketoprofen hoà tan nhanh kỹ thuật đông khô với mục tiêu sau đây: - Xây dựng công thức viên ketoproíen hoà tan nhanh kỹ. .. bào chế viên hoà tan nhanh, tăng sinh khả dụng, kỹ thuật đông khô phát triển thêm bước nữa, nghiên cứu bào chế viên rã nhanh, hoà tan nhanh Với phát triển không ngừng khoa học kỹ thuật, công nghệ... nguyên liệu 20 2.2.2 Xây dựng công thức viên đông khô ketoproíen 25 mg 25 2.2.3 Quy trình bào chế viên đông khô ketoprofen 25 mg 37 2.2.4 Đánh giá tính chất viên đông khô ketoproíen 25 mg