TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y  TĂNG MỸ TIÊN TÌNH HÌNH NHIỄM VI KHUẨN VIBRIO SPP TRÊN ỐC BƢƠU Ở MỘT SỐ CHỢ THUỘC QUẬN NINH KIỀU THÀNH PHỐ CẦN THƠ Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành: THÚ Y Cần Thơ, tháng 12/2013 TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y  Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành: THÚ Y TÌNH HÌNH NHIỄM VI KHUẨN VIBRIO SPP TRÊN ỐC BƢƠU Ở MỘT SỐ CHỢ THUỘC QUẬN NINH KIỀU THÀNH PHỐ CẦN THƠ Cán hướng dẫn: ThS Nguyễn Thu Tâm Sinh viên thực hiện: Tăng Mỹ Tiên MSSV: 3092643 Lớp: Thú y K35 Cần Thơ, tháng 12/2013 TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MƠN THÚ Y  Đề tài: “Tình hình nhiễm vi khuẩn Vibrio spp ốc bƣơu số chợ thuộc quận Ninh Kiều, Thành phố Cần Thơ” sinh viên Tăng Mỹ Tiên thực phòng Vi sinh-Miễn dịch Thú Y, môn Thú Y, khoa Nông nghiệp & Sinh học ứng dụng, trƣờng Đại học Cần Thơ, từ tháng 8/2013 đến tháng 12/2013 Cần Thơ, ngày…tháng…năm 2014 Cần Thơ, ngày…tháng…năm 2014 Duyệt Bộ môn Duyệt Cán hƣớng dẫn Cần Thơ, ngày….tháng….năm 2014 Duyệt Khoa Nông nghiệp Sinh học ứng dụng i LỜI CẢM ƠN Trong suốt khoảng thời gian xa nhà để học tập rèn luyện giảng đƣờng trƣờng Đại Học Cần Thơ, tơi đƣợc gia đình, thầy cơ, bạn bè giúp đỡ, động viên trang bị cho hành trang q báu để tơi tự tin học tập nhƣ vững tin bƣớc vào đời Ngay giây phút đây, tơi hồn thành xong luận văn tốt nghiệp chuyên ngành Thú Y mình, tơi vơ vui sƣớng khơng biết nói ngồi việc bày tỏ lịng biết ơn đến ngƣời bên tơi, quan tâm, chăm sóc, hỗ trợ, giúp đỡ động viên tơi suốt thời gian vừa qua Trƣớc hết, xin kính gửi lời cám ơn sâu sắc đến ba mẹ-ngƣời có cơng sinh thành, dƣỡng dục con, ln đặt niềm tin hy vọng vào nơi để có đƣợc ngày hôm Cám ơn ba, mẹ không ngại lao động vất vả để lo cho đƣợc đầy đủ vật chất lẫn tinh thần, để lấy làm động lực vƣợt qua lúc khó khăn khơng có ba mẹ bên cạnh Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc đến Nguyễn Thu Tâm, ngƣời tận tình hƣớng dẫn, giúp đỡ tơi hồn thành luận văn Cơ cố vấn học tập, ngƣời theo sát, tƣ vấn, chia sẻ động viên suốt năm dài đại học Tôi xin chân thành gửi lời cảm ơn đến q thầy Bộ mơn Thú Y nói riêng, nhƣ quý thầy cô Khoa Nông Nghiệp & Sinh học Ứng Dụng toàn thể Ban Giám Hiệu trƣờng Đại Học Cần Thơ nói chung tận tình giảng dạy, tạo điều kiện thuận lợi cho học tập suốt năm giảng đƣờng Chân thành cảm ơn tất bạn lớp Thú Y K35 đồng hành suốt năm học qua nhiệt tình giúp đỡ, động viên tơi nhiều để tơi hồn thành tốt đề tài Cuối xin gửi lời cảm ơn đến quý thầy cô Hội Đồng Giám Khảo dành thời gian quý báu để đọc đề tài tôi, nghe báo cáo đƣa nhận xét để tơi hồn thiện đề tài TĂNG MỸ TIÊN ii MỤC LỤC Trang duyệt i Lời cảm ơn ii Mục lục iii Danh mục bảng v Danh mục hình vi Danh mục sơ đồ vii Danh mục chữ viết tắt viii Tóm lƣợc ix CHƢƠNG 1: ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG 2: CƠ SỞ LÝ LUẬN 2.1 Lịch sử nghiên cứu vi khuẩn Vibrio spp giới Việt Nam 2.1.1 Trên giới 2.1.2 Ở Việt Nam 2.2 Giới thiệu vi khuẩn Vibrio spp 2.2.1 Phân loại vi khuẩn Vibrio spp phân bố 2.2.1.1 Phân loại vi khuẩn Vibrio spp 2.2.1.2 Phân bố 2.2.2 Đặc điểm hình thái vi khuẩn Vibrio spp 2.2.2.1 Đặc điểm chung vi khuẩn Vibrio spp 2.2.2.2 Đặc điểm riêng loài vi khuẩn Vibrio spp 10 2.2.3 Đặc tính ni cấy vi khuẩn Vibrio spp 12 2.2.4 Đặc tính sinh hóa vi khuẩn Vibrio spp 13 2.2.5 Cấu tạo kháng nguyên vi khuẩn Vibrio spp 14 2.2.6 Sức đề kháng vi khuẩn Vibrio spp 14 2.2.7 Độc tố vi khuẩn Vibrio spp 15 2.2.7.1 Yếu tố độc lực vi khuẩn V cholerae 15 2.2.7.2 Yếu tố độc lực vi khuẩn V parahaemolyticus 17 2.3 Đặc điểm sinh học ốc bƣơu (Pila polita (Deshayes, 1830)) 18 2.3.1 Hình thái 18 2.3.2 Tập tính sống 19 2.3.3 Đặc điểm giá trị dinh dƣỡng 19 2.3.4 Phân bố môi trƣờng sống 20 2.3.5 Đặc điểm sinh sản 20 2.4 Sơ lƣợc bệnh dịch tả gây ngƣời 21 2.4.1 Tác nhân gây bệnh dịch tả 21 2.4.2 Nguồn bệnh dịch tả 21 2.4.3 Cơ chế gây bệnh dịch tả 22 2.4.4 Cách lây lan bệnh dịch tả 23 2.4.5 Triệu chứng bệnh dịch tả 24 2.4.6 Chẩn đoán vi khuẩn học vi khuẩn V cholerae 25 2.4.7 Phòng bệnh dịch tả 25 2.5 Một số nghiên cứu nhạy cảm vi khuẩn Vibrio spp số loại kháng sinh 26 CHƢƠNG 3: PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 28 3.1 Phƣơng tiện thí nghiệm 28 iii 3.1.1 Thời gian, địa điểm 28 3.1.2 Thiết bị dụng cụ 28 3.1.3 Mơi trƣờng hóa chất 28 3.1.4 Kháng sinh 28 3.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 29 3.2.1 Nội dung 29 3.2.2 Phƣơng pháp lấy mẫu 29 3.2.3 Phƣơng pháp phân tích mẫu 29 3.2.4 Phƣơng pháp định danh chủng vi khuẩn Vibrio spp 35 3.2.5 Phƣơng pháp làm kháng sinh đồ 35 3.2.6 Phƣơng pháp xử lý số liệu 36 CHƢƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 37 4.1 Kết nuôi cấy phân lập vi khuẩn Vibrio spp ốc bƣơu 37 4.2 Khảo sát tỷ lệ nhiễm vi khuẩn Vibrio spp ốc bƣơu theo địa điểm lấy mẫu 37 4.3 Kết định danh số loài vi khuẩn Vibrio spp ốc bƣơu phản ứng sinh hóa 38 4.4 Kết kiểm tra tính nhạy cảm kháng sinh vi khuẩn Vibrio spp 39 CHƢƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 41 5.1 Kết luận 41 5.2 Đề nghị 41 TÀI LIỆU THAM KHẢO 42 PHỤ CHƢƠNG 46 iv DANH MỤC BẢNG Bảng Nội dung Trang So sánh khả gây bệnh nhóm phẩy khuẩn tả 10 Biểu lâm sàng bệnh nhiễm trùng gây loài vi khuẩn Vibrio spp Type huyết thành phần kháng nguyên vi khuẩn Vibrio spp Thành phần dinh dƣỡng 100g ốc bƣơu ăn đƣợc Đặc tính sinh hóa số lồi vi khuẩn Vibrio spp 35 Bảng tiêu chuẩn đƣờng kính vịng vơ khuẩn kháng sinh 36 Tỷ lệ nhiễm vi khuẩn Vibrio spp ốc bƣơu 37 Khảo sát tỷ lệ nhiễm vi khuẩn Vibrio spp ốc bƣơu theo địa điểm lấy mẫu Kết định danh tỉ lệ nhiễm số loài vi khuẩn Vibrio spp ốc bƣơu Kết kiểm tra tính nhạy cảm kháng sinh vi khuẩn Vibrio spp phân lập đƣợc 37 10 v 14 20 38 39 DANH MỤC HÌNH Trang 17 18 Nội dung Tình hình dịch tả giới qua giai đoạn Cơ chế gây bệnh độc tố cholera toxin Ốc bƣơu Pila polyta Khuẩn lạc vi khuẩn Vibrio spp bắt màu vàng môi trƣờng TCBS Khuẩn lạc vi khuẩn Vibrio spp bắt màu xanh mơi trƣờng TCBS Vi khuẩn Vibrio spp âm tính thử nghiệm oxidasemàu xanh tím) Vi khuẩn Vibrio spp âm tính thử nghiệm oxidase Kết thử nghiệm sinh hóa vi khuẩn V cholera Sự nhạy cảm vi khuẩn Vibrio spp với số loại kháng sinh 40 Hình vi 30 30 32 32 38 DANH MỤC SƠ ĐỒ Sơ đồ Nội dung Tóm tắt chế gây bệnh vi khuẩn Quá trình lây bệnh dịch tả Quy trình ni cấy phân lập vi khuẩn Vibrio spp vii Trang 23 24 31 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT Chữ viết tắt Chữ viết đầy đủ CDC Centers for Disease Control and Prevention CLSI Clinical and Laboratory Standards Institute CT Cholera Toxin TCP Toxin-Coregulated Pilus Zot Zonula occludens toxin Ace Accessory cholerae enterotoxin VIP Vibrio cholera Pathogenicity Island Tdh Thermolabile hemolysin Trh GM1 Related hemolysin Ganglioside NAD Nicotiamide Adenine Dinucleotide ADP Adenosine Diphosphate Camp Cyclic Adenosine Monophosphate TDH Thermostable Direct Hemolysin ASWP Alkaline saline peptone water TCBS Thiosulfate Citrate Bile and Sucrose agar SNA Saline Nutrient Agar MHA Muller Hinton Agar ODC Ornithine Decarboxylase LDC Lysine Decarboxylase ADH Arginine Dihydrolase TSI Triple Sugar Iron agar ONPG O-nitrophenyl-D-galactopyranoside viii 4.4 Kết kiểm tra tính nhạy cảm kháng sinh vi khuẩn Vibrio spp Bảng 10: Kết kiểm tra tính nhạy cảm kháng sinh vi khuẩn Vibrio spp phân lập đƣợc Kí hiệu Tổng số mẫu (mẫu) Norfloxacin Nr Tetracycline Tên kháng sinh Nhạy Trung gian Kháng Số lƣợng (mẫu) Tỷ lệ (%) Số lƣợng (mẫu) Tỷ lệ (%) Số lƣợng (mẫu) Tỷ lệ (%) 23 23 100 0 0 Te 23 23 100 0 0 Amoxicilin Ax 23 15 65,22 34,78 0 Kanamycin Kn 23 12 52,17 39,13 8,7 Trimethoprime/ Sulfamethoxazole Bt 23 22 96,65 4,35 0 Qua bảng 10 cho thấy vi khuẩn V cholera nhạy cảm cao với kháng sinh Norfloxacin (100%), Tetracyline (100%) Trimethoprime/ Sulfamethoxazole (96,65%) Vi khuẩn nhạy cảm trung bình với Amoxicillin (65,22%) nhƣ với Kanamycin (52,17%) Norfloxacin, Trimethoprime/ Sulfamethoxazole Tetracycline có độ nhạy cao với vi khuẩn V cholerae nhóm kháng sinh có tính sát khuẩn có phổ kháng khuẩn rộng Theo Huỳnh Kim Diệu (2010), Norfloxacin thuộc nhóm Quinolones hệ II, kháng sinh đƣợc tổng hợp hồn tồn phƣơng pháp hóa học có tính sát khuẩn cao, phụ thuộc nồng độ nhƣng gây tƣợng chọn lọc chủng vi khuẩn đề kháng Theo nghiên cứu vấn đề kháng kháng sinh vi khuẩn Vibrio spp mà đặc biệt vi khuẩn V cholera đƣợc nhiều tác giả nghiên cứu trƣớc đây, kết cho thấy vi khuẩn đa dạng nhạy cảm loại kháng sinh, tùy thuộc vào thời gian địa điểm nghiên cứu mà kết hầu nhƣ không giống Gần nhất, vi khuẩn V cholera O1 Indonesia đề kháng với Erythoromycin, nhƣng lại nhạy cảm với nhiều loại kháng sinh nhƣ Ampicilin, Ciprofloxacin, Tetracycline, Kanamycin, Norfloxacin, Trimethorprime/Sulfamethoxazole Trong vi khuẩn V cholera phân lập đƣợc Bangladesh vào khoảng thời gian 2002-2008 lại đề kháng với Tetracycline, Ciprofloxacin, Trimethorprime/Sulfamethoxazole, Erythoromycin Furazolindone (Kim ctv, 2010) Kết nghiên cứu phù hợp với với kết thử nghiệm Nguyễn Thị Xuân Trang (2012): vi khuẩn V cholerae nhạy cảm hoàn toàn 39 với Norfloxacin Doxycyline (100%), nhạy cảm với Gentamycin (88,9%) So sánh kết thử nghiệm Li (2003) có 50% loài vi khuẩn Vibrio spp nhạy cảm với Cotrimoxazole, Streptomycin, Trimethoprime Penicillin 100% loài Vibrio spp nhạy cảm với Norfloxacin Meropenem Hình 9: Sự nhạy cảm vi khuẩn V cholerae với số loại kháng sinh (E009) 40 Chƣơng KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Sau tiến hành thí nghiệm phân lập vi khuẩn Vibrio spp ốc bƣơu thu đƣợc kết nhƣ sau: có 23 mẫu dƣơng tính tổng số 81 mẫu, tỷ lệ nhiễm cao (28,4%) Bằng phản ứng sinh hóa đặc biệt xác định đƣợc tất mẫu dƣơng tính với vi khuẩn Vibrio spp V cholera Vi khuẩn V cholera nhạy cảm với Norfloxacin, Tetracycline, Trimethoprime/Sulfamethoxazole nhạy cảm mức độ trung bình Amoxcixilin Kanamycin 5.2 Đề nghị Để đảm bảo vệ sinh an toàn thực phẩm, bảo vệ sức khỏe cho ngƣời, chúng tơi có số ý kiến nhƣ sau:  Giáo dục, tuyên truyền cộng đồng vấn đề vệ sinh an tồn thực phẩm  Khơng nên ăn ốc bƣơu chƣa chế biến kỹ  Cần nghiên cứu thêm lƣu hành vi khuẩn Vibrio spp ốc bƣơu theo mùa Việt Nam  Tiến hành kiểm tra thêm nhiều thủy, hải sản nƣớc mặn, nƣớc khác 41 TÀI LIỆU THAM KHẢO  Tài liệu tiếng Việt Bộ Y tế-Viện dinh dƣỡng, 2000 Bảng thành phần dinh dưỡng thực phẩm Việt Nam NXB Y học Hà Nội Bùi Mạnh Hà (2006) “Ngộ độc thực phẩm cách phòng tránh”, Tạp chí báo niên 06/02/2006 Bùi Quang Tề (2006), Bệnh học thủy sản, Viện nghiên cứu nuôi trồng thủy sản Đặng Đức Trạch, Đỗ Gia Cảnh, Phạm Kim Sắc, Đỗ Thung, Nguyễn Đức Khiển (1993), “Bệnh dịch tả Việt Nam năm gần đây”, Tạp chí Vệ sinh phịng dịch, số 3, trang 50 Đồn Thị Nguyện (2009), Vi sinh vật, NXB giáo dục Việt Nam Đoàn Thị Nguyện Nguyễn Văn Dịp, 2008 Vi sinh vật y học Nhà xuất Y học Lê Thị Oanh (2012), Vi sinh y học, NXB giáo dục Việt Nam Lƣơng Văn Đàm, Nguyễn Bá Cẩn, Hoàng Văn Sinh, Vũ Văn Nhung, 2003 “Một số nhận xét vụ dịch tả Thanh Hoá” Cơng trình nghiên cứu khoa học, Trung tâm Y tế Dự phịng tỉnh Thanh Hố, tr.58-65 Nguyễn Anh Dũng, 1991 “Bệnh tả cơng tác chuẩn bị phịng chống dịch” Tạp chí Vệ sinh phịng dịch, 5(1), tr.3-7 10 Nguyễn Bình Minh, Ngơ Tuấn Cƣờng, Lê Thanh Hƣơng, Nguyễn Hồi Thu (2008), “Đánh giá kít chuẩn đốn nhanh Vibrio cholerae O gây bệnh tả”, Tạp chí Y học dự phịng, 18(2), trang 51-56 11 Nguyễn Cơng Tỷ Nguyễn Duy Phong (2006), Những bệnh miền nhiệt đới thường gặp, NXB y học Hà Nội 12 Nguyễn Đăng Hiền, Nguyễn Thị Mai Hƣơng, Đặng Ngân Hà, 2008 “Nghiên cứu dịch tễ học bệnh tiêu chảy virut Rota Việt Nam từ 2007- 2008” Tạp chí Y học dự phịng, 5(7), tr.19-20 13 Nguyễn Đình Bảng, 1992 Vi khuẩn tả Nhà xuất Đại học Trung học chuyên nghiệp, Hà Nội, tr.169-170 14 Nguyễn Đồng Tú, Ngô Tuấn Cƣờng, Nguyễn Hồi Thu, Lê Thanh Hƣơng, Nguyễn Bình Minh, Đỗ Kim Ninh, Phạm Văn Dịu, Trần Minh Thuỷ, 2008 “Giám sát Vibrio cholerae O1 Vibriophage môi trường nước ngoại cảnh - Các yếu tố dự báo dịch tả” Tạp chí Y học dự phịng, 18(4), tr.13-18 15 Nguyễn Gia Khánh, 2008 “Trẻ em Việt Nam mắc bệnh tiêu chảy cấp đứng thứ Châu Á” Mục Y Tế sức khỏe (sggp.org.Vn/y te suc khoe/2008/10) 16 Nguyễn Khánh Linh (2010), “Vi khuẩn Vibrio cholerae bệnh dịch tả ”,Tạp chí Khoa học ứng dụng, số 17 Nguyễn Ngọc Tuân, 2002 Vệ sinh thịt NXB Nông nghiệp, tr 68-142 18 Nguyễn Phú Quý (1993), “Chẩn đoán vi khuẩn học bệnh tả V cholerae O139”, Tạp chí Vệ sinh phịng dịch, 3(3), trang 52 42 19 Nguyễn Phú Quý, Phùng Đắc Cam, Lƣơng Ngọc Trâm (1991), Kỹ thuật xét nghiệm vi sinh vật y học, NXB Văn hoá, Hà Nội, trang 78-81 20 Nguyễn Tăng Ấm, Đặng Đức Trạch, Nguyễn Duy Thanh, 1983 Bệnh tả ElTor, dịch tễ học lâm sàng Nhà xuất Y học, Hà Nội, tr.7-195 21 Nguyễn Thị Hiền (chủ biên), 2009 Vi sinh vật nhiễm tạp lương thực-thực phẩm Đại học bách khoa Hà Nội, tr 50-58 22 Nguyễn Trần Chính (1997), Giáo trình bệnh truyền nhiễm, Bộ mơn truyền nhiễm – Trƣờng Đại Học Y Dƣợc Thành Phố Hồ Chí Minh 23 Nguyễn Trần Chính ctv (2008), Bệnh học truyền nhiễm nhiệt đới, Bộ môn truyền nhiễm – Trƣờng Đại Học Y Dƣợc Thành Phố Hồ Chí Minh 24 Nguyễn Trần Hiển, Phạm Ngọc Đính, 2007 “Tài liệu qui trình xét nghiệm, điều tra, giám sát, phòng chống bệnh tả” Bộ Y tế, Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ƣơng, Hà Nội, tr.1-28 25 Phạm Hồng Sơn, 2005 Giáo trình vi sinh vật học thú y Đại học Huế, tr 30-32 26 Phạm Thế Vũ, 2009 Nghiên cứu ứng dụng số kỹ thuật chẩn đoán nhanh Vibrio cholerae gây bệnh tiêu chảy cấp tỉnh Thái Nguyên năm 2008 Luận văn thạc sỹ sinh học, Trƣờng Đại học Sƣ phạm, Đại học Thái Nguyên, Việt Nam 27 Phùng Đắc Cam, 2003 Vibrio cholerae bệnh dịch tả Nhà xuất Y học, Hà Nội, tr.53-74 28 Trần Linh Thƣớc, 2009 Phương pháp phân tích vi sinh vật nước, thực phẩm mỹ phẩm Nhà xuất giáo dục, tr 131-136 29 Trần Văn Hƣng, 2008 Giáo trình Vi sinh học y học Đại học Huế, tr.122-125 30 Vũ Minh Hƣơng, Nguyễn Đình Mn, Nguyễn Văn Hiếu, 1994 “Một số trƣờng hợp mắc tả Hải Phịng năm 1994” Tạp chí Vệ sinh phịng dịch, 5(2), tr.60-75  Tài liệu tiếng Anh Brenner, D.J.; Hickman-brenner, F.W.; Lee, J.V.; Steigerwalt, A.G.; Richard, F.G.; Hollis, D.G.; Farmer III, J.J.; Weaver, R.E.; Joseph, S.W.; Seidler R.J., 1983 Vibrio furnissii (Formerly Aerogenic Biogroup of Vibrio fluvialis), a new species isolated from human feces and the environment J Clin Microbiol 18, 816-824 Briko I.I., Bachtarzi T., Ourtani A., Laouar M, 1985 “Cholerae morbidity problems in of the departments of the Democratic and Popular Republic of Angeria” Microbiol Epidemiol Immunobiol, 37(5), pp.45-51 CLSI, 2011 Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing Craig J P., Yamamoto K., Takeda Y and Miwatani T., 1981 Production of cholera-like enterotoxin by a Vibrio cholerae non-O1 strain solated from the environment Infection and Immunity 34 (1): 90 – 97 Davis, B R., Fanning, G R., Madden, J M., Steigerwalt, A G., Bradford, H B., Jr., Smith, H.L., Jr and Brenner, D.J., 1981 Characterization of biochemically atypical Vibrio cholerae strains and designation of a new pathogenic species, Vibrio mimicus J Clin Microbiol., 14, 631-639 43 Farmer III J J and Hickman-Brenner F W., 2006 The Genera Vibrio and Photobacterium In The Procaryotes 3rd edition volume (Eds: D Martin, F Stanley, R Eugene, S Karl-Heinz and S Erko) Springer, Singapore, pp 508 – 543 Fujino T, Okuno Y, Nakada D, Aoyama A, Fukai K, Mukai T, Ueho T, 1951 On the bacteriological examination of Shirasu food poisoning J Japan Ass Infect Dis., 35: 11-12 Hlady, W.G., 1997 Vibrio infections associated with raw oyster consumption in Florida, 1981–1994 Journal of Food Protection, 60: 353–357 Honda, T., Ni, Y.X & Miwatani, T., 1988 Purification and characterization of a hemolysin produced by a clinical isolate of Kanagawa phenomenon-negative Vibrio parahaemolyticus and related to the thermostable direct hemolysin Infection and Immunity, 56(4): 961–965 10 ISO/TS 21872-2, 2007 Microbiology of food and animal feeding stuffs – Horizontal method for the detection of potentially enteropathogenic Vibrio spp – Part 2: Detection of species other than Vibrio parahaemolyticus and Vibrio cholerae 11 Kaper J B., Morris J G and Levine M M., 1995 Cholerae Clin Microbiol Rev., (1): 48 – 86 12 Kassis S., Hagmann J and Fishman P H., 1982 Mechanism of action of cholera toxin on intact cells: generation of A1 peptide and activation of adenylate cyclase J Biol Chemist., 257 (20): 12148 – 12152 13 Kelly MT, Hickman-Brenner FW, Farmer III J-J, 1991 Vibrio In: Balows A, Hausler WJ, Herrmann KL, Isenberg DHD, Shadomy HJ, ed Manual of clinical microbiology Washington, DC, ASM Press, pp 384–395 14 Lee, J.V.; Shread, P.; Furniss, A.L.; Bryant, T.N, 1981 Taxonomy and description of Vibrio fluvialis sp nov (Synonym Group F vibrios, Group EF-6) J Appl Bacteriol 50, 73-94 15 Okeke I N., Eardley J., Bailey C C and Kaper J B., 2001 Vibrio cholerae In Molercular medical microbiology (Ed: M Sussman, 2002: 1st Edition) Harcuort Sciense and Technology Company San Diego, San Fransisco, New York, Tokyo, Sysney, London, pp 1191 – 1262 16 Oliver JD, Kaper JB, 1997 Vibrio species In: Doyle MP, ed Food microbiology, fundamentals and frontiers Washington, DC, ASM Press, pp 228–264 17 Rippey, S.R., 1994 Infectious diseases associated with molluscan shellfish consumption Clin Microbiol Rev 7, 419–425 18 Sakazaki R, Iwanami S, Fukumi H., 1963 Studies on the enteropathogenic, facultatively halophilic bacteria, Vibrio parahaemolyticus i morphological, cultural and biochemical properties and its taxonomical position Jpn j med sci biol 16, 161-188 19 Shapiro RL, Altekruse S and Hutwagner L., 1998 The role of Gulf Coast oyster harvested in warmer months in Vibrio vulnificus in the United States, 1988–1996 J Infect Dis 178, 752–759 44 20 Vesth T, Wassenaar T M, Hallin P F, Snipen L, Lagesen K and Ussery D W, 2010 On the origins of a Vibrio species Microb Ecol, 59:1-13 21 WHO, 2005 Risk assessment of Vibrio vulnificus in raw oysters Micro biological risk assessment ,8, pp.3-10 22 WHO, 2011 Risk assessment of Vibrio parahaemolyticus in seafood Micro biological risk assessment ,16, pp.5-12  Tài liệu từ internet Bộ Y tế- Cục an toàn thực phẩm - http://www.vfa.gov.vn/ Bộ Y tế - Cục y tế dự phịng - http://vncdc.gov.vn/ Cơng thơng tin điện tử - http://www.chinhphu.vn/ Tổ chức Y tế Thế Giới - http://www.who.int/en/ Trung tâm ngăn chặn kiểm soát dịch bệnh - http://www.cdc.gov/ Viện dinh dƣỡng-Bộ y tế- http://www.fao.org/ Viện vệ sinh dịch tễ trung ƣơng - http://www.nihe.org.vn/ 45 PHỤ CHƢƠNG So sánh tỷ lệ nhiễm vi khuẩn V cholera theo địa điểm lấy mẫu Chợ Số mẫu dƣơng Số mẫu âm Tổng A B C D E F G Tổng 23 7 10 58 12 12 12 12 12 12 81 ————— 12/7/2013 8:48:06 PM ————————————————— —— Welcome to Minitab, press F1 for help Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 3,50 0,071 C2 8,50 0,029 Total 12 3,50 0,071 8,50 0,029 12 Total 17 24 Chi-Sq = 0,202, DF = 1, P-Value = 0,653 Khác khơng có ý nghĩa p = 0,653 > 0,05 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 2,86 0,007 C2 9,14 0,002 Total 12 2,14 0.010 6,86 0.003 46 Total 16 21 Chi-Sq = 0,022, DF = 1, P-Value = 0,882 Khác khơng có ý nghĩa p = 0,882 > 0,05 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 4,00 0,250 C2 8,00 0,125 Total 12 4,00 0,250 8,00 0,125 12 Total 16 24 Chi-Sq = 0,750, DF = 1, P-Value = 0,386 Khác khơng có ý nghĩa p = 0,386 > 0,05 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 3,50 0,071 C2 8,50 0,029 Total 12 3,50 0,071 8,50 0,029 12 Total 17 24 Chi-Sq = 0,202, DF = 1, P-Value = 0,653 Khác khơng có ý nghĩa p = 0,653 > 0,05 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 3,00 0,000 C2 9,00 0,000 Total 12 3,00 0,000 9,00 0,000 12 Total 18 24 47 Chi-Sq = 0,000, DF = 1, P-Value = 1,000 Khác khơng có ý nghĩa p = 1,000 > 0,05 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 2,50 0,100 C2 9,50 0,026 Total 12 2 2,50 0,100 10 9,50 0,026 12 Total 19 24 Chi-Sq = 0,253, DF = 1, P-Value = 0,615 Khác khơng có ý nghĩa p = 0,615 > 0,05 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 3,43 0,095 C2 8,57 0,038 Total 12 2 2,57 0,127 6,43 0,051 Total 15 21 Chi-Sq = 0,311, DF = 1, P-Value = 0,577 Khác khơng có ý nghĩa p = 0,577 > 0,05 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 4,50 0,056 C2 7,50 0,033 Total 12 4,50 0,056 7,50 0,033 12 Total 15 24 Chi-Sq = 0,178, DF = 1, P-Value = 0,673 Khác khơng có ý nghĩa p = 0,673 > 0,05 48 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 4,00 0,000 C2 8,00 0,000 Total 12 4,00 0,000 8,00 0,000 12 Total 16 24 Chi-Sq = 0,000, DF = 1, P-Value = 1,000 Khác khơng có ý nghĩa p = 1,000 > 0,05 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 3,50 0,071 C2 8,50 0,029 Total 12 3,50 0,071 8,50 0,029 12 Total 17 24 Chi-Sq = 0,202, DF = 1, P-Value = 0,653 Khác khơng có ý nghĩa p = 0,653 > 0,05 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 3,00 0,333 C2 9,00 0,111 Total 12 2 3,00 0,333 10 9,00 0,111 12 Total 18 24 Chi-Sq = 0,889, DF = 1, P-Value = 0,346 Khác khơng có ý nghĩa p = 0,346 > 0,05 49 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 3,00 0,333 C2 6,00 0,167 Total 4,00 0,250 8,00 0,125 12 Total 14 21 Chi-Sq = 0,875, DF = 1, P-Value = 0,350 Khác khơng có ý nghĩa p = 0,350 > 0,05 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 2,57 0,127 C2 6,43 0,051 Total 3,43 0,095 8,57 0,038 12 Total 15 21 Chi-Sq = 0,311, DF = 1, P-Value = 0.577 Khác ý nghĩa p = 0,577 > 0,05 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 2,14 0,010 C2 6,86 0,003 Total 2,86 0,007 9,14 0,002 12 Total 16 21 Chi-Sq = 0,022, DF = 1, P-Value = 0,882 Khác khơng có ý nghĩa p = 0,882 > 0,05 50 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 1,71 0,048 C2 7,29 0,011 Total 2 2,29 0,036 10 9,71 0,008 12 Total 17 21 Chi-Sq = 0,103, DF = 1, P-Value = 0,748 Khác khơng có ý nghĩa p = 0,748 > 0,05 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 4,50 0,056 C2 7,50 0,033 Total 12 4,50 0,056 7,50 0,033 12 Total 15 24 Chi-Sq = 0,178, DF = 1, P-Value = 0,673 Khác khơng có ý nghĩa p = 0,673 > 0,05 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 4,00 0,250 C2 8,00 0,125 Total 12 4,00 0,250 8,00 0,125 12 Total 16 24 Chi-Sq = 0,750, DF = 1, P-Value = 0,386 Khác khơng có ý nghĩa p = 0,386 > 0,05 51 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 3,50 0,643 C2 8,50 0,265 Total 12 2 3,50 0,643 10 8,50 0,265 12 Total 17 24 Chi-Sq = 1,815, DF = 1, P-Value = 0,178 Khác khơng có ý nghĩa p = 0,178 > 0,05 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 3,50 0,071 C2 8,50 0,029 Total 12 3,50 0,071 8,50 0,029 12 Total 17 24 Chi-Sq = 0,202, DF = 1, P-Value = 0,653 Khác khơng có ý nghĩa p = 0,653 > 0,05 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 3,00 0,333 C2 9,00 0,111 Total 12 2 3,00 0,333 10 9,00 0,111 12 Total 18 24 Chi-Sq = 0,889, DF = 1, P-Value = 0,346 Khác khơng có ý nghĩa p = 0,346 > 0,05 52 Chi-Square Test: C1, C2 Expected counts are printed below observed counts Chi-Square contributions are printed below expected counts C1 2,50 0,100 C2 9,50 0,026 Total 12 2 2,50 0,100 10 9,50 0,026 12 Total 19 24 Chi-Sq = 0,253, DF = 1, P-Value = 0,615 Khác khơng có ý nghĩa p = 0,653 > 0,05 53 ... số chợ thuộc quận Ninh Kiều, Thành phố Cần Thơ? ?? Mục tiêu đề tài nhằm:  Xác định diện vi khuẩn Vibrio spp ốc bƣơu số chợ thuộc quận Ninh Kiều, Thành phố Cần Thơ  Xác định nhạy cảm vi khuẩn Vibrio. .. HỌC CẦN THƠ KHOA NÔNG NGHIỆP & SINH HỌC ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y  Luận Văn Tốt Nghiệp Ngành: THÚ Y TÌNH HÌNH NHIỄM VI KHUẨN VIBRIO SPP TRÊN ỐC BƢƠU Ở MỘT SỐ CHỢ THUỘC QUẬN NINH KIỀU THÀNH PHỐ CẦN... ỨNG DỤNG BỘ MÔN THÚ Y  Đề tài: ? ?Tình hình nhiễm vi khuẩn Vibrio spp ốc bƣơu số chợ thuộc quận Ninh Kiều, Thành phố Cần Thơ? ?? sinh vi? ?n Tăng Mỹ Tiên thực phòng Vi sinh-Miễn dịch Thú Y, môn Thú