BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ VIỆN NGHIÊN CỨU VÀ PHÁT TRIỂN CÔNG NGHỆ SINH HỌC LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC NGÀNH CÔNG NGHỆ SINH HỌC KHẢO SÁT ẢNH HƢỞNG CỦA NGUỒN ĐẠM VÀ NỒNG ĐỘ ĐẠM LÊN KHẢ NĂNG TĂNG SINH VÀ TỔNG HỢP 𝜷-CAROTENE Ở TẢO Spirulina sp. CÁN BỘ HƯỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN PGS.TS. NGUYỄN HỮU HIỆP BÙI NGỌC DUYÊN MSSV: 3092391 LỚP: CNSH TT K35 Cần Thơ, 12/2013 Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT PHẦN KÝ DUYỆT CÁN BỘ HƢỚNG DẪN SINH VIÊN THỰC HIỆN PGs. Ts. Nguyễn Hữu Hiệp Bùi Ngọc Duyên DUYỆT CỦA HỘI ĐỒNG BẢO VỆ LUẬN VĂN ……………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………… Cần Thơ, ngày tháng năm 2013 CHỦ TỊCH HỘI ĐỒNG Chuyên ngành Công nghệ Sinh học i Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT LỜI CẢM TẠ Trong thời gian thực Luận văn tốt nghiệp, nhận hỗ trợ động viên quý báu từ Thầy Cô, bạn bè gia đình để hoàn thành tốt luận văn tốt nghiệp mình. Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến PGs. Ts. Nguyễn Hữu Hiệp tận tình hướng dẫn, tạo điều kiện thuận lợi cho lời khuyên quý giá để giải vấn đề phát sinh lúc làm thí nghiệm lúc viết luận văn. Chân thành cám ơn chị phụ trách phòng thí nghiệm tất bạn anh chị thực đề tài phòng thí nghiệm Vi Sinh Vật bạn lớp Công Nghệ Sinh học Tiên tiến khóa 35 nhiệt tình giúp đỡ suốt trình thực luận văn. Xin kính chúc quý Thầy cô, ba mẹ, anh chị dồi sức khỏe chúc bạn lớp Công nghệ Sinh học Tiên Tiến khóa 35 báo cáo luận văn thành công tốt đẹp. Tôi xin chân thành cảm ơn! Cần Thơ, ngày 12 tháng 12 năm 2013 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học i Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT TÓM LƢỢC Spirulina sp. tảo đa bào, dạng sợi. Loài vi tảo chứa hàm lượng cao chất dinh dưỡng protein, lipid, carbohydrate, vitamin sắc tố β-carotene… Chính chứa hàm lượng dinh dưỡng cao nên việc đẩy mạnh nuôi trồng loài vi tảo trọng. Nitơ số tác nhân ảnh hưởng đến gia tăng sinh khối tích lũy sắc tố β-carotene Spirulina sp Qua trình khảo sát nguồn đạm khác cho thấy Urea nguồn đạm tối ưu cho phát triển sinh khối tích lũy β-carotene tảo Spirulina sp. số nguồn đạm khảo sát. Nồng độ thích hợp hiệu cao 0,05 g/l N để đạt sinh khối 0,183g/50ml hàm lượng carotenoid 2,182μg/ml. Từ khóa: β-carotene, sinh khối, Spirulina sp., urea Chuyên ngành Công nghệ Sinh học i Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT MỤC LỤC PHẦN KÝ DUYỆT . LỜI CẢM TẠ TÓM LƢỢC . i MỤC LỤC . ii DANH SÁCH BẢNG . iii DANH SÁCH HÌNH iv CÁC TỪ VIẾT TẮT iv CHƢƠNG 1: GIỚI THIỆU 1.1. Đặt vấn đề . 1.2. Mục tiêu đề tài CHƢƠNG 2: LƢỢC KHẢO TÀI LIỆU 2.1. Giới thiệu vi tảo . 2.2. Giới thiệu tảo Spirulina sp. 2.2.1. Lịch sử phát . 2.2.3. Đặc điểm sinh học Spirulina sp. 2.2.4. Đặc điểm sinh hóa . 2.3. Giới thiệu β-carotene . 2.3.1. Cấu tạo β-carotene 2.3.2. Chức β-carotene 10 2.4. Các yếu tố ảnh hưởng đến khả tăng sinh tích lũy β-carotene tảo Spirulina sp 12 2.4.1. Ảnh hưởng ánh sáng 12 2.4.2. Ảnh hưởng nhiệt độ . 13 2.4.3. Ảnh hưởng độ pH 13 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học i Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT 2.4.4. Ảnh hưởng nitrogen 13 2.4.5. Ảnh hưởng độ sục khí . 14 2.5. Tình hình nghiên cứu nước 14 2.5.1. Tình hình nghiên cứu nước . 14 2.5.2. Tình hình nghiên cứu giới . 15 CHƢƠNG 3: PHƢƠNG TIỆN VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU . 16 3.1. Phương tiện nghiên cứu 16 3.1.1. Thời gian địa điểm 16 3.1.2. Nguyên liệu . 16 3.1.3. Thiết bị 16 3.2. Phương pháp nghiên cứu 17 3.2.1. Khảo sát ảnh hưởng nguồn đạm khác lên khả tăng sinh tích lũy β-carotene tảo Spirulina sp. 18 3.2.2. Khảo sát ảnh hưởng nồng độ đạm khác lên khả tăng sinh tích lũy β-carotene tảo Spirulina sp. 19 CHƢƠNG 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 22 4.1. Thí nghiệm 1: Ảnh hưởng nguồn đạm khác lên khả tăng sinh tích lũy β-carotene tảo Spirulina sp. 22 4.2. Ảnh hưởng nồng độ Urea khác lên khả tăng sinh tích lũy β-carotene tảo Spirulina sp. . 27 CHƢƠNG 5: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ . 34 5.1. Kết luận 34 5.2 Kiến nghị 34 TÀI LIỆU THAM KHẢO 35 PHỤ LỤC Chuyên ngành Công nghệ Sinh học ii Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT DANH SÁCH BẢNG Bảng 1. Phân tích thành phần Spirulina sp. Bảng 2. Thành phần đa lượng môi trường Zarrouk (g/l) 17 Bảng 3. Dung dịch vi lượng A5 môi trương Zarrouk (g/l) . 17 Bảng 4. Dung dịch vi lượng B6 môi trường Zarrouk (g/l) . 17 Bảng 5. Ảnh hưởng nguồn đạm khác đến phát triển sinh khối tảo Spirulina sp. (g/50ml) . 22 Bảng 6. Ảnh hưởng nguồn đạm khác đến phát triển sinh khối tảo Spirulina sp. (μg/ml). 22 Bảng 7. Ảnh hưởng nồng độ Urea khác lên phát triển sinh khối tảo Spirulina sp. . 28 Bảng 8. Ảnh hưởng nồng độ Urea khác lên tích lũy β-carotene tảo Spirulina sp 28 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học iii Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT DANH SÁCH HÌNH Hình 1. Vi tảo Spirulina sp. chụp kính hiển vi E40 . Hình 3. Vi tảo Spirulina sp. lọc giấy lọc Whatman No.1 . 20 Hình 3. Quy trình xác định hàm lượng carotenoid tảo phương pháp quang phổ . 21 Hình 4. Vi tảo Spirulina sp. sau ngày nuôi với nguồn đạm khác 24 Hình 5. Tảo Spirulina sp. quan sát kính hiển vi ngày thứ vật kính E40 25 Hình 6. Hình 6. Ảnh hưởng nguồn đạm khác lên sinh khối hàm lượng β-carotene vi tảo Spirulina sp. ngày . 26 Hình 7. Ảnh hưởng nguồn đạm khác đến sinh khối tảo Spirulina sp. . 27 Hình 8. Ảnh hưởng nguồn đạm khác đến hàm lượng carotenoid Spirulina sp. qua ngày . 27 Hình 9. Vi tảo Spirulina sp. nồng độ Urea khác ngày 28 Hình 10. Ảnh hưởng nồng độ Urea khác đến khối lượng tảo qua ngày . 31 Hình 11. Ảnh hưởng nồng độ Urea khác đến hàm lượng carotenoid qua ngày 31 Hình 12. Vi tảo Spirulina sp. qua 11 ngày nuôi với nồng độ Urea khác 32 Hình 13. Ảnh hưởng nồng độ Urea khác lên sinh khối hàm lượng β-carotene vi tảo Spirulina sp. ngày . 33 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học iv Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT DANH SÁCH HÌNH Hình 1. Vi tảo Spirulina sp. chụp kính hiển vi E40 . Hình 3. Vi tảo Spirulina sp. lọc giấy lọc Whatman No.1 . 19 Hình 3. Quy trình xác định hàm lượng carotenoid tảo phương pháp quang phổ . 20 Hình 4. Vi tảo Spirulina sp. sau ngày nuôi với nguồn đạm khác 23 Hình 5. Tảo Spirulina sp. quan sát kính hiển vi ngày thứ vật kính E40 24 Hình 6. Hình 6. Ảnh hưởng nguồn đạm khác lên sinh khối hàm lượng β-carotene vi tảo Spirulina sp. ngày . 25 Hình 7. Ảnh hưởng nguồn đạm khác đến sinh khối tảo Spirulina sp. . 26 Hình 8. Ảnh hưởng nguồn đạm khác đến hàm lượng carotenoid Spirulina sp. qua ngày . 26 Hình 9. Vi tảo Spirulina sp. nồng độ Urea khác ngày 27 Hình 10. Ảnh hưởng nồng độ Urea khác đến khối lượng tảo qua ngày . 30 Hình 11. Ảnh hưởng nồng độ Urea khác đến hàm lượng carotenoid qua ngày 30 Hình 12. Vi tảo Spirulina sp. qua 11 ngày nuôi với nồng độ Urea khác 31 Hình 13. Ảnh hưởng nồng độ Urea khác lên sinh khối hàm lượng β-carotene vi tảo Spirulina sp. ngày . 32 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học v Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT CÁC TỪ VIẾT TẮT ATP Adenosine triphosphate BCO 𝛽-carotene-15,15’-oxygenase GTS-m glutathione S-transferase m NT Nghiệm thức N Nitơ Chuyên ngành Công nghệ Sinh học vi Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT Ngày 11 NT g/l 0,03g/l 0,05g/l 0,1g/l 0,2g/l 0,3g/l 0,4g/l KL giấy lọc (g) 0,7519 0,7466 0,7332 0,7432 0,7543 0,7539 0,7558 0,7531 0,7417 0,7338 0,7509 0,7524 0,7507 0,7644 0,7601 0,7604 0,7544 0,7624 - KL sau sấy (g) 0,7844 0,7764 0,7647 0,8592 0,862 0,8532 0,8887 0,8902 0,8802 0,8764 0,8906 0,8935 0,8604 0,8754 0,8761 0,8692 0,8714 0,8732 - TL khô (g) OD 663nm OD 646nm 0,079 0,081 0,08 0,197 0,193 0,188 0,368 0,366 0,371 0,3 0,322 0,303 0,115 0,119 0,113 0,044 0,043 0,043 - 0,03 0,032 0,031 0,051 0,05 0,049 0,093 0,096 0,103 0,1 0,108 0,112 0,08 0,085 0,084 0,023 0,022 0,022 - 0,0325 0,0298 0,0315 0,116 0,1077 0,0993 0,1329 0,1371 0,1385 0,1426 0,1397 0,1411 0,1097 0,111 0,116 0,1088 0,117 0,1108 - OD Chlo. a Chlo. b 470nm (μg/ml) (μg/ml) 0,09 0,088 0,087 0,25 0,252 0,256 0,374 0,379 0,376 0,348 0,341 0,347 0,221 0,221 0,219 0,088 0,091 0,09 - 0,88 0,899 0,89 2,262 2,216 2,158 4,232 4,199 4,24 3,382 3,628 3,385 1,179 1,214 1,144 0,473 0,463 0,463 - Carotene (μg/ml) 0,207 0,237 0,222 0,036 0,036 0,041 0,021 0,091 0,207 0,504 0,554 0,73 1,032 1,112 1,123 0,242 0,227 0,227 - 0,289 0,266 0,269 1,052 1,062 1,078 1,577 1,567 1,5 1,253 1,196 1,145 0,484 0,447 0,434 0,27 0,29 0,286 - Phụ lục 3. Số liệu thống kê thí nghiệm khảo sát ảnh hƣởng nguồn đạm khác lên khả tăng sinh tổng hợp carotenoid Spirulina sp. Summary Statistics for SINH KHOI NGAY MAU Count Average Standard deviation KNO3 0.0368 0.00200749 NH4Cl 0.0377667 0.001823 NaNO3 0.0370333 0.00150444 Urea 0.0367333 0.00193993 Total 12 0.0370833 0.00161742 ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Between groups 0.00000201667 Within groups 0.00002676 Total (Corr.) 0.0000287767 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Df 11 Coeff. of variation 5.45512% 4.82701% 4.06239% 5.28112% 4.36159% Mean Square 6.72222E-7 0.000003345 Minimum Maximum Range 0.0349 0.0358 0.0356 0.0345 0.0345 0.0389 0.0394 0.0386 0.038 0.0394 F-Ratio 0.20 0.004 0.0036 0.003 0.0035 0.0049 P-Value 0.8929 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean Urea 0.0367333 KNO3 0.0368 NaNO3 0.0370333 NH4Cl 0.0377667 Summary Statistics for CAROTENE NGAY MAU Count Average Standard deviation KNO3 0.0476667 0.00750555 NH4Cl 0.047 0.00556776 NaNO3 0.0506667 0.00750555 Urea 0.045 0.00458258 Total 12 0.0475833 0.00586915 ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Df Between groups 0.0000495833 Within groups 0.000329333 Total (Corr.) 0.000378917 11 Summary Statistics for SINH KHOI NGAY MAU Count Average Standard deviation KNO3 0.0562667 0.00106927 NH4Cl 0.0374333 0.00166533 NaNO3 0.0570333 0.00150444 Urea 0.0475333 0.000503322 Total 12 0.0495667 0.00836033 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Coeff. of variation 15.7459% 11.8463% 14.8136% 10.1835% 12.3345% Mean Square 0.0000165278 0.0000411667 Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean Urea 0.045 NH4Cl 0.047 KNO3 0.0476667 NaNO3 0.0506667 ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Between groups 0.00075598 Within groups 0.0000128667 Total (Corr.) 0.000768847 Homogeneous Groups X X X X Df 11 Minimum Maximum Range 0.04 0.041 0.042 0.041 0.04 F-Ratio 0.40 0.055 0.052 0.055 0.05 0.055 0.015 0.011 0.013 0.009 0.015 P-Value 0.7559 Homogeneous Groups X X X X Coeff. of variation 1.90036% 4.4488% 2.63782% 1.05888% 16.8668% Mean Square 0.000251993 0.00000160833 Minimum Maximum Range 0.0551 0.0361 0.0556 0.047 0.0361 F-Ratio 156.68 0.0572 0.0393 0.0586 0.048 0.0586 0.0021 0.0032 0.003 0.001 0.0225 P-Value 0.0000 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean NH4Cl 0.0374333 Urea 0.0475333 KNO3 0.0562667 NaNO3 0.0570333 Summary Statistics for CAROTENE NGAY MAU Count Average Standard Coeff. of deviation variation KNO3 0.381 0.013 3.41207% NH4Cl 0.134 0.0269629 20.1216% NaNO3 0.386 0.0183576 4.75584% Urea 0.236 0.00655744 2.77858% Total 12 0.28425 0.111356 39.1754% ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Between groups 0.13385 Within groups 0.002552 Total (Corr.) 0.136402 Df 11 Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count NH4Cl Urea KNO3 NaNO3 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Df 11 Minimum Maximum Range 0.368 0.103 0.373 0.229 0.103 0.394 0.152 0.407 0.242 0.407 Mean Square 0.0446168 0.000319 Mean 0.134 0.236 0.381 0.386 Summary Statistics for SINH KHOI NGAY MAU Count Average Standard Coeff. of deviation variation KNO3 0.0871333 0.00423596 4.86147% NH4Cl 0.0731333 0.00533042 7.28863% NaNO3 0.0900333 0.00169214 1.87946% Urea 0.107967 0.00435239 4.03124% Total 12 0.0895667 0.0134184 14.9815% ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Between groups 0.00184426 Within groups 0.000136327 Total (Corr.) 0.00198059 Homogeneous Groups X X X X F-Ratio 139.86 0.026 0.049 0.034 0.013 0.304 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X Minimum Maximum Range 0.0823 0.0692 0.0886 0.1037 0.0692 Mean Square 0.000614753 0.0000170408 0.0902 0.0792 0.0919 0.1124 0.1124 F-Ratio 36.08 0.0079 0.01 0.0033 0.0087 0.0432 P-Value 0.0001 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count NH4Cl KNO3 NaNO3 Urea Mean 0.0731333 0.0871333 0.0900333 0.107967 Summary Statistics for CAROTENE NGAY MAU Count Average Standard Coeff. of deviation variation KNO3 1.386 0.0386264 2.7869% NH4Cl 0.508333 0.0298385 5.86986% NaNO3 1.379 0.0425088 3.08258% Urea 1.32367 0.0652712 4.93109% Total 12 1.14925 0.389287 33.8732% ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Between groups 1.65009 Within groups 0.0168993 Total (Corr.) 1.66699 Df 11 Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count NH4Cl Urea NaNO3 KNO3 Mean Square 0.550031 0.00211242 Mean 0.508333 1.32367 1.379 1.386 Summary Statistics for SINH KHOI NGAY MAU Count Average Standard Coeff. of deviation variation KNO3 0.1354 0.0051449 3.79978% NH4Cl 0.130967 0.00201329 1.53725% NaNO3 0.140033 0.0035019 2.50076% Urea 0.195667 0.0055003 2.81106% Total 12 0.150517 0.0276726 18.3851% Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Homogeneous Groups X X X X Minimum Maximum Range 1.344 0.474 1.33 1.284 0.474 1.42 0.528 1.406 1.399 1.42 F-Ratio 260.38 0.076 0.054 0.076 0.115 0.946 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X Minimum Maximum Range 0.1297 0.1291 0.1366 0.1902 0.1291 0.1397 0.1331 0.1436 0.2012 0.2012 0.01 0.004 0.007 0.011 0.0721 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Between groups 0.00827742 Within groups 0.00014608 Total (Corr.) 0.0084235 Df 11 Mean Square 0.00275914 0.00001826 Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean NH4Cl 0.130967 KNO3 0.1354 NaNO3 0.140033 Urea 0.195667 Df 11 Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count NH4Cl NaNO3 KNO3 Urea Summary Statistics for SINH KHOI NGAY MAU Count Average Standard Coeff. of deviation variation KNO3 0.123433 0.00410041 3.32196% NH4Cl 0.1102 0.00248797 2.25769% NaNO3 0.118033 0.00125033 1.05931% Urea 0.151867 0.00376342 2.47811% Total 12 0.125883 0.0166341 13.2139% Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Minimum Maximum Range 1.12 0.521 0.975 1.531 0.521 Mean Square 0.482991 0.00627442 Mean 0.644 1.03167 1.146 1.61833 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X XX X X Summary Statistics for CAROTENE NGAY MAU Count Average Standard Coeff. of deviation variation KNO3 1.146 0.0230651 2.01266% NH4Cl 0.644 0.127189 19.7498% NaNO3 1.03167 0.0516172 5.00328% Urea 1.61833 0.0756593 4.67514% Total 12 1.11 0.369172 33.2587% ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Between groups 1.44897 Within groups 0.0501953 Total (Corr.) 1.49917 F-Ratio 151.10 1.164 0.775 1.076 1.664 1.664 F-Ratio 76.98 0.044 0.254 0.101 0.133 1.143 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X Minimum Maximum Range 0.1193 0.1075 0.1166 0.1483 0.1075 0.1275 0.1124 0.1189 0.1558 0.1558 0.0082 0.0049 0.0023 0.0075 0.0483 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Df Between groups 0.00296618 Within groups 0.00007746 Total (Corr.) 0.00304364 11 Mean Square 0.000988726 0.0000096825 Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean NH4Cl 0.1102 NaNO3 0.118033 KNO3 0.123433 Urea 0.151867 Summary Statistics for CAROTENE NGAY MAU Count Average Standard deviation KNO3 0.83 0.0433128 NH4Cl 1.17067 0.0421584 NaNO3 0.867 0.0467761 Urea 1.276 0.0485077 Total 12 1.03592 0.203734 ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Between groups 0.440196 Within groups 0.0163887 Total (Corr.) 0.456585 Df 11 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X Coeff. of variation 5.21841% 3.60123% 5.39516% 3.80155% 19.6671% Minimum Maximum Range 0.784 1.122 0.813 1.228 0.784 0.87 1.196 0.895 1.325 1.325 Mean Square F-Ratio 0.146732 71.63 0.00204858 Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean KNO3 0.83 NaNO3 0.867 NH4Cl 1.17067 Urea 1.276 Summary Statistics for NGAY 12 MAU Count Average Standard deviation KNO3 0.1029 0.00376431 NH4Cl 0.104 0.00253574 NaNO3 0.1107 0.00708731 Urea 0.1411 0.00735459 Total 12 0.114675 0.016922 F-Ratio 102.11 0.086 0.074 0.082 0.097 0.541 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X Coeff. of variation 3.65822% 2.43822% 6.40227% 5.21232% 14.7565% Minimum Maximum Range 0.1002 0.1022 0.1049 0.1336 0.1002 0.1072 0.1069 0.1186 0.1483 0.1483 0.007 0.0047 0.0137 0.0147 0.0481 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 ANOVA Table for NGAY 12 by MAU Source Sum of Squares Between groups 0.00290006 Within groups 0.00024984 Total (Corr.) 0.0031499 Trường ĐHCT Df 11 Multiple Range Tests for NGAY 12 by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean KNO3 0.1029 NH4Cl 0.104 NaNO3 0.1107 Urea 0.1411 Mean Square 0.000966688 0.00003123 Df Between groups Within groups Total (Corr.) 11 0.334319 0.0203553 0.354674 Multiple Range Tests for NGAY 12 by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean KNO3 0.647333 NaNO3 0.814 NH4Cl 0.984667 Urea 1.085 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học P-Value 0.0001 Homogeneous Groups X X X X Summary Statistics for CAROTENE NGAY 12 MAU Count Average Standard Coeff. of deviation variation KNO3 0.647333 0.0433167 6.69155% NH4Cl 0.984667 0.028589 2.90342% NaNO3 0.814 0.084664 10.401% Urea 1.085 0.0177764 1.63838% Total 12 0.88275 0.179564 20.3414% ANOVA Table for NGAY 12 by MAU Source Sum of Squares F-Ratio 30.95 Minimum Maximum Range 0.613 0.96 0.718 1.065 0.613 0.696 1.016 0.878 1.099 1.099 Mean F-Ratio Square 0.11144 43.80 0.00254442 0.083 0.056 0.16 0.034 0.486 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT Phụ lục 4. Số liệu thống kê thí nghiệm khảo sát ảnh hƣởng nguồn đạm khác lên khả tăng sinh tổng hợp carotenoid Spirulina sp. Summary Statistics for SINH KHOI NGAY MAU Count Average Standard deviation G/L 0.0309 0.0020664 0,03 G/L 0.0304333 0.00080829 0,05 G/L 0.0304667 0.000702377 0,1 G/L 0.0304333 0.0015885 0,2 G/L 0.0306667 0.00166233 0,3 G/L 0.0298333 0.000929157 0,4 G/L 0.0298 0.000781025 Total 21 0.0303619 0.00116939 ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Df Between groups 0.00000299619 Within groups 0.0000243533 14 Total (Corr.) 0.0000273495 20 Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean 0,4 G/L 0.0298 0,3 G/L 0.0298333 0,1 G/L 0.0304333 0,03 G/L 0.0304333 0,05 G/L 0.0304667 0,2 G/L 0.0306667 G/L 0.0309 Coeff. of variation 6.68737% 2.65594% 2.30539% 5.21961% 5.42063% 3.11449% 2.62089% 3.85151% 0.0292 0.0297 0.0298 0.0286 0.0289 0.0292 0.0289 0.0286 Mean Square 4.99365E-7 0.00000173952 0.0332 0.0313 0.0312 0.0314 0.0322 0.0309 0.0303 0.0332 F-Ratio 0.29 0.004 0.0016 0.0014 0.0028 0.0033 0.0017 0.0014 0.0046 P-Value 0.9334 Homogeneous Groups X X X X X X X Summary Statistics for CAROTENE NGAY MAU Count Average Standard Coeff. of deviation variation G/L 0.073 0.007 9.58904% 0,03 G/L 0.067 0.0087178 13.0116% 0,05 G/L 0.064 0.00360555 5.63367% 0,1 G/L 0.0663333 0.00472582 7.12435% 0,2 G/L 0.0706667 0.0023094 3.26802% 0,3 G/L 0.0693333 0.00493288 7.11473% 0,4 G/L 0.07 0.0072111 10.3016% Total 21 0.068619 0.00569628 8.30131% Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Minimum Maximum Range Minimum Maximum Range 0.068 0.061 0.061 0.061 0.068 0.066 0.064 0.061 0.081 0.077 0.068 0.07 0.072 0.075 0.078 0.081 0.013 0.016 0.007 0.009 0.004 0.009 0.014 0.02 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Df Between groups 0.000164952 Within groups 0.000484 14 Total (Corr.) 0.000648952 20 Mean Square 0.0000274921 0.0000345714 Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean 0,05 G/L 0.064 0,1 G/L 0.0663333 0,03 G/L 0.067 0,3 G/L 0.0693333 0,4 G/L 0.07 0,2 G/L 0.0706667 G/L 0.073 Summary Statistics for NGAY MAU Count Average Standard deviation G/L 0.0355667 0.00441173 0,03 G/L 0.036 0.00192873 0,05 G/L 0.0397667 0.00361156 0,1G/L 0.0380667 0.00181751 0,2 G/L 0.0384667 0.00250267 0,3 G/L 0.0321333 0.00146401 0,4 G/L 0.0185 0.0009 Total 21 0.0340714 0.00727043 ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Between groups 0.00095969 Within groups 0.0000974933 Total (Corr.) 0.00105718 Df 14 20 Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean 0,4 G/L 0.0185 0,3 G/L 0.0321333 G/L 0.0355667 0,03 G/L 0.036 0,1G/L 0.0380667 0,2 G/L 0.0384667 0,05 G/L 0.0397667 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học F-Ratio 0.80 P-Value 0.5890 Homogeneous Groups X X X X X X X Coeff. of variation 12.4041% 5.35758% 9.08187% 4.77454% 6.50606% 4.55606% 4.86486% 21.3388% Minimum Maximum Range 0.032 0.0346 0.0356 0.0366 0.0359 0.0308 0.0176 0.0176 0.0405 0.0382 0.042 0.0401 0.0409 0.0337 0.0194 0.042 Mean Square F-Ratio 0.000159948 22.97 0.00000696381 0.0085 0.0036 0.0064 0.0035 0.005 0.0029 0.0018 0.0244 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X XX XX X X X Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT Summary Statistics for CAROTENE NGAY MAU Count Average Standard deviation G/L 0.195333 0.0113725 0,03 G/L 0.187667 0.0123423 0,05 G/L 0.202333 0.0102632 0,1G/L 0.199667 0.0116762 0,2 G/L 0.139333 0.020306 0,3 G/L 0.113333 0.0085049 0,4 G/L 0.0276667 0.00208167 Total 21 0.15219 0.0621423 ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Df Squares Between groups 0.0752086 Within groups 0.00202467 14 Total (Corr.) 0.0772332 20 Coeff. of variation 5.82209% 6.57673% 5.07242% 5.84784% 14.5737% 7.50432% 7.52409% 40.8319% 0.186 0.174 0.191 0.187 0.116 0.105 0.026 0.026 0.208 0.198 0.211 0.21 0.153 0.122 0.03 0.211 0.022 0.024 0.02 0.023 0.037 0.017 0.004 0.185 Mean Square F-Ratio P-Value 0.0125348 0.000144619 86.67 0.0000 Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean 0,4 G/L 0.0276667 0,3 G/L 0.113333 0,2 G/L 0.139333 0,03 G/L 0.187667 G/L 0.195333 0,1G/L 0.199667 0,05 G/L 0.202333 Summary Statistics for SINH KHOI NGAY MAU Count Average Standard deviation G/L 0.0506667 0.00367469 0,03 G/L 0.0566 0.00190526 0,05 G/L 0.0623667 0.00251661 0,1G/L 0.0551333 0.000568624 0,2 G/L 0.0449 0.00150997 0,3 G/L 0.0260333 0.000776745 0,4 G/L 0.00796667 0.000568624 Total 21 0.043381 0.0185815 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Minimum Maximum Range Coeff. of variation 7.25267% 3.36618% 4.03519% 1.03136% 3.36296% 2.98366% 7.13754% 42.8333% Homogeneous Groups X X X X X X X Minimum Maximum Range 0.0483 0.0544 0.0597 0.0545 0.0433 0.0254 0.0075 0.0075 0.0549 0.0577 0.0647 0.0556 0.0463 0.0269 0.0086 0.0647 0.0066 0.0033 0.005 0.0011 0.003 0.0015 0.0011 0.0572 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Between groups 0.00685146 Within groups 0.0000539933 Total (Corr.) 0.00690545 Trường ĐHCT Df 14 20 Mean Square F-Ratio 0.00114191 296.09 0.00000385667 Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean 0,4 G/L 0.00796667 0,3 G/L 0.0260333 0,2 G/L 0.0449 G/L 0.0506667 0,1G/L 0.0551333 0,03 G/L 0.0566 0,05 G/L 0.0623667 Homogeneous Groups X X X X X X X Summary Statistics for CAROTENE NGAY MAU Count Average Standard Coeff. of deviation variation G/L 0.521667 0.072473 13.8926% 0,03 G/L 0.708 0.00984886 1.39108% 0,05 G/L 0.774333 0.0155027 2.00207% 0,1G/L 0.627333 0.0220303 3.51173% 0,2 G/L 0.402333 0.0718215 17.8513% 0,3 G/L 0.128333 0.0144684 11.274% 0,4 G/L 0.00966667 0.00288675 29.8629% Total 21 0.453095 0.278085 61.3745% ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Between groups 1.52372 Within groups 0.022902 Total (Corr.) 1.54662 Df 14 20 Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean 0,4 G/L 0.00966667 0,3 G/L 0.128333 0,2 G/L 0.402333 G/L 0.521667 0,1G/L 0.627333 0,03 G/L 0.708 0,05 G/L 0.774333 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học P-Value 0.0000 Minimum Maximum Range 0.438 0.697 0.759 0.602 0.349 0.119 0.008 0.008 Mean Square 0.253954 0.00163586 0.565 0.716 0.79 0.642 0.484 0.145 0.013 0.79 F-Ratio 155.24 0.127 0.019 0.031 0.04 0.135 0.026 0.005 0.782 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X X X X Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT Summary Statistics for SINH KHOI NGAY MAU Count Average Standard deviation G/L 0.0648333 0.00292973 0,03 G/L 0.0889333 0.0015695 0,05 G/L 0.1051 0.0031749 0,1 G/L 0.095 0.00234307 0,2 G/L 0.0959667 0.00120968 0,3 G/L 0.0299 0.00615873 Total 18 0.0799556 0.0264812 ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Between groups 0.0117893 Within groups 0.00013202 Total (Corr.) 0.0119213 Df 12 17 Coeff. of variation 4.51887% 1.76481% 3.02084% 2.46639% 1.26052% 20.5978% 33.1199% Summary Statistics for CAROTENE NGAY MAU Count Average Standard Coeff. of deviation variation G/L 0.863667 0.0595847 6.89904% 0,03 G/L 0.994667 0.0349476 3.5135% 0,05 G/L 1.415 0.0257099 1.81696% 0,1 G/L 1.368 0.0802932 5.86939% 0,2 G/L 0.975667 0.0100664 1.03175% 0,3 G/L 0.059 0.00781025 13.2377% Total 18 0.946 0.460729 48.7028% Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Maximum Range 0.0615 0.0877 0.1027 0.0923 0.0946 0.0228 0.0228 0.067 0.0907 0.1087 0.0965 0.0969 0.0338 0.1087 Mean Square 0.00235786 0.0000110017 Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean 0,3 G/L 0.0299 G/L 0.0648333 0,03 G/L 0.0889333 0,1 G/L 0.095 0,2 G/L 0.0959667 0,05 G/L 0.1051 ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Df Between groups 3.58452 Within groups 0.024084 12 Total (Corr.) 3.60861 17 Minimum Mean Square 0.716905 0.002007 F-Ratio 214.32 0.0055 0.003 0.006 0.0042 0.0023 0.011 0.0859 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X X X Minimum Maximum Range 0.806 0.956 1.386 1.295 0.965 0.054 0.054 0.925 1.024 1.435 1.454 0.985 0.068 1.454 F-Ratio 357.20 0.119 0.068 0.049 0.159 0.02 0.014 1.4 P-Value 0.0000 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean 0,3 G/L 0.059 G/L 0.863667 0,2 G/L 0.975667 0,03 G/L 0.994667 0,1 G/L 1.368 0,05 G/L 1.415 Summary Statistics for SINH KHOI NGAY MAU Count Average Standard deviation G/L 0.0565333 0.00325167 0,03 G/L 0.138067 0.000493288 0,05 G/L 0.176367 0.00100664 0,1 G/L 0.1714 0.00337194 0,2 G/L 0.168667 0.00283608 0,3 G/L 0.0748333 0.00247049 Total 18 0.130978 0.0494985 ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Between groups 0.041577 Within groups 0.0000746933 Total (Corr.) 0.0416517 Df 12 17 Coeff. of variation 5.75177% 0.357283% 0.570768% 1.96729% 1.68147% 3.30133% 37.7915% Minimum Maximum Range 0.053 0.1375 0.1753 0.1677 0.1666 0.0722 0.053 Mean Square 0.00831539 0.00000622444 Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean G/L 0.0565333 0,3 G/L 0.0748333 0,03 G/L 0.138067 0,2 G/L 0.168667 0,1 G/L 0.1714 0,05 G/L 0.176367 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Homogeneous Groups X X X X X X 0.0594 0.1384 0.1773 0.1743 0.1719 0.0771 0.1773 F-Ratio 1335.93 0.0064 0.0009 0.002 0.0066 0.0053 0.0049 0.1243 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X X X Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT Summary Statistics for CAROTENE NGAY MAU Count Average Standard deviation G/L 0.776333 0.015308 0,03 G/L 1.36467 0.0317228 0,05 G/L 1.94 0.03995 0,1 G/L 1.703 0.0564269 0,2 G/L 1.37267 0.0237136 0,3 G/L 0.0733333 0.00814453 Total 18 1.205 0.638568 ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Between groups 6.91878 Within groups 0.0132987 Total (Corr.) 6.93208 Df 12 17 Mean Square 1.38376 0.00110822 Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean 0,3 G/L 0.0733333 G/L 0.776333 0,03 G/L 1.36467 0,2 G/L 1.37267 0,1 G/L 1.703 0,05 G/L 1.94 Summary Statistics for SINH KHOI NGAY MAU Count Average Standard deviation G/L 0.0458667 0.00120554 0,03 G/L 0.140667 0.000945163 0,05 G/L 0.1826 0.00268514 0,1 G/L 0.178933 0.00172434 0,2 G/L 0.156 0.00332866 0,3 G/L 0.109767 0.00328836 Total 18 0.135639 0.0483936 ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Df Between groups 0.0397441 Within groups 0.0000688467 12 Total (Corr.) 0.0398129 17 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Coeff. of variation 1.97183% 2.32458% 2.05928% 3.31338% 1.72755% 11.1062% 52.9932% Minimum Maximum Range 0.759 1.331 1.906 1.643 1.351 0.064 0.064 0.788 1.394 1.984 1.755 1.398 0.079 1.984 F-Ratio 1248.63 0.029 0.063 0.078 0.112 0.047 0.015 1.92 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X X X Coeff. of variation 2.62836% 0.671917% 1.47051% 0.963675% 2.13376% 2.99578% 35.6782% Mean Square 0.00794882 0.00000573722 Minimum Maximum Range 0.0446 0.1396 0.1802 0.1774 0.1522 0.1073 0.0446 F-Ratio 1385.48 0.047 0.1414 0.1855 0.1808 0.1584 0.1135 0.1855 0.0024 0.0018 0.0053 0.0034 0.0062 0.0062 0.1409 P-Value 0.0000 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean G/L 0.0458667 0,3 G/L 0.109767 0,03 G/L 0.140667 0,2 G/L 0.156 0,1 G/L 0.178933 0,05 G/L 0.1826 Trường ĐHCT Homogeneous Groups X X X X X X Summary Statistics for CAROTENE NGAY MAU Count Average Standard Coeff. of deviation variation G/L 0.446 0.043715 9.80157% 0,03 G/L 1.537 0.019975 1.29961% 0,05 G/L 2.18233 0.00208167 0.0953872% 0,1 G/L 2.116 0.0598582 2.82884% 0,2 G/L 0.88 0.02 2.27273% 0,3 G/L 0.153333 0.0112398 7.33031% Total 18 1.21911 0.806531 66.1573% Minimum Maximum Range 0.4 1.524 2.18 2.078 0.86 0.141 0.141 0.487 1.56 2.184 2.185 0.9 0.163 2.185 ANOVA Table for NGAY by MAU Source Sum of Squares Df Mean Square F-Ratio Between groups 11.0455 2.2091 2063.40 Within groups 0.0128473 12 0.00107061 Total (Corr.) 11.0584 17 Multiple Range Tests for NGAY by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean Homogeneous Groups 0,3 G/L 0.153333 X G/L 0.446 X 0,2 G/L 0.88 X 0,03 G/L 1.537 X 0,1 G/L 2.116 X 0,05 G/L 2.18233 X Summary Statistics for SINH KHOI NGAY 11 MAU Count Average Standard deviation G/L 0.0312667 0.00136504 0,03 G/L 0.107667 0.00835005 0,05 G/L 0.136167 0.00291433 0,1 G/L 0.141133 0.00145029 0,2 G/L 0.112233 0.00332616 0,3 G/L 0.1122 0.00427551 Total 18 0.106778 0.0372912 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học Coeff. of variation 4.3658% 7.75546% 2.14027% 1.0276% 2.96361% 3.81062% 34.9241% 0.087 0.036 0.004 0.107 0.04 0.022 2.044 P-Value 0.0000 Minimum Maximum Range 0.0298 0.0993 0.1329 0.1397 0.1097 0.1088 0.0298 0.0325 0.116 0.1385 0.1426 0.116 0.117 0.1426 0.0027 0.0167 0.0056 0.0029 0.0063 0.0082 0.1128 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT ANOVA Table for NGAY 11 by MAU Source Sum of Squares Df Between groups 0.0234177 Within groups 0.000223053 12 Total (Corr.) 0.0236407 17 Mean Square 0.00468354 0.0000185878 Multiple Range Tests for NGAY 11 by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean G/L 0.0312667 0,03 G/L 0.107667 0,3 G/L 0.1122 0,2 G/L 0.112233 0,05 G/L 0.136167 0,1 G/L 0.141133 Mean Square 0.87051 0.000964222 Multiple Range Tests for NGAY 11 by MAU Method: 95.0 percent LSD MAU Count Mean G/L 0.274667 0,3 G/L 0.282 0,2 G/L 0.455 0,03 G/L 1.064 0,1 G/L 1.198 0,05 G/L 1.548 Chuyên ngành Công nghệ Sinh học P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X X X Summary Statistics for CAROTENE NGAY 11 MAU Count Average Standard Coeff. of deviation variation G/L 0.274667 0.0125033 4.55218% 0,03 G/L 1.064 0.0131149 1.2326% 0,05 G/L 1.548 0.0418688 2.70471% 0,1 G/L 1.198 0.0540278 4.50983% 0,2 G/L 0.455 0.0259422 5.70159% 0,3 G/L 0.282 0.010583 3.75284% Total 18 0.803611 0.506668 63.049% ANOVA Table for NGAY 11 by MAU Source Sum of Squares Df Between groups 4.35255 Within groups 0.0115707 12 Total (Corr.) 4.36412 17 F-Ratio 251.97 Minimum Maximum Range 0.266 1.052 1.5 1.145 0.434 0.27 0.266 0.289 1.078 1.577 1.253 0.484 0.29 1.577 F-Ratio 902.81 0.023 0.026 0.077 0.108 0.05 0.02 1.311 P-Value 0.0000 Homogeneous Groups X X X X X X Viện NC&PT Công nghệ Sinh học [...]... nghiệm: Xác định nguồn đạm thích hợp nhất để tiến hành thí nghiệm tiếp theo Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 18 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận văn tốt nghiệp Đại học Khóa 35 – 2013 Trường ĐHCT 3.2.2 Khảo sát ảnh hƣởng của các nồng độ đạm khác nhau lên khả năng tăng sinh và tích lũy β-carotene ở tảo Spirulina sp Mục đích thí nghiệm: tìm ra nồng độ đạm tối ưu cho sự tăng sinh khối và tích lũy săc tố... ban đầu là 20% là nồng độ thích hợp để nuôi cấy tảo Spirulina sp 3.2.1 Khảo sát ảnh hƣởng của các nguồn đạm khác nhau lên khả năng tăng sinh và tích lũy β-carotene ở tảo Spirulina sp Mục đích thí nghiệm: tìm ra nguồn đạm tối ưu cho sự tăng sinh khối và tích lũy săc tố ở tảo Spirulina sp Bố trí thí nghiệm: Thí nghiệm được bố trí hoàn toàn ngẫu nhiên với một nhân tố là nguồn đạm với các nguồn khác nhau... của nguồn đạm và nồng độ đạm lên khả năng tăng sinh và tổng hợp β-carotene ở tảo Spirulina sp.” được thực hiện nhằm nâng cao hàm lượng β-carotene thu được từ quá trình nuôi cấy 1.2 Mục tiêu đề tài Xác định nguồn đạm và nồng độ đạm phù hợp cho quá trình nuôi cấy tảo Spirulina sp để thu được hàm lượng β-carotene và sinh khối cao nhất Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 2 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận... QUẢ VÀ THẢO LUẬN 4.1 Thí nghiệm 1: Ảnh hƣởng của các nguồn đạm khác nhau lên khả năng tăng sinh và tích lũy β-carotene ở tảo Spirulina sp Vi tảo Spirulina sp được nuôi trong môi trường Zarrouk với nguồn đạm NaNO 3 được thay thế bằng các nguồn đạm khác nhau để đánh giá ảnh hưởng của nitơ đối với sự phát triển và tích lũy β-carotene trong tế bào Theo các thí nghiệm thăm dò ban đầu đối với các nguồn đạm. .. khác nhau, nồng độ 0,2 g/l N là thích hợp nhất để vi tảo có thể phát triển ở tất cả các nghiệm thức Do đó, nồng độ này được chọn để khảo sát ảnh hưởng của các nguồn đạm khác nhau lên sinh khối và sụ tích lũy β-carotene ở Spirulina sp Kết quả thí nghiệm cho thấy ở ngày thứ 7, khối lượng tảo và hàm lượng β-carotene ở đa số các nghiệm thức là cao nhất (Bảng 5, 6) Bảng 5 Ảnh hƣởng của các nguồn đạm khác... Carotenoids còn làm tăng mức độ enzyme detoxifying phase II như glutathione Stransferase m (GTS-m) và glutathione peroxidase 2.4 Các yếu tố ảnh hƣởng đến khả năng tăng sinh và tích lũy 𝜷-carotene ở tảo Spirulina sp 2.4.1 Ảnh hƣởng của ánh sáng Vi tảo cũng có quá trình quang hợp theo cơ chế như các thực vật bậc cao khác Hoạt động quang hợp đầu tiên của chúng là hấp thu ánh sáng (Ðặng Ðình Kim và Ðặng Hoàng... Hiền, 1999) Hai yếu tố chính ảnh hưởng đến sự phát triển của Spirulina sp là thời gian và cường độ chiếu sáng Cường độ ánh sáng tối ưu khi nuôi cấy ngoài trời là khoảng 20 – 30 klux (Lê Thị Phương Hồng, 1996) Tuy nhiên, cường độ ánh sáng còn phụ thuộc vào mật độ tảo, độ sâu nước nuôi và dụng cụ nuôi cấy Quá trình quang hợp của tảo sẽ gia tăng khi cường độ bức xạ mặt trời tăng (Trương Quốc Phú, 2006)... phát triển của tạo, do đó hiệu suất quang hợp giảm Ở điều kiện thiếu sáng trong thời gian dài chúng sẽ thích nghi bằng cách tăng hàm lượng chlorophyll trong cơ thể Đặc tính ánh sáng khác nhau sẽ tạo ra chlorophyll khác nhau và cũng ảnh hưởng đến quang hợp và quá trình tích lũy 𝛽-carotene của Spirilina sp., mặc khác còn ảnh hưởng đến sinh trưởng và tỉ lệ sinh khối Cường độ ánh sáng thích hợp khi nuôi... 1966) Trong quá trình nuôi cấy, mật độ tảo càng cao thì sự thay đổi pH càng lớn 2.4.4 Ảnh hƣởng của nitrogen Nitrogen chiếm 1 – 10% trọng lượng khô của tế bào tảo (Đặng Đình Kim, 1999) Nguồn nitrogen cung cấp không những ảnh hưởng đến quá trình phát triển của tảo mà còn ảnh hưởng đến thành phần sinh hóa của tế bào tảo Ảnh hưởng của nitrogen đến hàm lượng protein, lipid và các chất màu như 𝛽-carotene đã... LSD Hình 6 Ảnh hƣởng của các nguồn đạm khác nhau lên sinh khối và hàm lƣợng β-carotene trong vi tảo Spirulina sp ở ngày 7 Sang ngày 9 và ngày 11, khối lượng tảo và hàm lượng β-carotene ở tất cả các nghiệm thức đều giảm dần Vào thời điểm này, quá trình sinh trưởng và tích lũy các chất trong tế bào bắt đầu giảm do thiếu nguồn dinh dưỡng Chuyên ngành Công nghệ Sinh học 25 Viện NC&PT Công nghệ Sinh học Luận . (mg/kg) Canxi 1300 – 140 0 Photpho 670 0 – 9000 Magie 2000 – 2900 Sắt 580 – 1800 Kẽm 21 – 40 Đồng 8 – 10 Crom 2,8 Mangan 25 – 37 Natri 45 00 Kali 640 0 – 1 540 0 2.3. Giới thiệu. (Bujard et al. (1 970 ), Santillan (19 74 ) ) cho thấy làm lượng lipid chứa 5,6 – 7% trọng lượng khô (trong cả S. platensis và S. maxima), các tác giả khác (Hudson and Karis, 19 74 ) khẳng định có. nghệ Sinh học 2 .4. 4. Ảnh hưởng của nitrogen 13 2 .4. 5. Ảnh hưởng của độ sục khí 14 2.5. Tình hình nghiên cứu trong và ngoài nước 14 2.5.1. Tình hình nghiên cứu trong nước 14 2.5.2. Tình hình