[|^ ; . ^ BỘ YTẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI NGUYỄN THỊ NGỌC QUÝ NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY CHÈ DÂY TRỔNG SAPA (KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP Dược SỸ KHOÁ 2001-2006) Người hướng dẫn : GS.TS. Phạm Thanh Kỳ ThS. Nguyễn Huy Văn Nơi thực : Bộ môn Dược liệu Trường Đại học Dược Hà Nội Thời gian thực : Từ 2/2006 đến 5/2006 HÀ NỘI, 05/ 2006 m LỜI CẢM ƠN Với lòng biết ơn sâu sắc, em xin chân thành cảm ơn: GS. TS Phạm Thanh Kỳ Th.s Nguyễn Huy Văn tận tình hướng dẫn em suốt trình làm khoá luận. Em xin chân thành cảm ơn thầy cô, cán bộ môn Dược liệu phòng Thí nghiệm trung tâm tạo điều kiện thuận lợi giúp đỡ em suốt trình làm hoàn thành khoá luận. Em xin gửi lời cảm ơn sâu sắc tới gia đình bạn bè, người sát cánh, cổ vũ, động viên em suốt trình làm khoá luận. Hà Nội ngày 19/05/2006 Nguyễn Thị Ngọc Quý MỤC LỤC ĐẶT VÂN ĐỂ PHẦN I: TỒNG QUAN 1.1. Vị trí phân loại phân bố Chè Dây {Ampelopsis cantoniensis (Hook. et Arn.) Planch., Vitaceae) 1.1.1. Vị trí phân loại 1.1.2. Phân bố . 1.2. Đặc điểm thực vật . 1.2.1. Đặc điểm thực vật họ Nho (Vitaceae) .3 1.2.2. Đặc điểm thực vật chi Ampelopsis 1.2.3. Đặc điểm thực vật Chè dây {A. cantoniensis (Hook. et Arn.) Planch) . 1.3. Đặc điểm sinh thái 1.4. Thành phần hoá h ọ c . 1.5. Tác dụng sinh học . 1.5.1. Tác dụng chống loét d y 1.5.2. Tác dụng giảm đau 1.5.3. Tác dụng kháng khuẩn 1.5.4. Tác dụng chống oxy h oá . .8 1.5.5. Độc tính cấ p .9 1.5.6. Độc tính bán trường diễn . 1.6. Tính vị, công 1.7. Công dụng . 1.7.1. Kinh nghiệm dân gian . 1.7.2. Một số thuốc có chè d â y .9 1.7.3. Biệt dược AMPELOP phác đồ điều trị viêm loét dàyhành tá tràng 10 PHẦN II: NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ứ u 12 2.1. Nguyên liệu 12 2.2. Phương pháp nghiên cứu 13 PHẦN III: THỰC NGHIỆM VÀ KẾT q u ả 14 3.1. Định tính nhóm chất Chè dây trồng Sapa phản ứng hoá học 14 3.1.1. Định tính glycosid tim 14 3.1.2. Định tính Aavonoid 15 3.1.3. Định tính Anthranoid .15 3.1.4. Định tính coumarin 16 3.1.5. Định tính Tanin 17 3.1.6. Định tính Saponin .17 3.1.7. Định tính Alcaloid 18 3.1.8. Định tính đưòfng khử tự d o 18 3.1.9. Định tính acid hữu .18 3.1.10. Định tính chất béo 19 3.1.11. Định tính Caroten .19 3.1.12. Định tính Sterol 19 3.1.13. Định tính acid amin 19 3.2. Kết định tính nhóm chất chè dây trồng Sapa thời điểm thu hái khác 21 3.3. Định tính Aavonoid sắc ký lớp mỏng 21 3.4. Định lượng chất chiết phân đoạn ethyl acetat . 25 3.5. Phân lập chất chè dây trồng Sapa 29 3.5.1. Chất nhồi cột Sephadex LH20 29 3.5.2. Chất nhồi cột silicagen .29 3.6. Nhận dạng chất phân lập 31 3.6.1. Chất F .! . 31 3.6.2. Chất F . 32 3.6.3. Chất F . 32 PHẨN IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUÂT . 34 4.1. Kết luận .34 4.2. Đề xuất 34 CÁC CHỮ VIẾT TẮT HPLC : High Pressure Liquid Chromatography IR : Infrared Resolution KH : Ký hiệu MS : Mass Spectrometry SKLM ; Sắc ký lớp mỏng Tb : Trung bình TP : Toàn phần uv : Ultra Violet ĐẶT VẤN ĐỂ Việt Nam nằm vùng khí hậu nhiệt đới có thảm thực vật phong phú đa dạng, có nguồn dược liệu quý dồi dào. Điều khẳng định vị quan trọng dược liệu ngành y tế Việt Nam. Chè dây dược liệu nghiên cứu thực vật, xác định tên khoa học, thành phần hoá học, độc tính số tác dụng sinh học. Chế phẩm AMPELOP chữa viêm loét dày- hành tá tràng công ty cổ phần Traphaco sản xuất từ chè dây chứng minh có tác dụng tốt lâm sàng Bộ y tế cấp giấy phép lưu hành. Các kết nghiên cứu cho thấy Chè dây dược liệu có giá trị sử dụng cao có tiềm khai thác tốt. Tuy nhiên, biết khai thác mà phương án phát triển lâu dài dù dược liệu có nhiều đến đâu hết. Do đó, nay, Công ty cổ phần Traphaco thực đề tài: Nghiên cứu trồng Chè dây Sapa (Lào Cai) để đảm bảo nguyên liệu lâu dài cho sản xuất thuốc AMPELOP. Để góp phần tạo sở khoa học cho việc thu hái chè dây trồng làm nguyên liệu sản xuất thuốc, em tiến hành nghiên cứu đề tài: “Nghiên cứu thành phần hóa học chè dây trồng Sapa (Lào Cai)*' với nội dung sau: -Định tính nhóm chất hữu chè dây trồng Sapa. -Định lượng phân đoạn chiết ethylacetat chè dây trồng Sapa thời điểm thu hái khác nhau. -Phân lập chất chính. PHẦN I: TỔNG QUAN 1.1. VỊ trí phân loại phân bố Chè Dây {Ampélopsis cantoniensis (Hook, et Arn.) Planch., Vitaceae) 1.1.1. Vị trí phân loại Theo hệ thống phân loại Takhtajan 1987 [4], vị trí phân loại Chè Dây sau: Ngành Ngọc Lan (Magnoliophyta) Lớp Ngọc Lan (Magnoliopsida) Phân lớp Hoa Hồng (Rosidae) Liên Nho (Vitanae) Bộ Nho (Vitales) Họ Nho (Vitaceae) Chi Ampélopsis Trước đây, họ Nho họ Gối hạc xếp vào Táo ta (Rhamnales). Từ năm 1987, hai họ tách lập thành Nho (Vitales). Trong Flore générale de r Indochine, họ Nho mang tên Latin Ampelidaceae [4], [11] 1.1.2. Phân bố Trên giới, Chè Dây phân bố Ấn Độ, Trung Quốc, Việt Nam, Lào Indonesia [6 ], [7], [25], [26]. nước ta, phân bố rộng khắp từ Lào Cai, Hoà Bình, Hà Tây, Bắc Thái, Lạng Sơn, Quảng Ninh, Nghệ An vào tới Lâm Đồng, Đồng Nai [6 ], [7]. Cây có Hà Giang, Cao Bằng, Hà Tĩnh, Quảng Nam, Kontum, Gia Lai [26],Đ àN ẵng[25]. 1.2. Đặc điểm thực vật 1.2.1. Đặc điểm thực vật họ Nho (Vitaceae) Theo Vũ Văn Chuyên [3], [8], đặc điểm chung họ Nho là: Cây bụi leo hay dây thân gỗ có tua phát triển có số bụi đứng thẳng hay gỗ nhỏ. Tua có nguồn gốc từ thân mọc đối diện với lá. Lá mọc so le, có kèm có hình dạng khác nhau: đơn, nguyên, hay khía thùy kép chân vịt. Hoa nhỏ tập hợp thành cụm hoa xim, chùm hay ngù. Hoa lưỡng tính hay có tiêu giảm trở thành hoa đơn tính. Đài, tràng nhị theo mẫu - . Đài thường nhỏ, không phát triển, trông vảy nhỏ. Tràng có - cánh hoa xếp xen kẽ với đài. Bộ nhị tiêu giảm vòng - nhị xếp đối diện với cánh hoa, rời nhau, nhị cong vào dựng đứng đột ngột; bao phấn ô, mở kẽ nứt dọc [12]. Giữa nhị nhụy có đĩa mật phát triển, hình vòng khuyên khía thùy tuyến riêng rẽ. Nhụy thường gồm hai noãn dính lại với thành bầu có ô, ô có noãn. Một vòi nhụy. Núm nhụy hình đĩa hình đầu, có chia làm thùy (Tetrastigma - dây quai bị). Quả mọng. Hạt có phôi nhỏ có nội nhũ. Cây thụ phấn nhờ gió. Theo Nguyễn Tiến Bân [5], họ Nho gần với Rhamnaceae (hoa mẫu 5, nhị đối diện với cánh hoa dính vào mép triền), chủ yếu dây leo thân gỗ có tua cuốn; thưcmg xẻ thùy chân vịt với gân chân vịt, kép chân vịt (gồm - - chét), kép lông chim; nhụy gồm noãn hợp thành bầu thượng (6 ) ô, ô chứa ( 1) noãn; thường mọng; hạt thường có nội nhũ cuốn. Họ Nho giới có khoảng 11 chi 700 loài phân bố vùng nhiệt đới cận nhiệt đới, số đại diện vùng ôn đới (chủ yếu loài thuộc chi Vitis, Ampélopsis Parthenocissus) [5], [8 ]. Việt Nam, họ Nho có chi 61 loài [3], [5]. 1.2.2. Đặc điểm thực vật chi Ampélopsis Theo Lecomte [29], chi Ampélopsis có đặc điểm chung: Cây bụi leo. Thân có tua đối diện với lá. Lá đơn, khía hay chia thùy, chia thành - chét gần không cuống; kép lông chim hai lần lông chim. Cụm hoa ngù, mọc đối diện với lá. Hoa nhỏ, lưỡng tính, mẫu 5. Đài hình chén, uốn lượn. Nhị đối diện với cánh hoa, thường nằm hõm cánh hoa; bao phấn hướng trong. Đĩa dính liền với bầu tạo thành vành hay vành quanh co bao lấy bầu. Bầu nhụy nhô lên phần trên, bầu ô, ô noãn; vòi hình trụ; đầu nhụy không rõ. Quả mọng, nhỏ, khô; có - hạt hình trứng ngược, thót dần phía gốc; mặt bụng hạt có rãnh hình dải hẹp dạng lỗ khuyết; phôi nhũ không xếp nếp. Theo “Từđiển thực vật thông dụng” [7], đặc điểm chung chi Ampélopsis: Cây bụi leo, thân có tua quấn, vỏ cố lỗ bì sẫm có chấm trắng. Tuỷ gổ trắng. Lá sớm rụng, mọc so le, đơn hay kép, có cuống dài. Hoa nhỏ, màu lục nằm cuống hoa dài xếp thành xim lưỡng phân đối diện với hay mọc ò ngọn. Hoa lưỡng tính, mẫu 5, có mẫu 4, nhị ngắn. Quả mọng, có - hạt. Gồm 20 loài châu Mỹ châu Á. nước ta có loài: A. brevipedunculata (Maxim.) Trautv. A. cantoniensỉs (Hook, et Arn.) Planch. A. heterophylla Sieb, et Zucc. A. japónica (Thunb.) Makino. A. annamensis Gagn. [11] 1.2.3. Đặc điểm thực vật Chè dây (A. cantonỉensỉs (Hook, et Arn.) Planch) Theo Lecomte [29], loài Ampélopsis cantoniensis Planch, loài Cissus cantoniensis Hooker et Am. = Cissus deversifolia Walp. Cũng có tác giả gọi loài Vitis cantoniensis Seem. Cả ba tên dùng với tên thông dụng Ampélopsis cantoniensis (Hook, et Am.) Planch, mô tả: Thân leo. Cành hình trụ mảnh, phủ lông tơ mịn. Tua chia - nhánh, mọc lá, thay cho cụm hoa bị thui đi. Lá kép lông chim hay hai lần lông chim; có - 12 chét hơn. Lá hình trái xoan nhọn hay không, tròn gốc, trừ cuối gần hình tim; dài 2,5 - 7,5 cm, rộng 1, 5- cm. Phiến nhẵn gần nhẩn; nhạt mặt dưới; cưa không rõ, giảm thành mũi nhọn; gân bên - đôi, có nhú nhỏ; gân thành mạng lưới sít. Cuống chét dài - mm; chét cuối dài gấp lần khác. Lá kép dài 10 - 30 cm. Lá kèm gần tròn, đường kính - mm, dạng màng khô. Hoa mọc thành ngù mảnh đối diện với lá, rộng - cm, chia - nhánh; cuống cụm hoa mảnh ngắn cuống lá, dài nụ, có phủ lông tơ ngắn; nụ hoa hình trứng, tròn. Đài hình chén, uốn lượn, có lông mịn. Cánh hoa 5, hình trái xoan tù, có gợn mép, có mũ đỉnh, dài mm, mép dày mỏng dần vào phía cánh. Nhị 5, nhị hình sợi chỉ; bao phấn hình trái xoan, trung đới màu nâu mặt lưng. Đĩa dính vào bầu, mép rộng, có vân, khía. Bầu nhụy nhẵn, hình nón, có ô, ô noãn; vòi hình trụ; đầu nhụy hình đĩa. Quả mọng, màu đen, 5x4 mm, chứa - hạt, lồi nhăn nheo phía lưng, có hai mặt bụng, hình trái xoan ngược, hẹp dần gốc, mặt cắt ngang hình chữ T, hố nhỏ thuôn, choãi từ gốc. Mùa hoa: tháng , mùa quả: tháng 9. Sách “Cây thuốc động vật làm thuốc” [26], “Từ điển bách khoa dược học” [25] mô tả chè dây sau: Cây leo. Thân cành cứng, hình trụ, có lông nhỏ. Tua chẻ đôi, mọc đối diện với lá. Lá kép lông chim, mọc so le, có -13 chét có cuống, hình trái xoan, dài 2,5 - 7,5 cm, rộng 1, 5-5 cm, gốc tròn, đầu nhọn, mép có cưa, nhẵn, mặt khô có vết trắng loang lổ bị nấm mốc, mặt nhạt; kèm khô xác. Cụm hoa mọc đối diện với thành ngù phân nhiều nhánh, rộng - cm; hoa nhiều C : \HPCHEM\1\DATA\T-DIP806.D Phong Cau t r u e , V i e n Hoa h o c 22 May 106 : pm u s i n g A cq M eth o d DEFAULT 5989B MS FI CH30H F ile O perator A cquired Instrum ent S a m p l e Name M is c I n f o V i a l Number A v e r a g e o f 9T272 t“b 10". 246 m i h T ^ T - D I P W & . D ” Abundance 318 2400 69 2200 2000 1800 1600 1400 55 1200 51 1000 800 153 600 108 400 91 136 200 245 m /z--> M 60 289 W erage of 9.272 t o 10.246 m in .: m/ z 50 .15 51.10 52 .10 53 . 05 54 . 10 55 . 10 56.15 57 . 15 60 . 10 62 . 10 63 . 10 abund. 306 1042 449 981 205 1240 244 700 42 182 648 m/ z 64 . 65.10 66 . 67 . 10 68.10 69 . 05 70 . 10 71.15 73 . 05 77.05 78 . 00 T-D IP806.D abund. 260 219 346 664 247 2311 110 402 21 363 283 m/z 79.05 81.10 83 . 10 . 05 96 . 05 97.05 108.00 136.00 153.00 243.90 244.90 abund. 917 329 96 238 43 21 415 228 573 10 10 m/ z 288.95 317.00 318 . 00 319.00 abund. 30 361 2573 451 PHỤ LỤC 2: CÁC PHỔ CỦA F2 1. Phổ tử ngoại (ƯV) 2. Phổ hồng ngoại (IR) 3. Phổ khối (MS) ABS ABS . 53 393 1.53152 0.0451 _ABS____________ NM NM GS.Ky Gain Baseline 291.111 207.778 98 OFF SBU Page _ABS_ -0.0434 -> 1.8631 Baseline Erase Uieu Re-scale 2ootu Urite labels on the graph 28 Feb 2006 2.0 .3___________ NM Cursor 500.00 _________Hf1 200.00 -> More 500.00 P Eim iN ELMER \ 4000 3500 3000 06/05/22 14:11 Phong TNTT Y: scan, 4.0cm~l, smooth GS.Ky.MauF2 t 2500 2000 1500 1000 500 cni"^ F ile O perator A cquired Instrum ent S a m p le Name M is c I n f o V i a l Number C:\HPCHE M\1\DAT A\T-DIP 804.D Phong Cau t r u e , V i e n Hoa h o c 22 May 106 : pm u s i n g A c q M e t h o d DEFAULT 5989B MS F2 CH30H S c a n 188 Abundance ( 871 32 m i n ) : T - D r P . D 69 11000 10000 9000 8000 153 53 7000 291 320 6000 5000 55 139 40 00 166 3000 2000 96 124 111 273 182 1000 195 I , m /z--> 60 80 l6o , ; jlil' , ! . , il, . , , I . , 1^0 140 l ¿ I 1^0 ' ' 260 228 ' 2^0 ' 245 2^0 31' 284 260 ¿¿0 360 320 S c a n 188 ( . min) F2 T-DIP804.D m/ z abund. m/ z abund. 50 . 3167 62.05 890 1. 15 5005 63 .0 2359 52 . 15 245 64.05 1781 53 . 05 7604 65.05 3970 54.15 1639 66 .1 2711 55 . 15 5139 67.05 3009 56.15 863 68 . 1397 57.15 1683 69.05 11759 58 . 05 315 70.05 1048 60.05 663 1504 71.05 61.05 432 73.15 669 S c a n 188 (8 132 m i n ) : T - D I P .D F2 m/ z 110.05 111.05 121.05 122.05 122.95 124.05 125.05 126.05 127.05 135.95 137.05 abund. 890 1112 626 455 637 1407 536 1229 422 406 754 m/ z 138.05 139.05 140.05 152.05 152.95 153.95 164.95 165.95 166.95 167.95 180.95 abund. 710 4868 917 991 7881 688 1738 2952 396 1332 327 m/z 74 . 05 75.05 76.05 77.05 78.05 79.05 80.05 81.05 82.05 83.05 84 . 15 abund. 424 675 531 1331 1804 1819 1057 1694 1129 932 542 m /z 85 . 05 . 05 92 . 05 93 . 05 94 .0 95.05 96 . 05 97 . 05 98 . 05 108.05 109.05 abund. 805 548 594 747 1028 820 1589 1147 313 796 566 m/ z 181.95 194.90 228.00 244.90 262.90 273.00 283.90 291.00 292.00 301.00 302.00 abund. 842 450 340 472 621 864 336 6314 1017 310 621 m/ z 304 . 00 316.90 318.00 319.00 320 .00 321.00 abund. 321 366 2243 472 6279 1078 PHỤ LỤC 3: CÁC PHổ CỦA F3 1. Phổ tử ngoại (UV) 2. Phổ hồng ngoại (IR) 3. Phổ khối (MS) ABS ABS ABS . 71414 .17875 .14100 . 0542 200.00 NM NM NM NM 335.556 294.444 248.889 213.333 300.00 400.00 500.00 : - 0.1222 -> 4.2021 fiBS 298. 89 .z>^^-.89_ Baseline Erase Uieu Re-scale Zoom Cursor "¡E2BD More Urite labels on the graph__________________________________________ PERKIN ELMER 06/05/12 10:42 Phong TNTT Y: scan, 4.0cm-l, smooth GS.l i 40 I |i|,; i,,,i 60 80 j nl|l„.i 100 liO I I 183 ii 211 233 ^ox 295 309 253 ¿D 267/ 281 r - l - , - r - T * - f - V - r - r - r - r - r T - r - t-- * - r - * - I - r - T - . 140 r '1 ' 368379 T -T -T T lèo • T 180 32Ô0 ^ 2^0 ^ 3^0 240 F ile : O perator : A cquired : Instrum ent : S am ple Name: Mis c I n f o : V i a l Number: C : \HPCHEM\1\DATA\T-DIP796.D Phong Cau t r u e , V i e n Hoa h o c 12 May 106 : pm u s i n g A cqM eth od N-DIP 5989B MS F3 CH30H A v e r a g e o f . t o . 7 m i n V : T-DIP796VD A b u n d an ce 55 7000 57 6000 5000 81 4000 105 133 248 3000 203 137 187 2000 173 'I l| I I m /z--> 396 219 1000 40 ‘ 60 .■ 80 , 111 |! liJ ill i| 100 120 140 ‘ I . I ! i I 256 288303 329 ^^ 368381 llllllUlll Upi I lUjlil lll|LlilllMllljill|jik|Mlill4^liiiluf-'|il|^i^--r^ |i I /•T-r-r' 160 180 200 220 240 260 280 300 320 340 360 380 40 420 440 I n > I i- r - p i I'l I I I I L ib rary Searched Q uality ID D:\DATABASE\WILEY275.L 49 , - D i e t h o x y b e n z a l d e h y d e $$ B e n z a l d e h y d e , , - d i e t h o x y S c a n 85 137 'iUDundance (4.596 m in ): 194 T-DIP796.D {*) 8000 j 0 -! 69 4000 - 2000 J ]I 51 81 124 , 166 lp7 m /z--> 50 A b u n d a n c e f f ‘8'28 : 8000 233 253 281295 100 150 200 250 300 , - D i e t h o x y b e n z a l d e h y d e $“$ B e n z a l d e h y d e , 137 379 350 , 4-dietT i J 194 6000 4000 2000 J tn/z - -> 81 50 109 166 100 200 IN 250 300 350 C^T Scan 86 ( .5 min) F3 m/z 50 .10 51.10 52 .10 53 .10 54 .10 55.10 56 .10 57.20 58 .10 59 .10 60.10 Scan 86 I T-DIP796.D abund. m/z 7069 61.10 7998 62 .10 3472 63 .10 12529 64 .10 3223 65 .10 16392 66.10 3838 67 .10 16536 68 .10 2265 69.10 1671 70.10 2274 71.10 596 m i n ) ; T-DIP796 F3 abund. 3339 5182 8145 2789 3496 3930 6805 4307 36296 6001 12416 m/z 72.10 73 .10 74.10 75.10 76.10 77.1 78 .10 79.10 80 .10 81.10 82.10 abund. 1240 2181 1365 915 491 4740 3325 5280 1706 ■ 11258 4576 m/ z 83 .10 84 . 10 85 . 10 86.20 87.10 88 .10 89.10 90 .10 91.10 92.10 93 . 10 abund. 11148 3971 8691 abund. m/ z abund. 1274 05 .1 1393 5662 106.10 561 7569 107.10 1833 7575 108.10 4222 3243 109.10 6962 4081 110.10 4001 100.10 589 111.10 5746 101.10 721 112.20 1895 102.10 301 113.20 2848 103.10 462 114.10 535 104.10 272 115.10 657 Scan 86 (4 596 m i n ) : T-DIP796.D F3 m/ z 116.10 117.10 118.10 119.10 120.10 121.10 122.10 123.10 124.10 125.10 126.20 abund. 454 537 257 2221 6154 2271 903 2683 10602 3192 1664 m/z .2 .1 .1 130 .10 .1 .1 3 .1 .1 .1 .1 38 .1 a b u r .d . 2579 611 1175 387 482 239 773 550 1505 76736 12234 m/ z abund. m/ z abund. 139.10 2462 150.10 773 140.20 759 151.10 1450 141.20 1792 152.00 4231 142.10 628 153.10 2444 143 .10 529 154.10 1069 144.10 254 155.20 1563 145.10 536 156.10 280 146.20 208 157.10 446 147.10 792 158.10 181 148.10 1334 159.10 446 149.10 1719 160 .20 158 Scan 86 (4 596 m i n ) : T-DIP796.D F3 m/z 161.10 162.10 163 .20 164.10 165.10 166.10 167.10 168.10 169.20 170.20 171.10 abund. 509 250 562 448 6645 10390 2335 774 1210 267 375 m/z .2 173 .20 174.20 75 .2 176.20 177.10 178.10 179.10 180.20 181.10 .2 abund. 129 281 151 428 214 611 584 521 317 666 451 m/ z 207 .10 208 .20 209 .20 210 .3 211 .2 212 .20 213 .2 215 .2 217 .20 218 .2 abund. 282 259 313 278 610 188 223 136 216 172 m/ z 220.10 221.10 222 .20' 223 .20 224 .20 225.30 226 .20 227.20 228.20 229.20 abund. 521 381 164 274 228 32 102 152 177 176 m/ z 94 .10 95 .10 96.10 97.10 98 .10 99.20 m/z 183 .20 184.10 185 .20 186 .20 187.10 188.10 189.20 190.20 191.10 192.20 abund. 916 192 347 113 149 141 332 278 605 452 m/ z 195.10 196.10 197.20 198.20 199.10 200.20 201.20 203 .20 204.10 205.10 abund. 11819 1856 772 331 249 105 138 212 135 198 111 941 296 541 1131 4548 9554 3359 194.00 77160 206.20 Scan 86 ( . m i n ) : T-DIP796.D F3 m/ z 232 .20 233 .20 234 .20 235 .20 236.20 237.20 238.20 239.30 241.30 242 .20 243 .20 abund. 108 400 146 142 283 230 170 346 143 104 122 m/z 250.30 251.30 252.30 253.30 254.30 255.20 256.30 257.30 260.20 264.25 265.25 164 219.10 223 abund. 115 160 156 297 102 192 160 107 183 127 139 m/ z 266.25 267 .2 269 .2 279 .2 280 .3 281.35 295.35 309.35 316.25 368.35 379.45 abund. 116 188 102 134 119 146 147 140 134 108 108 231.20 m/ z 143 ab u r .d . [...]... cành [25] Cây có thể trồng được bằng cách gieo hạt và các cây con thu thập trong tự nhiên [25] Hiện nay, Công ty cổ phần Trapharco đang thực hiện đề tài: Nghiên cứu trồng Chè dây tại Sapa (Lào Cai) để đảm bảo nguyên liệu lâu dài cho sản xuất thuốc Ampelop 1.4 Thành phần hoá học ở Việt Nam, thành phần hoá học của cây Chè dây đã được nghiên cứu khá đầy đủ và đã được đưa vào các tài liệu tra cứu: Cây thuốc... Tên cây Năm thu hái Tháng thu hái Người thu hái Nơi thu hái AC 05 12 02 01 Trong đó: -AC: chè dây -Nơi thu hái: 01: Bản Khoang 02: Sapa 03: thu hái cây mọc hoang -KH khác: N: rửa bằng nước t: mẫu rửa khi tươi k: mẫu rửa khi khô Oz: xử lý vi sinh bằng khí Ô zôn -Nguyên liệu sau khi thu hái được sấy khô và đóng gói trong túi nilon kín 2.2 Phương pháp nghiên cứu Nghiên cứu thành phần hoá học trong cây chè. .. +++ +++ +++ +++ Có Kết luận: Như vậy trong lá chè dây trồng ở Sapa tại các thời điểm thu hái khác nhau đều có flavonoid và tanin 3.3 Định tính flavonoid bằng sắc ký lớp mỏng -Tiến hành làm đồng thời 5 mẫu lá chè dây trồng và 3 mẫu lá chè dây thiên nhiên thu hái ở Sapa tại các thời điểm khác nhau để so sánh -Chuẩn bị dịch chấm sắc ký: Lấy 5 g bột lá chè dây chiết với 50 ml cồn 70° trên cách thuỷ Lọc... phù hợp với các nghiên cứu trước đây về cây chè dây thu hái tự nhiên ở Sapa trong cùng thời gian (tháng 9) 3.5 Phân lập các chất trong lá chè dây trồng ở Sapa 3.5.1 Chất nhồi cột là Sephadex LH20 -Sử dụng cắn chiết đựơc trong phân đoạn ethylacetat ở mục 3.4 để tiến hành phân lập -Cột: đường kính 2,0 cm, chiều dài: 40 cm -Chất nhồi cột: Sephadex LH20 ngâm 48h trong Methanol cho trương hở hoàn toàn -Nạp... thái Chè dây là loại cây ưa ẩm và ưa ánh sáng, thường leo và mọc trùm lên trên các loại cây bụi và cây gỗ nhỏ ở vùng đồi, ven rừng hoặc ở bờ nương rẫy Độ cao phân bố từ 600 đến 1600 m Cây tỏ ra thích nghi với vùng cận nhiệt đới núi cao như Hà Giang, Lào Cai Mùa ra chồi và sinh trưỏfng mạnh trùng với mùa mưa ẩm Những cây mọc trùm lên các loại cây khác có nhiều hoa quả hơn cây bị che bóng Chè dây có... rõ (+): không rõ (-): âm tính Kết luận: Trong lá chè dây trồng ở Sapa có flavonoid, tanin, đường khử tự do, acid hữu cơ, caroten, sterol 3.2 Kết quả định tính 2 nhóm chất chính trong lá chè dây trồng ở Sapa tại các thời điểm thu hái khác nhau Tiến hành định tính flavonoid và tanin theo quy trình như ở mục 3.1.2 và 3.1.5 Kết quả định tính được tóm tắt ở bảng sau: Bảng 3.2: Kết quả định tính Flavonoid... tràng 92,5% Làm sạch HP 70% Giảm hoạt động viêm của niêm Rõ rệt: từ viêm hoạt động mức độ vừa và nặng sang viêm không hoạt mạc hang vị dạ dày động hoặc hoạt động nhẹ Nhóm thuốc AMA được dung nạp tốt, không có tác dụng không mong muốn PHẦN II; NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Nguyên liệu -Nguyên liệu là lá cây chè dây trồng và thu hái tự nhiên ở Sapa trong khoảng thời gian từ tháng 08/2004 đến... [26], Từ điển bách khoa dược học [25] Kết quả nghiên cứu của Phùng Thị Vinh [21], Vương Thị Hồng Vân [20] cho thấy: Chè dây có chứa ílavonoid, tanin, đường, caroten, sterol và acid hữu cơ Theo Phạm Thanh Kỳ và cộng sự, hàm lượng flavonoid toàn phần trong lá chè dây là 18,15% ± 0,36% Flavonoid tồn tại dưới 2 dạng aglycon và glycosid [14], [16], [20], [21] SKLM flavonoid toàn phần với hệ dung môi Toluen-Ethyacetat-Acid... máy UV-VIS Spectrophotometer cary lE tại phòng Thí nghiệm trung tâm- Đại học Dược Hà Nội - Đo phổ IR tại phòng Thí nghiệm trung tâm- Đại học Dược Hà Nội - Đo phổ khối trên máy 5989B MS tại phòng cấu trúc- Viện hoá học PHẦN III: THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 3.1 Định tính các nhóm chất trong lá Chè dây trồng ở Sapa bằng phản ứng hoá học Mẫu dược liệu: AC0408-02-01 thu hái 18/08/2004 3.1.1 Định tính glycosid... xuất từ cây Chè dây (A cantoniensis Planch.) có chứa 80% ílavonoid toàn phần Chế phẩm đã được thử nghiệm rộng rãi trên lâm sàng và chứng minh được tác dụng tốt trong điều trị viêm loét dạ dày- hành tá tràng - Trong luận án PTS của Vũ Nam [19] đã nghiên cứu chế phẩm AMPELOP trên lâm sàng điều trị cho 44 bệnh nhân so sánh với nhóm dùng Alusi (36 bệnh nhân) cho một số kết quả sau: Tác dụng Chè dây Cắt . cơ sở khoa học cho việc thu hái chè dây trồng làm nguyên liệu sản xuất thuốc, em tiến hành nghiên cứu đề tài: Nghiên cứu thành phần hóa học cây chè dây trồng ở Sapa (Lào Cai)*' với các. [|^ ; ^ m BỘ YTẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI NGUYỄN THỊ NGỌC QUÝ NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HÓA HỌC CỦA CÂY CHÈ DÂY TRỔNG ở SAPA (KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP Dược SỸ KHOÁ 2001-2006) Người. cổ phần Trapharco đang thực hiện đề tài: Nghiên cứu trồng Chè dây tại Sapa (Lào Cai) để đảm bảo nguyên liệu lâu dài cho sản xuất thuốc Ampelop. 1.4. Thành phần hoá học ở Việt Nam, thành phần