TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA THỦY SẢN ĐÀM THỊ HỒNG HẠNH KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HÓA CỦA HỖN HỢP POLYSACCHARIDE LY TRÍCH TỪ LOÀI RONG MƠ Sargassum microcystum VÀ RONG QUẠT Padina gymnospora LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN 2014 TRƯỜNG ĐẠI HỌC CẦN THƠ KHOA THỦY SẢN ĐÀM THỊ HỒNG HẠNH KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HÓA CỦA HỖN HỢP POLYSACCHARIDE LY TRÍCH TỪ LOÀI RONG MƠ Sargassum microcystum VÀ RONG QUẠT Padina gymnospora LUẬN VĂN TỐT NGHIỆP NGÀNH NUÔI TRỒNG THỦY SẢN CÁN BỘ HƯỚNG DẪN PGs.Ts. NGÔ THỊ THU THẢO 2014 KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HÓA CỦA HỖN HỢP POLYSACCHARIDE LY TRÍCH TỪ LOÀI RONG MƠ Sargassum microcystum VÀ RONG QUẠT Padina gymnospora Đàm Thị Hồng Hạnh, Huỳnh Trường Giang Dương Thị Hoàng Oanh ABSTRACT This study was conduct to evaluate chemical composition and antioxidant activity of polysaccharide extracted from Sargassum microcystum and Padina gymnospora. Polysaccharide is extracted with solvents, hot water and HCl 0.1N 100oC within and hours for each solvents. The results show that polysaccharide extracted by HCl 0.1N in hours has highest yield about 18,9±0,5% and 31,3±0,6% in S. microcystum and P. gymnospora repectively whereas HCl 0,1N in hours and hot-water in and hours have lower yield. Carbohydrate concentration in each treatment is low from 8,2% to 26% in S. microcystum and 0,33% - 9,54% in P. gymnospora. The contents of glucose in polysaccharide from S. microcystum and P. gymnospora highest in treatment hot-water within hours 18,4% and 3,1% for others treatment. DPPH free radicals scavenging activity, ferrous ion chelating and ferric reducing power increase proportionally with the rising of polysaccharide concentration. It shows that the polysaccharide extracted from S. microcystum and P. gymnospora can be used as a rich compound in antioxidant activity and can research to apply in aquaculture in order to increase immunity of shrimp and fish. TÓM TẮT Nghiên cứu thực nhằm đánh giá thành phần hóa học hoạt tính chống oxy hóa hỗn hợp polysaccharide ly trích từ rong mơ Sargassum microcystum rong quạt Padina gymnospora. Hỗn hợp polysaccharide ly trích dung môi nước 100oC HCl 0,1N 100oC thời gian giờ. Kết cho thấy ly trích dung môi HCl 0,1N thu sản lượng cao 18,9±0,5% 31,3±0,6% tương ứng rong mơ S. microcytum rong quạt P. gymnospora, nghiệm thức HCl 0.1N giờ, nước nước giờ. Hàm lượng carbohydrate nghiệm thức tương đối thấp, dao động 8,2% – 26% với rong mơ S. microcystum 0,33% - 9,54% rong quạt P. gymnospora. Hàm lượng đường glucose hỗn hợp polysaccharide rong mơ S. microcystum rong quạt P. gymnospora cao nghiệm thức nước giờ, đạt 18,4% 3,1% tương ứng. Hoạt tính khử gốc oxy hóa DPPH•, hoạt tính tạo phức với Fe2+ hoạt tính khử Fe+3 gia tăng tỉ lệ thuận với gia tăng hàm lượng hỗn hợp polysaccharide đạt cao nghiệm thức nước giờ. Điều cho thấy hỗn hợp polysaccharide ly trích từ rong mơ S. microsystum rong quạt P. gymnospora sử dụng hợp chất có hoạt tính chống oxy hóa nghiên cứu, ứng dụng nuôi trồng thủy sản nhằm tăng cường miễn dịch tôm cá nuôi. 1. GIỚI THIỆU Rong biển tài nguyên chứa nhiều nguồn dược liệu quý có tác dụng điều trị bệnh vi khuẩn, nấm, protozoa, vi rút kể ung thư. Các hợp chất polysaccharide ly trích từ rong biển sử dụng chất chống oxy hóa, chất chống đông máu, chống ung thư, chất kháng khuẩn… Hoạt tính chống oxy hóa tiêu quan trọng việc đánh giá miễn dịch tế bào. Các phân tử sinh học tế bào protein, DNA, lipid bị phá hủy gốc oxy hóa này…(Wu et al., 1998). Những chất chống oxy hóa, chất tăng cường miễn dịch sức đề kháng động vật thủy sản tôm sú (Penaeus monodon), tôm he Ấn Độ (Fenneropenaeus chinensis), thẻ chân trắng (Litopanaeus vannamei) ứng dụng thành công nuôi trồng thủy sản số nước hỗn hợp polysaccharide chiết xuất từ rong nâu Phaeophyceae (Chotigeat et al., 2004; Huang et al., 2006; Yeh et al., 2006; Giang et al., 2011). Rong nâu Phaeophyceae – nguồn tài nguyên sẵn có dồi tự nhiên với 400 loài miêu tả (Yoshida, 1983; Lu Tseng, 2004). Ở Việt Nam, gần 1.000 loài rong biển ngành rong nâu (Phaeophyceae) chiếm 143 loài, giống Sargassum phát gồm 22 loài miền Bắc 13 loài miền Nam (Phạm Hoàng Hộ, 1969; Nguyễn Hữu Dinh ctv., 1993). Trên Thế Giới, rong quạt Padina phát gồm 66 loài phân bố chủ yếu vùng ôn đới nhiệt đới (Winanyuda, et al., 2013). Do đó, việc nghiên cứu “Thành phần hóa học đặc tính chống oxy hóa hỗn hợp polysaccharide ly trích từ loài rong Mơ Sargassum mycrocystum rong Quạt Padina gymnospora” ứng dụng vào ngành thủy sản xu hướng phù hợp giai đoạn nay. 2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1. Thời gian địa điểm Thời gian thực từ tháng 07/2014 đến 12/2014. Mẫu rong S. microcystum P. gymnospore thu vùng ven biển thuộc tỉnh Kiên Giang (vùng biển huyện Kiên Lương Hà Tiên). Tiến hành ly trích, xác định thành phần hóa học hoạt tính chống oxy hóa thực Phòng thí nghiệm Phân tích chất lượng nước – Khoa Thủy sản – Trường Đại học Cần Thơ. 2.2. Chuẩn bị mẫu Mẫu rong S. microcystum P. gymnospora sau thu làm nước máy vận chuyển phòng Thí nghiệm. Sau đó, mẫu rong tráng nước cất sấy 37 o C trọng lượng không đổi. Tiếp theo mẫu rong nghiền máy sàn qua rây với mắt lưới 125 µm. Bột rong bảo quản oC tiến hành ly trích. 2.3. Phương pháp nghiên cứu 2.3.1. Bố trí thí nghiệm Nghiên cứu bao gồm thí nghiệm sau: Thí nghiệm 1: Đánh giá hàm lượng hỗn hợp polysaccharide từ loài rong mơ S. microcystum rong quạt P. gymnospore sau ly trích dung môi khác 10g bột rong ly trích 300 mL dung môi khác (nước, HCl) nhiệt độ 100 oC nghiệm thức (NT) (mỗi nghiệm thức lặp lại lần). Cụ thể sau: Bảng 1: Nghiệm thức ly trích rong mơ S. microcystum rong quạt P. gymnospora NT1 Nước NT2 NT3 S. microcystum Nước HCl giờ NT4 NT5 HCl Nước NT6 NT7 P. gymnospora Nước HCl giờ NT8 HCl Sau thời gian định, mẫu lọc qua lưới lọc có mắt lưới 57 µm. Sau đó, phần dung dịch vừa lọc ly tâm với tốc độ 4000 vòng/phút phút. Phần dung dịch lại loại nước 37 oC. Tiếp theo, mẫu cân xác định hàm lượng hỗn hợp polysaccharide (%) thu hoạch. Thí nghiệm 2: Xác định thành phần hóa học hoạt tính chống oxy hóa hỗn hợp polysaccharide ly trích từ rong mơ S. microcystum rong quạt P. gymnospore. Từ NT tương ứng (giống thí nghiệm 1) hỗn hợp phân tích xác định thành phần hóa học hoạt tính chống oxy hóa. Mỗi nghiệm thức phân tích lặp lại lần. 2.3.2. Phương pháp phân tích mẫu Phân tích thành phần hóa học: Bảng : Phương pháp phân tích thành phần hóa học hỗn hợp polysaccharidde STT Chỉ tiêu Phương pháp phân tích 1. Protein Công phá Kjedahl so màu phương pháp Phenate (APHA et al., 1999) 2. Photpho Công phá Kjedahl so màu phương pháp SnCl2 (APHA et al., 1999) 3. Carbohydrate Phenol-sulfuric acid (Dubois et al., 1956) 4. Glucose GC/MS (Dubois et al., 1956) 5. L-fucose Phenol-sulfuric acid (Dubois et al., 1956) 6. SO42- Turbidimetric (Terho Hartiala, 1971; APHA et al., 1999) 7. Phlorotannin Folin phenol (APHA et al., 1999) Phân tích hoạt tính chống oxy hóa: hoạt tính khử gốc tự DPPH● (2,2diphenylpicylhydrazyl) – C18H12N5O6+ xác định dựa theo phương pháp Shimada et al., (1992); hoạt tính tạo chelat với Fe2+ xác định theo phương pháp Dinis et al., (1994); khả khử Fe3+ hỗn hợp polysaccharide xác định theo phương pháp Oyaizu (1988). 2.4. Xử lý số liệu Hàm lượng polysaccharide tính giá trị trung bình độ lệnh chuẩn nghiệm thức. Các tiêu hoạt tính loại bỏ gốc DPPH●; hoạt tính tạo phức với Fe2+ khả khử Fe3+ dựa vào nồng độ polysaccharide hoạt tính (%) xử lý để đánh giá độ tương quan. IC50 giá trị nồng độ polysaccharide mà hoạt tính đạt 50% ước lượng thông qua phương trình tương quan Y = aX + b nồng độ polysaccharide hoạt tính (%). 3. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1. Hàm lượng polysaccharide ly trích từ rong S. mycrocystum P. gymnospora Sản lượng thu rong quạt P. gymnospora cao nghiệm thức HCl 0.1N (31,32±0,6%), tiếp đến nghiệm thức HCl 0.1N (30,20±0.4%) nghiệm thức nước (23,51±0,4%), thấp nghiệm thức nước (19,87±0,6%). Sản lượng thu rong mơ S. microcystum cao nghiệm thức HCl 0.1N (18,9±0,5%), tiếp đến nghiệm thức HCl 0.1N (18,67±0,4%) nghiệm thức nước (9,92±0,6%), thấp nghiệm thức nước (7,97±0,5%). Nhìn chung, sản lượng thu rong quạt P. gymnospora (31,32%) cao rong mơ S. microcystum (18,9%) nghiệm thức HCl giờ.35.0 Rong mơ Rong quạt polysaccharide (%) 30.0 25.0 20.0 15.0 10.0 5.0 0.0 nước nước HCl HCl Hình : Hàm lượng polysaccharide từ rong S. microcystum P. gymnospora Giang et al., (2011) báo cáo sản lượng polysaccharide S. hemiphyllum var. chinense thu hoạch 31% sử dụng dung môi nước 100oC giờ. Lim et al., (2002) nghiên cứu ly trích rong mơ S. siliquastrum methanol, nước 100oC, kết cho thấy sản lượng polysaccharide thu 6,42 2,41% tương ứng. Kết thấp so với kết Giang et al. (2013) nghiên cứu S. microcystum ly trích dung môi HCl 0.1N nước 100oC thu sản lượng tương ứng 40,2% 25%. Davis et al. (2014) sử dụng dung môi HCl 0,2N, thu sản lượng 21,1-24,5% S. fluitans 16,3-20,5% cho S. oligocystum, tương ứng cho S. dentifolium 3,25%, S. asperifolium 12,4%, S. latifolium 17,7%. Những kết cho thấy hàm lượng polysaccharide thay đổi tùy theo dung môi, nhiệt độ loài rong biển. Bên cạnh đó, Jormalainen Honkanen (2004) nhận định sản lượng ly trích thay đổi theo loài, theo mùa vụ thu mẫu rong điều kiện dinh dưỡng mà rong phát triển. Qua nghiên cứu thấy rằng, rong P. gymnospora dung môi HCl 0,1N – 100oC đánh giá hiệu việc ly trích polysaccharide đạt hàm lượng cao (31,32%). 3.2. Thành phần hóa học hỗn hợp polysaccharide ly trích từ rong mơ S. microcystum rong quạt P. gymnospora 3.2.1 Protein phot Hàm lượng protein hỗn hợp polysaccharide thấp, cao ly trích dung môi nước hai loài S. microcystum (6,8±0,8%), P. gymnospora (10±1,1%) thấp nghiệm thức HCl với hàm lượng 1,3±0,2% (S. microcystum), 2,8±0,3% (P. gymnospora). Tương tự, hàm lượng photpho hỗn hợp polysaccharide thấp, dao động từ 0,14% đến 0,32% rong mơ S. microcystum 0,35% đến 0,46% rong quạt P. gymnospora, tương ứng với dung môi HCl nước giờ. Hầu hết loài rong nâu Phaeophyceae hàm lượng protein photpho không cao. Theo Santoso et al. 2013, hàm lượng protein Padina australis đạt 10,76%. Theo Dawczynski et al., 2007, protein rong P. fernandeziana dao động từ - 8%. Cũng theo tác giả hàm lượng protein thay đổi theo mùa điều kiện môi trường. S. illicifolium đạt 9,18% protein (Hafezieh et al, 2014). Tuy nhiên có số loài có hàm lượng protein cao S. longicruris (27,7±1,5%) (Rioux et al., 2007). Giang Chen (2010) cho biết hỗn hợp polysaccharide ly trích từ S. hemiphyllum var.chinense phương pháp nước 100oC hàm lượng protein mức 9,1% . 0.6 AA B Rong quạt protein % 0.5 Rong mơ 10 photpho % 12 0.3 0.2 0.1 HCl Rong quạt 0.4 nước nước Rong mơ nước nước HCl HCl HCl Hình 2: Hàm lượng protein (A) photpho (B) hỗn hợp polysaccharide. 3.2.2 Đường glucose,L- fucose SO42Hàm lượng đường glucose thu hai loại rong biển cao nghiệm thức nước (18,4±0,072% S. microcystum 3,1±0,01% P. gymnospora), thấp nghiệm thức HCl (2,8±0,002% S. microcystum 0,2±0,003% P. gymnospora). Hàm lượng đường L-fucose thu rong mơ S. microcystum cao nghiệm thức nước (9,9±0,037%) thấp nghiệm thức HCl (3,6±0,002%), rong quạt P. gymnospora cao 3,6±0,036% nghiệm thức HCl thấp 0,7±0,029% nghiệm thức HCl giờ. Hàm lượng SO42- thu rong mơ S. microcystum dao động từ 4,4% đến 7,9% nghiệm thức nước HCl giờ, 8,8% đến 9,1% nghiệm thức HCl nước rong quạt P. gymnospora. 20 L-fucose 14 B Rong m 10 Rong mơ Rong quạt 16 glucose % 12 A 18 12 10 Rong quạt nước nước HCl nước HCl nước HCl HCl Hình 3: Hàm lượng glucose (A) L- fucose (B) hỗn lợp polysaccharide. L-fucose dạng đường trung tính quan trọng thường chứa nhiều ngành rong nâu (Phaeophyta) đường sulfate fucan dạng đường chủ yếu tìm thấy rong nâu. Khi ly trích dung môi nước 100oC hàm lượng đường L-fucose thu loài rong Padina australis, P. minor, Sargassum polycystum tương ứng 6,65%, 7,1%, 4,25%. Còn ly trích dung môi HCl 2M thu hàm lượng L-fucose 6,8%, 3,8%, 5,75%. Hàm lượng glucose thu P. minor ly trích hai dung môi thấp, dao động từ 0.09% đến 0.10% .Hàm lượng đường sunfate thu P. australis, S. polycystum 9.88% 10,9% (Kasetsart et al., 2010). Eluvakkal et al., (2010) báo cáo rong S. wightii có hàm lượng SO42- (9,9%), L-fucose (23,3%). Nếu so sánh với kết trước hàm lượng SO42- rong mơ S. microcytum ( 0,6% - 2,33%) rong quạt P. gymnospora (0,37% - 0,64%) thấp. 3.2.3 Phlorotannin Hàm lượng phloprotannin hỗn hợp polysaccharide ly trích từ rong mơ S. microcystum rong quạt P. gymnospora có hàm lượng thấp, S. microcystum dao động từ 0,48% đến 0,63%, P. gymnospora dao động 0,51% đến 0,63% nghiệm thức nước HCl giờ. Tannin tự nhiên bao gồm Hydrolysable-tannin thường tìm thấy hạt kín (Waterman Mole, 1994); Flavonoid-tannin dạng tìm thấy rượu vang, trà, hạt ca cao (Santos-Buelga Scalbert, 2000) phlorotannin (bao gồm phloroglucinol) tìm thấy rong nâu Phaeophyceae (Ragan Glombitza, (1986). Hàm lượng tannin Sargassum (0,12%) đáng kể. Theo Okwu, (2004), hàm lượng phlorotannin biến động tùy theo loài theo giai đoạn phát triển, phận khác thân phương pháp chiết tách. A 10 rong mơ rong quạt B 0.7 0.6 SO4 % Rong mơ Rong quạt phlorotannin % 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 nước nước HCl HCl nước nước HCl HCl Hình : Hàm lượng SO42- (A) phlorotannin (B) hỗn hợp polysaccharide. 3.2.4 Carbohydrate Nghiệm thức ly trích polysaccharide dung môi nước đạt hàm lượng carbohydrate cao (đối với hai loài rong) S. microcystum (25,99%) P. gymnospora (9,54%), thấp nghiệm thức HCl 8,20% (S. microcystum) 0,33% (P. gymnospora). Theo Santoso et al., (2013), hàm lượng carbohydrate rong Padina australis chiếm 62,21%. Rong P. fernandeziana có hàm lượng carbohydrate dao động từ 30 – 40% (Goecke, Escobar, Collantes., 2012). Theo Peng et al., (2013), S. naozhouense chứa 47,73% tổng số carbohydrate. Khi ly trích hai loài rong P. australis S. polycystum dung môi nước 100oC thu hàm lượng carbohydrate tương ứng 40,07% 40,1% (Kasetsart .,2010). Cũng theo tác giả hàm lượng carbohydrate loài rong nâu phụ thuộc vào dung môi, nhiệt độ, thời gian ly trích môi trường sống chúng. Từ kết cho thấy hàm lượng carbohydrate thu từ rong mơ S. microcystum (25,99%) rong quạt P. gymnospora (9,54%) thấp. 3.2. Hoạt tính chống oxy hóa hỗn hợp polysaccharide ly trích từ rong mơ S. microcystum rong quạt P. gymnospora. 3.2.1. Hoạt tính loại bỏ gốc tự DPPH•. Hoạt tính loại bỏ gốc DPPH• gia tăng tỉ lệ thuận với nồng độ hỗn hợp polysaccharide. Hỗn hợp polysaccharide ly trích nước có hoạt tính loại bỏ gốc DPPH• cao S. microcystum (81,2% nồng độ 0,8 mg/mL) nghiệm thức HCl rong P. gymnospora (72,3% nồng độ mg/ml), thấp nghiệm thức HCl S. microcystum (19,1% nồng độ 0,8 mg/mL) nghiệm thức nước P. gymnospora (55,3% nồng độ mg/mL). 80 90 81.2 70 80 Rong mơ 64.1 60 DPPH (%) DPPH (%) 70 60 50 40 30 19.3 20 19.1 72.3 Rong quạt 55.3 57.8 59.5 H20 H20 HCl 50 40 30 20 10 10 H20 H20 HCl HCl HCl Hình 5: Hoạt tính loại bỏ gốc tự DPPH• rong mơ S. microcystum (0,1-0,8mg/mL) rong quạt P. gymnospora (0,5-4mg/mL) Hoạt tính loại bỏ gốc oxy hóa DPPH• đạt 26,77% xử lý với hỗn hợp polysaccharide ly A độ 3,3 mg/mL (Budhiyanti et al, 2012). Theo Zahra et trích từ rong nâu S. pallidum nồng al., 2007 hoạt động chống oxy hóa S. boveanum đạt mức 90% nồng độ mg/ml giá trị IC50 3,82 mg/mL. Hỗn hợp polysaccharide ly trích từ P. tetrastromatica có hoạt tính loại bỏ gốc tự DPPH• 78,6 mg/mL (Kayalvizhi et al., 2014). S. hemiphyllum ly trích dung môi nước 180oC cho thấy hoạt tính loại bỏ gốc tự DPPH• gia tăng với gia nồng độ với phương trình tuyến tính (y = 25.78x + 9,25, r2 = 0,960) (Hwang et al., 2010). Từ nhận định cho thấy hỗn hợp polysaccharide ly trích nước rong mơ S. microcystum có hoạt tính loại bỏ gốc oxy hóa tự DPPH• nghiên cứu cao (81,2% nồng độ 0,8 mg/mL). 3.2.2 Hoạt tính tạo chelat với Fe2+ Nhìn chung, tương quan nồng độ hoạt tính tạo phức với Fe2+ cao. Ở rong mơ S. microcystum, hoạt tính tạo chelat với Fe2+ cao ly trích polysaccharide dung môi nước đạt 49,6% nồng độ 0,8 mg/mL, thấp ly trích dung môi HCl đạt 14,7% nồng độ 0,8 mg/mL. Còn rong quạt P. gymnospora, hoạt tính tạo 10 phức cao nghiệm thức nước đạt 89,2% thấp 24,4 % nghiệm thức HCl giờ. Kết cho thấy hoạt tính tạo chelat với Fe2+ rong mơ S. microcystum ly trích dung môi nước (49,6% nồng độ 0,8 mg/mL) cao so với kết Giang et al., 2013 đạt 76,77% nồng độ mg/mL. Khi nghiên cứu hoạt tính tạo phức hỗn hợp polysaccharide ly trích từ Padina autralis đạt 92,9%. Hỗn hợp polysaccharide ly trích dung môi nước từ S. hemiphyllum, cho thấy hoạt tính tạo phức với Fe2+ có mối quan hệ tuyến tính với phương trình (y = 22.71x + 3,00, r2 = 0,975), giá trị IC50 2,07 mg/mL (Hwang et al., 2010). 100 60 50 47.1 89.2 90 49.6 80 Rong mơ Rong quạt 72.2 30 20 60 50 38.8 40 24.4 30 14.7 20 10 10 H20 H20 HCl H20 H20 HCl HCl HCl Hình 6: Hoạt tính tạo chelat với Fe2+ rong mơ S. microcystum (0,1-0,8mg/mL) rong quạt P. gymnospora (0,5-4mg/mL) 3.3.3 Hoạt tính khử Fe3+ Các hỗn hợp polysaccharide ly trích từ S. microcystum P. gymnospora thể hoạt tính khử Fe+3. Điều thể rõ độ hấp thụ quang gia tăng với nồng độ hỗn hợp ly trích. Độ hấp thụ quang rong mơ S. microcystum tăng từ 0,18-0,653 rong quạt P. gymnospora tăng từ 0,129-0,298 nồng độ thay đổi từ 0,5-4 mg/mL nghiệm thức nước giờ. 1 0.635 0.580 0.298 Rong mơ 0.244 0.374 0.327 Fe 3+ 0 H20 H20 HCl Rong quạt Fe 3+ Fe 2+ 33.4 Fe 2+ 70 40 0.143 H20 HCl 0.126 H20 HCl HCl Hình 7: Hoạt tính tạo phức với Fe3+ rong mơ S. microcystum (0,5-4mg/mL) rong quạt P. gymnospora (0,5-4mg/mL) Tuy hoạt tính khử Fe+3 hỗn hợp polysaccharide ly trích từ S. hemiphyllum nồng độ 1,0 mg/mL cho giá trị lên đến 1.2 (Hwang et al., 2010) kết nghiên cứu 11 lại thấp nhiều. Kết nghiên cứu phù hợp với Wang et al. (2009) mà tác giả cho polysaccharide ly trích rong Laminaria japonica có nồng độ thay đổi từ 0,5-2,5 độ hấp thụ quang thay đổi từ 0,33-0,44. 4. Kết luận đề xuất 4.1 Kết luận Kết nghiên cứu cho thấy hàm lượng polysaccharide hai loài rong S. microcystum (18,7%) P. gymnospora (31,3%) đạt cao ly trích dung môi HCl 0,1N giờ. Thành phần hóa học hoạt tính chống oxy hóa rong mơ S. microcystum rong quạt P. gymnospora đạt hàm lượng cao ly trích dung môi nước giờ, S. microcystum (protein: 6,8%; photpho: 0,52%; glucose: 18,45; l-fucose: 9,9%; carbohydrate: 26%; hoạt tính loại bỏ gốc tự DPPH•: 81,2% nồng độ 0,8 mg/mL; khả tạo chelat với Fe2+: 49,6% nồng độ 0,8; khả khử Fe3+: 0,327% nồng độ mg/mL), P. gymnospora (protein: 9,7%; photpho: 0,46%;glucose: 3,1%;carbohydrat; 9,5%;SO42-: 9,1%; khả tạo chelat với Fe2+: 0,289%). Hàm lượng protein, carbohydrate, glucose, L-fucose hỗn hợp polysaccharide rong mơ S. microcystum cao so với rong quạt P. gymnospora điều kiện ly trích. Đồng thời hoạt tính chống oxy hóa cao hơn. Kết đạt chứng minh sử dụng hỗn hợp polysaccharide ly trích từ rong mơ S. microcystum rong quạt P. gymnospora dung môi nước nguồn hợp chất giàu hoạt tính chống oxy hóa từ rong nâu. 4.2 Đề xuất Những nghiên cứu cần tập trung vào dung môi phương pháp ly trích loài rong biển khác nhằm đạt hiệu cao. Ngoài ra, tiếp tục kiểm tra việc sử dụng nguồn hợp chất vào việc tăng suất thủy sản thời gian tới. Có thể ứng dụng nguồn tài nguyên sẵn có dồi tự nhiên vào việc tăng cường hệ miễn dịch sức đề kháng nuôi trồng thủy sản phương thức bổ sung vào thức ăn hay cải thiện môi trường nước. TÀI LIỆU THAM KHẢO Balboa, E.M., S. Rivas, A. Moure, H. Domínguez, and J.C. Parajó, 2013. Simultaneous Extraction and Depolymerization of Fucoidan from Sargassum muticum in Aqueous Media. Mar. Drugs. 11, 4612–4627. Butt, G., E. Hussan, A. Rehman, 2014. Ferrous ion-chelating Assay for analysis of antioxidant potential of Sargassum sp and Iyengaria sp. Mar. Drugs 9, 952-966. Beni Setha, B., F.F. Gaspersz, A.P.S. Idris, S. Rahman, M.N. Mailoa, 2013. Potential Of Seaweed Padina Sp. As A Source Of Antioxidant. Botanica Marina Vol. 45, 339–345. 12 Badrinathan, S., S.C. Suneeva, T.M. Shiju, C.P. Girish-Kumar, V. Pragasam, 2011. Exploration of a novel hydroxyl radical scavenger from Sargassum myriocystum. Journal of Medicinal Plants Research 5, 1997-2005. Blondin, C., E. Fischer, C. Boisson-Vidal, M.D. Kazatchkine, J. Jozefonvicz, 1994. Inhibition of complement activation by natural sulfated polysaccharides (fucoidans) from brown seaweed. Mol. Immunol. 31, 247-253. Chowdhury, T.T.H. , I. Bangoura, J.Y. Kang, N.G. Park, D.H. Ahn, Y.K. Hong, 2011. Distribution of Phlorotannins in the brown alga Ecklonia cava and comparison of pretreatments for extraction. Fisheries and Aquatic Sciences 14, 198-204. Chotigeat, W., Tongsupa, S., Supamataya, K., Phongdara, A., 2004. Effect of fucoidan on disease resistance of black tiger shrimp. Aquaculture 233, 23-30. Costa, L.S., G.P. Fidelis, C.B.S.Telles, N. Dantas-Santos, R.B.G. Camara, S.L. Cordeiro, M.S.S.P. Costa, J. Almeida-Lima, R.F. Melo-Silveira, R.M. Oliveira, I.R.L. Albuquerque, G.P.V. Andrade and H.A.O. Rocha, 2011. Antioxidant and Antiproliferative Activities of Heterofucans from the Seaweed Sargassum filipendula. Botanica Marina Vol. 45, pp. 339–345. Dotulong, V., S.B. Widjanarko, Yunianta, L.P. Mamahit, 2013. Antioxidant Activity of Three-Marine Algae Methanol Extract Collected from North Sulawesi Waters, Indonesia. Pak. J. Bot., 45(1): 341-344. Duarte, M.E.R., M.D. Noseda, M.A. Cardoso, S. Tuluo, A.S. Cerezo, 2002. The structure of a galactan sulfate from the red seaweed Bostrychia montagnei. Carbohydr. Res. 337, 1137-1144. Đặng Xuân Toàn, 2009. Nghiên cứu công nghệ sản xuất chất dinh dưỡng bổ sung cho phân bón qua từ nguồn rong biển nước. Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ. 25 (2013), 36-42. Đặng Xuân Cường, Vũ Ngọc Bội,Trần Thị Thanh Vân Ngô Đăng Nghĩa, 2013. Sàng lọc hoạt tính chống oxy hóa số loài rong nâu Sargassum Khánh Hòa, Việt Nam. Tạp chí hóa học. 45, 339-343. Franz, G., D. Paper, S. Alban, 2000. Pharmacological activities of sulphated carbohydrate polymers. In: Paulsen BS (ed.) Bioactive Carbohydrate Polymers, Kluwer Academic Publishers, Dordrecht. pp.47-58. Huỳnh Trường Giang, Dương Thị Hoàng Oanh, Vũ Ngọc Út Trương Quốc Phú, 2013. Thành phần hóa học hoạt tính chống oxy hóa hỗn hợp polysaccharide ly trích từ rong Sargassum microcystum. Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ. 25 (2013): 183-191. Halliwel, B., 1987. Oxidative damage, lipid peroxidation and antioxidant protection in chloroplasts. Chem. Phys. Lipids 44, 327-340. Haroun-Bouhedja, F., M. Ellouali, C. Sinquin, C. Boisson-Vidal, 2000. Relationship between sulfate group and biological activities of fucans. Thrombosis Res. 100, 453-459. 13 Hong, D.D., H.M. Hien, H.T.L. Anh, 2011. Studies on the analgesic and anti-inflammatory activities of Sargassum swartzii (Turner) C. Agardh (Phaeophyceae) and Ulva reticulata Forsskal (Chlorophyta) in experiment animal models African Journal of Biotechnology 10, 2308-2314. Huang, X., Zhou, H., Zhang, H., 2006. The effect of Sargassum fusiforme polysaccharide extracts on vibriosis resistance and immune activity of the shrimp, Fenneropenaeus chinensis. Fish Shellfish Immunol. 20, 750-757. Jormalainen, V., T. Honkanen, 2004. Variation in natural selection for growth and phlorotannins in the brown alga Fucus vesiculosus. Journal of Evolution Biology 17, 807-820. Jormalainen, V., T. Honkanen, 2008. Macroalgal chemical defenses and their roles in structuring temperate marine communities. In: Algal Chemical Ecology, Amsler, C.D. (Ed). Springer: Berlin. pp 57-89. Kloareg, B., R.S. Quatrano, 1988. Structure of the cell walls of marine algae and ecophysiological functions of the matrix polysaccharide. Oceanography Marine Biology Annual Reiew 26, 259-315. Krull, L.H., G.L. Cote, 1992. Determination of gulose and/or guluronic acid by ion chromatography and pulsed amperometric detection. Carbohydr. Polym. 17, 205-207. Mole M.N., A.B. Sabale, 2013. Antioxidant Potential of Seaweeds from Kunakeshwar along the West Coast Maharashtra. Cellular Microbiology. 7, 471–479. Nguyễn Hữu Đại. Rong Mơ (Sargassaceae) Việt Nam. Nguồn lợi ứng dụng, 1997. Nhà xuất Nông nghiệp. 200 trang. Nguyễn Hữu Dinh, Huỳnh Quang Năng, Trần Ngọc Bút, Nguyễn Văn Tiến, 1993. Rong biển Việt Nam – Phần phía Bắc. Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật. 364 trang. Oyesiku, O.O and A. Egunyomi, 2007. Identification and chemical studies of pelagic masses of Sargassum natans (Linnaeus) Gaillon and S. fluitans (Borgessen) Borgesen (brown algae), found offshore in Ondo State, Nigeria. African Journal of Biotechnology. Vol. 13(10), pp. 1188-1193. Ocurencer of Padina gymnospora (Phaeophycota at the coast of Karachi . Pak. J. Bot., 45(1): 341-344, 2013. Pai-An ,H., W. Chwen-Herng, G. Shu-Yun, C. Shih-Yung, and H. Deng-Fwu, 2010. Antioxidant and immune-stimulating activities of hot-water extract from seaweed Sargassum hemiphyllum. Journal of Marine Science and Technology, Vol. 18, No. 1, pp. 41-46. Torres, R., A.P.A. Sousa, E.A.T.S. Filho, D.F. Melo, J.P.A. Feitosa, R.C.M.P. Paulab, and M.G.S. Limaa,. Extraction and physicochemical characterization of Sargassum vulgare alginate from Brazil. Carbohydrate Research. 342, 2067–2074. Nguồn lợi sử dụng nuôi trồng rong biển Việt Nam. Tạp chí Khoa học Công nghệ biển T12 (2012). Số 1, 87 – 98. 14 Yeh, S.T., Lee, C.S., Chen, J.C., 2006. Administration of hot-water extract of brown seaweed Sargassum duplicatum via immersion and injection enhances the immune resistance of white shrimp Litopenaeus vannamei. Fish & Shellfish Immunology 20, 332-345. Yoshida, T., Konno, T., 1983. Taxonomic study of Sargassum Sargamianum Yendo and related species (Phaeophyta, Fucales). Botanical Magazine (Tokyo) 96, 145-157. Wu, X., G.R. Beecher, J.M. Holden, D.B. Haytowitz, S.E. Gebhardt and R.L. Prior, 2006. Concentrations of anthocyanins in common foods in the United States and estimation of normal consumption. J. Agric. Food Chem., 54: 4069-4075. 15 [...]... với Fe2+ của rong mơ S microcystum (0,1-0,8mg/mL) và rong quạt P gymnospora (0,5-4mg/mL) 3.3.3 Hoạt tính khử Fe3+ Các hỗn hợp polysaccharide ly trích từ S microcystum và P gymnospora thể hiện hoạt tính khử Fe+3 Điều này thể hiện rõ khi độ hấp thụ quang gia tăng cùng với nồng độ của các hỗn hợp ly trích Độ hấp thụ quang của rong mơ S microcystum tăng từ 0,18-0,653 và rong quạt P gymnospora tăng từ 0,129-0,298... lượng polysaccharide ở hai loài rong S microcystum (18,7%) và P gymnospora (31,3%) đạt cao nhất khi ly trích bằng dung môi HCl 0,1N 3 giờ Thành phần hóa học và hoạt tính chống oxy hóa của rong mơ S microcystum và rong quạt P gymnospora đạt hàm lượng cao khi ly trích trong dung môi nước 6 giờ, S microcystum (protein: 6,8%; photpho: 0,52%; glucose: 18,45; l-fucose: 9,9%; carbohydrate: 26%; hoạt tính loại... sử dụng hỗn hợp polysaccharide ly trích từ rong mơ S microcystum và rong quạt P gymnospora bằng dung môi nước 6 giờ như là nguồn hợp chất giàu hoạt tính chống oxy hóa từ rong nâu 4.2 Đề xuất Những nghiên cứu tiếp theo cần tập trung vào những dung môi và phương pháp ly trích trên các loài rong biển khác nhằm đạt hiệu quả cao Ngoài ra, tiếp tục kiểm tra việc sử dụng nguồn hợp chất này vào việc tăng năng... 89,2% và thấp nhất 24,4 % ở nghiệm thức HCl 6 giờ Kết quả hiện tại cho thấy hoạt tính tạo chelat với Fe2+ của rong mơ S microcystum khi ly trích bằng dung môi nước 6 giờ (49,6% ở nồng độ 0,8 mg/mL) cao hơn so với kết quả của Giang et al., 2013 đạt 76,77% ở nồng độ 4 mg/mL Khi nghiên cứu hoạt tính tạo phức của hỗn hợp polysaccharide ly trích từ Padina autralis đạt 92,9% Hỗn hợp polysaccharide khi ly trích. .. carbohydrate polymers In: Paulsen BS (ed.) Bioactive Carbohydrate Polymers, Kluwer Academic Publishers, Dordrecht pp.47-58 Huỳnh Trường Giang, Dương Thị Hoàng Oanh, Vũ Ngọc Út và Trương Quốc Phú, 2013 Thành phần hóa học và hoạt tính chống oxy hóa của hỗn hợp polysaccharide ly trích từ rong Sargassum microcystum Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ 25 (2013): 183-191 Halliwel, B., 1987 Oxidative damage,... P gymnospora (protein: 9,7%; photpho: 0,46%;glucose: 3,1%;carbohydrat; 9,5%;SO42-: 9,1%; khả năng tạo chelat với Fe2+: 0,289%) Hàm lượng protein, carbohydrate, glucose, L-fucose trong hỗn hợp polysaccharide trong rong mơ S microcystum cao hơn so với rong quạt P gymnospora khi ở cùng điều kiện ly trích Đồng thời hoạt tính chống oxy hóa cũng cao hơn Kết quả đạt được đã chứng minh có thể sử dụng hỗn hợp. .. đổi từ 0,5-4 mg/mL ở nghiệm thức nước 6 giờ 1 1 0 0.635 0.580 0.298 Rong mơ 0.244 0.374 0.327 0 Fe 3+ 0 0 Rong quạt 0 1 Fe 3+ Fe 2+ 33.4 Fe 2+ 70 40 0 0 0 0 0 0.126 0 0 0.143 0 H20 3 giờ H20 6 giờ HCl 3 giờ H20 3 giờ HCl 6 giờ H20 6 giờ HCl 3 giờ HCl 6 giờ Hình 7: Hoạt tính tạo phức với Fe3+ của rong mơ S microcystum (0,5-4mg/mL) và rong quạt P gymnospora (0,5-4mg/mL) Tuy hoạt tính khử Fe+3 của hỗn hợp. .. cho phân bón qua lá từ nguồn rong biển trong nước Tạp chí Khoa học Trường Đại học Cần Thơ 25 (2013), 36-42 Đặng Xuân Cường, Vũ Ngọc Bội,Trần Thị Thanh Vân và Ngô Đăng Nghĩa, 2013 Sàng lọc hoạt tính chống oxy hóa của một số loài rong nâu Sargassum ở Khánh Hòa, Việt Nam Tạp chí hóa học 45, 339-343 Franz, G., D Paper, S Alban, 2000 Pharmacological activities of sulphated carbohydrate polymers In: Paulsen... hỗn hợp polysaccharide ly trích từ S hemiphyllum ở nồng độ 1,0 mg/mL cho giá trị lên đến hơn 1.2 (Hwang et al., 2010) nhưng kết quả trong nghiên cứu hiện 11 tại lại thấp hơn nhiều Kết quả nghiên cứu hiện tại phù hợp với Wang et al (2009) khi mà tác giả cho rằng polysaccharide ly trích rong Laminaria japonica có nồng độ thay đổi từ 0,5-2,5 thì độ hấp thụ quang thay đổi từ 0,33-0,44 4 Kết luận và đề xuất... trích trong dung môi nước từ S hemiphyllum, cho thấy hoạt tính tạo phức với Fe2+ có mối quan hệ tuyến tính với phương trình (y = 22.71x + 3,00, r2 = 0,975), và giá trị IC50 là 2,07 mg/mL (Hwang et al., 2010) 100 60 50 47.1 89.2 90 49.6 80 Rong mơ Rong quạt 72.2 30 20 60 50 38.8 40 24.4 30 14.7 20 10 10 0 0 H20 3 giờ H20 6 giờ HCl 3 giờ H20 3 giờ H20 6 giờ HCl 6 giờ HCl 3 giờ HCl 6 giờ Hình 6: Hoạt tính . HỒNG HẠNH KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HÓA CỦA HỖN HỢP POLYSACCHARIDE LY TRÍCH TỪ LOÀI RONG MƠ Sargassum microcystum VÀ RONG QUẠT Padina gymnospora . 2014 4 KHẢO SÁT THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HÓA CỦA HỖN HỢP POLYSACCHARIDE LY TRÍCH TỪ LOÀI RONG MƠ Sargassum microcystum VÀ RONG QUẠT Padina gymnospora Đàm Thị. được từ rong mơ S. microcystum (25,99%) và rong quạt P. gymnospora (9,54%) là rất thấp. 3.2. Hoạt tính chống oxy hóa của các hỗn hợp polysaccharide ly trích từ rong mơ S. microcystum và rong quạt