BÁO CÁO MÔN HỌC NUÔI CẤY MÔ VÀ TẾ BÀO THỰC VẬT CHỦ ĐỀ: NUÔI CẤY TÚI PHẤN LÚA Giáo viên giảng dạy: TS Nguyễn Thị Pha Sinh viên thực hiện: Hà Thị Đính 1100288 Trương Chí Anh B1303637 Hồng Thị Quế Châu B1303642 Đỗ Thị Trà My B1303684 Lê Triều Anh Thư B1303733 NỘI DUNG BÁO CÁO Sơ lược nuôi cấy túi phấn Đặt vấn đề Vật liệu phương pháp nghiên cứu Kết thảo luận Kết luận Tài liệu tham khảo Sơ lược nuôi cấy túi phấn • Ni cấy túi phấn ni cấy túi phấn có chứa tiểu bào tử phấn hoa cịn non • Phương pháp thường sử dụng để thu đơn bội hình thành phơi soma trực tiếp từ phấn hoa quan mô sẹo Đặt vấn đề • Phương pháp tạo nhiều giống mới, rút ngắn thời gian chọn giống • Tuy nhiên, tỷ lệ tạo mơ sẹo tái sinh cịn thấp, đặc biệt tỷ lệ bạch tạng tạo cao • Mục đích: tìm hiểu ảnh hưởng mơi trường số yếu tố tác động đến hiệu nuôi cấy bao phấn giống lúa Indica Vật liệu phương pháp • Vật liệu: tổ hợp lúa lai F1: −MT508-1/IRBB5 (F1.5) −MT508-1/IRBB7 (F1.7) −MT508-1/IRBB62 (F1.62) Vật liệu phương pháp • Phương pháp: − Mơi trường nuôi cấy: N6 MS − Đặc điểm nuôi cấy: + Tạo mô sẹo tối + Tái sinh xanh điều kiện chiếu sáng 4000 – 5000 lux + Thời gian chiếu sáng: 13 – 14h/ngày + Nhiệt độ phòng chiếu sáng: 22 – 24oC + Độ ẩm: 50 – 70% Vật liệu phương pháp • Đánh giá hiệu ni cấy bao phấn lúa thông qua: − Tỷ lệ tạo mô sẹo (%) − Tỷ lệ tái sinh (%) − Tỷ lệ bạch tạng (%) Vật liệu phương pháp • Bố trí thí nghiệm (mỗi thí nghiệm lặp lại lần): − Thí nghiệm 1: tạo mơ sẹo tái sinh sử dụng loại môi trường bản: MS, N6, M-019, SK-I − Thí nghiệm 2: tạo 12 môi trường từ nguồn carbon (maltose sucrose) nồng độ agar Vật liệu phương pháp Bảng 1: 12 môi trường Môi trường 10 11 12 Nồng độ 0,5 0,75 0,5 0,75 0,5 0,75 0,5 0,75 Agar (%) Nguồn Carbon Sucrose 60g/l Maltose 60g/l Sucrose 80g/l Maltose 80g/l Vật liệu phương pháp − Thí nghiệm 3: khảo sát phát triển mô sẹo qua mốc thời gian: + T0: ngày + T1: ngày + T2: 10 ngày + T3: 15 ngày + T4: 20 ngày + Kết thúc mốc thời gian chuyển mô sẹo sang môi trường tái sinh 10 Kết thảo luận • Ảnh hưởng môi trường khác lên khả tạo mô sẹo tái sinh Tạo mô sẹo (%) Cây tái sinh (%) Mơi trường F1.5 F1.7 F.62 Trung bình F1.5 F1.7 F.62 Trung bình MS 1.6 0.8 1.3 1.2 40.3 41.2 36.1 39.2 N6 4.2 5.3 4.7 4.7 7.4 8.1 8.6 8.0 M-019 1.3 1.8 0.9 1.3 35.5 39.2 40.8 35.8 SK-I 5.7 5.2 5.1 5.3 11.5 5.0 7.9 7.9 • => Môi trường tối ưu tạo mô sẹo N6 SK-I, tái sinh MS M-019 11 Kết quả thảo luận • Ảnh hưởng nguồn carbon nồng độ agar đến tỷ lệ tạo mơ sẹo: Trung bình tỷ lệ tạo mô sẹo (%) Nồng độ agar (%) Sucrose (g/l) Maltose (g/l) 60 80 60 80 0.5 3.5 1.5 4.2 4.1 0.75 4.2 2.2 4.6 3.5 3.4 2.1 3.9 3.4 => Điều kiện tối ưu để tạo mô sẹo: nguồn C sucrose maltose (60g/l) nồng độ agar 0.75% 12 Kết quả thảo luận • Ảnh hưởng thời gian cấy chuyển mơ sẹo sang môi trường tái sinh đến tỷ lệ hình thành bạch tạng ni cấy bao phấn lúa Indica − Tỷ lệ bạch tạng xuất tăng dần theo thời gian lưu trữ mô sẹo môi trường tạo mơ − Thời gian thích hợp để chuyển mô sẹo sang môi trường tái sinh từ tuần đến 10 ngày => Tỷ lệ xanh cao nhất, bạch tạng thấp 13 Kết quả thảo luận • Cây bạch tạng thu thí nghiệm 14 Kết luận • Điều kiện tối ưu tạo sẹo: − Môi trường SK-I N6 − Nguồn carbon maltose sucrose hàm lượng 60g/l − Nồng độ agar: 0,75% • Điều kiện tối ưu tái sinh môi trường MS M-019 • Thời gian thích hợp để chuyển mơ sẹo sang môi trường tái sinh từ tuần đến 10 ngày 15 Tài liệu tham khảo • Nghiên cứu ảnh hưởng môi trường số yếu tố tác động đến hiệu nuôi cấy bao phấn giống lúa Indica – Tạp chí Khoa học Phát triển 2011: Tập 9, số 5: 751 – 758 Trường ĐH Nông Nghiệp Hà Nội 16 ... (F1.7) −MT508-1/IRBB62 (F1.62) Vật liệu phương pháp • Phương pháp: − Môi trường nuôi cấy: N6 MS − Đặc điểm nuôi cấy: + Tạo mô sẹo tối + Tái sinh xanh điều kiện chiếu sáng 4000 – 5000 lux + Thời... mô sẹo tái sinh sử dụng loại môi trường bản: MS, N6, M-019, SK-I − Thí nghiệm 2: tạo 12 mơi trường từ nguồn carbon (maltose sucrose) nồng độ agar Vật liệu phương pháp Bảng 1: 12 môi trường Môi... để tạo mô sẹo: nguồn C sucrose maltose (60g/l) nồng độ agar 0.75% 12 Kết quả thảo luận • Ảnh hưởng thời gian cấy chuyển mô sẹo sang môi trường tái sinh đến tỷ lệ hình thành bạch tạng nuôi cấy