Đang tải... (xem toàn văn)
So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ So sánh một số phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phổ
BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI ĐẶNG THỊ NGỌC LAN ■ ■ ■ s o SÁNH MỘT SỐ PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỤNGTRỤỦ TIẾP DUNG DỊCH HÀl thàn h p h ần bằn g quang p h í (KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP DUỢC SỸ KHOÁ 2002 - 2007) Người hướng dẫn: TS. Thái Nguyễn Hùng Thu ThS. Tạ Mạnh Hùng Nơi thực hiện: Viện Kiểm Nghiệm Thuốc Trung ương Thời gian thực hiện: 01.2007 - 05.2007 ■ y ! Á ^ i ũ ° y HÀ NỘI - 05.2007 M f o ũ d L /tL Ơ Q l ~Kh()á luân nài/ đùcU' time hì tu dưới iut hiuúKỊ dẫn. của thíìụ ^7hái QLạuụẪti TỈCìÙihị , 'lièu SÍỊ - rpitó hiêu titióiKỊ tiiíòiK/ <Dại họe rf)ỉt(ie 'X>à Qtệl. Q’ài rin oh ân thành ('ám on ÍỈIÍỈI/ £ 7kni QỉquụếtL 'Jôùnụ. đã tận tình tfiup đ&, ItiioniỊ dẫn tồi tvOiKỊ hoe tập DÙ làm, đề tài. Ỡ(M rill if ui lài eám ót! tói ('ác cá a bê eáa Ỡra/tạ tăm đánh ạìá tiùítKỊ ĩtmíiKỊ linh. ỈHH‘ - r()ìi'H kiêm ittỊỈtièm tlmòe tìtUtiỊ lùi M/ £7« JHạtih 'dùìtntỊ itã nhìêt tình tuiótHỊ dãn, (ỊỈúp itõ oà tọa moi điều Uiên ('/10 tôi iàttt thưa ngÂìêm t tí hoàn thành Uhoá /i/ítí/ nàụ. cjồi XÙI ti'ân tron (Ị (‘úm đu các thầy, (iỗ fi'Oittf (Ban (ịiám hiỀU; (Bà mồ*i 'Tôơú phàn tíeh I-ÌHKỊ cát' tỉuuỊ aà (ỊỈáo eảa titiòiit/ rf)ạì liọe 7fí)à Qịội ĩtã tận tình tlift Ị Ịiútí tôi tvotHỊ những, mini litìe tập tại íruòtKỊ. @uế ì cùII(Ị »r/« (‘(ínt đti <fìa (Tìnlt DÒ Ịxnt hè (tã itôníỊ DÌên, (ỊÌúp ĩ t õ ’ tòi Ỉ!'tìntf suốt quá trình ho í' tập. OãtKỊ "7h i QLạ&tt j£ an MỤC LỤC ■ ■ DANH MỤC CÁC CHỮVIÊT TẮT ĐẶT VẤN ĐỀ PHẦN 1 - TỔNG QUAN 1.1. QUANG PHỔ TỬNGOẠI - KHẢ KIÊN (UV-VIS) 1.1.1. Phổ hấp thụ ƯV-VIS 1.1.2. Định luật Lambert-Beer 1.1.3. Úng dụng quang phổ UV-VIS trong kiểm nghiệm thuốc 1.2. QUANG PHỔ ĐẠO HÀM 1.2.1. Nguyên tắc của phổ đạo hàm 1.2.2. Đặc điểm của đường cong quang phổ đạo hàm 1.2.3. ứng dụng của phổ đạo hàm trong kiểm nghiệm thuốc 1.3. QUANG PHỔ ĐẠO HÀM TỶ ĐÔÌ 1.4. MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM VÀ PHƯƠNG PHÁP ĐỊNH LƯỢNG CỦA Đối TƯỢNG NGHIÊN c ứ u 1.4.1. Cafein 1.4.2. Natri benzoat 1.4.3. Các phương pháp đã được dùng để định lượng CA và NB PHẨN 2 - THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 2.1. NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP THỰC NGHIỆM 2.1.1. Nguyên vật liệu 2.1.2. Phương pháp thực nghiệm 2.2. KẾT QUẢ THỰC NGHIỆM 2.2.1. Chuẩn bị mẫu nghiên cứu 2.2.2. Xây dựng phương pháp định lượng bằng quang phổ đạo hàm tỷ đối 2.2.3. Phương pháp định lượng bằng quang phổ đạo hàm 2.2.4. Phương pháp định lượng bằng đo quang ở nhiều bước sóng 2.2.5. ứng dụng các phương pháp để định lượng thuốc tiêm cafein 7% 2.3. BÀN LUẬN 2.3.1. Về phương pháp phổ đạo hàm tỷ đối 2.3.2. Về phương pháp phổ đạo hàm 2.3.3. Về phương pháp đo quang tại nhiều bước sóng KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT TÀI LIỆU THAM KHẢO DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT CA: cafein NB: natri benzoat PĐH: phổ đạo hàm PĐHTĐ: phổ đạo hàm tỷ đối PTĐ: phổ tỷ đối ĐẶT VÂN ĐỂ Cùng với sự phát triển của khoa học và công nghệ, người ta đã tìm ra nhiều phương pháp mới để kiểm nghiệm thuốc. Tuy nhiên với những đặc điểm và ưu thế của mình, phương pháp quang phổ tử ngoại khả kiến vẫn được sử dụng rộng rãi để định lượng các chất có khả năng hấp thụ ánh sáng và các chất có màu. Thông thường, đối với phương pháp quang phổ UV-VIS, khi phân tích hỗn họp nhiều thành phần có phổ hấp thụ xen phủ nhau, người ta thường phải tách riêng từng thành phần, sau đó mới có thể định lượng. Vì vậy tốn thời gian, hoá chất và đôi khi còn không thể thực hiện được. Khắc phục hạn chế này, người ta đã nghiên cứu và tìm ra một số phương pháp định lượng trực tiếp các hỗn hợp nhiều thành phần mà không phải qua giai đoạn chiết tách như: đo ở nhiều bước sóng, dùng quang phổ đạo hàm Khái niệm quang phổ đạo hàm được đưa ra lần đầu vào thập kỷ 50 của thế kỷ trước. Đến cuối thập kỷ 70 của thế kỷ XX, khoa học công nghệ phát triển nhanh chóng, đặc biệt là máy vi tính ngày càng hiện đại đã cho phép sử dụng các phương pháp toán học để tạo ra phổ đạo hàm nhanh hơn, dễ hơn và có độ lặp cao hơn. Từ đó, quang phổ đạo hàm được ứng dụng rộng rãi để phân tích dược phẩm. Chúng đặc biệt có ích đối với hỗn hợp nhiều thành phần hoặc dược phẩm có chất phụ gia trong dạng bào chế, các tạp chất, các sản phẩm phân huỷ gây cản trở lớn đến hoạt chất chính cần định lượng. Phương pháp phổ đạo hàm tỷ đối là sự kết hợp các phổ thành phần trước khi lấy đạo hàm cho giá trị cao hơn nên giảm được sai số so với phương pháp phổ đạo hàm. Một số cơ sở ở nước ta như: Viện kiểm nghiệm, Phân viện kiểm nghiệm và Trung tâm kiểm nghiệm nghiên cứu dược quân đội đã có các công trình nghiên cứu ứng dụng phương pháp quang phổ đạo hàm. Tuy nhiên, trong thực tế việc ứng dụng các phương pháp này chưa nhiều, nhất là đối với phương pháp phổ đạo hàm tỷ đối. Với mong muốn đề xuất thêm các phương pháp mới tiện lợi hơn trong việc kiểm tra chất lượng của thuốc và có thể khai thác các tính năng sẩn có của thiết bị -2- 1 - Xây dựng phương pháp định lượng trực tiếp chế phẩm hỗn hợp hai thành phần bằng quang phổ đạo hàm tỷ đối. 2 - So sánh kết quả thu được của phương pháp với các phương pháp thông dụng là quang phổ đạo hàm và đo quang ở nhiều bước sóng. được triệt để hơn, chúng tôi tiến hành đề tài: “Sỡ sánh một sô phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phô’’ với hai mục tiêu: PHẦN 1 TỔNG QUAN 1.1. QUANG PHỔ TỬNGOẠI - KHẢ KIÊN (UV-VIS): 1.1.1. Phổ hấp thụ ƯV-VIS: [3, 4] Khi tia bức xạ tương tác với vật chất, có thể xảy ra một số quá trình: phản xạ, tán xạ, hấp thụ, huỳnh quang và quang hóa. Khi đo quang phổ tử ngoại khả kiến, người ta mong muốn chỉ có quá trình hấp thụ xảy ra. Vì bức xạ điện từ là các hạt mang năng lượng nên khi được phân tử hấp thụ, nó sẽ kích thích hệ electron của phân tử và làm tăng nội năng của nó. Năng lượng tổng của một phân tử bao gồm: năng lượng chuyển động tịnh tiến của phân tử (Et), năng lượng của điện tử (Ee), năng lượng của các dao động (Ev) và năng lượng chuyển động quay (Ef): Etổng = Et + Ee + Ev + Er (Ee » Ev » Er) Sự hấp thụ bức xạ tử ngoại - khả kiến có thể làm thay đổi mức năng lượng điện tử Ee và là nguồn gốc của phổ UV-VIS. Do đó, phổ UV-VIS được gọi là phổ điện tử. Phổ hấp thụ UV-VIS của một chất biểu diễn sự phụ thuộc khả năng hấp thụ của chất đó theo bước sóng. 1.1.2. Định luật Lambert-Beer: [3, 4, 9, 15, 18, 20] Chiếu một chùm tia đơn sắc có cường độ I0 qua một dung dịch có chiều dày / (cm). Sau khi bị dung dịch hấp thụ, cường độ chùm tia còn lại là I. Theo ' định luật Lambert - Beer thì độ hấp thụ của dung dịch tỷ lệ với nồng độ của chất ị • hấp thụ và chiều dày của môi trường hấp thụ: A = lgT = lg^ỷ = K.l.C Trong đó: T: độ truyền qua I0 và I: cường độ ánh sáng đơn sắc tới và sau khi đã truyền qua dung dịch. K: là hệ số hấp thụ, phụ thuộc Ằ, thay đổi theo cách biểu thị nồng độ, đặc trưng cho bản chất của chất tan trong dung dịch. -4- 1: là chiều dày của lớp dung dịch (cm). C: nồng độ chất tan trong dung dịch. * Nếu nồng độ c tính bằng mol/1, 1 tính bằng cm: A = S.L.C, khi c = IM và 1=1 cm thì A = K = s. s là hệ sô hấp thụ phân tử hay độ hấp thụ mol, đặc trưng cho bản chất của chất tan trong dung dịch, chỉ phụ thuộc bước sóng ánh sáng đơn sắc và hay được dùng trong mô tả cấu trúc, tính chất quang phổ của các chất hữu cơ. * Nếu nồng độ c tính theo %(kl/tt) và khi c = 1%, 1 = lcm thì K được gọi là hệ sô hấp thụ riêng hay độ hấp thụ riêng; ký hiệu là A (1%, lent) hoặc Ej°^. Hệ sô này hay được dùng trong phân tích kiểm nghiệm và được ghi trong Dược điển. * Các điều kiện áp dụng định luật: - Chùm tia sáng phải đơn sắc: vì khi bước sóng thay đổi các hệ số hấp thụ cũng đều thay đổi. Chùm tia sáng càng đơn sắc thì định luật càng đúng. - Dung dịch phải nằm trong khoảng nồng độ thích hợp: để hạn chế các sai lệch về hóa học do sự phân ly (ion hóa) hay tạo các sản phẩm trùng hợp (dimer, trimer ). Sai lệch hóa học còn có thể do phản ứng với các chất lạ hay tạo phức với các ion trong dung dịch. Để hạn chế sai lệch này người ta thường dùng mẫu trắng có thành phần như dung dịch, chỉ thiếu chất cần khảo sát. Vì định luật Lambert-Beer chỉ đúng trong một giới hạn nhất định của nồng độ nên trước khi xây dựng phương pháp định lượng cần khảo sát để tìm khoảng nồng độ thích hợp. - Dung dịch phải trong suốt để hạn chế hiện tượng phản xạ, khuếch tán ánh sáng, - Chất thử phải bền trong dung dịch và bền dưới tác dụng của tia UV-VIS. 1.1.3. ứng dụng quang phổ UV-VIS trong kiểm nghiệm thuốc: [3, 4, 6, 9] 1.1.3.1. Phân tích định tính và thử tinh khiết: Thông thường các cực đại hấp thụ là đặc trưng định tính của một chất nên có thể dựa vào các giá trị Xmax để định tính các chất. Ngoài các cực đại, người ta có thể căn cứ thêm vào tỷ lê mât độ quang tại các cực trị để phân biệt các chất. Người ta cũng có thể phối hợp sử dụng giá trị mật độ quang tại các cực đại hấp thụ kết họp với dạng phổ để biết mức độ tinh khiết của chất đó. Vì dạng phổ ƯV-VIS có ít các yếu tố đặc trưng cho các chất nên để tăng khả năng phân biệt người ta còn dùng hệ số match với công thức tính: -5 - n n trong đó X và y là độ hấp thụ của phổ thứ nhất và phổ thứ hai ở cùng một bước sóng và được xác định tại n bước sóng khác nhau. I.I.3.2. Phân tích định lượng: Khi xây dựng quy trình định lượng, cần khảo sát chọn các điều kiện: bước sóng, khoảng nồng độ, pH, dung môi thích hợp để phép phân tích đảm bảo độ chính xác, tiến hành thuận tiện và kinh tế. * Các phương pháp định lượng dung dịch một thành phần: * Tính toán trực tiếp từ mật độ quang đo được: Với các chất có hệ số hấp thụ riêng biết trước chính xác và ổn định ở một bước sóng nào đó, người ta có thể đo mật độ quang của dung dịch chất đó trong dung môi tương ứng tại bước sóng này. Nồng độ của dung dịch được tính theo công thức: c = Ậ - vì A = .c.l và 1 = 1 cm. 1 Cììĩ Muốn áp dụng kỹ thuật này máy quang phổ phải được chuẩn hóa về bước sóng và giá trị mật độ quang. Dung dịch đo phải trong suốt và có nồng độ nằm trong vùng đáp ứng của định luật Lambert-Beer. * Đo so sánh với dung dịch chuẩn: Xác định mật độ quang của dung dịch thử có nồng độ Cx (chưa biết) được tiến hành cùng với việc xác định mật độ quang của dung dịch chuẩn có nồng độ Cc đã biết chính xác trong điều kiện thỏa mãn định luật Lambert-Beer thì có thể tính toán nồng độ dung dịch thử theo công thức: Ax _ c „ A — = => Cr = — X c,, Ac c, Ac Trong phương pháp so sánh, kết quả càng chính xác khi nồng độ Cx càng gần nồng độ dung dịch chuẩn (Cx « Cc ± 10%). Phương pháp đường chuẩn là so sánh dung dịch thử với nhiều dung dịch chuẩn. Để xây dựng đường chuẩn người ta chuẩn bị 5 - 8 dung dịch chuẩn có nồng độ khác nhau. Đo mật độ quang của từng dung dịch chuẩn và vẽ đồ thị biểu diễn mối quan hệ giữa mật độ quang và nồng độ của các dung dịch chuẩn. Trong -6- trường hợp các dung dịch đo thỏa mãn các điều kiện của định luật Lambert-Beer thì đường chuẩn thẳng. Khi đó, chỉ cần đưa giá trị mật độ quang Ax của dung dịch thử lên đường chuẩn và tìm ra giá trị Cx tương ứng. Để hạn chế phải ngoại suy, nồng độ các dung dịch thử phải nằm trong khoảng nồng độ của dãy chuẩn. Thông thường việc khảo sát vùng tuyến tính phải được tiến hành trước. Trên cơ sở đó, tiến hành pha loãng các dung dịch thử một cách thích hợp để sao cho các dung dịch thử có nồng độ nằm trong khoảng tuyến tính đã xác định được. * Thêm chuẩn: Để hạn chế ảnh hưởng của tạp chất người ta đưa thêm vào dung dịch thử một lượng chính xác chất chuẩn làm cho nồng độ dung dịch này tăng thêm một lượng C0. Đo mật độ quang Ax của dung dịch thử có nồng độ Cx và mật độ quang A ’x của dung dịch đã có thêm chất chuẩn (nồng độ Cx+Co). Nồng độ của dung dịch thử được tính toán như sau: A c , a \ - a, Phương pháp thêm đường chuẩn được tiến hành bằng cách thêm các lượng chính xác chất chuẩn khác nhau vào dung dịch cần định lượng. Vẽ đường chuẩn biểu diễn mối quan hệ giữa mật độ quang và nồng độ chất chuẩn đã thêm. Giao điểm của đường chuẩn với trục nồng độ chỉ giá trị của nồng độ dung dịch cần định lượng. * Phương pháp chuẩn độ đo quang: Xác định điểm tương đương bởi sự thay đổi khả năng hấp thụ ánh sáng của dung dịch. Phương pháp này có ưu điểm là áp dụng được cho dung dịch có màu hoặc đục không quá đậm, không tìm được chỉ thị màu, không định lượng được bằng phương pháp chuẩn độ đo thế. *1* Định lượng dung dịch hỗn hợp các chất: Độ hấp thụ ánh sáng có tính chất cộng tính nên dung dịch chứa nhiều chất tan khác nhau thì độ hấp thụ tổng cộng sẽ là tổng độ hấp thụ của các chất: Atổng = Aị + A2 + A3 + + An Thông thường với hỗn hợp nhiều chất người ta phải chiết đo quang, tức là tách riêng chất cần khảo sát ra khỏi hỗn hợp và tiến hành định lượng như với dung dịch của riêng một chất. Tuy nhiên có thể định lượng trực tiếp mà không cần chiết tách bằng phương pháp đo quang hỗn hợp tại nhiều bước sóng. -7- [...]... + Kiểm tra độ đúng của phương pháp - Dựa vào các kết quả xử lý thống kê để biện luận và rút ra các kết luận cần thiết 2.1.2.2 So sánh một sô phương pháp định lượng bằng quang phổ trên đôi tượng nghiên cứu: - Tiến hành định lượng các thành phần trong cùng mẫu bằng các phương pháp: + Đo quang tại nhiều bước sóng + Phổ đạo hàm + Phổ đạo hàm tỷ đối - So sánh kết quả của 3 phương pháp trên và rút ra nhận... xác định nồng độ -20- 2.2.2 Xây dựng phương pháp định lượng bằng quang phổ đạo hàm tỷ đối: 2.2.2.1 Xác định bước sóng định lượng: - Với NB: Xây dựng phổ tỷ đối từ phổ hấp thụ của từng dung dịch chuẩn hỗn hợp (ở các nồng độ khác nhau) và phổ hấp thụ của dung dịch chuẩn CA 10 ịig/mL Lấy đạo hàm bậc 1 của phổ tỷ đối, thu được hình 2.2 Dựa vào các cực đại trên phổ đạo hàm tỷ đối này chọn bước sóng định lượng. .. số tìm được khác trị số lý thuyết không có ý nghĩa thống kê 2.2.3 Phương pháp định lượng bằng quang phổ đạo hàm: 2.2.3.1 Xác định bước sóng định lượng: Từ các phổ hấp thụ của các dung dịch chuẩn đơn thành phần và hỗn hợp, xây dựng các phổ đạo hàm bậc 1 và bậc 2 Ở PĐH bậc 1, tại các bước sóng 245 nm và 273 nm thành phần CA có giá trị PĐH bằng 0 Cho nên tại đó, giá trị PĐH của dung dịch chỉ phụ thuộc vào... 14, 24] Phương pháp này dùng để định lượng CA Đầu tiên CA được kiềm hóa bằng NaOH 0,1N (chỉ thị phenolphtalein), sau đó chiết bằng cloroform rồi bốc hơi đến khô và cân cắn 1.4.3.4 Phương pháp đo iod: [5, 14, 18, 24] Phương pháp này dùng để định lượng dung dịch thuốc tiêm CA Trong môi trường acid sulfuric, CA cho tủa periodid với dung dịch iod 0,1N (dư) Lọc tủa rồi định lượng iod dư bằng dung dịch thiosulfat... 300.0 nm nm (a) (b) Hình 2.2 - Phổ tỷ đối (a) và phổ đạo hàm tỷ đối ịb) của dung dịch chuẩn hỗn hợp 2 thành phần và CA 10 juglmL - Với CA: tương tự lấy phổ các dung dịch hỗn hợp chuẩn chia cho phổ hấp thụ của NB 15 |ag/mL để xây dựng phổ tỷ đối Phổ tỷ đối thu được như hình 2.3, bước sóng định lượng được chọn là 226,8 nm Hình 2.3 - Phổ tỷ đối của dung dịch hỗn hợp 2 thành phần và N B 15 /uglmL -21 - Kiểm... có một thành phần vitamin B6 có hấp thụ quang nhưng trong quá trình chuẩn bị mẫu để đo quang, dung dịch vẫn bị đục sau khi lọc qua giấy lọc Đó là do chế phẩm có tá dược không thể lọc được hết bằng cách lọc thông thường Nếu đo ở phổ hấp thụ, dung dịch sẽ gây ra sai số là + 11,8%, còn đo ồ đạo hàm bậc 1 chỉ gây ra sai số là + 1,3%, ở đạo hàm bậc 2 l à -0,97% ^ '* 7 * Định lượng 2 hay nhiều thành phần Phổ. .. nồng độ 150 |ig/mL Từ dung dịch gốc này pha loãng thành dãy dung dịch có nồng độ: 3,75; 7,5; 15; 22,5 và 30 |ig/mL ♦♦ Dung dịch hỗn hợp chuẩn CA và NB: Các dung dịch HH1 đến HH5 được ♦ chuẩn bị từ các dung dịch gốc đơn chất theo các thể tích như trong bảng 2.1 -19- Bảng 2.1 - Một số dung dịch hỗn hợp chuẩn có nồng độ khác nhau dùng trong nghiên cứu Dung Nồng độ CA Nồng độ NB dịch (Hg/mL) (fig/mL) HH1... nhỏ hơn rất nhiều so với trị số giới hạn t(0,95;4) là 2,132 Như vậy giá trung bình tìm được và giá trị thực khác nhau không có ý nghĩa thống kê 2.2.4 Phương pháp định lượng bằng đo quang ở nhiều bước sóng: 2.2.4.1 Xác định bước sóng định lượng và hệ số hấp thụ riêng E^m: Dựa vào phổ hấp thụ của CA, NB và hỗn hợp của chúng (hình 2.11), xác định được bước sóng định lượng là Àm của hai chất trên Tiến... thành phần và N B 15 /uglmL -21 - Kiểm chứng sự không ảnh hưởng của thành phần này trong hỗn hợp đối với thành phần kia khi định lượng bằng quang phổ đạo hàm tỷ đối, chúng tôi tiến hành đo các giá trị phổ đạo hàm tỷ đối bậc phù hợp với các chất ở trên với một số dung dịch hỗn hợp chuẩn Với NB: Đo giá trị PĐHTĐ bậc 1 tại 220 nm của 4 dung dịch hỗn hợp chuẩn trong đó nồng độ NB không thay đổi còn nồng độ... xác 10 mL dung dịch trên cho vào bình định mức 100 mL, thêm nước vừa đủ để có dung dịch gốc CA có nồng độ 100 |ig/mL Từ dung dịch gốc này pha thành dãy chuẩn có nồng độ: 2,5; 5; 10; 15 và 20fig/mL ♦♦ Dung dịch chuẩn NB: cân chính xác khoảng 75 mg NB chuẩn, pha với nước, ♦ định mức thành 50 mL Lấy chính xác 10 mL dung dịch trên cho vào bình định mức 100 mL, thêm nước vừa đủ để có dung dịch gốc NB có . dựng phương pháp định lượng bằng quang phổ đạo hàm tỷ đối 2.2.3. Phương pháp định lượng bằng quang phổ đạo hàm 2.2.4. Phương pháp định lượng bằng đo quang ở nhiều bước sóng 2.2.5. ứng dụng các phương. sánh một sô phương pháp định lượng trực tiếp dung dịch hai thành phần bằng quang phô’’ với hai mục tiêu: PHẦN 1 TỔNG QUAN 1.1. QUANG PHỔ TỬNGOẠI - KHẢ KIÊN (UV-VIS): 1.1.1. Phổ hấp thụ ƯV-VIS:. chất lượng của thuốc và có thể khai thác các tính năng sẩn có của thiết bị -2- 1 - Xây dựng phương pháp định lượng trực tiếp chế phẩm hỗn hợp hai thành phần bằng quang phổ đạo hàm tỷ đối. 2 - So