điện di gel agarose và ứng dụng

19 536 2
điện di gel agarose và ứng dụng

Đang tải... (xem toàn văn)

Tài liệu hạn chế xem trước, để xem đầy đủ mời bạn chọn Tải xuống

Thông tin tài liệu

điện di gel agarose và ứng dụng

      !"   !"#  $%  #$%&'%()*+,)-)./) 01 2 3!#4)*+,)-)56-  -  &'()) *&+, -& ./01 2&3456#5 7# + &(8 *&95 +3:;0!< -&;0!<</ 2&"#4=35>  ?@A=5>#AB,C# # 34DA+,5;0;0!<</  !"#$%& '()##*+,  /"#0'1 E&( F G H5 7# +A+, 21#*+, 23 4 2.5,6 22(78 I& ?JG "GA+,;0!<</ 9:7$ 9.;<##*+,,6 9'.)0'1*##*+,,6 92.0'1=##*+,,6 +7.7-7$84#4#!09:;< =>?@<4; A&> BCDE0FG:E>4>:GC:!#>%!:H +7.7I7'&>(G +7.7.7$84 J>> K&>  +7.7,7=LM10NO& K&"#L?9#5 7# + >.;<,6##*+, >?(78 >'.)0'1@A* >2B*#1'0 & I *& M5;?N OG!P,QA+,</;0!< -&( !1# F5 3 R%S3 2&C 5T FAC /?O5 U3#/<##, E&B5!>T,Q &'()) *&+,V  P'1 =>QR4L2; ; %&S;T;MU>> SG#4?=>"; LQV>T;?@4;K#?= >!QW47XL2; ; %&S1&L0C YEX;?=>!04EX;'0!:>Z7=L>!34:ED4:E :E:;>!0C 0!:99HTCL[4>!049  \;C (>]$^^!0>:LX#>!3;T;?_; ?SGMU>E`;K#; a4 Qb"; > QV;^ c LJ4 #&?SG?d4>"; D90:E:;>; C0>H7e> %U>1&9]L[4G@>L%4L2; ?=GDN%ff:!H?SLO?=M1>J0?= >!QW4?g%7@>NA4:E?<4M#>!hE1> Sg?SC (>T; ;T;C (>]^M1;T;; B> ; B> %@Gb T; #%D:> %GL!0GL:^i# ;00G#99:^NJ;jH?SC T> =M2>!";T; C (>]4:E9#%b ?=L7 P=LE1bk> %U>?QR;L84?SC (>T; M1?lb ?S> 9J; ;T;?JC (>] ?_;N=>E1;T;C!0>:M1;T;%;E:;#;L>!3;m9nb"; > QV;b oEQR4^?=>"; M1;B% c ;K#; a47 P ;T;C (>]>"; ?=?QR;?_>>!04G@>?=>!QW4^; a49pL2; ; %&S QV4?q;X;LQm4DrH 0_;;X;(GDPH>8&> :0?=>"; ;K#; a474QR;MV C!0>:^E0JC (>];<?=>"; > X; 0_;LQm4 0_;(G^;T;%;E:;#;L;<G@> ?=>"; (Gb l4?s Wb %4C 09C #>:;K#Gc ^M1Mc> q; tL2; ; %&S QV4?q;X;LQm47  PT;C (>]C!0>:M1%;E:;#;L;<> S?QR;; J&?=L>!3G@>b %l?u D9%CC0!>G#>!iH Q4B&^;:EE%E09:#;:>#>:^4:E> N@>^#4#!09: 0_;C0E&#;!&E#GL: 4:E7!04?<4:E;K##4#!09:M1C0E&#;!&E#GL:?QR;9]L[4C sNq B>7 l4 > QW4^4:EE1G@>b %l?a;LJ4C qGv4;<;T;4q4?SJCDE0#L4HGO%7 :E?QR;4(G>!04?=G?=L;%4;BC;T;0?SLO>!%&gLh4?=M1G@> M1E0J?=G?SL%&>!cCnG@>4T>!2b l4?s>Qm4?o7 -& ./01 :E?QR;;B%>J0Nn;T;; %w;#0C (>]?QR;E3bq>; x0MV #%>J0> 1 G@> => o4GJ4EQVMVb"; > QV;;T;Gy;EQV>8&> %@;M10z4?@; B>;#0C ( >]M1C A{4>J0E3bq>; x07T;bS%?=L • =L>!34:E#4#!09:b A|4C (>T; 4:E+)NC}I)bN • =L>!34:EC0E&#;!&E#GL:b A|4C (>T; 4:E+NC}-bN • 401 !# ;h  ?=  L  >!04  >!QW4  i%4 D~• € %E9:  ~:EL  :E •E:;>!0C 0:9;H , 2&3456#5 7# + Pe> %U>?=L 0J>?@4 WM10EX;bx0;K#?=>!QW4>T;?@4M10;T;C (>] >"; ?=M1b"; > QV>Ew;K#> SgD4:EH7 PT;C (>](G #&LQm4>!04G@>?=>!QW49pL; %&S>!044:EMVMU>o; b T; #% WM109Xb T; #%;K# • 'X;?=>!QW4>T;?@4E3; a4Dq%;T;C (>]>"; ?=b T; #%H • "; > QV;;K#C (>]90MVb"; > QV;;K#Ew4:E • c LJ4^?@;z4bg ;K#C (>] &(8 *&95 +3:;0!< P4#!09:DC0E&9#;; #!L:H;<b oEQR4C (>]iBCit-I)7)))$#E1G@>>!04 # > 1 C Y; " ;K##4#!09:; qGb 0A4/)•^C Yb#E1#4#!0C:;>; qG b 0A4,)•74#!09:E1G@>C0E&G:!GJ; > d4b l4N29%EC #>: <#; {# #4o; i:bp #%E1$P4#E#;>09:M1,^6P# &L!0P'P4#E#;>09:74#!09:4:EE1G@>; B>>!04 9%o>D>!#9C#!:>H 0_;>!04GWD>!#9E%:>H4o4 Q#4#!^?QR;>J0> 1 b  w RC#4#!09:M1QV;D 0_;?=G?=LH?QR;?%<4>V‚-)) 0 M19#%?<?QR; E1GEJ ƒLJ44:Ei%B> =nb 0A4.)P.+ 0 74#!09:4:E?QR;{4L[4!@4!„ ?S  E1G  4T  > S  ; 0  ;T;  %;E:;  #;L  >!04  bk  > %U>  ?=  L  4#4  D 0!Z0>#E :E:;>!0C 0!:99H  0_;  E1G  4T  > S  ; 0  Gl  >!QW4  %l  ;B&  N#;>:!0C #4:  D>0C #4#!09:H7 P4#!09:?QR;>T; !#nLJ4> J; >…G@>9oE01NS?v>A0^ 0_;!04NS^?QR; >cG> B&>J#Ef0!#M1Gg?l4; (%†74#!^G@>> %U>4‡;<4%z4o;>…; ‡ > J; #4#!P#E#&^;<4 e#E19‡#04; a#^E1> QW4Ny>4%z>…;T;; :EL%G !04NS7<N#04zG;AC (>]#4#!09:M1#4#!0C:;>M1;%4;BC w>!R; 0;T; > 1 >qN10>!04>A0NS74#!?QR;9]L[4 QG@>; B>E1G?_;> {;|^4o4  Q4:E#>^ 0_;G@>C Qm4>=; 0Mb %ˆC T>>!S^BG^ 0_;;T;M9 MU> b T;7 Hình : *C$%&"# ##*+,:DE<##*+,FE8G#$%&( HI6),** ##*+,$6,*JKL2,**M).N$6,*7 . -&;0!<</ P4#!09:4:EE1G@>E0J4:E> l4L[4 B>^G@>C YL0> #0>T;?m4A^> QW4 L84?SC (>T;  ‡4?0J;<b"; > QV;>!04b 0A4)7+}I)bN7:E?QR;?s >!3G@>4T> S‰G4#4M1?QR;?=L?QR;> X; => :0C Qm4‰G4#47 PT;C (>]%;E:;#;L;<b oEQR4M1?=>"; b T; #%?QR;>T; !#b L ; %&S>…;X;(G9#4;X;LQm4;K# =?=L>!04G@>?=>!QW4;<?=> qM1 ;QW4?@> ";  RC7k> %U>1&?m4AM1> X; = # 7m‡#^M2>!";K# $>!044:E?QR;iT;?2 >!X;>qC;T;N|4$>!044:E?QR; %@Gnz4 ?@> BC;K#> %o; %@G %Š ‹%#4:> L%GN!0GL:D•>Œ!HM1;<> SC T> = LQVT 9T4>]40JD%E>!#M0E:>P•H7  P_>b T;^?SQV;EQR4b"; > QV;;T;>!c >X%;E:;#;L>!044:E#4#!09:^ 4QW>#9]L[4G@>?.O(8 *P6 4$%&DG00;%E#!F:4> G#!b:! }ŽH7<E1G@>>!c >X$;<b"; > QV;?„Nq>D> #4$}$E#LL:!H^ > l4> QW44QW>#9]L[4> #4$E1> X;> Sλ?QR;> K&4ANn:Z&G: 4V JL 2&"#4=35>  ?@A=5>#AB,C# # 34DA+,5;0;0!<</   !"#$%&  T;C (>]$GJ; > d49R?l?‹%#NA4:En;T;>o;?@>•E=4 2; MV 1GE04-);K#b oEQR4C (>];K#; a47$0?<^;T;C (>]$;<b"; > QV; ;14EVDb oEQR4C (>]EVH> c>o;?@L2; ; %&S;14; UG7  + '()##*+,  0J$G#4b"; > QV; B>?2 9pL2; ; %&Sn;T;>o;?@b T; #%‹%# ;T;NA4:E; {#;T;z4?@#4#!09:b T; #%7  QMU&^L844:En;T;z4?@b T; #%;<> SC (>T; ?QR;;T;?0J$;< b"; > QV;b T; #%H7z4?@#4#!09:;#0;<b A|4C (>T; ;T;?0J$  v^>!04b ?<z4?@#4#!09:> BCEJ; 0C xCC (>T; ;T;?0J$EV m7  Bng:5+O(780'1@##*+,,6  /"#0'1  T;$LJ4Mh4?<4Df0!GPH^Mh4?{>Df0!GPHM1GJ; > d4Df0!GPH;< ;84G@>b oEQR4C (>]9pL2; ; %&S>!3#4#!09:4:En;T;>o;?@b T; #%7  c; %4^$;K#;T;CE#9GLGJ; Mh4L2; ; %&S #  m$;K# CE#9GL;84E0J Q4;<LJ4GJ; > d47Y% q>CE#9GLGJ; Mh4; {#">  B> #LJ4$;<;B%>!a;b l44#b T; #%E1LJ4Mh4?<4D93%i0yH M1Mh4?{>7 E&( F G H5 7# +A+, 21#*+, 4#!09:E1LOi%B>C0E&9#;; #!L:>…#4#!D> J; H;<?@> b q>;#07<!B> g% E0J#4#!09:b T; #%Mg?@?=Gl^ =>?@<4; A&^?@>!04^?@;{47#4#!09: > QW4?QR;;%4;BCLQVLJ4N@>b l7 ; 0M10?=G9l<9p>#M14‡?QR; >!J4> TEv4; 0?qb >J04:Eb  =>?@ Ji%o4b 0A4.)•7 ?„?l4 4:Es?2 n =>?@> BC m7"; > QV;GJ4EQVM1?_;>" 91E\;C [> %@; M10z4?@#4#!09:>!044:E7z4?@;14;#0^GJ4EQV;14 v7z4?@> "; RCE1)^.•?q.•7 23 4 $84?S>J0!#;T;4q4>!04NA4:E 2.5,6 6 m?s4:EE3 /$QR7(78 22(78 PŒ%z4?=G?QR;>J03N‰4;T; >T;  #NAb" 4‡# #> # 9C#;:!D>J0Ng L1&Hn #?Y%^9#%?<>!TG;T;?Y%M1?T&4:E?S>J0N%z4b"D7-7.H7:ENA;< b"; > QV;>…I^+;GID4‡# #E#G:;K#b"  SMH?q,)7-+;GIM1?@L1&>… ‘)^)+GG?q‚-)GG7 P=;X;7 PT&?=L / /LES?<(78##*+, I& ?JG "GA+,;0!<</  9:7$  @>9o?=G?=L> ";  RC; 0$9R?l> QW4?QR;L84E1!9P#;:>#>:P •$D•H^!9PN0!#>:P•$DŒ•HM1!9PC 09C #>:P•$D•Hnz4?@ b 0A4+)GM1C/^+P/^*7 QW4L0> <‹%:^•?QR;9]L[4 g% B>^  Q4b A|4?=G;K#<EJ> BC7=GŒ•M1•?g%;<b A|4 h#>#>o> ;T;?0J$M1;<b A|4?=G;#0 mG@>;T; !!=>7T;?0J$9pL2; ; %&SMV;T;>o;?@ mb T; #%G@>; a>>!04N#E0J?=G>!3L09Xb T; #% Mg;QW4EX;0;K#?=G7=Gb l4 ‡4> q>EUCG@>4T>!2C^G1;h;%4 ;BC;T;0?S w>!R; 0?@LOD;0L%;>M>&H7q%; a4>#L84QV;> #&McE1 ?=G>!04‹%T>!c ?=L^> c9pb l4;<9XL2; ; %&S;Y> q>;K#$>!04 4:E74QR;EJ^q%9]L[4?=Gz4?@?UG?_;DM"L[L%4L2; 9>0;b’-)H^> c  =>?@>!044:E;<> S>|4;#0M1E1G<4; A&<7  9.;<##*+,,6   < g%E0J#4#!09:b T; #%> ";  RC?S; J&?=L^E0J#4#!09:L84>o>  B>>!04> "4 =GE1>&C:PP#4#!09:;<@> ˆG> B%> BCDE0FP:L0P09G0>;H7 <L“L14; A&!#M1>J0> 1 G@>L%4L2; >!049%o>^bq>‹%AE14:E?1 z> UG ; "  n  ;T;  z4  ?@  > BC7  %&   3^  >&C:PP#4#!09:  L“  N2  Nˆ  Nn  9%EC #>: * C0E&9#;; #!L:9DH^ m‡#;h{;; q;T;:Z&G: QE4#9:^C0E&G:!#9:M1 •7c> q^;T;?0J$L%4E&>… ‡44:E Q> qC A?QR;E1G9J; ;ˆ> U >!QV;b ; a4?QR;L84 QE1;T;b %lGO% 0_;;m; B>; 0;T;:Z&G:1&7 9'.)0'1*##*+,,6  Qm4C TC‹%#9T>$>!04#4#!09:4:E> %UER B>E1L84> %o; %@G %Š ‹%#4•>Œ!7•>Œ!?QR;L84?SC T> =$9R?lM19R?m7%&  3^TEX;D#ff>&H;K#> %o; %@G?oMV%;E:;#;L9R?mE1>Qm4?o> BC M1;< =%9%B> %Š ‹%#4b l4;#07#%b  %@G^•>Œ!9pi:M104‡#;T; N#9:;K#%;E:;#;LM1; 0C xCC T> =L“L14; a4n>!044:E7_;L8>" E ?@4?=L;K#$9R?lGJ; > d44AGb ;<G_>> %o; %@GDb 0A4 -+•H^ Q4b A|4iT;?2 4:E>!X;>qCLQVT 9T4•>!049%o>‹%T>!c ?=L 0_;n4#?0J;%o;<Q%> q!!=>7%& 3^q%;Y;<> S; J&?=L 4:Eb l4;<•>Œ!M1; t %@G$ 0_;9#%b ?=Li047.+µ:E?QR; 4(G>!04?=G?=L 0_; I ; {#•>Œ!D)^+C a>n =>?@C h4H7 CTA8.*8,6)%%()?U-()%.  E/  EV  Q  6.5  6.5  (,    #  K  Q  ,6  W  8.  8<  X#  .O .)*?$YC*R?$EDBE$LJD(R-L*M+#.K +&8GK5( 4L*#5* HK #( 4Y&6T4$7   *C,8.*8, 92.0'1=##*+,,6   g%C Qm4C TC?„?QR;i(&LX4?S> % z$>…#4#!09:4:E^ Q4b l4 ;<C Qm4C TC10E1 01>01>oQ%7< #MB?g; " 5 W X5?#9o;T;E0J #4#!09:?g%N2 “GNˆNn9%EC #>:C0E&9#;; #!L:9^;T;9AC ˆG9#%?<?QR; ; q>>…4:E;84MV$^; a4E1 (>o{;; q;< 0J>>" ;K# g%E0J 5 :Z&G:D•^E4#9:^b#9:^C0E&G:!#9:HL84>!04;T;NQV;>J0Lh4>qC> :09#%ƒ 5 W  =%9%B>; q>$>…#4#!09:4:EC [> %@;M10b oEQR4C (>];K#<^ ;T;?0J$;<; g%L1‘-bN;<> S?QR;> % z 01>01^b b oEQR4C ( >];K#$>|4> c =%9%B>; q>4AG^;T;?0J$;<b"; > QV;‚I)bN?QR; > % zbxGDb 0A4 mI)•9AEQR4H7< g%C Qm4C TC> % zM1> 9J; $>…#4#!09:4:E^LQV?(&E1G@>M1C Qm4C TC; "  920Z##*+,J7()JL-$F6[,6,$,*#.*,I O%#4#!09:4:E;< =>?@<4; A&> BC; {#?0J$‹%#>(G?QR;;y>!# b vNA4:EM1; 0M10>!04?=GMV>•E=--^Ns9%4G%o?qz4?@)^+^9#% ?<?QR;<4; A&n/) 0 ?S h#># 01>01>!04?=G7$%4L2; 4:E;<$ ?QR;; q>N‰4C :0E”; E0!0f0!GM1bq>>K#7'Q%`$?QR;>T; ; q>N‰4 C Qm4C TC1&b l4> ";  RC; 0G\C Qm4> {;> #0>T;>qC> :0^L09X = L=;K#;T; (>o{;; q>!04#4#!09:7  923%  O%#4#!09:4:E;<; {#N|4$‹%#>(G?QR;;y>!#M1; 0M10?=G; q>^ E1G<4?S h#># 01>01^9#%?<; 0L%4L2; 4:EE3>!3G@>EVCDG14H Nl4> K&> ?„9E;0 <#?_>>!04G@>;@>E\; vE0J)^+G'D;h4\E19C ;0E%GH7@>1&?QR;; 0M10G@>>%N:ME&>(GE0J-^+G'M1?QR;E&>(Gn>o; ?@;#0-)7)))P-+7)))!CG>!04-)P-+C a>7$9pE3bq>MVG14;hL%4L2; ?=G9p?‹%#EVCNl4> K&> M10>%N:ME&>(G7 0?=G!]#M10;@>M1!]#;@> M1EYN‰4;T; E&>(G # 7 #&>%N:ME&>(GGV^; 0?=G h#>#$M10 ;@>M1E&>(G?SL%4E&D:E%>0H$!#b vG14M10>%N:7$%4L2; $> % ?QR;;<> S?QR;> 9J; > 3Gq%;Y7•4;<> S?l4EJ GO%4:E>!QV;b  L84C Qm4C TCE&>(G?S;A> = =%9%B>> % z$7  92:78E\ @>;T!„  v?QR;;y>>!04#4#!09:4:E4#&C "#>!QV;;K#N|4$‹%# >(G7„ 1&?QR;E1G?Y&N‰44E&;:!0EM14:E?QR;?=L # >!nEJ?S ; %&S$>…4:EM10>!04L%4L2; 4E&;:!0ED‹%T>!c ?=L;<> S?QR;bSG 90T>N‰4•H7$%4L2; 4E&;:!0EP$9#%?<?QR;; q>N‰4CC:>>:70_;9#% b ?=L^G@>b : v?QR;;y>>!044:E4#&C "#>!QV;N|4$‹%#>(GM1 ?_>>!04b :G@>GO%4B&E0JP.+7:E9#%?<?QR;?=L>!nEJM1N|4$ ‹%#>(G9pL2; ; %&SM10>!04GO%4B&7O%4B&9#%?<?QR;!]#M1$ ?QR;L%4E&>!04?=GN‰4;T; ?%<4GO%4B&>V/) 0 7$9#%?<;<> S ?QR;>T; ; q>N‰4C :0EM1bq>>K#7  9220ZU" -) [...]... khi rót gel vào khuôn thì ngâm bản gel vào dung dịch này sau khi đã điện di) - Rót gel vào khuôn đã được chắn hai đầu bằng băng dán hoặc bằng kẹp, đã cài sẵn lược và đặt trên mặt phẳng - Chờ cho đến khi gel rắn hoàn toàn thì cẩn thận tháo lược ra khỏi gel 6.2 Tiến hành điện di - Tháo bản gel ra khỏi kẹp hoặc băng chắn, đặt khuôn gel trong chậu điện di ngang, rót dung dịch đệm vào cho ngập gel, chú... III ỨNG DỤNG - Agarose gel điện là một phương pháp sử dụng rộng rãi việc chia tách các phân tử trên cơ sở tính phí điện, kích thước và hình dạng Phương pháp này đặc biệt hữu ích trong việc tách các phân tử sinh học tính quan trọng như DNA (deoxyribonucleic acid), RNA (ribonucleic acid), và protein - Agarose gel là một chất được sử dụng trong khoa học cho điện gel và sắc ký loại trừ kích cỡ Sử dụng agarose. .. và 0,25% xylencyanol (XC) - Bằng micropipet hút mẫu DNA nhỏ vào lỗ răng lược 12 - Bật điện một chiều để thực hiện điện di Cường độ dòng điện khoảng 50 đến 150 V tùy loại thiết bị điện di Thời gian điện di thay đổi phụ thuộc vào độ lớn của DNA, nồng độ agarose của gel và cường độ dòng điện Chú ý lượng DNA có thể điện di trong mỗi lỗ răng lược nhiều ít tùy kích thước răng lược, nếu quá nhiều sẽ xuất hiện... trào gel ra ngoài, nên chờ đến khi gel 11 sôi thì cắt điện, lấy ra (coi chừng bỏng) lắc đều rồi cho vào làm sôi lần nữa Lặp lại ba lần cho agarose tan hoàn toàn - Cho vào chậu bảo ôn ~50°C cho đến khi dịch gel đạt đến khoảng 50 60 °C (tay chạm vào được) thì cho vào gel một lượng dung dịch ethidium bromide để có hàm lượng cuối cùng của chất màu này là 50 μg/ml (Nếu không cho ethidium bromide vào gel. .. và thu nhận mẫu Nguyên tắc: Dựa vào sự thay đổi hướng điện trường trong quá trình điện di Mỗi lần hướng điện trường thay đổi thì phân tử DNA phải tự định hướng lại Sau khi điện di các vạch tương ứng với DNA cần tinh sạch được phát hiện và thu nhận lại theo một trong những phương pháp: • Phương pháp 1: phần agarose chứa các vạch đó được cắt ra và DNA được thu nhận sau khi đã khuếch tán phân tử gel agarose. .. agarose vào một dung dịch đệm thích hợp • Phương pháp 2: một “giếng” nhỏ được khoét trong agarose ngay trước vạch DNA “giếng” này được bơm đầy dung dịch đệm và điện trường được tái lập DNA di chuyển vào giếng chứa đầy dung dich đệm và được thu nhận lại • Phương pháp 3: Điện di được thực hiện trong một gel agarose đặc biệt (như Nusieve hay Seaplaque) có điểm nóng chảy rất thấp (65°) Sau điện di vạch... thiết bị phân tích gel số hóa (gel documentation system) Chú ý: Đèn tử ngoại (UV) có hai loại bức xạ với bước sóng 254 nm (UV sóng ngắn) và 366 nm (UV sóng dài) UV sóng ngắn giúp quan sát rõ DNA nhưng làm tổn hại cấu trúc chất này, cho nên nếu cần thu hồi DNA từ gel thì không nên áp dụng Hệ thống chụp ảnh điện di geldoc XP của Biorad 15 A Kết quả điện di trên gel agarose chụp bằng ánh... Dùng thiết bị chuyên dụng để phân tích và lưu trữ hình ảnh DNA (Gel Documentation System) Chú ý: không nhìn vào ánh sáng tử ngoại nếu không có kính lọc thích hợp - Nếu điện di DNA trong gel có pha sẵn ethidium bromide thì chiếu tia tử ngoại (UV) nucleid acid sẽ hiện hình dưới dạng những vạch màu đỏ cam 14 - Nếu không cho trước ethidium bromide thì sau khi điện di cần ngâm gel 30 - 60 phút trong... dụng agarose gel để tách và phân tích protein và DNA Phương tiện bao gồm một bột agarose tinh khiết đã được đun sôi trong một dung dịch đệm và sau đó làm lạnh 1 Những trường hợp sử dụng điện di gel agarose: - Ước lượng kích thước của các phân tử DNA sau khi thực hiện phản ứng cắt hạn chế (ví dụ: lập bản đồ hạn chế của DNA được tạo dòng ) - Phân tích các sản phẩm PCR (ví dụ: trong chẩn đoán di truyền... EtBr Sau khi chạy điện di xong lấy nhẹ bản gel ra khỏi khuôn và ngâm vào dung dịch EtBr nồng độ 0,5 gian 30-45 phút, tốt nhất trên một máy lắc nhẹ (độ 10 vòng/phút ) Đổ dịch nhuộm EtBr vào một bình riêng để xử lý và rửa bản gel bằng cách ngâm trong nước cất hai lần, mỗi lần 15-20 phút EtBr thường pha sẵn ở dạng đậm đặc 5 mg/mL và giữ ở 4oC trong tối 6.4 Kiểm tra băng ADN - Bản gel sau khi nhuộm

Ngày đăng: 31/08/2015, 14:43

Từ khóa liên quan

Tài liệu cùng người dùng

  • Đang cập nhật ...

Tài liệu liên quan