BỘYTẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI ^ :|c :f: :Ịí :fí ^ ^ ^ % ^ % ^ ĩ|c ^ :fc ^ ^ 5fc ^ ^ :f: Đỗ Thị Huyền Giang NGHIÊN CỨU BIỆN PHÁP CẢI THIỆN TÍNH THÂM CỦA ACYCLOVIR (KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP D ự ỉc sĩ KHOÁ 2001-2006) Người hướng dẫn : TS. Phạm Thị Minh Huệ Nơi thực hiện : Bộ môn bào chế Thòi gian thực hiện: 02/2006-05/2006 JvlẨvlc)l KLịịyỵ Hà nội, tháng 5 năm 2006 LỜI CẢM ƠN Hoàn thành khoá luận tốt nghiệp của mình, tôi đã nhận được rất nhiều sự giúp đỡ. Nhân dịp này, tôi xin bày tỏ lòng kính trọng và biết ơn sâu sắc tới; Çtiêti it ^IfUutL Çîhi JlUnh 'dfôuê Người thầy đã dành nhiều thời gian, công sức chỉ bảo tận tình và hết lòng giúp đỡ tôi trong thời gian thực nghiệm và hoàn thành khoá luận. Tôi xin chân thành cảm 0fn tới thầy giáo PGS.TS Nguyễn Văn Long cùng các thầy cô giáo, các cô kỹ thuật viên trong bộ môn bào chế và toàn trường đã trang bị kiến thức và tạo điều kiện thuận lợi cho tôi có được kết quả tốt đẹp hôm nay. Tôi cũng xin gửi tới các phòng ban chức năng của trường Đại học Dược Hà Nội lời cảm ơn chân thành nhất. Cuối cùng xin được cảm ơn gia đình và bạn bè đã luôn động viên sát cánh bên tôi trong suốt quá trình học tập và làm đề tài. Hà Nội ngày 19 tháng 05 năm 2006 sv : Đỗ Thị Huyền Giang MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỂ trang 1 PHẦNI: TỔNG QUAN 2 1.1. VÀI NÉT VỀ ACYCLOVIR: 2 1.1.1. Công thức hoá h ọ c 2 1.1.2. Tính ch ất 2 1.1.3. Dược động học 2 1.1.4.Tác dụng dược lý 3 1.1.5. Chỉ định 3 1.1.6. Chống chỉ định 3 1.1.7. Thận trọng 3 1.1.8. Tác dụng không mong muốn 4 1.1.9. Tương tác thuốc 4 1.1.10. Liều lượng và cách dùng 4 1.1.11. Một số chế phẩm ACV trên thị trường 5 1.2. HẤP THU THUỐC QUA ĐƯỜNG TIÊU HOÁ 5 1.2.1. Đặc điểm hấp th u 5 1.2.2. Mô hình tính lượng thuốc hấp thu 7 1.2.3. Phân nhóm thuốc theo BCS 10 1.2.4. Một số nghiên cứu tăng tính thấm của thuốc 11 PHẦN II: THỰC NGHIỆM VÀ KẾT Q U Ả 15 2.1. NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN c ú u 15 2.1.1. Nguyên vật liệu và phương tiện nghiên cứu 15 2.1.2. Phương pháp nghiên cứu 16 2.1.2.1. Phương pháp xây dựng đường chuẩn 16 2.1.2.2. Phương pháp xác định độ tan 16 2.1.2.3. Phương pháp chế tạo hỗn hợp vật lý , phương pháp tạo phức của ACV với tá dược 17 2.1.2.4. Phương pháp đánh giá tính thấm 18 2.2. KẾT QUẢ VÀ NHẬN XÉT 19 2.2.1. Xây dựng đường chuẩn ACV 19 2.2.2. Khảo sát độ tan của A C V 20 2.2.2.1. Khảo sát độ tan của ACV trong các môi trường pH khác nhau20 22.2.2. Khảo sát ảnh hưởng của chất tăng thấm đến độ tan của ACV .21 2.2.3. Khảo sát ảnh hưởng của chất tăng thấm đến tính thấm của ACV26 2.2.3.1. Ảnh hưởng của HPBCD đến tính thấm của ACV 26 2.2.3.2. Ảnh hưởng của AT đến tính thấm của ACV 29 2.2.3.3. Ảnh hưởng của ND đến tính thấm của ACV 30 2.2.3.4. Ảnh hưởng của chất diện hoạt đến tính thấm của ACV 31 2.2.3.5. So sánh ảnh hưởng của các chất tăng thấm 36 PHẦN III: KẾT LUẬN VÀ ĐỂ XUẤT 38 TÀI LIÊU THAM KHẢO BẢNG CHỮ VIẾT TẮT ACV : Acyclovir HPBCD : Hydropropyl P- cyclodextrin NL : Natri laurylsulfat ND : Natri deoxycholat AT : Acid tartaric BCS ; Biopharmaceutics classification system (Hệ thống phân loại sinh dược học) WHO : World Health Organization (Tổ chức y tế thế giới) ĐẶT VẤN ĐỂ Herpes simplex virus (HSV) thuộc nhóm Herpes là loại virus mang vật chất di truyền ADN, thường ký sinh trên cơ thể, khi gặp điều kiện thuận lợi sẽ phát triển và biểu hiện thành bệnh. Viêm não Herpes là một bệnh nguy hiểm đe doạ đến tính mạng con người. Theo tài liệu tham khảo, bệnh viêm màng não Herpes nếu không được điều trị, 50% bệnh nhân viêm não Herpes tiên phát và 80% bệnh nhân viêm màng não tái phát sẽ chết [20'. Hiện nay, acyclovir là thuốc được lựa chọn hàng đầu trong các thuốc kháng Herpes. Acyclovir có tác dụng chọn lọc trên tế bào nhiễm virus Herpes và mạnh nhất trên virus HSV-1, sau đó là HSV-2, Varicellazoster, Epstein Bar, Cytomegalovirus. Để có tác dụng, acyclovir phải được phosphoryl hoá thành dạng có hoạt tính là acyclovir triphosphat nhờ enzym của virus. Acyclovir có thể dùng qua đường uống, tiêm hoặc qua da. Tuy nhiên, acyclovir hấp thu thấp qua đường uống, sinh khả dụng khoảng (15-30)%. Theo phân loại sinh dược học (BCS) của WHO, acyclovir thuộc nhóm III (độ tan cao- tính thấm thấp). Yếu tố giới hạn hấp thu acyclovir là do có tính thấm thấp. Để cải thiện hấp thu - tăng sinh khả dụng của acyclovir qua đường uống, chúng tôi tiến hành đề tài “Nghiên cứu biện pháp làm tăng tính thấm của acyclovir” với mục tiêu sau: - Khảo sát ảnh hưởng của một số tá dược tới độ tan của acyclovir - Khảo sát ảnh hưởng của một số tá dược đến tính thấm của acyclovir qua màng thẩm tích. PHẦN i: TỔNG QUAN 1.1. VÀI NÉT VỂ ACYCLOVIR 1.1.1. Công thức hoá học [2], [11] H.N + Công thức phân tử: Cj8HiiN503 + Khối lượng phân tử: 225,2 + Tên khoa học: 2-amino-9-[(2-hydroxyethoxy)-methyl]-l,9-dihydro- 6H- purin- 6- one hoặc [9-( 2- hydroxyethoxymethyl) Guanine]. 1.1.2. Tính chất [2], [9], [10] - Acyclovir là dạng bột kết tinh màu trắng tan trong nước, tan tự do trong dung môi dimethyl sulfoxid, rất ít tan trong alcohol, tan được trong dung dịch kiềm và acid loãng. - Acyclovir bền vững, dung dịch acyclovir trong môi trường kiềm ổn định hơn trong môi trường acid. - Nhiệt độ nóng chảy 230° c và bị phân huỷ. - Hằng số phân ly: Acyclovir có hai hằng số ion hoá pK = 2,41 ± 0,27 và pK = 9,06 ±0,88 ở nhiệt độ phòng. 1.1.3. Dược động học [3],[4],[5] Acyclovir có thể dùng đường uống, tiêm hoặc qua da. Sinh khả dụng qua đường uống từ 15%- 30%, thức ăn không làm ảnh hưởng đến hấp thu của thuốc. Nồng độ đỉnh trong huyết tương đạt được sau khi uống l,5-2h. Phân bố: ACV phân bố rộng trong dịch cơ thể và các cơ quan; não, phổi, ruột, gan, cơ, tử cung, niêm mạc và dịch âm đạo, nước mắt liên kết với protein thấp 9-33%. Chuyển hoá và thải trừ: thải trừ qua thận dưới dạng không đổi theo đường uống là 14,4% của liều, theo đường tiêm 62- 91% của liều. Thời gian bán thải (T1/2) theo đường tĩnh mạch 2-3h. Chất chuyển hoá chính là 9 carboxymethoxy methylguanine khoảng 14% của liều ở người chức năng thận bình thường. Một lượng nhỏ 8 hydroxy- 9 (2- hydroxy- ethoxymethyl)guanine chiếm dưới 0 ,2% của liều. 1.1.4. Tác dụng dược lý [3], [23], [24] Acyclovir là dẫn xuất guanosin có tác dụng đặc hiệu trên virus Herpes như: Herpes simplex (HSV) loại 1 và 2, Varicella zoster (VZV), Epstain-Barr (EBV), cytomegalovrus (CMV). Acyclovir vào cơ thể dưới tác dụng của thymidinkiase và một số emzym khác tạo thành acyclovir triphosphat là dạng có hoạt tính. Acyclovir ức chế chọn lọc ADN polymerase nên ngăn cản tổng hợp ADN của virus. Cơ chế tác dụng của acyclovir được trình bày ở sơ đồ 1. 1.1.5. Chỉ định [3], [4], [5] - Dự phòng và điều trị các bệnh do nhiễm HSV1 và HSV2 ở da, niêm mạc, thần kinh và sinh dục. - Điều trị bệnh zona cấp do VZN như zona mắt, phổi, thần kinh. - Dự phòng và điều trị nhiễm virus ở người suy giảm miễn dịch, cấy ghép cơ quan, bệnh thuỷ đậu. 1.1.6. Chông chỉ định [3], [4], [5] Chống chỉ định dùng acyclovir cho người bệnh mẫn cảm với thuốc 1.1.7. Thận trọng [3], [4], [5] Thận trọng với bệnh nhân suy thận, phụ nữ có thai và cho con bú. Tiêm truyền tĩnh mạch chậm (>lh), tránh kết tủa ACV trong thận cần Deoxyribonucleosides Acyclovir Viral thymidine kinase hoặc cellular kinase Acyclovir monophosphate Viral kinase hoặc Cellular enzymes Acyclovir diphosphate ị Acyclovir triphosphate Deoxyribonucleoside Triphosphate DN A/Acyclovir monophosphate/ DN Apoly merase Viral DNA polymerase Sơ đồ ỉ: Cơ chế tác dụng của acyclovir 1.1.8. Tác dụng không mong muốn [3], [4], [5] Đường uống: Gây buồn nôn, nôn, tiêu chảy, đau bụng, nhức đầu, ban da. Đường tiêm: Gây đau và viêm tĩnh mạch nơi tiêm, rối loạn chức năng thận. ít gặp là các rối loạn về thần kinh, tâm thần như ảo giác, ngủ lịm, động kinh. Dùng bôi ngoài da: Gây kích ứng, nóng rát, đau nơi bôi thuốc. 1.1.9. Tương tác thuốc [3], [4], [5] - Kết hợp với zidovudin gây tăng trạng thái ngủ lơ mơ. - Probenecid làm tăng thải trừ, giảm tác dụng của acyclovir. - Ketoconazol, amphotericin B tăng tác dụng của acyclovir. 1.1.10. Liều lượng và cách dùng [3] - Người lớn; 200- 800 mg / lần x5 lần/ ngày, đợt điều trị 5-7 ngày. - Trẻ em : 20 mg /kg X 4 lần/ ngày. 1.1.11. Một số chế phẩm ACV trên thị trường [5],[6] + Acyclovir - stada; Dạng viên nén 200mg, 400mg, 800mg. + Heq)ex - Torrent; Dạng viên nén 200 mg; dạng kem hàm lượng 5% trọng lượng 5g. + Medovir - Medochemie; Dạng viên nén 200mg, 800mg. + Nockwoo acyclvir - Welfide Korea: Dạng viên nén 200mg. + Zoviax - GlaxoSmithKline: Dạng viên nén 200mg; thuốc mỡ tra mắt hàm lượng 3% trọng lượng 4,5g; dạng kem hàm lượng 5% trọng lượng 2g; hỗn dịch 250mg/ 5ml, chai 125ml; lọ bột để pha thành dung dịch tiêm hay truyền tĩnh mạch 250mg. 1.2. HẤP THU THUỐC QUA ĐƯỜNG TIÊU HOÁ 1.2.1. Đặc điểm hấp thu [1], [22] 1.2.1.1. Khoang miệng Thuốc uống hầu như không hấp thu qua khoang miệng. 1.2.1.2.Thực quản Không xảy ra sự hấp thu khi thuốc đi qua thực quản trừ một lượng nhỏ nước bọt đã hoà tan nhiều dược chất khi ngậm lâu dưới lưỡi. 1.2.1.3. Dạ dày Niêm mạc dạ dày chủ yếu là niêm mạc tiết, tiết ra các chất: acid hydrocloric, chất kiềm, men, dịch nhày và các thành phần khác tạo nên dịch vị có pH lúc mới tiết từ 1-2 có thể có tác động xấu tới SKD của thuốc. Do ảnh hưởng của pH, acid yếu tồn tại chủ yếu dưới dạng không ion hoá và base yếu tồn tại chủ yếu dưới dạng ion hoá. Sự hấp thu ở dạ dày xảy ra theo cơ chế khuếch tán thụ động, chỉ có phần ion hoá thân dầu có khả năng đi qua màng, nước và các phân tử lượng nhỏ theo cơ chế lọc và khuyếch tán thụ động qua niêm mạc dạ dày. Đây là vùng hấp thu tối ưu các acid theo cơ chế micro pH dưới dạng kết tủa rất mịn. Dược chất hấp thu ở đây bị chuyển hoá một phần qua gan. 1.2.1.4. Ruột non Ruột non gồm 2 phần: [...]... số thấm 0,15 ± 0,01 X 10 '' cm/s < lOx 10'^ cm/s; liều 500 mg, độ tan tại pH 7,2 là 1,08, tỷ lệ D/S là 462,9 > 250; hấp thu 10% 1.2.4 Một số nghiên cứu tăng tính thấm của thuốc Sinh khả dụng thấp sẽ hạn chế tác dụng điều trị của thuốc Tính thấm thấp là một trong những nguyên nhân làm sinh khả dụng thuốc không cao Một số biện pháp đã được sử dụng nhằm cải thiện tính thấm, nâng cao sinh khả dụng của. .. hydropropylp- cyclodextrin tăng tính thấm của thuốc thân dầu - Muối mật có khả năng tăng tính thấm của thuốc, làm cho việc hấp thu thuốc nhanh và nhiều hơn so với các chất tăng thấm khác Natri deoxycholate có khả năng tăng tính thấm tốt hơn natri cholate Natri deoxycholate tác động lên lipid và protein màng * Ya Mrestani và cộng sự [18] đã nghiên cứu làm tăng tính thấm của cefpirom bằng cách sử dụng... hô hấp tăng Khả năng tăng hấp thu của HPBCD > natri deoxycholate > natri caprate > natri tauroglycocholate > EDTA và phụ thuộc vào nồng độ của chất tăng thấm - O.Diez và cộng sự [27] nghiên cứu ảnh hưởng của PG tới tính thấm qua da của acyclovir từ dung dịch PG và gel carbopol 971 Dung dịch và gel chứa PG với tỷ lệ từ 0%-70% Dạng dung dịch, mức độ thấm qua da của acyclovir tăng lên khi tỷ lệ PG trong... do tăng độ nhớt trong quá trình khuyếch tán, mức độ thấm qua da đạt cao nhất ở tỷ lệ 50% Tính thấm qua da của acyclovir từ gel thấp hơn từ dung dịch là do mạng lưới cấu trúc polyme của gel ảnh hưởng tới tốc độ khuyếch tán của ACV PHẦN II: THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN cứu 2.1.1 Nguyên vật liệu và phương tiện nghiên cứu * Nguyên liệu vật: Bảng l.l: Nguyên vật liệu STT... tan nhiều Nhóm IV: Tính thấm thấp - tan ít Dựa vào phân loại tính thấm - tính tan của thuốc và mức độ hấp thu của dược chất, V Pade và s Stavchansky [ 11 ] đã đưa ra mối tương quan giữa tính thấm - tính tan - hấp thu như sau: - Tính thấm cao - tan nhiều: Thuốc hấp thu nhanh và hoàn toàn, mức độ hấp thu > 90% Yếu tố giới hạn hấp thu thuốc của nhóm này là tốc độ tháo rỗng dạ dày Ví dụ: Naproxen có liều... Hệ số thấm ( cm/ s) V^: Thể tích ngăn cho (cm^) A: Diện tích bề mặt (cm^) : Phần trăm di chuyển qua màng Caco- 2 cells theo đơn vị thời gian Thuốc có hệ số thấm > 10x10 '^ cm/ s thì thuốc hấp thu hoàn toàn ( > 90%) Dựa vào mức độ tan và thấm thuốc có thể được phân thành các nhóm; Nhóm I: Tính thấm cao - tan nhiều Nhóm II: Tính thấm cao - tan ít Nhóm III: Tính thấm thấp - tan nhiều Nhóm IV: Tính thấm. .. nhau Natri caprate tăng tính thấm qua màng tế bào và kẽ tế bào như nhau, tác động lên lipid và protein của màng Natri caprylate tác động nên phần sơ nước trong màng, cả hai không độc với màng nhày ruột - Cyclodextrin tăng tính thấm của thuốc thân dầu 27 lần, thuốc thân nước 4 lần Cyclodextrin tăng tính thấm chủ yếu bằng vận chuyển qua tế bào P- cyclodextrin ưu tiên tăng tính thấm của thuốc thân nước còn... tăng tính thấm ACV khi ở nồng độ thấp nhưng ở nồng độ HPBCD cao làm tăng độ nhớt môi trường giảm tốc độ khuyếch tán của ACV, hạn chế lượng ACV thấm qua màng * Tạo phức ACV- HPBCD Tiến hành tạo phức ACV - HPBCD với các tỷ lệ ACV: HPBCD ; 1; 1; 1:1,5; 1; 2 theo phương pháp ghi ở mục 2.1.2.3 Nghiên cứu tính thấm của ACV theo mục 2.1.2.4 Kết quả được trình bày ở bảng 2.9 và hình 2.8 Bảng 2.9: Lượng ACV thấm. .. tan nhiều: Tính thấm của thuốc qua màng ruột là yếu tố giới hạn hấp thu Mức độ và tốc độ thấm có thể tăng lên khi thuốc di chuyển trong đường tiêu hoá, thấm qua màng Ví dụ: Furosemide có hệ số thấm 0,12 X 10‘^cm/s < 10 X 10'^ cm/s; liều 40 mg, độ tan ở pH = 7,2 là 2,25 mg/ml; tỷ lệ D/S là 17,78 < 250; phần trăm hấp thu 50% - Tính thấm thấp - tan ít: Tốc độ và mức độ hấp thu ít, khó cải thiện hấp thu... nồng độ thuốc thấm qua được xác định bằng phương pháp HPLC Kết quả nghiên cứu cho thấy hai chất BAC và HAS có khả năng cải thiện tính thấm và hấp thu của cefpirom Hệ số phân bố cefpirom trong noctanol/đệm khi kết hợp với BAC tăng 27 lần, kết hợp với HAS tăng 23 lần Khi không sử dụng BAC, HAS, cefpirom không di chuyển qua màng lipid nhân tạo Đánh giá sinh khả dụng in vivo trên thỏ, AUC của cefpirom . của HPBCD đến tính thấm của ACV 26 2.2.3.2. Ảnh hưởng của AT đến tính thấm của ACV 29 2.2.3.3. Ảnh hưởng của ND đến tính thấm của ACV 30 2.2.3.4. Ảnh hưởng của chất diện hoạt đến tính thấm. Nghiên cứu biện pháp làm tăng tính thấm của acyclovir với mục tiêu sau: - Khảo sát ảnh hưởng của một số tá dược tới độ tan của acyclovir - Khảo sát ảnh hưởng của một số tá dược đến tính thấm. học (BCS) của WHO, acyclovir thuộc nhóm III (độ tan cao- tính thấm thấp). Yếu tố giới hạn hấp thu acyclovir là do có tính thấm thấp. Để cải thiện hấp thu - tăng sinh khả dụng của acyclovir qua