Y H Ọ C TH Ự C HÀNH (893) - S Ố 11/2013 60 TÌM HIỂU NỒNG ĐỘ TNF- Ở BỆNH NHÂN UNG THƯ PHỔI KHÔNG TẾ BÀO NHỎ NGUYỄN TRỌNG TÀI – Đại học Y Vinh NGUYỄN KIM LƯU – Bệnh viện 103, Học viện Quõn y TÓM TẮT Nghiên cứu nồng độ TNF-α trên 35 bệnh nhân ung thư phổi và 30 người bình thường khỏe mạnh tại Khoa Ung bướu - Bệnh viện 103, thu được kết quả: nồng độ TNF-α trung bình ở nhóm bệnh nhân ung thư là 308,9 ± 176,0 pg/ml, tăng cao gần gấp 6 lần so với nhóm chứng (51,7 ± 49,4 pg/ml), sự khác biệt có ý nghĩa thống kê với p<0,0001; Giai đoạn càng muộn thì nồng độ TNF-α càng cao và mức độ thiếu máu càng nặng thì nồng độ TNF-α càng tăng cao (p < 0,01); TNF-α tăng cùng với tình trạng tổn thương tế bào gan. SUMMARY LEARN CONCENTRATIONS OF TNF-α IN PATIENT WITH NON SMALL CELL LUNG CANCER Research TNF-α levels in 35 lung cancer patients and 30 normal healthy people in the Department of Oncology - Hospital 103, get results: TNF-α levels in the average cancer patient group was 308, 9 ± 176.0 pg / ml, nearly 6 times higher than the control group (51.7 ± 49.4 pg / ml), the difference is statistically significant with p <0.0001; Stage more later, TNF-α levels and higher levels of anemia heavier concentrations of TNF-α as higher (p <0.01), TNF-α increases with injury to the liver cells. ĐẶT VẤN ĐỀ Sự có mặt của khối ung thư (UT), sẽ kích hoạt hệ miễn dịch của cơ thể, kích hoạt phản ứng viêm, đó là những phản ứng chống lại bệnh tật của cơ thể trong khi đau ốm hay sau phẫu thuật. Thông thường đáp ứng viêm tự hạn chế và giảm khi cơ thể lui bệnh và hồi phục sức khỏe, nhưng trong một số trường hợp phản ứng viêm vượt ngoài tầm kiểm soát của cơ thể như trong trường hợp bệnh ung thư, Hội chứng chuyển hóa (HCCH) Đáp ứng viêm được kích hoạt bởi sự phóng thích các protein điều tiết của các tế bào thuộc hệ miễn dịch vào máu. Các protein điều tiết này được gọi là các cytokine tiền viêm, đây là các protein nhỏ khởi đầu cho một chuỗi sự kiện dẫn đến các phản ứng viêm của cơ thể. Một số chất sinh ra do phản ứng của cơ thể đối với khối u như các cytokine gây viêm (IL-1, IL-6, TNF- α) hoặc do chính khối u sinh ra như yếu tố gây ly giải protein (proteolysis-inducing factor - PIF) Trong bệnh ung thư, các cytokine thuộc họ yếu tố hoại tử khối u (tumor necrosis factor: TNF) hoạt động dưới dạng protein tam trùng phân (trimer). Các protein này có nguồn gốc từ bề mặt màng tế bào, các cytokine này bao gồm: - Yếu tố gây hoại tử khối u-alpha (TNF- α) - Interleukin-1 (IL-1) - Interleukin-6 (IL-6). Các cytokine thuộc họ này có những tính chất rất khác biệt so với các cytokine của các họ khác.TNF α là đại diện tiêu biểu cho họ cytokine này. Đây là một yếu tố hoạt hóa tế bào nội mô mạch máu rất mạnh và tăng tính thấm thành mạch. Hiệu ứng này làm tăng các IgG, bổ thể và các tế bào đi vào tổ chức gây viêm cục bộ. TNF α còn có tác dụng toàn thân như gây sốt, huy động các chất chuyển hóa và gây sốc [7]. TNFα người là một polypeptid có trọng lượng phân tử khoảng 17 kilo dalton, tồn tại ở ba dạng: dimer, trimer hoặc pentamer tuỳ vào loại và phương pháp tách chiết. Những nghiên cứu in vitro đã chỉ ra rằng ở chuột, thỏ và người, polypeptid được sản xuất như một tiền hormon không hoạt động.TNFα của người bao gồm 157 acid amin, và polypetid của nó thêm 16 acid amin nữa. TNFα được sản xuất chủ yếu bởi đại thực bào sau đó đi vào máu rồi đến các mô và cơ quan khác, TNFα còn được tổng hợp trong các tế bào giết tự nhiên (NK), các tế bào u hắc tố và một vài dòng tế bào ung thư. Một điều đáng chú ý là họ TNF-α, vốn đóng vai trò đặc biệt quan trọng trong phản ứng viêm và chết tế bào theo lập trình, cũng có chức năng quyết định trong sự phát triển bình thường của các tế bào lympho, ví dụ điển hình là vai trò của CD40-ligand đối với vai trò của tế bào CD4. Ung thư phổi là bệnh có tỷ lệ mắc và tỷ lệ tử vong cao nhất hiện nay, theo cơ quan Nghiên cứu Quốc tế về Ung thư (IARC) cho biết trong năm 2010, có 223.000 người bị chết do ung thư phổi. Tại Viêt Nam, theo Nguyễn Chấn Hùng, năm 2010 có 14652 bệnh nhân ung thư phổi mới mắc, trong đó ung thư phổi không phải tế bào nhỏ thường gặp hơn ung thư phổi tế bào nhỏ (khoảng 80%) và nó thường phát triển và lan chậm hơn [ theo 4]. Trên thế giới và ở Việt nam đã có một số công trình nghiên cứu về nồng độ và liên quan của TNF-α trong viêm, trong hội chứng chuyển hóa [1],[2], [3], [5], còn trong ung thư chúng tôi chưa thấy nghiên cứu nào đề cập đến vấn đề này. Vì vậy chúng tôi tiến hành nghiên cứu với mục tiêu: bước đầu tìm hiểu nồng độ của TNF-α ở bệnh ung thư phổi không tế bào nhỏ. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU - Gồm 65 đối tượng nghiên cứu, trong đó: + Nhóm nghiên cứu: 35 bệnh nhân ung thư phổi mới được chẩn đoán, điều trị nội trú tại Khoa Ung bướu - Bệnh viện 103. + Nhóm chứng: 30 người bình thường khỏe mạnh. - Tiêu chuẩn chọn mẫu nghiên cứu: + Nhóm nghiên cứu:  Bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ, Y H Ọ C TH Ự C HÀNH (893) - S Ố 11/2013 61 được chẩn đoán xác định bằng kết quả giải phẫu bệnh lý.  Bệnh nhân mới được chẩn đoán UT, chưa điều trị gì.  BN đồng ý tham gia nghiên cứu. + Nhóm chứng: 30 người bình thường, khỏe mạnh và các xét nghiệm huyết học, sinh hóa trong giới hạn bình thường tại thời điểm nghiên cứu. - Tiêu chuẩn loại trừ + Những bệnh nhân có sốt, có hội chứng viêm nhiễm. + Những BN có các bệnh mạn tính kèm theo như: COPD, hen phế quản, viêm gan mạn, xơ gan, viêm cầu thận mạn, có HCCH, đái tháo đường - Thiết kế nghiên cứu: mô tả cắt ngang. - Thu thập số liệu theo mẫu thống nhất. - Định lượng nồng độ TNF-α huyết thanh được tiến hành bằng kỹ thuật ELISA, sử dụng bộ kít Avi Bion Human TNF-α, của hãng Orgenium, Phần Lan. Xét nghiệm tại trung tâm công nghệ cao Học viện Quân y. - Các xét nghiệm sinh hóa máu, huyết học được thực hiện tại khoa Sinh hóa và khoa Huyết học Bệnh viện 103. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU. Bảng 1. Phân độ thiếu máu của nhóm bệnh nhân ung thư. M ức độ thiếu máu S ố l ư ợng (n ) T ỷ lệ % Không thi ếu máu 15 42 , 8 Thi ếu máu nhẹ 13 37 , 2 Thi ếu máu vừa 7 20 Thi ếu máu nặng 0 0 C ộng 35 100 , 0 Bảng 2. Kết quả xét nghiệm GOT, GPT, GGT của nhóm bệnh nhân ung thư. Ch ỉ số Không tăng (n; %) Tăng (n; % ) p GOT 17 (48 , 6 ) 18 (51 , 4 ) > 0 , 05 GPT 15 (42 , 9 ) 20 (57 , 1 ) < 0 , 05 GGT 13 (37 , 1 ) 22 (62 , 9 ) < 0 , 01 Bảng 3. Nồng độ TNF-α ở nhóm bệnh nhân ung thư và nhóm chứng N ồng độ TNF-α (pg/ml) Nhóm ch ứng Nhóm b ệnh p  ± SD 51,7 ± 49,4 308,9 ± 176,0 < 0,0001 - Nồng độ TNF-α trung bình ở người khỏe mạnh bình thường là 51,7 ± 49,4 pg/ml, trong khi đó ở nhóm bệnh nhân ung thư là 308,9 ± 176,0 pg/ml, tăng cao gần gấp 6 lần so với nhóm chứng, so sánh thấy khác biệt có ý nghĩa thống kê với p<0,0001. Bảng 4. Nồng độ TNF-α theo giai đoạn của nhóm ung thư. Giai đo ạn UT N ồng độ TNF - α (pg/ml) (± SD) p I; n = 0 (1 ) II; n= 8 (2 ) 280 , 6 ± 153 , 0 P 2-3; 2-4 < 0 , 001 III; n = 20 (3 ) 3 02 , 9 ± 169 , 0 < 0 , 001 IV; n = 7 (4 ) 325 , 4 ± 177 , 0 - Nồng độ TNF-α ở các giai đoạn có sự khác biệt rõ rệt với p < 0,001. Bảng 5. Nồng độ TNF-α theo mức độ thiếu máu của nhóm nghiên cứu M ức độ thiếu máu N ồng độ TNF - α (pg/ml) (± SD) p Không thi ếu máu; n = 15 (1) 276 , 6 ± 158 , 0 P 1-2, 1-3 <0 , 001 Thi ếu máu nhẹ; n =13 (2) 311 , 9 ± 169 , 0 P< 0 , 001 Thi ếu máu vừa; n = 7 (3) 323 , 4 ± 173 , 0 Thi ếu máu nặng; n = 0 (4 ) - Nồng độ TNF-α tăng tương ứng với mức độ thiếu máu : nhẹ (276,6 ± 158,0); vừa (311,9 ± 169,0) ; nặng (323,4 ± 173,0); khác biệt có ý nghĩa thống kê. Bảng 6. Nồng độ TNF-α theo nồng độ GOT của nhóm nghiên cứu Ho ạt độ GOT N ồng độ TNF - α (pg/ml) (± SD) p Không tăng; n = 17 283 , 6 ± 161 , 0 < 0 , 001 Tăng; n =18 314 , 9 ± 178 , 3 - So sánh giữa hai nhóm tăng GOT và nhóm không tăng GOT thấy nồng độ TNF-α có sự khác biệt với p < 0,001 Bảng 7. Nồng độ TNF-α theo nồng độ GPT của nhóm nghiên cứu Ho ạt độ GPT N ồng độ TNF - α (pg/ml) (± SD) p Không tăng; n = 15 282 , 7 ± 158 , 6 < 0 , 001 Tăng; n =20 315 , 2 ± 185 , 2 - So sánh giữa hai nhóm tăng GPT và nhóm không tăng GPT thấy nồng độ TNF-α có sự khác biệt với p < 0,001 Bảng 8. Nồng độ TNF-α theo nồng độ GGT của nhóm nghiên cứu Ho ạt độ GGT N ồng độ TNF - α (pg/ml) (± SD) p Không tăng; n = 13 282 , 9 ± 157 , 7 < 0 , 001 Tăng; n =22 315 , 7 ± 184 , 8 - So sánh giữa hai nhóm tăng GGT và nhóm không tăng GGT thấy nồng độ TNF-α có sự khác biệt với p < 0,001 BÀN LUẬN Ung thư phổi là loại ung thư thường gặp nhất, gây ra cái chết của hơn một triệu người mỗi năm. Sự hiểu biết ở mức độ phân tử về xâm lấn / di căn của tế bào ung thư là rất quan trọng cho việc phát triển phương pháp điều trị mới của bệnh ung thư phổi. Chuyển đổi biểu mô-trung mô (EMT) là việc chuyển đổi sự khác biệt các tế bào biểu mô để có được kiểu hình trung mô, đóng vai trò quan trọng trong quá trình phát triển phôi thai cũng như quá trình xâm lấn / di căn ung thư [6]. Nhiều nghiên cứu đã cho thấy cơ chế phân tử mà các phản ứng viêm thúc đẩy sự tiến triển ung thư [6].Yếu tố hoại tử khối u (TNF)-α là một trong những cytokine tiền viêm mạnh nhất được sản xuất trong khối u. Khi kích thích, kích hoạt IKK (IκB kinase) phosphoryl hóa chất ức chế NFκB (IκB) và gây nên sự suy thoái nhanh chóng của mình thông qua sự phân giải protein proteasome, dẫn đến giải phóng Y H C TH C HNH (893) - S 11/2013 62 NFB, sau ú n nhõn t bo v gõy ra vụ s cỏc biu hin gen liờn quan n ỏp ng min dch. Vai trũ ca NFB tớn hiu khi u v tin trin ca bnh ung th c chng minh rừ rng, v mt vi nghiờn cu ó chng minh rng TNF- v / hoc NFB tớn hiu úng mt vai trũ quan trng trong vic iu tit chuyn i biu mụ trung mụ[8]. Yu t tng trng TGF- úng mt vai trũ trung tõm trong cỏc quy nh ca EMT, thng c biu hin quỏ mc trong mụ khi u, v to iu kin cho s tin trin ung th, ng thi TNF- tng cng TGF--qua trung gian EMT trong ung th phi / t bo biu mụ. S gia tng ca nng TNF- vn cũn gõy tranh cói, vỡ nhiu nghiờn cu cho thy TNF- lm nng thờm tỡnh trng bnh, cng cú ý kin cho rng chớnh TNF- l yu t chng li s phỏt trin ca khi u. Trờn 35 bnh nhõn ung th cú 15 bnh nhõn khụng thiu mỏu mc, 13 bnh nhõn thiu mỏu mc nh v 7 bnh nhõn thiờỳ mỏu mc va vi tỡnh trng tn thng gan khỏc nhau (bng 1, 2). Nghiờn cu ca chỳng tụi cho thy nng TNF- trung bỡnh ngi khe mnh bỡnh thng l 51,7 49,4 pg/ml, trong khi ú nhúm bnh nhõn ung th l 308,9 176,0 pg/ml, tng cao gn gp 6 ln so vi nhúm chng, so sỏnh thy khỏc bit cú ý ngha thng kờ vi p<0,0001 (bng 3). Giai on ung th cng mun thỡ nng TNF- cng cao (bng 4) v mc thiu mỏu cng nng thỡ nng TNF- cng tng cao (bng 5), s thay i cú ý ngha thng kờ vi p < 0,01; Nng TNF- tng cựng vi tỡnh trng tn thng t bo gan. KT LUN Nghiờn cu trờn 35 bnh nhõn ung th phi c iu tr ti khoa ung bu- Bnh viờn 103, cú so sỏnh vi 30 ngi khe mnh, chỳng tụi nhn thy Nng TNF- trung bỡnh nhúm bnh nhõn ung th l 308,9 176,0 pg/ml, tng cao gn gp 6 ln so vi nhúm chng (51,7 49,4 pg/ml), s khỏc bit cú ý ngha thng kờ vi p<0,0001; Nng TNF- thay i tng dn theo giai on ung th (giai on II, III, IV tng ng l: 280,6 153,0 302,9 169,0 325,4 177,0) Mc thiu mỏu cng nng thỡ nng TNF- cng cao, so sỏnh gia cỏc mc thiu mỏu khỏc bit cú ý ngha thng kờ vi p < 0,01. Hot GOT, GPT, GGT tng thỡ TNF- cng tng, so sỏnh gia 2 nhúm tng v khụng tng, khỏc bit cú ý ngha thng kờ vi p< 0,01. TI LIU THAM KHO 1. Nguyn Ngc Chõu (2012), Nghiờn cu mt khoỏng xng, IL 1, TNF- bnh nhõn thoỏi húa khp, Lun ỏn Tin s Y hc, Hc vin Quõn y. 2. Nguyn Kim Lu, Nguyn Lnh Ton (2012), Nghiờn cu nng adiponectin v TNF- ngi bộo phỡ v bnh nhõn T týp 2, Tp chớ Y dc hc Quõn s HVQY, s 9/2011. 3. Nguyn Th Phi Nga (2009), Nghiờn cu nng TNF , CRP huyt thanh v liờn quan vi hỡnh thỏi, chc nng ng mch cnh gc bng siờu õm doppler mch bnh nhõn ỏi thỏo ng typ 2. Lun ỏn Tin s Y hc, Hc vin Quõn y. 4. Quyt, Mai Xuõn Khn (1012), Nghiờn cu nng mt s cytokin (TNF-,IL-6, LI-8) bnh nhõn bnh phi tc nghn mn tớnh trong v sau t bựng phỏt. ti cp c s, Hc vin Quõn y. 5. Nguyn ỡnh Ton (2012), Nghiờn cu nng PAI-1, TNF- huyt tng bnh nhõn nhi mỏu nóo giai on cp, Lun ỏn tin s Y hc, i hc Y Hu. 6. Bruunsgaard H (2000), Ageing, tumour necrosis factor-alpha (TNF-) and atherosclerosis, Clinical & Experimental Immunology, Volume 121, Issue 2, pp.255260. 7. Carlson Noel G, Whitney A. Wieggel (1999), Inflammatory Cytokines IL-1, IL-1ò, IL-6, and TNF Impart Neuroprotection to an Excitotoxin Through Distinct Pathways, The Journal of Immunology, 163, pp.3963-3968. 8. Sultana Shehnaz et al (2011), Tumour necrosis factor alpha and interleukin10 gene polymorphisms and the risk of ischemic stroke in South Indian population, J. Genet, Vol.90, pp.361-364. NHậN XéT ĐặC ĐIểM TổN THƯƠNG Và CáC Kỹ THUậT PHẫU THUậT THAY KHớP HáNG TạI BệNH VIệN ĐạI HọC Y Hà NộI Trần Trung Dũng B mụn Ngoi, Trng i Hc Y H Ni TểM TT Mc tiờu nghiờn cu: 1) Mụ t cỏc c im lõm sng v X quang ca cỏc bnh nhõn thay khp hỏng; 2)Nhn xột cỏc phng phỏp phu thut thay khp hỏng. i tng v phng phỏp nghiờn cu: Nghiờn cu tin hnh trờn 39 bnh nhõn c phu thut thay khp hỏng ti Bnh vin i Hc Y H ni. Kt qu nghiờn cu: 82,1% cỏc bnh nhõn gy c xng ựi, 12,8% hoi t chm xng ựi vụ khun v 5,1% thoỏi húa khp hỏng. Thay khp hỏng ton phn l 38,5% v thay khp hỏng bỏn phn l 61,5%. Thay khp hỏng cú xi mng l 61,5% v khụng xi mng l 38,5%. Kt lun: a s cỏc bnh nhõn l gy c xng ựi v phng phỏp thay khp hỏng ch yu l bỏn phn cú xi mng. T khúa: thay khp hỏng, gy c xng ựi, hoi t vụ khun chm xng ựi, thoỏi húa khp hỏng. SUMMARY . do ung thư phổi. Tại Viêt Nam, theo Nguyễn Chấn Hùng, năm 2010 có 14652 bệnh nhân ung thư phổi mới mắc, trong đó ung thư phổi không phải tế bào nhỏ thư ng gặp hơn ung thư phổi tế bào nhỏ (khoảng. 60 TÌM HIỂU NỒNG ĐỘ TNF-  Ở BỆNH NHÂN UNG THƯ PHỔI KHÔNG TẾ BÀO NHỎ NGUYỄN TRỌNG TÀI – Đại học Y Vinh NGUYỄN KIM LƯU – Bệnh viện 103, Học viện Quõn y TÓM TẮT Nghiên cứu nồng độ TNF- α. độ TNF- α trên 35 bệnh nhân ung thư phổi và 30 người bình thư ng khỏe mạnh tại Khoa Ung bướu - Bệnh viện 103, thu được kết quả: nồng độ TNF- α trung bình ở nhóm bệnh nhân ung thư là 308,9 ± 176,0