Đang tải... (xem toàn văn)
PHẦN I ĐẶT VẤN ĐỂ Ngày nay cùng với sự phát triển của khoa học và y học hiện đại, việc sử dụng rộng rãi các vị thuốc cổ truyền không những hoàn toàn chỉ dựa vào kinh nghiệm dân gian, mà còn dựa trên cơ sở khoa học đã được chứng minh bằng những thành phần hoá học và tác dụng sinh học của chúng. Bạch chỉ là rễ đã phơi hoặc sấy khô của câv Hàng châu Bạch chỉ Angelica dahurica (Fisch.), Benth. et Hook,và cây Xuyên Bạch chỉ Angelica anomaỉa Lallem họ ( Apiaceae), là vị thuốc cổ truyền được sử dụri2 làm thuốc siảm đau, hạ sốt, chữa tràng nhạc, viêm tuyến vú, nsạt mũi, viêm mũi chảy nước hôi, mụn nhợt chốc lở... Thành phần hoá học và tác dụns sinh học của rễ Bạch chí đã được nhiều tác 2Íả trong và ngoài nước nghiên cứu. Ngoài bộ phận dùnơ là rễ ra, chúng tôi thấy quả Bạch chí cũng là nsuồn nsuyên liệu rất phong phú. nhưng chưa được sử dụns rộnơ rãi. Tài liệu trons và ngoài nước viết về quả Bạch chỉ cho tới nay hầu như còn rất hiếm. Chúng tòi mới chỉ thấy một tài liệu duy nhất, đó là quyển Những Coumarin và Furocoumarin tự nhiên” của ‘viết về sự có mật của Byak angelicin trong quả của câv Angelica dahurica.Với mong muốn 2Óp phần tìm nguồn nguyên liệu làm thuốc từ nhữnơ dược liệu sẵn có trong nước, chúns tôi bước đầu tiến hành sơ bộ nghiên cứu quả cây Bạch chi di thực ở Việt Namvới những mục tiêu sau: Định tính phát hiện một số hợp chất tự nhiên. Định lượng thành phần hoá học chính. Chiết xuất, phân lập, tinh chế, phân tích và sơ bộ nhận dạn2 chất phân lập được. Thử tác dụng kháng nấm, kháng khuẩn của dịch chiết quả và thành phần hoá học chính có trong quả. 1
BỘ Y TÊ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI lyj VŨ THỊ THU HƯƠNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HOÁ HỌC VÀ TÁC DỤNG KHÁNG KHUAN c ủ a q u ả c â y b ạ c h CHỈ DI THỰC Ở VIỆT NAM (KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP Dược sĩ ĐẠI HỌC KHOÁ 1996 - 2001) Người hướng dẫn Nơi thực hiện Thời gian thực hiện PGS.TS. BẾ THỊ THUẤN Bộ môn Dược liệu 2-5/2001 l e m HÀ NỘI - 5 / 2001 LỜI CAM ƠN Vói lòng kính trọng và biết ơn sâu sác nhốt, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới: PGS. TS. Bế Thị Thuẩn. Người tháy dỡ trục tiếp huóng dân, tận tình chỉ bảo và dành rát nhiều thòi gian giúp dỡ tôi trong suốt thòi gian thục hiện vò hoàn thành công trình tốt nghiệp. Tôi xin chôn thành cảm ơn TS. Chu Thị Lộc, TS. Nguyên Viết Thân, TS.ĐỖ Ngọc Thanh và các tháy cô giáo, các cán bộ bộ môn Dược liệu và bộ môn Vi sinh — Kháng sinh đỡ giúp đ ỡ , tạo diêu kiện thuận lợi cho tôi hoàn thành dề tài tốt nghiệp. Hà Nội ngày 15 tháng 05 nám 2001. Sinh viên Vũ Thị Thu Hương. MỤC LỤC Trang Phần I: Đặt vấn đề 1 Phần II: Tổng quan 2 2.1 Đặc điểm thực vật 2 2.2 Trồng trọt 3 2.3 Bộ phận dùng, phương pháp thu hái, chế biến 4 2.4 Thành phần hoá học 5 2.5 Tác dụng và công dụng 6 Phần III: Thực nghiêm và kết quả 8 3.1 Nguyên liệu và phương pháp thực nghiệm ' 8 3.2 Kết quả thực nghiệm và nhận xét 9 3.2.1 Định lượng tinh dầu trong quả Bạch chỉ 9 3.2.2 Đặc điểm bên ngoài của quả Bạch chỉ 9 3.2.3 Thành phần hoá học 10 3.2.4 Chiết tách, phân lập định tính Coumarin 18 3.2.5 Thử tác dụng kháng khuẩn in vitro 28 Phần IV: Kết luận và nhận xét 33 Tài liệu tham khảo 34 PHẦN I ĐẶT VẤN ĐỂ Ngày nay cùng với sự phát triển của khoa học và y học hiện đại, việc sử dụng rộng rãi các vị thuốc cổ truyền không những hoàn toàn chỉ dựa vào kinh nghiệm dân gian, mà còn dựa trên cơ sở khoa học đã được chứng minh bằng những thành phần hoá học và tác dụng sinh học của chúng. Bạch chỉ là rễ đã phơi hoặc sấy khô của câv Hàng châu Bạch chỉ - Angelica dahurica (Fisch.), Benth. et Hook, và cây Xuyên Bạch chỉ - Angelica anomaỉa Lallem họ (Apiaceae), là vị thuốc cổ truyền được sử dụri2 làm thuốc siảm đau, hạ sốt, chữa tràng nhạc, viêm tuyến vú, nsạt mũi, viêm mũi chảy nước hôi, mụn nhợt chốc lở Thành phần hoá học và tác dụns sinh học của rễ Bạch chí đã được nhiều tác 2Íả trong và ngoài nước nghiên cứu. Ngoài bộ phận dùnơ là rễ ra, chúng tôi thấy quả Bạch chí cũng là nsuồn nsuyên liệu rất phong phú. nhưng chưa được sử dụns rộnơ rãi. Tài liệu trons và ngoài nước viết về quả Bạch chỉ cho tới nay hầu như còn rất hiếm. Chúng tòi mới chỉ thấy một tài liệu duy nhất, đó là quyển "Những Coumarin và Furocoumarin tự nhiên” của ‘viết về sự có mật của Byak- angelicin trong quả của câv Angelica dahurica. Với mong muốn 2Óp phần tìm nguồn nguyên liệu làm thuốc từ nhữnơ dược liệu sẵn có trong nước, chúns tôi bước đầu tiến hành sơ bộ nghiên cứu quả cây Bạch chi di thực ở Việt Nam-với những mục tiêu sau: - Định tính phát hiện một số hợp chất tự nhiên. - Định lượng thành phần hoá học chính. - Chiết xuất, phân lập, tinh chế, phân tích và sơ bộ nhận dạn2 chất phân lập được. - Thử tác dụng kháng nấm, kháng khuẩn của dịch chiết quả và thành phần hoá học chính có trong quả. 1 PHẦN II TỔNG QUAN 2.1. Đặc điểm thực vật: Ớ Việt Nam hiện nay chính thức có hai loài cùng cho vị thuốc Bạch chỉ là Hàng châu Bạch chỉ - Angelica dahurica(Fisch.), Benth.et Hook, và Xuyên Bạch chỉ- Angelica anomala Lallem họ Hoa tán Ápiaceae [9]. Cả hai loài trên có nguồn gốc từ Tứ Xuyên - Trung Quốc, đã được di thực vào nước ta từ năm 1960. Cây Bạch chỉ thích nghi và phát triển tốt ở đồng bằng và miền núi phía Bắc nước ta [7]. Theo Đỗ Tất Lợi [9] và Trần Thuý Nga [11], cây Hàng châu Bạch chỉ là cây sống lâu năm, cao 1 - l,5m, đường kính thân có thể tới 2- 3cm. Thân rỗng, mặt ngoài có gờ dọc, gốc màu tím hồng, trên màu xanh lục hoặc toàn thân xanh lục. Phía dưới thân nhẵn, không có lông, nhưng phía trên gần cụm hoa thì có lông ngắn. Lá phía dưới to, có cuống dài, phiến lá 2-3 lần xẻ lông chim, thuỳ hình trứng hoặc hình trứng dài, mép có răng cưa. Mặt trên lá màu xanh lục thẫm, mặt dưới màu xanh lục nhạt. Hai mặt lá đều không có lông nhưng trên đường gân của mặt trên có lông che chở đơn hoặc đa bào. Lá phía trên nhỏ hơn, toàn bộ cuống lá phát triển thành bẹ bao ôm lấy thân. Bề mặt bẹ có gờ nhỏ, không có lông. Cụm hoa hình tán kép, mọc ở kẽ lá hay đầu cành, có 1-2 lá bắc phình to dạng túi, bề mặt lông ngắn. Mỗi tán có 22 đến 26 tán đơn, chiều dài không đều. Cuống tán nhỏ dài. Hoa màu trắng, đều lưỡng tính, mẫu 5. Quả bế đôi, cuống treo không có lông. Đỉnh quả có dấu vết đĩa tuyến mật và vòi nhuỵ. Quả hình bầu dục, gốc quả lõm hình thận, 2 gờ vai nhô lên ít, rộng hơn gốc, gờ lưng tù tròn, đầy, rộng hơn rãnh. Hai cạnh bên quả dạng cánh, mép cánh nhăn nheo không có lông. Hạt hình trứng, đầu trên nhọn, vỏ nâu đen. Mặt bụng hạt có đường gờ trắng đứt đoạn nối liền với cuống hạt. 2 Cây Xuyên Bạch chỉ là cây sống lâu nãm, thường cao hơn cây Hàng châu Bạch chỉ (cây cao tới 2-3m), đường kính thân nhỏ hơn, chỉ khoảng lcm, toàn thân màu xanh lục, phủ một lớp lông mịn. Lá có thuỳ mang cuống rõ rệt. Cụm hoa cũng hình tán kép, nhưng mỗi tán kép mang nhiều hoa hơn, thường từ 24- 36 tán đơn. Quả có 2 gờ vai nhô hẳn lên, rộng bằng gốc quả, gờ lưng nhọn, hẹp, nhỏ hơn rãnh. Các đặc điểm khác gần giống Hàng châu Bạch chỉ. Ảnh 1: Cây Bạch chỉ di thực - ảnh chụp tại xã Vạn Phúc-Thanh Trì-Hà Nội. 2.2. Trồng trọt : Theo Ngô Vân Thu [1], cây Bạch chỉ di thực được trồng ở một số tỉnh miền Bắc nước ta hiện nay chính là Angelica dahurica (Fisch.ex Hoffm.) Benth. et Hook.f. và Angelica dahurica (Fisch.ex Hoffm.)Benth. et Hook, f.var.formosana (Boiss) Shan et Yuan, họ hoa tán (Apiacae). Cây mọc tốt ở cả đồng bằng lẫn miền núi. Hạt giống thu hoạch ở cây mọc hai năm , giữ cây giống ở vùng có khí hậu mát như Tam Đảo. Gieo hạt vào tháng 10, 11. Bạch chỉ là cây ăn rễ sâu, cần cày sâu, bừa kỹ. Đánh luống, gieo hốc, mỗi hốc 10 - 3 15 hạt, tưới nước, vì hạt thích ẩm. Khi cây cao 20 - 30 cm thì tỉa bớt còn vài ba cây ở mỗi hốc. Cần làm cỏ bón phân khi lá chưa phủ hết mặt luống. Nếu có bệnh đốm đen (trên lá có đốm đen) thì hái lá đốt đi hoặc phun dịch Bordeaux. Nếu có sâu bọ nhiều thì dùng thuốc trừ sâu để phun. Ảnh 2: Bạch chỉ mùa thu hoạch tại xã Vạn Phúc-Thanh Trì-Hà Nội 2.3. Bộ phận dùng, phương pháp thu hái, chê biến: Bộ phận dùng của Bạch chỉ là rễ củ của cả hai loài. Vào mùa thu, khi trời khô ráo, đào lấy rễ, cắt bỏ thân và rễ con, rửa sạch đất, để ráo nước, cho vào lò xông sinh một ngày đêm rồi đem phơi hoặc sấy. Khi khô xông sinh lần nữa [ 1]. Theo sổ tay trung dược tễ [11], có thể chế biến Bạch chỉ theo phương pháp sau: Bạch chỉ khô đã sơ chế, rửa sạch, để ráo nước, cho vào nồi nhôm hai lớp, thêm rượu 15°, chưng cách thuỷ trong 8 giờ đến khi mềm không còn chảy nước. Cho ra khay, sấy ở 60°-70°C cho đến khô. Dược điển Việt Nam I tập 2 [4] và Dược điển Việt Nam II tập 3 [5] đã mô tả về hình thái vị thuốc: rễ nguyên, ít khi phân nhánh, hình chuỳ thẳng 4 hoặc cong queo. Rễ của loài Angelica, dahurica có thiết diện gần như vuông trong khi rễ của loài Angelica anomala có thiết diện gần tròn. Rễ dài 5-25cm, đường kính từ 0,5 cm trở lên. Mùi thơm hắc. Đầu rễ phía trên to và còn vết tích của thân cây, phía dướỉ thuôn nhỏ dần. Mặt ngoài màu vàng nâu có vết tích của rễ con đã cắt bỏ, có nhiều nếp nhăn xếp thành 4 hàng dọc, nhiều bì khổng lồi nổi lên thành những vết sần ngang. Mặt cắt ngang màu trắng đến trắng ngà, nhiều bột, tầng sinh libe-gỗ rõ rệt là một vòng màu nâu, mỏng như sợi chỉ. Phần vỏ có nhiều đám màu nâu là các ống tiết tinh dầu bị cắt ngang. Rễ có thể chất cứng chắc, đầu phía trên khó bẻ, vết bẻ lởm chởm, nhiều bột. Đặc điểm vi học của cả hai loài tương tự giống nhau. Vi phẫu rễ cắt ngang có cậc đặc điểm: mô mềm vỏ có khuyết, nhiều ống tiết nằm chủ yếu trong phần libe [1]. 2. 4. Thành phần hoá học: Nhiều tài liệu trong nước và nước ngoài đều công bố trong Bạch chỉ có chất nhựa , tinh bột, tinh dầu và các dẫn chất Coumarin. 2.4.1. Tinh dầu: Các tài liệu [1,9] đều đề cập đến sự có mặt của tinh dầu trong dược liệu, nhưng không thấy nêụ hàm lượng cũng như thành phần của tinh dầu.Trong sách “Những cây tinh dầu Việt nam” [8] có ghi trong tinh dầu của Xuyên Bạch chỉ có:a-pinen. mycren, |3- xymen. Còn trong tinh dầu Hàng châu Bạch chỉ, ngoài ba chất trên còn có: camphen, Ị3- pinen, a- phelandren, A3- caren, a- terpinen, p- phelandren, terpinolen, 4-vinylgmicol, izoelimicin, p-elemen, caryophylen, ligustilit, osthol. 2.4.2 Coumarin: Đây là thành phần được nghiên cứu nhiều hơn trong các hợp chất tự nhiên của Bạch chỉ. Theo Ngô Văn Thu [1], trong rễ Angelica dahurica có các chất: Scopolethin, Byak-angenlicol, oxypeucedanin, Imperatorin, isoimperatorin, phelloptenrin, Xanthotoxih, anhydrobyak-angelicin, 5 Neobyak-angelicol, Macmezin. Các tác giả Trung Quốc [17] còn công bố về sự có măt của các chất Heptatriacontane, Bergapten, Bergaptol, Nodakenin. Robin Witt và cộng sự [16] đã nêu phương pháp phân lập các chất Coumarin, 5,8-di (2,3-dihydroxy-3-methlbutoxyl) Psoralen từ rễ Angelica dahurica. Còn trong Angelica anomala có Byak-angelicol, byak-angelicin, Bergapten Umbeliferon, Anomalin, Ageomalin, Angelicontonxin và acid Angelic [6,9], Trong quả của Angelica dahurica có byak-angelicin [19]. Theo Đàm Hương Huyền [7], trong rễ Bạch chỉ di thực có: Tinh dầu, Coumarin, Flavonoid, phytosterol, chất béo, trong đó Coumarin và tinh dầu là chủ yếu. 2. 5. Tác dụng và công dụng: Theo Dược thư Trung Quốc 1998 [14], Bạch chỉ được xếp vào nhóm thuốc giảm đau, hạ sốt, kháng khuẩn, chống viêm. Theo quan niệm của y học cổ truyền Việt Nam thì Bạch chỉ có tác dụng phát biểu khứ phong, thẩm thấp, hoạt huyết, bài nùng, sinh cơ, giảm đau, làm huyết trong toàn thân vận chuyển nhanh chóng, thư gân, ra mồ hôi, dùng chữa cảm‘sốt, nhức đầu (đặc biệt vùng trán), ngạt mũi do bị lạnh, đau răng. Dùng ngoài chữa sưng vú, tràng nhạc, ghẻ lở, giảm đau, hút mủ [9,12]. Về tác dụng sinh học, chúng tôi ít thấy tài liệu nghiên cứu về tác dụng của Bạch chỉ với tự cách là 1 vị thuốc cổ truyền mà đa số nghiên cứu về tính chất và tác dụng của cao Bạch chỉ, các hợp chất Coumarin phân lập được từ dược liệu. Phạm Duy Mai và cộng sự [10] đã công bố về tác dụng giảm đau nội tạng, tác dụng kháng khuẩn rõ rệt của cao lỏng Bạch chỉ đối với các chủng Diplococcus pneumonia, Streptococcus hemolyticus, Staphilococcus aureus, Bacilus subtilis. Các tác giả Nhật Bản [18] đã xác định được nồng độ ức chế tối thiểu của 5,8-di - (2,3-dihydroxy-3-methyl butoxyl) Psoralen, Isoimperatarin, Imperatorin, Phellopterin, Byak-angelicin, Scopolethin phân lập từ rễ Angelica dahurica đối với các chủng Bacilus subtilis, E.coli, Cladosporium herbarum, Aspergilus Candidas. Năm 1999, Đàm Hương 6 Huyền và cộng sự [13] đã thử một số tác dụng dược lý của nước sắc (1:1) Bạch chỉ di thực. Kết quả cho thấy: - Với liều 2,5g/kg, chế phẩm có tác dụng chống viêm trên chuột cống trắng sau 24 giờ. - Vói liều 0,3g/kg, chế phẩm có tác dụng chống đông máu trên thỏ. - Dung dịch chế phẩm ở nồng độ 2 % trong dung dịch Ringer tim làm giảm biên độ co bóp cơ tim ếch cô lập. - Với liều 0,3g/kg, chế phấm gây hạ huyết áp thỏ 30 phút sau khi uống. Ngoài ra, chế phẩm không làm thay đổi nhịp tim ếch tại chỗ, không gây giãn cơ trơn mạch máu tai thỏ cô lập và dung dịch chế phẩm ở nồng độ 0,1% trong dung dịch Tyrode không ảnh hưởng đến nhu động ruột thỏ. Đối với quả Bạch chỉ, ngoài tài liệu [19] ra cho đến nay chúng tôi chưa thấy tài liệu nào công bố về thành phần hoá học cũng như về tác dụng và công dụng của nó. Một số địa phương ở miền Bắc Việt Nam, người ta vẫn dùng quả Bạch chỉ để làm thuốc chống viêm, nhất là bệnh viêm mũi, viêm xoang theo kinh nghiệm dân gian. 7 [...]... 7: Tác dụng của tinh dầu trên vi khuẩn Staphylococcus aureus ATCC 12228 Ảnh 8: Tác dụng kháng khuẩn của tinh dầu trên Proteus mirabilis BV 108 Qua kết quả thu được chúng tôi thấy cả tinh dầu và Coumarin trong quả Bạch chỉ đều có tác dụng kháng khuẩn, kháng nấm Candida albicans và có thể nồng độ chất càng cao thì tặc dụng kháng khuẩn ,kháng nấm càng mạnh 32 Bâng 4: Kết quả thử tác dụng kháng khưẩn của. ..P H Ẩ N III THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ % 3.1 Nguyên liệu và phương pháp thực nghiệm: 3.1.1 Nguyên liệu: Nguyên liệu nghiên cứu là quả già đã được phơi khô của cây Bạch chỉ di thực thu hái tại xã Vạn Phúc, huyện Thanh Trì, Hà Nội vào tháng 7 năm 1999 3.1.2 Phương pháp thực nghiệm: * Lấy mẫu mô tả quả của cây Bạch chỉ * Nghiên cứu về hoá học • Định lượng tinh dầu bằng phương pháp... rõ rệt (bảng 4, ảnh 6) Ảnh 6: Kết quả thử tác dụng kháng nấm của các chế phẩm từ quả Bạch chỉ - Tinh dầu [M6] và cao cồn [M7, M J đều có hoạt phổ tác dụng rộng trên cả vi khuẩn gram (+) và vi khuẩn gram (-) Đặc biệt các chế phẩm thử đều có tác dụng tốt với loài s.flexneri DT 112 (ảnh 7, ảnh 8, bảng4) - Các chế phẩm thử Mj, M2, M3, M4, M5 chỉ có tác dụng với một số vi khuẩn Điều này có lẽ do nồng độ chất... kim, mầu vàng nhạt, o Điểm chảy: 124°C-125°C o Phổ tử ngoại có các đỉnh hấp thụ ở Àm a, 222nm 247nm , , 275nm ,314nm ' 3.2.5 Thử tác dụng kháng khuẩn in vitro: Tác dụng kháng khuẩn của quả Bạch chỉ được xác định bằng phương pháp khuyếch tán trong mối trường đặc Khả năng kháng khuẩn được biểu thị bằng đường kính vòng ức chế vi sinh vật kiểm định của các chế phẩm thử • Vi sinh vật kiểm định: Vi khuẩn Gram... - Trường Đại học Dược Hà nội • Đo phổ hổng ngoại (IR) trên máy 1650-Perkin Elmer (USA) tại phòng thí nghiệm trung tâm - Trường Đại học Dược Hà nội • Độ ẩm của dược liệu đo trên máy Satorius tại phòng thí nghiệm trung tâm - Trường Đại học Dược Hà Nội • Nghiên cứu tác dụng kháng khuẩn và kháng nấm in vitro tại Bộ môn vi sinh -kháng sinh trường Đại học Dược Hà nội 8 3.2 Kết quả thực nghiệm và nhận xét 3.2.1... Kết quả cho thấy hàm lượng tinh dầu trong quả Bạch chỉ khô tuyệt đối là 1,56% (Bảng 1) Bảng 1: Hàm lượng tinh dầu trong quả Bạch chỉ Mẫu 1 Mẫu 2 Mẫu 3 Lượng dược liệu (g) 20,00 20,00 20,00 Thể tích tinh dầu (ml) 0,28 0,25 0,29 Hàm lượng tinh dầu (%) 1,60 1,43 1,66 1,56 Trung bình (%) 3.2.2 Đặc điểm bên ngoài của quả Bạch chỉ: Quả bế đôi, cuống treo không có lông Đỉnh quả có dấu vết đĩa tuyến mật và. .. sẵn Để hộp petri ở nhiệt độ khoảng 20°c trong 2-3 giờ cho hoạt chất khuếch tán 30 Kết quả được xác định bằng cách đo đường kính vòng vô khuẩn sau 1824 giờ nuôi cấy ở nhiệt độ từ 35-37°C (đối với vi khuẩn) và 28-30°C (đối với nấm) Qua kết quả thử chúng tôi nhận thấy: -Tất cả các loại chế phẩm thử đều có tác dụng kháng nấm Candida albicans, trong đó tinh dầu [M6] và cao cồn [M7] có tác dụng rõ rệt (bảng... mật và vòi nhuỵ Quả hình bầu dục, gốc quả lõm hình thận, hai gờ vai nhô lên 9 / ít, rộng hơn gốc, gờ lưng tù, tròn, đầy, rộng hơn rãnh Hai cạnh bên quả dạng cánh, mép cánlì nhăn nheo không có lông Hạt hình trứng, đầu trên nhọn, vỏ mầu nâu đen, mật bụng hạt có đường gò' trắng, đút đoạn nối liền với cuống hạt Ánh 3: Quả của cây Bạch chỉ di thực Đối chiếu với những đặc điểm của quả Bạch chỉ được mô lá... chúng tôi thấy mẫu quả nghiên cứu của chúng tồi có những đặc điểm giống quả của cây Hàng châu Bạch chỉ Angelica dahurica (Fisch.),Benth et Hooli 3.2.3 Thành phần hoá học: * Định tính l sô nhóm chất tự nhiên trong dược liệu bằng các phản úng hoá hục [1,2,6] ♦> Định tính Phytosterol : 10 cắn bằng 0,5ml anhydrid acetic, lắc đều Đặt nghiêng ống 45°, cho thêm 0,5 ml acid sulfuric đặc theo thành ống nghiệm... Coumarin trong quả Bạch chỉ: * Định tính Coumarin toàn phần bằng SKLM [1,6 ]: Kết quả của những phản ứng hoá học cho chúng tôi thấy trong dịch chiết cồn của quả Bạch chỉ có Coumarin là thành phần hoá học chính Để sơ bộ xác định thành phần Coumarin trong dịch chiết, chúng tôi dùng SKLM với bản mỏng Silicagel tráng sẵn và khai triển sắc ký trong 3 hệ dung môi: Hệ I: Cloroform : Methanol [9 : 1] Hệ II: . TRƯỜNG ĐẠI HỌC Dược HÀ NỘI lyj VŨ THỊ THU HƯƠNG NGHIÊN CỨU THÀNH PHẦN HOÁ HỌC VÀ TÁC DỤNG KHÁNG KHUAN c ủ a q u ả c â y b ạ c h CHỈ DI THỰC Ở VIỆT NAM (KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP Dược sĩ ĐẠI HỌC KHOÁ. chế biến 4 2.4 Thành phần hoá học 5 2.5 Tác dụng và công dụng 6 Phần III: Thực nghiêm và kết quả 8 3.1 Nguyên liệu và phương pháp thực nghiệm ' 8 3.2 Kết quả thực nghiệm và nhận xét 9 3.2.1. trong quả Bạch chỉ 9 3.2.2 Đặc điểm bên ngoài của quả Bạch chỉ 9 3.2.3 Thành phần hoá học 10 3.2.4 Chiết tách, phân lập định tính Coumarin 18 3.2.5 Thử tác dụng kháng khuẩn in vitro 28 Phần IV: