Nghiên cứu đánh giá ảnh hởng của ánh sáng, nhiệt độ và oxy không khí đến độ ổn định của Rotundin sulfat Ngời hớng dẫn: TS. Nguyễn Minh Chính Đỗ Thế Khánh Đặt vấn đề - Thuốc an thần, gây ngủ có vai trò quan trọng và có nhu cầu lớn. Thuốc nguồn gốc hoá dợc có nhiều tác dụng không mong muốn đang đợc khuyến cáo hạn chế sử dụng. Việc tìm các hợp chất tự nhiên: an thần, gây ngủ đợc quan tâm. - ở Việt Nam, Rotundin (L-tetrahydropalmatin), alcaloid từ củ bình vôi đã đợc dùng để sản xuất các dạng thuốc đờng uống. - Gần đây, Học viện quân y: Tinh chế Rotundin từ đó điều chế Rotundin sulfat (RS) làm nguyên liệu pha chế thuốc tiêm và thuốc đờng uống nhằm nâng cao hiệu quả điều trị. - Thuốc tiêm RS có tác dụng tơng tự Diazepam. - RS dễ bị tác động bởi: ánh sáng, nhiệt độ, oxy không khí và cần chế độ bảo quản phù hợp. - Vấn đề cần thiết: Làm rõ mức độ ảnh hởng của các yếu tố trên đối với RS điều kiện bảo quản cho RS. Đây là cơ sở để sử dụng lâu dài, pha chế thuốc tiêm và các dạng thuốc khác: chất lợng và hiệu quả điều trị cao hơn. - Đề tài nhằm mục tiêu: 1. Nghiên cứu đánh giá mức độ ảnh hởng của ánh sáng, nhiệt độ và oxy không khí đến độ ổn định của RS. 2. Xác định điều kiện bảo quả cho RS: bao bì đóng gói, nhiệt độ, ánh sáng, không khí. PhÇn 1 – tæng quan 1.1. Vµi nÐt vÒ c©y b×nh v«i (Stephania Lour - Menispermaceae): C©y d©y leo, rÔ cñ, ph©n bè, loµi, h×nh th¸i, thµnh phÇn, hµm lîng, sö dông trong d©n gian. ¶nh 1: C©y b×nh v«i (Stephania glabra (Roxb) – Menispermaceae) - S¶n xuÊt. - §Æc ®iÓm vËt lý: Kh«ng tan trong níc. - ChÕ phÈm. CTPT: C 21 H 25 NO 4 CTCT: KLPT: 355,43. 1.2. Rotundin (L-tetrahydropalmatin) vµ Rotundin sulfat: 1.2.1. Rotundin (L-tetrahydropalmatin): OCH 3 N CH 3 O OCH 3 OCH 3 1.2.2. Rotundin sulfat (RS): CTPT: C 21 H 25 NO 4 . H 2 SO 4 CTCT: KLPT: 453,51 . HSO 4 - OCH 3 N OCH 3 OCH 3 H CH 3 O + -Thông số hoá lý: Tinh thể, trắng, dễ tan trong nớc, t 0 C : 213 - 2210 C ; [a] 25 D -210; pH: 1,5 - 2,5; Hàm lợng: 98,0 101,0%. - Nguyên tắc điều chế (HVQY - 2001). Rotundin + Acid sulfuric Muối Rotundin sulfat - Đặc điểm quan trọng : Tan đợc trong nớc ý nghĩa. 1.3. Các thông số lý, hoá cơ bản của dợc chất cần thiết cho nghiên cứu: -Cấu trúc hoá học. - Dạng thù hình. - Độ tan, độ trong và màu sắc dd. - t 0 -[a] 25 D - pH. - Tạp chất và tạp chất liên quan. - Phổ hấp thụ: Các thông số trên cơ sở cho quá trình xây dựng, phơng pháp kiểm nghiệm, xác định độ ổn định của dợc chất và các thành phẩm chứa nó. 1.4. Độ ổn định của thuốc và các yếu tố thờng gặp ảnh hởng đến độ ổn định của thuốc: 1.4.1. Độ ổn định của thuốc và cách xác định: -Định nghĩa. - Đánh giá. - Trong phạm vi đề tài: quan tâm đánh giá độ ổn định của R.S dựa vào các chỉ tiêu lý, hoá. - Nghiên cứu độ ổn định: nhiều phơng pháp, nguyên tắc: thuốc đợc bảo quản trong những điều kiện nhất định, sau từng thời gian xác định lại chất lợng thuốc theo các chỉ tiêu đã đặt ra. - Điều kiện bảo quản : điều kiện thông thờng và điều kiện khắc nghiệt. - Một trong những mục đích chính của việc thử độ ổn định là : xác định điều kiện bảo quản để phát triển sản xuất và nâng cao tuổi thọ của thuốc. 1.4.2. Các yếu tố thờng gặp ảnh hởng đến độ ổn định của thuốc: 2 loại: YT nội tại và YT thuộc về điều kiện bảo quản . Các YT thuộc về điều kiện bảo quản: - t 0 . - AS. - Oxy không khí. Nghiên cứu các yếu tố trên cơ sở cho việc lựa chọn phơng pháp xác định độ ổn định, đồ bao gói và điều kiện bảo quản nguyên liệu làm thuốc. Phần 2 vật liệu và phơng pháp nghiên cứu 2.1. Nguyên vật liệu, đối tợng và thiết bị: 2.1.1. Nguyên liệu: Rotundin sulfat pha tiêm (đạt TCCS - HVQY). 2.1.2. Hoá chất, thuốc thử và dung môi: 2.1.3. Trang thiết bị và dụng cụ nghiên cứu: 2.2. Phơng pháp nghiên cứu: 2.2.1. Nghiên cứu ảnh hởng của ánh sáng đối với Rotundin sulfat: Mẫu: 5,0 g R.S (TCCS) trong lọ thuỷ tinh không màu, nút kín. SL: 6, của 2 lô khác nhau. Điều kiệnTN: Đặt trong hộp giấy , đợc chiếu sáng bởi đèn HQ 20W (24/24), k.cách 30 cm, t 0 = 25 2C; Độ ẩm tơng đối 90%. Thời gian TN: 60 ngày, bắt đầu TN, sau 15,30,45,60 ngày các mẫu đợc xác định các thông số đặc trng: Màu sắc, hình dạng t.thể, độ tan; độ trong và màu sắc dd 2%; pH dd1%; t C ; a D 25 ; tạp chất ; định tính; hàm lợng. Phơng pháp thử : - Tính chất: bằng cảm quan và thử độ hoà tan. - t 0 C : thử theo DĐVN III PL 5.19. - [a] 25 D : thử theo DĐVN III PL 5.13. - Tạp chất liên quan : thử = SKLM theo DĐVN III PL 4.4 và TCCS. - Định tính: p.p hoá học - theo TCCS. - Mất KL do làm khô: thử theo DĐVN III PL 5.16. - Độ trong và màu sắc dd: thử theo DĐVN III PL 5.12, 5.17 và TCCS. - pH : thử theo DĐVN III PL 5.9. - Định lợng : p.p quang phổ hấp thụ tử ngoại khả kiến (theo DĐVN III PL 3.1 và TCCS). 2.2.2. Nghiên cứu ảnh hởng của nhiệt độ đối với Rotundin sulfat: Mẫu: 5,0g RS trong lọ thuỷ tinh không màu, nút kín; SL: 6 mẫu (của 2 lô); Mỗi nhóm (6 mẫu) đợc đặt ở một t 0 : 25 2 C, 40 2 C. Đk TN: Tránh AS, độ ẩm 90%. Thời gian TN : 60 ngày; bắt đầu TN, sau 15, 30, 45, 60 ngày các mẫu đợc xác định các thông số đặc trng (mục 2.2.1). 2.2.3. Nghiên cứu ảnh hởng của oxy không khí đối với Rotundin sulfat: Mẫu: 5,0g RS trong hộp petri, không đậy nắp (tiếp xúc oxy kk). SL: 6, của 2 lô; Đk TN : tránh AS, t 0 TN: 25 2C, độ ẩm 90%; bắt đầu TN sau 15, 30, 45, 60 ngày xác định các thông số đặc trng (mục 2.2.1). 2.2.4. Nghiên cứu xác định điều kiện bảo quản Rotundin sulfat: Mẫu chứng: 5,0g R.S trong lọ thuỷ tinh không màu, nút kín; SL: 6 mẫu, của 2 lô sản xuất khác nhau. ĐkTN: tránh ánh sáng, t 0 TN: 15 2C, độ ẩm 90%, bắt đầu TN, sau 15, 30, 45, 60 ngày xác định các thông số đặc trng (mục 2.2.1). Tổng hợp kết quả, áp dụng TKTH: X, SD, kiểm định t . Xử lý số liệu tại Bộ môn Toán tin - HVQY. Phần 3 kết quả và bàn luận 3.1. Kết quả nghiên cứu ảnh hởng của AS đến độ ổn định của RS: Bảng 3.1.1, 3.1.2, 3.1.3, 3.1.4 và đồ thị 1. Bảng 3.1.1: ảnh hởng của AS đến Rotundin sulfat (Lô 1) Chỉ tiêu TG (ngày) Hình dạng, màu sắc tinh thể, độ tan Độ trong, màu sắc dd 2% pH dd1% t o C Tạp chất Định tính Hàm lợng (%) 0 TThể, trắng dễ tan T Suốt, không màu 2,1 0,1 228 1,2 218,7 0,8 - Đúng 99,9 0,2 15 TThể, hơi vàng, dễ tan T Suốt, ánh vàng 2,2 0,1 228 1,5 218,3 1,5 - Đúng 99,8 0,1 30 TThể, vàng nhạt, dễ tan T Suốt, vàng nhạt 2,1 0,1 227 1,2 218,3 0,8 - Đúng 99,6 0,2 45 TThể, vàng đậm, dễ tan T Suốt, đậm hơn màu VL 5 2,2 0,1 227 1,2 218,3 0,9 - Đúng 99,3 0,1 60 TThể, vàng đậm, dễ tan T Suốt, đậm hơn màu VL 5 2,1 0,1 226 1,0 217,5 1,5 - Đúng 99,2 0,2 Bảng 3.1.2: ảnh hởng của AS đến Rotundin sulfat (Lô 2) Chỉ tiêu TG (ngày) Hình dạng, màu sắc tinh thể, độ tan Độ trong, màu sắc dd 2% pH dd1% t o C Tạp chất Định tính Hàm lợng (%) 0 TThể, trắng dễ tan T Suốt, không màu 2,1 0,1 228 1,2 218,3 1,3 - Đúng 99,8 0,1 15 TThể, hơi vàng, dễ tan T Suốt, ánh vàng 2,2 0,1 228 1,5 218,3 0,5 - Đúng 99,7 0,1 30 TThể, vàng nhạt, dễ tan T Suốt, vàng nhạt 2,2 0,1 227 1,2 217,7 1,3 - Đúng 99,5 0,2 45 TThể, vàng đậm, dễ tan T Suốt, đậm hơn màu VL 5 2,2 0,1 227 1,2 216,8 1,5 - Đúng 99,3 0,1 60 TThể, vàng đậm, dễ tan T Suốt, đậm hơn màu VL 5 2,1 0,1 226 0,6 217,2 0,8 - Đúng 99,1 0,2 [a] 25 D [a] 25 D [...]... 2 lô khác nhau không có ý nghĩa thống kê (P < 0,01) KQ cho thấy: R.S dễ bị ảnh hởng bởi AS AS gây biến đổi màu sắc tinh thể, dd 2% và hàm lợng mẫu Do đó cần tránh AS tối đa trong quá trình bảo quản R.S 3.2 Kết quả nghiên cứu ảnh hởng của nhiệt độ đến độ ổn định của RS: KQ nghiên cứu ảnh hởng của nhiệt độ cao (40 2C) dến R.S: Bảng 3.2.1, 3.2.2 và đồ thị 2 Bảng 3.2.1 :ảnh hởng của 40 2C đến R.S (Lô 1)... quả nghiên cứu ảnh hởng của oxy không khí đến độ ổn định của RS: Bảng 3.3.1, 3.3.2 và đồ thị 3 Bảng 3.3.1: ảnh hởng của Oxy không khí đến R.S (Lô 1) Chỉ tiêu Hình dạng, màu sắc TG ngày) tinh thể, độ tan Độ trong, màu sắc dd 2% pH dd1% [a]25D to C Tạp chất Định tính Hàm lợng (%) 0 TThể, trắng, dễ tan T Suốt ,không màu 2,1 0,1 228,0 1,3 218,0 1,2 - Đúng 99,8 0,1 15 TThể, trắng, dễ tan T Suốt, không. .. hởng của AS, nhiệt độ và oxy không khí đến độ ổn định của RS: - AS, t0 và oxy KK đều có ảnh hởng, mức độ khác nhau đến R.S - AS có tác động rõ rệt đến Đ.Ô.Đ của R.S, gây biến đổi nhanh hơn cả nhất là về màu sắc tinh thể, dd 2% và hàm lợng mẫu TG chiếu sáng càng lâu, sự chuyển màu càng mạnh Sự tơng quan giữa thời gian chiếu sáng và giảm hàm lợng mẫu là rất chặt chẽ (r1 = - 0,985 và r2 = - 0,948), với... thị 3: Hàm lợng RS trung bình của các mẫu dới ảnh hởng của oxy không khí KQTN cho thấy: Oxy KK có ảnh hởng đến Đ.Ô.Đ của R.S gây biến đổi màu sắc tinh thể, dd 2% và hàm lợng mẫu r1 = - 0,447 (lô 1) và r2 = - 0,581 (lô 2) sự thay đổi hàm lợng cha có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) 3.4 Kết quả nghiên cứu bảo quản mẫu chứng: Bảng 3.4.1, 3.4.2 và đồ thị 4 Bảng 3.4.1: Nghiên cứu bảo quản mẫu chứng (Lô 1) Chỉ... 2: Hàm lợng R.S trung bình của các mẫu dới ảnh hởng của 40 2C KQTN cho thấy : t0 cao (40 2C) có ảnh hởng đến Đ.Ô.Đ của R.S, gây biến đổi màu sắc tinh thể, dd 2% và hàm lợng mẫu r1 = - 0,577 (lô 1) và r2 = - 0,671 (lô 2), kiểm định t: sự giảm hàm lợng cha có ý nghĩa thống kê (P < 0,05) KQ nghiên cứu bảo quản R.S ở nhiệt dộ phòng (25 2C) : bảng 3.2.3, 3.2.4 Bảng 3.2.3: Nghiên cứu bảo quản R.S ở t0 phòng... tránh AS KQTN cho thấy: ở 15 2C, tránh ánh sáng Qua các đợt TN, các chỉ tiêu ánh giá có sự thay đổi không đáng kể Trên cả 2 lô, các mẫu giữ đợc các đặc tính lý, hoá (TCCS) 0.6 Abs 0.5 281.3 0.4 0.3 0.2 0.1 0.0 -0.1 220.0 240.0 260.0 280.0 300.0 320.0 340.0 360.0 380.0 400.0 nm Hình 1: Phổ tử ngoại của dung dịch Rotundin sulfat nồng độ 30l/ml Phần 4 kết luận 4.1 Kết luận: 4.1.1 ảnh hởng của AS, nhiệt. .. không màu 2,1 0,1 226,0 1,5 218,0 0,6 - Đúng 99,8 0,1 45 TThể, trắng, dễ tan T Suốt, không màu 2,1 0,2 227,0 1,2 218,3 0,5 - Đúng 99,7 0,1 60 TThể, hơi vàng, dễ tan T Suốt, ánh vàng 2,0 0,1 227,0 1,0 217,5 1,5 - Đúng 99,8 0,1 Bảng 3.3.2: ảnh hởng của Oxy không khí đến R.S (Lô 2) Chỉ Hình dạng, màu sắc TG tiêu tinh thể, độ tan (ngày) Độ trong, màu sắc dd 2% pH dd1% [a]25D to C Tạp chất Định. .. chẽ (r1 = - 0,985 và r2 = - 0,948), với P < 0,01 - t0 cao (40 2C) và Oxy KK: có ảnh hởng đến Đ.Ô.Đ của R.S gây biến đổi màu sắc tinh thể, dd 2% và hàm lợng mẫu, nhng không rõ rệt nh tác động của AS 4.1.2 Điều kiện bảo quản đối với Rotundin sulfat: - Bao bì đựng là lọ thuỷ tinh màu, nút kín hoặc túi thiếc có mặt trong tráng PE, tránh ánh sáng tối đa trong quá trình bảo quản cũng nh trong quá trình pha... 99,8 0,1 60 TThể, hơi vàng, dễ tan T Suốt, ánh vàng 2,1 0,1 227,0 0,6 218,5 0,6 - Đúng 99,8 0,1 Tạp chất Định tính Hàm lợng (%) TG (ngày) [a]25D to C Tạp chất Định tính Hàm lợng (%) Bảng 3.2.2 :ảnh hởng của 40 2C đến R.S (Lô 2) Chỉ Hình dạng, màu sắc TG tiêu tinh thể, độ tan ngày) Độ trong, màu sắc pH dd1% [a]25D dd 2% toC 0 TThể, trắng, dễ tan T Suốt, không màu 2,1 0,1 228,0 1,2 218,5 1,5 -... 30 TThể, trắng, dễ tan T Suốt, không màu 2,1 0,1 227,0 1,3 218,0 0,7 - Đúng 99,8 0,1 45 TThể, trắng, dễ tan T Suốt, không màu 2,2 0,1 227,0 1,2 218,3 0,6 - Đúng 99,8 0,1 60 TThể, trắng, dễ tan T Suốt, không màu 2,1 0,1 228,0 1,0 218,5 1,3 - Đúng 99,8 0,1 T Suốt, không màu KQTN cho thấy: ở 252C, tránh AS Qua các đợt TN, các chỉ tiêu ánh giá có sự thay đổi không đáng kể Trên cả 2 lô, các . Nghiên cứu ánh giá ảnh hởng của ánh sáng, nhiệt độ và oxy không khí đến độ ổn định của Rotundin sulfat Ngời hớng dẫn: TS. Nguyễn Minh Chính Đỗ Thế Khánh Đặt vấn đề - Thuốc an. Đề tài nhằm mục tiêu: 1. Nghiên cứu ánh giá mức độ ảnh hởng của ánh sáng, nhiệt độ và oxy không khí đến độ ổn định của RS. 2. Xác định điều kiện bảo quả cho RS: bao bì đóng gói, nhiệt độ, ánh. độ ổn định của dợc chất và các thành phẩm chứa nó. 1.4. Độ ổn định của thuốc và các yếu tố thờng gặp ảnh hởng đến độ ổn định của thuốc: 1.4.1. Độ ổn định của thuốc và cách xác định: -Định nghĩa. -