BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI ĐOÀN HẠNH DUNG XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG MỘT SỐ HÓA CHẤT BẢO VỆ THỰC VẬT TRONG DƯỢC LIỆU KHÔ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI - 2014 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI ĐOÀN HẠNH DUNG XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG MỘT SỐ HÓA CHẤT BẢO VỆ THỰC VẬT TRONG DƯỢC LIỆU KHÔ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: 1. ThS. Đặng Thị Ngọc Lan 2. ThS. Trần Cao Sơn Nơi thực hiện: Viện Kiểm Nghiêm An Toàn Vệ Sinh Thực Phẩm Quốc Gia HÀ NỘI - 2014 i LỜI CẢM ƠN Sau mt thi gian làm vic khc s  tn tình c     n bè, tôi     n t  Xác định dư lượng một số hóa chất bảo vệ thực vật trong dược liệu khô Bn khóa lun c thc hin và hoàn thành ti Vin kim nghim an toàn v sinh thc phm Quc gt H - Hà Ni vi s ng dn ca Th.s ng Th Ngc Lan và Th.S Tr Vi lòng kính trng và bic, em xin trân trng cng Th Ngc Lan ng d em hoàn thành bn khóa lun tt nghip này. c bit, em xin chân thành cTh.S Tr tài và nhit  em trong sut quá trình thc hin khóa lun. t sc c, nhni làm vic ti Vin kim nghim an toàn v sinh thc phm Quc gia em trong thi gian thc hin khóa lun Cui cùng, tôi xin gi li bic bit là b m và li cn bn bè, là ngun ng lc không th thiu, luôn bên cnh giúp  tôi sut thc và trong sut quá trình thc hin khóa lun. Hà N Sinh viên Đoàn Hạnh Dung ii MỤC LỤC LI CM  i MC LC ii DANH MC CÁC KÝ HIU, CÁC CH VIT TT v DANH MC CÁC BNG vii DANH MC CÁC HÌNH V TH viii T V 1 CNG QUAN N TÀI 2 1.1. Gii thiu v hóa cht bo v thc vt 2 1.1.1. Khái nim hóa cht bo v thc vt 2 1.1.2. Nhóm Clo h 3 1.1.3. Nhóm lân h 3 1.1.4. Nhóm carbamat 4 1.1.5. Nhóm Pyrethroid. 4 1.1.6. Nhóm Neonicotinoid 4 1.2. Mng tc liu 5 nh hoá cht bo v thc vt 6 n thng 6  7 1.4. K thut sc ký lng khi ph 10 1.4.1. Nguyên tc chung: 11 1.4.2. Sc ký lng 12 1.4.4. Khi ph 13 U 15 ng nghiên cu 16 2.1.1. Hóa cht bo v thc vt 16 iii ng phân tích 19 2.2. Ni dung nghiên cu 20 2.2.1. Kh 20 2.2.2. Th 20 2.2.3. ng d 20 u 20 2.3.1. P lý mu theo QuEChERS 20 2.3.1.1.Nguyên tc 20 m c. 21 nh 21 a h thng 22 2.3.2.2. Gii hn phát hin, gii hng 22 2.3.2.3. Khong tuyng chun 23  lp l thu hi. 23  lý s liu 24 n nghiên cu 24 2.4.1 Thit b, dng c 24 2.4.2. Dung môi, hóa cht 25 T QU VÀ THO LUN 27 3.1 Kho sát xây d 27 3.1.1 Khu kin phân tích bng LC-MS/MS 27 3.1.1.1. Khu kin khi ph 27 u kin sc ký lng 29 3.1.2. Khu kin tách chic liu khô. 31 3.1.2.1. Kho sát thc 33 3.1.2.2. Kho sát ng ca pH thông qua so sánh 3 quy trình 34 3.1.2.3. Kho sát mui chit 35 iv a ni chun trong loi tr ng nn 36 3.2. Th 37 3.2.1. Gii hn phát hin và gii hng 37 3.2.2. Khong tuyn tính 39  lp l thu hi 40 3.3. Áp dc liu khô 41 KT LUN VÀ KIN NGH 44 TÀI LIU THAM KHO 45 PH LC 49 Ph lng chun HCBVTV 49 Ph lc 2: Mt s s chun hóa cht bo v thc vt 53 v DANH MC CÁC KÝ HIU, CÁC CH VIT TT Ký hiệu Tiếng anh Tiếng việt AOAC Association of Official Analytical Community hân tích  APCI Atmospheric Pressure Chemical Ionization   CAD Collision Gas Pressure  CE Collision Energy  CUR Curtain Gas Khí màng CV Coefficient of Variation  thiên CXP Collision Cell Exit Potential  DP Declustering Potential  d-SPE Dispersive Solid Phase Extraction  ESI Electrospray Ionization  FAO Food and Agriculture Organization   GCB Graphitized Carbon Black  GC-MS Gas Chromatography Mass Spectrometry  GS1 Ion Source Gas 1  GS2 Ion Source Gas 2  HCBVTV  HPLC High Performance Liquid  vi Chromatography IS IonSpray Voltage  LC-MS/MS Liquid Chromatography tandem Mass Spectrometry   LLE Liquid liquid extraction  LOD Limit of Detection  LOQ Limit of Quantification  MRL Maximum Residue Limit  MS Mass Spectrometry  PSA Primary Secondary Amine  R(%) Recovery   SD Standard Deviation  SPE Solid Phase Extraction  TEM Ion source Temperature  vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bng 1.1: Tóm tt quy trình chit xut theo 3 phiên bn QuEChERS. 9 Bu kin ta MS 27 Bu kin phân tích HCBVTV bng LC-MS/MS 27 Bng 3.3.Tóm tu ki tách hn hp HCBVTV 30 B lp li ca h thng v thn tích peak 30 Bt và pH dch chic 34 Bng 3.6: LOD, LOQ ca các hóa cht bo v thc vt 38 Bng 3.7. Kt qu c liu khô 41 viii DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ, ĐỒ THỊ Hình 1.1: Mô hình h thng LC-MS/MS. 12 Hình 1.2: Mô hình b phân tích t cc chp ba 15 Hình 3.1. S HCBVT và chun ni TPP 29  tóm tt quy trình QuEChERS kho sát 32 Hình 3.3. ng thi gian ngâm mn hiu sut chit 33 Hình 3.4: S  thu hi  các khong khác nhau 35 Hình 3.5: S  thu hi  các khong khác nhau (>80%; 70-80% và <70%) khi s dng NaCl khác nhau. 36 Hình 3.6: giá vai trò ca ni chun (IS) TPP vi vic loi tr ng nn 37 ng chun mt s HCBVTV 39 Hình 3.8: Kt qu  thu hi cn mu khác nhau ti các n khác nhau (0,01; 0,1 và 1 mg/kg) 40 Hình 3.9: Kt qu  lp li cn mu khác nhau ti các n khác nhau (0,01; 0,1 và 1 mg/kg) 41 [...]... dư lượng HCBVTV trong dư c liệu khô bằng LC-MS/MS 2 Thẩm địn p ương p p x địn dư lượng HCBVTV trong dư c liệu khô bằng LC-MS/MS 3 Áp dụng p ương p p o một số mẫu dư c liệu khô phổ biến trên thị trường 2 Chương 1: TỔNG QUAN NỘI DUNG ĐỀ TÀI 1.1 Giới thiệu về hóa chất bảo vệ thực vật 1.1.1 Khái niệm hóa chất bảo vệ thực vật Tổ chức Nông nghiệp và Lương t ực của Liên Hiệp Quố (FAO) đã đư r định ng ĩ k oàn... tích vài chất hoặc một n óm HCBVTV mà nhiều nhóm chất trong cùng một l n p ân tí do đó ư x định t ng t ường chỉ địn đồng thời ư t ể kiểm so t được hàm lượng HCBVTV trong những sản phẩm này Với lý do trên, úng t i đã lựa chọn đề tài: Xác định dư lượng một số hóa chất bảo vệ thực vật trong dư c liệu khô Thực hiện khóa luận này chúng tôi nhắm tới 3 mụ tiêu ín n ư s u: 1 Khảo sát p ương p p x địn dư lượng. .. dân đã sử dụng h u hết các loại hóa chất bảo vệ thực vật đ ng lưu àn trên t ị trường để hạn chế sâu bệnh, bảo vệ dư c liệu Một ph n không nhỏ số dư c liệu đó đượ p ơi k , sơ chế t àn dư c liệu khô là thành ph n chủ yếu trong các bài thuố đ ng ũng n ư trong sản phẩm hiện đại n ư t ực phẩm chức năng Hiện nay, ở Việt N m ư ó n iều nghiên cứu về p ương p p x HCBVTV trên dư c liệu k Hơn nữ , p ương p p p... có thể có những cách phân loại theo cấu tạo hóa học, theo mụ đí sử dụng (trừ sâu, diệt cỏ, diệt nấm…), t eo độc tính hay theo nguồn gốc (tự nhiên hay tổng hợp) Do nội dung đề tài là phân tích dư lượng thuốc bảo vệ thực vật, vì vậy hóa chất bảo vệ thực vật sẽ được phân loại theo cấu tạo hóa học của nó Các loại hóa chất bảo vệ thực vật gồm nhiều loại, một số nhóm chính bao gồm: - HCBVTV n óm Clo ữu ơ... vấn đề an toàn vệ sinh thực phẩm đ ng là vấn đề b o động với người dân và các cấp quản lý Các vụ ngộ độc thực phẩm ngà àng gi tăng, trong đó ó ngộ độc hoá chất bảo vệ thực vật (HCBVTV) càng làm bùng lên lo âu củ người tiêu dùng HCBVTV không chỉ được sử dụng trong nông nghiệp, ngà n nó òn được dùng trong trồng và chế biến dư c liệu Theo khảo sát thực tế tại một số vùng trồng cây dư c liệu ở nướ t ,... đối với u loài t ự vật trên k ắp t ế giới [19] 1.2 Mức dư lượng tối đa trong dư c liệu Dư lượng là p n òn lại ủ p nk oạt ất, sản p ẩm u ển ó và t àn ó trong t uố , tồn tại trên â trồng, n ng sản, đất, nướ s u một t ời gi n dư i t động ủ ệ sống và điều kiện ngoại ản Mứ dư lượng tối đ o p ép (MRL) là giới ạn tối đ dư lượng HCBVTV (t ường biểu t ị bằng mg/kg), là nồng độ o n ất ủ dư lượng t uố ở đó ó... côn trùng, nhện đối tượng khác trong hoặ trên ơ t ể chúng HCBVTV òn được dùng làm tác nhân điều ò sin trưởng thực vật, chất làm rụng lá, chất làm k â , t n ân làm t ư quả hoặ ngăn HCBVTV cho cây trồng trướ ặn rụng quả sớm Cũng ó t ể dùng ũng n ư s u k i t u oạ để bảo vệ sản phẩm không bị hỏng trong quá trình bảo quản và vận chuyển” [20] Việc phân loại hóa chất bảo vệ thực vật rất đ dạng, có thể có những... HCBVTV [1] 1.3 Các phương pháp xác định hoá chất bảo vệ thực vật Để x đượ ất địn dư lượng HCBVTV n p ân tí n p ải trải qu qu trìn t iết để lấ r k ỏi nền mẫu s u đó sử dụng một kỹ t uật để p t iện và địn lượng 1.3.1 Các phương pháp truyền thống Mụ đí ủ p ương p p p ân tí HCBVTV trong ùng một l n t ự đượ iện, do đó àng n iều HCBVTV àng tốt C lỏng (LLE), iết p rắn, vi iết p đ dư lượng là p ân tí kỹ t uật rắn,... địn ụt ể ư sử uẩn Codex, trong đó o mỗi HCBVTV trong từng nền mẫu Tu n iên, iện n rất n iều HCBVTV gi và tổ t ự p ẩm mà vẫn òn ó qu địn về MRL Để giải qu ết vấn đề nà , một số quố ứ trên t ế giới n ư N ật Bản, C âu Âu, Mỹ … sử dụng gi trị MRL (def ut v lue) o tất ả HCBVTV là 0,01 mg/kg ung 6 Đối với dư liệu và sản p ẩm từ dư liệu trong một số Dư điển n ư dư điển Việt N m IV, dư điển Mỹ (USP 36) qui... Tín hiệu này tỷ lệ thuận với lượng ion do đó tỷ lệ với nồng độ chất p ân tí b n đ u 16 Chương 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Đối tượng nghiên cứu 2.1.1 Hóa chất bảo vệ thực vật Đối tượng ng iên ứu là 25 HCBVTV và Ở đâ , việ lự ọn ất uẩn nội trip en l p osp t (TPP) HCBVTV trong ng iên ứu nà dự trên ơ sở một kết quả k ảo s t HCBVTV trong dư liệu tươi và t ự p ẩm liệu [7], [8] Kết quả k ảo . TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI ĐOÀN HẠNH DUNG XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG MỘT SỐ HÓA CHẤT BẢO VỆ THỰC VẬT TRONG DƯỢC LIỆU KHÔ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ . Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI ĐOÀN HẠNH DUNG XÁC ĐỊNH DƯ LƯỢNG MỘT SỐ HÓA CHẤT BẢO VỆ THỰC VẬT TRONG DƯỢC LIỆU KHÔ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người.  n bè, tôi     n t  Xác định dư lượng một số hóa chất bảo vệ thực vật trong dư c liệu khô  Bn khóa lun c thc hin và hoàn thành ti Vin kim