BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI HOÀNG VIỆT DŨNG NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG TĂNG CƯỜNG CHỨC NĂNG SINH DỤC NAM CỦA OS35 TRÊN CHUỘT CỐNG ĐỰC THỰC NGHIỆM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI – 2014 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI HOÀNG VIỆT DŨNG NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG TĂNG CƯỜ NG CHỨC NĂNG SINH DỤC NAM CỦA OS35 TRÊN CHUỘT CỐNG THỰC NGHIỆM KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: Nơi thực hiện: HÀ NỘI – 2014 1. Th.S Nguyễn Thu Hằng 2. ThS. Đậu Thùy Dương Bộ môn Dược lực LỜI CẢM ƠN Với tất cả lòng kính trọng và sự biết ơn sâu sắc nhất tôi xin gửi tới: Ths. Nguyễn Thu Hằng, Ths. Đậu Thùy Dương và TS. Đỗ Thị Nguyệt Quế là người thầy đã trực tiếp hướng dẫn tôi hoàn thành khóa luận. Các cô đã dành nhiều thời gian và tâm huyết tận tình chỉ bảo, quan tâm giúp đỡ tôi hoàn thành khóa luận. Các cô còn là tấm gương về tác phong làm việc và lối sống đạo đức cho tôi noi theo. Xin gửi lời cảm ơn đến toàn bộ thầy cô, anh chị kỹ thuật viên trong bộ môn dược lí trường Đại học Dược Hà Nội đã giúp đỡ, hướng dẫn tôi về điều kiện cũng như kỹ thuật để tôi có thể hoàn thành được nghiên cứu thực nghiệm tại bộ môn. Nhân dịp này tôi cũng xin gửi lời cảm ơn đến Ban giám hiệu cùng toàn thể các thầy cô giáo trường Đại học Dược Hà Nội đã dạy dỗ và tạo mọi điều kiện thuận lợi cho tôi trong thời gian tôi học tập tại trường. Và cuối cùng là lời cảm ơn tôi gửi tới gia đình và bạn bè đã động viên, giúp đỡ tôi trong suốt thời gian thực hiện khóa luận. Do thời gian làm thực nghiệm cũng như kiến thức của bản thân có hạn, khóa luận này còn có nhiều thiếu sót. Tôi rất mong nhận được sự góp ý của các thầy cô, bạn bè để khóa luận được hoàn thiện hơn. Hà Nội, ngày 21 tháng 5 năm 2014 Sinh viên Hoàng Việt Dũng MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ 1 CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN 3 1.1. Hành vi tình dục và rối loạn chức năng tình dục ở nam giới 3 1.1.1. Hành vi tình dục ở nam giới (male sexual behavior) 3 1.1.3. Rối loạn chức năng tình dục ở nam giới (male sexual dysfunction) 5 1.2. Mô hình nghiên cứu tác dụng của thuốc trên chức năng tình dục nam 8 1.2.1. Nghiên cứu tác dụng của thuốc trên hoạt động tình dục 9 1.2.2. Nghiên cứu tác dụng của thuốc trên chức năng cương dương 10 1.2.3. Nghiên cứu hoạt tính androgen của thuốc 12 1.3. Quả xà sàng và hợp chất osthole 12 1.3.1. Xà sàng 13 1.3.1.1. Đặc điểm thực vật 13 1.3.1.2. Phân bố, thu hái và chế biến 13 1.3.1.3. Thành phần hóa học 13 1.3.1.4. Công dụng và liều dùng 14 1.3.2. Các nghiên cứu về osthole 14 1.3.2.1.Tác dụng lên chức năng sinh dục nam 14 1.3.2.2. Một số nghiên cứu dược lý khác 15 CHƯƠNG 2. NGUYÊN LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 17 2.1. Nguyên liệu 17 2.2.1. Đối tượng nghiên cứu 17 2.2.2. Động vật nghiên cứu 17 2.1.3. Hóa chất, thiết bị 17 2.2. Phương pháp nghiên cứu 18 2.2.1. Nội dung nghiên cứu 18 2.2.2. Liều sử dụng trong nghiên cứu 18 2.2.3. Đánh giá tác dụng tăng cường chức năng sinh sản nam của OS35 thông qua hành vi tình dục trên động vật thực nghiệm 18 2.2.4. Đánh giá hoạt tính androgen của OS35 trên chuột cống đực trưởng thành 21 2.3. Xử lý số liệu 23 CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 24 3.1. Ảnh hưởng của OS35 lên hành vi tình dục của chuột cống đực 24 3.1.1. Ảnh hưởng của liều đơn OS35 lên hành vi tình dục của chuột 24 3.1.2. Ảnh hưởng của việc dùng liều lặp lại OS35 lên hành vi tình dục của chuột…… …………………………………………………………………………………26 3.2. Hoạt tính androgen của OS35 trên chuột cống đực trưởng thành 28 3.3. Bàn luận 33 3.3.1. Về tác dụng của OS35 trên hành vi tình dục động vật thực nghiệm 33 3.3.2. Hoạt tính androgen của OS35 trên chuột cống đực trưởng thành 37 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 40 DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT AR Androgen receptor cAMP Cyclic adenosin monophosphat cGMP Cyclic guanosin monophosphat CMC- Na Sodium carboxymethyl cellulose DHT Dihydrotestosteron ED Erectile dysfunction EL Ejaculation latency FSH Follicle-stimulating hormon GnRH Gonadotropin-releasing hormon HSDD Hypoactive sexual disorder ICP Intracavernous pressure IF Intromission frequency IL Intromission latency LDL-C Low-density lipoprotein LH Luteinizing hormon L-NAME L–nitro arginin methyl ester MF Mouting frequency ML Mouting latency NO Nitric oxid NOS Nitric oxid synthase ODQ 1H-[1,2,4] oxadiazolo [4,3-a] quinoxalin-1-on OS35 Osthole 35 PDE Phosphodiesterase PEI Post ejaculation interval PGI 2 Prostagladin I 2 SAD Sexual aversion disorder SNP Natri nitro prussiat TC Total cholesterol TCCS Tiêu chuẩn cơ sở TG Trigycerid TGF – β1 Yếu tố tăng trưởng β1 DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng Tên bảng Trang 3.1 Ảnh hưởng của liều đơn OS35 trên tỷ lệ (%) chuột thể hiện các hành vi 24 3.2 Ảnh hưởng của việc dùng liều đơn OS35 lên số lần nhảy, xâm nhập 25 3.3 Ảnh hưởng của việc dùng liều đơn OS35 lên thời gian thể hiện các hành vi 26 3.4 Ảnh hưởng của liều lặp lại (5 ngày) OS35 trên sự thể hiện các hành vi tình dục 27 3.5 Ảnh hưởng của việc dùng liều lặp lại OS35 lên số lần nhảy, xâm nhập 27 3.6 Ảnh hưởng của liều lặp lại OS35 lên thời gian thể hiện các hành vi tình dục 28 3.7 Ảnh hưởng của OS35 đến khối lượng cơ thể chuột cống trắng 29 DANH MỤC CÁC HÌNH Hình Tên hình Trang 1.1 Các mô hình nghiên cứu tác dụng của thuốc lên chức năng tình dục nam giới 9 1.2 Công thức cấu tạo của osthole 13 2.1 Sơ đồ nghiên cứu hành vi tình dục ở chuột cống trắng 21 2.2 Sơ đồ nghiên cứu hoạt tính androgen của OS35 trên chuột cống đực trưởng thành 22 3.1 Ảnh hưởng của OS35 lên khối lượng tinh hoàn 30 3.2 Ảnh hưởng của OS35 lên khối lượng quy đầu 30 3.3 Ảnh hưởng của OS35 lên khối lượng túi tinh 31 3.4 Ảnh hưởng của OS35 lên khối lượng tuyến cowper 31 3.5 Ảnh hưởng của OS35 lên khối lượng cơ nâng hậu môn 32 3.6 Ảnh hưởng của OS35 lên khối lượng tuyến tiền liệt 32 1 ĐẶT VẤN ĐỀ Xã hội ngày càng phát triển, đời sống vật chất được nâng lên và đời sống tinh thần cũng được quan tâm chăm sóc. Trong đó tình dục là một nhu cầu quan trọng cần quan tâm đặc biệt. Quan hệ tình dục không chỉ dừng lại ở mục đích duy trì nòi giống mà còn giữ vai trò quan trọng trong đời sống tinh thần của các cặp vợ chồng. Tuy nhiên cùng với sự phát triển của xã hội con người phải đối mặt với nhiều vấn đề như áp lực từ công việc, tiếp xúc với nhiều hóa chất độc hại từ môi trường và thực phẩm đây là nguyên nhân phát sinh các bệnh mãn tính và nan y… trong đó có các bệnh liên quan đến chức năng tình dục ở nam giới. Rối loạn chức năng tình dục ở nam giới (male sexual dysfunction) là những rối loạn liên quan đến quá trình giao hợp của nam giới với bạn đời và có thể gặp ở bất kỳ nam giới nào trong độ tuổi sinh sản. Khi gặp phải những vấn đề này người nam giới không thể thực hiện được hay không hoàn thành được hoạt động tình dục với bạn đời, từ đó ảnh hưởng xấu đến khả năng sinh sản, mối quan hệ vợ chồng hay thậm chí gây ra những vấn đề tâm lý nghiêm trọng. Rối loạn chức năng tình dục nam giới đang là mối quan tâm hàng đầu của nhiều nhà khoa học trong lĩnh vực bệnh lý nam khoa. Tiến bộ trong khoa học kỹ thuật và y học giúp việc chẩn đoán, đánh giá bệnh một cách chính xác hơn và đưa ra các phương pháp điều trị hiệu quả. Tuy nhiên hiện nay số hoạt chất cũng như thuốc đưa vào điều trị vẫn còn ít. Vì vậy phát triển các thuốc có tác dụng hỗ trợ và điều trị các rối loạn chức năng tình dục ở nam giới đang là hướng đi hứa hẹn nhiều tiềm năng. Ngoài các hoạt chất được nghiên cứu và tổng hợp hóa dược hoàn toàn, xu hướng hiện nay là sử dụng các hoạt chất được chiết xuất từ nguồn thảo dược trong tự nhiên để bổ sung và thay thế cho các thuốc có nguồn gốc tổng hợp với tác dụng tốt và giá thành thấp hơn. [...]... hướng cho đề tài Nghiên cứu tác dụng tăng cường chức năng sinh dục nam của OS35 trên chuột cống đực thực nghiệm để khẳng định thêm tác dụng trên chức năng sinh dục nam của osthole cũng như tạo cơ sở khoa học cho việc sử dụng OS35 một cách hợp lí Đề tài được thực hiện với 2 mục tiêu: 1 Nghiên cứu tác dụng của OS35 trên chức năng sinh sản thông qua hành vi tình dục trên động vật thực nghiệm 2 Đánh giá... thuật trên hệ thống động mạch  Phẫu thuật trên hệ thống tĩnh mạch  Phẫu thuật đặt dương vật giả  Phẫu thuật các dị tật dương vật 1.2 Mô hình nghiên cứu tác dụng của thuốc trên chức năng tình dục nam Có rất nhiều mô hình nghiên cứu tác dụng của thuốc trên chức năng tình dục nam, nhìn chung có thể chia làm 3 nhóm mô hình chính: - Nghiên cứu tác dụng của thuốc trên hoạt động tình dục - Nghiên cứu tác dụng. .. dụng của thuốc trên chức năng cương dương - Nghiên cứu hoạt tính androgen của thuốc 9 Mô hình nghiên cứu tác dụng của thuốc trên chức năng tình dục nam NC tác dụng thuốc trên hoạt động tình dục NC tác dụng thuốc trên chức năng cương dương Test hành vi Đo ICP Test kích dục NC dòng máu chảy qua dương vật NC trên thể hang cô lập NC hoạt tính androgen của thuốc Sử dụng mào gà trống Sử dụng cơ quan sinh dục. .. nhấm Nghiên cứu trên androgen receptor NC tác dụng của thuốc trên động vật đã được gây rối loạn cương dương Hình 1.1 Các mô hình nghiên cứu tác dụng của thuốc lên chức năng tình dục nam giới 1.2.1 Nghiên cứu tác dụng của thuốc trên hoạt động tình dục Nghiên cứu ảnh hưởng lên hành vi tình dục (sexual behavior test)[12, 13, 21, 35] 10 Nguyên tắc: Cho chuột đực đã có kinh nghiệm tình dục giao phối với chuột. .. sử dụng mức liều 150 mg/kg và 250 mg/kg cho các nghiên cứu tiếp theo 2.2.3 Đánh giá tác dụng tăng cường chức năng sinh sản nam của OS35 thông qua hành vi tình dục trên động vật thực nghiệm Sử dụng mô hình nghiên cứu hành vi tình dục ở chuột cống trắng phương pháp tiến hành như sau [12, 13, 46]: 19 Nguyên tắc: Cho chuột đực đã có kinh nghiệm tình dục giao phối với chuột cái đang trong thời kỳ động dục. .. phục vụ nghiên cứu 18 - Webcam chất lượng tốt, độ phân giải 8 megapixels, máy tính lưu trữ video, phần mềm ghi hình tương ứng - Đồng hồ bấm giờ - Cân phân tích - Bộ dụng cụ mổ chuột 2.2 Phương pháp nghiên cứu 2.2.1 Nội dung nghiên cứu Đề tài thực hiện với 2 nội dung:  Đánh giá tác dụng tăng cường chức năng sinh dục nam của OS35 thông qua hành vi tình dục trên động vật thực nghiệm: - Đánh giá tác dụng. .. thuốc khác [4, 10] 1.3.2 Các nghiên cứu về osthole 1.3.2.1 .Tác dụng lên chức năng sinh dục nam - Nghiên cứu invitro: Nghiên cứu in vitro của Chen J năm 2000 đã đánh giá tác dụng của osthole trên cơ trơn thể hang cô lập của thỏ Kết quả cho thấy: osthole có tác dụng gây giãn cơ trơn thể hang của thỏ, tác dụng này phụ thuộc vào liều Cơ chế gây giãn cơ trơn thông qua tăng giải phóng nitric oxid từ nội mạc,... Nghiên cứu hành vi tình dục trong lĩnh vực sinh lý đặc biệt thích hợp cho các phân tích về cơ chế, hành vi, và sinh lý thần kinh với sự kích thích tình dục trong tình trạng suy giảm hay thiếu hụt nhu cầu sinh lý Trong nghiên cứu dược lý, nghiên cứu hành vi tình dục được quan tâm khi muốn đánh giá tác dụng cải thiện của thuốc lên toàn bộ chức năng tình dục Nghiên cứu tác dụng của thuốc lên sự kích dục. .. - Đánh giá tác dụng sau dùng mẫu thử 5 ngày  Đánh giá hoạt tính androgen của OS35 trên chuột cống đực trưởng thành 2.2.2 Liều sử dụng trong nghiên cứu Trong thí nghiệm thăm dò liều có tác dụng (đánh giá tác dụng của thuốc trên test cương dương), sử dụng 3 mức liều 50 mg/kg, 150 mg/kg, 250 mg/kg Kết quả cho thấy, liều 50mg/kg OS35 bắt đầu thể hiện tác dụng, nhưng 2 mức liều thể hiện tác dụng rõ nhất... đánh giá tác dụng của thuốc trên từng bệnh lý cụ thể 1.2.3 Nghiên cứu hoạt tính androgen của thuốc Androgen là hormon sinh dục nam, đóng vai trò quan trọng trong việc hình thành và duy trì các đặc tính sinh dục nam thứ phát, ảnh hưởng đến khả năng sinh sản và hoạt động tình dục [3, 8] Vì vậy thử hoạt tính androgen là một bước để sàng lọc và đánh giá tác dụng của thuốc trên chức năng tình dục nam Đánh . của thuốc trên chức năng tình dục nam 8 1.2.1. Nghiên cứu tác dụng của thuốc trên hoạt động tình dục 9 1.2.2. Nghiên cứu tác dụng của thuốc trên chức năng cương dương 10 1.2.3. Nghiên cứu hoạt. chức năng sinh dục nam của OS35 trên chuột cống đực thực nghiệm để khẳng định thêm tác dụng trên chức năng sinh dục nam của osthole cũng như tạo cơ sở khoa học cho việc sử dụng OS35 một cách. thực hiện với 2 mục tiêu: 1. Nghiên cứu tác dụng của OS35 trên chức năng sinh sản thông qua hành vi tình dục trên động vật thực nghiệm. 2. Đánh giá hoạt tính androgen của OS35 trên chuột cống