BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI HOÀNG THỊ MINH NGHIÊN CỨU PHƯƠNG PHÁP ĐẨY QUA MÀNG TRONG LÀM NHỎ VÀ ĐỒNG NHẤT HÓA LIPOSOM RESVERATROL KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI  2014 BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI HOÀNG THỊ MINH NGHIÊN CỨU PHƯƠNG PHÁP ĐẨY QUA MÀNG TRONG LÀM NHỎ VÀ ĐỒNG NHẤT HÓA LIPOSOM RESVERATROL KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn: TS. Nguyn Th Lp Nơi thực hiện: 1. B  2. B  HÀ NỘI  2014 LI C L c ti: T.S. Nguyn Th Lp. i thng d c hin    k thu  u kin thun l  i li c k thu   i gian thc hin. Cui li c      t nghip c  13/05/2014   Minh. MỤC LỤC DANH MU, CH VIT TT DANH MNG BIU DANH M  TH T V 1 NG QUAN 3 1.1. Tng quan v liposom 3 m 3 1.1.2. i 3 1.1.3.  phn liposom 5  to liposom 6 ng nhc liposom 7  7  9 1.2. Tng quan v trans - Resveratrol 12 c 12  12 1.2.3. ng hc 13 1.3. Tng quan v liposom RSV 14 U 17 t liu 17 2.2. Nu 18 u 18  liposom RSV 18 2.3.1.1. T 19  ng nh 19 2.3.1.3. Tinh ch liposom RSV 20 t s a liposom RSV 23  KTTP liposom 23 ng RSV 23 u su 24 C NGHIM, KT QUN 26 3.1. Kt qu 26 3.1.1. Thng RSV 26  28 3.1.3. Khng cu kia liposom 32 nh c ti  35 n 36 KT LUN NGH 40 U THAM KHO Ph lc DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Chol Cholesterol  n Vit Nam DPPC Dipalmitoyl phosphatidylcholin DPPG Dipalmitoyl phosphatidylglycerol DSC t vi sai (Differential scanning calorimetry) DSPC Disteraroyl phosphatidylcholin KTTP c ti LUV Large unilamellar vesicle (liposom to mt lp) MLV Multilamellar vesicle (liposom nhiu lp) N/D c/ du PDI Ch s index) PEG Poly(ethylenglycol) PL Phospholipid RES Reticuloendothelial system (h i n RSV Resveratrol SPC  SUV Small unilamellar vesicle (liposom nh mt lp) Tc Nhit chuyn pha gel - tinh th lng TEM    n t truyn qua (Transmission electron microscope) TKHH Tinh khic DANH MỤC CÁC BẢNG BIỂU STT ng Trang 1 Bng 1.1. i liposom theo s lc 4 2 Bt liu 17 3 Bu ch to liposom RSV 19 4 Bng 3.1.    hp th quang c  u dung dch RSV chun   26 5 Bng 3.2. Kt qu  lp li cng bng k thu UV  VIS 28 6 Bng 3.3.  KTTP liposom c sau  29 7 B u sut liposom a liposom  31 8 Bng 3.5. ng ca u kin c,  KTTP 33 9 Bng 3.6.  ng ca u kin   i hiu sut liposom  34 10 Bng 3.7 KTTP, hiu sut liposom  ca liposom   KTTP b    y qua  35 DANH MỤC CÁC HÌNH VẼ VÀ ĐỒ THỊ STT  Trang 1 liposom 3 2 1.2 liposom c o 7 3 1.3 gim KTTP liposom by  10 4  20 5  n c liposom RSV 22 6  th biu din m hp th   1%   27 7  th bi theo s l 400 nm 30 8  th bi l 80 nm 31 9  th a h y  32 10 nh chp TEM ca mu liposom   thc b 36 1 ĐẶT VẤN ĐỀ y  c vt, c bic phc p lu t r  (Polygonum cuspidatum), mt loi thc vc c truyT nh  t nhi  u v resveratrol,      nghim resveratrol      ng  i cho sc khe  ng o v tim mch [5]. M i thin sc kha bnh m i [36]     li         n nay resveratrol vn ch i dng thc phm chng uc t vic s dng resveratrol dng t do gp nhiu hn ch do ng c [40], [41].   do sau khi hp thu b chuyu  gan  dng ung rt thp [42] khc phc m ca dng t do, hin nay nhiu h mang thuc mu,  ng dng cho  liposom [33]. Liposom  bo v resveratrol khng bt li cng,        n ci thin sinh kh dng ng ung ca resveratrol. Nhi      c s d    liposom resveratrol, n dch liposom tc ln vi kho c rng. Vy vi ng nht t bu liposom resveratrol.  n ng dng liposom t mang v nh va  dng ng ung  c hi   2 “Nghiên cứu phương pháp đẩy qua màng trong làm nhỏ và đồng nhất hóa liposom resveratrol” nhm m - u ng d  ng nht c liposom resveratrol. [...]... phân bố KTTP của liposom, hiệu suất liposom hóa - So sánh liposom thu được sau khi đồng nhất hóa bằng phương pháp đẩy qua màng và phương pháp siêu âm về hình thái, kích thước, phân bố kích thước, hiệu suất liposom hóa 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Phương pháp bào chế liposom RSV Nghiên cứu lựa chọn phương pháp bốc hơi pha đảo để bào chế liposom RSV có tham khảo nghiên cứu trước đó [22] và có điều chỉnh... gel nhớt Tiếp tục cất quay, sau khoảng 15 phút trạng thái gel bị phá vỡ hình thành liposom Cất thêm 1 giờ nữa để loại hoàn toàn dung môi hữu cơ thu được hỗn dịch liposom thô 2.3.1.2 Làm nhỏ kích thước và đồng nhất hóa liposom RSV Nghiên cứu này sử dụng hai phương pháp để làm nhỏ kích thước là siêu âm và đẩy qua màng  Phương pháp đẩy qua màng Sử dụng thiết bị đẩy làm nhỏ kích thước liposom cầm tay thể... - Màng thẩm tích kích thước lỗ xốp 12000 – 14000 Da (Sepetrum - Mỹ) - Cân phân tích, tủ sấy, tủ lạnh, bể siêu âm, nồi đun cách thủy, các dụng cụ thủy tinh 2.2 Nội dung nghiên cứu - Ứng dụng phương pháp đẩy qua màng trong làm nhỏ và đồng nhất hóa liposom RSV bào chế bằng phương pháp bốc hơi pha đảo Khảo sát ảnh hưởng của số lần đẩy qua màng đến kích thước và phân bố KTTP liposom, hiệu suất liposom hóa. .. chế h nh thành liposom theo phương pháp bốc hơi pha đảo 1.1.5 Các phương pháp đồng nhất hóa kích thước liposom Các phương pháp bào chế liposom thường dùng hiện nay không tạo được liposom có kích thước và khoảng phân bố kích thước tiểu phân tối ưu vì vậy việc làm giảm và đồng nhất hóa kích thước tiểu phân là một yêu cầu bắt buộc Các kỹ thuật có thể sử dụng là: siêu âm, đẩy qua màng, vi hóa lỏng, cột... MLV tồn tại đồng thời với SUV) và không có sự đồng nhất về kích thước và phân bố kích thước giữa các lô mẻ [4], [11], [19] 1.1.5.2 Phương pháp đẩy qua màng Phương pháp này được áp dụng lần đầu trong chế tạo liposom bởi Sozka và cộng sự từ năm 1980 cho tới nay vẫn là một trong những phương pháp bào chế LUV hiệu quả [28] Đẩy qua màng có nhiều ưu điểm như: áp dụng được với nhiều loại lipid và hỗn hợp lipid;... của lipid tạo màng liposom [14] Màng lọc thường dùng là loại màng polycarbonat bền và trơ về mặt hóa học [28] Đường kính lỗ màng lọc và số lần đẩy ảnh hưởng quyết định tới kích thước và phân bố kích thước liposom Khi đẩy qua màng có đường kính lỗ màng khoảng 100 nm thu được liposom có kích thước ≈ 100 nm, đẩy qua màng có đường kính lỗ lọc lớn hơn 100 nm thường được liposom kích thước nhỏ hơn đường... Hỗn dịch liposom được ủ ấm ở nhiệt độ 45˚C trước khi đẩy Đầu tiên đẩy qua màng polycarbonat kích thước lỗ màng lọc 400 nm, sau đó đẩy tiếp qua màng 20 80 nm Thay đổi số lần đẩy ở mỗi loại màng và khảo sát ảnh hưởng của số lần đẩy tới các đặc tính của liposom RSV  Phương pháp siêu âm Hỗn dịch liposom thô sau khi bào chế bằng phương pháp bốc hơi pha đảo được cho vào lọ thủy tinh, thể tích mẫu liposom. .. các liposom có đường kính nhỏ hơn lỗ lọc sẽ dễ dàng đi qua màng lọc Liposom kích thước lớn hơn đường kính lỗ lọc, một số sẽ biến dạng để đi qua lỗ lọc , một số do tác động của lực trượt bị “bóc” lớp vỏ ngoài và tái tạo lại liposom đơn, ít lớp với kích thước nhỏ hơn [1], [28] H nh 1.3 Cơ chế giảm KTTP liposom bằng phương pháp đẩy qua màng Khi nén liposom qua màng lọc sẽ xảy ra quá trình phá vỡ và tái... phân tán người ta chia các phương pháp bào chế liposom thành ba loại lớn là: (i) các phương pháp phân tán cơ học: thường dùng nhất hiện nay là hydrat hóa màng mỏng lipid, (ii) các phương pháp phân tán nhờ dung môi: tiêm ethanol, tiêm ether, bốc hơi pha đảo và (iii) các phương pháp loại bỏ chất diện hoạt [4], [11], [16] Trong phương pháp bốc hơi pha đảo liposom được tạo thành qua quá trình trung gian... quả cho thấy liposom RSV làm tăng nồng độ RSV trong máu cũng như tăng tác dụng bảo vệ tim mạch trên chuột so với RSV tự do [29] Wang Y và cộng sự [43] đã tiến hành bào chế liposom RSV từ lecithin : chol : RSV tỉ lệ mol là 3:1,5:1 bằng phương pháp hydrat hóa màng phim Hỗn dịch liposom thô được làm nhỏ kích thước bằng cách siêu âm trong 20 phút rồi đẩy qua màng kích thước lỗ màng lọc 80 nm Liposom thu . TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI HOÀNG THỊ MINH NGHIÊN CỨU PHƯƠNG PHÁP ĐẨY QUA MÀNG TRONG LÀM NHỎ VÀ ĐỒNG NHẤT HÓA LIPOSOM RESVERATROL KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ HÀ NỘI  2014 BỘ. TRƯỜNG ĐẠI HỌC DƯỢC HÀ NỘI HOÀNG THỊ MINH NGHIÊN CỨU PHƯƠNG PHÁP ĐẨY QUA MÀNG TRONG LÀM NHỎ VÀ ĐỒNG NHẤT HÓA LIPOSOM RESVERATROL KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP DƯỢC SĨ Người hướng dẫn:. cứu phương pháp đẩy qua màng trong làm nhỏ và đồng nhất hóa liposom resveratrol” nhm m - u ng d  ng nht c liposom resveratrol.