Đang tải... (xem toàn văn)
Phân lập và tuyển chọn các chủng nấm men có khả năng chuyển hóa đầy thầu dầu thành chất thơm
Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel : 0918.775.368 Đặt vấn đề Con ngời từ lâu đã khao khát tìm ra những nguồn hơng liệu để phục vụ cho nhu cầu ngày càng tăng của các ngành công nghiệp dợc phẩm, thực phẩm, mỹ phẩm. Những năm qua, nhiều loại chất thơm đặc biệt đã đợc xác định rõ về cấu tạo cũng nh tính chất hoá học, trong số đó các hợp chất -lactone là những hợp chất tạo ra mùi thơm rất dễ chịu. Các hợp chất này đợc tìm thấy trong tự nhiên ở một số loại hoa quả, thảo mộc và một số sản phẩm lên men tự nhiên. Với giá trị tạo hơng thơm các lactone này đã đợc sử dụng để tạo ra các loại nớc hoa, hay làm tăng mùi vị thơm ngon của các loại thực phẩmTuy nhiên tách chiết chúng từ nguồn tự nhiên là một công việc khó khăn và không mang lại hiệu quả kinh tế cao. Thực tế các -lactone đợc tổng hợp từ nguồn nguyên liệu dầu thực vật nhờ vào quá trình chuyển hoá của vi sinh vật. Dầu thầu dầu là loại nguyên liệu rất lý tởng để làm việc trên do thành phần chính của nó là acid ricinoleic, một acid có cấu trúc đặc biệt thuận lợi cho việc tổng hợp các lactone. Nguồn nguyên liệu dầu thầu dầu ở nớc ta rất sẵn có và rẻ tiền nhng việc sử dụng nó cho sinh tổng hợp chất thơm nhờ vi sinh vật còn rất mới mẻ. Vì vậy chúng tôi đã tiến hành đề tài: Phân lập và tuyển chọn các chủng nấm men có khả năng chuyển hoá dầu thầu dầu thành chất thơm với các mục tiêu sau: - Phân lập từ tự nhiên các chủng nấm men có khả năng chuyển hoá dầu thầu dầu thành chất thơm -decalactone. - Tuyển chọn các chủng nấm men từ bộ su tập giống của Viện CNTP - Tách chiết -decalactone từ môi trờng nuôi cấy nấm men và sơ bộ định tính, định lợng bằng sắc ký khí. 1 Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel : 0918.775.368 phần i: Tổng quan tài liệu 1.1. Đại Cơng về nấm men Nấm men (yeast, Levure) là tên gọi thông thờng của một nhóm nấm có vị trí phân loại không thống nhất nhng có những đặc điểm chung sau[3]: nói chung có tồn tại trạng thái đơn bào, đa số sinh sôi nảy nở theo lối nảy chồi, cũng có khi sinh sản theo lối phân cắt tế bào, nhiều loại có khả năng lên men đờng, thành tế bào có chứa mannan, thích nghi với môi trờng có chứa đờng cao, có tính acid cao. Nấm men phân bố rộng rãi trong tự nhiên, nhất là trong môi trờng có chứa đờng, có pH thấp, chẳng hạn nh trong hoa quả rau, da, mật mía, rỉ đờng, trong đất vờn trồng cây ăn quả, trong đất có nhiễm dầu mỡ. Là vi sinh vật điển hình cho nhóm nhân thật, nấm men có cấu tạo tế bào hoàn chỉnh gồm có: thành tế bào, màng tế bào, tế bào chất, nhân, ty thể, 1-2 không bàoKích thớc tế bào nấm men lớn gấp 10 lần so với vi khuẩn, và vào khoảng 8-15 àm do đó có thể thấy rõ dới kính hiển vi quang học. Hình thái tế bào nấm men rất đa dạng và phong phú: hình cầu, hình trứng, hình ô van, hình elip, hình cong, hình thoi, hình tam giác, hình thận, hình lỡi liềm, hình mũNấm men có cả hai hình thức sinh sản hữu tính và vô tính. Sinh sản vô tính bằng cách nảy chồi, phân cắt và bằng bào tử: bào tử đốt ở chi Geotrichum, bào tử bắn ở chi Sporobolomyces, bào tử áo ở chi Candida. Sinh sản hữu tính bằng bào tử túi ở các chi Saccharomyces, Zygosaccharomyces, và nhiều chi nấm men thuộc bộ Endomycetales. Nấm men thuộc loại dinh dỡng hoá năng hữu cơ. Chúng chỉ có khả năng thu nhận năng lợng nhờ quá trình oxy hoá hiếu khí hoặc lên men kỵ khí các hợp chất hữu cơ ngoại bào [4]. Trong quá trình sinh sống và phát triển nấm men cần những nguồn dinh dỡng nh: nguồn cacbon, nguồn nitrơ, các nguyên tố khoáng và các chất sinh trởng. Đồng thời trong quá trình sinh sống nấm men cũng tổng 2 Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel : 0918.775.368 hợp nên các chất hữu cơ, tạo ra các sản phẩm trao đổi chất mà con ngời đã và đang sử dụng chúng để phục vụ cho đời sống của mình. Rất nhiều loại nấm men đợc ứng dụng trong sản xuất nh: công nghiệp sản xuất rợu, bia, nớc giải khát, sinh khối phục vụ chăn nuôi, cao nấm men, lipit nấm men, các enzym nh amilaza, invertaza, lactaza, uricaza, sản xuất ergosterol, acid ribonucleic, riboflavin, các acid amin nh lizin, cystein, methionin .Cũng có rất nhiều loài nấm men đã đợc biết là có khả năng chuyển hoá dầu thầu dầu thành - decalacton và đã đợc sử dụng trong công nghiệp để sản xuất -decalactone nh: Candida guilliermondii, Yarrowia lipolytica, Geotrichum klebahni [13], Sporobolomyces odorus, Rhodotorula glutinus [11] 1.2. Dầu thầu dầu 1.2.1. Cây thầu dầu [1] Cây thầu dầu có tên khoa học là Ricinus communis L, thuộc họ thầu dầu Euphorbiaceae, bộ ba mảnh vỏ Euphorbiales, còn có tên gọi khác là: đu đủ tía, tỳ ma, cây dầu ve, cây hơng thét. Hình thái: Cây sống lâu năm, thân yếu, nhng có thể cao tới 10-12m. Lá mọc so le có cuống, lá kép hai bên họp thành một túi màng, sớm rụng, phiến lá hình chân vịt từ 5-9 có khi tới 11 thuỳ cắt sâu, mép có răng ca không đều. Hoa mọc thành chùm sim, quả 3 mảnh vỏ trên mặt có nhiều gai mềm. Hạt hình trứng hơi dẹt. Mặt hạt nhẵn bóng. Phân bố thu hái, chế biến: Mọc hoang ở nhiều vùng nhiệt đới: Việt Nam, ấn Độ, BrazinNgời ta thu hoạch hạt thầu dầu vào tháng 4-5, với mục đích chủ yếu là dùng để ép dầu trong công nghiệp. Ngày nay, cây thầu dầu đợc trồng ở nhiều nơi trên thế giới. 3 Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel : 0918.775.368 1.2.2. Dầu thầu dầu Dầu thầu dầu có tên thơng phẩm là Castor oil đợc tách ra từ hạt thầu dầu bằng phơng pháp ép lạnh, ép nóng hoặc trích ly. Dầu thầu dầu là một chất lỏng sền sệt, không màu hoặc hơi vàng, mùi vị nhạt. Thành phần hoá học của dầu thầu dầu Việt Nam cha đợc xác định rõ ràng, theo tác giả Đỗ Tất Lợi dầu thầu dầu Việt Nam ngoài các glycerit chung nh stearin, palmitin còn có một một glycerit đặc biệt là ricinolein là thành phần chính của dầu thầu dầu (xà phòng hoá sẽ cho acid ricinoleic). Ricinoleic là một acid rợu béo có công thức nh sau: Acid ricinoleic (12-hydroxy-9-octadecenoic ) Bảng 1: Thành phần hoá học của dầu thầu dầu[9,10] Acid Dầu Brazin (%) Dầu ấn độ (%) Ricinoleic acid 83-90,00 87,4-90,4 Linoleic 3,19-5,98 2,9-4,0 Oleic 2,96-5,64 2,5-4,0 Stearic 0,68-1,84 0,9-1,3 Palmitic 0,87-2,35 0,8-1,3 Dihydrostearic - 0,5-0,8 Encozenic - 0,6-1,6 Linoleic 0,34-0,91 0,1-1,1 Theo bảng 1 thì thành phần hoá học của dầu thầu dầu có thay đổi theo nguồn gốc tuy nhiên thành phần chính vẫn là acid ricinoleic. 1.3. [R]- -decalactone tính chất hoá lý nguồn gốc và ứng dụng 4 Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel : 0918.775.368 Các -lactone đợc tìm thấy nhiều trong tự nhiên trong số đó - decalactone là lactone có giá trị nhất và cũng đựoc quan tâm nghiên cứu nhiều nhất. -Decalactone là một lactone đợc tìm thấy lần đầu tiên trong quả đào và một số loại hoa quả khác. -Decalactone là một ester nội phân tử của acid 4- hydroxy-decanoic, acid này trong điều kiện pH từ 1-5 và nhiệt độ 70-100 0 C sẽ đóng vòng để tạo -decalactone [8]. ở điều kiện thờng -decalactone là một chất lỏng trong suốt không màu, hoặc có màu vàng rơm rất nhạt, rất dễ bay hơi tạo mùi thơm dễ chịu. Nó hầu nh không tan trong nớc nhng tan rất tốt trong rợu, dầu, ete, etyl acetat, hexaneNó có các đặc tính hoá lý sau[7,26]: + Công thức phân tử: C 10 H 18 O 2 (M=170) + Công thức cấu tạo: + nhiệt độ sôi: 281 0 C + Tỷ trọng : 0,952 + Mùi: Hoa quả và bơ sữa. -Decalactone không có độc tính và có thể sử dụng trực tiếp trong thực phẩm. Năm 1974, Uỷ ban hợp tác Châu Âu đã đa chất này vào danh sách những hợp chất thơm tổng hợp đợc sử dụng trong thực phẩm ở mức độ cao nhất từ 5 20 ppm. Tuy nhiên trong thực tế, nồng độ lactone này sử dụng trong thực phẩm cũng không quá 3 ppm và trong nớc hoa từ 20-400 ppm[23]. Trên thế giới -decalactone đợc sử dụng trong nhiều ngành công nghiệp khác nhau nh thực phẩm, dợc phẩm và mỹ phẩm chính vì sự an toàn và mùi thơm 5 CH 3 OH OH O O O CH 3 T o ACID 4-HYDROXY-DECANOIC GAMMA-DECALACTON Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel : 0918.775.368 hấp dẫn đối với ngời sử dụng. Nó đợc dùng làm chất tạo hơng thơm cho thực phẩm, singum, kem đánh răng, đồ uống, nớc hoa, sản phẩm làm mềm vải, các chế phẩm dùng cho tóc [13] . Trong tự nhiên, -decalactone có mặt trong một số loại hoa quả nh: mận 1230 mg/kg, mơ 490 mg/kg, xoài 450 mg/kg, đào 125 mg/kg, dứa 20 mg/kg .một số loại thảo mộc và một số sản phẩm lên men. Trong phân tử -decalactone có chứa một trung tâm hoạt động quang học vì vậy trong tự nhiên ngời ta tìm thấy cả hai loại đồng phân quang học của nó là [R]-- decalactone và [S]--decalactone. Tuy nhiên dạng đồng phân quang học R đợc tìm thấy nhiều hơn. Ngời ta đã nghiên cứu rất kỹ về sự vợt trội này trong nhiều loại quả từ các nớc khác nhau trên thế giới. 1.4. Tổng hợp -decalactone nhờ vi sinh vật [18]. -Decalactone đợc tổng hợp qua hai con đờng: tổng hợp sinh học (biosynthetic) và biến đổi sinh học (biotransformation). Con đờng biến đổi sinh học là con đờng chính trong công nghiệp để tổng hợp - decalactone vì con đờng này cho năng suất cao hơn con đờng tổng hợp sinh học. 1.4.1. Con đờng tổng hợp sinh học(biosynthetic) Là con đờng tổng hợp -decalactone nhờ vi sinh vật trong đó không sử dụng chất béo hay dầu mỡ. Một số vi sinh vật có khả năng tổng hợp - decalactone từ những hợp chất đơn giản. Berger là ngời đầu tiên đã phát hiện ra sự có mặt của -decalactone trong môi trờng nớc thịt lên men các chủng Basidomycetes (nấm đảm). Có rất nhiều các báo cáo khoa học về việc tổng hợp -decalactone nhờ nấm mốc nhng nói chung sản lợng - decalactone thu đợc rất thấp. Jourdant và cộng sự đã dùng chủng Sporobolomyces odorus để tổng hợp -decalactone nhng hiệu suất thu đợc rất 6 Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel : 0918.775.368 thấp (1mg/1 liter môi trờng)Tressel và Albrecht đã đa ra ý kiến về việc sản xuất -decalactone nhờ sự hoá đặc acyl-ACP cùng succinyl CoA. Tuy nhiên có rất ít tài liệu nói về khả năng có thể của việc kết hợp giữa hoá sinh hoặc sinh lý học với tổng hợp -decalactone. 1.4.2. Con đờng biến đổi sinh học (biotransformation) -Decalactone và những lactone khác đợc sản xuất trong công nghiệp bằng cách chuyển hoá acid ricinoleic, acid béo cơ bản của dầu thầu dầu nhờ vi sinh vật. acid ricinoleic đầu tiên bị biến đổi thành acid 4-hydroxy-decanoic sau đó đóng vòng lacton để tạo ra -decalactone . Con đờng biến đổi ricinoleic acid tạo -decalactone Phản ứng đóng vòng lactone xảy ra do sự tác động của enzym hay không cần sự xúc tác của enzym là điều cha rõ ràng. Tổng hợp - decalactone từ nguồn nguyên liệu dầu thầu dầu và acid ricinoleic theo quy mô công nghiệp là mục đích của nhiều công trình nghiên cứu [9,11,12,13,14, 22, 24, 26]. Những vi sinh vật đã đợc biết là có khả năng chuyển hoá acid ricinoleic thành -decalactone rất đa dạng và phong phú bao gồm cả vi khuẩn, nấm men và nấm mốc. Bảng 2: Một số vi sinh vật đã đợc sử dụng cho sản xuất -decalacton và một số lactone khác[9, 11, 13, 22, 25 ]. 7 Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel : 0918.775.368 Chủng VSV Năm Nguyên liệu Sản phẩm Giống Pityrosporum: P.canis P.achydermatis P.orbiculare P.ovale 1980 Acid oleic -decalactone -hexa -hepta -octa Aspergillus oryzae Geotrichum klebahnii Yarrowia lipolytica Candida guilliermondii Candida albicans Candida krusei Candida parakrusei Candida pseudotropicals Candida stellatoidea Candida tropicalis Candida rugosa Hansenula saturnus 1982 Dầu thầu dầu Dầu thầu dầu thuỷ phân Acid ricinoleic -decalactone Aspergillus niger Cladosporium suaveolens Phanerochaetechrysosporiu m Pichia etchellsii 1989 Dầu thầu dầu Dầu hớngdơng Dầu dừa -decalactone -octanolied -decanolied Sporobolomyces odorus Rhodotorula glutinus 1990 Dầu thầu dầu -decalactone -hydroxy- decanoic acid Yarrowia lipolytica HR 145 (DSM 12397) 2001 Dầu thầu dầu -decalactone 8 Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel : 0918.775.368 1.4.3. Cơ chế chuyển hoá acid ricinoleic thành -decalactone ở vi sinh vật. Quá trình chuyển hoá acid ricinoleic xảy ra ở vi sinh vật thực chất là qúa trình -oxi hoá nhờ vào hoạt động của các Acyl Coenzym A oxidase (Aox). Acid ricinoleic bị cắt dần thành từng mẩu 2 cacbon tạo ra Acetyl-CoA, chất này sau đó sẽ biến đổi qua chu trình citric acid và chuỗi hô hấp tế bào tạo năng lợng ATP cung cấp cho hoạt động sống của VSV [2]. Quá trình này tạo ra sản phẩm trung gian acid 4-hydroxy decanoic, nh đã biết ở trên acid này có thể đóng vòng để tạo ra -decalactone. Yves Wache [27,28] và cộng sự đã chứng minh hoạt động của các Aox (Aox1 đến Aox5) đợc mã hoá bởi các gen Pox1- >Pox5 ở nấm men Yarrowia lipolytica có liên quan đến sự tích tụ và tiêu huỷ lactone. Trong đó gen Pox3 mã hoá enzym Aox3 ( chuỗi ngắn-short chain ) có ảnh hởng lớn nhất đến sự tổng hợp -decalactone. ở những chủng đột biến cắt đứt gen Pox3 lợng -decalactone tạo thành tăng lên đáng kể so với chủng hoang dã ( Từ 50mg/l lên đến 220mg/l sau 24 h ). ở các chủng hoang dã sự tạo thành 3-hydroxy--decalactone chiếm phần lớn trong sản phẩm thu đợc đã gợi ra suy nghĩ rằng ở chủng hoang dã quá trình -oxi hoá chịu sự tác động của 3-hydroxy-Acyl-Coenzym A Hydrogenase. Con đờng -oxi hoá biến đổi methyl ricinoleate tạo -decalactone ở nấm men Yarrowia lipolytica theo Yves Wache và cộng sự [28]: 9 Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel : 0918.775.368 + Sản phẩm tạo thành: 1: Dec-3-en-4-Olide 2: -Decalactone 3: Dec-2-en-4-Olide 4: 3-hydroxy--Decalactone 5: 3-keto--Decalactone + Hệ enzymes: Aox: Acyl Coezym A oxidase Ahy: Acyl Co A Hydratase Hdh: 3-hydroxy -Decalactone Thi : 3keto acyl Co A thiolase. Phần 2: Thực nghiệm và kết quả 2.1. Nguyên vật liệu và phơng pháp thực nghiệm 2.1.1. Nguyên vật liệu hoá chất và thiết bị Dầu thầu dầu : Đợc mua tại trung tâm Dầu mỡ, Viện hoá học Công nghiệp. Dầu ở dạng thô, đợc khai thác từ thiết bị ép nóng tại ngay nơi trồng ở Bắc Ninh. 10 [...]... theo thứ tự KFP 346.1; KFP 346.2; KFP 346.3 và đợc giữ trong tủ lạnh để chạy sắc ký khí 2.2 Kết quả thực nghiệm 2.2.1 Phân lập các chủng nấm men chuyển hoá dầu thầu dầu thành chất thơm Từ 28 mẫu lá cây, hoa và đất chúng tôi phân lập đợc 70 chủng nấm men (HRA1-HRA70), trong đó có 41 chủng đợc phân lập từ lá, 18 chủng đợc phân lập từ hoa và 11 chủng đợc phân lập từ đất Sau khi thử hoạt lực chúng tôi tìm... ricinoleic 2.2.2 Tuyển chọn các chủng nấm men có khả năng chuyển hoá dầu thầu dầu từ bộ su tập giống của Viện CNTP: Từ 81 chủng giống trong bộ su tập của viện Công Nghiệp Thực Phẩm sau khi thử khả năng chuyển hoá acid ricinoleic, chúng tôi tuyển chọn đợc 7 chủng (KFP 346; KFP 145; KFP 116; KFP 304; KFP 248; KFP 254; KFP 265) có khả năng chuyển hoá acid ricinoleic thành chất thơm trong đó có 3 chủng tạo mùi... một số chủng nấm men có khả năng chuyển hoá acid ricinoleic thành chất thơm: Các chủng nấm men đợc cấy truyền từ ống giữ giống lên môi trờng MaltGlu 2 0 Bx 2 % Agar và quan sát trên kính hiển vi quang học để sơ bộ xác định hình thái và sơ bộ định tên 15 Website: http://www.docs.vn Email : lienhe@docs.vn Tel : 0918.775.368 Lên men và tách chiết chất thơm tạo thành từ môi trờng nuôi cấy các chủng tạo... chủng có khả năng tạo hơng thơm Tuyển chọn các chủng nấm men có khả năng chuyển hoá dầu thầu dầu từ bộ su tập giống của Viện CNTP: Các chủng giống đợc giữ trong ống eppendorf trong tủ lạnh đợc cấy truyền sang môi trờng 6 trên thạch nghiêng để hoạt hoá chủng Pha môi trờng 2 đong vào các ống nghiệm 2ml/ống Bổ xung 20àl acid ricinoleic /ống nuôi cấy ở điều kiện: rung lắc 320 vòng/phút, 25 0C và theo dõi... tròn, bề măt nhẵn 2.2.4 Lên men và tách chiết chất thơm tạo thành từ môi trờng nuôi cấy các chủng tạo hơng - Chủng giống đợc sử dụng để lên men và tách chiết chất thơm gồm: KFP 346, KFP 145, KFP 248, JMC 2320 (Chủng giống trong bộ su tập của bộ môn vi sinh viện: đã định tên là Yarrowia lipolytica ), PDT 7 (chủng phân lập từ tự nhiên của bộ môn có khả năng tạo hơng ): HRA 51 - Các chủng giống đợc cấy truyền... Nhận xét: Trong số các chủng phân lập từ tự nhiên chỉ có chủng HRA 51 tạo mùi thơm mạnh và tồn tại lâu hơn trong môi trờng Qua quan sát hình thái tế bào trên kính hiển vi thì chủng HRA 51 đợc sơ bộ xếp vào chi Candida Trong số các chủng tạo hơng thì có tới 3 chủng: HRA 51; HRA 55; HRA 61 thuộc chi Candida Điều đó có thể đi tới kết luận nấm men thuộc chi Candida có nhiều đại diện có thể chuyển hoá acid... lần 2 Thành phần nh môi trờng làm sạch lần 1nhng không bổ xung acid lactic Môi trờng 6: môi trờng phân lập và giữ giống Thành phần nh môi trờng làm sạch lần 2 2.1.3 Phơng pháp thực nghiệm Phơng pháp phân lập nấm men sử dụng Ricinoleic acid : + Nguyên tắc: Để phân lập nấm men có khả năng chuyển hoá acid ricinoleic chúng tôi sử dụng môi trờng chứa nguồn cacbon duy nhất là acid ricinoleic Nếu nấm men. .. của các chủng phân lập đợc: Chuẩn bị môi trờng 1 và đong vào các ống nghiệm 10 ml có nắp khoảng 3 ml/ống Bổ xung 30àl acid ricinoleic/ống Hấp thanh trùng ở 1 atm/20 phút Các chủng đã phân lập đợc cấy vào các ống nghiệm có chứa môi trờng trên Nuôi cấy trong điều kiện hiếu khí (mở 1/4 nắp ống nghiệm) nhiệt độ 25 0C, lắc 320 vòng /phút Theo dõi mùi tạo ra hàng ngày trong thời gian 2 tuần để chọn chủng có. .. 0918.775.368 đợc 5 chủng (HRA 1; HRA 2; HRA 51; HRA 55; HRA 61 ) có khả năng tạo mùi thơm Bảng 3: ảnh hởng của thời gian nuôi cấy đến sinh trởng và khả năng tạo mùi thơm của 5 chủng HRA 1, HRA 2, HRA 51, HRA 55, HRA 61 Chủng 3 ngày 5 ngày 7 ngày 9 ngày S M S M S M S M HRA 1 - - - - + Thơm ++ Hắc HRA 2 - - - - + Thơm ++ Hắc HRA 51 - - + Thơm + Thơm ++ Hắc HRA 55 - - + Thơm + Hắc ++ Hắc HRA 61 - - + Thơm + Hắc... lấy dịch trong vào ống Fancol giữ trong tủ lạnh để sử dụng cho việc định tính và định lợng chất thơm tạo ra bằng sắc ký khí chiết Định tính và định lợng chất thơm tạo thành trong các dịch n-hecxan bằng sắc ký khí Định tính chất thơm trong dịch chiết bằng cách so sánh đối chiếu vị trí của pic tơng ứng trên sắc đồ trùng với pic của chất chuẩn đối chiếu Định lợng chất thơm tạo thành bằng cách tính diện . hoá dầu thầu dầu thành chất thơm với các mục tiêu sau: - Phân lập từ tự nhiên các chủng nấm men có khả năng chuyển hoá dầu thầu dầu thành chất thơm -decalactone.. để chọn chủng có khả năng tạo hơng thơm. Tuyển chọn các chủng nấm men có khả năng chuyển hoá dầu thầu dầu từ bộ su tập giống của Viện CNTP: Các chủng