ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - - PHẠM THỊ NGUYỆT Tên đề tài: XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN NHANH MỘT SỐ GIỐNG MÍA YT006, BR3280 VÀ TQ2 BẰNG CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chun ngành : Cơng nghệ Sinh học Khoa : CNSH - CNTP Khóa học : 2010 - 2014 Thái Nguyên, 2014 ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM - - PHẠM THỊ NGUYỆT Tên đề tài: XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN NHANH MỘT SỐ GIỐNG MÍA YT006, BR3280 VÀ TQ2 BẰNG CƠNG NGHỆ NI CẤY MƠ TẾ BÀO KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chun ngành : Cơng nghệ Sinh học Khoa : Công nghệ Sinh học Công nghệ Thực phẩm Khóa học : 2010 – 2014 Người hướng dẫn : TS Hà Thị Thúy Viện Di truyền Nơng nghiệp Việt Nam PGS.TS Ngơ Xn Bình Khoa CNSH & CNTP - ĐH Nông Lâm Thái Nguyên Thái Ngun, 2014 LỜI CẢM ƠN Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc, xin chân thành cảm ơn TS Hà Thị Thuý, phó Viện trưởng Viện Di truyền Nơng nghiệp, người tận tình bảo tạo điều kiện giúp tơi hồn thành khóa luận Tôi xin chân thành cảm ơn thầy PGS TS Ngơ Xn Bình hướng dẫn, giúp đỡ tơi thực tập hồn thành khố luận Tơi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới chị Đỗ Thị Vân tận tình bảo tơi suốt thời gian thực tập tồn thể chú, anh chị làm việc Trạm thực nghiệm Công nghệ cao Văng Giang – Hưng Yên, trực thuộc Viện Di truyền Nông Nghiệp Việt Nam Tôi xin gửi lời tri ân biết ơn sâu sắc tới thầy cô khoa Công Nghệ Sinh Học Công Nghệ Thực Phẩm, Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên hướng dẫn giảng dạy tơi suốt q trình học tập trường Cuối cùng, tơi xin cảm ơn gia đình, người thân bạn bè, người hỗ trợ, giúp đỡ động viên suốt thời gian học tập nghiên cứu Tôi xin chân thành cảm ơn! Thái Nguyên, ngày 02 tháng 06 năm 2014 Sinh viên Phạm Thị Nguyệt DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 2.1 Diện tích, suất sản lượng mía giai đoạn 1995 – 2010 Bảng 2.2 Diện tích, suất sản lượng mía phân theo vùng năm 2010 Bảng 4.1 Khả bật chồi giống mía YT006, Br3280 TQ2 sau tuần nuôi cấy 22 Bảng 4.2: Ảnh hưởng IBA 0,1mg/l kết hợp với 2,4-D nồng độ khác lên trình phát sinh mô sẹo lát cắt non giống mía YT006, Br3280 TQ2 (tính theo tỷ lệ %) 24 Bảng 4.3: Ảnh hưởng BAP nồng độ khác kết hợp với Kinetin 0,2mg/l lên trình tái sinh chồi từ callus Giống mía YT006, Br3280 TQ2 sau tuần nuôi cấy 27 Bảng 4.4 Ảnh hưởng nước dừa đến hình thành chồi từ callus giống mía YT006, Br3280 TQ2 sau tuần nuôi cấy 29 Bảng 4.5: Ảnh hưởng trạng thái mơi trường lên q trình hình thành chồi giống mía YT006, Br3280 sau tuần ni cấy 31 Bảng 4.6: Ảnh hưởng trạng thái môi trường lên q trình hình thành chồi giống mía TQ2 sau tuần nuôi cấy 32 Bảng 4.7 Ảnh hưởng BAP nồng độ khác lên q trình hình thànhchồi giống mía YT006, Br3280 sau tuần nuôi cấy 34 Bảng 4.8 Ảnh hưởng BAP nồng độ khác lên trình hình thành chồi giống mía TQ2 sau tuần ni cấy 35 Bảng 4.9 Ảnh hưởng NAA nồng độ khác lên q trình rễ giống mía YT006 sau tuần nuôi cấy 38 Bảng 4.10 Ảnh hưởng NAA nồng độ khác lên q trình rễ giống mía Br3280 sau tuần nuôi cấy 38 Bảng 4.11 Ảnh hưởng NAA nồng độ khác lên trình rễ giống mía TQ2 sau tuần nuôi cấy 39 Bảng 4.12 Nghiên cứu ảnh hưởng chất đến tỷ lệ sống giống mía YT006 vườn ươm 41 Bảng 4.13 Nghiên cứu ảnh hưởng chất đến tỷ lệ sống giống mía Br3280 vườn ươm 42 DANH MỤC CÁC HÌNH Trang Hình 4.1: Phát sinh chồi từ chồi đỉnh giống Br3280 TQ2 23 Hình 4.2: Biểu đồ ảnh hưởng 2,4-D kết hợp với IBA 0,1mg/l lên q trình phát sinh mơ sẹo lát cắt non sau tuần nuôi cấy (theo tỷ lệ %) 25 Hình 4.3: Biểu đồ ảnh hưởng 2,4-D kết hợp với IBA 0,1mg/l lên q trình phát sinh mơ sẹo lát cắt non sau tuần nuôi cấy (theo tỷ lệ %) 25 Hình 4.4: Callus phát sinh sau tuần (bên trái) tuần (bên phải) .26 Hình 4.5: Biểu đồ ảnh hưởng BAP nồng độ khác kết hợp với Kinetin 0,2mg/l lên trình tái sinh chồi từ callus sau tuần ni cấy .27 Hình 4.6: Ảnh hưởng nước dừa đến hình thành chồi giống mía YT006 sau tuần ni cấy 29 Hình 4.7: Biểu đồ ảnh hưởng nước dừa đến hình thành chồi giống mía YT006, Br3280 TQ2 sau tuần nuôi cấy 30 Hình 4.8.: Biểu đồ ảnh hưởng trạng thái mơi trường lên q trình hình thành chồi sau tuần nuôi cấy 32 Hình 4.9: Ảnh hưởng trạng thái mơi trường lên q trình hình thành chồi giống Br3280 sau tuần nuôi cấy 33 Hình 4.10: Biểu đồ ảnh hưởng BAP nồng độ khác lên trình hình thành chồi sau tuần nuôi cấy 35 Hình 4.11: Ảnh hưởng BAP nồng độ khác lên trình hình thành chồi giống Br3280 sau tuần ni cấy 36 Hình 4.12: Biểu đồ ảnh hưởng NAA nồng độ khác lên trình rễ sau tuần nuôi cấy 39 Hình 4.13: Ảnh hưởng NAA mg/l (hình bên trái) NAA 0,5 mg/l (hình bên phải) lên trình rễ giống TQ2 sau tuần ni cấy 40 Hình 4.14 Mía sau 30 ngày ngồi vườn ươm công thức V .43 DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT BAP : 6- Benzyl Amino Purin IBA : 3-Indol Butyric acid NAA : α-Naphthyl Axetic acid 2,4 – D : 2,4-Dichlorophenoxy Axetic acid MS : Mura Shige Skoog CTMT : Công thức môi trường TB : Trung bình CV : Coefficient of Variation (Độ tin cậy) LSD : Least Significant Difference Test (Sai số nhỏ có ý nghĩa) Đ/C : Đối chứng CTTN : Công thức thí nghiệm MỤC LỤC Trang PHẦN 1: MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề 1.2 Mục đích nghiên cứu 1.3 Yêu cầu đề tài 1.4 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 1.4.1 Ý nghĩa khoa học 1.4.2 Ý nghĩa thực tiễn PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU .3 2.1 Giới thiệu mía 2.1.1 Nguồn gốc, vị trí, phân loại mía .3 2.1.2 Đặc điểm hình thái, sinh trưởng phát triển mía 2.1.3 Yêu cầu ngoại cảnh mía 2.1.4 Tình hình sản xuất phân bố .5 2.1.5 Tình hình nghiên cứu nhân giống mía cơng nghệ ni cấy mô tế bào thực vật in vitro giới Việt Nam 2.2 Kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào thực vật ứng dụng 2.2.1 Cơ sở khoa học nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.2.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến nuôi cấy mô tế bào thực vật 2.2.3 Các bước nhân giống in vitro .12 PHẦN 3: ĐỐI TƯỢNG, NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 14 3.1 Đối tượng, phạm vi nghiên cứu 14 3.2 Địa điểm thời gian tiến hành .14 3.3 Nội dung nghiên cứu tiêu theo dõi 14 3.3.1 Nội dung nghiên cứu 14 3.3.2 Phương pháp nghiên cứu .15 3.3.3 Các tiêu theo dõi 20 3.3.4 Phương pháp xử lý số liệu 21 PHẦN 4: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 22 4.1 Kết nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng số chất điều tiết sinh trưởng đến khả tạo chồi hình thành mơ sẹo giống mía YT006, Br3280 TQ2 22 4.1.1 Nghiên cứu khả bật chồi giống mía YT006, Br3280 TQ2 22 4.1.2 Nghiên cứu ảnh hưởng IBA0,1mg/l kết hợp với 2,4-D nồng độ khác kết hợp lên q trình phát sinh mơ sẹo lát cắt non Giống mía YT006, Br3280 TQ2 24 4.2 Kết nghiên cứu ảnh hưởng hàm lượng số chất điều tiết sinh trưởng nồng độ nước dừa đến trình tái sinh chồi từ callus giống mía 26 4.2.1 Nghiên cứu ảnh hưởng Kinetin 0,2mg/l kết hợp với BAP nồng độ khác lên trình tái sinh chồi từ callus giống mía YT006, Br3280 TQ2 .26 4.2.2 Nghiên cứu ảnh hưởng nước dừa lên trình tái sinh chồi Giống mía YT006, Br3280 TQ2 28 4.3 Kết nghiên cứu ảnh hưởng trạng thái môi trường chất điều tiết sinh trưởng (BAP) lên trình nhân nhanh chồi 31 4.3.1 Nghiên cứu ảnh hưởng trạng thái mơi trường lên q trình hình thành chồi Giống mía YT006, Br3280 TQ2 .31 4.3.2 Nghiên cứu ảnh hưởng BAP nồng độ khác lên q trình hình thành chồi Giống mía YT006, Br3280 TQ2 33 4.4 Kết nghiên cứu ảnh hưởng NAA nồng độ khác lên trình rễ Giống mía YT006, TQ2 Br3280 37 4.5 Kết giai đoạn vườn ươm 41 PHẦN 5: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 44 5.1 Kết luận 44 5.2 Đề nghị 44 TÀI LIỆU THAM KHẢO 45 PHẦN MỞ ĐẦU 1.1 Đặt vấn đề Mía cơng nghiệp ngắn ngày quan trọng kinh tế quốc dân nhiều nước khu vực nhiệt đới gió mùa ẩm Nó cung cấp ngun liệu cho ngành cơng nghiệp đường, phục vụ nhu cầu đường nước đường mặt hàng xuất quan trọng Ở nước ta mía nguồn nguyên liệu để chế biến đường coi trồng quan trọng cấu trồng vùng đồi, vùng trung du miền núi Ngoài ra, phụ phẩm ngành cơng nghiệp đường cịn nguồn nguyên liệu quý báu cho ngành công nghiệp giấy, bia, rượu, cồn Nhưng năm gần ngành sản xuất mía đường gặp nhiều khó khăn việc tìm nguồn giống mía có suất chất lượng cao, nhiều giống bị thoái hoá, suất chất lượng thấp, mức độ dịch hại nhiều Trong đó, nhà máy chế biến đường thiếu nguồn cung cấp nguyên liệu mía ổn định đảm bảo mặt giá chất lượng Mía loại khỏe, có khả thích nghi cao với nhiều loại đất từ loại đất bãi ven sông, đất pherarít vùng đồi thấp đất phù sa đê Mía trồng rộng rãi nhiều địa phương nước ta tỉnh đồng sơng Hồng, đồng Cửu Long, Thanh Hóa, Nghệ An, Đồng Nai Nuôi cấy mô tế bào in vitro công nghệ đại cho phép sản xuất giống bệnh với quy mô lớn, cung cấp giống với số lượng lớn cho sản xuất thời gian ngắn nhất, giống hệt bố mẹ đặc tính di truyền, hệ số nhân cao, độ đồng lớn, thể tính ưu việt so với phương pháp nhân giống truyền thống khác Nhiều nước Trung Quốc, Ấn Độ, Đài Loan, Pháp… sử dụng công nghệ cấy mô mắt xích ổn định, hiệu kinh tế cao hệ thống giống nhà máy Ni cấy mơ cịn biện pháp an toàn cung cấp giống bệnh, giảm chi phí thuốc hố học, giúp cho việc nhập nội giống trao đổi nguồn gen Xuất phát từ vấn đề trên, để tìm hiểu nghiên cứu sâu kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào in vitro, đặc biệt nghiên cứu việc nhân nhanh giống mía cơng nghệ invitro góp phần cung cấp liệu hồn thiện cơng nghệ nhân nhanh giống mía YT006, Br3280 TQ2 để có nguồn giống tốt, đảm bảo số lượng chất lượng cho người dân, tiến hành nghiên cứu đề tài: “Xây dựng quy trình nhân nhanh số giống mía YT006, Br3280 TQ2 cơng nghệ ni cấy mơ tế bào” 1.2 Mục đích nghiên cứu Xác định chất điều hịa sinh trưởng thích hợp nồng độ cần bổ sung vào môi trường nuôi cấy số giống mía YT006, Br3280 TQ2 công nghệ nuôi cấy mô tế bào để đạt hiệu nhân nhanh cao 1.3 Yêu cầu đề tài - Xác định ảnh hưởng hàm lượng số chất kích thích sinh trưởng đến khả tạo chồi hình thành mơ sẹo giống mía YT006, Br3280 TQ2 - Xác định ảnh hưởng số chất kích thích sinh trưởng hàm lượngnước dừa đến khả tái sinh chồi giống mía - Xác định ảnh hưởng trạng thái môi trường hàm lượng số chất kích thích sinh trưởng đến q trình nhân nhanh chồi - Xác định ảnh hưởng hàm lượng auxin đến khả rễ tạo hoàn chỉnh giống YT006, Br3280 TQ2 - Xác định giá thể thích hợp để đưa in vitro vườn ươm trước đưa đồng ruộng 1.4 Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài 1.4.1 Ý nghĩa khoa học - Bước đầu hoàn thiện quy trình ni cấy mơ giống mía YT006, Br3280 TQ2 phương pháp invitro - Biết phương pháp nghiên cứu vấn đề khoa học, xử lý phân tích số liệu, cách trình bày báo khoa học 1.4.2 Ý nghĩa thực tiễn Đề xuất quy trình nhân nhanh Giống mía YT006, Br3280 TQ2 công nghệ nuôi cấy mô tế bào in vitro, tạo số lượng lớn giống mía góp phần tạo cấu giống phù hợp cho vùng nguyên liệu với tốc độ nhanh nhất, tạo nguồn vật liệu cho nghiên cứu khoa học, nuôi cấy mơ làm trẻ hóa, bệnh, tăng suất mía cách đáng kể F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE RARE(%) RETB/CAY DAI RE GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 72.356 15 2.4733 15 2.0280 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 23.381 1.8053 2.5 0.0000 0.78145 0.17127 6.9 0.0000 0.67561 0.12396 6.1 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE RARE(%) FILE EA 25/ 5/** 23:43 PAGE Anh huong cua NAA den qua trinh re cua giong TQ2 VARIATE V003 RARE(%) LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 8665.07 2166.27 437.79 0.000 * RESIDUAL 10 49.4817 4.94817 * TOTAL (CORRECTED) 14 8714.55 622.468 BALANCED ANOVA FOR VARIATE RETB/CAY FILE EA 25/ 5/** 23:43 PAGE Anh huong cua NAA den qua trinh re cua giong TQ2 VARIATE V004 RETB/CAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 8.72400 2.18100 61.73 0.000 * RESIDUAL 10 353333 353333E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 9.07733 648381 BALANCED ANOVA FOR VARIATE DAI RE FILE EA 25/ 5/** 23:43 PAGE Anh huong cua NAA den qua trinh re cua giong TQ2 VARIATE V005 DAI RE LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 6.76396 1.69099 64.94 0.000 * RESIDUAL 10 260399 260399E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 7.02436 501740 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE EA 25/ 5/** 23:43 PAGE Anh huong cua NAA den qua trinh re cua giong TQ2 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 RARE(%) 24.2222 71.1111 94.2222 83.1111 75.7778 RETB/CAY 1.50000 1.90000 3.73333 2.50000 2.13333 DAI RE 1.27333 1.72333 3.28000 2.29333 2.05000 SE(N= 3) 1.28429 0.108525 0.931663E-01 5%LSD 10DF 4.04683 0.341968 0.293571 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE EA 25/ 5/** 23:43 PAGE Anh huong cua NAA den qua trinh re cua giong TQ2 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE RARE(%) RETB/CAY DAI RE GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 69.689 15 2.3533 15 2.1240 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 24.949 2.2244 3.2 0.0000 0.80522 0.18797 8.0 0.0000 0.70834 0.16137 7.6 0.0000 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE CAY/KHOM FILE GY 26/ 5/** 16:39 PAGE Anh huong cua chat nen sau 10 giong YT006 VARIATE V003 CAY/KHOM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 2.04267 510667 13.21 0.001 * RESIDUAL 10 386667 386667E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.42933 173524 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE GY 26/ 5/** 16:39 PAGE Anh huong cua chat nen sau 10 giong YT006 VARIATE V004 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 15.9867 3.99667 15.35 0.000 * RESIDUAL 10 2.60333 260333 * TOTAL (CORRECTED) 14 18.5900 1.32786 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA/CAY FILE GY 26/ 5/** 16:39 PAGE Anh huong cua chat nen sau 10 giong YT006 VARIATE V005 SOLA/CAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 2.30933 577333 23.41 0.000 * RESIDUAL 10 246667 246667E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.55600 182571 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE GY 26/ 5/** 16:39 PAGE Anh huong cua chat nen sau 10 giong YT006 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 CAY/KHOM 2.26667 2.66667 2.86667 2.93333 3.40000 CCC 6.51667 7.71667 8.18333 8.71667 9.61667 SOLA/CAY 2.70000 3.16667 3.36667 3.63333 3.83333 SE(N= 3) 0.113529 0.294581 0.906765E-01 5%LSD 10DF 0.357735 0.928234 0.285725 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE GY 26/ 5/** 16:39 PAGE Anh huong cua chat nen sau 10 giong YT006 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CAY/KHOM CCC SOLA/CAY GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 2.8267 15 8.1500 15 3.3400 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.41656 0.19664 7.0 0.0006 1.1523 0.51023 6.3 0.0004 0.42728 0.15706 4.7 0.0001 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE CAY/KHOM FILE JK 26/ 5/** 16:47 PAGE Anh huong cua chat nen sau 10 cua giong Br3280 VARIATE V003 CAY/KHOM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 1.75600 439000 18.29 0.000 * RESIDUAL 10 240000 240000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.99600 142571 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE JK 26/ 5/** 16:47 PAGE Anh huong cua chat nen sau 10 cua giong Br3280 VARIATE V004 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 40.1957 10.0489 70.93 0.000 * RESIDUAL 10 1.41667 141667 * TOTAL (CORRECTED) 14 41.6123 2.97231 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA/CAY FILE JK 26/ 5/** 16:47 PAGE Anh huong cua chat nen sau 10 cua giong Br3280 VARIATE V005 SOLA/CAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 2.34667 586667 14.43 0.000 * RESIDUAL 10 406667 406667E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.75333 196667 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE JK 26/ 5/** 16:47 PAGE Anh huong cua chat nen sau 10 cua giong Br3280 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 CAY/KHOM 2.56667 2.86667 3.00000 3.16667 3.60000 CCC 7.41667 8.50000 9.05000 9.75000 12.3000 SOLA/CAY 2.83333 3.26667 3.50000 3.76667 3.96667 SE(N= 3) 0.894427E-01 0.217307 0.116428 5%LSD 10DF 0.281837 0.684741 0.366870 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE JK 26/ 5/** 16:47 PAGE Anh huong cua chat nen sau 10 cua giong Br3280 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CAY/KHOM CCC SOLA/CAY GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 3.0400 15 9.4033 15 3.4667 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.37759 0.15492 5.1 0.0002 1.7240 0.37639 4.0 0.0000 0.44347 0.20166 5.8 0.0005 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE CAY/KHOM FILE BH 26/ 5/** 22: PAGE Anh huong cua chat nen sau 20 giong YT006 VARIATE V003 CAY/KHOM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 2.69333 673333 32.58 0.000 * RESIDUAL 10 206667 206667E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.90000 207143 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE BH 26/ 5/** 22: PAGE Anh huong cua chat nen sau 20 giong YT006 VARIATE V004 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 87.2457 21.8114 61.12 0.000 * RESIDUAL 10 3.56833 356833 * TOTAL (CORRECTED) 14 90.8140 6.48671 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA/CAY FILE BH 26/ 5/** 22: PAGE Anh huong cua chat nen sau 20 giong YT006 VARIATE V005 SOLA/CAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 1.63333 408333 25.52 0.000 * RESIDUAL 10 160000 160000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 1.79333 128095 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE BH 26/ 5/** 22: PAGE Anh huong cua chat nen sau 20 giong YT006 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 CAY/KHOM 2.40000 2.73333 3.06667 3.13333 3.66667 CCC 14.0833 15.5000 18.3500 19.4000 20.5167 SOLA/CAY 2.66667 2.80000 3.03333 3.23333 3.60000 SE(N= 3) 0.829993E-01 0.344883 0.730297E-01 5%LSD 10DF 0.261534 1.08674 0.230119 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE BH 26/ 5/** 22: PAGE Anh huong cua chat nen sau 20 giong YT006 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CAY/KHOM CCC SOLA/CAY GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 3.0000 15 17.570 15 3.0667 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.45513 0.14376 4.8 0.0000 2.5469 0.59736 3.4 0.0000 0.35790 0.12649 4.1 0.0001 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE CAY/KHOM FILE MN 26/ 5/** 22:40 PAGE Anh huong cua chat nen sau 20 giong Br3280 VARIATE V003 CAY/KHOM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 2.10267 525667 21.31 0.000 * RESIDUAL 10 246667 246667E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.34933 167810 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE MN 26/ 5/** 22:40 PAGE Anh huong cua chat nen sau 20 giong Br3280 VARIATE V004 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 106.883 26.7207 95.72 0.000 * RESIDUAL 10 2.79166 279166 * TOTAL (CORRECTED) 14 109.674 7.83388 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA/CAY FILE MN 26/ 5/** 22:40 PAGE Anh huong cua chat nen sau 20 giong Br3280 VARIATE V005 SOLA/CAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 1.86267 465667 20.54 0.000 * RESIDUAL 10 226667 226667E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.08933 149238 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE MN 26/ 5/** 22:40 PAGE Anh huong cua chat nen sau 20 giong Br3280 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 CAY/KHOM 2.53333 2.83333 3.10000 3.26667 3.63333 CCC 14.0667 15.6167 18.4000 19.5667 21.4667 SOLA/CAY 2.70000 2.93333 3.16667 3.33333 3.73333 SE(N= 3) 0.906764E-01 0.305050 0.869227E-01 5%LSD 10DF 0.285725 0.961222 0.273897 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE MN 26/ 5/** 22:40 PAGE Anh huong cua chat nen sau 20 giong Br3280 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CAY/KHOM CCC SOLA/CAY GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 3.0733 15 17.823 15 3.1733 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.40965 0.15706 5.1 0.0001 2.7989 0.52836 3.0 0.0000 0.38631 0.15055 4.7 0.0001 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE CAY/KHOM FILE NH 26/ 5/** 23:39 PAGE Anh huong cua chat nen sau 30 cua giong YT006 VARIATE V003 CAY/KHOM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 3.42000 855000 24.20 0.000 * RESIDUAL 10 353333 353333E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 3.77333 269524 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE NH 26/ 5/** 23:39 PAGE Anh huong cua chat nen sau 30 cua giong YT006 VARIATE V004 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 83.9826 20.9956 33.12 0.000 * RESIDUAL 10 6.33960 633960 * TOTAL (CORRECTED) 14 90.3222 6.45158 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA/CAY FILE NH 26/ 5/** 23:39 PAGE Anh huong cua chat nen sau 30 cua giong YT006 VARIATE V005 SOLA/CAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 10.8973 2.72433 18.41 0.000 * RESIDUAL 10 1.48000 148000 * TOTAL (CORRECTED) 14 12.3773 884095 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE NH 26/ 5/** 23:39 PAGE Anh huong cua chat nen sau 30 cua giong YT006 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 CAY/KHOM 2.76667 3.06667 3.26667 3.56667 4.16667 CCC 23.3833 25.3900 27.3000 28.6833 30.0667 SOLA/CAY 3.30000 3.76667 4.13333 4.56667 5.80000 SE(N= 3) 0.108525 0.459696 0.222111 5%LSD 10DF 0.341968 1.44852 0.699880 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE NH 26/ 5/** 23:39 PAGE Anh huong cua chat nen sau 30 cua giong YT006 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CAY/KHOM CCC SOLA/CAY GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 3.3667 15 26.965 15 4.3133 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.51916 0.18797 5.6 0.0001 2.5400 0.79622 3.0 0.0000 0.94026 0.38471 8.9 0.0002 | | | | BALANCED ANOVA FOR VARIATE CAY/KHOM FILE SD 26/ 5/** 23:56 PAGE Anh huong cua chat nen sau 30 giong Br3280 VARIATE V003 CAY/KHOM LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 2.55733 639333 39.96 0.000 * RESIDUAL 10 160000 160000E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 2.71733 194095 BALANCED ANOVA FOR VARIATE CCC FILE SD 26/ 5/** 23:56 PAGE Anh huong cua chat nen sau 30 giong Br3280 VARIATE V004 CCC LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 112.735 28.1837 62.34 0.000 * RESIDUAL 10 4.52094 452094 * TOTAL (CORRECTED) 14 117.256 8.37541 BALANCED ANOVA FOR VARIATE SOLA/CAY FILE SD 26/ 5/** 23:56 PAGE Anh huong cua chat nen sau 30 giong Br3280 VARIATE V005 SOLA/CAY LN SOURCE OF VARIATION DF SUMS OF MEAN F RATIO PROB ER SQUARES SQUARES LN ============================================================================= CT 12.6573 3.16433 42.76 0.000 * RESIDUAL 10 740001 740001E-01 * TOTAL (CORRECTED) 14 13.3973 956952 TABLE OF MEANS FOR FACTORIAL EFFECTS FILE SD 26/ 5/** 23:56 PAGE Anh huong cua chat nen sau 30 giong Br3280 MEANS FOR EFFECT CT CT NOS 3 3 CAY/KHOM 3.06667 3.16667 3.40000 3.73333 4.20000 CCC 23.2333 25.8567 27.7833 28.9333 31.3167 SOLA/CAY 3.26667 3.83333 4.16667 4.50000 6.00000 SE(N= 3) 0.730297E-01 0.388198 0.157056 5%LSD 10DF 0.230119 1.22323 0.494890 ANALYSIS OF VARIANCE SUMMARY TABLE FILE SD 26/ 5/** 23:56 PAGE Anh huong cua chat nen sau 30 giong Br3280 F-PROBABLIITY VALUES FOR EACH EFFECT IN THE MODEL SECTION - VARIATE CAY/KHOM CCC SOLA/CAY GRAND MEAN (N= 15) NO OBS 15 3.5133 15 27.425 15 4.3533 STANDARD DEVIATION C OF V |CT SD/MEAN | BASED ON BASED ON % | TOTAL SS RESID SS | 0.44056 0.12649 3.6 0.0000 2.8940 0.67238 2.5 0.0000 0.97824 0.27203 6.2 0.0000 | | | | ... Tên đề tài: XÂY DỰNG QUY TRÌNH NHÂN NHANH MỘT SỐ GIỐNG MÍA YT006, BR3280 VÀ TQ2 BẰNG CÔNG NGHỆ NUÔI CẤY MÔ TẾ BÀO KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chun ngành : Cơng nghệ Sinh... Đề xuất quy trình nhân nhanh Giống mía YT006, Br3280 TQ2 công nghệ nuôi cấy mô tế bào in vitro, tạo số lượng lớn giống mía góp phần tạo cấu giống phù hợp cho vùng nguyên liệu với tốc độ nhanh nhất,... nguồn giống tốt, đảm bảo số lượng chất lượng cho người dân, tiến hành nghiên cứu đề tài: ? ?Xây dựng quy trình nhân nhanh số giống mía YT006, Br3280 TQ2 công nghệ nuôi cấy mô tế bào” 1.2 Mục đích nghiên