ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƯỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN THÀNH LONG Tên đề tài: NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ BỆNH TIÊN MAO TRÙNG (TRYPANOSOMIASIS) Ở ĐÀN TRÂU TẠI HUYỆN CHIÊM HÓA, TỈNH TUYÊN QUANG VÀ THỬ NGHIỆM PHÁC ĐỒ ĐIỀU TRỊ KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC Hệ đào tạo : Chính quy Chuyên ngành : Thú y Khoa : Chăn nuôi - Thú y Khoá : 2010 - 2015 Giáo viên hướng dẫn : ThS. Nguyễn Thu Trang Thái Nguyên, 2014 LỜI CẢM ƠN Được sự nhất trí của Ban giám hiệu nhà trường, Ban chủ nhiệm Khoa Chăn nuôi Thú y, em được phân công về thực tập tại Trạm Thú y huyện Chiêm Hóa tỉnh Tuyên Quang. Đến nay em đã hoàn thành đợt thực tập tốt nghiệp và khóa luận tốt nghiệp của mình. Nhân dịp này, em xin bày tỏ lòng biết ơn và sự kính trọng sâu sắc nhất tới: Ban Giám hiệu Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, Ban Chủ nhiệm khoa, tập thể các thầy cô giáo trong Khoa Chăn nuôi Thú y – Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên đã tận tình giảng dạy, dìu dắt em trong suốt quá trình học và đợt thực tập thực hiện khóa luận này. Đặc biệt, em xin chân thành cảm ơn sự quan tâm, chỉ bảo tận tình của cô giáo hướng dẫn ThS. Nguyễn Thu Trang cùng ThS. Phạm Thị Trang đã giúp đỡ em trong suốt quá trình thực tập tốt nghiệp và hoàn thành khóa luận này. Em xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới Ban lãnh đạo và tập thể cán bộ nhân viên Trạm Thú y huyện Chiêm Hóa đã giúp đỡ em trong quá trình thực tập tốt nghiệp tại cơ sở. Nhân dịp này, em cũng xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới gia đình, bạn bè và các đồng nghiệp đã tạo điều kiện về vật chất cũng như tinh thần động viên em trong suốt quá trình học tập và thực tập tốt nghiệp. Em xin trân trọng gửi tới các thầy cô giáo trong Hội đồng chấm Khóa luận lời cảm ơn chân thành và lời chúc tốt đẹp nhất. Thái Nguyên, ngày tháng năm 2014 Sinh viên Nguyễn Thành Long LỜI NÓI ĐẦU Để trở thành một bác sĩ thú y trong tương lai, ngoài việc phải trang bị cho mình một lượng kiến thức về lý thuyết, mỗi sinh viên cần phải trải qua giai đoạn thực tập thử thách về thực tế, tự mình trau dồi kỹ năng và đạo đức. Chính vì vậy, thực tập tốt nghiệp là một khâu quan trọng đối với các trường Đại học nói chung và Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên nói riêng. Đây là thời gian cần thiết để mỗi sinh viên củng cố và hệ thống lại các kiến thức đã học trong nhà trường, đồng thời giúp sinh viên làm quen với thực tế sản xuất, nâng cao tay nghề, tích lũy kinh nghiệm chuyên môn, áp dụng những kiến thức đã học vào thực tiễn sản xuất, góp phần vào sự phát triển của nền nông nghiệp nước nhà. Xuất phát từ những lý do trên, được sự nhất trí của Ban Giám hiệu nhà trường, Ban Chủ nhiệm Khoa Chăn nuôi Thú y – Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, sự giúp đỡ nhiệt tình của thầy giáo hướng dẫn và sự tiếp nhận của Trạm Thú y huyện Chiêm Hóa, em được về thực tập tốt nghiệp tại cơ sở từ tháng 06 tới tháng 11/2014 thực hiện đề tài “Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh tiên mao trùng (Trypanosomiasis) ở đàn trâu tại huyện Chiêm Hóa, tỉnh Tuyên Quang và thử nghiệm phác đồ điều trị”. Đến nay, thời gian thực tập đã kết thúc và khóa luận tốt nghiệp của em đã hoàn thành. Do thời gian thực tập có hạn, kiến thức chuyên môn và kinh nghiệm chưa nhiều nên kết quả báo cáo khóa luận này không tránh khỏi những thiếu sót. Em kính mong nhận được sự giúp đỡ, thông cảm và những góp ý quý báu của các thầy cô giáo, bạn bè để khóa luận của em được hoàn thiện hơn. Em xin chân thành cảm ơn! Sinh viên Nguyễn Thành Long DANH MỤC CÁC TỪ VIẾT TẮT Cs : Cộng sự TMT : Tiên mao trùng Kg : Kilôgam TT : Thể trọng Nxb : Nhà xuất bản T. evansi : Trypanosoma evansi VGS : Vanant Glycoprotein Surface ISG : Invanant Surface Glycoprotein VAT : Variable Antigen Typet LATEX : Latex Agglutination Test IFAT : Indirect Fluorecent Antibody Test ELISA : Enzym Linked Immunosorbent Assay CATT : Card Agglutination Test for Trypanosomiasis 1 Phần 1 MỞ ĐẦU 1.1. Đặt vấn đề Bệnh tiên mao trùng hay còn gọi là bệnh ngã nước, do Trypanosoma (Trypanosomiasis) là bệnh truyền nhiễm lây giữa người và gia súc do ký sinh trùng đơn bào (Protozoa) lớp trùng roi (Flagellata) gây ra. Trâu mắc bệnh ở thể cấp tính thường sốt cao 40 – 41,7 0 C với các triệu chứng thần kinh như ngã quỵ, kêu rống, đi vòng tròn….Trâu bệnh sẽ chết sau 7 – 15 ngày. Theo số liệu của Phạm Sỹ Lăng (1982) [14], Phan Địch Lân (1994, 2004) [19], Phan Văn Chinh (2006) [4], bệnh tiên mao trùng xuất hiện ở nhiều vùng trên cả nước, với tỷ lệ mắc khá cao: trên trâu là 13 – 30 %, trên bò là 7 – 14%, trong đó tỷ lệ gia súc chết khi gia súc mắc bệnh từ 6,3 – 20%. Khả năng phát sinh và phát triển bệnh tiên mao trùng phụ thuộc nhiều vào điều kiện thời tiết, khí hậu, tập quán chăn nuôi và chế độ làm việc của gia súc. Sự thay đổi các điều kiện trên sẽ ảnh hưởng đến khả năng gây bệnh cũng như dịch tễ bệnh. Huyện Chiêm Hóa, tỉnh Tuyên Quang có địa hình đồi núi, khí hậu nhiệt đới gió mùa, thời tiết nóng ẩm, mưa nhiều là điều kiện thích hợp cho ruồi trâu, mòng (ký chủ trung gian truyền bệnh tiên mao trùng) phát triển. Chúng hút máu truyền bệnh tiên mao trùng từ trâu bệnh sang trâu khỏe làm bệnh phát tán nhanh chóng và có thể gây thiệt hại nặng nề cho người chăn nuôi. Vì vậy, việc nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh và thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh là hết sức cần thiết. Xuất phát từ yêu cầu thực tiễn trên, chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài: “Nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh tiên mao trùng (Trypanosomiasis) ở đàn trâu tại huyện Chiêm Hóa, tỉnh Tuyên Quang và thử nghiệm phác đồ điều trị”. 2 1.2. Mục tiêu nghiên cứu - Xác định các đặc điểm dịch tễ bệnh do Trypanosoma evansi gây ra ở đàn trâu tại huyện Chiêm Hóa – tỉnh Tuyên Quang. - Lựa chọn phác đồ điều trị bệnh tiên mao trùng có hiệu quả, phù hợp với điều kiện chăn nuôi miền núi. - Xây dựng quy trình phòng, trị bệnh, góp phần hạn chế những thiệt hại do bệnh tiên mao trùng cho đàn trâu ở huyện Chiêm Hóa – tỉnh Tuyên Quang. 1.3. Mục đích nghiên cứu Giúp người chăn nuôi trâu hiểu biết thêm về bệnh tiên mao trùng do Trypanosoma evansi gây ra, đồng thời khuyến cáo người chăn nuôi áp dụng các biện pháp phòng và trị bệnh cho trâu có hiệu quả. 1.4. Ý nghĩa của đề tài. 1.4.1. Ý nghĩa trong học tập và nghiên cứu khoa học Kết quả của đề tài là những thông tin khoa học về đặc điểm dịch tễ và quy trình phòng chống bệnh tiên mao trùng ở trâu. 1.4.2. Ý nghĩa trong thực tiễn Kết quả của đề tài là cơ sở khoa học để khuyến cáo người chăn nuôi áp dụng quy trình phòng, trị bệnh tiên mao trùng; nhằm hạn chế tỷ lệ nhiễm và thiệt hại do Trypanosoma evansi gây ra; góp phần nâng cao năng suất chăn nuôi, thúc đẩy ngành chăn nuôi trâu phát triển. 3 Phần 2 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1. Cơ sở khoa học của đề tài 2.1.1. Đặc điểm hình thái, cấu trúc và phân loại Trypanosoma 2.1.1.1. Vị trí của tiên mao trùng Trypanosoma trong hệ thống phân loại động vật học Theo Levine và cs (1980) (dẫn theo Lương Văn Huấn và cs, 1997) [9], vị trí của tiên mao trùng trong hệ thống phân loại nguyên bào (Protozoa) như sau: Ngành Sarcomastigophora Phân ngành Mastigophora Lớp Zoomastigophorasida Bộ Kinetoplastorida Phân bộ Trypanosomatorida Họ Trypanosomatidae Donein, 1901 Giống Trypanosoma Gruby, 1843 Giống phụ Megatrypanum Hoare, 1964 Loài Trypanosoma (M) theileria Giống phụ Herpetosoma Donein, 1901 Loài Trypanosoma (H) leisi Giống phụ Schizotrypanum Chagas, 1909 Loài Trypanosoma (S) cruzi Giống phụ Duttonella Chalmers, 1918 Loài Trypanosoma (D) vivax Loài Trvpanosoma (D) uniform Giống phụ Nalmomonas Hoare, 1964 4 Loài Trypanosoma (N) congolense Loài Trypanosoma (N) siminae Loài Trypanosoma (N) vanhogi Giống phụ Trypanozoon Liihe, 1906 Loài Trypanosoma (T) brucei Loài Trypanosoma (T) gambience Loài Trypanosoma (T) rhodesiense Loài Trypanosoma (T) equiperdum Giống phụ Pycnomonas Hoare, 1964 Loài Trypanosoma (P) suis Giống phụ Trypanosoma Gruby, 1843 Loài Trypanosoma evansi Steel, 1885 Trong các loài tiên mao trùng trên, có 7 loài được tổ chức dịch tễ quốc tế (OIE) thông báo là có khả năng gây bệnh cho người và động vật có vú, đó là: T. brucei, T. congolense, T. cruzi, T. evansi, T. gambiense, T. siminae, T. vivax. 2.1.1.2. Đặc điểm hình thái, cấu tạo của tiên mao trùng Tiên mao trùng T. evansi được xếp vào loại đơn hình thái, cơ thể chỉ là một tế bào, có kích thước nhỏ, chiều dài 18 - 34 µm (trung bình là 25 µm), chiều rộng 1,5 - 2µm. Cơ thể có hình suốt chỉ mảnh hoặc hình thoi, cuối thân nhọn. Nhìn chung, cấu trúc cơ bản của T. evansi cũng giống như cấu trúc của các loài tiên mao trùng khác thuộc họ Trypanosomatidae. Cấu trúc từ ngoài vào trong được chia thành 3 phần chính: - Vỏ: ngoài cùng là lớp vỏ dày 10 - 15 nm, vỏ được chia làm 3 lớp (lớp ngoài và lớp trong cùng tiếp giáp với nguyên sinh chất dầy hơn lớp giữa). Lớp vỏ ngoài cùng được cấu tạo từ các phân tử glycoprotein luôn biến 5 đổi (Vanant Glycoprotein Surface -VGS). Tiếp giáp với lớp trong cùng là 9 cặp vi ống xếp song song dọc theo chiều dài thân tiên mao trùng. Chính nhờ sự sắp xếp của các cặp vi ống nên tiên mao trùng có dạng hình suốt chỉ mảnh (Hoare, 1972 [40]; Phạm Sỹ Lăng, 1982 [14]; Nguyễn Quốc Doanh, 1999 [7]). - Nguyên sinh chất: gồm lớp trong và lớp ngoài. Trong nguyên sinh chất có chứa các nội quan: ribosome có màu thẫm xen kẽ vùng không bào màu sáng, kinetoplast (thể cơ động), mitochrondno, reticulum (lưới nội bào) và mạng lưới golgi. - Nhân: nhân tiên mao trùng có chứa ADN, hình bầu dục hoặc hình trứng. Nhân thường nằm ở vị trí trung tâm hoặc gần vị trí trung tâm cơ thể. Ngoài nhân, về phía cuối thân còn có thể kinetoplast chứa AND (KADN). Từ kinetoplast có một roi chạy vòng quanh thân lên đầu và ra phía ngoài cơ thể thành một roi tự do. Roi của tiên mao trùng có lớp vỏ ngoài cùng giống lớp vỏ của thân. Trong roi có 9 cặp vi ống ở xung quanh và một cặp ở trung tâm, xếp song song dọc chiều dài roi (Hoare, 1972 [40]; Nguyễn Quốc Doanh, 1999 [7]). 2.1.1.3. Cấu trúc kháng nguyên của tiên mao trùng Trypanosoma evansi Kháng nguyên của T. evansi gồm hai loại: kháng nguyên ổn định (kháng nguyên không biến đổi) và kháng nguyên biến đổi * Kháng nguyên ổn định (kháng nguyên không biến đổi) Phần lớn các thành phần kháng nguyên tiên mao trùng không biến đổi trong quá trình sống ký sinh. Bằng phương pháp điện di miễn dịch huyết thanh thỏ tối miễn dịch với T. evansi, Kageruka (1982) đã phát hiện tới 30 thành phần kháng nguyên khác nhau. Có ba loại kháng nguyên không biến đổi ở màng nguyên sinh chất tế bào (ISG: Invanant Surface Glycoprotein): ISG 65, ISG 75 và ISG 100. Do cấu trúc không gian ba chiều và đặc tính ưa 6 nước, các loại này không kết hợp với kháng thể của vật chủ (Nolan, 1997). * Kháng nguyên biến đổi Về kháng nguyên biến đổi, cần đề cập đến sự biến đổi lớp vỏ bề mặt VSG (Variant Surface Glycoprotein), những quan điểm mới về sự xuất hiện kháng nguyên biến đổi của tiên mao trùng và cơ chế di truyền của kháng nguyên biến đổi. Nhờ kháng thể đặc hiệu được đánh dấu mà Vickerman và Luckins (1969) đã phát hiện ra sự biến đổi của lớp kháng nguyên bề mặt. Cross (1975) đã mô tả lớp áo bề mặt của tiên mao trùng có thành phần là glycoprotein bao phủ toàn bộ bề mặt tế bào bằngmột lớp phân tử giống nhau (mỗi tiên mao trùng có 107 phân tử). Lớp áo bề mặt này kích thích cơ thể vật chủ tạo ra kháng thể đặc hiệu với từng type kháng nguyên biến đổi VAT (Variable Antigen Type). Chỉ có kháng nguyên biến đổi mới có khả năng kích thích vật chủ tạo miền dịch chủ động. Người ta ước lượng rằng, một con tiên mao trùng có ít nhất vài trăm hoặc vài nghìn VSG, nghĩa là 5 - 10% số gen của tiên mao trùng cung cấp cho kháng nguyên bề mặt này. Nhiều tác giả nghiên cứu về miễn dịch học cho rằng, tiên mao trùng biến đổi kháng nguyên bề mặt để né tránh miễn dịch đặc hiệu của vật chủ. Tuy nhiên, Van Meirvenne (1975) cho biết, sự biến đổi kháng nguyên bề mặt của ký sinh trùng đã có ngay ở pha đầu tiên của quá trình nhiễm (trước khi xuất hiện đáp ứng miễn dịch của cơ thể vật chủ). Theo Hajduc và Vickernlan (1981), hiện tượng biến đổi kháng nguyên bề mặt của tiên mao trùng còn thấy ở gia súc đã bị tiêm thuốc làm suy giảm miễn dịch. Những quan điểm này là hoàn toàn mới để lý luận về sự xuất hiện kháng nguyên biến đổi của tiên mao trùng. Như vậy, quan điểm về sự biến đổi kháng nguyên lớp vỏ của tiên mao trùng cho đến nay vẫn chưa thống nhất. * Cơ chế di truyền của kháng nguyên biến đổi [...]... và đầu mùa xuân, trâu bò nhiễm tiên mao trùng phải sống trong điều kiện thời tiết lạnh, thiếu thức ăn nên sức đề kháng giảm, bệnh thường phát ra vào thời gian này và trâu bò bị đổ ngã hàng loạt Tiên mao trùng có sức đề kháng yếu, dễ chết khi tiếp xúc với nước cất, cồn và thuốc sát trùng 2.1.3 Đặc điểm bệnh lý và lâm sàng của bệnh 2.1.3.1 Đặc điểm bệnh lý Khi ruồi trâu, mòng đốt, hút máu và truyền tiên. .. tiên mao trùng vào trâu, bò, ngựa, tiên mao trùng xâm nhập vào da, gây ra vết viêm trên mặt da Theo dõi có thể quan sát được phản ứng viêm ở da của thỏ, cừu, dê và bò gây nhiễm thực nghiệm tiên mao trùng, kích thước chỗ viêm phụ thuộc vào số lượng tiên mao trùng được tiêm truyền (ước chừng khoảng 108 tiên mao trùng có thể gây viêm da - ở vị trí tiêm truyền), một số lượng lớn tiên mao trùng phát triển ở. .. Philippine Ở Việt Nam, bệnh tiên mao trùng thấy ở hầu hết các vùng sinh thái khác nhau: miền núi, trung du, đồng bằng, ven biển Theo Phạm Sỹ Lăng (1982) [14], bệnh tiên mao trùng có ở tất cả các tỉnh miền Bắc (Bắc Kạn, Lạng Sơn, Tuyên Quang, Thái Nguyên, Ninh Bình, Hà Tây) Trâu, bò nhiễm bệnh với tỷ lệ cao và thay đổi giữa các vùng khác nhau (trâu, bò ở đồng bằng nhiễm tiên mao trùng cao hơn vùng trung du và. .. Berenyl trị bệnh tiên mao trùng cho trâu bò, thấy kết quả điều trị tốt Phan Văn Chinh (2006) [4] dùng Berenyl điều trị bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò ở các tỉnh miền Trung và cho biết, thuốc đạt hiệu lực 100% với những trâu, bò bị bệnh - Trypamidium samorin, liều 1 mg/kgTT Tiêm sâu bắp thịt Nguyễn Quốc Doanh và cs (1996) [5] đã dùng Trypamidium samorin điều trị bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò và xác... (1994 - 2004) [19] cho biết, kiểm tra ở nhiều địa điểm 12 thấy hai loài mòng T rubidus và T striatus mang tiên mao trùng với tỷ lệ 15,2% và 14,0%; ruồi hút máu Stomoxys calcitrans mang tiên mao trùng với tỷ lệ 12,5% Ở những vùng đang có bệnh tiên mao trùng, kiểm tra ruồi và mòng hút máu dễ dàng tìm thấy tiên mao trùng Sau khi theo máu vào vòi hút ruồi và mòng, tiên mao trùng vẫn sống đến giờ thứ 53, thời... 1992, Tperone M C và cs kiểm tra bò ở Venezuela thấy: bò dưới 3 tháng nhiễm T evansi 13% và bò trên 36 tháng nhiễm 50% Theo Sukanto I P (1992): tỷ lệ lưu hành bệnh tiên mao trùng ở trâu Indonesia cao hơn ở bò và tỷ lệ lưu hành bệnh tiên mao trùng ở bò lại cao hơn ở ngựa Ở Thái Lan, trâu bò của hầu khắp các tỉnh trong cả nước đều nhiễm T evansi nhưng tỷ lệ nhiễm bệnh ở bò cao hơn ở trâu (Nishikawa, Tuntasuvan... còn điều tra ở nhiều tỉnh khác nhau nhưng chỉ thấy ở vùng đồng bằng trâu, bò nhiễm với tỷ lệ 2,71 – 20,00% Lê Ngọc Mỹ và cs (1994) [22], đã điều tra tình hình nhiễm tiên mao trùng ở trâu bò Việt Nam Kết quả cho thấy, trâu bò nhiễm tiên mao trùng với tỷ lệ cao (21,27%), trong đó trâu bò nuôi ở các tỉnh miền núi phía Bắc nhiễm T.evansi cao hơn đồng bằng Theo Lê Đức Quyết và cs (1995) [29], Phạm Chiến và. .. mới đang được thử nghiệm tại một số phòng thí nghiệm hiện đại 2.1.6 Phòng trị bệnh tiên mao trùng cho trâu, bò, ngựa 2.1.6.1 Phòng bệnh Để phòng ngừa bệnh tiên mao trùng có hiệu quả cao, các nhà khoa học đã đề nghị áp dụng 3 biện pháp sau: * Diệt tiên mao trùng trên cơ thể ký chủ Diệt tiên mao trùng ký sinh ở vật chủ không những ngăn chặn được tác hại gây bệnh của chúng mà còn làm cho bệnh mất khả năng... Mỗi đợt sóng tiên mao trùng bắt đầu bằng sự tăng số lượng tiên mao trùng trong máu, sau đó giảm và khó phát hiện thấy tiên mao trùng Mỗi đợt tiên mao trùng tăng lên trong máu là biểu hiện sự xuất hiện một quần thể tiên mao trùng có tính kháng nguyên bề mặt mới, quần thể này có thể tiếp tục sinh sản và tồn tại một thời gian cho đến khi cơ thể xuất hiện kháng thể đặc hiệu với chúng Tiên mao trùng phát... trong máu la và lạc đà vào năm 1880 ở Punjab (Ấn Độ) Năm 1885, Steel phát hiện ký sinh trùng này trong máu la ở Miến Điện, mô tả đặc điểm hình thái và đặt tên là T evansi Blanchard (1886) tìm thấy T evansi trong máu la nhập nội vào Bắc Bộ Việt Nam và mô tả thể bệnh ở la, ngựa và bò… Smith và Kilborme năm 1893 đã nghiên cứu về vai trò của ve mòng trong truyền bệnh TMT ở trâu và bò Bệnh được đưa vào Bắc Mỹ . dịch tễ bệnh tiên mao trùng (Trypanosomiasis) ở đàn trâu tại huyện Chiêm Hóa, tỉnh Tuyên Quang và thử nghiệm phác đồ điều trị . 2 1.2. Mục tiêu nghiên cứu - Xác định các đặc điểm dịch tễ bệnh. LONG Tên đề tài: NGHIÊN CỨU ĐẶC ĐIỂM DỊCH TỄ BỆNH TIÊN MAO TRÙNG (TRYPANOSOMIASIS) Ở ĐÀN TRÂU TẠI HUYỆN CHIÊM HÓA, TỈNH TUYÊN QUANG VÀ THỬ NGHIỆM PHÁC ĐỒ ĐIỀU TRỊ KHÓA LUẬN TỐT. nghiên cứu đặc điểm dịch tễ bệnh và thử nghiệm phác đồ điều trị bệnh là hết sức cần thiết. Xuất phát từ yêu cầu thực tiễn trên, chúng tôi tiến hành thực hiện đề tài: Nghiên cứu đặc điểm dịch