BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM TĂNG XUÂN LƯU NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM SINH HỌC CỦA BÒ SỮA CHẬM SINH VÀ ỨNG DỤNG HORMONE ĐỂ KHẮC PHỤC Chuyên ngành: Sinh sản bệnh sinh sản gia súc Mã số: 62 64 01 06 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ HÀ NỘI, 2015 Cơng trình hồn thành tại: HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM Người hướng dẫn Khoa học: GS.TSKH Cù Xuân Dần PGS.TS Trần Tiến Dũng Phản biện 1: PGS TS Nguyễn Văn Thanh Học viện Nông nghiệp Việt Nam Phản biện 2: TS Đào Đức Hà Viện Chăn nuôi Phản biện 3: TS Lê Văn Thông Trung tâm Gia súc lớn trung ương Luận án bảo vệ trước Hội đồng đánh giá luận án cấp Học viện họp Học viện nông nghiệp Việt Nam Vào hồi ngày tháng năm 2015 Có thể tìm hiểu luận án thư viện: - Thư viện Quốc gia Việt Nam - Thư viện Học viện Nơng nghiệp Việt Nam MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Chăn ni bị sữa Việt Nam phát triển mạnh năm gần đây, đem lại hiệu kinh tế cao, ổn định thu nhập cho người chăn nuôi Chăn nuôi tập trung chiếm khoảng 35%, cịn lại chăn ni nơng hộ Chăn ni nơng hộ có đặc điểm: quy mô nhỏ, không đồng bộ, thiếu khoa học kỹ thuật khả sinh sản đàn bò thấp, biểu cụ thể tuổi động dục lần đầu cao, khoảng cách hai lứa đẻ dài, tỷ lệ chậm sinh cao Chậm sinh bị sữa tình trạng chung nước vùng Ba Vì, Hà Nội Bò sữa thường bị bệnh buồng trứng thể vàng tồn lưu, u nang buồng trứng khơng hoạt động Có nhiều ngun nhân dẫn đến bệnh chậm sinh bò sữa Bên cạnh yếu tố giống, thức ăn, ni dưỡng, chăm sóc, mùa vụ, vùng miền, phải kể đến yếu tố kỹ thuật: phát động dục, phối giống, điều trị bệnh sinh sản Tất điều ảnh hưởng đến khả sinh sản bò sữa Vì vậy, xuất phát từ yêu cầu rút ngắn tuổi động dục lần đầu, rút ngắn khoảng cách lứa đẻ, tăng số sinh hay nói cách khác tăng sản lượng sữa đời cái, tiến hành đề tài Mục tiêu đề tài Đánh giá thực trạng sinh sản đàn bị sữa ni Ba Vì, Hà Nội tình trạng hoạt động buồng trứng bị chậm sinh, từ giúp cho người chăn ni có thông tin hướng tác động nhằm nâng cao hiệu chăn nuôi Đánh giá động thái hormone progesterone trường hợp buồng trứng hoạt động khơng bình thường (khơng hoạt động, u nang, thể vàng tồn lưu), giúp cho việc chẩn đoán điều trị bệnh sinh sản có hiệu Sử dụng số hormone hướng sinh sản điều trị bệnh buồng trứng để nâng cao khả sinh sản bò sữa Ý nghĩa khoa học thực tiễn đề tài Ý nghĩa khoa học Đề tài làm rõ thêm quy luật hoạt động sinh lý, sinh sản bò sữa nuôi theo vùng sinh thái, giúp cho việc nghiên cứu, sản xuất có tác động phù hợp, chủ động hiệu Kết góp phần bổ sung số liệu, tài liệu khoa học đặc điểm sinh lý sinh sản bị nói chung bị sữa nói riêng khả điều khiển hoạt động sinh sản bò chế phẩm hormone sinh sản Ứng dụng kỹ thuật ELISA để định lượng hormone progesterone (P4), sữa huyết tương, để làm rõ tình trạng hoạt động buồng trứng, hỗ trợ hữu hiệu chẩn đoán lâm sàng (qua trực tràng), nâng cao độ xác kỹ thuật chẩn đốn bệnh buồng trứng, sử dụng hormone có hiệu Ý nghĩa thực tiễn Đề tài đánh giá, phân tích thực trạng sinh sản đàn bị sữa yếu tố hạn chế suất chăn nuôi, giúp cho nhà quản lý có sở để đưa sách, quản lý, kỹ thuật phù hợp nâng cao hiệu chăn nuôi Ứng dụng số chế phẩm hormone hướng sinh sản để điều trị triệu chứng rối loạn sinh sản bị sữa có hiệu khơng tăng suất sinh sản mà hạn chế ảnh hưởng hormne tồn dư sản phẩm chăn ni Những đóng góp luận án Luận án tiếp cận phương pháp nghiên cứu việc xác định, đánh giá, phân loại cụ thể ngun nhân gây chậm sinh bị sữa Đó phương pháp số hóa (định lượng hormone progesterone), kết hợp với phương pháp truyền thống (lâm sàng) làm cho kết lâm sàng xác chẩn đoán điều trị bệnh buồng trứng Việc đưa phác đồ điều trị bệnh cách cụ thể cho trạng thái buồng trứng giúp cho kỹ thuật sở sản xuất áp dụng cách thuận thiện xác hơn, đạt hiệu cao Nhất địa bàn khơng có kỹ thuật giỏi Kết luận án tài liệu tham khảo cho nhà chuyên môn tham khảo dùng giảng dạy, học tập, nghiên cứu ứng dụng thực tiễn sản xuất Chương TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Cơ sở khoa học đề tài Sinh sản đặc tính sinh học tự nhiên gia súc nói chung bị sữa nói riêng nhằm trì bảo vệ nịi giống Hoạt động sinh sản có tính chất quy luật, chịu điều khiển chế thần kinh thể dịch đồng thời phụ thuộc vào môi trường, điều kiện sống Khi người nắm quy luật đó, chúng có tác động điều khiển chúng theo ý muốn để thúc đẩy sản xuất có hiệu hơn, phục vụ nhu cầu thực phẩm ngày tăng xã hội Cụ thể bò sữa, khả sinh sản chúng chịu ảnh hưởng yếu tố: di truyền (giống), độ tuổi, thời tiết khí hậu, phương pháp quản lý, chăm sóc ni dưỡng, kỹ thuật Ngày nay, việc áp dụng tiến kỹ thuật công nghệ sinh học để điều khiển sinh sản khơng cịn vấn đề khó khăn phức tạp Chúng ta chủ động việc gây động dục, gây rụng trứng, điều khiển giới tính thơng qua tác động hormone Chính nhờ kỹ thuật này, suất sinh sản bò sữa nâng lên nhiều 1.2 Một số nghiên cứu nước nước có liên quan đến luận án 1.2.1 Những nghiên cứu nước ngồi Những nghiên cứu bị sữa rằng, nguyên nhân gây tỷ lệ thụ thai thấp bò sữa, bò cao sản cân đối lượng phần ăn (Opsomer et al., 2000), dẫn đến u nang buồng trứng, viêm nhiễm đường sinh dục, sảy thai, chết thai sớm, thai chết lưu, sót nhau, đẻ khó Theo Nakao (1982, 1983), sử dụng kỹ thuật ELISA để phân tích hàm lượng hormone P giúp cho việc chẩn đoán điều trị bệnh sinh sản (u nang, thể vàng, không hoạt động) hiệu hơn, kỹ thuật có hiệu điều khiển sinh sản Dùng kỹ thuật ELISA để chẩn đoán trường hợp bị rối loạn sinh sản bò nghiên cứu Nakao et al (1983), Prakash et al (1987), Lee et al (1996) Dochi et al (1998), Ake-Lopez et al (1999) sử dụng P4 để gây rụng trứng nhiều công nghệ cấy truyền phôi gia súc cho kết tốt Sử dụng P4, prostaglandin (PG) chế phẩm tương đương nghiên cứu Henricks (1986), Agarwal (1987), Buse (1995), Fukui et al., (1999), Baruselli et al (2003), Cutaia et al (2003), Gavara et al (2003), Su et al., (2009) Sử dụng kết hợp GnRH-PGF2α-GnRH-Estradiol nhằm nâng cao khả sinh sản nghiên cứu Martiner et al (2001), Fabio de Rensis et al (2002), Alinmer (2005), Bilego et al (2013), Giordano et al (2013) 1.2.2 Những nghiên cứu nước Nghiên cứu ứng dụng hormone sinh sản (P4, estradiol, GnRH, PGF2α ) Nguyễn Tấn Anh, Nguyễn Văn Thiện, Lưu Kỷ, Trịnh Quang Phong Đào Đức Thà (1995), Nguyễn Thị Ước (1996), Hoàng Kim Giao Nguyễn Thanh Dương (1997), Chung Anh Dũng (2001), Nguyễn Xuân Trạch (2004), Lưu Công Khánh cs (2004), Quản Xuân Hữu, (2006), Tăng Xuân Lưu cs (2010), Trịnh Quang Phong cs (2012) Nghiên cứu, ứng dụng kỹ thuật ELISA xác định hàm lượng (P4) điều trị rối loạn sinh sản thưc Phan Văn Kiểm cs (1998, 2000, 2006), Trần Tiến Dũng cs.(2003), Nguyễn Hùng Nguyệt (2009) Chương PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1 Vật liệu, nội dung phương pháp nghiên cứu 2.1.1 Vật liệu nghiên cứu Đàn bò lai hướng sữa HF (HF ≥ 75%) đến tuổi sinh sản sau đẻ Sữa để định lượng hormone P4, kít chẩn đốn P4 Trường đại học Hiroshima, Nhật Bản (2002) Các chế phẩm hormone hướng sinh sản: P4 (vòng CIDR), PGF2, GnRH hãng Fizer Intervet 2.1.2 Nội dung nghiên cứu 2.1.2.1 Đánh giá tình hình sinh sản đàn bị sữa Ba Vì, Hà Nội Thông qua tiêu: tuổi phối giống lần đầu, tuổi đẻ lứa đầu, khối lượng đẻ lứa đầu, thời gian động dục lại sau đẻ, khoảng cách hai lứa đẻ, tỷ lệ đẻ toàn đàn, tỷ lệ thụ thai, hệ số phối giống, tỷ lệ chậm sinh, tỷ lệ sảy thai, đẻ non tình trạng hoạt động buồng trứng sau đẻ 120 ngày 2.1.2.2 Đánh giá tình trạng hoạt động buồng trứng bò sau đẻ Qua tiêu: Động dục trở lại bò sữa đến 120 ngày sau đẻ, nguyên nhân buồng trứng, ảnh hưởng mùa vụ, lứa đẻ, thể trạng 2.1.2.3 Định lượng hormone P4, để phát bệnh buồng trứng chẩn đoán thai sớm nhằm nâng cao khả sinh sản bò sữa Qua nội dung: Xác định nguyên nhân phương pháp khám qua trực tràng, định lượng P4 sữa trường hợp chậm sinh buồng trứng (thể vàng tồn lưu, u nang buồng trứng, buồng trứng phát triển (thiểu năng)), chẩn đốn có thai sớm 21, 28 35 ngày sau phối giống 2.1.2.4 Ứng dụng số biện pháp kỹ thuật nhằm nâng cao khả sinh sản bò sữa Sử dụng thiết bị đặt âm đạo CIRD; hormone: GnRH, PGF2 2.1.3 Phương pháp nghiên cứu 2.1.3.1 Phương pháp đánh giá tiêu sinh sản Theo dõi ghi chép trực tiếp, qua sổ sách giống điều tra trực tiếp hộ chăn nuôi (theo phương pháp Nguyễn Trọng Tiến cs., 1991) 2.1.3.2 Phương pháp đánh giá thể trạng khám lâm sàng để phân loại buồng trứng bò Chấm điểm thể trạng BCS (Body Condition Scoring In Dairy Cattle) theo phương pháp đánh giá cho điểm Nhật Bản 2.1.3.3 Phương pháp định lượng progesterone (P4) Sử dụng phương pháp định lượng miễn dịch enzyme - ELISA để định lượng P 4, theo phương pháp Isobe et al (2004), Mann et al (2005) Su Thanh Long et al., (2009): 2.1.3.4 Phương pháp xác định bệnh buồng trứng qua định lượng progesterone Áp dụng phương pháp Isoble (2004), Mann et al (2005) Su et al., (2009) 2.1.3.5 Phương pháp xác định bệnh buồng trứng bò qua khám lâm sàng Khám buồng trứng (qua trực tràng) lần liên tiếp cách – 10 ngày (Hoàng Kim Giao Nguyễn Thanh Dương, 1997) 2.1.3.6 Phương pháp ứng dụng số hormone hướng sinh dục để nâng cao khả sinh sản - Sử dụng CIRD, GnRH, PGF2α buồng trứng không hoạt động; - Sử dụng GnRH, PGF2 bò bị u nang buồng trứng; - Sử dụng PGF2 bị vàng tồn lưu; - Sử dụng cơng thức tổng hợp: GnRH-PGF2-PGF2-GnRH trường hợp bò chậm sinh không rõ nguyên nhân; Phương pháp phối giống khám thai cho bị thí nghiệm: Phối giống cho bò kỹ thuật thụ tinh nhân tạo (tinh bò đông lạnh) Thời gian phối giống từ 12-18 kể từ bò xuất động dục (Sato et al., 1992) Định lượng P4 sau 21 ngày khám thai qua trực tràng 45 - 60 ngày sau phối 2.2 Xử lý số liệu Các tiêu tuổi phối giống lần đầu, tuổi đẻ lứa đầu, khối lượng thể đẻ lần đầu, thời gian mang thai, thời gian dộng dục lại sau đẻ, khoảng cách hai lứa đẻ Số liệu thu thập xử lý chương trình Minitab 16 Các tham số thống kê bao gồm dung lượng mẫu (n), giá trị trung bình ( X ), độ lệch chuẩn (SD), giá trị nhỏ (Min), giá trị lớn (Max) Các tiêu bao gồm tỷ lệ đẻ, xẩy thai, đẻ non, sát nhau, hệ số phối giống tỷ lệ thụ thai, tượng chậm sinh, động dục trở lại bò đến 120 ngày sau đẻ, ảnh hưởng mùa vụ đến chức buồng trứng sau đẻ, chẩn đoán lâm sàng bệnh buồng trứng khám qua trực tràng, định lượng progesterone sữa, điều trị bệnh buồng trứng không hoạt động, điều trị bệnh u nang buồng trứng, điều trị bệnh thể vàng tồn lưu, điều trị bò chậm sinh không rõ nguyên nhân phác đồ tổng hợp Các tham số thông kê xác định bao gồm: dung lượng mẫu, tần xuất quan sát tỷ lệ Dữ liệu phân tích thống kê so sánh phép thử (χ2) (Chi-square test) phép thử xác Fisher (Fisher’s exact test) Phép thử xác Fisher sử dụng trường hợp mẫu bé (có giá trị tần suất ước tính lý thuyết