Tiểu luận Tiểu luận TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỚP MỎNG TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỚP MỎNG Các thành viên nhóm Các thành viên nhóm Phan Hoàng Trung Hiếu Phan Hoàng Trung Hiếu Phạm Trung Hiếu Phạm Trung Hiếu Trương Thị Ngọc Duyên Trương Thị Ngọc Duyên Nguyễn Tuấn Phong Nguyễn Tuấn Phong Phạm Ngọc Xuân Phạm Ngọc Xuân I.TỔNG QUAN SẮC KÍ. I.1. Phương pháp sắc kí. - Sắc kí là một họ các kĩ thuật hoá học phân tích dùng để tách các chất trong một hỗn hợp. - Nó bao gồm việc cho mẫu chứa chất cần phân tích trong "pha động", thường là dòng chảy của dung môi, di chuyển qua "pha tĩnh." Pha tĩnh trì hoãn sự di chuyển của các thành phần trong mẫu. Khi các thành phần này di chuyển qua hệ thống với tốc độ khác nhau, chúng sẽ được tách khỏi nhau theo thời gian. - Một cách lí tưởng, mỗi thành phần đi qua hệ thống trong một khoảng thời gian riêng biệt, gọi là "thời gian lưu." - Trong kĩ thuật sắc kí, hỗn hợp được - Trong kĩ thuật sắc kí, hỗn hợp được chuyên chở trong chuyên chở trong chất chất lỏng lỏng hoặc hoặc khí khí và và các thành phần của nó được tách ra do các thành phần của nó được tách ra do sự phân bố khác nhau của các sự phân bố khác nhau của các chất chất tan tan khi chúng chảy qua pha tĩnh rắn hay khi chúng chảy qua pha tĩnh rắn hay lỏng. Nhiều kĩ thuật khác nhau đã được lỏng. Nhiều kĩ thuật khác nhau đã được dùng để phân tích hợp chất phức tạp dùng để phân tích hợp chất phức tạp dựa trên ái tính khác nhau của các chất dựa trên ái tính khác nhau của các chất trong môi trường động khí hoặc lỏng và trong môi trường động khí hoặc lỏng và đối với môi trường đối với môi trường hấp hấp phụ phụ tĩnh mà tĩnh mà chúng di chuyển qua, như chúng di chuyển qua, như giấy giấy , , gelatin gelatin hay gel hay gel magnesium silicate magnesium silicate . . - Sắc kí phân tích được dùng để xác định - Sắc kí phân tích được dùng để xác định danh tính và nồng độ các phân tử trong danh tính và nồng độ các phân tử trong hỗn hợp. Sắc kí tinh chế được dùng để hỗn hợp. Sắc kí tinh chế được dùng để tinh chế các chất có trong hỗn hợp. tinh chế các chất có trong hỗn hợp. I.2. Các kĩ thuật sắc kí I.2. Các kĩ thuật sắc kí - Sắc kí giấy - Sắc kí giấy - Sắc kí lớp mỏng - Sắc kí lớp mỏng - Sắc kí khí-lỏng - Sắc kí khí-lỏng - Sắc kí trao đổi ion - Sắc kí trao đổi ion - Sắc kí ái tính ion kim loại bất động - Sắc kí ái tính ion kim loại bất động - Sắc kí lỏng hiệu năng cao - Sắc kí lỏng hiệu năng cao - Sắc kí thẩm thấu gel - Sắc kí thẩm thấu gel II. TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỚP MỎNG II. TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỚP MỎNG II.1. Sắc kí lớp mỏng II.1. Sắc kí lớp mỏng - Sắc kí lớp mỏng (thin layer chromatography - - Sắc kí lớp mỏng (thin layer chromatography - TLC) là một kĩ thuật TLC) là một kĩ thuật sắc sắc kí kí được dùng để tách được dùng để tách các chất trong hỗn hợp. Phương pháp sắc kí các chất trong hỗn hợp. Phương pháp sắc kí lớp mỏng bao gồm pha tĩnh là một lớp mỏng lớp mỏng bao gồm pha tĩnh là một lớp mỏng các các chất chất hấp hấp phụ phụ , thường là , thường là silica gel silica gel , , aluminium aluminium oxide oxide , hoặc , hoặc cellulose cellulose được phủ được phủ trên một mặt phẳng chất trơ. Pha động bao trên một mặt phẳng chất trơ. Pha động bao gồm dung dịch cần phân tích được hòa tan gồm dung dịch cần phân tích được hòa tan trong một dung môi thích hợp và được hút trong một dung môi thích hợp và được hút lên bản sắc kí bởi lên bản sắc kí bởi mao mao dẫn dẫn , tách dung dịch thí , tách dung dịch thí nghiệm dựa trên tính nghiệm dựa trên tính phân phân cực cực của các thành của các thành phần trong dung dịch. phần trong dung dịch. - Sắc kí lớp mỏng được sử dụng rộng rãi trong - Sắc kí lớp mỏng được sử dụng rộng rãi trong nhiều lĩnh vực: xét nghiệm độ tinh khiết của nhiều lĩnh vực: xét nghiệm độ tinh khiết của các hóa chất phóng xạ trong dược khoa các hóa chất phóng xạ trong dược khoa - Xác định các sắc tố trong tế bào thực vật - Xác định các sắc tố trong tế bào thực vật - Phát hiện thuốc trừ sâu, thuốc diệt côn - Phát hiện thuốc trừ sâu, thuốc diệt côn trùng trong thức ăn, hoặc nhận biết trùng trong thức ăn, hoặc nhận biết những hóa chất trong một chất cho sẵn những hóa chất trong một chất cho sẵn - Giám sát các phản ứng hữu cơ - Giám sát các phản ứng hữu cơ - Một số cải tiến có thể kết hợp phương - Một số cải tiến có thể kết hợp phương pháp truyền thống để tự động hóa một pháp truyền thống để tự động hóa một vài bước, làm tăng độ dung giải của sắc vài bước, làm tăng độ dung giải của sắc kí lớp mỏng và cho số liệu chính xác kí lớp mỏng và cho số liệu chính xác hơn. Phương pháp này được gọi là hơn. Phương pháp này được gọi là sắc sắc kí kí lớp lớp mỏng mỏng hiệu hiệu năng năng cao cao (high (high performance TLC - HPTLC). performance TLC - HPTLC). II.2 Chuẩn bị bản sắc kí II.2 Chuẩn bị bản sắc kí - Bản sắc kí được làm bằng cách trộn chất - Bản sắc kí được làm bằng cách trộn chất hấp phụ, như hấp phụ, như silica gel silica gel , với một lượng , với một lượng nhỏ chất trơ để kết dính, như nhỏ chất trơ để kết dính, như calcium sulfate calcium sulfate (thạch cao), và nước. (thạch cao), và nước. Hỗn hợp này được trải ra như một lớp Hỗn hợp này được trải ra như một lớp vữa đặc trên một bề mặt chất trơ, như vữa đặc trên một bề mặt chất trơ, như thủy thủy tinh tinh , nhôm, hoặc nhựa. Bản sắc kí , nhôm, hoặc nhựa. Bản sắc kí này sẽ được để khô và kích hoạt bằng này sẽ được để khô và kích hoạt bằng cách nung nóng trong lò trong 30 phút cách nung nóng trong lò trong 30 phút ở nhiệt độ 110 °C. Độ dày của lớp hấp ở nhiệt độ 110 °C. Độ dày của lớp hấp phụ thường là 0.1-0.25 mm cho phụ thường là 0.1-0.25 mm cho hóa hóa học học phân phân tích tích , và khoảng 1-2mm cho sắc kí , và khoảng 1-2mm cho sắc kí lớp mỏng dự bị. Trong mọi kĩ thuật sắc lớp mỏng dự bị. Trong mọi kĩ thuật sắc kí đều bao gồm 1 pha động và 1 pha kí đều bao gồm 1 pha động và 1 pha tĩnh. tĩnh. III.3 Kĩ thuật III.3 Kĩ thuật - - Sắc Sắc phổ phổ của 10 của 10 tinh tinh dầu dầu được nhuộm được nhuộm màu bởi thuốc thử màu bởi thuốc thử vanillin vanillin - Phương pháp tiến hành giống với - Phương pháp tiến hành giống với sắc sắc kí kí giấy giấy với lợi thế là nhanh hơn, tách hỗn với lợi thế là nhanh hơn, tách hỗn hợp hiệu quả hơn, và có sự lựa chọn hợp hiệu quả hơn, và có sự lựa chọn giữa các "pha tĩnh" khác nhau. Bởi tính giữa các "pha tĩnh" khác nhau. Bởi tính đơn giản và nhanh, sắc kí lớp mỏng đơn giản và nhanh, sắc kí lớp mỏng thường được dùng để giám sát các thường được dùng để giám sát các phản phản ứng ứng hóa hóa học học và phân tích chất và phân tích chất lượng sản phẩm của phản ứng. lượng sản phẩm của phản ứng. [...]... khai, sắc ký đồ được chụp ảnh qua buồng chụp (reprostar 3) và kết quả được đánh giá bằng phần mềm Videoscan II SẮC KÝ GIẤY II.1 Định nghĩa - Sắc ký giấy là một kỹ thuật phân tích hóa học để tách và xác định các hỗn hợp chất hoặc có thể nhuộm màu, đặc biệt là các chất sắc tố - Sắc ký giấy là phương pháp được sử dụng từ rất sớm nhưng ngày nay nó đã được thay thế bằng sắc ký lớp lỏng Nhưng sắc ký lớp mỏng. .. II 5.Phương pháp sắc ký lớp mỏng hiệu năng cao - Phương pháp sắc ký lớp mỏng hiệu năng cao được dùng để định tính, thử tinh khiết và đôi khi để bán định lượng hoặc định lượng hoạt chất thuốc - Về nguyên tắc cơ bản không khác nhiều với sắc ký lớp mỏng thông thường Điểm khác chủ yếu là quá trình chấm sắc ký được điều khiển và thực hiện bằng máy, số vết, lượng dịch chiết sẽ chấm trên bản mỏng được xác lập... mà sắc ký giấy có thể phân tách được,đó là các ion kim loại, các amin, và mọt vài chất khác Sắc ký giấy lan ra bởi phân bố còn sắc ký lớp mỏng lan ra bởi mao dẫn, tuy vậy quá trình tiến hành là giống nhau Vì vậy ta sẽ xét nhiều tới phương pháp thông dụng hơn để có thể hiểu rõ cho cả hai phương pháp này IV KẾT LUẬN - Như vậy: sắc kí lớp mỏng giúp phân tích được trong một hợp chất có bao nhiêu chất và. .. sắc kí trong bước cuối cùng và lutein là hợp chất đầu tiên nhuộm màu vàng lên bản sắc kí Bước 1 Bước 2 Bước 3 Bước 4 Bước 5 Bước 6 Bước 7 - Trong một nghiên cứu, sắc kí lớp mỏng đã được sử dụng để lọc phản ứng hóa học hữu cơ, như tổng hợp BINAP từ 2-naphtol Trong phương pháp này, cồn và dung dịch xúc tác (chẳng hạn như iron(III) chloride được đặt riêng rẽ trên đường gốc, sau đó phản ứng với nhau và. .. trình sắc kí lớp mỏng: một hỗn hợp của một hợp chất đỏ và một hợp chất lam được tách biệt trong quá trình sắc kí (dung môi màu xanh nhạt di chuyển lên trên bản sắc kí) - Dung môi thích hợp dùng trong sắc kí lớp mỏng sẽ là một dung môi có tính phân cực khác với pha tĩnh Nếu một dung môi phân cực được dùng để hòa tan mẫu thử trên một pha tĩnh phân cực, vệt nhỏ mẫu thử sẽ lan tròn do mao dẫn, và các... thấm lên bản sắc kí, khoảng 1 cm từ dưới lên Bản sắc kí sau đó được nhúng vào một dung môi thích hợp, như ethanol hoặc nước, và được đặt vào trong một vật chứa có nắp Dung môi di chuyển lên bản sắc kí bởi mao dẫn, gặp phải mẫu thử và dịch chuyển mẫu thử lên bản sắc kí Các hợp chất khác nhau trong hỗn hợp mẫu thử dịch chuyển với tốc độ khác nhau do chúng có sức hút khác nhau đối với pha tĩnh, và độ tan... bởi sắc kí lớp mỏng Các mẫu thử được thấm lên bản sắc kí bằng một ống mao dẫn: một vệt nhỏ chất ban đầu, một vệt nhỏ từ hỗn hợp phản ứng, và một vệt nhỏ gồm cả 2 chất Một bản sắc kí nhỏ (3 cm x 7 cm) sẽ mất khoảng khoảng hai, ba phút để vận hành Quá trình này phân tích chất lượng và sẽ chỉ ra nếu chất ban đầu biến mất, sản phẩm được tạo thành, và bao nhiêu sản phẩm được tạo thành Đáng tiếc rằng sắc. .. được cho thêm vào chất hấp phụ để có thể quan sát được những vệt này dưới ánh sáng đen (tia cực tím UV254) Lớp hấp phụ vì thế sẽ tự phát ra ánh sáng lục, nhưng các vệt mẫu sẽ làm tắt ánh sáng này - Hơi Iodine cũng là một loại thuốc thử cho màu giống nhau - Một số thuốc thử cho màu riêng biệt được dùng để nhúng bản sắc kí vào, hoặc phun lên bản sắc kí - Trong trường hợp của chất béo, sắc phổ có thể... gel, và tất cả các hợp chất trên bản sắc kí sẽ dịch chuyển lên cao hơn - Trên thực tế, nếu chúng ta dùng một hỗn hợp ethyl acetate và heptane như là pha động, tăng thêm ethyl acetate sẽ cho hệ số lưu Rf cao hơn cho tất cả các hợp chất trên bản sắc kí Thay đổi độ phân cực của pha động sẽ không làm các hợp chất có thứ tự di chuyển ngược lại trên bản sắc kí Nếu muốn có một thứ tự ngược lại trên bản sắc. .. sắc kí lớp mỏng đối với các phản ứng xảy ra ở nhiệt độ thấp có thể cho ra kết quả không đúng, bởi vì các mẫu thử sẽ được làm ấm lên trong mao dẫn Một trong những phản ứng như vậy là phản ứng khử ester bởi DIBALH thành aldehyde - Một ví dụ là sắc kí được áp dụng cho một phần lá xanh (ở đây là rau chân vịt ) qua 7 bước Carotene tách ra nhanh chóng và chỉ quan sát được cho đến bước 2 Chlorophyll A và B . cao - Sắc kí lỏng hiệu năng cao - Sắc kí thẩm thấu gel - Sắc kí thẩm thấu gel II. TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỚP MỎNG II. TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỚP MỎNG II.1. Sắc kí lớp mỏng II.1. Sắc kí lớp mỏng - Sắc. kí lớp mỏng - Sắc kí lớp mỏng - Sắc kí khí-lỏng - Sắc kí khí-lỏng - Sắc kí trao đổi ion - Sắc kí trao đổi ion - Sắc kí ái tính ion kim loại bất động - Sắc kí ái tính ion kim loại bất động - Sắc. Tiểu luận Tiểu luận TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỚP MỎNG TỔNG QUAN VỀ SẮC KÝ LỚP MỎNG Các thành viên nhóm Các thành viên nhóm Phan Hoàng