LUẬN VĂN THẠC SĨ DƯỢC HỌC TỔNG HỢP VÀ KHẢO SÁT TÁC DỤNG CHỐNG OXY HÓA IN VITRO CỦA CÁC DẪN CHẤT CHRYSIN Học viên: Trương Văn Thiện Người hướng dẫn khoa học: TS TRẦN THÀNH ĐẠO NỘI DUNG Phần 1: Mở đầu Phần 2: Tổng quan tài liệu Phần 3: Đối tượng phương pháp nghiên cứu Phần 4: Kết nghiên cứu Phần 5: Bàn luận Phần 6: Kết luận kiến nghị PHẦN 1: MỞ ĐẦU MỞ ĐẦU  Gốc tự do: nguyên nhân bệnh lý thối hóa: rối loạn chức não, ung thư, suy giảm HT miễn dịch…  Các enzym khử độc thể bao gồm:  superoxid dismutase  catalase  glutathion peroxidase  Sự gia tăng mức tác động yếu tố bên giảm khả thu dọn hệ thống enzym / thể  Bổ sung chất chống oxy hóa từ tự nhiên đóng vai trị quan trọng: vitamin A, C, E, selen, kẽm, flavonoid… MỞ ĐẦU (tt)  Chrysin (5,7-dihydroxyflavon)  Một flavonoid phân bố rộng rãi thực vật  Có nhiều tác dụng sinh học như: kháng dị ứng, kháng viêm, kháng ung thư, kháng enzym, chống oxy hóa…  Một số chất tương tự chrysin: wogonin, baicalein, apigenin, tectorigenin oroxylin, ly trích từ thực vật  kháng viêm mạnh chrysin  Các dẫn chất chrysin (6,8-dibromochrysin; 6,8-diiodochrysin; 6,8-dimethylthiochrysin; 6,8-dimethoxychrysin)  kháng viêm tốt chrysin MỞ ĐẦU (tt)  Tuy nhiên chrysin dẫn chất đến chưa nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa cách có hệ thống  Với mục tiêu  Tổng hợp dẫn chất chrysin đa dạng cấu trúc  Nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa cách có hệ thống  Đánh giá liên quan cấu trúc tác dụng sinh học nhằm tìm cơng thức thích hợp MỞ ĐẦU (tt) “Tổng hợp khảo sát tác dụng chống oxy hóa in vitro dẫn chất chrysin” Nội dung cụ thể sau:  Tổng hợp dẫn chất chrysin từ chrysin, rutin dẫn chất 2’-hydroxychalcon  Khảo sát tác dụng chống oxy hóa in vitro dẫn chất chrysin tổng hợp (bao gồm dẫn chất tổng hợp dẫn chất thu thập)  Đánh giá liên quan cấu trúc tác dụng chống oxy hóa PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU TỔNG QUAN TÀI LIỆU  Tổng quan chrysin  Một số phương pháp xác định hoạt tính chống oxy hóa TỔNG QUAN VỀ CHRYSIN  Nguồn gốc Là flavonoid tìm thấy rộng rãi nhiều họ thực vật khác như: passifloraceae, pinaceae 2' HO O 1' 3' 5' 6' OH O 4' Công thức phân tử: C15H10O4 Phân tử lượng: 254,24 Danh pháp: 5,7dihydroxyflavon Bảng kết hoạt tính chống oxy hóa Stt Ký hiệu As0 As60 T (%) As120 T (%) 26 F26 0,681 0,201 10,9 0,048 3,5 27 F27 0,718 0,203 4,5 0,034 -4,3 28 F28 0,668 0,184 10,2 0,070 8,8 29 F29 0,697 0,198 7,4 0,065 3,7 30 F30 0,699 0,362 37,5 0,187 22,0 31 F31 0,687 0,203 10,2 0,064 5,0 32 F32 0,689 0,192 7,8 0,062 4,4 33 F33 0,669 0,198 12,6 0,031 2,7 34 F34 0,701 0,176 2,6 0,018 -4,1 Bảng kết hoạt tính chống oxy hóa Stt Ký hiệu As0 As60 T (%) As120 T (%) 35 F35 0,708 0,183 2,6 0,025 -4,1 36 F36 0,701 0,368 38,2 0,167 18,6 37 F37 0,698 0,204 8,3 0,056 2,1 38 F38 0,658 0,161 7,8 0,009 1,1 39 F39 0,685 0,198 9,6 0,031 0,3 40 F40 0,708 0,188 3,5 0,062 1,5 41 F41 0,681 0,179 6,9 0,050 3,8 42 F42 0,677 0,174 6,7 0,009 -1,8 43 F43 0,691 0,182 5,6 0,017 -2,7 Bảng kết hoạt tính chống oxy hóa Stt Ký hiệu As0 As60 T (%) As120 T (%) 44 F44 0,678 0,145 1,1 0,022 0,0 45 F45 0,695 0,156 0,0 0,018 -3,2 46 F46 0,688 0,144 -0,9 0,008 -3,7 47 F47 0,688 0,140 -1,7 0,013 -2,9 48 F48 0,667 0,152 4,5 0,009 -0,3 49 FB 0,682 0,673 98,3 0,660 96,6 Nhận xét  Sau 60 phút: oxy hóa beta-caroten chưa hồn tồn  Sau 120 phút, q trình oxy hóa xảy hồn tồn mẫu khơng có hoạt tính chống oxy hóa (gần màu hồn tồn beta-caroten)  Có chất có hoạt tính chống oxy hóa F5, F6, F7, F16, F30, F36  Flavonoid: 18,0  68,0%  BHT : 96,6 %, PHẦN 5: BÀN LUẬN  8/48 chất có khả bắt giữ gốc tự DPPH: F5, F6, F7, F9, F16, F27, F30, F36  6/48 chất ức chế trình oxy hóa beta-caroten F5, F6, F7, F16, F30, F36  F5 : 3’,4’,5,7-tetrahydroxyflavon  F6 : 3-hydroxy-3’,4’,5,7-tetramethoxyflavon  F7 : 3,3’,4’,5,7-pentahydroxyflavon  F9 : 3,3’,4’,7-tetraacethoxy-5-hydroxyflavon  F16 : 3’,4’-dihydroxy-7-methoxyflavon  F27 : 5,7-dihydroxy-6,8-dimethylsulfinylflavon  F30 : 3-rutinose-3’,4’,5,7-tetrahydroxyflavon  F36 : 4’-allyl-5,7-dimethoxyflavon Dẫn chất có tác dụng Ký hiệu F5 F6 F7 F9 F16 F27 F30 F36 S30 (%) 95,2 95,2 98,9 86,7 94,1 28,7 98,4 83,5 T120 (%) 26,1 53,2 68 7,9 24,2 -4,3 22 18,6 F7 98,9 68,0 DPPH HO O F16 94,1 24,2 OH F6 H3CO O OH OCH3 H3CO O O OAc OH HO O AcO OH F30 O-Rutinose O OAc F9 OAc OH O O H3CO OH F5 H3CO O OH F16 O F36 OH H3CO O OH F27 HO O SCH3 O H3CS O OH F9 86,7 7,9 O OH HO F6 95,2 53,2 OH OH OH F5 95,2 26,1 OCH3 OH F7 F30 98,4 22,0 Beta-caroten O F36 83,5 18,6 F27 28,7 -4,3 PHẦN 6: KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ KẾT LUẬN Qua thời gian thực đề tài đạt mục tiêu đề thu kết sau:  Tổng hợp 17 dẫn chất chrysin, bao gồm:   chất từ rutin (ký hiệu từ F5 đến F9)   chất từ chrysin (ký hiệu từ F1 đến F4) chất từ dẫn chất 2’-hydroxychalcon (ký hiệu từ F10 đến F17) Thu thập tinh chế 31 mẫu dẫn chất chrysin làm phong phú thêm mẫu thử KẾT LUẬN  Áp dụng oxon muối halogen (NaX) thay cho brom, iod giảm độc hại mơi trường  Xác định tính chất vật lý độ tan, nhiệt độ nóng chảy tiến hành đo phổ UV, IR, 1H NMR chất tổng hợp  Khảo sát tác dụng chống oxy hóa in vitro dẫn chất chrysin  Bước đầu cho thấy có liên quan khả bắt giữ gốc tự hoạt tính chống oxy hóa KẾT LUẬN Cấu trúc có tác dụng chống oxy hóa tốt:  Khung flavon  nhóm OH kế cận (3’, 4’)  nhóm OH cạnh carbonyl (3) OH O OH OH O KIẾN NGHỊ  Tiếp tục tổng hợp thêm dẫn chất 3’-hydroxyflavon  Nghiên cứu có chọn lọc tác dụng chống oxy hóa in vivo dẫn chất 3’-hydroxyflavon  Nên sử dụng quercetin thay rutin  Nghiên cứu thêm độc tính, dược động học chất 3-hydroxy-3’,4’,5,7-tetramethoxyflavon, dự đốn hấp thu tốt phân cực so với quercetin rutin XIN CHÂN THÀNH CÁM ƠN Thầy hướng dẫn: TS TRẦN THÀNH ĐẠO Quý thầy cô mơn Hóa Dược Trung tâm nghiên cứu Khoa học Các anh chị bạn đồng nghiệp mơn Hóa Dược XIN CHÂN THÀNH CÁM ƠN SỰ QUAN TÂM THEO DÕI CỦA QUÝ THẦY CÔ, CÁC ANH CHỊ CÙNG CÁC BẠN! ... ? ?Tổng hợp khảo sát tác dụng chống oxy hóa in vitro dẫn chất chrysin? ?? Nội dung cụ thể sau:  Tổng hợp dẫn chất chrysin từ chrysin, rutin dẫn chất 2’-hydroxychalcon  Khảo sát tác dụng chống oxy hóa. .. hóa in vitro dẫn chất chrysin tổng hợp (bao gồm dẫn chất tổng hợp dẫn chất thu thập)  Đánh giá liên quan cấu trúc tác dụng chống oxy hóa PHẦN 2: TỔNG QUAN TÀI LIỆU TỔNG QUAN TÀI LIỆU  Tổng. .. enzym, chống oxy hóa? ??  Một số chất tương tự chrysin: wogonin, baicalein, apigenin, tectorigenin oroxylin, ly trích từ thực vật  kháng viêm mạnh chrysin  Các dẫn chất chrysin (6,8-dibromochrysin;