hiệm iểm ng m K ẩ ược ph d Đà Nẵng, 7/2011 Kiểm nghiệm dược phẩm Kiểm nghiệm dược phẩm Chương 1: Tổng quan Nhóm Đà Nẵng, 7/2011 Giới thiệu Clopheniramin Các phương pháp xác định TỔNG QUAN Kiểm nghiệm dược phẩm Nhóm  Tên chung quốc tế: Chlorpheniramine  Là viên nén chứa clorpheniramin maleat  Loại thuốc: Thuốc đối kháng thụ thể H1 histamin  Công thức phân tử: C16H19ClN2.C4H4O4  Dạng thuốc hàm lượng: Viên nén: mg, mg, 12 mg Hàm lượng: 90,0 đến 110,0% so với hàm lượng ghi nhãn Đà Nẵng, 7/2011 NMe2 H COOH N Cl COOH Clorpheniramin maleat TỔNG QUAN Kiểm nghiệm dược phẩm Nhóm  Tính chất: Viên nén màu trắng vàng nhạt  Tác dụng dược lý: Có tác dụng an thần, tác dụng phụ chống tiết acetylcholine Tác dụng kháng histamin thông qua phong bế cạnh tranh thụ thể H1 tế bào tác động  Tác dụng động học: Hấp thu tốt uống xuất huyết tương vịng 30 - 60 phút Chuyển hóa nhanh nhiều Thuốc tiết chủ yếu qua nước tiểu Sự tiết phụ thuộc vào pH lưu lượng nước tiểu Đà Nẵng, 7/2011 TỔNG QUAN Kiểm nghiệm dược phẩm Nhóm  Cơng dụng: Chữa viêm mũi dị ứng mùa quanh năm với triệu chứng khác như: mày đay, viêm mũi vận mạch histamin, viêm kết mạc dị ứng, viêm da tiếp xúc, phù mạch, phù Quincke, dị ứng thức ăn, phản ứng huyết thanh, côn trùng đốt, ngứa người bệnh bị sởi thủy đậu Phối hợp số chế phẩm bán thị trường để điều trị triệu chứng ho cảm lạnh  Bảo quản: Ðể nơi khô, mát, tránh ánh sáng Đà Nẵng, 7/2011 TỔNG QUAN Kiểm nghiệm dược phẩm Nhóm phương pháp Đà Nẵng, 7/2011 TỔNG QUAN Kiểm nghiệm dược phẩm Nhóm Nguyên tắc Ứng dụng Đánh giá Đà Nẵng, 7/2011 kĩ thuật sắc ký dùng để tách chất hỗn hợp Bao gồm pha tĩnh lớp mỏng chất hấp phụ, thường silicagel, aluminium oxit, xenlulozo phủ mặt phẳng chất trơ; pha động bao gồm dung dịch cần phân tích hịa tan dung mơi thích hợp hút lên sắc kí mao dẫn, tách dung dịch thí nghiệm dựa tính phân cực thành phần dung dịch Xét nghiệm độ tinh khiết hóa chất phóng xạ dược khoa Xác định sắc tố tế bào thực vật Phát thuốc trừ sâu, thuốc diệt trùng thức ăn Nhận biết hóa chất chất cho sẵn Giám sát phản ứng hữu Quan sát vết xuất hiện, tính giá trị Rf tiến hành định tính, phát tạp chất định lượng Việc sắc ký lớp mỏng tiến hành điều kiện chuẩn hoá cho kết có độ tin cậy cao Hiện người ta thường tiến hành sắc ký với giúp đỡ hệ thống sắc ký lớp mỏng hiệu cao HPLC Kiểm nghiệm dược phẩm Nhóm  Ðại lượng đặc trưng cho mức độ di chuyển chất phân tích hệ số di chuyển Rf tính tỷ lệ khoảng dịch chuyển chất thử khoảng dịch chuyển dung mơi Trong đó: a: khoảng cách từ điểm xuất phát đến tâm vết mẫu thử, tính cm b: khoảng cách từ điểm xuất phát đến mức dung môi đo đường vết, tính cm Rf: Chỉ có giá trị từ đến l Đà Nẵng, 7/2011 TỔNG QUAN Kiểm nghiệm dược phẩm Nhóm  Phương pháp quang phổ hấp phụ tử ngoại dựa khả hấp phụ chọn lọc xạ chiếu vào dung dịch chất phân tích dung mơi định  Tuỳ theo bước sóng, ánh sáng chia thành nhiều vùng sóng: Vùng UV: 200 – 400 nm Vùng VIS: 400 – 800 nm Đà Nẵng, 7/2011 TỔNG QUAN Kiểm nghiệm dược phẩm Nhóm Sự hấp thụ xạ tử ngoại trông thấy:  Phân tử chất có khả hấp thụ cách chọn lọc xạ chiếu qua Phổ hấp thụ phức tạp, khơng có dạng vạch sắc nhọn mà băng phổ trải rộng  Trong phân tử, e có vai trị khác nhau: tham gia liên kết gọi điện tử hóa trị, khơng tham gia liên kết gọi điện tử độc thân  Các e hóa trị tạo liên kết σ π; e không tham gia liên kết lớp vỏ e ngồi Khi e hóa trị tham gia liên kết tạo thành obital liên kết obital phản liên kết (σ σ*, π π*); obital σ có lượng thấp cịn obital σ* có mức lượng cao  Trong điều kiện thường e mức lượng thấp Khi phân tử hấp thụ lượng, e từ mức lượng thấp chuyển lên mức lượng cao  Khi phân tử hấp thụ xạ điện từ để gây bước chuyển lượng điện tử tạo nên hiệu ứng phổ hấp thụ Đà Nẵng, 7/2011 σ** π n π σ 10 TỔNG QUAN Kiểm nghiệm dược phẩm Nhóm  Định luật hấp thụ ánh sáng (định luật Lambe-Bia): Chiếu chùm tia đơn sắc có cường độ I0 qua dung dịch có chiều dày Sau bị hấp thụ, cường độ chùm tia lại I Hệ thức: lg(Io/I) = A = K.C Trong đó: k hệ số hấp thụ phụ thuộc vào cấu tạo chất tan dung dịch A mật độ quang C nồng độ dung dịch Đà Nẵng, 7/2011 11 TỔNG QUAN Kiểm nghiệm dược phẩm Nhóm Máy trắc quang UV-Vis: Chú thích: Hệ tán sắc Nguồn chiếu sáng Cuvét đựng dung dịch (mẫu) Detectơ (tế bào quan điện, nhân quang) Bộ ghi đo (a điện kế, b máy tự ghi hay số, c máy tính) Đà Nẵng, 7/2011 12 Kiểm nghiệm dược phẩm Nhóm Máy sắc ký lớp mỏng Máy quang phổ hấp phụ Đà Nẵng, 7/2011 13 Kiểm nghiệm dược phẩm Nhóm Chương 2: Phần thực nghiệm (Clopheniramin) Định tính ( Sắc ký lớp mỏng) Định lượng (Quang phổ hấp thụ tử ngoại) Đà Nẵng, 7/2011 14 THỰC NGHIỆM Kiểm nghiệm dược phẩm Nhóm Phương pháp sắc ký lớp mỏng •Bản mỏng: Silica gel GF254, sấy 1050C 30 phút trước sử dụng •Dung mơi: Axit axetic 1M – metanol – etyl axetat (20:30:50) •Dung dịch thử: Lắc kỹ lượng bột viên khoảng 5mg clorpheniramin maleat với cloroform, lọc, bay dịch lọc đến cắn Hịa tan cắn ml choroform •Dung dịch so sánh: Dung dịch clorpheniramin maleat chuẩn đối chiếu 0,5% cloroform ãCỏch tin hnh: Chm ln lt àl mi dung dịch lên mỏng Sau triển khai, lấy sắc ký ra, để khơ ngồi khơng khí quan sát ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm Hai vết sắc ký đồ dung dịch thử phải tương ứng vị trí màu sắc với hai vết sắc ký đồ dung dịch so sánh Sau đó, phun dung dịch kali iodobismuthat lên sắc ký Vết thu sắc ký đồ dung dịch thử phải tương ứng vị trí màu sắc với vết sắc ký đồ dung dịch so sánh Đà Nẵng, 7/2011 Tạp chất liên quan •Bản mỏng: Silicagel GF254 •Dung mơi khai triển: Đietylamin – cloroform – xiclohexan (10:40:50) •Dung dịch (1): Lắc kỹ lượng bột viên tương đương khoảng 50 mg clorpheniramin maleat với cloroform, lọc, bay dịch lọc đến cắn Hòa tan cắn ml choroform •Dung dịch (2): Pha lỗng thể tích dung dịch (1) với cloroform thành 500 thể tích •Cách tiến hành: Chấm 10 µ l dung dịch lên mỏng Triển khai sắc ký đến dung môi khoảng 12 cm Lấy sắc ký ra, để khơ ngồi khơng khí quan sát ánh sáng tử ngoại bước sóng 254 nm Những vết phụ sắc ký đồ dung dịch (1) không đậm màu vết sắc ký đồ dung dịch (2) (0,2%) Loại bỏ vết điểm xuất phát 15 THỰC NGHIỆM Kiểm nghiệm dược phẩm Nhóm  Cân xác lượng bột viên khoảng mg clorpheniramin maleat vào bình gạn          có chứa sẵn 20 ml dung dịch axit sulfuric 0,05 M; lắc kỹ phút, thêm 20 ml eter Lắc kỹ lọc Chiết lớp eter với 10 ml dung dịch axit sulfuric 0,05 M Rửa phễu lọc dung dịch acid sulfuric 0,05 M Kiềm hóa dịch lọc dịch rửa dung dịch natri hydroxyd 1M đến làm xanh giấy quỳ, lắc đều,chiết lần, lần với 50 ml eter, rửa dịch chiết eter với 20 ml nước Lấy dịch chiết ether, chiết lần với dung dịch acid sulfuric 0,25 M theo tỉ lệ 20: 20: Lấy dịch chiết axit vào bình định mức 50 ml, thêm dung dịch axit sulfuric 0,25 M tới định mức, lắc Lấy xác 10 ml dung dịch pha loãng với dung dịch acid sulfuric 0,25 M vừa đủ 25 ml, lắc lọc Đo độ hấp thụ dung dịch thu bước sóng 265 nm, cốc đo dày cm, dùng dung dịch acid sulfuric 0,25 M làm mẫu trắng Tính hàm lượng clorpheniramin maleat, C16H19ClN2, theo A (1%,1 cm) Lấy 212 giá trị A (1%, cm) bước sóng cực đại 265 nm Đà Nẵng, 7/2011 16 hiệm iểm ng m K ẩ ược ph d Đà Nẵng, 7/2011 17 Kiểm nghiệm dược phẩm ... máy tính) Đà Nẵng, 7/2011 12 Kiểm nghiệm dược phẩm Nhóm Máy sắc ký lớp mỏng Máy quang phổ hấp phụ Đà Nẵng, 7/2011 13 Kiểm nghiệm dược phẩm Nhóm Chương 2: Phần thực nghiệm (Clopheniramin) Định.. .Kiểm nghiệm dược phẩm Chương 1: Tổng quan Nhóm Đà Nẵng, 7/2011 Giới thiệu Clopheniramin Các phương pháp xác định TỔNG QUAN Kiểm nghiệm dược phẩm Nhóm  Tên chung quốc tế:... thủy đậu Phối hợp số chế phẩm bán thị trường để điều trị triệu chứng ho cảm lạnh  Bảo quản: Ðể nơi khô, mát, tránh ánh sáng Đà Nẵng, 7/2011 TỔNG QUAN Kiểm nghiệm dược phẩm Nhóm phương pháp Đà Nẵng,