Đang tải... (xem toàn văn)
Nha đam còn được gọi là cây Lô hội, tên khoa học là Aloe vera hoặc Aloe barbadensis, thuộc họ Aloeaceae (Liliaceae) . Tên Aloe vera được chính thức công nhận bởi Quy ước quốc tế về danh xưng thực vật (International rules of botanical nomenclature), và A. barbadensis được xem là một tên đồng nghĩa.Tuy nhiên, trong danh mục cây thuốc của Tổ chức y tế thế giới (WHO), Aloe được xem là tên chung của khá nhiều loài khác nhau như Aloe chinensis, A. elongata, A. indica… Ngoài ra, một loài Aloe khác, Aloe ferox cũng được chấp nhận là một cây cung cấp nhựa Aloe.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC KỸ THUẬT CÔNG NGHỆ TP. HCM CHUYÊN ĐỀ: PHÂN TÍCH HOẠT CHẤT TRONG SẢN PHẨM LÔ HỘI GVHD: Ths. Nguyễn Thị Thu Hương SVTH: Tên Lớp MSSV Nguyễn Thị Lan 08DSH4 0851110116 Lê Nguyễn Nhật Thanh 08DSH4 0851110226 Chuyên đề phân tích LỜI CÁM ƠN “Học đi đôi với hành” là một chân lý không bao giờ thay đổi. Hiểu được vấn đề đó nên trong quá trình học tập suốt 4 năm, em đã cố gắng tiếp thu kiến thức từ Thầy Cô và trong quá trình làm đề tài tốt nghiệp này em đã có cơ hội kiểm chứng và hoàn thiện kiến thức cho mình. Để hoàn thành tốt chuyên đề tốt nghiệp, em đã nhận được sự giúp đỡ rất nhiều từ phía ban giám hiệu nhà trường, đặc biết là cán bộ giảng viên khoa MT và CNSH . Vì thế, em xin chân thành cám ơn: - Cán bộ giảng viên khoa MT và CNSH đã tạo điều kiện giúp đở và chỉ dạy trong quá trình học tập tại trường - Đặc biệt là sự nhiệt tình chỉ dẫn và giúp đỡ của Cô Nguyễn Thị Thu Hương là người trực tiếp hướng dẫn giúp em hoàn thành tốt chuyên đề tốt nghiệp nay. - Cám ơn Ba Mẹ là người luôn sát cánh và ủng hộ con. - Cám ơn sự hợp tác của bạn đồng hành, là người cùng hoàn thành chuyên đề tốt nghiệp. Trong quá trình thực hiện chuyên đề khó tránh khỏi những thiếu sót, em rất mong nhận được sự đóng góp chân thành của Thầy Cô Em xin chân thành cảm ơn! 2 GVHD: Ths. Nguyễn Thị Thu Hương SVTH: Nguyễn Thị Lan Lê Nguyễn Nhật Thanh Chuyên đề phân tích MỤC LỤC MỤC LỤC 2 DANH MỤC CÁC HÌNH ẢNH 3 DANH MỤC CÁC BẢNG 2 LỜI MỞ ĐẦU 2 Chương 1. TỔNG QUAN VỀ CÂY NHA ĐAM 5 1.1 Cây nha đam Error: Reference source not found 1.1.1 Phân loại khoa học 6 1.1.2 Đặc điểm hình thái 6 1.1.3 Đặc tính sinh học của cây nha đam 6 1.1.4 Tác dụng dược lý của nha đam 9 1.1.4.1 Tác dụng điều trị của gel nha đam 9 1.1.4.2. Tác dụng trị liệu của nhựa nha đam 12 1.1.5 Các sản phẩm của nha đam 13 Chương 2. PHÂN TÍCH HOẠT CHẤT TRONG SẢN PHẨM NHA ĐAM 14 2.1 Thành phần hóa học của nha đam 14 2.2 Phân tích 15 2.2.1 Anthraquinose bằng phương pháp LC/MS và LC/UV 15 2.2.1.1 Phương pháp 9 2.2.1.2 Dụng cụ - thiết bị - hóa chất 9 2.2.1.3 Các bước tiến hành 9 2.2.2 Vitamin C trong sản phẩm nha đam 17 2.2.2.1 Dụng cụ - thiết bị - hóa chất và thuốc thử 9 2.2.2.2 Các bước tiến hành 9 2.2.3 Thành phần khác(Phytochemycal) của nha đam 17 2.2.3.1 Thiết bị 9 2.2.3.2 Chuẩn bị mẫu 9 2.2.3.3 Điều kiện chạy máy 9 2.2.4Định tính Sapomins, Flavonoids bằng phản ứng màu 17 2.2.4.1 Hóa chất – thiết bị 9 2.2.4.2 Định tính Flavonoids 9 2.2.4.3 Định tính Sapomins 9 TÀI LIỆU THAM KHẢO 2 3 GVHD: Ths. Nguyễn Thị Thu Hương SVTH: Nguyễn Thị Lan Lê Nguyễn Nhật Thanh Chuyên đề phân tích LỜI MỞ ĐẦU • Từ lâu, lô hội đã được biết tới với khả năng làm lành vết thương. Khả năng chữa lành vết bỏng, vết thương hở và giảm đau đã được ghi trong sử sách từ cách đây cả 10 thế kỷ. • Truyền thuyết kể rằng nữ hoàng Cleopatra đã dùng lô hội để duy trì vẻ tươi tắn, mềm mại của làn da. • Lịch sử hiện đại ghi nhận việc sử dụng lô hội là vào thập kỷ 30 của thế kỷ 20. Lô hội là một thành phần chính trong các loại thuốc trị cháy nắng, những vết thương nhỏ, kích ứng da và nhiều loại vết thương nhẹ khác. • Gần đây, lô hội còn trở nên phổ biến khi được đưa vào gel đánh răng. Tương tự như dùng cho da, lô hội trong gel đánh răng có tác dụng làm sạch, làm mềm lợi và có tác dụng chống khuẩn. • Thiên nhiên đã ban tặng cho nhân loại một loại cây thần kỳ, với rất nhiều những ứng dụng tuyệt vời mà chúng ta còn chưa khám phá hết. • Việt Nam, và trên thế giới cây Nha Đam (lô hội) được biết đến như một loài cây cảnh dùng trang trí , và khả năng chữa bệnh của nó. • Lá Lô Hội chứa đến gần 99% là nước, còn lại khoãng hơn 10% là những thành phần quan trọng mà nhóm xin được giới thiệu trong bài. - Phân tích Anthranquinone bằng phương pháp LC/UV và LC/MS - Phân tích vitamin C trong Lô Hội bằng HPLC - Định tính SAPONIN, FLAVONOIDS bằng phản ứng màu - Phân tích một số thành phần khác (phytochemycal) trong lô Hội 4 GVHD: Ths. Nguyễn Thị Thu Hương SVTH: Nguyễn Thị Lan Lê Nguyễn Nhật Thanh Chuyên đề phân tích 5 GVHD: Ths. Nguyễn Thị Thu Hương SVTH: Nguyễn Thị Lan Lê Nguyễn Nhật Thanh Chuyên đề phân tích Chương 1 TỔNG QUAN VỀ CÂY NHA ĐAM 1.1 Cây nha đam 1.1.1 Phân loại khoa học Hình 1.1: Cây Nha Đam (Lô Hội) » Giới Plantae » Loài A. vera (Cây Lô Hội) » Bộ Asparagales » Họ Asphodelaceae (Liliaceae) » Chi Aloe » Không phân hạng Angiospermae Monocots 6 GVHD: Ths. Nguyễn Thị Thu Hương SVTH: Nguyễn Thị Lan Lê Nguyễn Nhật Thanh Chuyên đề phân tích Nha đam còn được gọi là cây Lô hội, tên khoa học là Aloe vera hoặc Aloe barbadensis, thuộc họ Aloeaceae (Liliaceae) . Tên Aloe vera được chính thức công nhận bởi Quy ước quốc tế về danh xưng thực vật (International rules of botanical nomenclature), và A. barbadensis được xem là một tên đồng nghĩa. Tuy nhiên, trong danh mục cây thuốc của Tổ chức y tế thế giới (WHO), Aloe được xem là tên chung của khá nhiều loài khác nhau như Aloe chinensis, A. elongata, A. indica… Ngoài ra, một loài Aloe khác, Aloe ferox cũng được chấp nhận là một cây cung cấp nhựa Aloe. Mỹ gọi cây Aloe vera dưới tên “Curacao Aloes”, còn Aloe ferox dưới tên “Cape Aloes”. Người Pháp gọi dưới những tên : Aloe de Curacao, Aloe du Cap. Đông y gọi là Lô hội. WHO cũng liệt kê tên gọi của Lô hội tại các nước với 78 danh xưng khác nhau… Tại nước ta, A. vera được gọi là Lô hội hoặc Nha đam, Lưỡi hổ. Tên khoa học : Aloe vera L var. Chinensis (Haw) Berger 1.1.2 Đặc điểm hình thái Nha đam thuộc loại cây nhỏ, gốc thân hóa gỗ, ngắn. Lá dạng bẹ, không có cuống, mọc vòng rất sát nhau, màu từ lục nhạt đến lục đậm. Lá mọng nước, mép lá có răng cưa thô như gai nhọn, cứng tùy theo loại, mặt trên lõm có nhiều đốm không đều, lá dài từ 30 - 60 cm. Phát hoa ở nách lá, có thể dài đến 1 m, mang rất nhiều hoa mọc rũ xuống, với 6 cánh hoa dính nhau ở phần gốc, 6 nhị thò. Quả nang chứa nhiều hột. Trong số hơn 300 loài Aloe, ngoài Aloe vera, Aloe ferox… dùng làm thuốc, còn một loài được dùng làm cây cảnh rất đẹp, như Aloe variegata (Lô hội mỏ két) có hoa màu đỏ; Aloe maculata (Lô hội vằn), hoa màu da cam 1.1.3 Đặc tính sinh học của cây nha đam Cây Nha đam rất dễ trồng nơi ráo nước, nhiều nắng nhưng cần tưới 2 - 3 ngày 1 lần. Trồng bằng chồi non phát xuất từ gốc. Có thể trồng trong chậu kiểng. Cây tuy thích ánh sáng mặt trời nhưng cũng chịu được bóng râm 50% và đất cằn cỗi. Aloe vera không phát triển được ở nơi có mùa đông dưới 60 o C 7 GVHD: Ths. Nguyễn Thị Thu Hương SVTH: Nguyễn Thị Lan Lê Nguyễn Nhật Thanh Chuyên đề phân tích 1.1.4 Tác dụng dược lý của nha đam NHA ĐAM TRONG ĐÔNG Y Đông y cổ truyền dùng Nha đam dưới dạng chất nhựa khô từ nhựa lá cô đặc. Dược liệu được lấy từ các loài Aloe vera var. chinensis hay A. ferox trồng tại các tỉnh phía nam. Theo đông y thì Nha đam hay Lư hội có vị đắng, tính hàn, tác dụng vào các kinh thuộc can, vị và đại trường. Nha đam có tác dụng hạ hỏa, tống ứ: dùng để trị táo bón, chóng mặt, mắt đỏ và tinh thần cáu kỉnh do ở “nhiệt” ứ. Dùng chung với Chu sa (Cinnabaris) để trị táo bón kinh niên do nhiệt ứ. Nha đam diệt được ký sinh trùng, và bổ được vị: trị được trẻ em chậm phát triển vì sán lãi. Nha đam “thanh nhiệt” và làm mát gan: trị các chứng đau hạ vị, chóng mặt, nhức đầu, ù tai, cáu bực, bón và sốt nóng do ở nhiệt tại kinh can. Nha đam được dùng chung với rễ Long đởm (Radix Gentianae) và Hoàng cầm (Radix Scutellariae Baicalensis). Liều dùng Nha đam trong đông y: từ 0,3 - 1,5 gr dưới dạng viên, hoàn hoặc bột (không công hiệu khi dùng dưới dạng thuốc sắc). NHA ĐAM TRONG TÂY Y Tây y sử dụng Nha đam như hai loại dược phẩm khác hẳn nhau: gel nha đam và nhựa nha đam 1.1.4.1 Tác dụng điều trị của gel nha đam • Tác dụng trị phỏng và giúp làm lành vết thương: - Khả năng của chất Aloe gel tươi trong việc giúp trị lành các vết thương đã được ghi nhận lần đầu tiên vào năm 1935 khi tạp chí Y khoa Mỹ công bố trường hợp một phụ nữ bị phỏng vì tia X được trị lành bằng cách đắp chất nhày lấy trực tiếp từ lá Aloe tươi - Aloe gel có tác dụng kháng viêm giảm đau, làm giãn nở các vi mạch máu, giúp đưa máu về nuôi dưỡng các tế bào bị hư hại. Tác dụng kháng viêm của Aloe gel đã được giải thích bằng 3 cơ chế sinh học: (1) phân hóa tố (enzym) bradykinase (loại carboxypeptidase) trong Aloe gel có thể ức chế tác dụng gây đau nhức của Bradykinin. (2) Magnesium lactat có khả năng ngăn cản tiến trình 8 GVHD: Ths. Nguyễn Thị Thu Hương SVTH: Nguyễn Thị Lan Lê Nguyễn Nhật Thanh Chuyên đề phân tích tạo histamin. (3) Khi có sự hiện diện của Aloe gel, các chất thromboxan B2 và prostaglandin F2 (các chất gây viêm và gây đau nhức) đều giảm bớt. - Hợp chất loại sterol (lupeol) trong Aloe gel có tác dụng chống sưng rất mạnh. Aloe gel đã được chứng minh là có tác dụng ngăn chặn được sự phát triển của các vi trùng Mycobacterium tuberculosis (bệnh lao), Staphyloccoccus aureus, Streptococcus pyogenes (gây mụn nhọt), Salmonella paratyphi, Pseudomonas, Escherichia coli và các loại nấm gây bệnh như Candida albicans, Trichophyton (nấm tóc), và cả siêu vi Herpes. Hơn nữa, Acemannan, một hợp chất phức tạp trong lá Nha đam cũng cho thấy có khả năng giúp vết thương chóng lành và giảm được các phản ứng tác hại của tia phóng xạ trên da. Cơ chế tác dụng này gồm hai mặt: trước hết Acemannan là một tác nhân kích hoạt đại thực bào rất mạnh và do đó kích thích sự phóng thích các cytokin, và thứ đến là các yếu tố tăng trưởng có thể kết dính trực tiếp với acemannan, tạo sự ổn định và kéo dài khả năng kích ứng tạo mô tế bào. • Tác dụng trị phỏng: Các vết phỏng cấp 1 và 2 khi được chữa trị bằng cách thoa trực tiếp Aloe gel tươi cho thấy thời gian lành vết thương nhanh hơn, đồng thời vết thẹo cũng nhỏ hơn. Tác dụng này được cho là do allantoin trong gel. Aloe gel cũng khá hữu hiệu trong các trường hợp vết thương ngoài da do băng giá và cả phỏng da vì phơi nắng quá độ: khi phân tích tác dụng trên vết thương cho thấy Aloe gel tác dụng như một chất ức chế Thromboxane A2, một chất trung gian gây tiến trình hư hại mô tế bào. • Tác dụng trị nấm nơi bộ phận sinh dục • Tuy những thử nghiệm trong ống nghiệm cho thấy Aloe gel có thể làm Candida albicans (thủ phạm gây bệnh nấm nơi bộ phận sinh dục phụ nữ - yeast infection) ngưng tăng trưởng. Nhưng các kết quả này chưa được FDA chấp nhận. - Khả năng kích thích hệ miễn dịch và trị một vài loại ung thư - Các nhà nghiên cứu tại Đại học y khoa Tokyo đã tìm thấy những lectin trong Aloe gel có khả năng kích thích hệ miễn dịch gia tăng sự sản xuất các đại thực 9 GVHD: Ths. Nguyễn Thị Thu Hương SVTH: Nguyễn Thị Lan Lê Nguyễn Nhật Thanh Chuyên đề phân tích bào có thể tiêu diệt được các vi khuẩn và các tế bào lạ (tế bào ung thư mới phát). - Tại nước ta hiện thời có nhiều người dùng lá Nha đam tươi xay sinh tố luôn cả vỏ để trị bệnh là không tốt vì chất nhựa Aloe trong vỏ màu lục có độc. Ngoài ra trên thị trường có nhiều sản phẩm từ gel Aloe được bán với giá rất đắt là không cần thiết vì không đạt yêu cầu bằng ăn gel tươi. Liều dùng có thể từ 100 - 200 g Aloe gel tươi mỗi ngày. • Aloe gel trong mỹ phẩm - Aloe gel được dùng trong nhiều mỹ phẩm, nhất là những loại kem thoa ngoài da. Nữ hoàng Cleopatra đã từng dùng Aloe gel để thoa da cho bóng, nhưng muốn có một làn da đẹp nên dùng Aloe gel tươi, lấy ngay từ lá, vì đa số các loại gel “ổn định hóa” trong công nghiệp mỹ phẩm dùng trên thị trường như kem thoa mặt, dưỡng da, dưỡng thể và dầu gội đầu lại không hề có tác dụng trị liệu vì các hợp chất thiên nhiên của Aloe gel bị phân hủy do quá trình chế biến, bảo quản. Thông thường thì một nồng độ 40% gel trở lên mới có thể có tác dụng sinh học. Người ta biết chất Aloe gel tươi có tính sát khuẩn và bảo quản tốt cho gel nếu lúc thao tác ta không làm nhiễm trùng miếng gel. - Một số nhà sản xuất mỹ phẩm còn quảng cáo là Nha đam có thể ngăn chặn sự lão hóa của da, nhưng thật ra Aloe gel có khả năng thấm ướt, làm ẩm da (moisturizing) nên tạm thời làm da bớt bị nhăn mà thôi. Aloe gel có thể có tác dụng kích thích sự tổng hợp các chất collagen và sợi elastin, nên có thể ngăn chặn sự hủy hoại của da trong tiến trình của sự lão suy khi ta bôi gel tươi cho da. 1.1.4.2 Tác dụng trị liệu của nhựa nha đam • Tác dụng trị liệu chính thức của nhựa Aloe khô (đông y gọi là Nha đam hay Lư hội) được y học phương Tây chấp nhận là gây xổ, trị táo bón hay nhuận trường nếu dùng liều thấp. Tác dụng làm xổ của nhựa Aloe do hoạt chất 1,8- dihydroanthracen glycosid, aloin A và B. Sau khi uống aloin A và B, không bị hấp thu nơi phần trên của ruột, sẽ bị thủy phân nơi ruột bởi các vi khuẩn để trở thành các chất biến dưỡng có hoạt tính (chất chính là aloe-emodin-9-anthron). 10 GVHD: Ths. Nguyễn Thị Thu Hương SVTH: Nguyễn Thị Lan Lê Nguyễn Nhật Thanh [...]... chế biến và xuất khẩu ở nhiều dạng thành phẩm khác nhau Chương 2 PHÂN TÍCH HOẠT CHẤT TRONG SẢN PHẨM NHA ĐAM 2.1 Thành phần hóa học của Nha Đam: Tùy theo nguồn gốc về chủng loại, Nha Đam có thành phần hóa học khác nhau nhưng căn bản thì có những tính chất sau: Tinh dầu màu vàng có độ sôi 2660 – 2710 0C Nha Đam có mùi hắc đặc biệt, không quan trọng về tác dụng dược lý Nhựa 12 – 13% có tác dụng tẩy Hoạt... FDA khuyến cáo nên dùng các loại dược thảo khác như Muồng (Senna) hoặc Cascara là những dược phẩm có tính xổ nhẹ hơn và an toàn hơn 1.1.5 Các sản phẩm của nha đam 11 Hương GVHD: Ths Nguyễn Thị Thu SVTH: Nguyễn Thị Lan Lê Nguyễn Nhật Thanh Chuyên đề phân tích Cây nha đam được con người biết đến và sử dụng từ lâu Ngày nay, với tính chất ưu việt của nha đam được con người chế biến thành rất nhiều dạng sản... Lư hội làm thuốc xổ (ghi trong German Commission E Mono graph), với cách dùng là sử dụng trích tinh khô đã được tiêu chuẩn hóa (Standardized dry extract, theo Dược điển châu Âu 2 hoặc Dược điển Anh (BP 1988) phải chứa từ 19 đến 21% các chất hydro-anthracen Trích tinh này có lợi điểm là loại được các chất nhựa tạp thường gây ra các phản ứng phụ không tốt Liều đề nghị dùng để xổ là 0,05 đến 0,1 g (5 0... chất trong nha đam - Vitamin: (chiếm 25% – 40% khối lượng) Nha Đam có rất nhiều vitamin với hàm lượng cao, hầu hết các loại vitamin đều có trừ vitamin D Đặc biệt hàm luợng vitamin A (B-caroten), C và E đều cao Một hàm lượng nhỏ vitamin B1, B2, B3, B12 Aloe Vera là một loài đặc biệt có chứa rất nhiều vitamin thích hợp cho người ăn chay - Lignin: Lignin có tác dụng thu hút các chất dinh duỡng Nha Đam vào... đến hiệu quả có ích trong giá trị y học Hợp chất Anthraquinon: Đây là thành phần có tác dụng của nha đam bao gồm: Aloe Emodin (chất này không có trong dịch tươi nha đam) Trong nhựa khô, Aloe Emodin chiếm 0,05%-0,5% chất này tan trong ete, cloroform, benzen Barbaloin: Chiếm 15-30% thành phần nhựa của nha đam Chất này sẽ tan dần khi để ngoài không khí và ánh sáng Tan trong nước, cồn, axeton, rất... V Mẫu được chuyển thành sol khí (aerosol) bởi 1 máy phun sương bằng khí nitrogen (3 0psig) cũng như khí khô tại 10L/phút và khí khô ở nhiệt độ sấy 300 0C Phần mềm QS(Agilent Technologies, palo, CA) đã được sử dụng để thu thập dữ liệu Một cột gemini C18 150x4.6 mm, kích thước hạt 5µm (phenomenex, torrance, CA) đã được sử dụng để tách Cột được trang bị với một cột bảo vệ (supelco, bellefonte, PA) nhằm... uống hằng ngày Gel Nha Đam còn có 11 loại amino acid trong 12 thứ amino acid phụ mà cơ thể đòi hỏi - Acid salicylic: Là một hợp chất tương tự aspirin Nó có tác dụng chống viêm và kháng khuẩn 2.2 Phân tích 2.2.1 Anthranquinone bằng phương pháp LC/MS và LC/UV 2.2.1.1 Phương pháp Sử dụng phương pháp sắc ký lỏng / khối phổ (LC / MS) LC và với đầu dò mảng diode quang (DAD) với tia UV trong (LC / UV) được phát... MS) LC và với đầu dò mảng diode quang (DAD) với tia UV trong (LC / UV) được phát triển để xác định nồng độ của anthraquinon aloe-emodin và aloin-A (barbaloin ) trong các sản phẩm lô hội Các phương pháp này được sử dụng để phân tích một số sản phẩm thương mại (chất lỏng, bán rắn, và rắn) Các bước sóng được sử dụng để định lượng aloin-a, aloe-emodin, và emodin là DAD với bước sóng tương ứng 357.257.289... hợp cho việc xác định các anthraquinon khác nhau trong lô hội 2.2.1.2 Dụng cụ - thiết bị - hóa chất a Dụng cụ: Bình định mức các loại Ống ly tâm 50ml Phễu lọc; giấy lọc và màng lọc 0,45 mm Cốc 50, 100ml Vial đựng mẫu 1,5ml Lọ LC b Thiết bị: Máy ly tâm Máy lắc Vortex Máy sắc ký HPLC Agilent 1100series bao gồm : - Máy bơm bậc bốn - Dung môi đã được khử bọt khí (nhằm tăng hiệu quả của máy bơm và đầu dò)... Khoáng chất (Minerals): (1 1-12% khối lượng) Có các chất calcium 0.8%, potassium, sodium, phosphorus 0.5%, magnesium, zine 60ppm, copper, chromium, các chất bổ thiên nhiên này giúp tăng cường sinh lực, chống mệt mỏi phát sinh từ các sinh hoạt thường nhật Chất chống oxy hóa selenium 0.3ppm, những chức năng chuyên biệt của những hệ enzim khác nhau trong những con đường trao đổi chất khác nhau đều cần . và B còn được gọi là Barbaloin; hydroxy-aloin A và B (từ 3 đến 4%); một ít aloe-emodin và chrysophanol. Các chuyển hóa chất Chromon gồm 8-C- glycosyl chromon, còn gọi aloeisin (khoảng 30%) và