Đang tải... (xem toàn văn)
thực hiện các thao tác dứt khoát, chính xác ở tốc độ đều đặn vừa phải, thỉnh thoảng cho ngón tay nghỉ; thỉnh thoảng đổi vị trí ngồi thả lỏng vai và cánh tay; thực hiện các thao tác dứt khoát, chính xác ở tốc độ đều đặn vừa phải, thỉnh thoảng cho ngón tay nghỉ; thỉnh thoảng đổi vị trí ngồi thả lỏng vai và cánh tay
HƯỚNG DẪN SỬ DỤNG PIPETMAN VÀ CHUẨN BỊ CÁC DÃY PHA LỖNG Bố trí tư thoải mái Thực thao tác dứt khốt, xác tốc độ đặn vừa phải, cho ngón tay nghỉ Thỉnh thoảng đổi vị trí ngồi, thả lỏng vai cánh tay Hướng dẫn sử dụng pipetman (8 quy tắc) 1) Chọn loại pipetman (vd P2 – P10ml) vùng dung tích cần đo Thể tích đo tối thiểu ~10 – 20% thể tích đo tối đa pipet Khơng đặt thể tích q thể tích tối đa 2) Đặt pipetman dung tích cần đo Hướng dẫn sử dụng pipetman (8 quy tắc) 3) Thao tác gắn đầu tip pipet phải Chọn loại đầu típ pipet phù hợp Ấn pipet vào đầu típ kết hợp xoay nhẹ; khơng xoay, có khe hở pipet đầu típ, dẫn đến thể tích hút thực sai pipet nhỏ giọt Hướng dẫn sử dụng pipetman (8 quy tắc) 4) Kiểm tra pipet phân phối thể tích Có thể dùng nước cất cân phân tích (10-4g) để kiểm tra mg = ul = mm3 Sai số khơng nên vượt q 1% dung tích thực cần đo Hướng dẫn sử dụng pipetman (8 quy tắc) 5) Hút dịch quy cách Giữ pipet thẳng Đẩy nút pittơng đến vị trí dừng Đưa đầu típ vào dung dịch Từ từ nhả nút pittơng (khơng có bọt khí) Chờ - giây (để đảm bảo dịch hút lên hoàn toàn) Hướng dẫn sử dụng pipetman (8 quy tắc) 5) Hút dịch quy cách Loại Pipetman Độ sâu bề mặt dung dịch (mm) Thời gian chờ (giây) Hướng dẫn sử dụng pipetman (8 quy tắc) 6) Quan sát nhanh để kiểm tra lượng dung dịch có trong đầu típ pipet Ví dụ: 100 ul chiếm khoảng 1/2 dung tích đầu típ P200 Dung dịch giữ ngun đầu tip, khơng có 7) tượng nhỏ giọt Phân phối (nhả) dung dịch quy cách Đặt đầu típ chạm nhẹ vào thành ống hứng, nghiêng góc ~10 – 15o Đẩy nút pittơng từ từ tới vị trí dừng Chờ – giây để đảm bảo dung dịch chảy Đẩy dứt khốt nút pittơng tới vị trí dừng cuối để nhả toàn dung dịch vào ống đựng Nhấc pipet đầu típ khỏi ống hứng Hướng dẫn sử dụng pipetman (8 quy tắc) 8) Nhả đầu típ; thay đầu típ cho lần thao tác Nhả đầu típ vào ống đựng vật liệu thải ấn vào nút nhả đầu típ Thay đầu típ cho lần pipet Pipetman cần tu, bảo dưỡng theo hướng dẫn nhà sản xuất Cách chuẩn bị dãy pha loãng Dãy pha loãng dùng nhiều qui trình chuẩn độ; với thiết bị phổ biến: máy khuấy từ lắc rung vortex Có kiểu dãy pha lỗng thơng dụng: 1) Dãy pha lỗng tuyến tính: - Nồng độ pha lỗng theo khoảng cách (kiểu cấp số cộng); vd: – 0,2 – 0,4 – 0,6 – 0,8 1,0 ug/ml Dùng phổ biến để dựng đường chuẩn chuẩn độ protein - Dùng công thức C1V1 = C2V2 để xác định lượng dung dịch gốc lượng dung mơi hịa tan (thường H2O đệm) để pha loãng đến nồng độ cuối) Cách chuẩn bị dãy pha loãng 2) Dãy pha loãng logarit: Dùng phổ biến để xác định hoạt độ nhiều hợp chất sinh học (vd xác định hoạt độ enzym, tương tác thuốc – thụ thể), đếm tế bào vi khuẩn, phép thử sinh học liên quan đến biến thiên nồng độ theo hàm logarit 2.1 Dãy pha loãng lần: vd 1, 1/2, 1/4, 1/8, 1/16 … Hãy chuẩn bị dung dịch có nồng độ cao với dung tích gấp đơi lượng cần thiết bổ sung 1/2 lượng vừa pha với thể tích tương đương H2O đệm trộn lặp lại tương tự cho bước pha loãng Cách chuẩn bị dãy pha loãng 2.2 Dãy pha loãng 10 lần: vd 1, 10-1, 10-2, 10-3, 10-4 … Hãy chuẩn bị dung dịch nồng độ cao với dung tích nhiều 10% so với lượng cần thiết thực tương tự pha loãng lần, NHỚ lượng H2O đệm gấp lần dung dịch gốc bước nồng độ trước Cách chuẩn bị dãy pha loãng Khi pha loãng dãy logarit, NHỚ bổ sung trước dung môi (H2O đệm) với thể tích phù hợp giống vào ống bước nồng độ sau dùng pipet hút dịch nồng độ bước trước trộn bổ sung vào nồng độ bước sau lặp lại đặn hết dãy 3) Dãy pha lỗng điều hịa: vd 1, 1/2, 1/3, 1/4, 1/5 … Hãy tăng thể tích dung mơi (H2O đệm) theo cấp số nhân tương ứng (0,1, 2, 3, ….) với lượng dung dịch gốc bổ sung giống vào ống ... pipet Pipetman cần tu, bảo dưỡng theo hướng dẫn nhà sản xuất Cách chuẩn bị dãy pha loãng Dãy pha loãng dùng nhiều qui trình chuẩn độ; với thiết bị phổ biến: máy khuấy từ lắc rung vortex Có kiểu dãy. .. đương H2O đệm trộn lặp lại tương tự cho bước pha loãng Cách chuẩn bị dãy pha loãng 2.2 Dãy pha loãng 10 lần: vd 1, 10-1, 10-2, 10-3, 10-4 … Hãy chuẩn bị dung dịch nồng độ cao với dung tích nhiều... dịch hút lên hoàn toàn) Hướng dẫn sử dụng pipetman (8 quy tắc) 5) Hút dịch quy cách Loại Pipetman Độ sâu bề mặt dung dịch (mm) Thời gian chờ (giây) Hướng dẫn sử dụng pipetman (8 quy tắc) 6) Quan