BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI  PHẠM NHƯ THÙY KHẢO SÁT MỘT SỐ CHỈ TIÊU CỦA VACXIN TỤ DẤU LỢN NHƯỢC ðỘC SẢN XUẤT TẠI XÍ NGHIỆP THUỐC THÚ Y TRUNG ƯƠNG LUẬN VĂN THẠC SĨ HÀ NỘI, NĂM 2013 B Ộ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI  PHẠM NHƯ THÙY KHẢO SÁT MỘT SỐ CHỈ TIÊU CỦA VACXIN TỤ DẤU LỢN NHƯỢC ðỘC SẢN XUẤT TẠI XÍ NGHIỆP THUỐC THÚ Y TRUNG ƯƠNG CHUYÊN NGÀNH: THÚ Y Mà SỐ: 60.64.01.01 NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: TS. TRẦN THỊ LAN HƯƠNG HÀ NỘI, NĂM 2013 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… ii LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan, các số liệu cũng như kết quả trong luận văn này là trung thực và chưa từng ñược công bố trong bất kỳ luận văn nào khác. ðề tài này ñược chính tôi thực hiện với sự giúp ñỡ của các ñồng nghiệp. Các thông tin trích dẫn trong luận văn ñều ñược chỉ rõ nguồn gốc. Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… iii LỜI CẢM ƠN Trước hết, tôi xin chân thành cảm ơn các thầy cô giáo ñang giảng dạy cho học viên cao học chuyên ngành Thú y - Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội ñã tạo ñiều kiện cho tôi ñược thực hiện ñề tài này. Xin chân thành cảm ơn TS. Trần Thị Lan Hương ñã hướng dẫn nghiên cứu khoa học tận tình ñể tôi hoàn thành ñề tài này một cách tốt nhất. Qua ñây tôi cũng xin ñược gửi lời cảm ơn tới Ban giám ñốc Xí nghiệp thuốc Thú y Trung ương cùng toàn thể ñồng nghiệp trong cơ quan ñã tạo mọi ñiều kiện ñể tôi tiến hành thí nghiệm, thu thập số liệu làm tài liệu báo cáo. Tôi vô cùng biết ơn và trân trọng sự giúp ñỡ tận tình quý báu ñó. Hà Nội, ngày tháng năm 2013 Tác giả Phạm Như Thuỳ Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… iv MỤC LỤC Trang Lời cam ñoan ii Lời cảm ơn iii Mục lục iv Danh mục chữ viết tắt vii Danh mục bảng viii Danh mục hình ix MỞ ðẦU 1 1. Tính cấp thiết của ñề tài 1 2. Mục ñích nghiên cứu của ñề tài 2 3. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của ñề tài 2 Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 1.1. Bệnh Tụ huyết trùng và ðóng dấu lợn 3 1.1.1. Bệnh Tụ huyết trùng lợn 3 1.1.2. Bệnh ðóng dấu lợn 4 1.2. ðặc tính sinh học của vi khuẩn Tụ huyết trùng và vi khuẩn ðóng dấu 7 1.2.1. ðặc tính sinh học của vi khuẩn Tụ huyết trùng 7 1.2.2. ðặc tính sinh học của vi khuẩn ðóng dấu 15 1.3. Vacxin phòng bệnh Tụ huyết trùng, ðóng dấu lợn 19 Chương 2 NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 22 2.1. ðối tượng nghiên cứu 22 2.2. Nội dung nghiên cứu 22 2.3. Nguyên liệu nghiên cứu 22 2.4. Phương pháp nghiên cứu 23 Chương 3 KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 29 3.1. Kết quả kiểm tra chất lượng môi trường vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc 29 3.2. Kết quả kiểm tra một số chỉ tiêu kỹ thuật của vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc 35 3.2.1. Kết quả xác ñịnh số lượng vi khuẩn THT và ðD lợn trong canh khuẩn vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc sau khi nuôi cấy 48 giờ 36 3.2.2. Kết quả kiểm nghiệm vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc sản xuất tại Xí nghiệp thuốc Thú y Trung ương 39 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… v 3.3. Kết quả xác ñịnh ảnh hưởng về thời gian bảo quản ñến chất lượng vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc sau thời gian lưu kho ở nhiệt ñộ 2-8 0 C 53 3.3.1. Kết quả xác ñịnh số lượng vi khuẩn THT và ðD trong vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc sau thời gian lưu kho 1, 3, 6, 9 và 10 tháng ở nhiệt ñộ 2-8 0 C 54 3.3.2. Kết quả xác ñịnh hiệu lực của vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc sau khi lưu kho 1, 3, 6, 9 và 10 tháng ở nhiệt ñộ 2-8 0 C 62 KẾT LUẬN 73 TÀI LIỆU THAM KHẢO 75 Tài liệu tiếng Việt 75 Tài liệu tiếng Anh 75 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… vi Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… vii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT CFU: Colony forming unit CNF: Cytotoxic necrotizing factors DNT: Dermonecrotic toxin IL: Interleukin LPS: Lipopolysaccharide MHC: Major histocompatibility complex MLD: Minimum lethal dose M: Mucoid PI: Protective index Pmt: Pasteurella multocida toxin R: Rough RTX: Repeats in toxin S: Smooth SDS-PAGE: Sodium dodecyl sulphate-Polyacrylamide gel electrophoresis SPF: Specified-pathogen-free (Sạch bệnh) TNF: Tumor necrosis factor Md: Miễn dịch THT: Tụ huyết trùng ðD: ðóng dấu ð/c: ðối chứng Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… viii DANH MỤC BẢNG Trang 1.1. ðặc ñiểm khác biệt giữa Mannheimia haemolytica và Pasteurella trehalosi 13 1.2. ðặc ñiểm khác biệt giữa Pasteurella multocida với Pasteurella haemolytica 14 3.1. Kết quả kiểm tra chất lượng môi trường sản xuất vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc 33 3.2. Kết quả xác ñịnh số lượng vi khuẩn THT và ðD trong canh khuẩn vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc 48 giờ 37 3.3. Kết quả kiểm tra chỉ tiêu thuần khiết vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc 41 3.4. Kết quả kiểm tra an toàn vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc 45 3.5. Kết quả kiểm tra hiệu lực vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc 50 3.6. Kết quả xác ñịnh ảnh hưởng về thời gian bảo quản ñến số lượng vi khuẩn THT và ðD trong vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc sau khi lưu kho ở 2-8 0 C 56 3.7. Kết quả xác ñịnh hiệu lực của vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc sau thời gian lưu kho 1, 3, 6 tháng ở 2-8 0 C 66 3.8. Kết quả xác ñịnh hiệu lực của vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc sau thời gian lưu kho 9, 10 tháng ở 2-8 0 C 69 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sỹ khoa học Nông nghiệp ……………………… ix DANH MỤC HÌNH Trang 2.1. Sơ ñồ pha loãng và cấy canh khuẩn vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc 25 3.1. Tiến trình sản xuất vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc tại Xí nghiệp thuốc Thú y Trung ương 30 3.2. Biến ñộng số lượng vi khuẩn THT và ðD lợn sống trong vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc sau thời gian lưu kho ở 2-8 0 C (Lô vacxin I) 60 3.3. Biến ñộng hiệu lực của vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc sau thời gian lưu kho ở 2-8 0 C (Lô vacxin I) 71 [...]... Thú y mi n Trung Vacxin ch a kháng nguyên vi khu n T huy t trùng ch ng AvPS-3 và vi khu n ðóng d u ch ng VR2 Ngoài các s n ph m trong nư c s n xu t, trên th trư ng th gi i còn có các s n ph m khác cũng có tác d ng phòng b nh ðD l n như: - Vacxin Ery Shield, vacxin vô ho t ch a kháng nguyên Erysipelothrix rhusiopathiae, s n ph m c a hãng Novartis - Vacxin Porcilis Ery, vacxin vô ho t ch a kháng nguyên... m quan tr ng ñó, Xí nghi p thu c Thú y Trung ương ñã không ng ng c i ti n s n ph m vacxin T huy t trùng l n, ðóng d u l n ñ ph c v công tác tiêm phòng cho ñàn l n trong c nư c Ban ñ u Xí nghi p ch s n xu t ñư c vacxin ñơn giá phòng riêng b nh T huy t trùng ho c b nh ðóng d u l n, nhưng nay ñã s n xu t ñư c vacxin nh giá phòng ñ ng th i hai b nh T huy t trùng và ðóng d u l n ð n nay, tr i qua nhi u... multocida type A ch a thành ph n polysacharide, axít hyaluronic Giáp mô c a vi khu n T huy t trùng type D ch a heparin và giáp mô c a type F có ch a chondroitin (Dwight và c ng s , 2004) Nh ng ch t n y gi ng v i thành ph n n m trong c u trúc mô bào v t ch , tính kháng nguyên y u, liên k t y u v i ph c h p b th do ñó giúp cho vi khu n có kh năng kháng l i s th c bào Bên c nh ñó l p giáp mô ch a axít hyaluronic... ng Erysipelothrix bao g m hai loài Erysipelothrix rhusiopathiae (insidiosa) và Erysipelothrix tonsillarum Trư c ñ y m t s ch ng Erysipelothrix tonsillarum ñư c mô t như là nh ng serotype c a Erysipelothrix rhusiopathiae Erysipelothrix tonsillarum có ñ c ñi m hình thái và hoá sinh tương t Erysipelothrix rhusiopathiae, chúng ch khác nhau v s như tương ñ ng ADN Erysipelothrix tonsillarum không g y b nh... ho t b i các ch t sát trùng thông thư ng, nhi t ñ 600C/15 phút và các tia gamma Erysipelothrix rhusiopathiae nh y c m v i Penicillin, Cephalosporin, Clindamycin Kháng l i m t s kháng sinh Erythromycin, Oleandomycin, Oxytetracycline và Dihydrostreptomycin S kháng thu c dư ng như không liên quan ñ n s truy n plasmid (Dwight và Zee, 1999a) 1.2.2.6 Bi n ch ng M t s ch ng ch a kháng nguyên không ch u nhi... TÀI LI U 1.1 B nh T huy t trùng và ðóng d u l n 1.1.1 B nh T huy t trùng l n B nh T huy t trùng x y ra trên l n, nguyên nhân do vi khu n Pasteurella multocida g y ra ð c ñi m c a b nh g y b i huy t, xu t huy t Vi khu n tác ñ ng t i b m y hô h p, g y thuỳ ph viêm Tri u ch ng, b nh tích ñ c trưng t p trung b m y hô h p Theo s li u hi n nay t i M , ti n hành ñi u tra trên t ng s 6.634 l n ñư c gi t m... o sát m t s ch tiêu k thu t c a vacxin T D u l n như c ñ c - S lư ng vi khu n THT, ðD trong canh khu n vacxin T D u l n như c ñ c sau khi nuôi c y 48 gi - M t s ch tiêu ki m nghi m vacxin T D u l n như c ñ c: + Ch tiêu thu n khi t + Ch tiêu an toàn + Ch tiêu hi u l c 2.2.3 Xác ñ nh th i gian b o qu n vacxin T D u l n như c ñ c sau khi lưu kho nhi t ñ 2-80C ð tài ñư c th c hi n t i Xí nghi p thu c Thú. .. huy t, ñ c bi t Trư ng ð i h c Nông nghi p Hà N i – Lu n văn th c s khoa h c Nông nghi p ……………………… 6 là cơ tâm nhĩ trái D d y viêm cata, xu t huy t, có th xu t hi n hi n tư ng xu t huy t màng thanh d ch d d y Gan sung huy t Lách sung huy t, giãn r ng, rõ nh t nh ng con b m c b nh sau vài ba ng y Xu t huy t ñi m mi n v th n có th x y ra Niêm m c bàng quang ñôi khi có nh ng vùng b sung huy t H ch lympho... ng S l y truy n b nh gi a các ñàn v t nuôi ch y u thông qua ñư ng hô h p, qua ti p xúc tr c ti p C hai phương th c l y truy n, truy n d c và truy n ngang ñ u x y ra trong ñàn nhưng ch y u là truy n ngang Các loài ñ ng v t khác c m nhi m v i vi khu n Pasteurella multocida bao g m chu t, loài g m nh m, gia c m 1.1.1.2 Cơ ch sinh b nh Pasteurella multocida có kh năng kích thích nhanh chóng, g y ph n ng... multocida type A M t s ch ng thu c loài Pasteurella multocida và Pasteurella haemolytica xu t hi n các y u t bám dính Thành t bào vi khu n ñư c c u t o ch y u t lipopolysaccharide và protein M t s protein là y u t ñi u hòa nguyên t s t, chúng xu t hi n dư i ñi u ki n nghèo s t 1.2.1.3 Các y u t g y b nh Vi khu n T huy t trùng s n sinh m t s các ch t g y b nh cho cơ th v t ch Trong s n y, quan tr ng . HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI  PHẠM NHƯ TH Y KHẢO SÁT MỘT SỐ CHỈ TIÊU CỦA VACXIN TỤ DẤU LỢN NHƯỢC ðỘC SẢN XUẤT TẠI XÍ NGHIỆP THUỐC THÚ Y TRUNG ƯƠNG CHUYÊN NGÀNH: THÚ Y Mà SỐ: 60.64.01.01. TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI  PHẠM NHƯ TH Y KHẢO SÁT MỘT SỐ CHỈ TIÊU CỦA VACXIN TỤ DẤU LỢN NHƯỢC ðỘC SẢN XUẤT TẠI XÍ NGHIỆP THUỐC THÚ Y TRUNG ƯƠNG LUẬN VĂN THẠC SĨ . c y canh khuẩn vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc 25 3.1. Tiến trình sản xuất vacxin Tụ Dấu lợn nhược ñộc tại Xí nghiệp thuốc Thú y Trung ương 30 3.2. Biến ñộng số lượng vi khuẩn THT và ðD lợn sống