BỘ GIÁO DỤC VÀ ðÀO TẠO TRƯỜNG ðẠI HỌC NÔNG NGHIỆP HÀ NỘI  HOÀNG VĂN LÂN THANH NGHIÊN CỨU TÌNH HÌNH BỆNH VIÊM RUỘT HOẠI TỬ Ở ðÀN GÀ HƯỚNG THỊT NUÔI TẠI VĨNH PHÚC LUẬN VĂN THẠC SĨ NÔNG NGHIỆP Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60.62.05 Người hướng dẫn khoa học: 1. TS. HUỲNH THỊ MỸ LỆ 2. TS. ðỖ NGỌC THÚY HÀ NỘI - 2012 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… i LỜI CAM ðOAN Tôi xin cam ñoan rằng, ñây là công trình nghiên cứu của riêng tôi, số liệu và kết quả nghiên cứu trong luận văn là trung thực và chưa từng ñược sử dụng ñể bảo vệ một học vị nào. Tôi xin cam ñoan, mọi sự giúp ñỡ cho việc thực hiện luận văn này ñã ñược cảm ơn và các thông tin trích dẫn trong luận văn ñã ñược chỉ rõ nguồn gốc. Hà Nội, ngày tháng năm 2012 Tác giả luận văn Hoàng Văn Lân Thanh Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… ii LỜI CẢM ƠN ðể hoàn thành luận văn này, ngoài sự cố gắng của bản thân, tôi luôn nhận ñược sự quan tâm giúp ñỡ của các thầy cô giáo và bạn bè ñồng nghiệp. Nhân dịp này, trước tiên tôi xin chân thành cảm ơn sự giúp ñỡ của các giảng viên khoa Thú y, Viện Sau ðại học trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội ñã giảng dạy tôi trong suốt thời gian học tập tại Trường. Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới TS. Huỳnh Thị Mỹ Lệ - giảng viên Bộ môn Vi sinh vật - Truyền nhiễm, khoa Thú y, trường ðại học Nông Nghiệp Hà Nội, TS. ðỗ Ngọc Thúy – Bộ môn vi trùng – viện Thú y ñã tận tình giúp ñỡ, hướng dẫn tôi trong quá trình thực hiện và hoàn thành luận văn. Tôi xin trân trọng cảm ơn chủ các trang trại gà tại Vĩnh Phúc và các bạn ñồng nghiệp ñã giúp ñỡ tôi trong suốt thời gian qua. Tôi xin gửi lời cảm ơn tới gia ñình, bạn bè những người ñã luôn giúp ñỡ, ñộng viên tôi trong suốt quá trình học tập tại trường cũng như trong quá trình thực hiện luận văn này. Hà Nội, ngày tháng năm 2012 Tác giả Hoàng Văn Lân THanh Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… iii MỤC LỤC LỜI CAM ðOAN i LỜI CẢM ƠN ii MỤC LỤC iii DANH MỤC BẢNG BIỂU vi DANH MỤC HÌNH vii DANH MỤC VIẾT TẮT viii MỞ ðẦU 1 PHẦN 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 1.1. Hệ thống vi sinh vật trong ñường tiêu hoá của gà 3 1.2. Một số hiểu biết về vi khuẩn Clostridium perfringens và bệnh do vi khuẩn này gây ra. 4 1.2.1. Giới thiệu chung về genus (giống, chi) Clostridium 4 1.2.2. Vi khuẩn Clostridium perfringens 7 1.3. Hiểu biết về một số bệnh ở gà 15 1.3.1 . Bệnh do vi khuẩn Salmonella 15 1.3.2 . Bệnh Viêm ruột hoại tử 17 1.3.3. Bệnh Gumboro 19 1.3.4. Bệnh cầu trùng gà (Eimeria) 21 1.3.5 . Bệnh Viêm ñường hô hấp mạn tính (CRD) 24 PHẦN 2 NỘI DUNG – NGUYÊN LIỆU - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 2.1. ðối tượng nghiên cứu 26 2.2. ðịa ñiểm nghiên cứu 26 2.3. Nội dung nghiên cứu 26 2.3.1. ðiều tra tình hình bệnh viêm ruột hoại tử do C. perfringens gây ra ở ñàn gà thịt nuôi tại Vĩnh Phúc 26 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… iv 2.3.2. Theo dõi triệu trứng và bệnh tích ñặc trưng của bệnh viêm ruột hoại tử ở ñàn gà 26 2.3.3 Phân lập và giám ñịnh vi khuẩn C. perfringens từ gà bệnh 26 2.3.4. Thử nghiệm phác ñồ ñiều trị bệnh viêm ruột hoại tử ở gà 27 2.4. Nguyên liệu 27 2.5. Phương pháp nghiên cứu 27 2.5.1. Phương pháp ñiều tra tình hình bệnh viêm ruột hoại tử ở ñàn gà 27 2.5.2. Phương pháp lấy mẫu 27 2.5.3. Phương pháp phân lập vi khuẩn hiếu khí và yếm khí 27 2.5.4. Phương pháp giám ñịnh một số ñặc tính sinh học của vi khuẩn C. perfringens phân lập ñược 29 2.5.5. Phương pháp xác ñịnh khả năng mẫn cảm với kháng sinh của các chủng C. perfringens phân lập ñược 30 2.5.6. Phương pháp xác ñịnh gen mã hóa ñộc tố và ñịnh typ bằng kỹ thuật PCR (Polymerase Chain Reaction) 32 2.5.7. Phương pháp xử lý số liệu 35 PHẦN 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 36 3.1. Kết quả theo dõi tình hình bệnh viêm ruột hoại tử do C. perfringens gây ra ở ñàn gà thịt nuôi tại Vĩnh Phúc 36 3.1.1. Tình hình mắc bệnh theo lứa tuổi gà 36 3.1.2 Tình hình bệnh theo giống gà 38 3.1.3 Tình hình bệnh theo các tháng trong năm 39 3.1.4. Tình hình bệnh theo phương thức chăn nuôi 40 3.2. Kết quả theo dõi triệu trứng và bệnh tích ñặc trưng của bệnh viêm ruột hoại tử ở ñàn gà 42 3.2.1. Tỷ lệ có triệu chứng, bệnh tích của bệnh/ tổng số gà mổ khám 42 3.2.2. Biểu hiện triệu chứng và bệnh tích của bệnh Viêm ruột hoại tử 46 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… v 3.3. Kết quả phân lập và giám ñịnh vi khuẩn C. perfringens từ gà bệnh 49 3.3.1. Kết quả phân lập vi khuẩn 49 3.3.2. Kết quả giám ñịnh một số ñặc tính sinh học của vi khuẩn 50 3.3.3. Kết quả ñịnh typ vi khuẩn C. perfringens bằng PCR 51 3.4. Thử nghiệm phác ñồ ñiều trị bệnh viêm ruột hoại tử ở gà 52 3.4.1. Kiểm tra tính mẫn cảm với kháng sinh của các chủng C. perfringens 52 3.4.2. Thử nghiệm một số phác ñồ ñiều trị 54 PHẦN 4 KẾT LUẬN VÀ ðỀ NGHỊ 56 4.1. Kết luận 56 4.2. ðề nghị 57 TÀI LIỆU THAM KHẢO 58 PHỤ LỤC 61 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… vi DANH MỤC BẢNG BIỂU Bảng 1.1. Bệnh do vi khuẩn Clostridium gây ra ở người và ñộng vật 5 Bảng 1.2. ðiều kiện nuôi cấy thích hợp của vi khuẩn C. perfringens 8 Bảng 1.3. Các loại ñộc tố do vi khuẩn C. perfringens sản sinh ra (Hatheway, 1990) 10 Bảng 2.1. Tiêu chuẩn ñánh giá ñộ mẫn cảm kháng sinh của vi khuẩn 31 Bảng 2.2. Trình tự mồi của phản ứng Multiplex PCR dùng ñể xác ñịnh gen mã hoá ñộc tố của các chủng C. perfringens 33 Bảng 2.3. Thành phần các chất trong phản ứng Multiplex PCR dùng ñể xác ñịnh gen mã hoá ñộc tố của các chủng C. perfringens 34 Bảng 2.4. Chu kỳ nhiệt của phản ứng Multiplex PCR dùng ñể xác ñịnh gen mã hoá ñộc tố của các chủng C. perfringens 34 Bảng 3.1. Tình hình bệnh Viêm ruột hoại tử theo tuổi gà 36 Bảng 3.2. Tình hình bệnh Viêm ruột hoại tử theo giống gà 38 Bảng 3.3. Tình hình bệnh Viêm ruột hoại tử theo tháng 39 Bảng 3.4.Tình hình bệnh Viêm ruột hoại tử theo phương thức chăn nuôi 41 Bảng 3.5. Kết quả chẩn ñoán một số bệnh thường gặp ở ñàn gà nuôi tại Vĩnh Phúc dựa vào bệnh tích ñặc trưng 43 Bảng 3.6. Bệnh tích của các bệnh trên gà mổ khám 45 Bảng 3.7. Bệnh tích do C.perfringens gây ra trên gà qua kết quả mổ khám… 48 Bảng 3.8. Kết quả phân lập vi khuẩn C. perfringens 49 Bảng 3.9. Một số ñặc tính sinh học của các chủng C. perfringens 50 Bảng 3.10. Kết quả xác ñịnh typ vi khuẩn C.perfringens bằng PCR 51 Bảng 3.11. Kết quả xác ñịnh gen mã hóa ñộc tố ruột (cpe) và β-2 (cpb2) 52 Bảng 3.12. Kết quả kiểm tra kháng sinh ñồ 53 Bảng 3.13. Kết quả thử nghiệm ñiều trị bệnh Viêm ruột hoại tử ở gà 55 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… vii DANH MỤC HÌNH Hình 2.1: Sơ ñồ quy trình phân lập và giám ñịnh vi khuẩn C.perfringens 28 Hình 3.1. Tình hình bệnh Viêm ruột hoại tử theo tuổi gà 37 Hình 3.2. Tình hình bệnh Viêm ruột hoại tử theo giống gà 38 Hình 3.3. Tình hình bệnh Viêm ruột hoại tử theo tháng 40 Hình 3.4. Tình hình bệnh Viêm ruột hoại tử theo phương thức chăn nuôi 42 Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… viii DANH MỤC VIẾT TẮT Chữ viết tắt Chữ viết ñầy ñủ ARN : Axit ribonucleic bp : base pair CAMP : Christie Atkins Munch-Petersen CRD : Chronic Respiratory Diseases CW : Clostridium welchii DNA : Axit deoxyribonucleic E. coli : Escherichia coli ELISA : Enzyme-Linked Immunosorbent Assay EYA : Egg Yolk Agar FCR : Feed Conversion Rate IB : Infections Bronchitis ND : Newcastle Disease NE : Necrotic Enteritis PCR : Polymerase Chain Reaction Trường ðại học Nông nghiệp Hà Nội – Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp …………………… 1 MỞ ðẦU * ðặt vấn ñề ë Việt Nam, chăn nuôi gia cầm luôn giữ vị trí quan trọng trong việc cung cấp thực phẩm thịt và trứng cho nhu cầu tiêu dùng. Bên cạnh các giống gà truyền thống như gà Ri, gà Mía, gà ðông Cảo, gà Tàu Vàng… còn có rất nhiều giống mới nhập nội như gà Lương Phượng, gà Tam Hoàng, gà Kabir, gà Sasso. Các giống gà nhập nội có ưu ñiểm sinh sản nhiều, tăng trọng nhanh, nhưng chúng chỉ thích hợp với môi trường nuôi nhốt hoặc bán chăn thả với mức ñộ ñầu tư cao mới cho hiệu quả. Việc tạo ra con giống có chất lượng cao ñáp ứng nhu cầu chăn nuôi ngày càng tăng là một yêu cầu cấp thiết. Tuy nhiên, việc nhân thuần các giống gà ngoại này ñòi hỏi phải tuân thủ theo một quy trình kỹ thuật nghiêm ngặt. Với sự phát triển nhanh chóng, ngành chăn nuôi gà cũng ñứng trước những khó khăn to lớn của vấn ñề dịch bệnh ñòi hỏi phải nâng cao hơn nữa chất lượng chăn nuôi, tăng cường khả năng phòng và chống dịch bệnh; Bởi dịch bệnh là nguyên nhân chủ yếu gây thiệt hại kinh tế trong ngành chăn nuôi, ảnh hưởng ñến sức khoẻ cộng ñồng. Trong số các bệnh do vi khuẩn gây những thiệt hại không nhỏ, làm giảm sản lượng thịt và trứng, phải kể ñến bệnh Viêm ruột hoại tử do vi khuẩn Clostridium perfringens gây nên. Bệnh Viêm ruột hoại tử trên gà ñược Parish mô tả lần ñầu tiên năm 1961, do vi khuẩn có tên là Clostridium welchii (hay C. perfringens) gây ra. Sau ñó, bệnh ñược phát hiện ở hầu hết các nước có nuôi gà. C. perfringens là trực khuẩn Gram dương, yếm khí, sinh nha bào, có khả năng sản sinh ñộc tố. ðến nay, ñã xác ñịnh ñược chính xác 14 loại ñộc tố, có thể gây nên 25 loại bệnh khác nhau, trong ñó có bệnh Viêm ruột hoại tử trên gà. Ở Việt Nam ñã có các công trình nghiên cứu về Clostridium perfringens và bệnh do vi khuẩn này gây nên tuy nhiên các tác giả tập trung [...]... dung nghiên c u Trong khuôn kh ñ tài chúng tôi th c hi n n i dung sau: 2.3.1.ði u tra tình hình b nh viêm ru t ho i t do C perfringens gây ra ñàn gà th t nuôi t i Vĩnh Phúc - Tình hình b nh theo l a tu i gà - Tình hình b nh theo gi ng gà - Tình hình b nh theo các tháng trong năm - Tình hình b nh theo phương th c chăn nuôi 2.3.2 Theo dõi tri u tr ng và b nh tích ñ c trưng c a b nh viêm ru t ho i t ñàn gà. .. khoa h c nông nghi p …………………… 25 PH N 2 N I DUNG - NGUYÊN LI U - PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C U 2.1 ð i tư ng nghiên c u B nh Viêm ru t ho i t và vi khu n C perfringens gây b nh gà hư ng th t nuôi t i t nh Vĩnh Phúc 2.2 ð a ñi m nghiên c u - ði u tra tình hình b nh viêm ru t ho i t và l y m u ñàn gà hư ng th t nuôi t i t nh Vĩnh Phúc - Vi c phân l p, giám ñ nh, ñ nh typ vi khu n C perfringens ñư c th c hi.. .nghiên c u trên gia súc (trâu, bò, bê, nghé, dê và l n); nhưng chưa có nh ng báo cáo ñ y ñ v tình hình b nh do vi khu n Clostridium perfringens gây ra trên ñàn gà ð góp ph n làm rõ nh ng thi t h i do Clostridium perfringens trên gà, chúng tôi ñã ti n hành ñ tài: "Nghiên c u tình hình b nh viêm ru t ho i t ñàn gà hư ng th t nuôi t i Vĩnh Phúc" * M c tiêu nghiên c u: Phân l p và... phòng, tr b nh viêm ru t ho i t ñàn gà th t nuôi t i t nh Vĩnh Phúc * Ý nghĩa khoa h c - Là nghiên c u ñ y ñ v vi khu n C perfringens gây b nh viêm ru t ho i t ñàn gà th t nuôi t i t nh Vĩnh Phúc - Cung c p thêm thông tin v y u t ñ c l c gây b nh Viêm ru t ho i t c a vi khu n C perfringens ñàn gà * Ý nghĩa th c ti n K t qu c a ñ tài cung c p cơ s khoa h c giúp ñ xu t bi n pháp phòng, tr b nh viêm ru t ho... nh c u trùng gà B nh c u trùng gà r t ph bi n, h u như không ñàn gà nào không b nhi m m t trong các ch ng Eimeria trên B nh x y ra ch y u trên gà con, gà dò, gà mái trư ng thành Gà m và gà kh i b nh nhưng mang trùng là ngu n b nh ti m tàng lâu dài, nguy hi m nh t, các y u t v sinh thú y, chăm sóc nuôi dư ng kém, thi u các vitamin, nguyên t vi lư ng ñ c bi t là vi c nuôi chung gà con v i gà l n s thúc... Mycoplasma galisepticum, ngư i ta cũng ñã phân l p ñư c Mycoplasma galisepticum t gà lôi, gà gô, công, chim cút, v t, gà tây r ng, b câu, ng ng, v t Gà l n và gà ñ d m c b nh hơn gà con, gà nuôi theo phương th c công nghi p d m c hơn gà nuôi theo phương th c gia ñình, t l m c b nh t p trung 4 – 8 tu n tu i, gà ñ bói, gà ñ khi t l ñ cao nh t B nh x y ra quanh năm nhưng t p trung nhi u nh t vào tháng... t s vùng b viêm ho i t − Thành các túi hơi dày lên, phù thũng: xoang túi hơi nh t là vùng ng c và b ng ch a ñ y m t ch t d ch màu s a; n u b nh chuy n sang m n tính thì ch t ch a quánh l i, cu i cùng thành m t ch t khô, b , màu vàng − Gà còn b viêm ngo i tâm m c, viêm quanh gan và viêm phúc m c − Lách có th hơi sưng − Gà mái: viêm bu ng tr ng và ng d n tr ng − Gà tr ng: viêm tinh hoàn, viêm kh p Trư... tích nhưng không ñi n hình 1.3.4 B nh c u trùng gà (Eimeria) B nh c u trùng gà là m t b nh ký sinh trùng truy n nhi m nguy hi m thư ng g p gà và ñ c bi t là gà nuôi theo phương th c công nghi p B nh ph bi n kh p nơi trên th gi i, b nh do 7 ch ng Eimeria gây ra làm thi t h i r t l n cho ngành chăn nuôi gà t p trung theo l i s n xu t công nghi p, thi t h i kinh t ñư c th hi n: Tăng s gà còi c c trong ñàn,... y gà ch t ngay trong máy n , dính phôi, sát phôi, ch t ng t, ch t t c 21 ngày p Nh ng con n ra ñư c thì có tr ng lư ng nh hơn gà bình thư ng, y u t, ch t y u Gà con b b nh thư ng b ng tr do lòng ñ không tiêu, ho c ch t sau 2 – 3 ngày phát b nh Gà con bi u hi n rũ, m t lim dim, y u t, gi m tính thèm ăn, b nh phát tri n m nh vào lúc 5 – 10 ngày tu i sau khi n Gà g y còm và ch t sau 2 – 3 tu n tu i, gà. .. nh 2 – 3 ngày Trong ñàn gà xu t hi n m t s con có d u hi u ho ng lo n, có ti ng kêu khác thư ng Gà quay ñ u v phía h u môn ñ “gãi” Sau 2 – 3 ngày th y n n chu ng ư t nhanh do gà b a ch y, m c dù ñi a ch y nhưng gà có bi u hi n khó a, ph i r n ra ñ a: lông gáy d ng ngư c, ñ u g i khuỳnh ra, h u môn h th p xu ng, toàn b cơ b p rung lên, phân loãng, nhi u nư c, tr ng nh t Gà u ng nhi u nư c Do gà a ch y, . 3.1. Tình hình bệnh Viêm ruột hoại tử theo tuổi gà 36 Bảng 3.2. Tình hình bệnh Viêm ruột hoại tử theo giống gà 38 Bảng 3.3. Tình hình bệnh Viêm ruột hoại tử theo tháng 39 Bảng 3.4 .Tình hình. dõi tình hình bệnh viêm ruột hoại tử do C. perfringens gây ra ở ñàn gà thịt nuôi tại Vĩnh Phúc 36 3.1.1. Tình hình mắc bệnh theo lứa tuổi gà 36 3.1.2 Tình hình bệnh theo giống gà 38 3.1.3 Tình. Clostridium perfringens trên gà, chúng tôi ñã tiến hành ñề tài: " ;Nghiên cứu tình hình bệnh viêm ruột hoại tử ở ñàn gà hướng thịt nuôi tại Vĩnh Phúc& quot;. * Mục tiêu nghiên cứu: Phân lập và xác