1 MỞ ĐẦU 1. Lý do chọn đề tài Nền kinh tế nước nhà hiện nay đang có những bước chuyển mình mạnh mẽ do đó đời sống vật chất và tinh thần của con người ngày càng được nâng cao. Phát triển kinh tế kéo theo sự thay đổi lối sống, giảm các hoạt động thể lực, mức sống cao với sự dồi dào về thực phẩm gắn liền với tình trạng thừa cân – béo phì. Béo phì là trạng thái thừa cân do tăng khối lượng mỡ. Nếu mỡ thừa phân phối đều toàn thân, đó là trường hợp béo phì toàn thân. Nếu mỡ thừa tập trung chủ yếu ở bụng, mông đùi, đó là béo phì hướng tâm, rất nguy hiểm vì dễ dẫn đến rối loạn lipid máu [18]. Ngoài ra hiện tượng thừa cân và béo phì là nguyên nhân chính liên quan đến các rối loạn về chuyển hoá, tăng huyết áp, tăng nguy cơ mắc các bệnh đái tháo đường(ĐTĐ), tim mạch và các bệnh mãn tính khác [28], [32]. ĐTĐ là một bệnh mãn tính, trong giai đoạn mới phát thường làm bệnh nhân đi tiểu nhiều, tiểu ban đêm và do đó làm khát nước. ĐTĐ là một trong những nguyên nhân chính của những căn bệnh hiểm nghèo, điển hình là bệnh tim mạch, tai biến mạch máu não, bệnh về mắt, suy thận liệt dương, hoại thư,…gây ảnh hưởng lớn đến sức khoẻ cộng đồng, cũng như kinh tế của quốc gia [5], [6]. Điều đáng lo ngại là ĐTĐ tăng nhanh ở các nước đang phát triển. Cùng với ung thư và tim mạch, ĐTĐ là một trong 3 bệnh có tốc độ phát triển nhanh chóng nhất. Hiện trên thế giới ước lượng có hơn 190 triệu người mắc bệnh tiểu đường và số này tiếp tục tăng lên. Ước tính năm 2025 sẽ lên tới 330 triệu người (gần 6% dân số toàn cầu). 2 Theo WHO và liên đoàn ĐTĐ thế giới(IDF), Việt Nam là một trong những nước có tỷ lệ gia tăng bệnh ĐTĐ nhanh nhất thế giới( khoảng 8% -10%/ năm). So sánh giữa số liệu thống kê của năm 2002 và năm 2012 cho thấy tỷ lệ mắc ĐTĐ ở Việt Nam tăng tới 211%. ĐTĐ có 2 dạng chính: ĐTĐ Type 1 do tụy tạng không tiết insulin, và ĐTĐ type 2 do tiết giảm insulin và đề kháng insulin. Trong đó, ĐTĐ type 2 chiểm khoảng 90 đến 95% trong tổng số bệnh nhân ĐTĐ, thường gặp ở lứa tuổi trên 40, nhưng gần đây xuất hiện ngày càng nhiều ở lứa tuổi 30, thậm chí ở cả lứa tuổi thanh thiếu niên. Bệnh ĐTĐ và béo phì có quan hệ chặt chẽ, trong đó ĐTĐ là hậu quả của béo phì(Obesity) và thừa cân quá mức [24],[27]. Ngày nay có hàng loạt các loại thuốc ra đời nhằm điều trị và hạn chế sự phát triển của bệnh ĐTĐ hiệu quả như insulin, biguanid…. Tuy nhiên việc sử dụng các loại thuốc tổng hợp thường kéo theo các phản ứng phụ cho cơ thể và giá thành cao. Tổ chức Y tế thế giới WHO khuyến cáo là nên dùng các sản phẩm có nguồn gốc từ thảo dược với ưu điểm là nguồn dược liệu sẵn có, giá cả rẻ và ít gây phản ứng phụ với cơ thể. Ở nước ta nhiều nghiên cứu đã chứng tỏ có nhiều loại thảo dược trị bệnh ĐTĐ và béo phì được bắt đầu từ khoảng 8 năm trở lại đây [25],[28],[29]. Các nghiên cứu đã chứng minh được một số thảo dược có tác dụng chữa béo phì và ĐTĐ trên mô hình thực nghiệm như vỏ quả Măng cụt, lá Khế, Mướp đắng, Thổ phục linh Qua thời gian khảo sát và tham khảo kết hợp với việc nghiên cứu tài liệu về các bài thuốc cổ truyền ở nước ta, tôi nhận thấy cây 3 Trạch tả được đồng bào sử dụng nhiều trong đời sống hàng ngày làm thuốc chữa bệnh. Trong Đông y chủ yếu làm thuốc thông tiểu, chữa bệnh thuỷ thũng trong bệnh viêm thận, nhiễm trùng đường tiết niệu gây đau buốt, có người nói là có thể chữa bệnh sỏi thận và lợi sữa. Trên thực tế chưa có đề tài nào nghiên cứu về tác dụng sinh dược của cây Trạch tả đối với bệnh béo phì và ĐTĐ. Xuất phát từ thực tế, cùng với mong muốn góp phần vào việc nghiên cứu, phát hiện thêm những đặc tính sinh dược học về cây thuốc tự nhiên để dự phòng và chữa bệnh, chúng tôi chọn đề tài: "Nghiên cứu một số đặc tính hóa sinh dược của dịch chiết từ rễ củ cây Trạch tả (Alisma phantago-aquatica L.)". 2. Mục đích nghiên cứu Nghiên cứu tác dụng của một số phân đoạn dịch chiết từ rễ củ cây Trạch tả (Alisma phantago-aquatica L.) đến trọng lượng, chỉ số lipid, nồng độ glucose huyết của chuột béo phì thực nghiệm . 3. Nhiệm vụ nghiên cứu 3.1. Tách, chiết các phân đoạn từ của rễ củ cây Trạch tả (Alisma phantago-aquatica L.). 3.2. Khảo sát thành phần hoá học của rễ củ cây Trạch tả (Alisma phantago-aquatica L.). 3.3. Xây dựng mô hình chuột béo phì thực nghiệm, chuột ĐTĐ type 2. 3.4. Đánh giá tác dụng của các phân đoạn dịch chiết đến trọng lượng, nồng độ glucose huyết và một số chỉ số lipid máu của chuột béo phì thực nghiệm, trên mô hình chuột ĐTĐ mô phỏng type 2. 4 4. Giới hạn, phạm vi nghiên cứu Khảo sát thành phần hoá học của rễ củ cây Trạch tả (Alisma phantago-aquatica L.) và nghiên cứu tác dụng của các phân đoạn dịch chiết đến trọng lượng, nồng độ glucose huyết và một số chỉ số lipid máu của chuột béo phì thực nghiệm, trên mô hình chuột ĐTĐ mô phỏng type 2. 5. Đóng góp mới của luận văn 5.1. Cung cấp các dẫn liệu khoa học về thành phần hoá học trong rễ củ cây Trạch tả. 5.2. Đánh giá tác dụng sinh dược của dịch chiết từ rễ củ cây Trạch tả đến trọng lượng, nồng độ glucose huyết và một số chỉ số hóa sinh của chuột béo phì thực nghiệm và ĐTĐ type 2. Chương 1 TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1. Các hợp chất thứ sinh thực vật 1.1.1. Một số khái niệm cơ bản về hợp chất thứ sinh thực vật Quá trình trao đổi chất của sinh vật bao gồm sự tạo thành hợp chất sơ cấp và hợp chất thứ cấp. Hợp chất sơ cấp là sản phẩm tạo thành từ quá trình đồng hóa và dị hóa, có vai trò quan trọng đối với cơ thể sống, bao gồm những chất thiết yếu cho cơ thể sống như các acid amin, các acid nucleic, cacbonhydrat, lipid… Chúng là trung tâm của quá trình trao đổi chất, sinh trưởng và phát triển của sinh vật. Các hợp chất thứ sinh không có chức năng trực tiếp trong các quá trình đồng hóa, hô hấp, vận chuyển, tăng trưởng và phát triển của thực vật, mà chủ yếu là bảo vệ thực vật chống lại các tác nhân gây bệnh. 5 Căn cứ vào cấu trúc hóa học và tinh chất lý hóa mà các hợp chất thứ sinh được phân làm ba nhóm chính: các hợp chất phenolic, các terpen và ankaloid. Nhiều công trình nghiên cứu cho thấy, các hợp chất polyphenol (thuộc nhóm hợp chất phenolic) đang được ứng dụng ngày càng rộng rãi trong điều trị các bệnh như: ung thư, béo phì, tiểu đường,viêm gan, chống oxy hóa [20], [22], [26]. 1.1.1.1. Hợp chất phenolic 1.1.1.2. Flavonoid 1.1.1.3. Alkaloid 1.1.1.4. Terpen 1.1.2. Vai trò của các hợp chất thứ sinh ở thực vật 1.1.3. Ứng dụng của các hợp chất thứ sinh ở thực vật trong đời sống 1.2. Bệnh béo phì (Obesity) 1.2.1. Khái niệm và phân loại bệnh béo phì Bệnh béo phì (Obesity) được tổ chức y tế thế giới WHO định nghĩa là: tình trạng tích lũy mỡ quá mức và không bình thường tại một vùng cơ thể hay toàn thân tới mức ảnh hưởng tới sức khỏe[28]. 1.2.2. Thực trạng béo phì trên thế giới và Việt Nam *Trên thế giới Thừa cân – béo phì đang gia tăng trên toàn cầu, không những ở người lớn mà cả ở trẻ em. Theo tổ chức Y tế Thế giới (WHO), hiện nay số người béo phì đã lên tới hơn 1.7 tỉ người [32], M• là nước có số dân mắc bệnh cao nhất thế giới khoảng hơn 60 triệu người (chiếm gần 35% dân số), tăng gấp 3 lần so với điều tra năm 1991. Ở Châu 6 Âu, Anh là quốc gia có số người thừa cân béo phì đứng thứ 2 trên thế giới có hơn 20% số dân mắc bệnh. *Ở Việt Nam Năm 2007, Viện dinh dưỡng Quốc gia điều tra trên đối tượng người trưởng thành 25-64 tuổi cho thấy tỉ lệ thừa cân béo phì là 16.8% và còn có xu hướng tăng lên. Trẻ em Việt Nam cũng có 16.3% mắc thừa cân béo phì [24]. Hà Nội có 4.9% trẻ 4-6 tuổi mắc bệnh, Thành Phố Hồ Chí Minh 6% trẻ dưới 5 tuổi và 22.7% học sinh tiểu học cũng mắc vào tình trạng này[6]. 1.2.3. Nguyên nhân gây ra bệnh béo phì 1.2.4. Các tác hại và nguy cơ của bệnh béo phì 1.2.5. Rối loạn trao đổi lipid máu Rối loạn lipid máu là tình trạng tăng cholesterol, triglycerides (TG) huyết tương hoặc cả hai, hoặc giảm nồng độ lipoprotein phân tử lượng cao, tăng nồng độ lipoprotein phân tử lượng thấp làm gia tăng quá trình xơ vữa động mạch[18]. 1.2.6. Giải pháp phòng và điều trị béo phì Để phòng bệnh béo phì có hiệu quả, mỗi cá nhân cần nâng cao nhận thức về dinh dưỡng và hoạt động thể lực. Điều trị thừa cân béo phì dựa trên nguyên tắc kết hợp giữa chế độ ăn uống, luyện tập và dùng thuốc. Trong đó chế độ ăn uống kết hợp với luyện tập thể dục thể thao, lao động vừa sức là hai giải pháp cơ bản. 1.3. Bệnh đái tháo đường (Diabetse mellitus) 1.3.1. Khái niệm và phân loại bệnh ĐTĐ 1.3.1.1. Khái niệm ĐTĐ Theo tổ chức Y tế WHO, ĐTĐ là một hội chứng rối loạn chuyển hóa cacbohydrat có đặc tính biểu hiện bằng tăng glucose máu 7 do hậu quả của việc thiếu hoặc mất hoàn toàn insulin hoặc do có liên quan đến sự suy yếu trong bài tiết và hoạt động của insulin[5], [13]. 1.3.1.2. Phân loại ĐTĐ * ĐTĐ type 1 * ĐTĐ type 2 1.3.2. Thực trạng ĐTĐ trên thế giới và Việt Nam *Trên thế giới Theo Tổ chức Y tế thế giới (WHO) có 30 triệu bệnh nhân vào năm 1985, con số này tăng lên 135 triệu vào năm 1995 và lên đến 195 triệu bệnh nhân năm 2003 trong đó 2/3 là bệnh nhân ở những quốc gia đang phát triển, năm 2010 có 221 triệu người và dự báo đến năm 2025 là 330 triệu người mắc căn bệnh này, chiếm 6.0%. Tỷ lệ bệnh tăng lên ở các nước phát triển là 42%, nhưng ở các nước đang phát triển (như Việt Nam) tăng hơn 170%. *Ở Việt Nam Theo nguồn Diabetes Atlas 2003 thống kê có 3% dân só VN bị bệnh tiểu đường (15-25% dân số trên 50 tuổi). Theo PGS.TS Lương Ngọc Khuê - Cục trưởng Cục Quản lý khám chữa bệnh - tỷ lệ ĐTĐ trên toàn quốc là 5,7% dân số (theo kết quả điều tra năm 2012). Theo Tổ chức Y tế thế giới (WHO) và Liên đoàn ĐTĐ thế giới (IDF), Việt Nam là một trong những nước có tỷ lệ gia tăng bệnh ĐTĐ nhanh nhất thế giới (khoảng 8 - 10%/năm). 1.3.3. Các thuốc điều trị bệnh ĐTĐ 1.3.4. ĐTĐ với y học cổ truyền 1.4. Mối quan hệ giữa béo phì và ĐTĐ * Mối quan hệ giữa béo phì và ĐTĐ *Các biến chứng liên quan đến ĐTĐ và béo phì 8 Chương 2 ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1. Đối tượng nghiên cứu 2.1.1. Mẫu thực vật Trạch tả (Alisma phantago-aquatica L.) hay gọi là Mã đề nước, thuộc chi Alisma, một chi nằm trong họ Trạch tả - Alismataceae. 2.1.2. Mẫu động vật Chuột nhắt trắng Mus musculus (chủng Swiss) có trọng lượng 18- 20g . 2.1.3. Dụng cụ, hóa chất thí nghiệm *Dụng cụ *Hóa chất 2.2. Phương pháp nghiên cứu 2.2.1. Xử lý mẫu 2.2.2. Khảo sát thành phần các hợp chất tự nhiên có trong rễ củ cây Trạch tả 2.2.2.1. Định tính một số nhóm hợp chất tự nhiên *Định tính flavonoid * Định tính tannin *Định tính các polyphenol khác *Định tính alkaloids * Định tính glycoside: 2.2.2.2.Phương pháp sắc ký lớp mỏng (TLC) 2.2.3. Định lượng polyphenol tổng số theo phương pháp Folin- Ciocalteau 2.2.4. Phương pháp tạo mô hình chuột béo phì và đái tháo đường type 2 * Tạo mô hình chuột béo phì 9 - Nhóm nuôi thường (lô 1): Cho ăn chế độ bình thường (thức ăn chuẩn của Viện Vệ sinh Dịch tễ TW). - Nhóm nuôi béo (lô 2 đến lô 8): Cho ăn thức ăn giàu lipid với thành phần được trộn từ nhiều loại thức ăn khác nhau như: ngô, sữa bột, đậu tương, lòng đỏ trứng, lạc, mỡ nước… - Thời gian nuôi chuột theo 2 chế độ ăn là 6 tuần. * Phương pháp gây ĐTĐ type 2 từ chuột béo phì thực nghiệm bằng Streptozotocin (STZ) liều thấp. Sau khi chuột được nuôi béo phì thực nghiệm thành công chúng tôi tiếp tục tiến hành gây ĐTĐ type 2 bằng cách tiêm liều đơn STZ (110mg/kg thể trọng pha trong đệm citrate 0,01M, pH = 4,5). * Phân lô chuột thí nghiệm Lô 1: Chuột bình thường, uống nước cất (lô đối chứng âm) Lô 2: Chuột béo phì-ĐTĐ, uống nước cất, không điều trị (lô đối chứng dương) Lô 3: Chuột béo phì-ĐTĐ , điều trị cao phân đoạn EtOH Lô 4: Chuột béo phì-ĐTĐ, điều trị cao phân đoạn n- hexan Lô 5: Chuột béo phì-ĐTĐ, điều trị cao phân đoạn CHCl 3 Lô 6: Chuột béo phì-ĐTĐ, điều trị cao phân đoạn EtOAc Lô 7: Chuột béo phì-ĐTĐ, điều trị cao phân nước Lô 8: Chuột béo phì-ĐTĐ, điều trị metformin 2.2.5. Thử độc tính cấp xác định LD 50 bằng đường uống 2.2.6. Phương pháp định lượng một số chỉ số hóa sinh( glucose, lipid máu) * Phương pháp định lượng glucose huyết. *Tiến hành lấy mẫu thử nghiệm sau khi kết thúc đợt thí nghiệm *Định lượng một số chỉ số lipid trong huyết thanh. 2.2.7. Phương pháp xử lý thống kê 10 Chương 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.1. Quy trình tách chiết các phân đoạn từ rễ củ cây Trạch tả (Alisma phantago-aquatica L.) Từ 5000 gam rễ củ cây Trạch tả khô được ngâm kiệt 3 lần trong ethanol 96% tinh khiết ở nhiệt độ phòng, lọc chiết 3 lần liên tiếp, loại dung môi dưới áp suất giảm thu được tổng khối lượng mẫu cao cồn tổng số là 298g. Giữ lại 50g dùng cho quá trình phân tích và điều trị cho chuột (chiếm 16,78% tổng khối lượng cao cồn tổng số), khối lượng cao cồn còn lại (248g) dùng để tách chiết qua các dung môi hữu cơ có độ phân cực tăng dần: n-hexan, chloroform, ethylacetate theo quy trình chiết rút trên. Cụ thể là hòa tan cao cồn tổng số vào nước ấm rồi chiết, lọc 3 lần qua dung môi n-hexan tỷ lệ 1:1 theo thể tích. Thu phân lớp n-hexan cô loại bỏ dung môi được 97g cao phân đoạn n-hexan. Phân lớp nước còn lại hòa tan với CHCl 3 tỷ lệ 1:1 theo thể tích(cũng chiết , lọc 3 lần), thu phân lớp CHCl 3 cô loại bỏ dung môi thu được cao phân đoạn CHCl 3 38g . Phân lớp nước còn lại hoà tan với EtOAc tỷ lệ 1:1 theo thể tích (cũng chiết, lọc 3 lần), thu phân lớp EtOAc cô loại bỏ dung môi được 45g cao phân đoạn EtOAc. Phân lớp nước còn lại cô cạn được cao phân đoạn nước 60,8g Bảng 3.1. Hiệu suất tách chiết các phân đoạn từ rễ củ cây Trạch tả Phân đoạn Khối lượng dịch chiết cô đặc (g) Hiệu suất chiết rút (% nguyên liệu khô) Cao ethanol 298 5,96 Cao n-hexan 97 1,94 Cao CHCl 3 31 0,62 Cao EtOAc 45 0,9 Cao PĐ nước 60,8 1,22 [...]... tốt nhất Kiến nghị - Tiếp tục nghiên cứu các phương pháp tách, tinh chế và xác định hàm lượng các chất trong rễ củ cây Trạch tả (Alisma phantagoaquatica L.) - Nghiên cứu thành phần và các chất trong rễ củ cây Trạch tả ở các vùng địa lí khác nhau - Đi sâu nghiên cứu cơ chế hóa sinh của một số hợp chất thứ sinh có tác dụng chống béo phì và hạ đường huyết trong rễ củ cây Trạch tả ... các hợp chất tự nhiên có trong các phân đoạn dịch chiết rễ củ cây Trạch tả 3.2.1 Định tính một số hợp chất tự nhiên có trong rễ củ cây Trạch tả Chúng tôi tiến hành thử định tính bằng các phản ứng hóa học đặc trưng Kết quả được trình bày trong bảng 3.2 Bảng 3.2 Bảng kết quả định tính một số hợp chất tự nhiên trong các phân đoạn dịch chiết từ rễ củ cây Trạch tả Mẫu Nhóm chất Thuốc thử PĐ EtOH n-hexan CHCl3... 500mg/ kg thể trọng Từ kết quả trên ta có thể thấy được trong rễ củ cây Trạch tả có chứa nhiều hợp chất thứ sinh có tác dụng giảm glucose huyết Trong các phân đoạn dịch chiết thì cao phân đoạn EtOH và n-hexan là có tác dụng giảm đường huyết rõ nét hơn trong điều trị ĐTĐ type 2.Tuy nhiên muốn phát triển thực phẩm chức năng chữa ĐTĐ từ rễ củ cây Trạch tả cần có thêm nhiều nghiên cứu sâu hơn về các hợp... 23 chỉ số HDL-c tăng cũng giải thích tại sao lượng cholesterol toàn phần, triglycerid giảm KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ Kết luận Từ các kết quả nghiên cứu trong quá trình thực nghiệm, chúng tôi rút ra những kết luận sau: 1 Thành phần các hợp chất thứ sinh trong dịch chiết từ rễ củ cây Trạch tả khá phong phú, bao gồm: Flavonoid, alkaloid, glycoside và tanin 2 Tác dụng giảm trọng lượng cơ thể của một số phân... xanh (tanin) chứng tỏ trong các phân đoạn dịch chiết từ rễ củ cây Trạch tả chứa thành phần các hợp chất tự nhiên khá phong phú Đây là cơ sở bước đầu cho phép chúng ta tiếp tục khảo sát các tác dụng của các hoạt chất có trong rễ củ cây Trạch tả lên trọng lượng, nồng độ đường huyết và chỉ số lipid trên chuột, béo phì và ĐTĐ 13 3.3 Định lượng polyphenol tổng số theo phương pháp FolinCiocalteau Đường chuẩn... cứu sâu hơn về các hợp chất trong mỗi phân đoạn dịch chiết đặc biệt là trong phân đoạn EtOH và n-hexan đã thể hiện hiệu quả tốt hơn 21 3.6.3.Tác dụng đến chuyển hóa lipid trên mô hình chuột ĐTĐ type 2 Để có thêm cơ sở đánh giá ảnh hưởng của các phân đoạn dịch chiết đến một số chỉ số lipid trong huyết thanh của chuột ĐTĐ type 2 thì vào ngày cuối cùng của thời gian điều trị ( ngày thứ 21) sau khi cho... hai lô chuột có chỉ số đường huyết thấp là lô 3 (lô điều trị bằng cao phân đoạn EtOH) và lô 4 (lô điều trị bằng cao phân đoạn n-hexan) rồi tiến hành lấy máu tổng số và phân tích một số chỉ số lipid: cholesterol, triglycerid, HDL-c, LDL-c Bảng 3.12 Tác dụng của cao PĐ EtOH và n-hexan lên một số chỉ số lipid ở chuột ĐTĐ type 2 sau điều trị 21 ngày Sau 21 ngày điều trị Chỉ số hóa sinh Trước ĐT Cao PĐ... của một số phân đoạn dịch chiết sau 21 ngày điều trị là rất rõ rệt Lô uống cao phân đoạn EtOH cho kết quả giảm trọng lượng cơ thể chuột mạnh nhất 9,62%, các lô điều trị bằng phân đoạn n-hexan, CHCl 3, EtOAc giảm lần lượt là 8,14%; 6,51%; 5,77% còn lô uống cao phân đoạn nước giảm thấp nhất 2,70% so với trọng lượng cơ thể trước điều trị 3 Một số phân đoạn dịch chiết từ rễ củ cây Trạch tả có khả năng hạ... bằng phương pháp Folin-Ciocalteau Dịch chiết mẫu cho phản ứng với thuốc thử Folin-Ciacalteau tạo ra sản phẩm có màu xanh lam So màu trên máy quang phổ UV VIS 1000 ở bước sóng λ = 760nm, dùng chất chuẩn là gallic acid để tính lượng polyphenol Kết quả được trình bày ở bảng 3.5 Bảng 3.5 Kết quả định lượng polyphenol tổng số trong các phân đoạn dịch chiết từ rễ củ cây Trạch tả Hàm lượng Mẫu OD760nm polyphenol...11 % Tính theo nguyên liệu khô ban đầu Hiệu suất chiết rút cao nhất là ở phân đoạn cao ethanol (5,96%), tiếp đến là cao phân đoạn n-hexan(1,94%), cao phân đoạn ethylacetate là (0,9%), và thấp nhất cao phân đoạn chloroform (0,62%) Kết quả này cho thấy trong rễ củ cây Trạch tả có chứa một lượng lớn các hợp chất tự nhiên và các cao phân đoạn thu được sẽ được sử dụng cho các nghiên cứu tiếp theo . dùng để tách chiết qua các dung môi hữu cơ có độ phân cực tăng dần: n-hexan, chloroform, ethylacetate theo quy trình chiết rút trên. Cụ thể là hòa tan cao cồn tổng số vào nước ấm rồi chiết, lọc. phân đoạn cao ethanol (5,96%), tiếp đến là cao phân đoạn n-hexan(1,94%), cao phân đoạn ethylacetate là (0,9%), và thấp nhất cao phân đoạn chloroform (0,62%). Kết quả này cho thấy trong rễ củ. +++ +++ - + + Tannin Vanilin/HCl(đ) + + + - - Vanilin +++ +++ + + + Gelatin/NaCl ++ + + ++ + Acetat chì +++ +++ + Polyphenol khác NaOH 10% +++ ++ - FeCl 3 5% ++ ++ + + + 12 Alkaloid Mayer +