     JASMINUM SUBTRIPLINERVE BLUME. Chuyên ngành: HÓA   60 44 31   1. TS.  2. TS.  -  2012 LỜI CẢM ƠN Tôi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến TS Hồ Thị Cẩm Hoài, Bộ môn Hóa lý - Khoa Hóa học trường Đại học khoa học Tự nhiên Tp Hồ Chí Minh. TS Huỳnh Ngọc Thụy, Bộ môn Dược Liệu – Khoa Dược, Đại học Y Dược Tp.HCM, những người thầy đã tận tình theo dõi, chỉ bảo, giúp đỡ tôi trong quá trình thực hiện luận văn này. Tôi đã học tập được rất nhiều kinh nghiệm cũng như kiến thức khoa học và phương pháp làm việc. Xin chân thành cảm ơn chân thành đến các Thầy, Cô bộ môn Hóa lý và Khoa Hóa trường Đại học khoa học Tự nhiên Tp Hồ Chí Minh đã giúp đỡ tôi trong quá trình học tập và thực hiện luận văn tốt nghiệp này. Tôi xin gửi lời biết ơn chân thành đến các Thầy, Cô trong Bộ môn Dược Liệu – Khoa Dược, Đại học Y Dược Tp.HCM đã tạo điều kiện cho tôi thực hiện luận văn này. Xin cảm ơn các bạn Ngân, Thiên Hương, Hoán, các em trong phòng Hóa lý hữu cơ, Hóa Phân tích đã tạo điều kiện cho tôi trong quá trình thực hiện đề tài. Con xin gửi lời biết ơn đến Bố Mẹ, người đã sinh thành, dưỡng dục cho con có được ngày hôm nay và mai sau. Em xin cảm ơn các anh, chi của em đã động viên và giúp đỡ em. Cảm ơn em, người vợ yêu thương của anh, đã luôn ở bên và động viên anh hoàn thành tốt luận văn này. Xin cảm ơn Trường THPT Trần Đại Nghĩa đã tạo điều kiện tốt nhất cho tôi học tập và làm việc. Xin cảm ơn và gửi lời chúc sức khỏe đến tất cả mọi người. Phan Hồng Sơn ii MỤC LỤC Trang  L MỤC LỤC ii  iv  v  vii MỞ ĐẦU viii CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 CHI JASMINUM ( CHI NHÀI HAY LÀI) 2 1.2 CÂY VẰNG SẺ JASMINUM SUBTRIPLINERVE BLUME 2 1.2.1  3 1.2.2  3 1.2.3     Jasminum subtriplinerve Blume  ác cây cùng chi 4 1.2.4   6 1.2.5 v 9 1.3 MÔ HÌNH GAN NHIỄM ĐỘC TRONG THỬ NGHIỆM IN VIVO 17 1.3.1  4 17 1.3.2 Mô hình in vitro và in vivo 18 1.4 CHẤT CHUẨN 19 CHƢƠNG 2: THỰC NGHIỆM 2.1 NGUYÊN VẬT LIỆU 22 2.1.1  22 iii 2.1.2 Thú  22 2.1.3   23 2.2 PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 24 2.2.1 Qui trình trích ly 24 2.2.2  các  25 2.2.3 Qui trình tác 31 2.2.4   CCl 4 (in vivo) 36 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 3.1 KẾT QUẢ KHẢO SÁT IN VITRO 43 3.1.1  43 3.1.2   47 3.2 XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC VÀ NHẬN DANH CÁC HỢP CHẤT 47 3.2.1  VS3.1 47 3.2.2  49 3.2.3  51 3.2.4  56 3.3 KẾT QUẢ KHẢO SÁT IN VIVO 57 3.3.1  4 57 3.3.2  58 CHƢƠNG 4: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 4.1 KẾT LUẬN 62 4.2 ĐỀ NGHỊ 64  65  71  72 iv -  ****** 13 C-NMR:  1 H-NMR:  Ac: Aceton ALT: Alanin aminotransferase BuOH: Butanol CYP: Cytochrome P450 DMSO: Dimetylsulfoxid DPPH: 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl EA: Etyl axetat Ed:  EDTA: Etylendiamintetraaxetic axit EtOH: Etanol GOT: Glutamat Oxaloaxetat Transaminase GPT: Glutamat pyruvat transaminase GSH:  HPLC: High-performance liquid chromatography HMBC: Heteronuclear multiple-bond correlation spectroscopy HSQC: Heteronuclear single-quantum correlation spectroscopy IC:  LDH: Lactat dehydrogenase MeOH: Metanol MS: Mass spectroscopy NAD: Nicotinamid adenin dinucleotid NADPH: Nicotinamid adenin dinucleotid photphat NO: Nitric oxit OD: Optical Density SRB: Sulforhodamine B SKBM:  SKC:  TLG:  v  CÁC NG *****  So sánh  Jasminum subtriplinerve Blume chi Jasminum 5          Jasminum subtriplinerve Blume và cây lá ngón Gelsemium elegans Benth 5 1.3   Jasminum subtriplinerve Blume 9   Jasminum subtriplinerve Blume 10   Jasminum subtriplinerve Blume  11   Raphanus sativa               Jasminum subtriplinerve Blume 13  IC 50  bào      Jasminum subtriplinerve Blume trên 3 -G2, RD, LU 16        i hóa c     Jasminum subtriplinerve Blume DPPH  17  K  các cao trích ly      Jasminum subtriplinerve Blume 24   27  P              Jasminum subtriplinerve Blume 43     etyl axetat 44 vi        do NO        Jasminum subtriplinerve Blume 45      etyl axetat . 46  Gi H  axit 3,4-dihidroxibenzoic 49   13 à   axit 3,4-dihidroxibenzoic 49    C  axit gallic và  VS3.2 50    H axit gallic . 51   13   VS3.3 và verbascosid 53  -  VS3.3 và verbascosid 54        cao EA 56   4  58 .13  cao etyl axetat  59 vii  CÁC  ***** Hình 1.1  Jasminum subtriplinerve Blume  Ca 4 Hình 1.2 Hoa  . 20 Hình 2.1  . 22 Hình 2.2 P  . 26 Hình 2.3 Các  . 38 Hình 2.4  . 39 Hình 3.1  . 48 Hình 3.2  . 50 Hình 3.3  . 52 Hình 3.4  . 55 Hình 3.5   olyphenol . 56  CÁC  *****  ly trích các cao v Jasminum subtriplinerve Blume 25  Quy trình    . 27  NO  30   . 32    VS3 . 32  VS3.A . 33 SVS3.B . 34 c VS3.G . 35 viii MỞ ĐẦU                     c gia        i  T    i hoá                 flavonoid, antocyanosid         i                m Jasminum subtriplinerve Blume,                 - Jasminum subtriplinerve Blume. ix MỤC TIÊU ĐỀ TÀI  Jasminum subtriplinerve Blume etyl axetat Netyl axetat có ý ng v etyl axetat  Khảo sát hóa học phân đoạn có tác dụng bảo vệ gan của cây vằng sẻ - Jasminum subtriplinerve Blume.  - Trích ly các cao   cây . -    các DPPH  và   . - C   cao etyl axetat. -  DPPH    - Ketyl axetat   4 (in vivo) silymarin. [...]... sẻ, mỏ quả… Theo dân gian có 3 loại vằng: vằng lá nhỏ (vằng sẻ) dùng tốt hơn cả, vằng lá to (vằng trâu) cũng đƣợc dùng, còn vằng n i không dùng làm thuốc 1.2.1 Phân bố sinh thái của cây vằng sẻ [1],[13] Vằng sẻ Jasminum subtriplinerve Blume phân bố phổ biến và khá tập trung ở khu vực các nƣớc Đông Nam Á, Nam Á, các tỉnh phía nam Trung Quốc và đảo Hải Nam Ở Vi t Nam, vằng sẻ mọc rải rác ở hầu hết các... albicans K TN E Salmonella typhi (in vivo) K TN A A: có tác dụng tốt B: tác dụng rõ r t K TN: không thử nghi m C: tác dụng vừa D: tác dụng yếu 11 E: không tác dụng Chƣơng 1: Tổng quan Các kết quả ghi nhận đƣợc cho thấy, vằng sẻ có tác dụng kháng khuẩn khá tốt, trong đó tác dụng ức chế khá mạnh trong thử nghi m in vitro lên sự phát triển của các chủng vi khuẩn phân lập từ b nh phẩm: liên cầu tan máu – Streptococcus... tính của phản ứng viêm Kết quả thu đƣợc cho thấy vằng sẻ có tác dụng gây teo tuyến ức 10 Chƣơng 1: Tổng quan 1.2.5.3 Tác dụng kháng sinh của vằng sẻ trên một số vi khuẩn gây bệnh và hoạt tính kháng vi sinh vật kiểm định Tác giả Nguyễn Thị Ninh Hải và các cộng sự sử dụng các phƣơng pháp sau để nghiên cứu tác dụng kháng sinh của cao vằng sẻ (Jasminum subtriplinerve Blume): + Phƣơng pháp khuếch tán trên... đã công bố những nghiên cứu ban đầu về một số hoạt tính của cao vằng sẻ Cả 2 báo cáo cùng tiến hành nghiên cứu tác dụng kháng viêm của vằng sẻ với các phƣơng pháp và liều lƣợng khác nhau Xem bảng 1.4 Bảng 1.4 So sánh kết quả nghiên cứu hoạt tính kháng viêm của cây vằng sẻ Jasminum subtriplinerve Blume Kết quả của nhóm tác giả Võ Kết quả của nhóm tác giả Nguyễn Thị Ninh Thị Ngọc Sơn [17] Hải [6-7] Phƣơngpháp... u hạt Chƣa thấy tác dụng chống tính viêm mãn tính Có tác dụng ức chế giai đoạn mãn tính của phản ứng viêm khi dùng liều khá cao Trong nghiên cứu hoạt tính kháng viêm, nhóm tác giả Nguyễn Thị Ninh Hải [17] còn nghiên cứu tác dụng trên tuyến ức của chuột cống non, do các thuốc chống viêm thƣờng có mối tƣơng quan giữa tác dụng gây thu teo tuyến ức và tác dụng chống giai đoạn mãn tính của phản ứng viêm... Silymarin có tác dụng ức chế sự biến đổi của gan thành các tổ chức xơ, giảm sự hình thành và lắng đọng của các sợi collagen dẫn đến xơ gan [35], [48] Ngoài ra, Silymarin còn bảo v tế bào gan, tăng cƣờng chức năng gan và kích thích sự phát triển của các tế bào gan mới để thay thế các tế bào gan cũ bị tổn thƣơng, kích thích phục hồi các tế bào gan đã bị hủy hoại [22] cũng nhƣ có tác dụng chống peroxid hóa. .. loại cây khác cùng chi Do vằng sẻ có đặc điểm hình thái gần giống với nhiều cây cùng chi Jasminum nên rất dễ bị nhầm lẫn Để phân bi t vằng sẻ với các loại cây khác có thể dựa vào các đặc điểm về thân, lá gân và cụm hoa Xem bảng 1.1 4 Chƣơng 1: Tổng quan Bảng 1.1 So sánh đặc điểm thực vật giữa vằng sẻ Jasminum subtriplinerve Blume với một số cây khác cùng chi Jasminum [7],[14] J subtriplinerve J longisetum... nh gan, làm giảm nồng độ các enzym gan trong máu Silymarin đã đƣợc kiểm nghi m, chứng thực tác dụng phục hồi gan, đã đƣợc bào chế thành thuốc bán ra thị trƣờng và sử dụng rộng rãi, nên chúng tôi sử dụng Silymarin nhƣ là một chất chuẩn trong phƣơng pháp sàng lọc tác dụng bảo v gan trên mô hình chuột nhiễm độc CCl4 (in vivo) để đối chiếu, so sánh với tác dụng phục hồi gan với các cao chiết, phân đoạn của. .. hợp chất đƣợc phân lập và xác định cấu tr c từ các loài thuộc chi Jasminum chủ yếu là các hydrocacbon, chất thơm, flavonoid, terpenoid, hợp chất chứa nitơ…và đặc bi t là hợp chất iridoid [52] Hoa và lá có vị cay và ngọt, tính mát, có tác dụng trấn thống, thanh nhi t giải biểu, lợi thấp Rễ có vị cay ngọt, tính mát, hơi có độc, có tác dụng trấn thống, gây tê, an thần 1.2 CÂY VẰNG SẺ JASMINUM SUBTRIPLINERVE. .. Tuy nhiên, chỉ có rất ít tài li u nghiên cứu về hoạt tính sinh học cũng nhƣ thành phần hoá học của cây vằng sẻ Năm 1984 nhóm Bác sỹ Nguyễn Thị Ninh Hải cùng các đồng nghi p Vi n Dƣợc li u - Bộ Y tế công bố công trình nghiên cứu về thành phần hoá học ban đầu và thử tác dụng sinh học của các nhóm hoạt chất cây chè vằng Trong đó, dựa theo phƣơng pháp chiết xuất hoá sinh thực vật của các tác giả Ấn Độ và . axetat   Khảo sát hóa học phân đoạn có tác dụng bảo vệ gan của cây vằng sẻ - Jasminum subtriplinerve Blume. . đã học tập được rất nhiều kinh nghiệm cũng như kiến thức khoa học và phương pháp làm việc. Xin chân thành cảm ơn chân thành đến các Thầy, Cô bộ môn Hóa lý và Khoa Hóa trường Đại học khoa học. thành đến TS Hồ Thị Cẩm Hoài, Bộ môn Hóa lý - Khoa Hóa học trường Đại học khoa học Tự nhiên Tp Hồ Chí Minh. TS Huỳnh Ngọc Thụy, Bộ môn Dược Liệu – Khoa Dược, Đại học Y Dược Tp.HCM, những người