BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI NGUYỄN ĐÌNH NGÂN NGHIÊN CỨU SỬ DỤNG TẤM BIỂU MÔ CUỐNG RỐN NUÔI CẦY ĐIỀU TRỊ LOÉT GIÁC MẠC KHÓ HÀN GẮN CHUYÊN NGHÀNH: NHÃN KHOA Mã số: 62720157 TÓM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SỸ Y HỌC Hà Nội - 2014 Cơng trình hồn thành tại: TRƯỜNG ĐẠI HỌC Y HÀ NỘI Người hướng dẫn khoa học: PGS.TS Hoàng Thị Minh Châu PGS.TS Phan Toàn Thắng Phản biện 1: Phản biện 2: Phản biện 3: Luận án bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án cấp Trường Họp Vào hồi: ngày tháng .năm 2014 CĨ THỂ TÌM HIỂU LUẬN ÁN TẠI CÁC THƯ VIỆN 1- Thư viện Quốc gia 2- Thư viện Trường Đại học Y Hà Nội 3- Thư viện thơng tin Y học Trung ương CÁC CƠNG TRÌNH KHOA HỌC ĐÃ CƠNG BỐ Nguyễn Đình Ngân, Hoàng Thị Minh Châu, Phan Toàn Thắng (2012) Kết bước đầu sử dụng biểu mô cuống rốn nuôi cấy điều trị loét giác mạc khó hàn gắn ệt Nam, 29, tr 16 – 23 Nguyễn Đình Ngân, Hoàng Thị Minh Châu (2013) Nghiên cứu đặc điểm loét khó hàn gắn điều trị bệnh viện Mắt Trung ương năm 2011.T Y dược học Quân sự, 38/6, tr 137 -145 Nguyễn Đình Ngân, Hồng Thị Minh Châu, Phan Toàn Thắng (2013) Nghiên cứu sử dụng biểu mô cuống rốn nuôi cấy điều trị loét giác mạc khó hàn gắn T p chí Y học Việt Nam, 405, tr 93 – 100 Nguyễn Đình Ngân, Hoàng Thị Minh Châu (2014) Bài tổng quan: Tiềm ứng dụng biểu mô cuống rốn nuôi cấy bệnh lý bề mặt nhãn cầu T p chí Y học Việt Nam, 414, tr – GI I THI U LU N ÁN tv Loét giác m c khó hàn g n (LGMKHG) tình tr ng lt khơng bi u tr tích c c lo i tr nguyên nhân gây b nh h u qu c a b nh lý khác c a giác m c (GM) ph c t p, u tr c hi u Có nhi u bi u tr c ng d ch ng viêm, c m t nhân t o, ng b m t nhãn c u, t kính ti p xúc m m, khâu cò mi, ghép GM nhiên nhi u ng h p trình bi u mơ hóa GM v n ch c giác Ghép màng i c ng d ng t l ng (t n 91,7%), vi c s d ng màng i m c ng làm gi m tính su t c a GM, ng n ch giác Công ngh t bào g c g c nghiên c u tr LGMKHG, m ng phát tri n m u tr b nh lý Ghép t m bi u mô nuôi c y t thân (vùng rìa, niêm m c mi ng) ho ng lo i (bi u mô màng i) c s d ng cho m t s ng h p cho k t qu Bi u mô cu ng r n (BMCR) v b n ch t bi u mô màng i b c quanh cu ng r n Các t c phân l p ch ng minh có tính ch t c a t bào g c bi u mơ, có kh t hóa thành m t s lo i t bào bi ng thích h p c bi t bi u mô GM Reza (2011) bi t hóa bi u mơ cu ng r n gi ng v i bi u mô GM, ghép th K t qu cho th y GM sau ghép 10 tu n v n trong, tân m ch, có hình nh mơ h c gi ng v i GM th bình ng Nh ng nghiên c ng ng d ng BMCR nuôi c y b nh lý b m t nhãn c c bi t LGMKHG tình tr ng b u tr nhãn khoa Xu t phát t k t qu ti tài nh m m c tiêu: k t qu m bi u mô cu ng r n nuôi c u tr loét giác m c khó hàn g n Nh n xét y u t n k t qu ph u thu t 2 Tính c p thi t c tài Loét GM khó hàn g n h u qu c a nhi u b nh lý khác c a b m t nhãn c ph c t u tr c hi u, u tr u h n ch loét t n t i kéo dài, t n nhu mơ có th gây loét th ng, b nh lý nan gi i v i th y thu c nhãn khoa c nghiên c u u tr hi u qu b nh lý r t c n thi t Công ngh t bào g c bi t t bào bi ng lo i) b c ng d u tr LGMKHG g m gi i pháp m i cho tình tr ng b nh lý n có r t nghiên c u v ng d ng t bào g c bi t t bào g ng lo u tr LGMKHG Nh i c a lu n án c công b th gi i t i Vi t nam s d ng t m BMCR nuôi c y u tr LGMKHG v i s ng l n Nghiên c ng minh hi u qu c li n bi u mô, s t n t i c a t bào bi u mô ng lo i di n GM sau ghép V i th i gian theo dõi dài nh t sau PT an tồn c a ghép BMCR ni c y M c dù k thu t áp d i gi ng v i t m bi u mô màng i nghiên c u c a Parmar D.N ng c i ti n m n hóa cho q trình nuôi c y PT, phù h p v i u ki n c n Vi c a gi ng nuôi c y (thay t m collagen v GM) giúp q trình ni c y d ng pháp c nh t m bi u mô b ng khâu ép lên kính ti p t hi u qu t n hi i, k thu t ph c t p B c c lu n án Lu n án g m 119 trang g tv T ng quan (32 trang i u (17 trang) - K t qu - Bàn lu n (30 trang), K t qu (2 trang), Ki n ngh (1 trang) Trong lu n án có 31 b ng, 13 bi , 23 hình, ph l c Lu n án có 110 tài li u tham kh ng Vi t, 104 ti ng Anh, ti c NG QUAN 1.1 Loét giác m c khó hàn g n 1.1.1 Khái ni m Loét GM khó hàn g n hay khuy t bi u mô lâu li n (persistent epithelial defect), loét không bi u tr tích c c lo i tr nguyên nhân gây b nh Trên lâm sàng lt khơng có bi u hi n bi u mơ hóa vịng tu nh khó hàn g n LGMKHG bao g m c hai nhóm khuy t bi n có loét nhu mô 1.1.2 b nh sinh LGMKHG -T c ti n t bào bi u mơ GM, vùng rìa do: suy gi m t bào g c vùng rìa, suy gi m liên k t c a t bào bi u mô, t bào bi u mô thu c nh m t, ch t b o qu n - Tình tr ng viêm c a b m t nhãn c u: ho t hóa men tiêu protein hóa i b ch c u, c ch bào -T ng (neurotrophic keratopathy): c ch phân chia t bào gi m c m giác c a GM -T c: ng t bào b bong kh i GM, m n gây khuy t bi u mô, loét GM 1.1.3 u tr LGMKHG hi n Nguyên t c chung: ph i h p nhi u bi ch chi u tr phù h u tr c nh ng t ih p Các p i khoa: d ng thu c tra m c bi u c m t nhân t o, thu n bi u mô, thu c c ch men tiêu protein, ch ng viêm T ch c s d n pháp h tr , ho u tr nh ng h p LGMKHG m nh Huy t t t kính ti p xúc m pháp có hi u qu c áp d ng hi n Tuy nhiên c n theo i nhi m loét u tr ngo i khoa: c k t m c, ghép GM) m c dù có hi u qu nhi m, n th m m , ch có nguy G tái phát Ghép vùng rìa GM có hi u qu LGMKHG suy gi m t bào ngu th c hi n c t n hai m t Ghép màng c nghiên c u, ng d ng kho n, ph c h c tình tr ng khuy t nhu mô c a GM ng h p loét th ng nh (< 3mm), làm gi ch t i GM, không gây ph n ng th i ghép Màng i kích thích li n bi u mô ch y u: t ng v áy GM bình ng (khi ghép di n loét inlay), t ng thu n l i kích thích t bào bi u mô xung quanh t n vào che ph loét (khi ghép ph lên di n loét overlay) P có k t qu ng (t l thành cơng t n 91,7% tùy t ng ng làm gi c a GM sau ghép, có n chéo (khi ghép màng i c b o qu n nh) Công ngh t bào g u tr LGMKHG: ng nghiên c um u tr - loét giác m c thay th t m th vi n b ng t m bi u mô nuôi c y gi ng bi u mô GM 1.2 Nghiên c u s d ng t m bi u mô nuôi c u tr LGMKHG 1.2.1 T m bi u mô nuôi c y t thân Ghép t m bi u mô nuôi c y t thân (t bào g c vùng rìa, t bào niêm m c mi c s d ng LGMKHG suy t bào g c vùng rìa tồn b c hai m t t c che ph b ng l p bi u mơ n dày tính ch i gi ng v i l p bi u mô GM ng Tuy nhiên m nên h ng m nh ghép cao, t bào bi u mô không t n t i lâu dài t i di n ghép 1.2.2 T m bi u mô nuôi c ng lo i Ghép t m bi u mô nuôi c ng lo i c n t bào khơng gây th i ghép, có th bi t hóa gi ng bi u mơ GM t bào bi u mô màng ng yêu c u He Y.G c ng s (1999) so sánh ghép t m bi u mơ t bào vùng rìa GM nuôi c y t m bi u mô màng i nuôi c y GM th t n u cho th y sau ghép 24h, t bào bi u mô màng i nv i b ng th bán liên k t gi bào bi u mô rìa GM ni c y Sau PT 10 ngày, ng h p ghép bi u mô màng ng h p ghép t bào vùng rìa v n phát hi n s t n t i c a t bào GM K th a k t qu này, Parmar D.N c ng s (2006) nghi m s d ng t m bi u mô màng i nuôi c y t m collagen cho b nh nhân loét GM khó hàn g n th t b i v i bi n pháp u tr n i khoa K t qu c b nh nhân lt bi u mơ hóa hồn tồn sau l t t m bi u mô màng i nuôi c y li n bi u mô, tác gi cho r ng có c s li n ng sinh h c c a bi u mô màng i t ng c a t bào bi u mô loét Ngồi ra, bi u mơ màng i có th liên k t t m th che ph loét t m th i, c thay th d n t bào GM xung quanh di chuy n vào 1.3 ng d ng BMCR ni c u tr LGMKHG 1.3.1 Tính ch t g c c a t bào BMCR B c quanh cu ng r n màng i, BMCR bi u mơ màng c hình thành t ng bì phơi (epiblast) vào ngày th c a thai k d n suy lu n t bào BMCR có th có tính ch t t bào v ng bì phơi T bào BMCR có marker c a t bào g c phôi (Oct-4, Rex 1, SSEA- 4, SOX i m t s marker c a t bào g c trung mô (CD44, CD166 t rõ v i marker c a t bào g c bi u mô (CD151, CD227) Các t bào bi u hi n r t rõ tính ch t c a t bào g c bi i CK7, CK8, CK14, CK19, Np63) nh ng marker khác c a t bào g c vùng rìa (ABCG2, HES1, BMI1, CK15, SOD2) Trên th c nghi m t c bi t hóa thành t bào gan (v ch u bì bi u mơ GM an tồn c y ghép t bào g c bi u mô cu ng r n Màng i (có t bào bi u mơ) t cs d i T bào bi u mô màng c th nghi m ghép ch ng minh an toàn it it bào BMCR b n ch t bi u mô màng i ng bi u mô) c nghi m ghép BMCR chu t suy gi m mi n d ch sau tháng khơng th y có kh i tân t o BMCR m t ph n c a thai nên không gây th ng lo i Trong t bào có HLA E, G có vai trò c ch mi n d ch Trên th c nghi m ghép d loài (trên chu y BMCR không b th i 1.3.3 Các nghiên c u bi t hóa BMCR thành bi u mơ giác m c BMCR có marker c a t bào g c vùng rìa, ni c y ng PTTet hóa gi ng v i t bào bi u mơ GM ) Reza H.M c ng s m BMCR nuôi c y m t th c g t s ch bi u mô k t GM K t qu 100% s th GM trong, khơng có bi u hi n suy gi m t bào g c vùng rìa sau tu n, th m 10 tu n 50% s th Xét nghi m gi i ph u b nh lý cho th y b m t GM sau ghép l p t bào bi u mô lát t ng không s ng hóa, có c u trúc gi ng GM th ng, khơng có viêm i bi n d ch t bào i c hi u cho bi u mô GM) âm tính v i CK4, CK19 c hi u bi u mô k t m c) y, BMCR b n ch t bi u mô màng i, có th bi t hóa gi ng bi u mơ c a giác m c nên hồn tồn có th nghiên c u áp d ng u tr loét GM khó hàn g n gi a Parma D.N nêu n th gi i Vi t Nam nghiên c u v v NG, U ng nghiên c u Nghiên c u ti n hành 37 b nh nhân b LGMKHG nguyên nhân khác u tr t i B nh vi n M t tháng 1 Tiêu chu n l a ch n Tiêu chu n lo i tr - Nuôi c y ch t n o loét cho k t - Loét GM d a th ng, ho qu âm tính v i vi khu n, n m th ng u tr n i khoa h t - GM viêm sâu nhu d u hi u viêm c p b m t nhãn mô c u, loét có d u hi u khó hàn - B nh nhân có qu m, ho c g n: bi n d ng, h mi n ng kèm + M t gi m kích thích theo +B lt có g cu n bi u mơ ng h p lt khó hàn i s ch, h u g n có t bào g c t ho t t vùng rìa GM tồn b + Khơng có bi u hi n bi u mơ hố - B nh nhân khơng h p tác thêm tu n nghiên c u u 2.2.1.Thi t k nghiên c u: th nghi m lâm sàng, có ch i ch ng, so sánh d c tr u tr 2.2.2 C m u nghiên c u: p1 p tính theo cơng th c N Z 21 / 2 không d N: c m u nghiên c u 32 m t (trong nghiên c u 37 m t) 2.2.3 n m u: n u b u tr n i khoa tích c PT Các ng h p l i u tr tích c c b i khoa nh t hai tu n mà khơng có hi u qu m c ch nh PT 2.2.4 n nghiên c u n khám ph u thu t: b ng th l c, sinh hi n vi khám, hi n vi PT, gi y th m nitrocellulose, KTX - T m bi u mô cu ng r n nuôi c y: c nuôi ni c y t i phịng thí nghi m c a b môn Ngo i h c qu c gia Singapore (cung c p b i công ty KenCare Vi t Nam) T m bi h c, marker CK3, CK12 (theo tiêu chu ) 2.2.5 Cách th c ti n hành nghiên c u - Khám, thu th p thông tin b nh nhân: v m b nh nhân, ti n s b nh t n t i m t - Ph u thu t ghép t m bi u mô cu ng r n nuôi c y Tê t i c nh nhãn c u b ng ml lidocain 2% Dùng dao i tròn g t l y b ho i t , làm s loét, b loét, t o n n cho di n ghép t t m bi u mô ng nuôi c y) lên di n lt m t có bi u mơ quay xu i t kính ti p xúc m m ng kính 11mm che ph di t t m bi u mô, khâu c nh vào c ng m c Vicryl 8/0 theo hình d u c ng b t chéo qua KTX PT ph i h p m t thì: r a m ti n phịng ho c c t m ng ghép k t m ng h p có b nh lý ph i h p Ghép t m bi u mô l n hai: LGMKHG sau ghép l n th nh t thu g u mô hóa hồn tồn sau tu n u tr n i khoa sau ph u thu t + Tra m t dung d ch moxifloxacin 0,5% (Vigamox) x4 l n/ngày n GM li n hoàn toàn, u ng Cefuroxime (Zinnat) 0,25g x viên/ngày x ngày ng b ng huy t t c m t nhân t o 10 3.1.3 Th i gian m c b nh th i gian khó hàn g n Bi 3.1 Th i gian loét giác m c (a), th i gian khó hàn g n (b) Th i gian loét GM t tu n 28 tu n (TB 9,9 ± 5,2 tu n), th i gian khó hàn g n t tu n 13 tu n (TB 5,0 ± 2,9 tu n) H s a th u tr g n) v i th i gian loét khó hàn g ng kê u tr B u tr c áp d ng u tr S ng(m t) Th i gian (tu n) Ghép giác m c R a m ti n phòng TGM Kháng sinh TGM Kháng virus TGM Kháng n m TGM NSAIDs TGM Steroid TGM NMNT Ngo i khoa N i khoa 37 23 24 24 8,9 ± 3,2 5,1 ± 1,7 3,5 4,8 ± 2,1 2,2 ± 1,5 4,5 ± 1,9 s m t 40 20 37 Cò mi thân Bi 17 Ghép 3.2 TGM KS TGM kháng virus 15 24 13 TGM TGM TGM NMNT kháng NSAIDs u tr LGMKHG 11 3.1.5 mt c ph u thu t - Tình tr ng loét giác m c Di n tích loét t n 65% di n tích GM, trung bình 33,9 ± 14,9 % di n tích GM H s gi a di sâu c a loét th ng kê), gi a tình tr ng loét sâu) y u t th i gian loét, th i gian khó hàn g n u r t th p (r < 0,1) B ng 3.6 Di sâu loét khó hàn g n Di n tích < 30% 30% -60% 60% T ng sâu < 1/3 CDGM (1) 16 1/3- 0,05); th i gian li n m t có gi m ch ti t c m t kèm r i lo n ch n Meibomius (10,1±5,5 ngày) t cịn l i ng kê (p>0,05) - Tình tr ng t m bi c ghép: h s a ch ng t m bi u mô v i th c ghép) th i gian 15 b o qu n v i th i gian li n loét r t th th ng kê (p > 0,05) 3.3.2 Các y u t n tình tr ng di n GM sau ghép - Các y u t n tình tr ng loét khó hàn g n Nguyên nhân gây loét: n n Herpes th m tháng t i th m tháng (p < 0,05), cịn nhóm cịn l i có c i thi n khơng rõ ràng (p > 0,05) Th i gian loét giác m c: di n) tháng th c i thi ng kê so v i tháng th sau PT (p 0,05) Th i gian khó hàn g n: u khơng có s khác bi t Tính h s a th i gian loét GM th i gian khó hàn g n v i tình tr ng di n ghép th m theo dõi u th p (r < 0,35), ng kê (p > 0,05) - Tình tr ng t c ph u thu t: sâu c a loét: p v i tình tr ng di n ghép (r ng kê (p > 0,05) Các t i h p: a ch ti c m t tình tr ng di n ghép th m tháng r = ng kê (p s gi m d n th m u ng kê (p > 0,05) - Tình tr ng t m bi c ghép: th i gian b o qu n t m bi u mô ch ng t m BMCR nuôi c c ghép h u n tình tr ng di n ghép t t c th m theo dõi (r < 0,1, p >0,05) 3.3.3 Các y u t n th l c sau ph u thu t Th l c th m theo dõi theo t ng nhóm nguyên nhân loét GM không th y s khác bi t (p > 0,05) Th l c c a nhóm loét GM tái phát th l c nhóm loét l u th m tháng sau PT k t thúc (p < 0,05) H s sâu loét m ch ti cm t v i th l c l t ng kê (p 0,05) Th i gian b o qu n, tình tr ng t m bi c ghép h u có t th p v i m th l c sau PT( r < 0,1) 16 N m b nh nhân nghiên c u ng nghiên c u gây LGMKHG c a t ng h p c th r t ph c t ng có s ph i h p nhi Tuy nhiên có th ph n u, t ih u tr Nguyên nhân gây loét GM nghiên c u c a n nhi m trùng c a GM (m u ph a loét GM g p Vi t nam ch y u nhi m trùng, gi ng v i nghiên c u tr LGMKHG c a Nguy n H u Lê c ng s (2002), loét nhi m trùng chi i v i nhóm ngun nhân này, q trình viêm c a b m t nhãn c i di n loét, bào bi t b loét liên k t v ng Trong t i h p, gi m c m giác GM, khơ m t m ti n phịng y u t n i b t - Có 21/37 m t (56,8%) có tình tr ng gi m c m giác GM (bi u 3.4) LGMKHG x y m t có vai trị c loét th ng - Trong nghiên c u có 30/37 m t (81,1%) có gi m ti cm t t r i lo n ch a n 14 m t có c hai t (m c 3.1.5) i b n m t (37,8%) có m ti n phịng u m (1 mm), nh th i gian dài c PT, xét nghi u cho k t qu âm tính, ch ng t m ph n ng, tình tr ng viêm kéo dài tác n m ng m t th mi Hai y u t (khơ m t, m ti n phịng) làm phát tri n tình tr ng khó hàn g n GM viêm Tìm hi u trình s d ng thu c LGMKHG xu t hi n) c a nhóm b nh nhân nghiên c u cho th y thu c c ch trình li n v ( c ch ng viêm không steroid, kháng virus) t b o qu c v i bi u mô GM c dùng ph bi c tra kéo dài (b ng 3.4) Th m chí, 24 m cs d c m t nhân t o v i m n 17 bi benzakolium 0,1% ng h p dùng thu c có ch t b o qu n giá y u t làm LGMKHG xu t hi n cho th y hay g p viêm b m t nhãn c u kéo dài loét th n kinh ng tr c ti p lên t bào bi u mô (ch y u thu c tra m c bi h khác g p h ng ng nghiên c u u tr loét giác m c khó hàn g n Vi c d ng thu c bi u mô GM (khi dùng kéo dài) c coi bi u tr LGMKHG Tuy nhiên nghiên c u 100% b c ti p t c s d ng kháng sinh tra m t lo s i nhi m V n có m t ti p t c dùng thu c tra kháng virus kéo dài Vi c dùng thu c nhóm kéo dài s làm loét khó hàn g n phát tri n n làm t bi u mô GM c m t nhân t o khơng có ch t b o qu n thu cs d u tr LGMKHG, nhiên nghiên c u, v ng h c m t nhân t o có ch t b o qu n Benzalkonium 0,1% Khi tình tr ng khó hàn g n x y ra, 13 m c m t nhân t o, ch có m t s d ng nhóm khơng có ch t b o qu n Các bi u tr tích c c LGMKHG nghiên c u m c áp d ng v i s ng ít: cị mi (1 m t), ghép màng i (2 m t KTX m m kéo dài (2 m t), KTX ph i h p huy t t thân (3 m t) (bi 3.2) m c a loét giác m c khó hàn g n LGMKHG nghiên c c nh di n tích GM (trung bình 33,9 ± 14,9 % di n tích GM) sâu ch y i 2/3 chi u dày GM (33/37 m t) sâu c c a loét nghiên c u r t th p (r = 0,24) h khơng có liên h gi sâu c v i th i gian m c b nh th i gian loét khó hàn g n (r < 0,1) (m c 3.1.5) m m t nghiên c u có m t i cung gi ) Seitz B (2009) n th y r ng m t có t bào g c vùng rìa l n (trên cung gi ) lt GM khó hàn g ng r 18 v i nhóm khơng t , ho c t Ngoài nghiên c u ch có 12/37 m t loét vi khu n, n m, Herpes (14/37 m ng h p mang tính lo n n phá h y ng khơng rõ ràng nên lt ng khơng sâu c có th r ng 4.2 K t qu c m BMCR nuôi c y 4.2.1 Th i gian li n bi u mơ c a lt khó hàn g n Th i gian li n loét c a nghiên c u ng n, 22/37 m t có GM bi u mơ hóa hồn tồn tu n sau PT, ch có m t tu n T l thành công chung c a nghiên c u cao (34/37 m t, 91,9%), ch ng t ch nh c m bi u mô phù h p v ng LGMKHG nghiên c u (m c 3.2.1) B ng 4.1 Th i gian li n bi u mô u tr LGMKHG Th i gian li n Tác gi n (%) > tu n tu n tu n Tsubota Huy t 16 10 (1999) 20% (%) 43,8 62,5 37,5 Pool Huy t 15 (2001) 50%, ho c 100% (%) 20 46,7 53,3 Jeng Huy t 25 13 17 (2009) 50% (%) 52 68 32 Chen AMT (inlay, 16 11 (2000) overlay) (%) 37,5 68,8 31,2 Letko AMT (inlay, 30 15 15 (2001) overlay) (%) 26,7 50 50 Prabhasawat AMT (inlay, 28 16 21 (2001) overlay) (%) 57,1 75 25 N.H Lê 36 25 31 AMT inlay (2002) (%) 69,4 86,1 13,9 n Ghép t m 37 31 33 (2014) BMCR (%) 83,8 89,2 10,8 K t qu c i m t s nghiên c u tr ng c a nghiên c u khơng hồn tồn gi ng (b ng 4.1) 4.2.2 Tình tr ng di n GM ghép t m BMCR ni c y 19 Tình tr ng di n ghép t t c m u tr thành công (34/37 m t) th i gian theo dõi nh d n tháng th sau ph u thu t, ng h p xu t hi n kh i tân t o b ng di n GM c ghép t m bi u mô (m c 3.2.2) K t qu test áp tình tr ng di n ghép khác nhau, th u cho th y t bào bi u mô b m t gi ng v i bi u mô GM, không th y t bào b ng (m c 3.2.3) K t qu xét nghi m s c th Y) cho th y c b nh nhân n th m khác (1 tháng, u khơng cịn t bào bi u mơ mang NST Y (t bào BMCR) GM b nh nhân (m c 3.2.6 u tr , di c ghép t m BMCR ni c y ch có t bào bi u mơ GM bình ng T t c m u khơng th y có bi u hi sinh tân m ch M t s m t có c ng nh ch c nh Sau li n bi u mơ hồn tồn, tình tr ng viêm, phù m ch máu chi u dày nhu mô GM m d n 4.2.3 K t qu th l c sau ph u thu t Th l c m c a nhóm nghiên c u th p, có 86,5% (32/37) m t có th l c m 3m), khơng có ng h p th l c 20/60 Sau PT th l c có c i thi n rõ so v i cm n th m sau PT tháng v n có 28,1% (9/32) m t v n có th l c m c dù th i m k t thúc theo dõi có 40% (12/30) s m t có th l c t n t t ng 3.10) Th l c th m sau m c c i thi l th m tháng k t thúc theo dõi so v i th m tháng sau m (p 0,05), ch ng t th l c có xu ng nh tháng th sau PT (m c 3.2.4) hàn g n c a ghép t m BMCR nuôi c y Vi c s d ng t m BMCR ni c y lt GM khó hàn g n xu t phát t hi u qu c i bi u mô màng i nuôi c u tr LGMKHG Màng i t c ch ng minh có kh c ch ph n ng viêm, kích thích t bào bi u mơ di chuy n, k t dính, c ch t o s o ch b m t nhãn c u ghép ph di n loét GM (overlay) Hi u qu sinh h c nh ch t có t bào bi u mô màng i nhu mô màng i), ch t trung 20 gian sinh h c ch t n t i vài ngày sau ghép màng i vào b m t nhãn c u Do v y vi c che ph t ng t bào bi u mô màng i s ng s t ng thu n l i cho t bào bi u mô GM phát tri i che ph b ng màng c ch ng minh qua nghiên c u c a Parma D.N (2006) m t LGMKHG BMCR (bi u mô màng i b c quanh cu ng r n) có ngu n g c c u trúc gi ng v i bi u mơ màng i c bi t hóa thành bi u mô GM nên ghép t m BMCR ph di n loét GM khó hàn g n theo chúng tơi s kích thích bi u mơ GM phát tri li n bi liên k t v i nhu mô GM i, che ph di n khuy t bi u mô, t o t m th c thay th d n b i bi u mô GM che ph l a Parma D.N c ng s Tuy nhiên theo tác d ng (n u có) ch t m th có m t c a BMCR GM c a BN nghiên c s có m t c a NST Y (c a t bào BMCR tr trai) cho th y th i m 1,5 tháng sau PT bào GM ho p v ng LGMKHG nghiên c u ( viêm th n kinh chính, t n vùng rìa) nên g u ki n thu n l i t bào bi u mô GM s t 4.3 Các y u t n k t qu u tr 4.3.1 Các y u t n tình tr ng lt khó hàn g n Ngun nhân gây loét: i gian li n bi u mô, t t c m n Herpes cho k t qu li n bi u mô t t nh t T t c m u li n tu n sau PT m t (78,6%) li n bi u mô tu u ti u tiên Theo chúng tôi, hi ng t n kinh dinh ng viêm t loét; t bào bi u mô lân c n vùng rìa nói chung t c ghép BMCR nuôi c y s c ch c ph n ng viêm t i bào bi u mô lân c n giúp li n loét nhanh chóng Tuy nhiên di n GM sau ghép c a m t sau PT tháng m i nh, ng nh s i u có th viêm GM Herpes ngồi tình tr ng lt khó hàn g n cịn viêm, thâm nhi m nhu mơ, nên sau lt bi u mơ hóa, tình 21 tr ng viêm, tân m ch nhu mô m i gi m d n tháng sau di n ghép m i th c s nh Th i gian loét GM th i gian khó hàn g n: Khi phân tích k t qu li n bi u mơ gi a nhóm th i gian khó hàn g n khơng th y có s khác bi t rõ ràng (p > 0,05) Tuy v i th i gian li n loét, th i gian loét GM có trung bình ng kê), v i th i gian khó hàn g n th p (r = 0,29, không th ng kê) ng nh c a di n ghép theo th i gian m c b nh, nhóm loét GM kéo dài (trên tháng) nh mu có s khác bi t rõ r t v tình tr ng di n ghép th m theo dõi gi a nhóm theo th i gian khó hàn g a th i gian m c b nh, th i gian khó hàn g n v i tình tr ng di n ghép t ng th i m cho th p (r 0,05) 4.3.2 Tình tr ng t c ph u thu t sâu c a loét: H s a kích sâu c a loét v i m t s y u t k t qu c (th i gian li n bi u mô, tình tr ng di u th p (r < 0,32) ng kê (p > 0,05) Ch ng t tình tr ng t khó hàn g c PT c k t qu sau ghép t m bi u mô nuôi c i liên quan gi a sâu loét v i th l c sau PT cho th y h s ch m trung bình (r = - 0,4, ng kê) Theo chúng u sâu c a lt có liên quan ch t ch n q trình t o s c bi t s s p x p c a l p collagen c ng lo n th u c a GM nên n th l u tr , có th y u t h u ích ng th l c sau PT Các t ih p Tình tr cm ng k t qu PT Th i gian li n bi m trung bình v i ch ti c m t (r = 0,36, ng kê) Th i gian li n bi u mô c a 14 m t v a gi m ch ti c m t r i lo n ch n i nhóm b nh nhân cịn l i 7,8 ± 4,1 ngày ( p