Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN THỊ HÀ NGHIÊN CỨU SỰ LƢU HÀNH CỦA VI KHUẨN PASTEURELLA MULTOCIDA TRONG BỆNH TỤ HUYẾT TRÙNG Ở TRÂU, BÕ TẠI MỘT SỐ HUYỆN CÓ DỊCH TRÊN ĐỊA BÀN TỈNH HÀ GIANG VÀ BIỆN PHÁP PHÕNG TRỊ LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP Thái Nguyên, năm 2010 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn ĐẠI HỌC THÁI NGUYÊN TRƢỜNG ĐẠI HỌC NÔNG LÂM NGUYỄN THỊ HÀ NGHIÊN CỨU SỰ LƢU HÀNH CỦA VI KHUẨN PASTEURELLA MULTOCIDA TRONG BỆNH TỤ HUYẾT TRÙNG Ở TRÂU, BÕ TẠI MỘT SỐ HUYỆN CÓ DỊCH TRÊN ĐỊA BÀN TỈNH HÀ GIANG VÀ BIỆN PHÁP PHÕNG TRỊ Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60.62.50 LUẬN VĂN THẠC SĨ KHOA HỌC NÔNG NGHIỆP NGƢỜI HƢỚNG DẪN KHOA HỌC: TS. Đặng Xuân Bình Thái Nguyên, năm 2010 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu do tôi trực tiếp thực hiện cùng với sự giúp đỡ của TS. Đặng Xuân Bình. Các số liệu, hình ảnh và kết quả trong luận văn là trung thực và chưa từng được công bố trong bất kỳ một công trình nào khác. Tôi xin đảm bảo rằng các thông tin, trích dẫn trong luận văn đã được chỉ rõ nguồn gốc. Tác giả luận văn Nguyễn Thị Hà Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn LỜI CẢM ƠN Để hoàn thành luận văn này, ngoài sự nỗ lực của bản thân, tôi đã luôn nhận được sự giúp đỡ quý báu, chỉ bảo tận tình của các thầy trong suốt quá trình thực hiện đề tài. Nhân dịp này, cho phép tôi được bày tỏ lòng biết ơn chân thành và sâu sắc đối với thầy: T.S. Đặng Xuân Bình, người đã trực tiếp hướng dẫn tôi trong quá trình nghiên cứu và hoàn thành luận văn. Tôi xin trân trọng cảm ơn Khoa Sau đại học - Trường Đại học Nông Lâm Thái Nguyên, tập thể cán bộ nghiên cứu của Bộ môn Công nghệ Vi Sinh - Viện Khoa học Sự sống, Chi cục Thú y Hà Giang, cùng gia đình, bạn bè đồng nghiệp đã tạo mọi điều kiện thuận lợi nhất, giúp đỡ tôi trong quá trình hoàn thành luận văn này. Thái Nguyên, ngày… tháng….năm 2010 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn MỤC LỤC Lời cam đoan Lời cảm ơn Mục lục Danh mục các ký hiệu, các chữ viết tắt Danh mục các bảng Danh mục các hình Trang MỞ ĐẦU 1 1. Tính cấp thiết đề tài 1 2. Mục tiêu nghiên cứu đề tài 2 3. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài 2 CHƢƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 3 1.1. Tình hình nghiên cứu bệnh tụ huyết trùng trong và ngoài nước 3 1.1.1. Tình hình nghiên cứu trong nước 3 1.1.2. Tình hình nghiên cứu ngoài nước 4 1.2. Đặc điểm dịch tễ bệnh tụ huyết trùng 6 1.2.1. Quá trình sinh dịch 6 1.2.1.1. Nguồn bệnh 6 1.2.1.2. Yếu tố truyền lây 7 1.2.1.3. Động vật mẫn cảm 8 1.2.2. Tuổi mắc bệnh 9 1.2.3. Mùa vụ phát bệnh và tần suất xuất hiện dịch 10 1.2.4. Vùng phát bệnh 12 1.2.5. Hiện tượng mang vi khuẩn Pasteurella multocida ở đường hô hấp trên của động vật khoẻ 13 1.3. Các đặc tính sinh học của mầm bệnh 15 1.3.1. Phân loại vi khuẩn Pasteurella multocida 15 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 1.3.2. Đặc điểm hình thái và tính chất bắt màu 16 1.3.3. Đặc tính nuôi cấy 16 1.3.4. Đặc tính sinh hoá 19 1.3.5. Kháng nguyên của vi khuẩn P. multocida 21 1.3.6. Sức đề kháng của vi khuẩn P. multocida 24 1.4. Bệnh tụ huyết trùng do vi khuẩn P. multocida gây ra 25 1.4.1. Biểu hiện đặc trưng của trâu, bò mắc bệnh tụ huyết trùng 25 1.4.1.1. Triệu chứng của trâu, bò mắc bệnh tụ huyết trùng 25 1.4.1.2. Bệnh tích 27 1.4.2. Chẩn đoán bệnh 27 1.4.2.1. Chẩn đoán lâm sàng 27 1.4.2.2. Chẩn đoán vi khuẩn học 27 1.4.2.3. Chẩn đoán huyết thanh học 28 1.4.3. Phòng và trị bệnh 29 1.4.3.1. Phòng bệnh 29 1.4.3.2. Điều trị bệnh 30 CHƢƠNG 2: NỘI DUNG - NGUYÊN LIỆU VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 32 2.1. Đối tượng, thời gian và địa điểm nghiên cứu 32 2.1.1. Đối tượng nghiên cứu 32 2.1.2. Thời gian và địa điểm nghiên cứu 32 2.2. Nội dung nghiên cứu 32 2.2.1. Điều tra một số đặc điểm dịch tễ bệnh tụ huyết trùng tại tỉnh Hà Giang 32 2.2.2. Phân lập vi khuẩn Pasteurella multocida từ dịch ngoáy mũi gia súc khoẻ 32 2.2.3. Đề xuất biện pháp phòng chống bệnh tụ huyết trùng tại tỉnh Hà Giang 33 2.3. Nguyên liệu dùng cho nghiên cứu 33 2.3.1. Mẫu bệnh phẩm dùng phân lập vi khuẩn 33 2.3.2. Động vật thí nghiệm 33 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 2.3.3. Hóa chất và dụ ng cụ nghiên cứ u 33 2.4. Phương pháp nghiên cứu 34 2.4.1. Phương pháp nghiên cứu dịch tễ học 34 2.4.2. Phương pháp tính tỷ lệ và hệ số 34 2.4.3. Phương pháp xác định tương quan giữa các yếu tố khí hậu và số gia súc mắc bệnh tụ huyết trùng 35 2.4.4. Phương pháp nuôi cấy, phân lập và xác định vi khuẩn Pasteurella multocida 37 2.4.4.1. Phương pháp nuôi cấy, phân lập 37 2.4.4.2. Phương pháp xác định tính chất sinh vật, hoá học của P. multocida 38 2.4.5. Kiểm tra độc lực của vi khuẩn của vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập được 41 2.4.5.1. Kiểm tra độc lực của vi khuẩn trên chuột bạch 41 2.4.5.2. Phương pháp làm kháng sinh đồ 42 CHƢƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 43 3.1. Đặc điểm dịch tễ học bệnh tụ huyết trùng gia súc tại Hà Giang 43 3.1.1. Tình hình bệnh tụ huyết trùng trâu, bò, lợn trên địa bàn tỉnh Hà Giang từ năm 2007 - 2009. 43 3.1.2. Tần suất xuất hiện dịch bệnh tụ huyết trùng trâu, bò tại các huyện từ năm 2007 - 2009 45 3.1.3. Kết quả điều tra trâu, bò mắc bệnh và chết do bệnh tụ huyết trùng trâu, bò theo loài gia súc 47 3.1.4. Kết quả điều tra trâu, bò mắc bệnh và chết do bệnh tụ huyết trùng trâu, bò theo mùa vụ 49 3.1.5. Kết quả điều tra trâu, bò mắc bệnh và chết do bệnh tụ huyết trùng trâu, bò theo lứa tuổi 51 3.1.6. Triệu chứng đặc trưng của trâu, bò mắc bệnh tụ huyết trùng 55 3.2. Nghiên cứu mức độ và thời gian xảy ra dịch bệnh 56 3.2.1. Nghiên cứu mức độ dịch và hệ số năm dịch 56 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 3.2.2. Nghiên cứu thời điểm phát dịch, mùa dịch 57 3.3. Nghiên cứu các yếu tố tự nhiên ảnh hưởng đến bệnh tụ huyết trùng trâu, bò . 60 3.3.1. Kết quả điều tra trâu, bò mắc bệnh và chết do bệnh tụ huyết trùng trâu, bò theo vùng địa lý 61 3.3.2. Ảnh hưởng các yếu tố khí hậu 64 3.4. Kết quả phân lập, xác định một số đặc tính sinh vật hoá học, độc lực Pasteurella multocida từ dịch ngoáy mũi của gia súc tại tỉnh Hà Giang 68 3.4.1. Kết quả phân lập vi khuẩn Pasteurella multocida từ dịch ngoáy mũi của gia súc khoẻ 68 3.4.2. Kết quả giám định một số đặc tính sinh vật hoá học của các chủng vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập 69 3.4.3. Kết quả thử độc lực của các chủng vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập 70 3.4.4. Kết quả thử tính mẫn cảm với kháng sinh và hoá dược của các chủng Pasteurella multocida phân lập 72 3.4.5. Kết quả xác định type của Pasteurella multocida bằng kỹ thuật PCR 73 3.4.6. Kết quả thử nghiệm một số phác đồ điều trị bệnh tụ huyết trùng trâu, bò 73 3.4.7. Biện pháp phòng trị bệnh tụ huyết trùng trâu, bò tại Hà Giang 75 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 77 DANH MỤC CÔNG TRÌNH CÔNG BỐ 79 TÀI LIỆU THAM KHẢO 80 Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT ADN : acid deoxyribonucleic BHI : Brain Heart Infusion Cs : Cộng sự FAO : Food and Agriculture Oganization HSND : Hệ số năm dịch HSTD : Hệ số tháng dịch MR : Methylen Red PCR : Polymerase Chain Reaction P. multocida : Pasteurella multocida THT : Tụ huyết trùng TT : Thể trọng VP : Voges Proskauer Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn DANH MỤC CÁC BẢNG Trang Bảng 1.1. Phân biệt các loài Pasteurella 21 Bảng 1.2. Mối quan hệ giữa hai hệ thống phân loại Carter - Robert 22 Bảng 1.3. Hệ thống phân loại serotype của P. multocida 24 Bảng 3.1. Kết quả điều tra tình hình bệnh tụ huyết trùng gia súc tại Hà Giang từ năm 2007 - 2009 43 Bảng 3.2. Tần suất xuất hiện dịch tụ huyết trùng tại Hà Giang 45 Bảng 3.3. Kết quả xác định tỷ lệ trâu bò mắc bệnh, chết, tử vong do bệnh tụ huyết trùng theo loài gia súc 48 Bảng 3.4. Kết quả xác định tỷ lệ trâu bò mắc bệnh, chết, tử vong do bệnh tụ huyết trùng theo mùa vụ 50 Bảng 3.5. Kết quả xác định tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh, chết, tử vong do bệnh tụ huyết trùng theo lứa tổi 53 Bảng 3.6. Kết quả theo dõi triệu chứng đặc trưng của trâu bò mắc bệnh tụ huyết trùng 55 Bảng 3.7. Hệ số năm dịch tụ huyết trùng trâu, bò từ năm 2007 - 2009 56 Bảng 3.8. Hệ số tháng dịch tụ huyết trùng trâu, bò 58 Bảng 3.9. Kết quả xác định tỷ lệ trâu, bò mắc bệnh, chết, tử vong do bệnh tụ huyết trùng theo vùng địa lý 63 Bảng 3.10. Mối tương quan giữa các yếu tố khí hậu với trâu, bò mắc bệnh tụ huyết trùng trung bình/tháng từ năm 2007 - 2009 65 Bảng 3.11. Kết quả phân lập Pasteurella multocida từ dịch ngoáy mũi gia súc khoẻ 68 Bảng 3.12. Kết quả giám định một số đặc tính sinh vật hoá học của vi khuẩn Pasteurella multocida phân lập 70 Bảng 3.13. Kết quả thử độc lực của các chủng Pasteurella multocida phân lập 71 [...]... trước ở trong và ngoài nước, chúng tôi đã tiến hành nghiên cứu đề tài: "Nghiên cứu sự lưu hành của vi khuẩn Pasteurella multocida trong bệnh tụ huyết trùng ở trâu, bò tại một số huyện có dịch trên địa bàn tỉnh Hà Giang và biện pháp phòng trị " Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 2 2 Mục tiêu nghiên cứu đề tài - Xác định đặc điểm dịch tễ bệnh tụ huyết trùng trâu,. .. trâu, bò trên địa bàn tỉnh Hà Giang - Nghiên cứu vai trò của các yếu tố khí hậu tác động đến đặc điểm dịch tễ bệnh tụ huyết trùng trâu, bò - Xác định sự lưu hành vi khuẩn Pasteurella multocida ở trâu, bò - Đề xuất các biện pháp phòng và trị bệnh hiệu quả 3 Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài - Bổ sung tư liệu về đặc điểm dịch tễ bệnh tụ huyết trùng trâu, bò và tình trạng lưu hành vi khuẩn Pasteurella. .. đây bệnh tụ huyết trùng lợn xảy ra mạnh ở các tỉnh phía Nam và xảy ra lẻ tẻ ở các tỉnh phía Bắc Trong những năm 70 cuối thế kỷ 20, có 80% số ổ dịch và 84% số thiệt hại gia súc do bệnh tụ huyết trùng thuộc về các tỉnh ở phía Nam Đến những năm 90, phân bố địa lý của bệnh nghiêng về các tỉnh phía Bắc, số địa phương có dịch tụ huyết trùng cũng tăng lên nhiều, hàng năm có 20 - 25 tỉnh thông báo có bệnh lưu. .. trùng ở gia súc, gia cầm và biện pháp phòng chống Cao Văn Hồng (2001) [10] nghiên cứu đặc điểm dịch tễ học bệnh tụ huyết trùng trâu, bò, lợn tại Đăk Lăk Hoàng Đăng Huyến (2004) [13] nghiên cứu đặc điểm dịch tễ, các yếu tố ảnh hưởng đến bệnh tụ huyết trùng trâu bò ở Bắc Giang Nguyễn Văn Minh (2005) [16] nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ bệnh tụ huyết trùng và xác định tỷ lệ mang trùng Pasteurella ở. .. huyết trùng ở gia súc như: Nguyễn Ngã (1996) [17] đã nghiên cứu tính kháng nguyên và độc lực của vi khuẩn tụ huyết trùng ở khu vực miền Trung; Dương Thế Long (1995) [15] nghiên cứu một số đặc điểm dịch tễ và vi khuẩn học của bệnh tụ huyết trùng trâu bò Sơn La để xác định biện pháp phòng trị thích hợp; Võ Văn Hùng (1997) [11] nghiên cứu về đặc điểm dịch tễ học bệnh tụ huyết trùng lợn ở Đăk Lăk và biện pháp... TÀI LIỆU 1.1 Tình hình nghiên cứu bệnh tụ huyết trùng trong và ngoài nƣớc 1.1.1 Tình hình nghiên cứu trong nước Có nhiều nghiên cứu về bệnh tụ huyết trùng, theo Phan Đình Đỗ và Trịnh Văn Thịnh (1958) [5], bệnh tụ huyết trùng trâu bò được phát hiện đầu tiên vào năm 1868 bởi Condamine ở Bà Rịa, Long Thành, sau đó được Gemain phát hiện bệnh ở Gò Công, Shein xác nhận có bệnh này ở Tây Ninh Những năm sau... trâu bò tỉnh Hà Tây Trần Xuân Hạnh và Tô Thị Phấn (2007) [9] nghiên cứu một số đặc tính của vi khuẩn P multocida phân lập từ trâu, bò, lợn Đỗ Ngọc Thuý và cs (2007) [31] đã ứng dụng kỹ thuật PCR để xác định type các chủng vi khuẩn P multocida phân lập từ vật nuôi; Đỗ Quốc Tuấn (2008) [35] nghiên cứu bệnh tụ huyết trùng lợn ở một số tỉnh miền núi phía Bắc Vi t Nam 1.1.2 Tình hình nghiên cứu ngoài nước Bệnh. .. đã nghiên cứu về đặc tính của Pasteurella multocida và type huyết thanh của chúng Đoàn Thị Băng Tâm (1987) [26], bệnh tụ huyết trùng trâu bò ở Vi t Nam thường xảy ra ở Nam bộ và đặc biệt ở miền tây Nam bộ, vào những năm 1910, 1919, 1920, 1933, 1935 dịch xảy ra mạnh gây thiệt hại và lây lan nhiều hơn ở những vùng đất trũng, thấp, khí hậu ẩm ướt Một số tác giả trong nước đã nghiên cứu bệnh tụ huyết trùng. .. dạng bệnh này đều thấy ở thỏ Theo De Alwis (1982b) [50] động vật cảm nhiễm mạnh nhất đối với bệnh tụ huyết trùng trâu bò là trâu, bò trong đó trâu mẫn cảm hơn bò Bệnh có thể lây sang lợn, ngựa, chó v.v, nên trong ổ dịch tụ huyết trùng trâu bò cần chú ý phòng bệnh cho cả ngựa, lợn, chó Đặc biệt là dê cũng dễ mắc bệnh tụ huyết trùng này Nhiều tác giả đã khẳng định: Nơi nào có bệnh tụ huyết trùng trâu, bò. .. điểm dịch tễ bệnh tụ huyết trùng 1.2.1 Quá trình sinh dịch 1.2.1.1 Nguồn bệnh Nguồn lây bệnh tụ huyết trùng là những trâu, bò, lợn và gia cầm bị bệnh và mang trùng Theo Bùi Quý Huy (1998) [12], ổ dịch đầu tiên trong vùng xảy ra từ trâu, bò của địa phương bị bệnh, do vi c mổ thịt đem phân tán, làm cho dịch lây lan rộng Dịch thường xảy ra và lan rộng theo các triền sông do dòng nước bị nhiễm vi khuẩn . của tác giả đi trước ở trong và ngoài nước, chúng tôi đã tiến hành nghiên cứu đề tài: " ;Nghiên cứu sự lưu hành của vi khuẩn Pasteurella multocida trong bệnh tụ huyết trùng ở trâu, bò tại. điểm dịch tễ bệnh tụ huyết trùng trâu, bò trên địa bàn tỉnh Hà Giang. - Nghiên cứu vai trò của các yếu tố khí hậu tác động đến đặc điểm dịch tễ bệnh tụ huyết trùng trâu, bò. - Xác định sự lưu. CỦA VI KHUẨN PASTEURELLA MULTOCIDA TRONG BỆNH TỤ HUYẾT TRÙNG Ở TRÂU, BÕ TẠI MỘT SỐ HUYỆN CÓ DỊCH TRÊN ĐỊA BÀN TỈNH HÀ GIANG VÀ BIỆN PHÁP PHÕNG TRỊ Chuyên ngành: Thú y Mã số: 60.62.50