Đang tải... (xem toàn văn)
MỞ ĐẦUHoa lan là một trong những giống hoa rất được yêu thích không chỉ về màu sắc, kiểu dáng mà còn mang một nét đẹp rất sang trọng và trang nhã. Chính vì vậy hiện nay rất nhiều hộ gia đình đang có thú chơi hoa lan. Nguyên nhân của trào lưu trên là do cuộc sống ngày càng phát triển, nhu cầu tạo góc vườn nhỏ, mang màu xanh cây lá thiên nhiên vào trong nhà của những người dân ngày càng cao. Với ưu điểm ít chiếm diện tích, không quá khó trồng, cho hoa đẹp lại lâu tàn nên việc chọn, trồng và tạo một vườn lan nhỏ trong khuôn viên nhà là sự lựa chọn của nhiều người.Bên cạnh đó, hoa lan là sản phẩm cây trồng có giá trị kinh tế cao, ngày càng có nhiều cơ sở kinh doanh hoa lan mọc lên, kinh doanh nhiều chủng loại. Nhưng làm sao để có số lượng lớn cây giống, đồng đều, chất lượng cao là một vấn đề khó 16. Trong những năm gần đây, cùng với sự phát triển của công nghệ sinh học, ngành vi nhân giống cây đặc biệt trên đối tượng cây hoa lan từng bước phát triển, nhiều đơn vị nhà nước cũng như tư nhân đã mạnh dạn đầu tư để sản xuất cây giống phục vụ cho nông dân. Tuy nhiên qui mô cũng như những hạn chế về đội ngũ kỹ thuật cũng như kiến thức về lĩnh vực này có hạn về trang bị kỹ thuật hiện đại, vì thế cây giống có chất lượng thấp không đồng đều, không đáp ứng được nhu cầu của thị trường. Hầu hết các giống hoa lan phải nhập giống từ Thái Lan.Hiện nay, việc nghiên cứu và nhân giống hoa lan đã được tiến hành ở nhiều nơi, nhưng hầu hết đều chưa có thành tựu nào đột biến để ngành nhân giống hoa lan phát triển đáp ứng được nhu cầu của thị trường. Những thành công hiện nay thường là nhân giống với quy mô sản xuất nhỏ. Trong đó kỹ thuật nhân giống hoa lan phổ biến hiện nay là nhân giống trên môi trường thạch. Ngoài ra, hiện nay trên thế giới nhiều nước có ngành công nghệ sinh học phát triển đã ứng dụng các công nghệ cao để nhân nhanh giống cây trồng như: hệ thống fermenter, bioreactor, quang tự dưỡng,… Ở nước ta các công nghệ này mới chỉ thực hiện ở phòng thí nghiệm của một số trường Đại Học, Viện Nghiên cứu hoặc trung tâm công nghệ sinh học trong mấy năm gần đây. Tuy nhiên việc nghiên cứu xác định môi trường thích hợp cho từng cây trồng nhân bằng các hệ thống này còn rất hiếm. Để từng bước áp dụng công nghệ mới trong sản xuất cây lan giống ở nước ta, đẩy nhanh tiến độ sản xuất cây giống theo quy mô công nghiệp, góp phần khắc phục sự thiếu hụt cây giống trong sản xuất hiện nay. Chúng tôi tiến hành đề tài: Nghiên cứu nhân giống vô tính in vitro giống lan Dendrobium Sena Red’’ nhằm tìm ra môi trường thích hợp nhân giống lan Dendrobium Sena Red.
TRƯỜNG ĐẠI HỌC BÁCH KHOA ĐÀ NẴNG KHOA HOÁ N G À N H C Ô N G N G H Ệ S I N H H Ọ C ĐỒ ÁN TỐT NGHIỆP Đề tài: Nghiên cứu nhân giống vô tính in vitro giống lan Dendrobium “Sena Red” GVHD: Nguyễn Hoàng Trung Hiếu SVTH : Ngô Thị Trà Giang NỘI DUNG CHÍNH ĐẶT VẤN ĐỀ NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ Hoa lan có khoảng 750 chi và 15.000–25.000 loài, trong đó Dendrobium in vitro có giá trị: ĐẶT VẤN ĐỀ Giá trị kinh tế cao. Giá trị kinh tế cao. Số lượng lan lớn và bảo tồn giống quý. Số lượng lan lớn và bảo tồn giống quý. Tạo ra lan Dendrobium siêu bông. Tạo ra lan Dendrobium siêu bông. Sản xuất cây con quanh năm. Sản xuất cây con quanh năm. Cung cấp cây con để bán. Cung cấp cây con để bán. Hạn chế sự khai thác cây hoang dại. Hạn chế sự khai thác cây hoang dại. ĐẶT VẤN ĐỀ Giới thiệu một số dạng hoa đẹp của lan Dendrobium Orchidacea D. Sena red D. Salaya Gold D. Salaya White D. Pink Mini D. Chan Chao D. Negro VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Hoa lan Dendrobium Sena Red VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Bước 1: Nhân protocorm Bước 1: Nhân protocorm Bước 2: Nhân nhanh chồi Bước 2: Nhân nhanh chồi Bước 3: tạo rễ Bước 3: tạo rễ Môi trường MS (Murashige & Skoog, 1962) + chất điều hòa sinh trưởng, pH= 5.8 - Điều kiện nuôi cấy: t o 25 ± 1 o C, ánh sáng 2000-3000 lux Môi trường MS (Murashige & Skoog, 1962) + chất điều hòa sinh trưởng, pH= 5.8 - Điều kiện nuôi cấy: t o 25 ± 1 o C, ánh sáng 2000-3000 lux ` Cây non Tạo rễ Cụm chồi phát triển Cây con 5 - 7 cm và 3 – 4 lá Tách cụm protocorm chuyển sang môi trường nhân protocorm(tách 4 miếng) Nhân nhanh cụm chồi Môi trường nuôi cấy và cụm chôi (tách 4 miếng) Cụm protocorm phát triển chuyển sang môi trường nhân nhanh chồi (tách 4 miếng) Cụm chồi phát triển chuyên sang môi trường tạo rễ (tách 4 miếng) Cụm chồi gồm nhiều thể chồi Quy trình nghiên cứu Dendrobium Sena red KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Bảng 3.1. Kết quả nhân protocorm ở môi trường BA Ký hiệu Nồng độ mg/l Tình trạng Protocorm Ghi chú 2 tuần Sau 4 tuần M0 0 0 + Protocorm nhỏ ít có hiện tượng hoá vàng và đen. M1 0,5 + ++ Protocorm mới xanh nhưng ít. M2 1 ++ +++ Protocorm nhiều nhưng nhỏ. M3 2 ++ ++++ Protocorm xanh bóng to và rất mướt. M4 3 + + Protocorm xanh nhưng ít gần giống môi trường MS. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN M M M0 M0 M1 M1 M2 M2 M3 M3 M4 M4 Hình 3.1. Kết quả nhân protocorm ở môi trường BA - M0 protocorm kém phát triển. - M3 protocorm phát triển nhanh và xanh mướt nhất. - M1, M2 xanh và chậm hơn còn M3 nhưng quá cao protocom nhỏ và trắng. Bảng 3.2. Kết quả nhân protocorm ở môi trường NAA KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Ký hiệu Nồng độ NAA (mg/l) Tình trạng Protocorm Ghi chú 2 tuần Sau 4 tuần M0 0 0 + Protocorm nhỏ ít có hiện tượng hoá vàng và đen. M5 0,1 ++ +++ Protocorm xanh mướt và nhiều phát triển chồi. M6 0,5 + ++ Protocorm xanh to và ít. M7 1 + ++ Protocorm xanh ít và nhỏ. M8 1,5 + + Protocorm nhỏ hơi vàng và ít. [...]... sung NAA 0,5mg/l Môi ĐỀ NGHỊ Có thời gian tôi sẽ tiến hành giai đoạn huấn luyện và đưa cây ra vườn ươm Cần tiếp tục nghiên cứu thêm để tìm tỉ lệ phối hợp (auxin, giberelin, cytokinin) Áp dụng trên các đối tượng hoa lan Dendrobium lai khác nhằm đánh giá hiệu quả nông học và hiệu quả kinh tế XIN CHÂN THÀNH CẢM ƠN THẦY CÔ VÀ CÁC BẠN LẮNG NGHE! ... lượng rễ tốt nhất KẾT LUẬN Môi trường nhân protocorm 1 - Môi trương MS có bổ sung BA với 2mg/l nồng độ tốt nhất cho việc nhân protocorm Môi trường nhân nhanh chồi 2 - Thì môi trường tốt nhất cho việc nhân BA với nồng độ 0,5mg/l, và kết hợp giữa BA 0,5mg/l với NAA 0,1mg/l tốt nhân chồi tạo rễ Môi trường tạo rễ -3 trường tốt nhất cho việc tạo rễ lan Dendrobium Sena Red là môi trường có bổ sung NAA 0,5mg/l... QUẢ VÀ THẢO LUẬN NHẬN XÉT MÔI TRƯỜNG NHÂN CHỒI Như vậy - BA với nồng độ 0,5mg/l tốt nhất cho việc nhân nhanh chồi của lan Dendrobium Sena Red - Khi kết hợp giữa hai chất điều hoà sinh trưởng thì nồng độ kết hợp NAA 0,1mg/l với BA 0,5mg/l thuận lợi cho việc phát triển chồi và tạo rễ sau này KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.3.1 Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ NAA đến tạo rễ lan Bảng 3.7 Kết quả tạo rễ trên môi... lượng rễ đạt 1-3 nhưng mập và dài, cây con thấp, lá có màu xanh đậm Biểu đồ 3.4 Ảnh hưởng chất điều hoà sinh trưởng IAA đến sự ra rễ lan Dendrobium KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN M0 M0 MI1 MI1 MI2 MI2 MI3 MI3 Hình 3.8 Cây lan in vitro được thu hoạch sau 1 tháng nuôi cấy trong môi trường bổ sung chất điều hoà sinh trưởng IAA KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN NHẬN XÉT MÔI TRƯỜNG TẠO RỄ Môi trường tốt nhất cho sự phát triễn rễ... 0,65 52 ± 0,21 Biểu đồ 3.3: Ảnh hưởng nồng độ chất điều hoà sinh - MN2, tỷ lệ cây ra rễ và rễ cao rễ dài, mập và có màu xanh, cây con có nhiều lá và dài xanh mướt trưởng NAA đến sự tạo rễ lan KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN M0 M0 MN2 MN2 MN1 MN1 MN3 MN3 Hình 3.7 Cây lan in vitro được thu hoạch sau 1 tháng nuôi cấy trong môi trường bổ sung chất điều hoà sinh trưởng NAA KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Bảng 3.8 Kết quả tạo rễ... chất điều hoà sinh trưởng BA đến quá trình nhân nhanh chồi KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN MB MB MB00 MB - MB1 chồi phát triển nhanh nhất và xanh mướt - MB2, MB3, MB4 chồi phát triển nhỏ và MB11 MB MB22 MB thập hơn MB33 MB Hình 3.5 Kết quả nhân nhanh chồi ở môi trường nồng độ BA MB44 MB KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.2.1 Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ BA kết hợp NAA đến sự nhân nhanh chồi Bảng 3.6 Kết nhân nhanh chồi... chồi ở tất cả các môi trường - Đối với việc nhân protocorm thì sử dung môi trường M3, M5, M9, M15 tốt - Sử dụng môi trường M3 là tốt nhất cho nhân protocorm KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN 3.2.1 Khảo sát sự ảnh hưởng của nồng độ BA đến sự nhân nhanh chồi Bảng 3.5 Kết nhân nhanh chồi trên môi trường MS bổ sung BA CĐHST Nồng độ KH Số chồi/mẫu cấy Chiều cao chồi(mm) MS c M0 1,69 ± 0,75 0,5 BA 0 MB1 3,5±0,91 1 MB2... mướt, rất tốt - Nhưng nồng độ quá cao protocom nhỏ và màu xanh hơi vàng bắt đầu hóa nâu M11 M11 Hình 3.4 Kết quả nhân protocorm ở môi trường nồng độ BA 2mg/l kết hợp với NAA M12 M12 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Bảng 3.4 Kết quả nhân protocorm ở môi trường nồng độ NAA 0,1mg/l kết hợp với BA đến sự nhân nhanh protocorm Ký CĐHST hiệu Tình trạng Protocorm (mg/l) 2 tuần Ghi cShú NAA BA Sau 4 tuần M0 0 0 0 + Protocor... 3.2: Ảnh hưởng nồng độ chất điều hoà sinh trưởng0,5mg/l BA kết hợp NAA đến quá trình nhân 0,1 MBN5 3.6±0,89 a b 9,74±0,20 nhanh chồi KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN M M MBN00 MBN - MBN5 chồi phát triển nhanh nhất và xanh mướt nhất và phát triển rất tốt xuất hiện 2-3 lá MBN55 MBN MBN66 MBN MBN77 MBN MBN88 MBN - MBN6, MBN7, MBN8 trên và số lượng chồi không mập mạp Hình 3.6 Kết quả nhân nhanh chồi ở môi trường nồng... đầu hóa nâu M13 M13 M15 M15 Hình 3.4 Kết quả nhân protocorm ở môi trường nồng độ NAA 0.1mg/l kết hợp với BA M14 M14 M16 M16 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Nhận xét môi trường nhân protocorm Như vậy: - Sau 30 ngày các protocorm đều tăng lên về kích thước, có màu xanh bóng, phát triển thành khối to tròn và có sự xuất hiện chồi ở tất cả các môi trường - Đối với việc nhân protocorm thì sử dung môi trường M3, M5, . tính in vitro giống lan Dendrobium “Sena Red” GVHD: Nguyễn Hoàng Trung Hiếu SVTH : Ngô Thị Trà Giang NỘI DUNG CHÍNH ĐẶT VẤN ĐỀ NỘI DUNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN KẾT LUẬN