LOGO Chương 6 Công nghệ gen thực vật Tạ Ngọc Ly www.themegallery.com www.themegallery.com www.themegallery.com Khái niệm về gen  DNA mã hóa protein thông qua gen  DNA là chuỗi các nucleotide  DNA được cấu trúc thành các nhiễm sắc thể www.themegallery.com Quá trình phiên mã  Tạo mARN  Nhân tố phiên mã Tái cấu trúc NST: histone acetyltransferases và histone deacetylase Quá trình methyl hóa DNA: ức chế phiên mã, mức độ methyl hóa ở thực vật cao hơn ở động vật www.themegallery.com Quá trình sau phiên mã www.themegallery.com www.themegallery.com Poly adenylation Transesterfications Splicing Quá trình dịch mã www.themegallery.com www.themegallery.com Amino acid attachment site Hydrogen bonds 3′ 5′ Two-dimensional structure Anticodon Amino acid attachment site 3′ 5′ Hydrogen bonds Anticodon Anticodon Symbol used in this book Three-dimensional structure 3′ 5′ [...]...www.themegallery.com Nghiên cứu ch c năng bộ máy di truyền Systems Biology www.themegallery.com Phân lập gen  4 kiểu: - kiểu hình đột biến - Đặc tính hóa sinh của sản phẩm gen  Elisa - Đo mức độ biểu hiện  PCR - Trình tự DNA  lai phân tử 4 c ch nghiên cứu di truyền ngược - biểu hiện quá mức - Tăng hoặc giảm ch c năng gen - Ức ch gen ( gen silence) - Gen knockout www.themegallery.com www.themegallery.com... www.themegallery.com Ch n lọc bằng các maker phân tử  SSLP www.themegallery.com RFLP www.themegallery.com RAPD www.themegallery.com Các maker và promoter dùng trong công nghệ gen thực vật  Maker ch n lọc  Maker ch thị (reporter) www.themegallery.com www.themegallery.com www.themegallery.com Reporter maker  β-glucuronidase (GUS): - substrate: 4-methylumbelliferyl glucuronide(MUG) - histochemical localization... localization : 5-bromo-4chloro-3-indolylglucuronide (X-gluc)  Luciferase (LUC): - Substrate: Luciferin - sử dụng bioluminescence để đọc  Green fluorescent protein (GFP): - không cần substrate - Co thể dùng confocal lasers canning microscopy để đọc trực tiếp trên tế bào www.themegallery.com www.themegallery.com www.themegallery.com www.themegallery.com Các vector chuyển gen thực vật  Ti plasmid www.themegallery.com... vật  Ti plasmid www.themegallery.com Vector nhị hợp  pVS1: tái sinh trong Agrobacterium  CoIE1: tái sinh trong Ecoli www.themegallery.com www.themegallery.com Gate way cloning  bacteriophage lambda (λ) www.themegallery.com www.themegallery.com Univector(EchoTM ) Cloning www.themegallery.com www.themegallery.com www.themegallery.com Vector cho RNA Interference(RNAi)  Sủ dụng Gateway vector tạo cấu... Cloning www.themegallery.com www.themegallery.com www.themegallery.com Vector cho RNA Interference(RNAi)  Sủ dụng Gateway vector tạo cấu trúc kẹp tóc www.themegallery.com www.themegallery.com Dòng hóa gen www.themegallery.com . c ch nghiên cứu di truyền ngược - biểu hiện quá mức - Tăng hoặc giảm ch c năng gen - Ức ch gen ( gen silence) - Gen knockout www.themegallery.com www.themegallery.com www.themegallery.com Ch n. LOGO Ch ơng 6 Công nghệ gen thực vật Tạ Ngọc Ly www.themegallery.com www.themegallery.com www.themegallery.com Khái niệm về gen  DNA mã hóa protein thông qua gen  DNA là chuỗi các nucleotide  DNA. adenylation Transesterfications Splicing Quá trình d ch mã www.themegallery.com www.themegallery.com Amino acid attachment site Hydrogen bonds 3′ 5′ Two-dimensional structure Anticodon Amino acid attachment site 3′ 5′ Hydrogen bonds Anticodon Anticodon Symbol