Đang tải... (xem toàn văn)
Lời Mở Đầu31.Tổng quan về enzyme pectinase41.1.Khái niệm41.2.Phân loại41.3.Cơ chế tác động 41.4.Nguồn thu nhận enzyme pectinase 61.5.Giới thiệu về cơ chất pectin61.6.Ứng dụng của enzyme pectinase 72.Tổng quan về chủng Aspergillus niger92.1.Giới thiệu chung92.2.Phân loại khoa học 92.3.Đặc điểm cấu tạo92.4.Đặc điểm sinh lý102.5.Đặc điểm sinh hóa 102.6.Đặc điểm sinh sản113.Thu nhận enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger123.1.Cơ chế sinh tổng hợp enzyme123.1.1.Các cơ chất thường hay sử dụng123.1.2.Các nghiên cứu trước đây liên quan tới việc tổng hợp enzyme pectinase từ Aspergillus niger 123.2.Các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình sinh tổng hợp enzyme133.2.1.Ảnh hưởng của nguồn nguyên liệu133.2.2.Ảnh hưởng của thành phần đa lượng143.2.3.Ảnh hưởng của nguồn khoáng dinh dưỡng143.2.4.Ảnh hưởng của nhiệt độ nuôi cấy143.2.5.Độ ẩm môi trường143.2.6.Thời gian nuôi143.2.7.pH154.Quy trình công nghệ sản xuất enzyme pectinase164.1.Các phương pháp sản xuất164.2.Nguyên liệu174.3.Quy trình sản xuất174.3.1.Nuôi cấy nấm mốc184.3.2.Môi trường nhân giống, lên men194.3.3.Thu nhận chế phẩm enzyme thô194.3.4.Quá trình kết tủa enzyme pectinase20Tài Liệu Tham Khảo22
Công nghệ sản xuất enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger ĐỀ TÀI : CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT ENZYME PECTINASE TỪ CHỦNG ASPERGILLUS NIGER MỤC LỤC GVHD: Phạm Thị Hương 1 Lớp 10SH – Nhóm 5 Công nghệ sản xuất enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger Lời Mở Đầu Công nghệ enzyme được phát triển rất mạnh từ đầu thế kỷ XX đến nay, đem lại những thuận lợi lớn và mở ra sự phát triển mạnh mẽ hơn nữa cho ngành công nghệ thực phẩm. Enzyme pectinase thường được dùng trong công nghiệp thực phẩm và dược phẩm đặc biệt, nó có vai trò hết sức quan trọng trong quá trình bảo quản trái cây và rau quả. Pectinase có thể được sản xuất từ nhiều loại vi khuẩn và nấm mốc, nhưng Aspergillus là nguồn chủ yếu. Sản phẩm từ Aspergillus niger cũng được Cục quản lý thực phẩm và Dược phẩm Hoa Kỳ (FDA) chứng nhận là sản phẩm an toàn. Ngoài ra, Aspergillus niger còn là một nấm mốc có khả năng phát triển nhanh chóng trên các cơ chất rẻ tiền và tiết ra enzyme vào trong môi trường, dễ dàng thu hồi [2]. GVHD: Phạm Thị Hương 2 Lớp 10SH – Nhóm 5 Công nghệ sản xuất enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger 1. Tổng quan về enzyme pectinase 1.1. Khái niệm Pectinase là nhóm enzyme xúc tác sự phân cắt các hợp chất pectin thành các hợp phần khác nhau như axit galacturonic, arabinose, galactose, methanol….[3]. 1.2. Phân loại [5] Dựa vào tính đặc hiệu, cơ chế tác dụng kiểu phản ứng, pH tối ưu của enzyme. Năm 1966, Koller và Neukom phân loại chia pectinase thành hai nhóm chính: hydrolase và transeliminase. Cả hai nhóm này đều có đặc điểm chung là gỉam độ nhớt của dung dịch pectin và làm giảm khối lượng phân tử của các sản phẩm tạo thành. Dựa vào cơ chế tác dụng của chúng gồm các loại như sau: pectinesterase (PE), Polymethylgalacturonic (PMG), polygalacturonase (PG), Pectate lyase (PEL). Ngoài ra còn có: pectin-transelimiase (còn gọi là poly-α-1,4 galacturonite- methylesteglucanoliase) là enzyme tác dụng trên pectin và trên pectinic acid. Polygalacturonate-transelimiase (còn gọi là poly-α-1,4 D-galacturonite- glucanoliase) là enzyme tác động trên pectic acid và pectinic acid. Pectin lyase (PNL) xúc tác sự phân cách các đơn vị galacturonate đã bị ester hoá. Tất cả các PNL đều là endo – enzyme. 1.3. Cơ chế tác động [4] Pectinesterase ( PE ): Enzyme này xúc tác sự thuỷ phân liên kết ester phức tạp của pectin và protopectin, sản phẩm tạo thành là rượu methylic và acid pectinic hay acid polygalalacturonic. Người ta nhận thấy rằng PE chỉ phân cách liên kết ester giữa các nhóm metoxyl và -COOH tự do. PE tách gốc methyl khỏi phân tử pectin làm lộ ra các nhóm carboxyl rất linh động, dễ kết hợp với các ion kim loại như Ca 2+ để tạo thành các muối không hoà tan, kết lắng lại và có thể tách ra dễ dàng. PE của nấm mốc sẽ thuỷ phân trước tiên là nhóm methylester nằm giữa hai nhóm carboxyl tự do. Và enzyme sẽ thuỷ phân lần lượt các liên kết ester dọc theo phân tử pectin. Chẳng hạn đối với tác dụng của PE từ nấm mốc Asp. Niger cần thiết có pectin ester hoá ở mức độ cao từ 70 % trở lên. GVHD: Phạm Thị Hương 3 Lớp 10SH – Nhóm 5 Công nghệ sản xuất enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger pH tối ưu của PE từ nấm mốc là 4.5 -5.5, còn của chế phẩm đã loại bỏ enzyme polygalacturonase sẽ có pH tối ưu từ 2.0 – 6.5. Nhiệt độ tối ưu của PE từ nấm mốc là 40 – 45 0 C, từ 55- 62 0 C thì vô hoạt. Các ion kim loại đặc biệt là Na + và Ca 2+ và các muối clorua của chúng sẽ hoạt hoá PE từ nấm mốc Asp.niger. Trái lại , các cation hoá trị 3 và 4 ( thuỷ phân nitrat, FeCl 2 , Al 2 (SO 4 ) 3 ) sẽ kìm hãm tác dụng của PE. Ảnh hưởng của các ion kim loại khi kích hoạt enzyme PE có thể có liên quan đến tương tác của nó với cơ chất. Polygalacturonic acid là một chất ức chế cạnh tranh trong phản ứng thuỷ phân nhờ sự xúc tác của PE. Sự liên kết của các ion kim loại và các nhóm carboxylate trong trường hợp này có khuynh trung hoà ảnh hưởng ức chế của cơ chất pectin lên enzyme. Tuy nhiên lượng dư các ion này trên thực tế gây ra sự bất hoạt của PE vì các ion kim loại bị bao vây bởi các nhóm carboxylate nằm kế cận với các liên kết ester cần thiết cho phản ứng thuỷ phân xảy ra. Polymethylgalacturonase ( PMG): Là enzyme tác động trên acid polygalacturonic đã được metoxyl hoá ( tức là pectin). Enzyme này có tên hệ thống là poly- α - 1,4 galacturonic – methylesterglucanohydrolase ( E.C.3.2.1.41), lại được chia thành hai nhóm nhỏ: Endo – glucosidase – polymethylgalacturonase kiểu 1 (Endo PMG I) : Là enzyme dịch hoá, pectin có mức độ metoxyl càng cao thì bị thuỷ phân bởi enzyme này càng nhanh và càng có hiệu quả cao. Trong dung dịch khi có mặt của enzyme pectinesterase thì hoạt độ của enzyme này thường bị giảm. Enzyme này phổ biến ở một số nấm mốc như: Asp.niger, Asp.awamori,Botrytis cinerea… Exo – glucosidase – polymethylesterase kiểu III ( Exo- PMG-III): Là enzyme đường hoá, enzyme này có thể cắt từng acid galacturonic ra khỏi pectinic hay pectin. Exo – PMG- III có ái lực với các gốc acid galacturonic đã được metoxyl hoá nghĩa là phân cắt liên kết α - 1,4 glucoside ở đầu mạch nằm giữa hai gốc acid galacturonic có nhóm -COOCH 3 . Polygalacturonase ( PG) : Là enzyme tác dụng trên acid pectinic hoặc pectic. PG lại được chia thành hai nhóm nhỏ: Endo – glocosidase – polygalacturonase kiểu II (Endo – PG II): Là enzyme dịch hoá, enzyme này có thể thuỷ phân acid pectinic hay acid pectic và chỉ tác dụng khi có mặt nhóm _COOH tự do. GVHD: Phạm Thị Hương 4 Lớp 10SH – Nhóm 5 Công nghệ sản xuất enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger Hoạt độ của Endo-PG II sẽ tăng lên nhiều khi cơ chất được xử lý sơ bộ bằng PE. Đa số vi khuẩn và nấm mốc là những vi sinh vật tổng hợp được enzyme này. Exo – glucosidase – polygalacturonase kiểu IV ( Exo- PG-IV): Enzyme này thường có ái lực mạnh đối với các liên kết glucoside ở cuối mạch phân tử acid pectinic hay acid pectic nhưng bên cạnh đó không có nhóm methyl. Có lẽ để tạo được phức enzyme - cơ chất thì trong phân tử cơ chất phải có nhóm carboxyl tự do liền kề với liên kết bị đứt. Pectate lyase ( PEL): Năm 1960, P. Abershim lần đầu tiên đưa ra thông báo về phân huỷ phân tử pectin không bằng con đường thuỷ phân. Enzyme tham gia vào quá trình đó gọi là pectate lyase. Enzyme này xúc tác phá vỡ mối liên kết α - 1,4 glucoside, tiến tới làm mất hoạt tính nguyên tử hydro ở C5, tạo thành mối liên kết đôi giữa C4 và C5. Dựa trên cơ chế tác dụng của pectate lyase, người ta chia nó thành hai nhóm: Endo – pectatelyase: Tham gia thuỷ phân phân tử polygalacturonic ở chỗ khác nhau của dãy tạo nên acid galacturonic. Exo – pectatelyase: Tham gia phân huỷ thành phần mạch vòng của acid digalacturonic. Pectate lyase (PEL ) là enzyme vi sinh vật ngoại bào. 1.4. Nguồn thu nhận enzyme pectinase [5] Thực vật: Enzyme pectinase có nhiều trong lá, củ khoai tây, trong chanh, cà chua, trong một số quả khác Thường là có nhiều enzyme pectinesterase (PE ).[4 Đặc điểm của pectinesterase thực vật: Enzyme này thường tồn tại dưới nhiều hình thức khác nhau, nằm trong phần vỏ tế bào. PE ở thực vật nói chung có hoạt độ tối ưu trong khoảng pH hơi kiềm. Các cation kim loại ở nồng độ thấp, như Ca 2+ chẳng hạn, có khuynh hướng làm tăng nồng độ hoạt động của enzyme. Các PE có nguồn gốc thực vật phản ứng theo kiểu làm hình thành các khối pectin chứa các nhóm carboxylate dọc theo mạch pectin. Vi sinh vật: Nhiều vi sinh vật trong đất, trong nước có khả năng phân giải pectin. Chúng có ý nghĩa quan trọng không những đối với vòng GVHD: Phạm Thị Hương 5 Lớp 10SH – Nhóm 5 Công nghệ sản xuất enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger tuần hoàn carbon trong tự nhiên mà còn đối với một số ngành sản xuất công nghiệp (ngâm đay, gai, làm bia, làm giấy…). Một số vi sinh vật có khả năng phân giải pectin mạnh mẽ: Aspergillus ccum, Aspergillus niger, Aspergillus awamori, Clostridium roserum… Đặc điểm của E. pectinase ở vi sinh vật: Tất cả các vi sinh vật để thu nhận enzyme pectinase đều là hiếu khí. Sự phân bố các kiểu enzyme pectinase ở vi sinh vật không giống nhau: có cơ thể chỉ tạo được một enzyme song đa số cơ thể khác lại tạo ra được một phức hệ enzyme pectinase khác nhau, tuỳ theo loài. Ví dụ: Sac. Fragilis chỉ tạo ra duy nhất một loại enzyme phân giải pectin là endopolygalaturonase. Còn ở nấm mốc Aspergillus niger thường tạo được một phức hệ enzyme pectinase khác nhau. Các enzyme pectinase ở vi sinh vật có thể là enzyme cảm ứng hoặc enzyme bản thể. Ngoài ra enzyme pectinase ở vi sinh vật còn khác nhau ở một số tính chất. 1.5. Giới thiệu về cơ chất pectin Pectin là polysaccarit của thực vật, tồn tại dưới 2 dạng : Protopectin không tan (tồn tại chủ yếu dưới dạng liên kết ở thành tế bào) và dạng Pectin hòa tan (tồn tại chủ yếu ở dịch tế bào).Pectin hòa tan là polysaccarit, cấu tạo từ các gốc α-D-galacturonic, các đơn vị này nối với nhau nhờ liên kết 1-4 glucozit [11], trong đó, một số gốc axit có chứa nhóm thế metoxy (-OCH3) [8]. Trong pectin tự nhiên có khoảng ¾ số nhóm axit bị metyl hóa. GVHD: Phạm Thị Hương 6 Lớp 10SH – Nhóm 5 Công nghệ sản xuất enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger Khối lượng phân tử pectin trong khoảng 3.000 – 280.000, từ nguồn gốc thực vật. Dung dịch pectin có độ nhớt cao. Độ hòa tan của pectin trong nước phụ thuộc vào mức độ ester hóa nhóm cacbonyl. Mức ester hóa càng cao độ hòa tan càng cao. Pectin hòa tan dưới tác dụng của kiềm loãng hay enzym pectase sẽ giống nhóm metoxyl tạo rượu metylic và axit pectic tự do. 1.6. Ứng dụng của enzyme pectinase [1] - Trong công nghiệp thực phẩm, pectinase được sử dụng rộng rãi để tăng tốc độ lọc, tăng hiệu suất ép nước quả, giúp nước quả trong trong quá trình tồn trữ không có hiện tượng đục do pectin bị lắng trở lại, trong sản xuất nước quả, enzyme pectinase được sử dụng cho mục đích bẻ gãy liên kết C-C hay –C-O- trùng hợp như pectin, hemixenlulo, tinh bột. Vì vậy làm tăng hàm lượng nước ép trái cây, cải tiến những chất trong nước quả như hàm lượng acid, chất thơm chất màu, giảm độ nhớt và tăng độ trong đến hiệu suất cao nhất. - Enzym pectinase được dùng trong công nghệ y dược với mục đích trích ly dược liệu. Khắc phục được nhược điểm của phương pháp trích ly thông thường tốn nguyên liệu, thời gian, tách không kiệt được chất trong bã thuốc, dược liệu bị keo nhầy không chiết được, hoặc bị đục trở lại sau thời gian tồn trữ. - Pectinase còn được sử dụng trong quá trình ngâm đay, gai để tách sợi cellulose nhưng không phá hủy sợi, ứng dụng trong chế biến trà, ca cao, nước táo và các loại nước giải khát. 2. Tổng quan về chủng Aspergillus niger 2.1. Giới thiệu chung Aspergillus niger là loài phổ biến nhất trong chi Aspergillus, phân bố rộng rãi trên các cơ chất tự nhiên, trong các sản phẩm nông công nghiệp và ở nhiều vùng địa lư khác nhau trên thế giới. Hiện nay, A. niger được sử dụng chủ yếu trong công nghiệp sản xuất enzyme (điển hình như α - amylase, glucoamylase, pectinase, protease, cellulase), trong công nghiệp chế biến thực phẩm, công nghiệp sản xuất một số acid hữu cơ như acid citric, acid gluconic,…(Pansear et al., 2010). 2.2. Phân loại khoa học [6, 10] Sinh giới: Eukaryot Giới: Fungi Ngành: Amastigomycota Ngành phụ: Ascomycotina GVHD: Phạm Thị Hương 7 Lớp 10SH – Nhóm 5 Công nghệ sản xuất enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger Lớp: Ascomycetes Lớp phụ: Plectomycetidae Bộ: Eurotiales Họ: Eurotiaceae Giống: Aspergillus Loài: Aspergillus niger Nguồn: umbali, (2005) 2.3. Đặc điểm cấu tạo [6] Tên nấm mốc Đặc điểm khuẩn lạc Đặc điểm vi thể A.niger [6] Khóm nấm mốc có đường kính 4 ¸ 5 cm trên thạch Czapek sau 5 ngày. Khóm nấm mốc màu đen hoặc nâu đen lấm tấm như bã cafe. Bông hình cầu có màu đen. Bọng hình cầu. Thể bình 1 hoặc 2 tầng, ở đa số loài thể bình 2 tầng, Metulae dài gấp đôi tầng Phialides. Vách cuống conidi trơn. Hạt đính hình cầu đến gần cầu, có gai rõ. Trụ nấm tách biệt và có hyalin. Các bào tử có nguồn gốc xuất phát từ các tế bào chân đáy trên trụ đỡ và kết thúc bằng một túi nấm ở đầu. Túi này là một sự hình thành đặc trưng cho giống nấm Aspergillus. Hình thể và màu sắc của các bào tử nấm khác nhau giữa các loài. Aspergillus có bào tử màu đen. Cơ thể dạng sợi, gọi là khuẩn ty hay sợi nấm (hypha), nhiều sợi (lypha), hợp lại thành hệ sợi nấm (mycelium). Khuẩn ty của nấm mốc A.niger tăng trưởng ở ngọn, vừa dài ra vừa ngăn vách tạo thành nhánh. Khuẩn ty có 2 loại: GVHD: Phạm Thị Hương 8 Lớp 10SH – Nhóm 5 Công nghệ sản xuất enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger Khuẩn ty cơ chất (hay khuẩn ty dinh dưỡng) có kích thước nhỏ, màu trắng, bám chặt vào cơ chất môi trường và hấp thu các chất dinh dưỡng. Các khuẩn ty này bện thành khối. Khi già hệ sợi nấm mốc ngả sang màu vàng. Khuẩn ty khí sinh (hay khuẩn ty sinh sản) có kích thước lớn hơn khuẩn ty cơ chất nhiều lần, trong suốt trên bề mặt cơ chất và từ khuẩn ty khí sinh sẽ có 1 sợi phát triển thành cơ quan sinh sản đặc biệt, mang bào tử. Thành của khuẩn ty nấm có cấu tạo sợi, thành phần hóa học chính là chitin và glucan. 2.4. Đặc điểm sinh lý [6] Loại Aspergillus niger phân bố nhiều trong tự nhiên, trong đất, ở xác bã thực vật, hoa quả và đặc biệt có nhiều ở vùng khí hậu ấm áp. Chúng là những cơ thể hiếu khí sống hoại sinh hoặc kí sinh, không có khả năng quang hợp tạo chất hưu cơ mà sống nhờ khả năng hấp thụ các loại chất hữu cơ có sẵn qua bề mặt khuẩn ty. 2.5. Đặc điểm sinh hóa [6] Khả năng đồng hóa các loại đường khác nhau : A.niger đồng hóa tốt các loại đường như glucose, fructose, saccharose, mannose. Đối với đường sorbose, galactose, A.niger đồng hóa ở mức khá tốt, còn đường lactose thì đồng hóa ở mức trung bình. Nguồn dinh dưỡng nitơ : A.niger có khả năng sử dụng ure làm nguồn N và chất điều chỉnh pH, dưới tác dụng của enzyme urease, ure phân hủy thành CO 2 và NH 3 . A.niger đồng hóa các muối amon. Việc sử dụng nguồn N hữu cơ, urease và các muói amon đều gắn liền với việc tách NH 3 ra rồi hấp thụ vào cơ thể. Như vậy NH 3 là trung tâm của con đường dinh dưỡng nitơ của vi sinh vật. Nguồn dinh dưỡng khoáng phospho : Sự có mặt của các hợp chất phospho và nồng độ của chúng trong môi trường có ảnh hưởng rất lớn đến quá trình trao đổi chất trong tế bào vi sinh vật. Thay đổi nồng độ các hợp chất phospho trong môi trường sẽ dẫn đến thay đổi các quá trình tổng hợp hàng loạt các chất hợp phần của tế bào có chứa phospho, tế bào và chất nhân. Ngoài ra, phospho có trong môi trường còn có tác dụng điều chỉnh hoạt tính hệ enzyme đồng hóa các loại thức ăn cacbon. GVHD: Phạm Thị Hương 9 Lớp 10SH – Nhóm 5 Công nghệ sản xuất enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger Khả năng sinh tổng hợp enzyme : A.niger có khả năng sinh các enzyme như amylase, protease, peptinase, và đặc biệt là hệ enzyme cellulase. 2.6. Đặc điểm sinh sản [6] A.niger có thể sinh sản theo hai hình thức chính: - Sinh sản sinh dưỡng: từ một đoạn khuẩn ty riêng lẻ có thể phát triển thành một hệ sợi nấm. Khuẩn ty của nấm mốc có thể lẫn vào bụi, không khí bay đi khắp nơi, gặp điều kiện thuận lợi sẽ nhanh chóng phát triển thành khuẩn lạc mới. - Sinh sản vô tính: Reaper và thơm (1968) cho rằng A.niger sinh sản vô tính bằng bào tử trần (conidium). Hầu như các bào tử trần là các bào tử ngoại sinh, nghĩa là được hình thành ở bên ngoài tế bào sinh bào tử trần (conidiogenóu cell). Các bào tử này sinh ra trực tiếp trên khuẩn ty hoặc đặc biệt là cuống bào tử trần (conidiophone). GVHD: Phạm Thị Hương 10 Lớp 10SH – Nhóm 5 [...]... Công nghệ sản xuất enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger 4 Quy trình công nghệ sản xuất enzyme pectinase 4.1 Các phương pháp sản xuất Hiện nay người ta thu nhận pectinase chủ yếu từ VSV Có 2 phương pháp sản xuất pectinase: Thu nhận chế phẩm enzyme pectinase theo phương pháp bề mặt Thu nhận chế phẩm enzyme pectinase theo phương pháp bề sâu Tuy nhiên, lý do vi sinh vật sản xuất ra enzyme trên...Công nghệ sản xuất enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger 3 Thu nhận enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger 3.1 Cơ chế sinh tổng hợp enzyme ( 2 enzyme tiêu biểu : PE, PG) Tùy theo nguồn cơ chất sử dụng mà chủng A niger sinh ra các loại enzyme khác nhau trong hệ pectinase như PE, PG V.vv 3.1.1.Các cơ chất thường hay sử dụng Cơ chất pectin từ nguồn phụ phẩm nông nghiệp được... sản xuất enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger xác định các điều kiện ảnh hưởng đến quá trình sản xuất 2 enzyme này : ĐK tối ưu sản xuất enzyme pectinase của chủng A Niger là : 2 ngày, độ ẩm 62% 3.2 Các yếu tố ảnh hưởng đến quá trình sinh tổng hợp enzyme 3.2.1.Ảnh hưởng của nguồn nguyên liệu Thành phần môi trường là yếu tố cơ bản nhất quyết định khả năng sinh PME cũng như các enzyme khác từ vi... hợp enzyme pectinase và cellulose từ Asp .niger và ứng dụng xử lí vỏ cà phê trong sản xuất phân hữu cơ, Lê Hồng Phú, TP Hồ Chí Minh,2003 [5] Đề tài Thu nhận enzyme pectinase từ Aspergillus niger, ĐH Tôn Đức Thắng, 2009 [6] Đề tài Khảo sát khả năng sinh enzyme pectinase từ Asp ,niger và Asp.oryza, báo cáo thực tập, Lê Hoàng Bảo Vi [7] Nazeen Akhter và cs, “ Production of pectinase by Aspergillus Niger. .. hoạt độ enzyme cao (85,54U/g) Khi thêm 9,68% pectin thì sự sản sinh enzyme tăng lên đạt 11,6U/g Cũng theo nghiên cứu này, quá trình sản xuất pectinase của chủng A .Niger IM6 đạt tối ưu 98,34U/g khi độ ẩm ban đầu của môi trường nuôi cấy là 60% Sự thông thoáng cũng ảnh hưởng rõ rệt đến quá trình sinh pectinase. [7] • Sun Zhong-Tao (2008) đă nghiên cứu sản xuất pectinase từ hai dòng Aspergillus niger đã... endo-polygalacturonase bởi chủng A .niger đột biến trên môi trường rắn Nghiên cứu đã sử dụng mô hình Plackett –Burman và tối ưu hóa bằng GVHD: Phạm Thị Hương 11 Lớp 10SH – Nhóm 5 Công nghệ sản xuất enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger phương pháp quy hoạch thực nghiệm tối ưu hóa môi trường nuôi cấy và hoạt lực tổng hợp endo-polugalacturonase là 4266U/l • Nghiên cứu khả năng sản xuất pectinase của các chủng A .niger. .. cụ nuôi cấy GVHD: Phạm Thị Hương 16 Lớp 10SH – Nhóm 5 Công nghệ sản xuất enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger Thu nhận phế phẩm enzyme thô Chế phẩm enzyme thô đem đi sử dụng Chế phẩm enzyme thô đem tinh chế Nghiền mịn Trích ly Lọc Bã Kết tủa enzyme Thu nhận kết tủa Sấy kết tủa Tinh chế kết tủa Thu nhận chế phẩm enzyme tinh khiết Enzyme kết tinh 4.3.1.Nuôi cấy nấm mốc Nhằm đủ lượng bào tử giống... phẩm enzyme pectinase được sản xuất từ chủng A niger trên môi trường có chứa chất cảm ứng bột cà rốt sau 48h đạt hoạt độ cao nhất ( 30,01UI/g) • Năm 2009, các tác giả Trần Thị Thanh Thuần, Nguyễn Đức Lượng đã thực hiện nghiên cứu enzyme cellulose và pectinase từ chủng Trichoderma viride và Aspergillus niger nhằm xử lý nhanh vỏ cà phê Nghiên cứu đã GVHD: Phạm Thị Hương 12 Lớp 10SH – Nhóm 5 Công nghệ sản. .. trong đó còn chứa 1 số enzyme ta quan tâm GVHD: Phạm Thị Hương 20 Lớp 10SH – Nhóm 5 Công nghệ sản xuất enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger Tài Liệu Tham Khảo [1] http://doc.edu.vn/tai-lieu/de-tai-ung-dung-cua-he-enzym -pectinase9 947/ [2]Luận văn Nghiên Cứu Khả Năng Sinh Aspergillus Niger PECTIN METHYLESTERASE Trên Cơ Chất Bã Táo,Nguyễn Thị Kim Ngân,Cần Thơ, 2009 [3] Công nghệ enzyme, Nguyễn Trọng... trích ly enzyme pectinase Các loại enzyme thủy phân có khả năng tan trong nước nên người ta thường dùng nước như một dung môi hòa tan.Cứ một phần chế phẩm enzyme thô, người ta cho 4-5 phần nước, khuấy nhẹ và sau đó lọc lấy dịch, phần bã thu riêng dùng làm thực phẩm gia súc(chú ý cần loại bỏ GVHD: Phạm Thị Hương 19 Lớp 10SH – Nhóm 5 Công nghệ sản xuất enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger các . công nghệ sản xuất enzyme pectinase 4.1. Các phương pháp sản xuất Hiện nay người ta thu nhận pectinase chủ yếu từ VSV. Có 2 phương pháp sản xuất pectinase: Thu nhận chế phẩm enzyme pectinase. nghệ sản xuất enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger ĐỀ TÀI : CÔNG NGHỆ SẢN XUẤT ENZYME PECTINASE TỪ CHỦNG ASPERGILLUS NIGER MỤC LỤC GVHD: Phạm Thị Hương 1 Lớp 10SH – Nhóm 5 Công nghệ sản xuất. 10SH – Nhóm 5 Công nghệ sản xuất enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger 3. Thu nhận enzyme pectinase từ chủng Aspergillus niger 3.1. Cơ chế sinh tổng hợp enzyme ( 2 enzyme tiêu biểu : PE,