Bộ y tế Báo cáo kết quả đề tài nghiên cứu cấp Bộ Đánh giá tơng đơng sinh học chế phẩm hai thành phần Amoxicilin và acid clavulanic Đề tài KHCN cấp Bộ (Quyết định số 3075/QĐ - BYT ngày 06/9/2004) Chủ nhiệm đề tài: PGS-TS Trần Tử An Cơ quan chủ trì đề tài: Trờng Đại học Dợc Hà Nội 5754 14/4/2006 Năm 2006 Bộ y tế Báo cáo kết quả đề tài nghiên cứu cấp Bộ Đánh giá tơng đơng sinh học chế phẩm hai thành phần Amoxicilin và acid clavulanic Chủ nhiệm đề tài: PGS - TS. Trần Tử An Cơ quan chủ trì đề tài: Trờng Đại học Dợc Hà Nội Cấp quản lý: Bộ y tế Mã số đề tài: Quyết định số 3075/BYT - QĐ ngày 06/9/2004 Thời gian thực hiện: 9/2004 đến 3/2006 Tổng kinh phí thực hiện đề tài: 390 triệu đồng Trong đó kinh phí SNKH: 350 triệu đồng Nguồn khác: 40 triệu đồng Năm 2006 Báo cáo kết quả đề tài nghiên cứu KHCN cấp Bộ Tên đề tài: Đánh giá tơng đơng sinh học chế phẩm hai thành phần Amoxicilin và acid clavulanic Cấp quản lý đề tài: Bộ y tế Cơ quan chủ trì đề tài: Trờng Đại học Dợc Hà Nội Danh sách những ngời thực hiện chính: 1. Ths. Nguyễn Thị Kiều Anh - Trờng Đại học Dợc Hà Nội 2. Ths. Trần Nguyên Hà - Trờng Đại học Dợc Hà Nội 3. Ths. Nguyễn Lâm Hồng - Trờng Đại học Dợc Hà Nội 4. Ths. Nguyễn Trung Hiếu - Trờng Đại học Dợc Hà Nội 5. CN. Trần Văn Tích - Trờng Đại học Dợc Hà Nội 6. DSCKI. Nguyễn Văn Tuyền - Trờng Đại học Dợc Hà Nội 7. DS. Lê Thanh Hà - Sở Y tế Hòa Bình 8. DS. Đặng Thị Thu Dung - Xí nghiệp Dợc phẩm Trung Ương I 9. TS. Phùng Thị Vinh - Viện Kiểm nghiệm, Bộ Y tế Năm 2006 Các chữ viết tắt Amox Amoxicilin AUC Diện tích dới đờng cong nồng độ - thời gian (Area Under Curve) AUC t Diện tích dới đờng cong dợc động học đến thời điểm t AUC Diện tích dới đờng cong dợc động học ngoại suy đến t = BP Dợc điển Anh (Bristish Pharmacopoiea) Clav Acid clavulanic C max Nồng độ thuốc đạt cực đại trong máu CDER Trung tâm đánh giá và nghiên cứu thuốc thuộc FDA (Mỹ) CPMP Uỷ ban các chế phẩm thuốc bản quyền của Liên minh châu Âu (EU) DC Dợc chất DĐH Dợc động học EDTA Acid etylendiamin tetracetic FDA Cơ quan quản lý dợc phẩm và thực phẩm Hoa Kỳ (Food and Drug Administration) GMP Thực hành sản xuất thuốc tốt (Good Manufacture Practice) GTTB Giá trị trung bình H% Hiệu suất HPLC Sắc ký lỏng hiệu năng cao IS Chuẩn nội OMS Tổ chức Y tế thế giới (tiếng Pháp) LOQ Giới hạn định lợng (Limit of Quantification) MRT Thời gian lu trú trung bình MeOH Methanol MeCN Acetonitril NTN Ngời tình nguyện PA Tinh khiết phân tích RSD% Độ lệch chuẩn tơng đối (Relative Standard Deviation) R Chế phẩm đối chiếu S. amox Diện tích pic của amoxicilin S. clav Diện tích pic của acid clavulanic S. nội chuẩn Diện tích pic của chuẩn nội SĐK Số đăng ký SKD Sinh khả dụng (Bioavailability) T 1/2 Thời gian bán thải (Half - life) T Chế phẩm thử t max Thời gian thuốc đạt nồng độ cực đại trong máu TĐSH Tơng đơng sinh học (Bioequivalence) WHO Tổ chức Y tế thế giới (tiếng Anh) XNDPTWI Xí nghiệp Dợc phẩm trung ơng I Danh mục bảng Trang Bảng 2.1. Một số biệt dợc kết hợp amoxicilin và acid clavulanic trên thị trờng 15 Bảng 2.2. Các chơng trình định lợng amoxicilin và acid clavulanic trong huyết tơng bằng HPLC 16 Bảng 3.1. Bố trí các nhóm uống thuốc 21 Bảng 4.1 Kết quả xác định LOQ 34 Bảng 4.2. Dãy nồng độ trong huyết tơng. 35 Bảng 4.3. Kết quả biểu thị sự phụ thuộc giữa đáp ứng phân tích và nồng độ amoxicilin và acid clavulanic trong huyết tơng 35 Bảng 4.4 Kết quả xác định độ chính xác của phơng pháp 37 Bảng 4.5 Kết quả xác định độ đúng định lợng amoxicilin trong huyết tơng 39 Bảng 4.6. Kết quả xác định độ đúng định lợng acid clavulanic trong huyết tơng 40 Bảng 4.7. Kết quả xác định độ ổn định của hoạt chất trong mẫu phân tích. 41 Bảng 4.8. Kết quả xác định độ đồng đều hàm lợng của mẫu T và R 42 Bảng 4.9. Nồng độ amoxicilin và acid clavulanic (àg/ml) trong huyết tơng theo thời gian của các cá thể 43 Bảng 4.10. Các thông số dợc động học của amoxicilin và acid clavulanic trong huyết tơng của ngời tình nguyện sau khi uống 1 viên Vigentin 500/ 125 mg 44 Bảng 4.11 .Nồng độ hoạt chất trong huyết tơng ngời tình nguyện N8 sau khi uống 3 viên Vigentin 500mg/125mg 46 Bảng 4.12. Các thông số dợc động học của amoxicilin và 48 acid clavulanic ở ngời tình nguyện N8 sau khi uống 3 viên Vigentin 500mg/125mg Bảng 4.13. Nồng độ hoạt chất trung bình trong huyết tơng của 12 ngời tình nguyện sau khi uống 3 viên Augmentin 500/125mg 49 Bảng 4.14. Nồng độ hoạt chất trung bình trong huyết tơng của 12 ngời tình nguyện sau khi uống 3 viên Vigentin 500/125mg 50 Bảng 4.15. Kết quả các thông số dợc động học cần dùng cho phân tích 52 Bảng 4.16. Giá trị lg của các thông số dợc động học dùng cho phân tích phơng sai 55 Bảng 4.17. Phân tích phơng sai đối với giá trị AUC 0-420 57 Bảng 4.18. Phân tích phơng sai đối với giá trị AUC 0- 59 Bảng 4.19. Phân tích phơng sai đối với giá trị C max 60 Bảng 4.20. Tổng hợp các thông số dợc động học của amoxicilin và acid clavulanic trong 2 chế phẩm thử và chuẩn 62 Bảng 4.21. Giá trị C max và AUC 0-420 (TB sd) của amoxicilin và acid clavulanic của viên Vigentin 500 mg/ 125 mg và Augmentin 500 mg/ 125 mg 65 Bảng 4.22. Thông số dợc động học đối với amoxicilin và acid clavulanic của viên Augmentin 500 mg/ 125 mg 66 Danh mục hình Trang Hình 3.1. Qui trình xử lý mẫu huyết tơng 23 Hình 4.1a. Phổ hấp thụ của dẫn chất acid clavulanic 30 Hình 4.1b. Phổ hấp thụ của amoxicilin 30 Hình 4.2. Phổ hấp thụ của pic nội chuẩn trên sắc ký đồ 32 Hình 4.3a. Sắc ký đồ của huyết tơng trắng tại 200nm 33 Hình 4.3b. Sắc ký đồ của amoxicilin trong huyết tơng tại 200nm 33 Hình 4.4a. Sắc ký đồ của huyết tơng trắng tại 322nm 33 Hình 4.4b. Sắc ký đồ của acid clavulanic trong huyết tơng tại 322nm 34 Hình 4.5. Đồ thị biểu diễn sự phụ thuộc giữa đáp ứng phân tích và nồng độ amoxicilin và acid clavulanic trong huyết tơng 36 Hình 4.6a. Biểu đồ xác định độ chính xác của phơng pháp đối với amoxicilin 37 Hình 4.6b. Biểu đồ xác định độ chính xác của phơng pháp đối với acid clavulanic 38 Hình 4.7a: Sắc ký đồ định lợng acid clavulanic trong huyết tơng NTN N8 sau khi uống viên Vigentin 500mg/ 125mg thứ nhất 46 Hình 4.7b.: Sắc ký đồ định lợng amoxicilin trong huyết tơng ngời tình nguyện N8 sau khi uống viên Vigentin 500mg/ 125mg thứ nhất 46 Hình 4.8. Đờng cong dợc động học ở ngời tình nguyện N8 48 Hình 4.9. Đờng cong dợc động học trung bình của amoxicilin và acid clavulanic của 12 ngời tình nguyện uống 3 viên Vigentin 500mg/125mg hoặc Augmentin 500mg/125mg 51 mục lục Các chữ viết tắt Danh mục các bảng Danh mục các hình Trang Phần 1: mở đầu 1 Phần 2: tổng quan 3 2.1. Khả dụng sinh học và tơng đơng sinh học 3 2.1.1. Khả dụng sinh học 3 2.1.2. Tơng đơng sinh học 3 2.1.3. Các chế phẩm cần đánh giá tơng đơng sinh học 4 2.1.4. Các chế phẩm không cần đánh giá tơng đơng sinh học 5 2.1.5. Phơng pháp dợc động học đánh giá tơng đơng sinh học 5 2.2. Đại cơng về amoxicilin và acid clavulanic 12 2.2.1. Tính chất lý hoá của amoxicilin và acid clavulanic 12 2.2.2. Tính chất dợc lý và dợc động học 13 2.2.3. Các dạng thuốc trên thị trờng 14 2.2.4. Định lợng amoxicilin trong dịch sinh vật 15 2.2.5. Đánh giá tơng đơng sinh học của chế phẩm có amoxicilin và acid clavulanic 17 Phần 3: nguyên vật liệu và phơng pháp nghiên cứu 18 3.1. Nguyên vật liệu 18 3.1.1. Dợc phẩm 18 3.1.2. Hóa chất chất chuẩn 18 3.1.3. Thiết bị 18 3.2. Phơng pháp nghiên cứu 19 3.2.1. Đánh giá tơng đơng sinh học 19 3.2.2. Định lợng amoxicilin và acid clavulanic trong huyết tơng 22 3.2.3. Thẩm định phơng pháp phân tích amoxicilin và acid clavulanic trong huyết tơng 24 3.2.4. Phân tích số liệu thực nghiệm 26 Phần 4: kết quả và bàn luận 29 4.1. Xây dựng phơng pháp định lợng định lợng 29 4.1.1. Khảo sát dung môi chiết đồng thời amoxicilin và acid clavulanic trong huyết tơng 29 4.1.2. Khảo sát điều kiện sắc ký định lợng đồng thời amoxicillin và acid clavulanic trong huyết tơng 29 4.1.3. Chọn chất nội chuẩn 31 4.2. Thẩm định phơng pháp định lợng 32 4.2.1. Tính chọn lọc 32 4.2.2. Giới hạn định lợng 34 4.2.3. Khoảng nồng độ tuyến tính 35 4.2.4. Độ chính xác của phơng pháp 36 4.2.5. Độ đúng của phơng pháp 38 4.2.6. Độ ổn định 41 4.3. Đánh giá sinh khả dụng viên nén Vigentin 500/ 125 mg trên ngời tình nguyện 42 4.3.1. Độ đồng đều hàm lợng 42 4.3.2. Xây dựng chơng trình lấy máu. 43 4.4. Đánh giá tơng đơng sinh học 45 4.4.1. Xây dựng đờng cong dợc động học của các cá thể 45 4.4.2. Phân tích số liệu 51 4.5. Bàn luận 64 Phần 5: kết luận và đề xuất 74 5.1. Kết luận 74 5.2. Đề xuất 75 Tài liệu tham khảo 76 Phụ lục Phụ lục 1: Các đờng chuẩn dùng trong tính toán Phụ lục 2: Kết quả kiểm tra sức khỏe của ngời tình nguyện Phụ lục 3: Một số sắc ký đồ Phụ lục 4: Đơn tình nguyện tham gia nghiên cứu [...]... hiện đề tài "Đánh giá tơng đơng sinh học chế phẩm hai thành phần amoxicilin và acid clavulanic nhằm hai mục tiêu chính l : - Xây dựng một qui trình thực nghiệm thích hợp, khả thi để nghiên cứu tơng đơng sinh học của chế phẩm chứa hai thành phần amoxicilin và acid clavulanic - Đánh giá tơng đơng sinh học của viên nén bao film Vigentin 500mg/125mg sản xuất tại Xí nghiệp Dợc phẩm Trung ơng I so sánh với chế. ..Tóm tắt kết quả nổi bật của đề tài 1 Kết quả nổi bật của đề tài 1.1 Đóng góp mới của đề tài: Sau khi hoàn thành đề tài: Đánh giá TĐSH của chế phẩm hai thành phần amoxicilin (amox) và acid clavunanic (clav) sản xuất ở Việt Nam, chúng tôi rút ra 3 đóng góp mới của đề tài 1.1.1 Đối với các chế phẩm có sự cá thể hoá cao trong hấp thu nh amox và clav chọn mô hình chéo đa liều là phù hợp... 12 ngời Chọn chế phẩm đối chiếu + Mục đích của đánh giá TĐSH là xác định xem chế phẩm generic có tơng đơng với chế phẩm phát minh (innovator product) hay không 7 Chế phẩm phát minh là những chế phẩm bản quyền đợc cấp phép lu thông trên cơ sở có đủ hồ sơ nghiên cứu về hóa học, sinh học, bào chế, dợc lý, độc chất và thử lâm sàng Vì vậy, chế phẩm đối chiếu trong đánh giá TĐSH phải là chế phẩm phát minh... Đánh giá sự tơng đồng của thuốc (essentially similarity) dựa vào TĐSH với một chế phẩm đối chiếu ở một nớc thành viên có thể dùng cho các nớc thành viên khác của khối * Khi cần đánh giá TĐSH bổ sung, có thể dùng chế phẩm đã đợc đăng ký ở nớc thành viên liên quan làm chế phẩm đối chiếu Chế phẩm nghiên cứu Chế phẩm nghiên cứu cần đánh giá TĐSH so sánh với chế phẩm đối chiếu phải đảm bảo các yêu cầu:... kết quả đánh giá sinh khả dụng và tơng đơng sinh học của thuốc Việt Nam có tỷ lệ sử dụng kháng sinh cao so với các nớc trên thế giới, do đó các doanh nghiệp dợc trong nớc đã đầu t sản xuất nhiều loại thuốc kháng sinh Trong đó, chế phẩm dạng phối hợp của amoxicilin và acid clavulanic đợc sử dụng khá phổ biến trong điều trị ở nhiều dạng bào chế khác nhau: dung dịch tiêm, viên, hỗn dịch dạng chai và dạng... thuốc và hớng tới đánh giá tơng đơng điều trị của các chế phẩm sản xuất trong nớc Do đó ngành Dợc Việt Nam nên xem xét để đa phép thử TĐSH vào qui chế về sản xuất, kiểm nghiệm và cấp phép chế phẩm thuốc 3/ Nhà nớc cần đầu t và thành lập các trung tâm đánh giá SKD và TĐSH của thuốc để đảm bảo kết quả nghiên cứu này có đáng tin cậy và có tính chất pháp lý đợc thế giới công nhận Phần 1 mở đầu Nghiên cứu sinh. .. nớc: 4,0mg/ml; trong cồn tuyệt đối: 3,4mg/ ml; trong methanol: 7,5mg/ ml; không tan trong hexan, benzen, ethylacetat, acetonitril Acid clavulanic [21], [22], [23] - Công thức hoá học: Trong chế phẩm thuốc thờng dùng dạng muối kali: H O O OH N COOK - Công thức phân t : C8H9NO5 - Trọng lợng phân t : 199,16 2.2.2 Tính chất dợc lý và dợc động học [3], [5] - Cơ chế tác dụng: Amoxicilin (Amox) là kháng sinh. .. tiền sử dị ứng với Amox và Clav và các thuốc khác - Để đánh giá hiện trạng sức khoẻ chúng tôi xem xét thêm chỉ tiêu xét nghiệm: 19 + Hoá sinh: 5 chỉ tiêu: urê, creatinin, bilirubin toàn phần, SGOT, SGPT + Huyết học: 4 chỉ tiêu: hồng cầu, công thức bạch cầu, HIV và HBsAg Các chỉ tiêu xét nghiệm hoá sinh và huyết học của NTN phải nằm trong giới hạn của ngời bình thờng Riêng HIV và HBsAg phải cho kết quả... chế phẩm viên nén bao film Augmentin 500mg/125mg của hãng dợc phẩm SmithKline Beecham Chúng tôi hy vọng rằng thông qua thực tế nghiên cứu của đề tài này sẽ cung cấp một số dữ liệu giúp thêm các cơ quan chức năng soạn thảo văn bản đánh giá tơng đơng sinh học ở nớc ta 2 Phần 2 tổng quan 2.1 Sinh khả dụng và tơng đơng sinh học 2.1.1 .Sinh khả dụng (Bioavailability: SKD) [2], [19] Đối với các thuốc mà sinh. .. - Amoxicilin 1 150 ì 4,6 5àm MeOH: MeCN: NaH2PO4 Zorbax C8 10mM 1,4 (1 0:2 :8 8) (1) 2 3 (2) (4) 125 ì 4 5àm MeCN: Na2HPO4 LiChrospher RP pH 6,8 ( 3:9 7) 18 E Zorbak ODS-7 250 4 230 (3) 150 ì 4,6 7àm ì 20mM 1 (5) UV 225 MeCN: NaH2PO4 20mM: Na2S2O3 20-80 1 20mM (2 4:3 8:3 8) 4,6 MeOH: àBondapak C18 UV 328 đệm ( 6:9 4), (dd đệm KH2PO4 gồm 25-50 2,5 100mM, chỉnh pH 3,2 6 UV bằng 4 UV 227 acid phosphoric) Acid Clavulanic . Báo cáo kết quả đề tài nghiên cứu KHCN cấp Bộ Tên đề tài: Đánh giá tơng đơng sinh học chế phẩm hai thành phần Amoxicilin và acid clavulanic Cấp quản lý đề tài: Bộ y tế . nổi bật của đề tài 1. Kết quả nổi bật của đề tài 1.1. Đóng góp mới của đề tài: Sau khi hoàn thành đề tài: Đánh giá TĐSH của chế phẩm hai thành phần amoxicilin (amox) và acid clavunanic. Bộ y tế Báo cáo kết quả đề tài nghiên cứu cấp Bộ Đánh giá tơng đơng sinh học chế phẩm hai thành phần Amoxicilin và acid clavulanic Đề tài KHCN cấp Bộ (Quyết định số 3075/QĐ