Bộ Nông nghiệp và phát triển nông thôn Viện Di truyền Nông nghiệp Báo cáo Tổng kết Khoa học và Kỹ thuật Đề tài S S ử ử d d ụ ụ n n g g k k ỹ ỹ t t h h u u ậ ậ t t b b i i ế ế n n n n ạ ạ p p d d i i t t r r u u y y ề ề n n c c ả ả i i t t ạ ạ o o m m ộ ộ t t s s ố ố đ đ ặ ặ c c t t í í n n h h n n ô ô n n g g s s i i n n h h h h ọ ọ c c ở ở n n g g ô ô v v à à l l ú ú a a m m ỳ ỳ Chủ nhiệm Đề tài: PGS. TS. Lê Huy Hàm Cơ quan chủ trì: Viện Di truyền Nông nghiệp Cơ quan chủ quản: Bộ Nông nghiệp & PTNT Thời gian thực hiện: 1/2002 12/2004 5885 19/6/2006 Hà Nội, 2006 Bản báo cáo viết xong ngày 1/04/2006 Tài liệu này đợc chuẩn bị trên cơ sở kết quả thực hiện Đề tài Nghị định th hợp tác KHCN với CHLB Đức Lời cảm ơn Chủ nhiệm đề tài xin chân thành cảm ơn Viện Di truyền Nông nghiệp đã ủng hộ, tạo điều kiện thuận lợi về trang thiết bị và nhân lực cho cán bộ chủ trì và các cán bộ tham gia thực hiện đề tài này. Chủ nhiệm đề tài và cán bộ thực hiện đề tài xin chân thành cảm ơn Vụ Quản lý Khoa học & Công nghệ các ngành kinh tế của Bộ Khoa học & Công Nghệ; Vụ Hợp tác Quốc tế của Bộ Khoa học & Công Nghệ; Bộ Nông nghiệp và PTNT đã tạo điều kiện về kinh phí và quản lý quá trình thực hiện các nội dung nghiên cứu của đề tài trong suốt thời gian qua. Hà Nội, ngày tháng năm 2006 Cơ quan chủ trì đề tài Chủ nhiệm đề tài PGS. TS. Lê Huy Hàm Mục lục Danh sách những ngời tham gia thực hiện đề tài 1 Bài tóm tắt 2 Những chữ viết tắt 4 Lời mở đầu 5 Chơng 1. Tổng quan tình hình nghiên cứu trong nớc và ngoài nớc 8 1.1. Tình hình sản xuất ngô trên thế giới và trong nớc 8 1.2. Tình hình nghiên cứu và sử dụng cây chuyển gen 8 1.3. Công nghệ sinh học và ứng dụng trong chọn tạo giống ngô ở Việt nam 11 1.3.1. Các nghiên cứu về nuôi cấy bao phấn ngô 11 1.3.2. Nuôi cấy noãn cha thụ tinh 12 1.4. Các nghiên cứu chuyển gen ở cây ngô 12 1.5. Một số hớng mới nhằm cải tạo giống ngô 13 1.5.1. Chọn tạo giống chín sớm 13 1.5.2. Chọn tạo giống có khả năng chịu lạnh 14 1.5.3. Tăng cờng khả năng hấp thụ nitơ 14 Chơng 2. Lựa chọn đối tợng và phơng pháp nghiên cứu 16 2.1. Mục tiêu của đề tài 16 2.2. Nội dung nghiên cứu cần thực hiện 16 2.2.1. Tách chiết và tái tổ hợp gen, thiết kế vectơ mang gen 16 2.2.2. Xây dựng hệ thống tái sinh và biến nạp di truyền 16 2.2.2.1. Xây dựng hệ thống tái sinh từ phôi non và mô đơn bội ở ngô 16 2.2.2.2. Thiết lập hệ thống chuyển gen ở cây ngô 17 2.2.2.3. Chuyển gen vào ngô với các gen quan tâm 18 2.2.2.4. Phân tích cây chuyển gen 18 2.3. Vật liệu và phơng pháp nghiên cứu 18 2.3.1. Vật liệu 18 2.3.1.1. Vật liệu thực vật 18 2.3.1.2. Các chủng vi khuẩn Agrobacterium, plasmid DNA, vật t và hoá chất 19 2.3.2. Phơng pháp 20 2.3.2.1. Phơng pháp thí nghiệm đồng ruộng 20 2.3.2.2. Phơng pháp nuôi cấy mô tế bào 20 2.3.2.3. Cải thiện khả năng tái sinh của các dòng ngô Việt Nam bằng phơng pháp di truyền 20 2.3.2.4. Phơng pháp biến nạp gen 21 2.3.2.5.Phơng pháp đánh giá cây chuyển gen 21 2.4. Dạng sản phẩm kết quả tạo ra 22 2.5. Nhu cầu kinh tế, xã hội và địa chỉ áp dụng 22 Chơng 3. Những nội dung và kết quả đã thực hiện 23 3.1. Xây dựng hệ thống tái sinh 23 3.1.1. Xây dựng hệ thống tái sinh từ phôi non 23 3.1.1.1. Cơ sở khoa học và các nghiên cứu về hệ thống tái sinh in vitro 23 3.1.1.2. Vật liệu và phơng pháp 27 3.1.1.3. Hoàn thiện hệ thống nuôi cấy và tái sinh cây từ phôi non 29 3.1.1.4. Quy trình tái sinh cây từ phôi non ở ngô 39 3.1.1.5. Đánh giá khả năng tái sinh của một số dòng ngô Việt Nam 41 3.1.2. Xây dựng hệ thống tái sinh phôi từ nuôi cấy bao phấn 42 3.1.2.1. Đặt vấn đề 42 3.1.2.2. Vật liệu và phơng pháp 43 3.1.2.3. Phản ứng của các giống ngô Việt Nam trong nuôi cấy bao phấn 45 3.1.2.4. Tối u hoá quy trình tái sinh phôi từ nuôi cấy bao phấn 46 3.1.2.5. Quy trình tái sinh cây từ bao phấn 51 3.1.3. Tạo các dòng ngô Việt Nam có khả năng tái sinh cao bằng phơng pháp di truyền 52 3.1.3.1. Vật liệu và phơng pháp 53 3.1.3.2. Kết quả chọn tạo các dòng ngô Việt Nam có khả năng tái sinh cao 53 3.1.4. Kết luận 57 3.2. Xây dựng hệ thống chuyển gen 59 3.2.1. Xây dựng hệ thống chuyển gen bằng súng bắn gen 59 3.2.1.1. Cơ sở khoa học và thực tiễn của việc chuyển gen bằng súng bắn gen 59 3.2.1.2. Vật liệu và phơng pháp 62 3.2.1.3. Hoàn thiện quy trình chuyển gen bằng súng bắn gen 64 3.2.1.4. Kết luận 74 3.2.1.5. Quy trình biến nạp bằng súng bắn gen 75 3.2.2. Xây dựng hệ thống biến nạp gen thông qua Agrobacterium 77 3.2.2. 1. Cơ sở khoa học và thực tiễn của việc chuyển gen thông qua Agrobacterium 77 3.2.2. 2. Vật liệu và phơng pháp 79 3.2.2.3. Hoàn thiện quy trình chuyển gen thông qua Agrobacterium 82 3.2.2.4. Quy trình biến nạp gen thông qua Agrobacterium 90 3.2.2.5. Đánh giá khả năng biến nạp gen của một số dòng ngô thuần và ngô lai 92 3.2.2.6. Kết luận 94 3.3. Chuyển gen vào ngô với các gen quan tâm 95 3.3.1.Vật liệu và phơng pháp 95 3.3.1.1. Vật liệu 95 3.3.1.2. Phơng pháp 96 3.3.2. Kết quả và thảo luận 97 3.3.3. Những khó khăn tồn tại 104 3.3.4. Kết luận 105 3.4. Phân tích cây chuyển gen 106 3.4.1. Vật liệu và phơng pháp 106 3.4.1.1. Vật liệu 106 3.4.1.2. Phơng pháp 107 3.4.2. Kết quả đánh giá biểu hiện bền vững của gen chỉ thị trong các dòng ngô chuyển gen 109 3.4.2.1. Biểu hiện bền vững của gen gfp trong các dòng ngô chuyển gen 109 3.4.2.2. Biểu hiện bền vững của gen gus trong các dòng ngô chuyển gen 111 3.4.3. Kết quả phân tích PCR các dòng ngô chuyển gen 113 3.4.3.1. Phân tích PCR các dòng ngô chuyển gen gfp và pat 113 3.4.3.2. Phân tích PCR các dòng ngô chuyển gen gus và nptII 114 3.4.4. Kết quả phân tích lai Southern các dòng ngô chuyển gen 115 3.4.4.1. Phân tích lai Southern các dòng ngô chuyển gen pat 115 3.4.4.2. Phân tích lai Southern các dòng ngô chuyển gen nptII 117 3.4.5. Thử nghiệm cây chuyển gen trong nhà kính 119 3.4.6. Kết luận 122 Chơng 4. Tổng quát hoá và đánh giá kết quả thu đợc 123 4.1. Kết quả về khoa học 123 4.2. Kết quả nổi bật và khả năng áp dụng 124 4.3. Trình độ công nghệ 126 4.4. Khả năng áp dụng 126 4.5. Đào tạo 126 4.6. Sản phẩm khoa học của đề tài 127 4.7 Hợp tác quốc tế 128 4.8. Tình hình sử dụng kinh phí 128 4.9. Danh sách các công trình công bố 129 4.10. Hạn chế của đề tài 129 Chơng 5. Kết luận và đề nghị 131 5.1. Kết luận 131 5.2. Đề nghị 132 Tài liệu tham khảo 134 Tài liệu Tiếng Việt 134 Tài liệu Tiếng Anh 135. Phụ lục Mục lục các bảng Bảng 1 Đánh giá một số chỉ tiêu nông học của các dòng ngô nhập n ộ i HR8 và HR9 qua các thời vụ trồng trong điều kiện Việt nam 30 Bảng 2 Khả năng tạo mô sẹo và tái sinh cây dòng HR8 32 Bảng 3 Khả năng tạo mô sẹo và tái sinh cây dòng HR9 32 Bảng 4 ảnh hởng của kích thớc phôi nuôi cấy (tuổi phôi) lên khả năng tạo mô sẹo và tái sinh cây 33 Bảng 5 ảnh hởng của AgNO 3 đến khả năng tạo mô sẹo và tái sinh cây dòng HR8 36 Bảng 6 ảnh hởng của thành phần môi trờng và AgNO 3 đến khả năng tạo mô sẹo và tái sinh dòng HR8 37 Bảng 7 ảnh hởng của 2,4-D đến khả năng tạo mô sẹo của phôi non dòng ngô HR8 38 Bảng 8 Đánh giá khả năng tái sinh của các dòng ngô Việt Nam 41 Bảng 9 Phản ứng của các giống ngô Việt Nam trong nuôi cấy bao phấn 45 Bảng 10 ảnh hởng của thời gian cấy chuyển đến tần số tạo phôi và tái sinh cây từ nuôi cấy bao phấn 46 Bảng 11 ảnh hởng của xử lý áp suất thẩm thấu đối với phản ứng của bao phấn ngô 48 Bảng 12 ảnh hởng của kinetin đến khả năng tái sinh cây từ phôi tạo thành trong nuôi cấy bao phấn 49 Bảng 13 ảnh hởng của BAP lên quá trình nhân nhanh cụm chồi ngô 50 Bảng 14 ảnh hởng của auxin tới sự tạo rễ cây ngô 51 Bảng 15 Đánh giá khả năng tái sinh từ phôi non của các dòng ngô lai giữa dòng ngô Việt Nam và dòng nhập nội HR8/HR9 54 Bảng 16 Phản ứng tái sinh in vitro của các dòng ngô chọn tạo bằng phơng pháp lai ngợc giữa dòng ngô Việt Nam và dòng nhập nội HR8 55 Bảng 17 ảnh hởng của thời gian tiền nuôi cấy phôi đến biểu hiện tạm thời của gen gus và khả năng tái sinh 65 Bảng 18 ảnh hởng của khoảng cách bắn và áp lực khí đến biểu hiện gen tạm thời 68 Bảng 19 Biểu hiện gen tạm thời của phôi non dòng ngô HR8 sau khi bắn gen với các plasmid mang các đoạn khởi động khác nhau 69 Bảng 20 ảnh hởng của xử lý áp suất thẩm thấu đến biểu hiện gen tạm thời 71 Bảng 21 ảnh hởng hàm lợng hạt vàng đến biểu hiện tạm thời của gen gus và khả năng tái sinh 72 Bảng 22 ảnh hởng kích thớc hạt vàng đến biểu hiện tạm thời của gen gus và khả năng tái sinh 73 Bảng 23 Thành phần môi trờng nuôi cấy và chuyển gen thông qua vi khuẩn Agrobacterium ở ngô 81 Bảng 24 Biểu hiện tạm thời của gen gus khi biến nạp các chủng Agrobacterium và vector khác nhau vào phôI non dòng ngô HR8 83 Bảng 25 Tơng tác giữa kích thớc phôi nuôi cấy và mức độ xâm nhiễm của vi khuẩn Agrobacterium trong biến nạp gen ở ngô 85 Bảng 26 ảnh hởng của thời gian tiền nuôi cấy phôi đến hiệu quả chuyển gen thông qua Agrobacterium 87 Bảng 27 ảnh hởng của acetosyringone (AS) đến biểu hiện tạm thời của gen gus 89 Bảng 28 Phản ứng của các dòng ngô khác nhau trong biến nạp gen thông qua Agrobacterium 93 Bảng 29 Trình tự các đoạn mồi (Biozym) sử dụng trong nghiên cứu 97 Bảng 30 Kết quả chọn lọc và tái sinh cây sau khi biến nạp phôi non dòng HR8 với các gen quan tâm 98 Bảng 31 Tóm tắt các thí nghiệm chuyển gen quan tâm vào phôi non dòng HR8 100 Bảng 32 Trình tự các đoạn mồi (Biozym) sử dụng trong nghiên cứu 108 Bảng 33 Tóm tắt các thí nghiệm chuyển gen bằng súng bắn gen vào phôi non dòng ngô HR8 109 Bảng 34 Tóm tắt các thí nghiệm chuyển gen thông qua vi khuẩn Agrobacterium 111 Bảng 35 Theo dõi sinh trởng và phát triển của các dòng HR8 chuyển gen trồng trong nhà kính 120 Mục lục các hình Hình 1 Mô tả hình thái, sinh trởng và phát triển của hai dòng ngô nhập nội HR8 và HR9 qua các thời vụ trồng trong điều kiện Việt Nam 31 Hình 2 Tạo mô sẹo và tái sinh cây từ phôi non dòng ngô nhập nội HR8 32 Hình 3 Các giai đoạn phát triển của phôi ngô 34 Hình 4 Tạo mô sẹo và tái sinh cây ở các phôi nuôi cấy có kích thớc khác nhau 35 Hình 5 ảnh hởng của AgNO 3 đến khả năng tạo mô sẹo và tái sinh cây dòng HR8 37 Hình 6 ảnh hởng của 2,4-D đến khả năng tạo mô sẹo của phôi non dòng ngô HR8 39 Hình 7 Khả năng tái sinh của các dòng ngô Việt Nam 42 Hình 8 Khả năng tái sinh cây từ phôi non của các dòng ngô lai giữa dòng Việt Nam và dòng HR8/HR9 54 Hình 9 Tạo mô sẹo và tái sinh cây từ phôi non của các dòng ngô 55 Hình 10 Chọn tạo các dòng ngô FNBcr2 56 Hình 11 Sơ đồ cấu trúc các plasmid sử dụng trong các thí nghiệm biến nạp gen bằng súng bắn gen 63 Hình 12 Mô đích sử dụng cho bắn gen 65 Hình 13 Biểu hiện gus tạm thời ở phôi sau khi bắn gen 66 Hình 14 Tạo mô sẹo phôi hoá và tái sinh chồi từ phôi non bắn gen 67 Hình 15 Biểu hiện gus tạm thời ở phôi ngô non sau khi biến nạp với plasmid mang đoạn khởi động khác nhau 70 Hình 16 Biêủ hiện tạm thời của gen gus ở phôi non dòng HR8 sau 2 ngày bắn gen 72 Hình 17 Sơ đồ cấu trúc vectơ pBINGUSINT và pSB11-PAT-ubi-GUSINT sử dụng cho các nghiên cứu biến nạp gen thông qua vi khuẩn Agrobacterium 80 Hình 18 Biểu hiện tạm thời của gen gus ở phôi non dòng HR8 biến nạp với các chủng Agrobacterium mang các vector khác nhau 84 Hình 19 Biểu hiện tạm thời của gen gus ở các phôi non có kích thớc khác nhau sau khi biến nạp với Agrobacterium ATHV(pBINGUSINT) 86 Hình 20 Biểu hiện tạm thời của gen gus ở các phôi non đợc tiền nuôi cấy 88 Hình 21 Biểu hiện tạm thời của gen gus ở các phôi non lây nhiễm trong môi trờng có bổ sung AS 90 Hình 22 Biểu hiện tạm thời của gen gus ở các phôi non dòng ngô HR8, GA35 và GC8 sau khi biến nạp với ATHV(pBINGUSINT) 93 Hình 23 Sơ đồ cấu trúc vectơ pBIN4F4 và pBINIIIE9 sử dụng trong các thí nghiệm biến nạp gen ở ngô thông qua Agrobacterium. 96 Hình 24 Kết quả phân tích PCR các dòng ngô HR8 chuyển gen 100 Hình 25 Kết quả điện di sản phẩm PCR các dòng ngô HR8 đợc biến nạp với vectơ pPLANTA195ZAP1 mang gen chín sớm ZAP1 101 Hình 26 Kết quả phân tích PCR các cây ngô HR8 đợc biến nạp với vectơ pPLANTA195Zmm4 mang gen chín sớm Zmm4 102 Hình 27 Kết quả phân tích PCR các dòng ngô HR8 đợc biến nạp với vectơ pBIN4F4 mang gen chịu lạnh 4F4 103 Hình 28 Kết quả phân tích PCR các dòng ngô HR8 đợc biến nạp với vectơ pBINIIIE9 mang gen chịu lanh IIIE9 104 Hình 29 Sơ đồ cấu trúc plasmid p35PAT sử dụng cho các nghiên cứu chuyển gen bền vững vào phôi ngô non bằng súng bắn gen 107 Hình 30 Biểu hiện bền vững của gen gfp ở mô sẹo tạo thành từ phôi non bắn gen và rễ cây chuyển gen tái sinh 110 Hình 31 Biểu hiện của gen gus ở chồi và rễ cây ngô tái sinh đã chuyển gen 112 Hình 32 Kết quả phân tích PCR các dòng ngô HR8 đã đợc chuyển gen gfp 113 Hình 33 Kết quả phân tích PCR các dòng ngô HR8 đã đợc chuyển gen pat 113 Hình 34 Kết quả phân tích PCR các dòng ngô HR8 và GA35 đã đợc chuyển gen gus 114 Hình 35 Kết quả phân tích PCR các dòng ngô HR8 đã đợc chuyển gen nptII 115 Hình 36 Kết quả phân tích PCR các dòng ngô HR8 đã đợc chuyển gen thông qua Agrobacterium 115 Hình 37 Kết quả lai DNA của các dòng ngô HR8 chuyển gen pat (cắt bằng NcoI) 116 Hình 38 Kết quả lai DNA của các dòng ngô HR8 chuyển gen pat (cắt bằng SacI) 117 Hình 39 Kết quả lai Southern của các dòng ngô GA35 chuyển gen nptII 118 Hình 40 Dòng ngô GA35 chuyển gen hữu thụ trồng trong nhà kính 119 Hình 41 Đánh giá biểu hiện bền vững của gen pat ở các dòng ngô HR8 chuyển gen trồng trong nhà kính 121 Báo cáo Tổng kết Khoa học & Kỹ thuật Đề ti 1 Danh sách những ngời tham gia thực hiện đề ti TT Họ và tên Cơ quan công tác A Chủ nhiệm đề tài PGS.TS Lê Huy Hàm Phòng thí nghiệm trọng điểm Công nghệ tế bào thực vật, Viện Di truyền Nông nghiệp B Cán bộ tham gia nghiên cứu 1 PGS.TS. Đỗ Năng Vịnh Phòng thí nghiệm trọng điểm Công nghệ tế bào thực vật, Viện Di truyền nông nghiệp 2 Th.S. Phạm Thị Lý Thu nt 3 TS. Đinh Đoàn Long nt 4 CN. Lê Thu Về nt 5 Th.S. Nguyễn Khánh Vân nt 6 CN. Lu Thị Mỹ Dung nt 7 ThS. Hà Thị Thuý nt 8 CN. Phạm Minh Thợi nt 9 KS. Vũ Thị Sơn nt [...]... Agrobacterium đặc hiệu cũng đợc chuyển giao cho Việt Nam Xuất phát từ những đòi hỏi thực tế trên và khả năng của đối tác nớc ngoài bổ sung những thiếu hụt của nớc ta trong vấn đề áp dụng kỹ thuật di truyền cải tạo giống cây trồng, Viện Di truyền Nông nghiệp đã đợc Bộ Khoa học Công nghệ cho phép thực hiện đề tài Sử dụng kỹ thuật biến nạp di truyền cải tạo một số đặc tính nông sinh học ở ngô và lúa mỳ Đây là một. .. tần số chuyển gen tạm thời (%) Vir : Virulence Region = Vùng gây độc có khả năng tạo khối u 4 Báo cáo Tổng kết Khoa học & Kỹ thuật Đề ti Lời mở đầu Công nghệ sinh học hiện đại và các cây trồng biến đổi di truyền đang đợc ứng dụng rộng rãi và có nhiều đóng góp có giá trị cho sản xuất nông nghiệp, đặc biệt trên lĩnh vực tạo giống cây trồng mới Công nghệ sinh học sử dụng kỹ thuật di truyền để cải tạo. .. Khoa học & Kỹ thuật Đề ti Bi tóm tắt ở Việt Nam, ngô là cây lơng thực quan trọng thứ hai đứng sau lúa Trong lĩnh vực chọn tạo giống ngô mặc dù đã có những chuyển biến hết sức tích cực nhng công nghệ sinh học vẫn cha đợc áp dụng rộng rãi vào công tác chọn tạo giống ngô, đặc biệt là việc tạo ra các giống ngô có các đặc tính mới bằng kỹ thuật di truyền Những hạn chế làm giảm hiệu quả của việc ứng dụng. .. truyền cải tạo một số đặc tính nông sinh học ở ngô và lúa mỳ đợc thực hiện trên cơ sở hợp tác khoa học với Trung tâm nghiên cứu PLANTA/KWS (CHLB Đức) là một trong những cố gắng theo hớng khắc phục các nhợc điểm trên để tiến tới ứng dụng thành công công nghệ gen vào cải tạo giống cây trồng Mục tiêu của đề tài phía Việt Nam tập trung vào giải quyết các vấn đề sau: i) Xây dựng hệ thống tái sinh sử dụng. .. hai đứng sau lúa Trong lĩnh vực chọn tạo giống ngô mặc dù đã có những chuyển biến hết sức tích cực nhng công nghệ sinh học vẫn cha đợc áp dụng rộng rãi vào công tác chọn tạo giống ngô Chúng ta mới chỉ giới hạn ở việc ứng dụng các công nghệ nh công nghệ đơn bội, đánh giá khoảng cách di truyền vào chọn tạo giống ngô ở quy mô rất hạn chế Do đó, đóng góp của công nghệ sinh học vào sản xuất ngô hầu nh cha... gen vào cây ngô đã đợc hoàn thiện Các quy trình biến nạp gen bằng súng bắn gen và thông qua Agrobacterium đã đợc xây dựng và cải thiện trên cơ sở tối u hoá các yếu tố chính ảnh hởng đến quá trình biến nạp Chuyển các gen vào ngô: Sử dụng các quy trình biến nạp đã xây dựng để chuyển các gen: gfp/gus, pat/nptII, các gen mang các đặc tính quan tâm: chín sớm, chịu lạnh vào ngô Đề tài đã nhận đợc 10 dòng ngô. .. nghiên cứu trên cơ sở dự án hợp tác giữa Viện Di truyền Nông nghiệp và Công ty KWS là những nghiên cứu mở đầu đối với đối tợng cây trồng quan trọng này 1.3 Công nghệ sinh học và ứng dụng trong chọn tạo giống ngô ở Việt nam Thành công của kỹ thuật gen trong tạo giống cây trồng phụ thuộc vào 3 yếu tố cơ bản sau: - Thiết kế hợp lý gen và hệ điều hành của gen - Kỹ thuật chuyển và lắp ghép gen vào vị trí thích... tiêu và nội dung nghiên cứu sau đây: Xây dựng quy trình chuyển gen hiệu quả cao ở ngô (tại Việt nam) và lúa mỳ (tại CHLB Đức) sử dụng phơng pháp biến nạp thông qua Agrobacterium và súng bắn gen Trên cơ sở đó thực hiện việc chuyển các gen ngắn ngày, gen tăng cờng hấp thụ nitơ, gen chịu lạnh và một số gen kháng bệnh khác vào ngô và lúa mỳ nhằm mục đích cải thiện các đặc tính chất lợng quan trọng ở hai... sinh học phân tử trong chọn tạo giống ngô ở nớc ta là: i) Chúng ta cha có hệ thống tái sinh có hiệu quả sử dụng cho chuyển gen; ii) Chúng ta cha có nguồn gen (gen có giá trị kinh tế) và các vật liệu sử dụng cho chuyển gen (các plasmid, các chủng Agrobacterium, các promotor đặc hiệu ); iii) Chúng ta cha có cán bộ lành nghề trong lĩnh vực tạo cây trồng chuyển gen Đề tài Sử dụng kỹ thuật biến nạp di truyền. .. ở cây một lá mầm thông qua Agrobacterium bằng cách làm tổn thơng mô trớc khi lây nhiễm 1.5 Một số hớng mới nhằm cải tạo giống ngô 1.5.1 Chọn tạo giống chín sớm Do mùa hè ở các nớc Tây Âu ngắn nên thời gian sinh trởng của ngô bị hạn chế hơn so với các vùng trồng ngô ở Mỹ và Nam Âu Vì thế, việc tạo ra các giống ngô ngắn ngày là mối quan tâm chung của các nhà nghiên cứu trên thế giới ở Việt nam, với đặc . tài Sử dụng kỹ thuật biến nạp di truyền cải tạo một số đặc tính nông sinh học ở ngô và lúa mỳ đợc thực hiện trên cơ sở hợp tác khoa học với Trung tâm nghiên cứu PLANTA/KWS (CHLB Đức) là một. tài Sử dụng kỹ thuật biến nạp di truyền cải tạo một số đặc tính nông sinh học ở ngô và lúa mỳ. Đây là một trong những đề tài thuộc chơng trình hợp tác khoa học công nghệ giữa Việt Nam và CHLB. tích cực nhng công nghệ sinh học vẫn cha đợc áp dụng rộng rãi vào công tác chọn tạo giống ngô, đặc biệt là việc tạo ra các giống ngô có các đặc tính mới bằng kỹ thuật di truyền. Những hạn chế